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Complementary DNA sequencing (cDNA): an eff ective approach for assessing the diversity and distribution of marine benthic ciliates along hydrographic gradients 被引量:3
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作者 Pingping HUANG Feng ZHAO Kuidong XU 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2021年第1期208-222,共15页
The Yellow Sea Cold Water Mass(YSCWM)is a distinct hydrographic phenomenon of the Yellow Sea,and the distribution pattern of meio-and macrobenthos diff ers inside and outside of the YSCWM.However,such a pattern has ne... The Yellow Sea Cold Water Mass(YSCWM)is a distinct hydrographic phenomenon of the Yellow Sea,and the distribution pattern of meio-and macrobenthos diff ers inside and outside of the YSCWM.However,such a pattern has never been observed in the microbenthic ciliate communities.Therefore,we hypothesized that benthic ciliates followed a similar distribution pattern as meio-and macrobenthos,but this pattern has not been uncovered by morphological methods.We evaluated the diversity and distribution of benthic ciliates at fi ve stations along hydrographic gradients across the YSCWM and adjacent shallow water by using morphology and DNA and complementary DNA(cDNA)high-throughput sequencing of the V4 region of 18S rRNA gene.Results showed that the diversity of benthic ciliates detected by DNA(303 OTUs),and the cDNA(611 OTUs)sequencing was much higher than that detected by the morphological method(79 species).Morphological method detected roughly diff erent ciliate communities inside and outside of the YSCWM,but without statistical signifi cance.No clear pattern was obtained by DNA sequencing.In contrast,cDNA sequencing revealed a distinct distribution pattern of benthic ciliate communities like meioand macrobenthos,which coincided well with the results of the environmental parameter analysis.More than half of the total sequences detected by DNA sequencing belonged to planktonic ciliates,most(if not all)of which were recovered from historic DNA originating through the sedimentation of pelagic forms because none of them were observed morphologically.The irrelevant historic DNA greatly infl uenced the recovery of rare species and thus limited the understanding of the benthic ciliate diversity and distribution.Our research indicates that the methods used have signifi cant eff ects on the investigation of benthic ciliate communities and highlights that cDNA sequencing has great advantages in estimating the diversity and distribution of benthic ciliates,as well as the potential for benthic environmental assessments. 展开更多
