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脂质体载体法转染FPRL1基因到HEK293细胞及其鉴定
1
作者 曹雯 胡锦跃 李官成 《医学临床研究》 CAS 2002年第4期241-243,共3页
[目的]验证脂质体载体法将FPRL1基因有效转染到HEK293细胞。[方法]G418筛选，RT-PCR和趋化试验。[结果]用脂质体载体法将FPRL1基因转染HEK293细胞，G418筛选，3周形成集落状细胞克隆；RT-PCR以FPRL1特异性引物扩增，凝胶电泳可见1条约70... [目的]验证脂质体载体法将FPRL1基因有效转染到HEK293细胞。[方法]G418筛选，RT-PCR和趋化试验。[结果]用脂质体载体法将FPRL1基因转染HEK293细胞，G418筛选，3周形成集落状细胞克隆；RT-PCR以FPRL1特异性引物扩增，凝胶电泳可见1条约700bp的目的片段，对照组为阴性；趋化实验显示HEK293/FPRL1细胞在一定浓度的fMLP的刺激下有趋化活性，而HEK293细胞无反应。[结论]初步证实脂质体载体法能有效地将FPRL1基因导入HEK293细胞，且FPRL1在细胞中有表达。 展开更多
关键词 脂质体载体法转染 fprl1基因 HEK293细胞 鉴定
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食管癌相关基因2抑制细胞侵袭迁移的机制研究 被引量：1
2
作者 原发家 毕炀辉 +5 位作者 杜斌 王文健 聂守民 李彦红 赵瑞君 刘静 《中国药物与临床》 CAS 2015年第3期301-304,共4页
目的本研究旨在明确食管癌相关基因(ECRG)2基因抑制肿瘤细胞侵袭迁移的分子机制。方法利用HT1080-Tet-On可诱导表达系统,采用基因敲除技术、免疫共沉淀、体外Matrigel transwell实验等技术,深入研究ECRG2基因抑制肿瘤细胞侵袭迁移的分... 目的本研究旨在明确食管癌相关基因(ECRG)2基因抑制肿瘤细胞侵袭迁移的分子机制。方法利用HT1080-Tet-On可诱导表达系统,采用基因敲除技术、免疫共沉淀、体外Matrigel transwell实验等技术,深入研究ECRG2基因抑制肿瘤细胞侵袭迁移的分子机制。结果 1敲除HT1080-ECRG2-Tet-On可诱导表达细胞株中的ECRG2后,加入多西环素诱导ECRG2蛋白高度表达,撤除多西环素后ECRG2蛋白表达降低;2HT1080-ECRG2-Tet-On-3′UTR-si可诱导细胞株中尿激酶型纤溶酶原激活剂(u PA)分解尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(u PAR)产生分解后的u PAR(D2D3);而加入多西环素诱导ECRG2表达后,ECRG2通过与u PA/u PAR直接结合,抑制u PA对u PAR的分解作用;3HT1080-ECRG2-Tet-On-3′UTR-si可诱导细胞株中u PAR/甲酰肽样受体(FPRL1)的结合作用显著增强,而添加多西环素诱导ECRG2表达细胞中u PAR/FPRL1的结合作用被完全阻断,撤除多西环素后结合作用又恢复;4敲除HT1080-ECRG2-Tet-On-3′UTR-si可诱导细胞株中FPRL1,细胞的侵袭迁移能力降低。结论 ECRG2通过u PA/u PAR/FPRL1通路抑制肿瘤细胞侵袭迁移。 展开更多
关键词 肿瘤浸润 癌基因 ECRG2 UPAR fprl1
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