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IP3R2及RYR2介导Ca^(2+)信号在急性一氧化碳中毒迟发性脑病小鼠模型中的表达 被引量：3
1
作者 赵吉利 孟天予 +5 位作者 岳雅蓉 张鑫 杜文倩 张鑫宇 薛慧 项文平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期254-261,共8页
背景:研究发现星形胶质细胞中Ca^(2+)的表达与认知功能密切相关,目前由1,4,5-三磷酸肌醇受体(Inositol 1,4,5-trisphosphate receptors,IP3Rs)2、兰尼碱受体(ryanodine receptors,RYRs)2受体及其调控的Ca^(2+)信号通路已经成为认知障碍... 背景:研究发现星形胶质细胞中Ca^(2+)的表达与认知功能密切相关,目前由1,4,5-三磷酸肌醇受体(Inositol 1,4,5-trisphosphate receptors,IP3Rs)2、兰尼碱受体(ryanodine receptors,RYRs)2受体及其调控的Ca^(2+)信号通路已经成为认知障碍相关疾病研究的热点。目的:研究急性一氧化碳中毒迟发性脑病动物模型中,海马组织内星形胶质细胞和IP3R2、RYR2介导的Ca^(2+)信号的表达情况,探索急性一氧化碳中毒迟发性脑病可能的发病机制。方法:Morris水迷宫实验筛选认知功能合格的C57BL小鼠随机分为对照组、实验组,实验组小鼠采用静态吸入一氧化碳建立急性一氧化碳中毒迟发性脑病模型,对照组小鼠吸入等量空气。造模后第21天,利用Morris水迷宫、苏木精-伊红染色、Western blot、免疫荧光双标法、Ca^(2+)荧光探针检测中毒小鼠行为学及神经元改变、星形胶质细胞特异性标记物胶质纤维酸性蛋白及IP3R2、RYR2受体、星形胶质细胞内Ca^(2+)浓度变化。结果与结论:①Morris水迷宫实验发现与对照组相比,实验组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05);②苏木精-伊红染色表明实验组小鼠海马锥体细胞数减少、细胞结构紊乱、细胞核碎裂伴溶解;③免疫荧光检测表明海马区IP3R2、RYR2分别和胶质纤维酸性蛋白存在共表达,且实验组海马区IP3R2、RYR2和胶质纤维酸性蛋白表达均上调(P<0.05);④Western blot检测显示实验组海马区IP3R2、RYR2及胶质纤维酸性蛋白的蛋白表达均增多(P<0.05);⑤Ca^(2+)荧光探针法检测表明实验组小鼠海马区星形胶质细胞内Ca^(2+)浓度明显升高(P<0.05);⑥结果说明,星形胶质细胞可能通过介导IP3R2、RYR2受体影响Ca^(2+)信号,进而使一氧化碳中毒的小鼠认知功能受损,最终导致急性一氧化碳中毒迟发性脑病发生。 展开更多
关键词 急性一氧化碳中毒迟发性脑病 星形胶质细胞 ip3R2受体 RYR2受体 钙信号 认知功能
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钙信号通过IP3通路对肥胖小鼠脂肪合成代谢的影响 被引量：5
2
作者 吕彬 王勇 +3 位作者 解芸菲 孙婵 安磊 孙超 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第9期41-47,共7页
【目的】探讨IP3信号通路是否会影响肥胖小鼠细胞内的钙离子浓度以及钙信号对肥胖小鼠脂肪代谢的作用机制,进一步了解胞内钙离子浓度变化对脂肪代谢的作用机理。【方法】用高脂日粮饲喂小鼠30d以建立肥胖模型,将肥胖小鼠分为对照组、去... 【目的】探讨IP3信号通路是否会影响肥胖小鼠细胞内的钙离子浓度以及钙信号对肥胖小鼠脂肪代谢的作用机制,进一步了解胞内钙离子浓度变化对脂肪代谢的作用机理。【方法】用高脂日粮饲喂小鼠30d以建立肥胖模型,将肥胖小鼠分为对照组、去甲肾上腺素(NE)组、肝素组、钙组、钙+NE组和钙+肝素组,除对照组和钙组外的各药物组小鼠分别给予相应的药物处理,腹腔注射质量浓度0.1mg/mL的NE或1.5mg/mL的肝素0.2mL/(只.d);对照组和钙组同法给予等体积的生理盐水。对照组、NE组和肝素组小鼠饲喂普通日粮,钙组、钙+NE组和钙+肝素组小鼠饲喂加钙饲粮(钙含量12g/kg),小鼠共饲喂16d,期间每3d测1次体质量,17d时禁食12h,摘眼球取血后脱颈椎处死,分离血清检测其中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白(HDL-C)的浓度,并取脂肪组织,测定附睾脂肪和肾周脂肪组织质量,分析附睾脂肪、肾周脂肪和肝脏的钙含量。通过RT-PCR法分析与脂肪生成密切相关的转录因子PPARγ、C/EBPα和脂解基因HSL及生脂基因FAS mRNA的表达水平,检测IP3受体IP3R1的mRNA表达水平。【结果】肝素和膳食钙处理对肥胖小鼠有极显著的减肥效果(P<0.01),可极显著减少体脂质量(P<0.01),降低血清中TG和TC浓度(P<0.01),而HDL-C浓度极显著升高(P<0.01),肝素和膳食钙处理肥胖小鼠的PPARγ、FAS和IP3R1的mRNA水平均极显著降低(P<0.01),HSL mRNA水平极显著升高(P<0.01),C/EBPα的mRNA水平无明显变化;NE处理对肥胖小鼠的作用效果与肝素相反,其可明显削弱减肥作用(P<0.01)。膳食钙有显著的减肥效果(P<0.01),但钙+NE组的减肥效果弱于钙组(P<0.01),钙+肝素组的减肥效果强于膳食钙的处理效果(P<0.01)。【结论】IP3通路激活可引起胞内钙离子浓度升高,脂肪蓄积增加;反之,脂肪蓄积减少。通过IP3通路,膳食钙可抑制胞内钙离子增加。 展开更多