关键词 benthic ciliates cdna high-throughput sequencing community comparison dna highthroughput sequencing morphology
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补肾方剂治疗男性不育症患者精子DNA损伤的系统综述和meta分析
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作者 刘涛 赵琦 +4 位作者 杨朝旭 徐琰 孙志兴 陈赟 陈建淮 《中华男科学杂志》 2026年第1期52-60,共9页
目的运用meta分析方法系统评价补肾方剂治疗男性不育症患者精子DNA损伤(SDF)的有效性和安全性。方法从中国知网、维普、万方、PubMed、Cochrane Library、Embase、Web of Science数据库中检索补肾方剂改善SDF的随机对照试验(RCT)研究,... 目的运用meta分析方法系统评价补肾方剂治疗男性不育症患者精子DNA损伤(SDF)的有效性和安全性。方法从中国知网、维普、万方、PubMed、Cochrane Library、Embase、Web of Science数据库中检索补肾方剂改善SDF的随机对照试验(RCT)研究,对文献进行方法学质量评价,运用RevMan5.3.5软件进行meta分析,并对结局指标进行GRADE质量分级。结果共纳入17项RCT研究,涉及2164例男性患者。与西医常规治疗相比,补肾方剂能够显著改善男性不育症患者DNA碎片指数(DFI)(MD=-6.50,95%CI:-7.88~-5.11,P<0.01),提高配偶妊娠率(RR=2.11,95%CI:1.12~4.00,P=0.87)、精子总活率(MD=5.56,95%CI:4.39~6.74,P<0.01)、前向运动精子百分率(MD=6.82,95%CI:5.62~8.03,P<0.01)、精子浓度(MD=6.51,95%CI:3.81~9.21,P<0.01)和正常形态精子百分率(MD=1.26,95%CI:0.45~2.06,P<0.01),且补肾方剂不会增加不良反应的发生。结论低到中等质量证据表明,与西医常规治疗相比,补肾方剂在改善男性不育症患者DFI、精液参数、配偶妊娠率等方面具有一定优势,且安全性较好。 展开更多
关键词 精子dna损伤 精子dna碎片指数 男性不育症 补肾方剂 META分析
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The formation of fibers via complementary base pairing of DNA-conjugated bovine serum albumin
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作者 Jing Wei Si Sun +4 位作者 Qian Lu Pengcheng Gao Yang Wang Xianhe Li Yong Jiang 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期461-463,共3页
Assembled protein-based substances are emerging and promising classes of materials that provide unique properties for various applications in biotechnology and nanotechnolegy. Self-assembly is an effective way to immo... Assembled protein-based substances are emerging and promising classes of materials that provide unique properties for various applications in biotechnology and nanotechnolegy. Self-assembly is an effective way to immobilize protein. In this study, DNAs-conjugated bovine serum albumin (BSA) assembled into fibers via DNA hybridization is demonstrated. The morphology of fibers was observed by optical microscopy, scanning electron microscopy (SEM), and atomic force microscopy (AFM), and the assembly mechanism was then analysed and discussed. BSA molecules were first linked by DNA molecule and formed linear chains. These chains then were parallelly linked through additional DNA hybridization. Finally, several BSA chains further assembled into fibers by layering lamellae in a parallel manner. This work perhaps will provide a guide to the immobilization of enzyme, which could be applied to increase its catalytic efficiency in biomedicine and nanotechnology. 展开更多
关键词 Assembling dna Protein Microscope Atomic force microscope
