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DDIT3对乳腺癌的预后及他莫西芬耐药性影响
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作者 薛佳莹 王丹丹 黄国庆 《生物技术》 2025年第5期622-630,共9页
[目的]探讨DDIT3对乳腺癌患者预后的影响及其调控乳腺癌他莫昔芬耐药性形成的潜在机制。[方法]采用TCGA等数据库资源,生物信息学分析DDIT3表达与乳腺癌患者预后的关系;同时,在乳腺癌T47D细胞中敲降或过表达DDIT3基因,分析其对细胞生长... [目的]探讨DDIT3对乳腺癌患者预后的影响及其调控乳腺癌他莫昔芬耐药性形成的潜在机制。[方法]采用TCGA等数据库资源,生物信息学分析DDIT3表达与乳腺癌患者预后的关系;同时,在乳腺癌T47D细胞中敲降或过表达DDIT3基因,分析其对细胞生长及他莫昔芬耐药的影响;并对DDIT3敲降T47D细胞进行转录组测序分析及验证试验,推测DDIT3调控乳腺癌他莫昔芬耐药机制。[结果]与正常乳腺组织相比,DDIT3在乳腺癌中呈低表达(P<0.05),DDIT3低表达乳腺癌患者生存率较低(P=0.004 2),相对预后不良。DDIT3在接受及未接受他莫昔芬类内分泌药物治疗的患者中的表达也显著不同。此外,DDIT3负调控乳腺癌T47D细胞生长(P<0.05)。再者,DDIT3敲降后靶细胞耐药性显著降低,对照组、si DDIT3-3和si DDIT3-7试验组细胞IC50分别为(14.65±0.23)μmol/L、(6.75±0.65)μmol/L(P<0.000 1)和(11.24±0.38)μmol/L(P<0.000 1)。DDIT3过表达后,靶细胞耐药性也显著增强,对照组、过表达组IC50分别为(6.27±0.13)μmol/L、(7.43±0.24)μmol/L(P<0.01)。表明DDIT3与T47D细胞TAM敏感度呈负相关。此外,汇总RNA-seq数据及相关试验结果,发现TNF敲降后AKT、MAPK14、MAP3K14、JAK1、PTEN等TNF信号通路关键基因显著下调,TNF敲降可以显著纠正DDIT3敲降引起的上述TNF信号通路关键基因表达变化,TNF敲降还能显著拯救DDIT3敲降造成的靶细胞TAM敏感现象。推测DDIT3可能通过TNF信号通路调控乳腺癌生长耐药。[结论] DDIT3表达与乳腺癌患者预后显著正相关,DDIT3可能通过TNF信号通路调控乳腺癌生长及他莫昔芬耐药。 展开更多
关键词 DDIT3 乳腺癌 TNF T47D 他莫昔芬 生长 耐药 预后
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二元同位素测温技术及其在白云岩储层成因研究中的应用——以塔里木盆地中下寒武统为例 被引量:11
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作者 郑剑锋 李晋 +3 位作者 季汉成 黄理力 胡安平 马明璇 《海相油气地质》 CSCD 北大核心 2017年第2期1-7,共7页
作为近年来新兴的实验技术,二元同位素(D47)测温技术已被应用于碳酸盐岩成岩环境的研究中。简要介绍了二元同位素测温技术的原理及应用方法,并以塔里木盆地中下寒武统白云岩为例,优选11块样品,测试其D47值和白云石的碳氧同位素,并计算... 作为近年来新兴的实验技术,二元同位素(D47)测温技术已被应用于碳酸盐岩成岩环境的研究中。简要介绍了二元同位素测温技术的原理及应用方法,并以塔里木盆地中下寒武统白云岩为例,优选11块样品,测试其D47值和白云石的碳氧同位素,并计算出样品的成岩温度和古流体的δ^(18)O值。综合分析认为:样品中,颗粒白云岩形成于低温准同生—浅埋藏环境,成岩流体为海水;细晶白云岩为深埋藏成岩环境中原岩受到了高温重结晶作用的改造,成岩流体为地下热卤水;孔缝中的白云石胶结物是深埋藏成岩环境富镁热卤水沉淀作用的产物。研究证明二元同位素测温技术可以较好地恢复白云岩的成岩温度,减少储层成因的多解性,它为今后储层成因研究提供了一种新的手段和依据。 展开更多
关键词 二元同位素 d47 测温技术 成岩环境 白云岩储层 塔里木盆地
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丹参酮ⅡA抗乳腺癌细胞增殖作用研究 被引量:27
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作者 赵丕文 牛建昭 +5 位作者 王继峰 郝庆秀 于杰 孙丽萍 黄春芳 陶仕英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期903-906,共4页
目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对细胞增殖活性的影响及其对雌激素受体亚型的调节功能。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖... 目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对细胞增殖活性的影响及其对雌激素受体亚型的调节功能。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察1×10-6mol.L-1和1×10-7mol.L-1丹参酮ⅡA对T47D和MDA-MB-231细胞增殖的影响。利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测其对T47D细胞ERα和ERβmRNA及蛋白表达情况的影响。结果丹参酮ⅡA能够抑制T47D细胞增殖,且该作用可被ICI182,780部分拮抗;对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用较其对T47D细胞的作用更为明显。丹参酮ⅡA可使T47D细胞ERα和ERβmRNA和蛋白表达明显增加,并使ERα/ERβ比值有所上升。结论丹参酮ⅡA具有抑制乳腺癌细胞增殖的作用,抑制强度与对其ER亚型的调节作用相关。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 乳腺癌 T47D MDA-MB-231 细胞增殖 雌激素受体亚型