关键词 ip3 膳食钙 胞内钙 脂肪沉积
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舒胃汤对功能性消化不良大鼠小肠ICC细胞IP3R,RyR表达的影响 被引量：12
3
作者 王小娟 阳松威 +5 位作者 郭璇 姜苏南 徐寅 黄琳桂 刘乐平 田少聪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期97-103,共7页
目的:通过观察舒胃汤对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型大鼠小肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)中IP3受体(inositol 1,4,5-triphosphate receptor,IP3R),Ry受体(ryanodine receptor,RyR)蛋白及mRNA表达... 目的:通过观察舒胃汤对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型大鼠小肠Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)中IP3受体(inositol 1,4,5-triphosphate receptor,IP3R),Ry受体(ryanodine receptor,RyR)蛋白及mRNA表达的影响,从钙离子通道调节角度探讨舒胃汤对FD的治疗作用及机制。方法:取Wistar大鼠15只,随机分成空白组、模型组与舒胃汤组(30.68 g·kg^-1)。模型组与舒胃汤组按复合病因造模法处理21 d复制FD模型,灌胃给药14 d后取血制备含药血清。取2~3周Wistar乳鼠小肠平滑肌原代ICC细胞,传代培养后分为空白血清组(A组),模型血清组(B组),舒胃汤5%含药血清组(C组),舒胃汤10%含药血清组(D组),舒胃汤15%含药血清组(E组)。待细胞融合至60%~80%时分别加入对应组别血清,继续孵育24 h。提取细胞蛋白及总RNA,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IP3R,RyR蛋白表达,实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)检测IP3R,RyR mRNA表达。结果:Western blot检测发现,与A组比较,B组IP3R-1,IP3R-2,IP3R-3,RyR-1,RyR-2,RyR-3蛋白表达均明显降低(P〈0.01);与B组比较,D,E组IP3R,RyR蛋白表达明显升高(P〈0.05,P〈0.01)。Real-time PCR检测发现,与A组比较,IP3R,RyR mRNA表达均明显降低(P〈0.01);与B组比较,D,E组IP3R,RyR mRNA表达明显升高(P〈0.01)。结论:舒胃汤可通过上调FD模型大鼠小肠ICC细胞内IP3R,RyR蛋白及mRNA表达,发挥对功能性消化不良疾病的治疗作用。 展开更多
关键词 舒胃汤 功能性消化不良(FD) Cajal间质细胞(ICC) ip3受体(ip3R) Ry受体(RyR)
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苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因vip3A的研究 被引量：18
4
作者 刘荣梅 张杰 +1 位作者 高继国 宋福平 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第9期39-42,共4页
根据已知vip3A基因序列设计一对特异性引物VIP3／VIP5，对218株Bt菌株进行PCR鉴定，有51株含有vip3A类基因，其中12株为不同亚种的标准菌株，有4株标准菌株不含有该基因。从Bt C9菌株中分离克隆了vip—C9基因，并插入表达载体pET—21b... 根据已知vip3A基因序列设计一对特异性引物VIP3／VIP5，对218株Bt菌株进行PCR鉴定，有51株含有vip3A类基因，其中12株为不同亚种的标准菌株，有4株标准菌株不含有该基因。从Bt C9菌株中分离克隆了vip—C9基因，并插入表达载体pET—21b，转化大肠杆菌BL21，诱导表达出分子量88．6kDa的可溶性蛋白，表达产物对甜菜夜蛾和棉铃虫具有较高的杀虫活性，LC50分别为0．42ng／mg和25．95ng／mg，对小菜蛾活性较低。构建了缺失蛋白Vip—C9—N(N端去除39个氨基酸组成的信号肽序列)，杀虫活性测定结果表明其对甜菜夜蛾的活性显著降低，说明N端39个氨基酸对甜菜夜蛾的活性是必需的。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 苏云金芽孢杆菌 杀虫活性 营养期杀虫蛋白 BT菌株 棉铃虫 小菜蛾 基因 ip3 标准菌株