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泥鳅DNA甲基转移酶基因家族结构及时空表达
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作者 向玉梅 苏君晓 +1 位作者 曾燏 周小云 《华中农业大学学报》 北大核心 2026年第1期255-265,共11页
为深入解析DNA甲基化对泥鳅等硬骨鱼类基因表达调控的作用机制,基于转录组测序数据,用hiTAIL-PCR技术克隆获得泥鳅DNA甲基转移酶基因家族dnmts的启动子序列,并用qRT-PCR和原位杂交技术分析dnmts的时空表达特征。结果显示,维持甲基化酶dn... 为深入解析DNA甲基化对泥鳅等硬骨鱼类基因表达调控的作用机制,基于转录组测序数据,用hiTAIL-PCR技术克隆获得泥鳅DNA甲基转移酶基因家族dnmts的启动子序列,并用qRT-PCR和原位杂交技术分析dnmts的时空表达特征。结果显示,维持甲基化酶dnmt1与从头甲基化酶dnmt3s的亚细胞定位、N端调控结构域存在较大的差异,dnmt1的调控域包含DMAP、PBD、CXXC和BAH保守结构域,而dnmt3s包含PWWP、ADD或CH结构域,提示dnmt1和dnmt3s间存在较大的功能分化。在4个dnmts的启动子序列上,均预测到典型元件TATA-box,以及CREB、Egr-1、Pit-1等与胚胎发育、生长、繁殖等相关的转录因子结合位点。4个dnmts的表达量均与发育阶段相关、呈动态变化,在卵裂期到囊胚期的快速卵裂阶段,dnmt1高表达,而在胚胎后期的器官分化阶段,dnmt3aa和dnmt3ab高表达。在成鱼阶段,dnmt1在性腺中高表达,dnmt3aa和dnmt3ab在脑中高表达,而dnmt3b在性腺、脑和肌肉中均有较高的表达水平。Dnmts的表达呈明显的性别二态性,dnmt1和dnmt3b在卵巢中高表达,而dnmt3aa和dnmt3ab则在精巢中高表达。原位杂交结果显示,dnmt3aa在卵巢的生殖细胞和体细胞中均有表达,而dnmt3ab仅在卵巢的体细胞中表达。以上结果表明,泥鳅dnmts各成员之间存在功能分化,并在特定的发育阶段和组织中发挥重要功能。 展开更多
关键词 泥鳅 dna甲基化 dna甲基转移酶 基因结构和功能 基因表达调控
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基于环境DNA技术的元江鱼类生物多样性研究
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作者 朱书礼 陈蔚涛 +3 位作者 李跃飞 武智 李捷 刘亚秋 《南方水产科学》 北大核心 2026年第1期60-73,共14页
元江是云南地区最主要的河流之一,拥有丰富的鱼类资源,近年来受人类活动影响,元江鱼类资源呈衰退趋势。本研究通过利用环境DNA(Environmental DNA,eDNA)技术对元江鱼类进行调查,为元江鱼类资源管理和保护提供基础数据。2023年10月在元... 元江是云南地区最主要的河流之一,拥有丰富的鱼类资源,近年来受人类活动影响,元江鱼类资源呈衰退趋势。本研究通过利用环境DNA(Environmental DNA,eDNA)技术对元江鱼类进行调查,为元江鱼类资源管理和保护提供基础数据。2023年10月在元江设置了16个站位采集水样,共检出鱼类47种,隶属于5目15科40属,包括红(鱼丕)(Bagarius rutilus)和斑鳠(Hemibagrus guttatus)等珍稀濒危鱼类,并检出8种外来鱼类。α多样性分析显示,各站位Shannon-Wiener指数为0.92~2.41,Simpson指数为0.44~0.88,Pielou均匀度指数为0.35~0.60,Margalef指数为0.30~1.16。采用层次聚类(Cluster)和非度量多维尺度分析(NMDS)方法对鱼类群落空间分布特征进行分析,结果显示鱼类群落在空间分布上存在差异,各站位从下游至上游分为3组,表现为在地理空间上相近的站位聚在一起。通过相似性百分比分析(SIMPER)物种对各组间差异的贡献,结果表明翘嘴鲌(Culter alburnus)、宽额鳢(Channa gachua)、鲮(Cirrhinus molitorella)和棒花鱼(Abbottina rivularis)等是造成各组间差异的主要种类。采用冗余分析方法(RDA)分析了鱼类多样性与环境因子的关系,发现元江鱼类群落主要受海拔、盐度、电导率、总溶解固体、氧化还原电位和总磷等环境因子影响。研究表明,环境DNA技术可有效分析元江鱼类的种类组成和分布,是开展元江鱼类生物多样性监测和保护的重要手段。 展开更多
关键词 环境dna(edna) 鱼类多样性 群落结构 环境因子 元江
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基于共价闭合环状DNA动力学的慢性乙型肝炎治疗策略
6
作者 胡接力 黄爱龙 《临床肝胆病杂志》 北大核心 2026年第1期14-20,共7页
实现慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染的普遍治愈,是乙型肝炎研究领域的最高目标。深入探索HBV感染治愈的可能途径,对于明确关键研究方向具有重要意义。共价闭合环状DNA(cccDNA)作为HBV复制循环中最难以被清除的遗传物质,既是实现治愈的主要障... 实现慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染的普遍治愈,是乙型肝炎研究领域的最高目标。深入探索HBV感染治愈的可能途径,对于明确关键研究方向具有重要意义。共价闭合环状DNA(cccDNA)作为HBV复制循环中最难以被清除的遗传物质,既是实现治愈的主要障碍,也是构建治愈策略分析框架的核心基点。本文在概述“cccDNA动力学”思维框架的基础上,进一步阐释其核心内涵,并以此为依据系统探讨论述促进cccDNA衰减的关键策略。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 共价闭合环状dna 治疗学
