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InnVit基因沉默对黑素细胞B10BR黑素合成和细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 李永伟 张迪敏 +4 位作者 刘东银 关翠萍 刘继峰 尉晓冬 许爱娥 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2007年第1期3-4,16,共3页
目的观察siRNA抑制InnVit基因后对小鼠永生化B10BR黑素细胞黑素合成和细胞凋亡的影响,进一步探讨InnVit基因的生物学功能。方法将InnVit基因的三对siRNA转染B10BR黑素细胞,半定量RT-PCR检测InnVit基因抑制后对黑素细胞InnVit基因mRNA水... 目的观察siRNA抑制InnVit基因后对小鼠永生化B10BR黑素细胞黑素合成和细胞凋亡的影响,进一步探讨InnVit基因的生物学功能。方法将InnVit基因的三对siRNA转染B10BR黑素细胞,半定量RT-PCR检测InnVit基因抑制后对黑素细胞InnVit基因mRNA水平的变化;采用MTT法测定InnVit基因抑制后对细胞增殖率的影响;采用流式细胞仪检测InnVit基因抑制后对黑素细胞凋亡的影响。结果siRNA1转染后,InnVit基因在黑素细胞中的表达明显下降,试验组细胞的早期凋亡率(35.80%)较对照组(6.47%)明显增加。结论通过RNA干扰技术可抑制InnVit在黑素细胞中的表达,可诱导B10BR细胞的凋亡增加。 展开更多
关键词 黑素细胞 innvit 白癜风 RNA 小分子干扰
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InnVit基因对永生化黑素细胞B10BR迁移的影响 被引量:1
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作者 周妙妮 林福全 +3 位作者 关翠萍 傅丽芳 洪为松 许爱娥 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2010年第2期75-78,共4页
目的分析InnVit基因对永生化黑素细胞B10BR迁移的影响,探讨InnVit基因对黑素细胞生物学功能的调控情况。方法化学合成InnVit基因特异性SiRNA,构建InnVit基因表达载体P3XF-P120,lipofectamineTM2000转染B10BR细胞。半定量RT-PCR鉴定抑制... 目的分析InnVit基因对永生化黑素细胞B10BR迁移的影响,探讨InnVit基因对黑素细胞生物学功能的调控情况。方法化学合成InnVit基因特异性SiRNA,构建InnVit基因表达载体P3XF-P120,lipofectamineTM2000转染B10BR细胞。半定量RT-PCR鉴定抑制和过表达效率;Transwell观察InnVit基因抑制和过表达后黑素细胞的迁移能力,明胶酶谱分析MMP2和MMP9的活性。结果成功在永生化黑素细胞B10BR中抑制和过表达InnVit基因。细胞处理20h后,抑制和过表达组Transwell滤膜下层黏附细胞数与对照组相比无显著性差异(P>0.05),MMP2和MMP9活性较对照组也无显著性差异(P>0.05)。结论InnVit基因对黑素细胞的迁移无明显调控作用。 展开更多
关键词 innvit基因 黑素细胞 细胞迁移
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InnVit基因对BIOBR细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响
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作者 林福全 关翠萍 +3 位作者 刘东银 洪为松 周妙妮 许爱娥 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期269-272,共4页
目的分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株BIOBR细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响。方法化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF—P120,lip... 目的分析InnVit基因的抑制和过表达对永生化黑素细胞株BIOBR细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨InnVit基因的生物学功能及其对白癜风中黑素细胞缺失的影响。方法化学合成InnVit基因特异性siRNA片段以及构建过表达质粒载体P3XF—P120,lipofectamineTM2000脂质体方法转染B10BR细胞。半定量RT—PCR法检测InnVit基因mRNA水平;Western印迹检测该蛋白水平变化;M.rr法测定细胞增殖情况;流式细胞技术分析细胞周期和凋亡的变化。结果InnVit基因抑制后mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,InnVit基因过表达质粒组mRNA和蛋白表达水平显著高于对照组;转染后24、48、72h抑制组的细胞存活量极显著下降(P〈0.01),过表达质粒组的细胞存活量在48和72h极显著增加(P〈0.01)。转染后48h基因抑制组的早期凋亡率从(10.24±1.00)%升至(37.34±3.26)%,过表达质粒组早期凋亡率从(14.58±1.49)%降至(8.43±0.86)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P〈0.01);转染48h基因抑制组的G。期细胞南(56.11±5.46)%增至(69.76±6.08)%(P〈0.05),过表达质粒组的G.期细胞由(55.14±5.65)%降至(29.33±3.01)%(P〈0.01)。结论InnVit基因抑制使细胞增殖能力下降,促进细胞凋亡;InnVit基因的过表达增强了细胞的增殖能力,抑制细胞凋亡。其增殖能力的改变可能是通过细胞周期的调控调节的。 展开更多
关键词 innvit基因 白癜风 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期 细胞 培养的
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