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平胃散对湿阻中焦证模型大鼠结肠PLC-IP3/DG-CaM/PKC信号通路的影响 被引量：11
5
作者 陈继兰 张慧慧 +3 位作者 黄秀深 黄腾炜 于宗强 杨成 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1769-1771,共3页
目的探讨平胃散如何影响湿阻中焦证动物结肠组织中AQPs表达及PLC-IP3/DG-CaM/PKC信号转导途径,并揭示其可能存在的机理。方法采用综合法造模,通过免疫组化技术测定结肠组织中AQPs的表达,通过酶联免疫法(ELISA)检测磷脂酶C(PLC)、三磷酸... 目的探讨平胃散如何影响湿阻中焦证动物结肠组织中AQPs表达及PLC-IP3/DG-CaM/PKC信号转导途径,并揭示其可能存在的机理。方法采用综合法造模,通过免疫组化技术测定结肠组织中AQPs的表达,通过酶联免疫法(ELISA)检测磷脂酶C(PLC)、三磷酸肌醇(IP3)、钙调素(CaM)的表达差异。结果大鼠结肠组织中有AQP1、AQP2、AQP3、AQP4、AQP5、AQP7、AQP9等7种水通道蛋白表达;造模后,AQP2的表达上升,PLC、IP3、CaM的含量都有升高;经过平胃散治疗后,AQP1、AQP2、AQP7的表达下调,PLC、CaM的含量下降,IP3含量有下降趋势。结论平胃散可能通过调控PLC-IP3-CaM途径改变水通道蛋白表达,达到燥湿目的。 展开更多
关键词 湿阻中焦证 PLC-ip3 DG-CaM PKC AQP 平胃散
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复心汤对大鼠原代心肌细胞IP3-Ca^(2+)/CaM-CaN通路的影响 被引量：5
6
作者 薛一涛 陈瑞雪 +2 位作者 高翔宇 孙德 焦华琛 《中国中医急症》 2017年第1期1-4,共4页
目的研究用复心汤含药血清培养的大鼠原代心肌细胞中IP3-Ca^(2+)/CaM-CaN通路的表达情况,并与缬沙坦干预后的心肌细胞模型进行比较,观察复心汤对心肌细胞的干预效果,进一步探讨复心汤抗心衰的作用靶点及机制,为临床及科研提供一条新思... 目的研究用复心汤含药血清培养的大鼠原代心肌细胞中IP3-Ca^(2+)/CaM-CaN通路的表达情况,并与缬沙坦干预后的心肌细胞模型进行比较,观察复心汤对心肌细胞的干预效果,进一步探讨复心汤抗心衰的作用靶点及机制,为临床及科研提供一条新思路。方法健康成年的雄性Wistar大鼠50只,随机分为空白对照组、复心汤低剂量组、复心汤中剂量、复心汤高剂量组、西药(缬沙坦)组,分别给予生理盐水,低、中、高剂量复心汤及缬沙坦每天1次灌胃1周,末次灌胃后腹主动脉采血并分离血清,血清经灭活、滤菌。含药血清干预原代心肌细胞后分别采用Elisa、激光共聚焦成像技术、Western blot法检测心肌中IP3、Ca^(2+)、CaM及CaN的表达情况及或定量分析。结果复心汤高剂量组及西药组IP3表达量较空白组明显降低,有显著统计学意义(P<0.01);复心汤中、高剂量及西药组CaM、CaN表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与西药组相比,复心汤高剂量组IP3、CaM、CaN表达量差异无显著统计学意义(P>0.05);Ca^(2+)荧光探针荧光强度由高到低依次是空白组,复心汤低、中、高剂量组,西药组。表明高剂量复心汤治疗心衰的效果与缬沙坦相当。结论复心汤治疗心衰可能与IP3-Ca^(2+)/CaM-CaN通路有关。 展开更多
关键词 复心汤 心衰 ip3 Ca2^+ CAM CAN
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背俞指针疗法对GERD模型大鼠食管黏膜病理及IP3、CaM表达的影响 被引量：8
7
作者 刘园园 戴文杰 +9 位作者 黄晓燕 候秋科 梁梦月 陈家坤 陈广文 李娟 谢洁如 陈松林 安晓霞 谢胜 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期3037-3040,共4页