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基于形态学和DNA条形码的青藏高原东缘鼢鼠物种鉴定
7
作者 蔡振媛 孔虹颖 +8 位作者 何振邦 宋鹏飞 郭凡 李斌 梁程博 胡天石 徐波 林中原 张同作 《兽类学报》 北大核心 2026年第1期116-128,共13页
物种分类和鉴定是生物学研究的基石,综合分子生物学和经典分类学方法进行物种鉴定可提高结果可靠性。本研究采用传统形态学和线粒体细胞色素b基因(Cyt b)序列对青藏高原东缘青海省海东市平安区采集的74个鼢鼠样本进行物种鉴定。头骨形... 物种分类和鉴定是生物学研究的基石,综合分子生物学和经典分类学方法进行物种鉴定可提高结果可靠性。本研究采用传统形态学和线粒体细胞色素b基因(Cyt b)序列对青藏高原东缘青海省海东市平安区采集的74个鼢鼠样本进行物种鉴定。头骨形态鉴定结果显示,尾巴被稀疏短白毛的鼢鼠个体(Pac)为甘肃鼢鼠(Eospalax cansus),而尾巴被密毛的个体(Pab)为高原鼢鼠(Eospalax baileyi)。74个鼢鼠样本的Cyt b序列共定义了25个单倍型,结合GenBank中8种鼢鼠的Cyt b序列进行分析,在构建的系统发育树中,已知8种鼢鼠序列各自聚为1个单系群,平安区Pab的16个单倍型与已知高原鼢鼠聚为一支,Pac的8个单倍型与已知甘肃鼢鼠聚为一支。遗传距离结果显示,Pac与已知甘肃鼢鼠遗传距离小于与其他物种的遗传距离(P<0.001),Pab与已知高原鼢鼠的遗传距离小于与其他物种的遗传距离(P<0.001)。Cyt b基因分析和形态鉴定结果一致,Cyt b是鼢鼠鉴定的一个有效的DNA条形码基因。综合形态学和DNA条形码鉴定结果,平安区分布着2种鼢鼠:甘肃鼢鼠和高原鼢鼠。在地理分布上,甘肃鼢鼠主要分布在平安区北部邻近黄土高原海拔相对较低的区域,高原鼢鼠则分布在南部邻近青藏高原海拔相对较高的区域。本研究加深了对平安区鼢鼠物种组成和分布特征的了解,并为解决鼢鼠物种形态鉴定难的问题提供了DNA条形码解决方案。 展开更多
关键词 dna条形码技术 鼢鼠 Cyt b 形态 系统发育 遗传距离
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两个镍配合物的结构、抑菌活性及与DNA的相互作用
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作者 季甲 姚腾奇 +5 位作者 邓文钱 石文婧 吕璇 田琳 辛晓艳 侯银玲 《无机化学学报》 北大核心 2026年第1期78-86,共9页
通过原位反应,设计合成了2例配合物[Ni(HL_(1))_(2)]·CH_(3)CN·CH_(3)OH(1)和[Ni(L2)2](2),其中H_(2)L_(1)=2-羟基苯甲酸(6-甲氧基-吡啶-2-基亚甲基)-肼,HL2=4-溴-2-[(6-甲氧基吡啶-2-基亚甲基)-氨基]-苯酚。单晶X射线衍射分... 通过原位反应,设计合成了2例配合物[Ni(HL_(1))_(2)]·CH_(3)CN·CH_(3)OH(1)和[Ni(L2)2](2),其中H_(2)L_(1)=2-羟基苯甲酸(6-甲氧基-吡啶-2-基亚甲基)-肼,HL2=4-溴-2-[(6-甲氧基吡啶-2-基亚甲基)-氨基]-苯酚。单晶X射线衍射分析表明:配合物1和2均具有以二价镍离子为中心的单核零维结构。打孔抑菌圈实验数据表明,与单纯的过渡金属镍离子相比,配合物1和2表现出更强的抑菌活性。采用紫外可见光谱法、循环伏安法和荧光光谱法研究了配合物1和2与小牛胸腺DNA(CTDNA)之间的相互作用,结果表明2个配合物均通过插入作用模式与CTDNA结合。 展开更多
关键词 Ni配合物 原位合成 晶体结构 生物活性 dna相互作用
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脓毒症患者循环游离DNA甲基化特征及其临床应用前景
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作者 晏梓豪(综述) 龚艺(审校) 《国际检验医学杂志》 2026年第1期91-96,共6页
脓毒症是感染诱发的宿主失调性炎症反应所致的器官功能障碍,具有高发病率和高病死率。循环游离DNA(cfDNA)作为一种来源于细胞凋亡、坏死及免疫过程的分子标志,近年来受到广泛关注。cfDNA不仅在浓度水平上反映机体组织损伤,其片段组学和... 脓毒症是感染诱发的宿主失调性炎症反应所致的器官功能障碍,具有高发病率和高病死率。循环游离DNA(cfDNA)作为一种来源于细胞凋亡、坏死及免疫过程的分子标志,近年来受到广泛关注。cfDNA不仅在浓度水平上反映机体组织损伤,其片段组学和甲基化特征更携带组织来源及免疫状态信息,为脓毒症的诊断、分型及预后评估提供了新的思路。该文总结了cfDNA甲基化的检测方法、脓毒症患者cfDNA甲基化特征的研究进展,分析其在器官损伤监测、免疫失衡评估及疾病预后中的应用潜力,并提出当前研究尚待解决的问题。 展开更多
关键词 脓毒症 循环游离dna dna甲基化 免疫失衡 预后评估
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基于环境DNA的河-湖水生态调查与评估研究进展
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作者 魏源送 蔡佳琳 +5 位作者 谢阳村 张耀方 程楷文 薛万来 魏明海 张俊亚 《环境科学学报》 北大核心 2026年第1期1-22,共22页
环境DNA(eDNA)技术通过分析环境样品中的遗传物质,为水生态监测与评估带来了革命性进展,实现了非侵入性、高灵敏度及多物种同步检测.本综述系统梳理并总结了近年来eDNA技术在河湖水生态调查与评估应用全链条—从eDNA信号的产生与环境行... 环境DNA(eDNA)技术通过分析环境样品中的遗传物质,为水生态监测与评估带来了革命性进展,实现了非侵入性、高灵敏度及多物种同步检测.本综述系统梳理并总结了近年来eDNA技术在河湖水生态调查与评估应用全链条—从eDNA信号的产生与环境行为到样本采集、实验分析、数据解读及模型应用的关键研究进展,并剖析了面临的核心科学问题与技术挑战.当前,eDNA技术在生物多样性评估、濒危物种追踪、外来种入侵预警及生态修复评价等方面已展现出显著应用潜力,但其可靠性与推广仍面临eDNA信号环境动态复杂、参考数据库不完整、引物通用性与特异性难以兼顾、以及生物信息分析流程标准化不足等挑战.区别于其它综述,本文不仅全面覆盖各环节的现状与瓶颈,更从标准化建设、技术方法革新、数据资源共享、多源信息融合及智能化决策支持等维度,前瞻性地展望了该领域未来的发展方向与系统性解决方案的构建框架,以期为科研工作者深入把握eDNA技术的最新进展与未来趋势提供参考,从而助力该领域的技术优化与标准化进程. 展开更多