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芒柄花素的植物雌激素作用研究 被引量:29
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作者 于杰 赵丕文 +3 位作者 牛建昭 王继峰 曹远奎 郝庆秀 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期3060-3064,共5页
目的:探讨芒柄花素的雌激素样作用及其可能机制。方法:选取当归、黄芪、红三叶草中含有的黄酮类物质之一——芒柄花素,利用ER阳性T47D细胞,检测其对细胞增殖速率、分裂增殖指数以及ER亚型表达的影响,评价芒柄花素的植物雌激素活性。... 目的:探讨芒柄花素的雌激素样作用及其可能机制。方法:选取当归、黄芪、红三叶草中含有的黄酮类物质之一——芒柄花素,利用ER阳性T47D细胞,检测其对细胞增殖速率、分裂增殖指数以及ER亚型表达的影响,评价芒柄花素的植物雌激素活性。结果:MTT增殖试验结果显示,1×10-71×10-6mol.L-1芒柄花素不能促进人乳腺癌细胞T47D的体外增殖;在ICI182,780抑制试验中,芒柄花素可能能够与ICI182,780协同作用抑制T47D细胞体外增殖;流式细胞术测定细胞周期结果显示,1×10-71×10-6mol.L-1芒柄花素对T47D细胞的分裂增殖指数没有影响;芒柄花素有增强T47D细胞ERα表达的作用(P〈0.05)。结论:芒柄花素能够在体外条件下增强T47D细胞ERα表达,具有植物雌激素样作用,但该物质不能促进T47D细胞的体外增殖。 展开更多
关键词 芒柄花素 植物雌激素 雌激素样作用 T47D细胞
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阿魏酸对人类乳腺癌细胞增殖作用机制的实验研究 被引量:14
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作者 郝庆秀 赵丕文 +3 位作者 牛建昭 王继峰 于杰 薛晓鸥 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期2752-2755,共4页
目的:考察阿魏酸对人类乳腺癌细胞的增殖作用及可能的作用机制。方法:利用体外培养的ER阳性人乳腺癌细胞系T47D细胞和ER阴性人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,通过MTT增殖实验、流式细胞技术检测细胞周期分布、测定ER亚型蛋白表达和用实... 目的:考察阿魏酸对人类乳腺癌细胞的增殖作用及可能的作用机制。方法:利用体外培养的ER阳性人乳腺癌细胞系T47D细胞和ER阴性人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,通过MTT增殖实验、流式细胞技术检测细胞周期分布、测定ER亚型蛋白表达和用实时荧光定量RT-PCR法检测阿魏酸对雌激素效应基因pS2的调控作用。结果:1×10-51×10^-7mol.L^-1的阿魏酸可促进T47D细胞增殖(P〈0.05),1×10^-8mol.L^-1雌激素受体拮抗剂FaslodexTM能抑制这种增殖效应。实验浓度阿魏酸以及它们与1×10^-8mol.L^-1雌激素受体拮抗剂FaslodexTM共孵育对MDA-MB-231细胞的增殖作用无论在时效或者量效方面均无显著的统计学意义。阿魏酸能使T47D细胞S期细胞数增加,细胞分裂增殖指数升高(P〈0.05);随着细胞的孵育时间延长至48 h,细胞分裂增殖指数与孵育24 h相比显著降低(P〈0.01),实验浓度阿魏酸以及它们与1×10^-8mol.L^-1雌激素受体拮抗剂FaslodexTM共孵育使T47D细胞S期和G2M期细胞比例下降,G0-G1期比例升高,细胞周期停滞于G0-G1期。1×10-7,1×10-6mol.L-1阿魏酸可诱导T47D细胞ERα蛋白表达水平显著升高(P〈0.01),而对ERβ蛋白表达水平无显著影响。1×10-7,1×10-6mol.L-1阿魏酸均上调T47D细胞雌激素依赖性基因pS2mRNA表达。结论:阿魏酸通过促进ER阳性乳腺癌细胞增殖、上调ERα蛋白和雌激素依赖性基因pS2mRNA表达水平,有植物雌激素样作用。 展开更多
关键词 阿魏酸 T47D MDA—MB-231 雌激素受体 PS2 mRNA
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异补骨脂素的植物雌激素作用及其机制的探讨 被引量:27
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作者 赵丕文 牛建昭 +2 位作者 王继峰 郝庆秀 于杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1193-1197,共5页