目的研究背俞指针疗法对胃食管反流病(GERD)食管黏膜病理、三磷酸肌醇(IP3)及钙调蛋白(CaM)表达的影响,探索背俞指针疗法的治疗作用和机制。方法将90只SD大鼠采用随机数字法分为空白组、模型组、指针组,除空白组外运用食管支架植入术制... 目的研究背俞指针疗法对胃食管反流病(GERD)食管黏膜病理、三磷酸肌醇(IP3)及钙调蛋白(CaM)表达的影响,探索背俞指针疗法的治疗作用和机制。方法将90只SD大鼠采用随机数字法分为空白组、模型组、指针组,除空白组外运用食管支架植入术制作GERD动物模型。指针组予背俞指针疗法治疗,治疗疗程为14天,干预结束后,用HE染色法观察食管下端黏膜组织病理变化,采用免疫组织化学法检测IP3、CaM蛋白表达,Real-time PCR法检测CaM mRNA表达。结果与空白组食管黏膜比较,模型组食管黏膜鳞状上皮基底细胞中度增生,基底细胞层增厚,固有层乳头延长,固有层内炎细胞浸润;与模型组食管黏膜比较,指针组食管黏膜结构恢复正常,未见明显炎症细胞浸润:与空白组相比,模型组IP3蛋白表达显著升高(P<0.01),CaM蛋白表达降低,但无统计学意义(P>0.05),CaM mRNA表达显著升高(P<0.01),指针组IP3、CaM蛋白、CaM mRNA表达显著升高(P<0.01)o与模型组相比,指针组IP3蛋白无统计学差异(P>0.05),CaM蛋白、CaM mRNA表达有所升高(P<0.05)<结论背俞指针疗法有效改善GERD大鼠模型食管黏膜的病理状况,其机制可能与上调CaM蛋白及其基因表达有关. 展开更多
关键词 背俞指针疗法 胃食管反流病 食管黏膜病理 三确酸肌醇(ip3) 钙调蛋白(CaM)
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基于久病入络理论的当归饮子通过调控PIP2/IP3/DAG信号通路对荨麻疹的防治及其机理研究 被引量：4
8
作者 郭静 肖敏 +3 位作者 左小红 刘光秀 周丽娟 钟振东 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2333-2335,共3页
目的研究当归饮子对大鼠荨麻疹的防治及其作用机理。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,氯雷他定组及当归饮子高、中、低剂量组,每组10只。后5组采用注射抗卵清蛋白及联合抗原激活制作慢性荨麻疹模型。致敏前一天氯雷他定... 目的研究当归饮子对大鼠荨麻疹的防治及其作用机理。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,氯雷他定组及当归饮子高、中、低剂量组,每组10只。后5组采用注射抗卵清蛋白及联合抗原激活制作慢性荨麻疹模型。致敏前一天氯雷他定组灌胃给予10 ml·kg-1氯雷他定生理盐水溶液,当归饮子高、中、低剂量组分别按36,18,9g·kg-1·只灌胃给予当归饮子提取浓缩液,正常对照组和模型对照组灌胃给予等体积纯净水。实验结束时,收集各实验组大鼠血液和皮肤,Elisa法测定血清Calcineurin、PIP2、IP3含量,采用甲苯胺蓝对大鼠皮肤进行染色,显微镜观察皮肤病理形态及肥大细胞脱颗粒情况;采用RT-PCR技术检测皮肤PKC基因的表达。结果与模型组比较,当归饮子高、中、低剂量组大鼠血清Calcineurin、PIP2、IP3含量均有显著降低(P<0.05)。肥大细胞脱颗粒百分数均有显著降低(P<0.05),肥大细胞脱颗粒均有抑制率有显著增大(P<0.05)。皮肤肥大细胞脱颗粒区域均有显著减少(P<0.05)。皮肤PIP2、IP3和PKC mRNA表达均有显著降低(P<0.05)。结论当归饮子可下调PIP2/IP3/DAG信号通路关键因子而降低肥大细胞脱颗粒发生率,进而对大鼠慢性荨麻疹产生治疗作用。 展开更多
关键词 久病入络 当归饮子 PIP2/ip3/DAG 荨麻疹 机理研究
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降钙素基因相关肽及IP3信号通路介导1型糖尿病大鼠离体心脏缺血预适应保护作用 被引量：2
9
作者 王世婷 郭竹英 +1 位作者 徐芒华 高丰厚 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期191-195,共5页
目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)及IP3信号通路在1型糖尿病大鼠离体心脏缺血预适应(IPC)中的作用,探讨1型糖尿病大鼠心脏IPC保护作用减弱的机制。方法将80只造模成功的SD大鼠随机分为1型糖尿病4周(D-4w)组(n=40)和8周(D-8w)组(n=40),并... 目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)及IP3信号通路在1型糖尿病大鼠离体心脏缺血预适应(IPC)中的作用,探讨1型糖尿病大鼠心脏IPC保护作用减弱的机制。方法将80只造模成功的SD大鼠随机分为1型糖尿病4周(D-4w)组(n=40)和8周(D-8w)组(n=40),并进一步将两组各自随机分为模型对照(D-Cont)组、1型糖尿病缺血再灌注(IR)组、IPC组、CGRP(IPC+CGRP)组和IP3抑制剂wortmanin(IPC+WMN)组5个亚组;另取16只大鼠作为正常对照(N-Cont)组。采用Langendorff方法建立离体心脏体外灌流模型,灌流期间外源性给予CGRP或wortmanin(WMN)。