关键词 环境dna(edna) 水生态系统 生物多样性监测 宏条形码 参考数据库 标准化
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循环肿瘤DNA在卵巢癌早期诊断的研究进展
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作者 徐若兰 杨将 +1 位作者 王冉冉 周金婷(审校) 《国际妇产科学杂志》 2026年第1期8-11,共4页
卵巢癌是女性生殖系统致死率极高的恶性肿瘤之一,其早期症状不明显,易误诊漏诊,超过70%的患者在确诊时已属晚期,且生存率较低。目前,糖类抗原125、经阴道超声检查等常用筛查手段在卵巢癌早期诊断中的敏感度和特异度均有限。近年来,随基... 卵巢癌是女性生殖系统致死率极高的恶性肿瘤之一,其早期症状不明显,易误诊漏诊,超过70%的患者在确诊时已属晚期,且生存率较低。目前,糖类抗原125、经阴道超声检查等常用筛查手段在卵巢癌早期诊断中的敏感度和特异度均有限。近年来,随基因测序技术的发展,分子诊断成为卵巢癌早期检测的重要手段,尤其是基于循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)的检测受到广泛关注。ctDNA是肿瘤细胞释放到血液中的DNA片段,携带肿瘤特征,能动态、实时地反映肿瘤状态。基于ctDNA的卵巢癌突变检测、甲基化模式识别,显著提高了检测敏感度。此外,ctDNA与机器学习方法的结合进一步提升了卵巢癌的早期检出率。未来,检测技术和大规模人群数据的研究以及多组学数据整合将极大地推动ctDNA在卵巢癌诊疗中的应用,提升患者的生存质量。 展开更多
关键词 循环肿瘤dna 卵巢肿瘤 序列分析 dna 甲基化 机器学习 早期诊断
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Quick TargSeqTM全集成DNA快速检测系统在极端环境下运行性能评测
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作者 黄章龙 韩俊萍 +3 位作者 庄斌 谢何鑫 李彩霞 张海军 《刑事技术》 2026年第1期16-21,共6页
快速DNA分析技术能够将DNA提取、多重PCR扩增以及毛细管电泳等多个步骤集成,无需人工干预即可自动完成所有流程。商业化的DNA快速检测系统可通过自动化设备提供的内部环境来模拟实验室环境,从而使得整个检测过程彻底摆脱常规DNA实验室... 快速DNA分析技术能够将DNA提取、多重PCR扩增以及毛细管电泳等多个步骤集成,无需人工干预即可自动完成所有流程。商业化的DNA快速检测系统可通过自动化设备提供的内部环境来模拟实验室环境,从而使得整个检测过程彻底摆脱常规DNA实验室所需环境条件限制。本文针对国产Quick TargSeqTM全集成DNA快速检测系统,开展极端环境条件下作业能力测试,评估其实战使用效能,这是在该领域的首次尝试。将Quick TargSeqTM装载于车辆上,进行车载静止测试和行进中测试。测试高度涵盖从海拔500 m的平原环境到海拔3 800 m的高原环境,共分为4个静止测试点(包含1个平原参考点)和5个行进中测试路段。测试全程为雨雪天气,最低气温达-1℃,总计测试数据36组,其中平原静止点2组,平原行进中测试4组,高原静止点18组,高原行进中测试12组。测试结果显示STR基因座的检出率为99.21%,分型准确率为100%,测试结果表明该快检系统具备环境适应能力和野外作业能力。 展开更多
关键词 法医物证学 dna检验 快速dna 高原测试 低温雨雪环境
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基于周期阻滞和氧化⁃抗氧化失衡研究槟榔碱致小鼠骨髓细胞DNA损伤的机制
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作者 于蕾 于晶涵 +6 位作者 宋辉 郎朗 马瑗晗 龚艳朝 张小坡 张彩云 王正文 《海南医科大学学报》 北大核心 2026年第2期89-95,共7页
目的:研究槟榔碱(arecoline,ARC)体内对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用,并探讨其作用机制。方法:采用单细胞凝胶电泳实验分析ARC对小鼠骨髓细胞DNA损伤作用。采用流式细胞术、DCFH-DA荧光染色、罗丹明123染色等方法对小鼠骨髓细胞的细胞周期... 目的:研究槟榔碱(arecoline,ARC)体内对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用,并探讨其作用机制。方法:采用单细胞凝胶电泳实验分析ARC对小鼠骨髓细胞DNA损伤作用。采用流式细胞术、DCFH-DA荧光染色、罗丹明123染色等方法对小鼠骨髓细胞的细胞周期,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondial dehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,线粒体膜电位(Δψm),p53蛋白含量进行分析。结果:给予ARC1/2 LD_(50)剂量可引起小鼠骨髓细胞DNA损伤,与空白组相比拖尾现象较严重。随着ARC给药剂量的增加,G_(0)/G_(1)期的细胞比例明显增加(P<0.01),使骨髓细胞周期停滞在G_(0)/G_(1)期。ARC作用小鼠骨髓细胞后,SOD活性和GSH含量明显降低(P<0.01),MDA和ROS含量明显升高(P<0.01),并且随着ARC浓度增加,Δψm明显降低(P<0.01)。ARC给药组骨髓细胞内p53蛋白含量随给药剂量的增加而明显升高(P<0.01),呈一定的剂量依赖关系。结论:ARC能造成小鼠骨髓细胞DNA损伤,可增加p53蛋白表达诱导小鼠骨髓细胞周期阻滞在G_(0)/G_(1)期,引起Δψm降低,ROS增加,脂质过氧化增强,抗氧化功能受到严重损害,氧化和抗氧化失衡,这些是ARC引起小鼠骨髓细胞DNA损伤的机制。 展开更多