目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB231细胞观察异补骨脂素(isopsoralen)的雌激素样作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察... 目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB231细胞观察异补骨脂素(isopsoralen)的雌激素样作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察异补骨脂素对T47D和MDA-MB231细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测细胞周期分布的变化。同时,利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测异补骨脂素对T47D细胞pS2 mRNA及蛋白表达情况的影响。结果1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素能够促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且该作用可被ICI182,780所拮抗;1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素对MDA-MB231细胞增殖无影响。PCR及流式蛋白检测结果显示:1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素可使pS2 mRNA和蛋白表达增加,同时加入ICI182,780可部分拮抗异补骨脂素对pS2表达的诱导和促进作用。结论异补骨脂素具有植物雌激素作用,该效应可通过作用于靶细胞雌激素受体途径实现。 展开更多
关键词 异补骨脂素 植物雌激素 T47D MDA-MB231 细胞增殖 PS2 雌激素受体
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中药成分CDP抑制肿瘤细胞生长及其去甲基化作用的研究 被引量:8
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作者 栾菊 覃扬 +2 位作者 徐丹 孙芝琳 孙泽芳 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期834-838,共5页
目的探讨中药成分CDP对肿瘤细胞系的生长抑制作用及其对抑癌基因p 16启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法培养人肝癌细胞系Huh-7和乳腺癌细胞系T 47D,用M TT法检测药物对肿瘤细胞生长的抑制作用;分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和... 目的探讨中药成分CDP对肿瘤细胞系的生长抑制作用及其对抑癌基因p 16启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法培养人肝癌细胞系Huh-7和乳腺癌细胞系T 47D,用M TT法检测药物对肿瘤细胞生长的抑制作用;分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytid ine(5-aza-C)作用细胞;同时提取细胞的DNA,用甲基化特异性PCR(m ethy lation-spec ific PCR,M SP)的方法观察肿瘤细胞系p 16基因启动子区CpG岛甲基化/去甲基化的状态。结果①Huh-7和T 47D细胞系皆为抑癌基因p 16启动子区CpG岛完全发生甲基化的肿瘤细胞系。②CDP和5-aza-C以时间、剂量依赖方式抑制Huh-7和T 47D增殖。③在25、50、75和100μm o l/L的CDP持续作用6 d后,Huh-7和T 47D p 16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍然存在;Huh-7在四个剂量CDP作用下,非甲基化特异性条带被扩增出,T 47D则在50、75和100μm o l/L CDP作用下,非甲基化特异性条带被扩增出。④在50μm o l/L CDP作用后,Huh-7和T 47D p 16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍然存在;Huh-7非甲基化特异性条带自12 h出现并持续到144 h,而T 47D非甲基化特异性条带72 h出现并持续到144 h。结论中药成分CDP可以抑制肿瘤细胞的生长并可以逆转高甲基化的p 16基因,具有开发并成为抗肿瘤药物的潜在价值。 展开更多
关键词 中药成分 CDP p16 去甲基化 Huh-7 T47D
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淫羊藿苷和淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响 被引量:16
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作者 王洁 陈花 +3 位作者 买迪娜 马海蓉 王振华 李一 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1470-1475,共6页