采用多道生物信号分析系统监测各组大鼠离体心脏左室功能,记录冠脉流量,ELISA法检测大鼠血清CGRP含量;生化法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶(CK)的活性;NBT染色法测量心肌梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。结果与N-Cont组大鼠相比,1型糖尿病大鼠血清CGRP含量随着时间进行性降低,且心脏基础左心功能降低,冠脉流出液中LDH和CK活性增加,心肌梗死面积和心肌细胞凋亡指数增加(P<0.05);IR组与D-Cont组相比,左心功能更为降低,心肌损伤明显;IPC可改善D-4w IR心肌损伤情况,而对D-8w IR损伤无保护作用;IPC+CGRP组与IPC组相比,其左心功能明显改善;IPC+WMN组可阻断IPC对D-4w组大鼠心肌保护作用。结论CGRP及IP3信号通路参与1型糖尿病大鼠离体心脏的IPC保护作用。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 ip3信号通路 1型糖尿病 心脏缺血预适应
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细胞内IP3-Ca^(2+)途径对UV-B辐射下玉米幼苗光合特性的调控机制 被引量：3
10
作者 吴能表 洪鸿 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期373-379,共7页
使用外加0.15Wm-2UV-B及不同钙效应剂处理玉米幼苗,研究细胞Ca2+信号系统对UV-B辐射下玉米幼苗光合作用的调控机制。结果表明,UV诱导的胞内Ca2+荧光增强受胞内IP3通道阻断剂肝素(Heparin)、胞内CaM活性抑制剂三氟啦嗪(TFP)抑制,降低玉... 使用外加0.15Wm-2UV-B及不同钙效应剂处理玉米幼苗,研究细胞Ca2+信号系统对UV-B辐射下玉米幼苗光合作用的调控机制。结果表明,UV诱导的胞内Ca2+荧光增强受胞内IP3通道阻断剂肝素(Heparin)、胞内CaM活性抑制剂三氟啦嗪(TFP)抑制,降低玉米幼苗Chla、Chlb及Chla+b含量、原初光能转化效率(Fv/Fm)、PSII活性(Fv/Fo)、Hill反应活力、水分利用效率(WUE),提高胞间二氧化碳浓度(Ci),最终导致净光合速率(Pn)下降;细胞质膜钙通道阻断剂氯化镧(LaCl3)引发的此效应较小。据此提出,UV-B辐射下,玉米幼苗叶片细胞IP3动员胞内钙库释放Ca2+,调节光合色素合成、Hill反应活性、WUE,CaM介导的下游反应调节Gs,是Ca2+信号系统最终实现对Pn调控的主要机制。 展开更多
关键词 钙效应剂 ip3-Ca2+途径 UV-B 光合作用 玉米
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人类组织中TRAF3IP3基因表达的检测及转染胚肾HEK293细胞后的亚细胞定位 被引量：1
11
作者 王洋 王沂 +4 位作者 余源 刘青 毛焕 熊艳杰 张秀军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1447-1450,共4页
目的克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。方法采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾H... 目的克隆TRAF3IP3基因,明确TRAF3IP3在部分人类组织中的表达谱并鉴定其表达产物的亚细胞定位。方法采用实时定量PCR检测TRAF3IP3基因在人体各组织中的表达情况;克隆TRAF3IP3基因开放读码框区(ORF)并构建真核亚细胞定位质粒。转染人胚肾HEK 293细胞,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的亚细胞定位。结果实时定量PCR证实TRAF3IP3基因在被检测的11种组织中均有表达,其中在淋巴结、脾、骨髓、胃和睾丸中的表达水平较高;成功克隆了TRAF3IP3基因ORF区并构建成为荧光定位质粒,激光共聚焦显微镜观察证实TRAF3IP3蛋白主要定位于核膜,在核周呈颗粒状分布。结论 TRAF3IP3基因在淋巴细胞富集的器官呈高表达,可能参与免疫系统的发育、成熟及调控,其表达产物在细胞内主要定位于核膜及核周胞浆。 展开更多
关键词 TRAF3ip3 组织表达谱 亚细胞定位
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MPEP对吗啡耐受大鼠脊髓Ⅰ型IP3受体表达的影响 被引量：3
12
作者 刘金变 江伟 《中国药物依赖性杂志》 CAS CSCD 2009年第1期24-27,共4页