关键词 槟榔碱 骨髓细胞 dna损伤 G_(0)/G_(1)期阻滞 氧化-抗氧化失衡
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阿昔洛韦抑制EB病毒裂解引发的DNA损伤
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作者 刘剑 姚友恒 +2 位作者 邱红梅 刘益飞 李燊 《交通医学》 2026年第1期6-8,12,共4页
目的:研究阿昔洛韦抑制EB病毒裂解引发的DNA损伤作用。方法:以人类伯基特淋巴瘤细胞系Akata与Daudi细胞为研究对象,对照组采用200 nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate,TPA)诱导Akata细胞,200 nmol/L TPA联合3 mmol/L丁... 目的:研究阿昔洛韦抑制EB病毒裂解引发的DNA损伤作用。方法:以人类伯基特淋巴瘤细胞系Akata与Daudi细胞为研究对象,对照组采用200 nmol/L佛波酯(12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate,TPA)诱导Akata细胞,200 nmol/L TPA联合3 mmol/L丁酸钠(sodium butyrate,NaB)诱导Daudi细胞0、6、24和48 h,实验组再同时向培养基中加入50μmol/L阿昔洛韦共孵育48 h。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法测定细胞中EB病毒裂解基因BZLF1、BMRF1和BLLF1的表达水平;采用Western Blot法测定细胞中BZLF1、γH2AX蛋白表达水平。结果:TPA和NaB诱导Akata和Daudi细胞0、6、24和48 h后,细胞中BZLF1、BMRF1和BLLF1基因表达水平较诱导前显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western Blot结果显示,Akata细胞和Daudi细胞中EB病毒由潜伏转为裂解状态后,BZLF1与DNA损伤相关蛋白γH2AX表达显著增加,阿昔洛韦干预后γH2AX与BZLF1蛋白表达显著降低。结论:阿昔洛韦可抑制EB病毒裂解引发的DNA损伤,为阿昔洛韦治疗EB病毒相关疾病提供新思路。 展开更多
关键词 阿昔洛韦 EB病毒 裂解 dna损伤
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基于Geant4-DNA模拟碳离子辐照诱导V79细胞DNA损伤与修复机制研究
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作者 韩旭 刘志强 +3 位作者 张庆华 左子杰 孙世龙 张秋宁 《中华放射肿瘤学杂志》 北大核心 2026年第2期163-171,共9页
目的模拟V79细胞在碳离子不同剂量平均LET(LET_(d))条件下的细胞核DNA早期损伤和修复过程,并评估其对细胞存活率的影响。方法首先,基于Geant4-DNA建立V79细胞的细胞质、细胞核,以及基于分形几何结构排列的细胞核DNA模型。然后,使用GATE... 目的模拟V79细胞在碳离子不同剂量平均LET(LET_(d))条件下的细胞核DNA早期损伤和修复过程,并评估其对细胞存活率的影响。方法首先,基于Geant4-DNA建立V79细胞的细胞质、细胞核,以及基于分形几何结构排列的细胞核DNA模型。然后,使用GATE模拟细胞入射前不同能量的碳离子LET_(d),随后使用Geant4-DNA中3种物理模型(option2、4、6)模拟不同LET_(d)的碳离子与细胞的相互作用,得到碳离子辐照下的细胞核DNA直接损伤和间接损伤产额。最后,利用双损伤动力学(TLK)模型计算细胞存活率,并以细胞辐射生物实验数据为依据,优化TLK模型参数。结果建立好的V79细胞模型其几何大小和DNA含量与真实细胞一致。随着碳离子LET_(d)的增加,DNA单链断裂总产额下降,平均损伤产额变化范围为171.164~192.402 Gy^(-1)·Gbp^(-1);双链断裂总产额上升,平均损伤产额变化范围为6.047~7.516 Gy^(-1)·Gbp^(-1)。通过对TLK模型损伤修复参数的优化,模拟得到其他LET_(d)下的细胞存活分数与Furusawa等研究的数据吻合程度较高,且模拟α值与Furusawa等研究的α值平均相差0.0156±0.0246,模拟β值则平均相差0.0147±0.0046,模拟相对生物学效应(RBE)值则平均相差0.1796±0.083。结论本研究建立的V79细胞模型,预测碳离子不同LET_(d)下的细胞存活率、α、β和RBE值结果可靠。模拟结果显示,高LET_(d)的碳离子更容易造成细胞DNA双链断裂,该损伤难以修复,最终导致细胞死亡。 展开更多
关键词 dna损伤 Geant4-dna 碳离子照射 V79细胞存活率预测 相对生物学效应
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板栗叶片DNA的提取及AFLP反应体系的建立 被引量:28
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作者 程丽莉 苏淑钗 +1 位作者 秦岭 尹伟伦 《北京农学院学报》 2005年第2期5-9,共5页