目的研究淫羊藿苷及淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探讨雌激素受体(ER)与其作用机制的关系。方法用不同浓度的淫羊藿苷和淫羊藿素处理雌激素受体呈阳性的乳腺癌T47D细胞系后,MTT法检测T47D细胞增殖,流式细胞术检测T47D细胞周期的... 目的研究淫羊藿苷及淫羊藿素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探讨雌激素受体(ER)与其作用机制的关系。方法用不同浓度的淫羊藿苷和淫羊藿素处理雌激素受体呈阳性的乳腺癌T47D细胞系后,MTT法检测T47D细胞增殖,流式细胞术检测T47D细胞周期的变化,Western blotting法检测T47D细胞ERα和ERβ蛋白表达。结果淫羊藿苷和淫羊藿素浓度为1×10 9~1×10 6mol/L,能显著促进T47D细胞增殖,且该作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780(1×10 6mol/L)所拮抗。与对照组相比,淫羊藿苷和淫羊藿素1×10 7mol/L使S期T47D细胞比例明显增加,增殖指数显著升高,但该作用可被ICI 182.780抑制。淫羊藿苷和淫羊藿素1×10 7mol/L还可显著增加ERα、ERβ蛋白表达(P<0.01)。结论淫羊藿苷和淫羊藿素均可显著促进T47D细胞增殖,该作用可能是通过上调胞内ERα、ERβ蛋白表达介导的。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 淫羊藿素 乳腺癌T47D细胞 细胞增殖 雌激素受体
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β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体表达及其下游基因PS2的影响 被引量:12
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作者 陶仕英 牛建昭 +4 位作者 赵丕文 郝庆秀 杨美娟 孙艳玲 张丽娟 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-167,174,共4页
目的:观察β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)及下游基因PS2的影响,探讨其植物雌激素样作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,应用实时荧光定量PCR技术检测ERα、ERβ及PS2mRNA表达变化,western-blot技术检... 目的:观察β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)及下游基因PS2的影响,探讨其植物雌激素样作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,应用实时荧光定量PCR技术检测ERα、ERβ及PS2mRNA表达变化,western-blot技术检测ERα、ERβ蛋白表达变化。结果:β-谷甾醇可诱导ERα、ERβ及PS2 mRNA表达,且上调ERβ更显著,对PS2 mRNA的诱导作用可以被ICI182 780抑制,能够上调ERα和ERβ蛋白表达,且可以被ICI182 780抑制。结论:β-谷甾醇可以通过ER途径调节下游靶基因的表达而发挥植物雌激素样作用。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 T47D PS2 雌激素受体 植物雌激素
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鼠尾草酚抗乳腺癌细胞增殖活性及其雌激素受体亚型介导和调节机制的研究 被引量:11
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作者 赵丕文 David Yue-Wei LEE +4 位作者 Zhongze Ma 孙艳玲 陶仕英 臧金凤 牛建昭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期3344-3348,共5页
既往研究已经表明,鼠尾草酚(carnoso1)具有一定的抗乳腺癌效应,但其ER亚型特异性调节和介导机制与该物质抑制细胞增殖效应的相关性尚不清楚。该研究利用雌激素受体(ER)阳性乳腺癌T47D细胞观察鼠尾草酚对细胞增殖活性的影响及其雌激素受... 既往研究已经表明,鼠尾草酚(carnoso1)具有一定的抗乳腺癌效应,但其ER亚型特异性调节和介导机制与该物质抑制细胞增殖效应的相关性尚不清楚。该研究利用雌激素受体(ER)阳性乳腺癌T47D细胞观察鼠尾草酚对细胞增殖活性的影响及其雌激素受体α,卢亚型特异性介导和调节机制。以ERα和ERβ特异性拮抗剂MPP,PHTPP为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察鼠尾草酚对T47D细胞增殖的影响;检测T47D细胞增殖周期的变化。利用Western blot方法检测鼠尾草酚对T47D细胞ERα和ERβ表达情况的影响。研究发现,1×10^(-5)~1×10^(-7)mol·L^(-1)鼠尾草酚能够显著抑制T47D细胞增殖,该抑制作用可被ERα拮抗剂MPP增强、被ERβ拮抗剂PHTPP减弱;1×10^(-1),1×10^(-6)mol·L^(-1)鼠尾草酚可使T47D细胞增殖指数显著下降。Western blot检测结果显示1×10^(-5),1×10^(-6)mol·L^(-1)鼠尾草酚可使T47D细胞ERα和ERβ蛋白表达显著增加,并可明显提高ERα/ERβ。结果表明鼠尾草酚具有抑制ER阳性乳腺癌细胞增殖的作用,其效应是通过靶细胞雌激素受体,特别是ERβ途径实现的;同时,鼠尾草酚对靶细胞雌激素受体ERα和ERβ亚型的表达及其比例具有调节功能。 展开更多