目的:探讨代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)拮抗剂MPEP对吗啡耐受大鼠脊髓背角Ⅰ型IP3受体(IP3R-Ⅰ)表达的影响。方法:24只♂SD大鼠,随机分为4组:生理盐水对照组(NS)、吗啡耐受组、吗啡加MPEP组和MPEP组。通过测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)评定各... 目的:探讨代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)拮抗剂MPEP对吗啡耐受大鼠脊髓背角Ⅰ型IP3受体(IP3R-Ⅰ)表达的影响。方法:24只♂SD大鼠,随机分为4组:生理盐水对照组(NS)、吗啡耐受组、吗啡加MPEP组和MPEP组。通过测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)评定各组大鼠的热痛阈变化。最后一次给药后次日取大鼠L4-5脊髓,Westernblot测定并比较各组脊髓背角IP3R-Ⅰ蛋白表达量。结果:吗啡组TFL呈下降趋势,但d7后与NS组比较无统计学意义(P>0.05)。吗啡加MPEP组TFL在用药后3-7 d与吗啡组比较差异有显著性(P<0.05)。吗啡组脊髓背角IP3R-Ⅰ表达较NS组升高(P<0.05),吗啡加MPEP组IP3R-Ⅰ的表达低于吗啡组(P<0.05),MPEP组IP3R-Ⅰ表达与NS组无统计学差异(P>0.05)。结论:鞘内重复注射吗啡后IP3R-Ⅰ表达上调。MPEP抑制吗啡耐受发展,机制可能与其抑制IP3R-Ⅰ表达有关。 展开更多
关键词 谷氨酸受体5 吗啡耐受 ip3受体 脊髓
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基于G蛋白偶联—PLC—IP3信号途径探讨湿阻脾胃证模型ICC Ca^(2+)调节机制及平胃散干预作用 被引量：8
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作者 杨旭 王琦越 黄秀深 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-50,共3页
目的探讨平胃散如何影响湿阻脾胃证模型ICC内、外Ca^(2+)浓度及G蛋白偶联—PLC—IP3信号途径,并揭示平胃散调节胃肠运动的作用机制。方法用湿阻脾胃证模型动物血清建立"湿阻脾胃证ICC模型"。动物血清的制备:采用本实验室建立... 目的探讨平胃散如何影响湿阻脾胃证模型ICC内、外Ca^(2+)浓度及G蛋白偶联—PLC—IP3信号途径,并揭示平胃散调节胃肠运动的作用机制。方法用湿阻脾胃证模型动物血清建立"湿阻脾胃证ICC模型"。动物血清的制备:采用本实验室建立的湿阻脾胃证动物模型方法造模,造模20天后,分别取正常组动物血清,湿阻模型组动物血清,给药组动物血清及自然恢复组血清。用Ⅱ胶原酶消化法体外培养小鼠小肠ICC,经形态学观察和免疫荧光学鉴定成功后,通过细胞造模后血清给药,观察细胞内PLC活性,IP3、IP3R含量以及细胞内、外Ca^(2+)浓度变化。结果与正常组比较,模型组细胞内、外Ca^(2+)浓度水平均降低(P<0.05),PLC活性升高(P<0.05),IP3含量无显著性差异,IP3R含量降低(P<0.05);与正常组比较,自然恢复组细胞内、外Ca^(2+)浓度水平均无显著性差异,PLC活性升高(P<0.05),IP3含量无显著性差异,IP3R含量升高(P<0.05);与模型组比较,自然恢复组细胞内、外Ca^(2+)浓度水平均升高(P<0.05),PLC活性升高(P<0.05),IP3含量无显著性差异,IP3R含量升高;平胃散组细胞内、外Ca^(2+)浓度水平均升高(P<0.05),PLC活性大幅升高(P<0.05),IP3含量升高(P<0.05),IP3R含量升高(P<0.05)。结论平胃散可能是通过影响G蛋白—PLC—IP3信号途径,使ICC细胞内Ca^(2+)浓度周期性震荡恢复,产生起搏电位,而起到调节胃肠运动。 展开更多
关键词 平胃散 G蛋白偶联—PLC—ip3 湿阻脾胃证模型ICC
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人TRAF3IP3基因的克隆及真核表达 被引量：1
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作者 王沂 张秀军 +3 位作者 刘青 余源 慈雅丽 王洋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期465-468,共4页
目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法... 目的构建人肿瘤坏死因子受体相关因子3相互作用蛋白3(TRAF3IP3)基因真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法 RT-PCR扩增获得TRAF3IP3开放读码框区基因,双酶切连入真核表达载体pIRES2-EGFP,双酶切和测序鉴定阳性克隆;重组质粒磷酸钙法转染HEK293细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot法鉴定TRAF3IP3基因的表达情况。结果经限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,成功构建了TRAF3IP3真核表达质粒,荧光显微镜观察可见转染了重组质粒的HEK293细胞有绿色荧光蛋白的表达,实时定量PCR和Western blot结果证实TRAF3IP3蛋白高水平表达。结论成功构建了pIRES-EGFP-TRAF3IP3真核表达质粒,为TRAF3IP3基因功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 TRAF3ip3 真核表达 转染 HEK293细胞