以初展开的板栗嫩叶为材料,利用改进的CTAB法,提取到高质量的板栗叶片总DNA。通过优化酶切连接、预扩增、选择性扩增等试验条件,建立了板栗AFLP银染反应体系,得到了清晰的板栗AFLP指纹图谱。为板栗品种的分子标记和板栗品种间亲缘关系... 以初展开的板栗嫩叶为材料,利用改进的CTAB法,提取到高质量的板栗叶片总DNA。通过优化酶切连接、预扩增、选择性扩增等试验条件,建立了板栗AFLP银染反应体系,得到了清晰的板栗AFLP指纹图谱。为板栗品种的分子标记和板栗品种间亲缘关系等研究奠定了基础。研究结果表明:①DNA模板的质量影响酶切以及后续的连接扩增反应。以初展开的嫩叶提取的板栗叶片总DNA纯度最高,所含蛋白质、小分子杂质少,改良的CTAB提取法可用于板栗AFLP分析,形成清晰的AFLP指纹。②先进行酶切后再进行酶连的反应体系比酶切酶连一起进行的体系效果更好。板栗基因组DNA最佳酶切反应体系为:模板DNA总量500ng,反应体积为25μl,10×Y+/TanqoTMBuffer2.5μl,BSA0.8μl,EcoRI5U,MseI5U。连接反应体系中T4DNA连接酶浓度2U即达最佳效果。酶切、酶连反应最佳温度均为37℃。③以板栗为材料进行AFLP标记时,E AAC+M CAA、E AAC+M CAT和E AGT+M CAT三个引物均获得较好的多态性。其中以E AGT+M CAT引物组合的扩增条带信号强度一致性好,条带分布均匀,能够得到稳定、清晰、分辨率较高的指纹谱带,可进行中国板栗的遗传变异分析。 展开更多
关键词 反应体系 叶片dna 板栗 AFLP指纹图谱 种间亲缘关系 AFLP分析 基因组dna AFLP标记 遗传变异分析 CTAB法 选择性扩增 dna模板 dna纯度 模板dna dna连接 dna 试验条件 分子标记 质量影响 研究结果 反应体积 最佳温度 信号强度
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Identification of p63 expression in human lung cancer: analysis by complementary DNA and tissue microarray
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作者 余永伟 Mitch Garber +2 位作者 Karsten Schlüns Manuela Pacyna-Gengelbach lver Petersen 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2004年第1期51-54,共4页
Objective: To evaluate p63 expression at mRNA transcripts and protein levels in lung squamous cell cancer (SCC), adenocarcinoma, large cell lung cancer (LCLC) and small cell lung cancer (SCLC) and their matched metast... Objective: To evaluate p63 expression at mRNA transcripts and protein levels in lung squamous cell cancer (SCC), adenocarcinoma, large cell lung cancer (LCLC) and small cell lung cancer (SCLC) and their matched metastatic tumors. The association between p63 expression and p63 locus at chromosomal 3q27 q29 was also investigated. Methods: p63 mRNA expression levels in a large series of lung cancers including SCC, adenocarcinoma, LCLC, SCLC and their matched metastatic tumors were analyzed by cDNA microarray technology. A tissue microarray from 150 primary lung cancer specimens was constructed and used for immunohistochemical detection of p63 protein expression. Chromosomal imbalances at the p63 locus in 70 primary lung cancers samples were studied by comparative genomic hybridization (CGH) technology. Results: mRNA levels were 10 fold in SCC compared to LCLC, SCLC, and adenocarcinoma. Interestingly, the mRNA expression of p63 in metastatic carcinomas was significantly higher than that in their matched primary tumors ( P <0 001). Immunohistochemistry demonstrated that p63 expression was 94.64% in SCC but only 1 79% in lung adenocarcinoma and 2 of 4 LCLC were positive staining. All the results in of SCLC were negative. There was a statistically significant difference for p63 positivity between pT1 tumors and those of higher