关键词 鼠尾草酚 乳腺癌 T47D细胞 细胞增殖 细胞周期 雌激素受体
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红豆杉提取物对乳腺癌T47D细胞生长与凋亡的影响 被引量:7
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作者 王健 陈荣昌 +3 位作者 孙桂波 杨骅力 张强 孙晓波 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期88-91,共4页
目的:探讨红豆杉提取物对乳腺癌T47D细胞生长与凋亡的影响。方法:以乳腺癌T47D细胞为研究对象,实验设空白组、不同质量浓度红豆杉提取物组(200,100,50,25 mg·L-1)和阿霉素组(3μmol·L-1),各给药组处理乳腺癌T47D细胞24 h,MTT... 目的:探讨红豆杉提取物对乳腺癌T47D细胞生长与凋亡的影响。方法:以乳腺癌T47D细胞为研究对象,实验设空白组、不同质量浓度红豆杉提取物组(200,100,50,25 mg·L-1)和阿霉素组(3μmol·L-1),各给药组处理乳腺癌T47D细胞24 h,MTT法检测T47D细胞增殖,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及半胱天冬酶-3(Caspase-3)活性,Hoest33342荧光染色检测细胞凋亡,Western blot法检测T47D细胞凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2,Caspase-3的表达。结果:与空白组比较,红豆杉提取物明显抑制乳腺癌T47D细胞的增殖,增加LDH及Caspase-3活性,诱导细胞凋亡及上调促凋亡蛋白Bax的水平,下调抗凋亡蛋白Bcl-2水平,均具有明显的统计学差异(P<0.05,P<0.01),且具有浓度依赖性。结论:红豆杉提取物对乳腺癌细胞T47D增殖具有直接抑制作用,并且具有浓度依赖性,其作用机制与促进细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 红豆杉提取物 乳腺癌 T47D 细胞增殖 凋亡
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人参皂苷-Rh_2对人乳腺癌T47D细胞的生长抑制作用及对Caspase-3表达的影响 被引量:8
12
作者 朱君荣 孙建国 +4 位作者 谢海棠 娄晟 陶宜富 肖大伟 王广基 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期630-634,共5页
目的:研究人参皂苷-Rh2(GS-Rh2)对雌激素依赖性人乳腺癌T47D细胞增殖和凋亡的影响,并对可能引起凋亡的机制做一初步探索。方法:采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的T47D细胞生长的抑制作用;用光学显微镜观察T47D细胞用药前后的形态学变... 目的:研究人参皂苷-Rh2(GS-Rh2)对雌激素依赖性人乳腺癌T47D细胞增殖和凋亡的影响,并对可能引起凋亡的机制做一初步探索。方法:采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的T47D细胞生长的抑制作用;用光学显微镜观察T47D细胞用药前后的形态学变化;应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化以及Caspase-3表达的变化。结果:MTT比色法测定结果显示,T47D细胞经GS-Rh2作用后生长受抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)为21.6μg/mL;光学显微镜显示T47D细胞经GS-Rh2作用后呈较明显的凋亡形态学改变;流式细胞仪检测证实,GS-Rh2能在一定浓度范围内诱导T47D细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G1期,并使Caspase-3表达增加。结论:GS-Rh2能抑制体外培养的T47D细胞增殖并诱导其凋亡。Caspase-3表达增加可能是GS-Rh2诱导T47D细胞凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 人参皂苷-Rh2 T47D细胞 生长抑制 细胞 凋亡 CASPASE-3
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黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳腺癌T47D细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响 被引量:7
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作者 陈雪莲 姜浩 +2 位作者 曹建国 尹婵 肖集文 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第3期432-435,共4页