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IP3R介导的钙释放在DI发生中的作用研究 被引量：1
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作者 郑霁 方强 +5 位作者 陈志文 陈志朋 何鹏 邓国贤 代林勇 潘进洪 《西部医学》 2015年第2期167-169,共3页
目的探讨IP3R的功能改变是否参与了逼尿肌不稳定(DI)的发生。方法对比分析DI和对照组大鼠膀胱平滑肌IP3R mRNA和蛋白表达的变化,观察IP3R阻断剂Heparin对DI和对照组膀胱平滑肌条收缩幅度和频率的影响。结果 DI逼尿肌细胞IP3RmRNA和蛋白... 目的探讨IP3R的功能改变是否参与了逼尿肌不稳定(DI)的发生。方法对比分析DI和对照组大鼠膀胱平滑肌IP3R mRNA和蛋白表达的变化,观察IP3R阻断剂Heparin对DI和对照组膀胱平滑肌条收缩幅度和频率的影响。结果 DI逼尿肌细胞IP3RmRNA和蛋白表达较对照组显著增加。IP3R阻断剂Heparin能显著抑制DI、正常组大鼠逼尿肌肌条自发收缩频率及收缩幅度,且Heparin对DI逼尿肌条的影响效应要显著高于正常组。结论 IP3R功能在DI逼尿肌组织兴奋、收缩发生中明显上调,这种上调在DI的发生中起着重要作用。 展开更多
关键词 ip3R 钙离子通道 逼尿肌不稳定 尿动力学
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bFGF对人晶状体上皮细胞系内钙离子及IP3R、RyR的作用 被引量：5
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作者 曲勃 张劲松 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第2期235-238,共4页
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人晶状体上皮细胞系LEC-B3内静息Ca2+浓度及三磷酸肌醇受体(IP3R)、ryanodine受体(RyR)表达的影响。方法:LEC-B3细胞系传代培养,分别以1,10,100μg/L bFGF诱导第3代细胞的增殖,MTT法检测其增殖... 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人晶状体上皮细胞系LEC-B3内静息Ca2+浓度及三磷酸肌醇受体(IP3R)、ryanodine受体(RyR)表达的影响。方法:LEC-B3细胞系传代培养,分别以1,10,100μg/L bFGF诱导第3代细胞的增殖,MTT法检测其增殖度,激光扫描共聚焦显微镜测细胞内静息钙浓度;RT-PCR(reverse-transcriptase,PCR)方法检测10μg/L bFGF作用后细胞内IP3R和RyRmRNA的表达。结果:与对照组相比,3个浓度的bFGF对LEC-B3都有促增殖作用(P<0.01),其中10μg/L作用最强;bFGF作用后细胞内Ca2+浓度呈bFGF浓度依赖性增高,10μg/L,100μg/LP<0.01,1μg/L<0.05;10μg/L bFGF作用后的细胞IP3RI mRNA表达无明显变化,III型表达明显减弱(P<0.01),ryan-odineRI,IIImRNA表达升高(P<0.05,0.01)。结论:bFGF诱导LEC-B3细胞增殖引起细胞内钙离子浓度增加。Ca2+升高呈bFGF浓度依赖性,并不与细胞增殖度平行。bFGF对IP3R和RyR亚型的mRNA表达有一定影响,并且细胞内Ca2+浓度升高与bFGF刺激RyRmRNA表达升高有关。 展开更多
关键词 ip3R 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 晶状体上皮 细胞系内 ryanodine受体 激光扫描共聚焦显微镜 钙离子 RYR 三磷酸肌醇受体 Ca^2+浓度 MTT法检测 上皮细胞系 人晶状体 传代培养 PCR) 细胞内 第3代 钙浓度 静息 增殖
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分析雌激素受体(ER)与IP3R在子宫肌瘤细胞中的表达价值 被引量：2
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作者 金贤灿 《中国医药指南》 2015年第7期153-154,共2页