stage ( P =0 035). The CGH results indicated that p63 locus at chromosomal 3q27 q29 was overrepresented in SCC. p63 immunopositivity correlated significantly with pronounced gains of the p63 locus at chromosomal 3q27 q29 (P=0.0001), indicating that strong expression of p63 in lung SCC correlated with increased gene amplification. Conclusion: p63 might play an important role not only in squamous differentiation of lung cancer but also in tumor development and progression. 展开更多
关键词 lung cancer cdna microarray tissue microarray p63 comparative genomic hybridization
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基于ctDNA与MRD探讨亚肺叶切除术治疗早期周围型肺腺癌的围术期疗效评估
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作者 陈涛 王翠莲 +8 位作者 钟新 钟智森 谢群燕 饶鼎宇 朱慎钰 章祖雄 古亮 廖国亮 唐志贤 《赣南医科大学学报》 2026年第1期26-31,共6页
目的:拟通过监测血浆游离DNA(Cell-free DNA,cfDNA)和循环肿瘤DNA(Circulating tumor DNA,ctDNA)及微小残留病灶(Minimal residual disease,MRD)水平,评估亚肺叶切除术治疗早期周围型肺腺癌的手术创伤和肿瘤学疗效差异。方法:回顾性分析... 目的:拟通过监测血浆游离DNA(Cell-free DNA,cfDNA)和循环肿瘤DNA(Circulating tumor DNA,ctDNA)及微小残留病灶(Minimal residual disease,MRD)水平,评估亚肺叶切除术治疗早期周围型肺腺癌的手术创伤和肿瘤学疗效差异。方法:回顾性分析2023年1月——2024年6月行亚肺叶手术治疗的25例IA期周围型肺腺癌患者临床资料,其中肺段切除术患者13例为肺段切除组,肺楔形切除术患者12例为肺楔形切除组。对所有患者肿瘤组织进行全外显子测序(Whole exome sequencing,WES),筛选患者个体化高频突变位点(中位数36个)定制MRD监测Panel,利用超高深度测序检测血浆中的ctDNA,评估MRD状态,于术前、术后第3 d采集外周血,检测cfDNA含量。结果:术后25例样本中有3例检测出变异,3例样本均只有1个变异,2组术后MRD阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。肺段切除组术后cfDNA水平及增量均显著高于楔形切除组(P<0.05)。术后肺部发生感染的患者,其血浆cfDNA水平显著高于未发生感染的患者(P<0.05)。结论:肺段切除术较肺楔形切除术有更显著的手术创伤反应,术后cfDNA动态变化可作为评估组织损伤和预测并发症的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 肺腺癌 亚肺叶切除术 循环肿瘤dna 微小残留病灶 血浆游离dna
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科学思维视角下的高中生物学情境教学研究——以“重组DNA技术的基本工具”教学为例
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作者 刘会坚 魏梅红 《福建基础教育研究》 2026年第1期134-136,140,共4页
根据建构主义学习理论有关情境教学论述,以“重组DNA技术的基本工具”教学为例,通过创设系列任务情境,激发学生认知冲突,引导学生动手构建模型,深化理解。通过探究、质疑、评价与反思,突破学习难点,优化思维路径,培养学生归纳与概括、... 根据建构主义学习理论有关情境教学论述,以“重组DNA技术的基本工具”教学为例,通过创设系列任务情境,激发学生认知冲突,引导学生动手构建模型,深化理解。通过探究、质疑、评价与反思,突破学习难点,优化思维路径,培养学生归纳与概括、模型与建模、批判性思维、创造性思维等科学思维。 展开更多
关键词 科学思维 情境教学 重组dna技术 建模 批判性思维
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自己“组装”DNA链置换计算机——人工智能和仿真软件支持下的跨学科学习案例
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作者 陈凯 《中国信息技术教育》 2026年第1期27-31,共5页
DNA链置换是实现分子逻辑门进而实现较复杂的DNA计算的一种方法,DNA计算问题天然具有跨学科特征,人工智能工具和仿真软件的支持,对学习者在实施相关跨学科学习过程中消除学科壁垒、降低认知负荷起到很大的作用。本文以构造2-4二进制解... DNA链置换是实现分子逻辑门进而实现较复杂的DNA计算的一种方法,DNA计算问题天然具有跨学科特征,人工智能工具和仿真软件的支持,对学习者在实施相关跨学科学习过程中消除学科壁垒、降低认知负荷起到很大的作用。本文以构造2-4二进制解码器为例,阐述和分析在当前已有技术支持下,生成式人工智能工具和仿真软件在DNA计算相关跨学科学习过程中可能发挥的作用、优势以及弱点。 展开更多
关键词 dna链置换 生成式人工智能 仿真软件
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