目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人乳腺癌(T47D)细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响。方法:体外培养T47D细胞,溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成的抑制作用;平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖生长能力的抑制作用;人乳腺... 目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人乳腺癌(T47D)细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响。方法:体外培养T47D细胞,溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成的抑制作用;平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖生长能力的抑制作用;人乳腺癌T47D裸鼠移植瘤模型治疗实验,观察EVn-50在体内对T47D细胞生长抑制作用,HE染色观察乳腺癌组织和细胞形态改变。结果:EVn-50抑制体外培养T47D细胞核酸合成和生长,呈剂量依赖性;EVn-50对裸鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用,呈剂量和时间依赖性;EVn-5080mg/kg实验组对移植瘤的瘤重抑制率为51.4%(P<0.001);镜下观察EVn-5080mg/kg实验组肿瘤组织坏死组织较多,细胞异型性较少。结论:黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳腺癌有生长抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 T47D细胞 黄荆子 移植瘤
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中药成分CDP对乳腺癌细胞P16,E-CADHERIN去甲基化作用的研究 被引量:6
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作者 柴新娟 栾菊 +3 位作者 杨文理 张迎春 葛亚俊 覃扬 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期798-802,共5页
目的探讨中药成分CDP对乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435的抑癌基因P16和E-CADHERIN启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法培养人乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435,分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytidine(5-aza-C)处理细胞;用甲... 目的探讨中药成分CDP对乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435的抑癌基因P16和E-CADHERIN启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法培养人乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435,分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytidine(5-aza-C)处理细胞;用甲基化特异性PCR(MSP)和半定量RT-PCR,检测细胞中P16和E-CADHERIN基因的甲基化改变和RNA表达恢复情况。结果①在25、50、75和100μmol/L剂量的CDP持续作用6d后,T47D细胞P16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带减弱,在100μmol/L剂量时消失,在4个剂量CDP作用下,非甲基化特异性条带均重新出现;在75和100μmol/L浓度作用下时,T47D细胞中出现P16基因重新表达;②在50μmol/LCDP作用144h后,T47DP16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍存在;非甲基化特异性条带24h出现并持续到144h;在药物作用144h时,P16出现表达。③在MDA-MB-435细胞中,用不同剂量CDP处理或同一剂量CDP处理不同时间后,均未观察到E-CADHERIN非甲基化条带的出现,RT-PCR也未检测到E-CADHERIN基因的表达。结论在T47D细胞中,中药成分CDP可以剂量、时间依赖的形式逆转高甲基化的P16基因,而对MDA-MB-435细胞中高甲基化的E-CADHERIN基因无效,提示CDP药物存在靶分子反应多样性。 展开更多
关键词 中药成分CDP P16 E-CADHERIN 去甲基化 T47D MDA—MB-435
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白花蛇舌草醇提取物对乳腺癌T-47D细胞株生长的抑制作用 被引量:6