目的分析雌激素受体(ER)与IP3R在子宫肌瘤细胞中的表达价值。方法选择2012年12月至2013年5月于我院治疗的40例子宫肌瘤患者为实验组,并以同期于我院治疗的40例非子宫肌瘤患者作对照组进行观察。比较两组患者治疗前后的雌激素受体(ER)和I... 目的分析雌激素受体(ER)与IP3R在子宫肌瘤细胞中的表达价值。方法选择2012年12月至2013年5月于我院治疗的40例子宫肌瘤患者为实验组,并以同期于我院治疗的40例非子宫肌瘤患者作对照组进行观察。比较两组患者治疗前后的雌激素受体(ER)和IP3R水平。结果治疗前对照组患者体内雌激素受体(ER)、IP3R水平明显优于实验组组(P<0.05);手术治疗后实验组患者雌激素受体(ER)、IP3R水平有所好转,但仍比对照组差(P<0.05)。结论子宫肌瘤细胞中雌激素受体(ER)与IP3R在子宫肌瘤的临床中具有特异型,值得临床进一步研究。 展开更多
关键词 雌激素受体(ER) ip3R 子宫肌瘤细胞 表达价值
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人TRAF3IP3基因剪接异构体2的克隆表达和生物信息学分析
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作者 王沂 杨文思 +5 位作者 赵俊暕 石峻 戚晓渊 郑永强 牛艳艳 王洋 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期119-123,共5页
[目的]克隆、原核表达并纯化人类TRAF3IP3基因剪接异构体2(TRAF3IP3iso2),对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[方法]从人骨髓单个核细胞c DNA中扩增TRAF3IP3iso2开放阅读框区,双酶切连入原核表达载体p ET-28a(+),重组质粒转化E.col... [目的]克隆、原核表达并纯化人类TRAF3IP3基因剪接异构体2(TRAF3IP3iso2),对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[方法]从人骨髓单个核细胞c DNA中扩增TRAF3IP3iso2开放阅读框区,双酶切连入原核表达载体p ET-28a(+),重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达效果,Ni-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白;根据测序结果对TRAF3IP3iso2蛋白进行生物信息学分析。[结果]成功克隆了人类TRAF3IP3iso2编码区并构建了原核表达载体p ET-28a(+)-TRAF3IP3iso2,在大肠杆菌中诱导表达、纯化获得了相对分子量约22.7k Da的融合蛋白;生物信息学分析显示TRAF3IP3iso2蛋白二级结构以α螺旋为主,无TRAF3IP3iso1蛋白的跨膜区结构。[结论]证明了人类TRAF3IP3iso2的存在,为TRAF3IP3功能的研究提供了实验依据。 展开更多
关键词 TRAF3ip3 剪接异构体 原核表达 生物信息学
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大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上Ⅲ型IP3受体的免疫电镜定位分析
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作者 杨璐 卫静 +1 位作者 黄晓峰 焦凯 《科学技术与工程》 北大核心 2012年第8期1733-1736,共4页
研究Ⅲ型1,4,5三磷酸肌醇受体(IP3R-Ⅲ型)在大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上的定位。利用免疫电镜技术,5nm胶体金标记IP3R-Ⅲ型抗原后定位观察其分布情况。实验表明在胰岛β细胞中,金颗粒大量定位于胰岛素分泌颗粒的内部及颗粒膜上。在... 研究Ⅲ型1,4,5三磷酸肌醇受体(IP3R-Ⅲ型)在大鼠胰岛β细胞胰岛素分泌颗粒上的定位。利用免疫电镜技术,5nm胶体金标记IP3R-Ⅲ型抗原后定位观察其分布情况。实验表明在胰岛β细胞中,金颗粒大量定位于胰岛素分泌颗粒的内部及颗粒膜上。在分泌颗粒表面的切线部位,也有金颗粒的聚集。本研究证明胰岛素分泌颗粒存在IP3R-Ⅲ型,提示IP3-IP3R3型可能参与了β细胞胰岛素分泌的调节。 展开更多
关键词 ip3R-Ⅲ型 胰岛Β细胞 胰岛素分泌颗粒 免疫金标
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高IP3的测试方法
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作者 赵利 付国映 +1 位作者 陈文全 徐继麟 《现代电子技术》 2004年第4期46-48,共3页
具体分析了高 IP3测试环境中的不利因素 ,提出了减小其影响的方法 ,以提高高
关键词 ip3 IMD3 信号源 功率合成器 频谱分析仪
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