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作者 张志伟 李瑜 +3 位作者 陈雪莲 尹婵 英智 曹建国 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第13期2436-2439,共4页
目的:观察白花蛇舌草醇提取物对乳腺癌细胞T-47D生长的影响。方法:采用平皿克隆形成实验、软琼脂集落形成实验和BrdUrd(溴脱氧尿苷)掺入实验,观察不同浓度的白花蛇舌草醇提取物(1.0μg/mL,3.0μg/mL,10μg/mL,30μg/mL,100μg/mL)对T-47... 目的:观察白花蛇舌草醇提取物对乳腺癌细胞T-47D生长的影响。方法:采用平皿克隆形成实验、软琼脂集落形成实验和BrdUrd(溴脱氧尿苷)掺入实验,观察不同浓度的白花蛇舌草醇提取物(1.0μg/mL,3.0μg/mL,10μg/mL,30μg/mL,100μg/mL)对T-47D细胞锚定依赖性生长和软琼脂集落形成能力及核酸合成的抑制作用。结果:①随着白花蛇舌草醇提取物浓度的升高,对T-47D细胞的生长呈现明显抑制作用;②白花蛇舌草醇提取物可呈浓度依赖性抑制对数生长期T-47D细胞核酸合成。结论:白花蛇舌草醇提取物可能通过影响肿瘤细胞核酸合成而抑制T-47D细胞生长。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 乳腺癌细胞T-47D 生长抑制
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四物汤治疗更年期综合征的作用机制研究 被引量:17
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作者 陈悦 冯放 +3 位作者 裴育莹 俞舒丹 梁叶莺 赵丕文 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第8期799-801,804,共4页
目的观察四物汤对更年期模型SD大鼠的作用并探讨发挥作用的可能靶点和机制。方法将正常SD雌性大鼠40只按体质量均衡和随机的原则分为正常组、模型组、四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组。除正常组外,其余组均切除两侧卵... 目的观察四物汤对更年期模型SD大鼠的作用并探讨发挥作用的可能靶点和机制。方法将正常SD雌性大鼠40只按体质量均衡和随机的原则分为正常组、模型组、四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组。除正常组外,其余组均切除两侧卵巢造模。手术2周后,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组分别给予3,6,9 g/(kg·d)四物汤灌胃,均1次/d,持续6 d。第7天腹主动脉取血并分离血清,分离子宫并称质量,免疫组化法测定子宫组织雌激素受体ERα表达量;蛋白质免疫印记技术检测药物血清对T47D细胞雌激素受体ERα表达的影响。结果正常组大鼠的子宫系数与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组的子宫系数与模型组比较差异均有统计学意义,且随着四物汤方剂浓度的升高,子宫系数有增大的趋势;大鼠子宫组织ERα表达模型组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),四物汤中剂量组和高剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);四物汤低、中剂量组的含药血清能够明显提高T47D细胞ERα的表达水平(P均<0.01)。结论四物汤对更年期综合征有很好的治疗作用,并可提高靶细胞ERα的表达水平。 展开更多
关键词 四物汤 更年期综合征 子宫系数 T47D细胞 ERΑ
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刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响 被引量:9
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作者 司玲玲 马俊 +3 位作者 任欢欢 任博雪 李德芳 郑秋生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期260-267,共8页
目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67... 目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67)mRNA表达,Western blot法检测ERα、ERβ蛋白表达。结果刺槐素浓度为0.001~10μmol·L^(-1),能促进T47D细胞增殖,使S和G_2/M期的细胞比例明显增加,增殖指数升高,同时增加Ki67 mRNA的表达,此作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780所拮抗。刺槐素及17β-雌二醇(E2)均可上调ERα和ERβ的表达,刺槐素联合ERα受体拮抗剂(MPP)可逆转刺槐素的促增殖作用,使S和G_2/M期的细胞比例明显降低,减少Ki67mRNA的表达;但刺槐素联合ERβ受体拮抗剂(PHTPP)处理虽可抑制细胞增殖效应,使S和G_2/M期的细胞比例降低,减少Ki67 mRNA的表达,但作用不明显。结论刺槐素具有雌激素样作用,在0.001~10μmol·L^(-1)浓度范围内,可通过调节ERα受体表达来促进T47D细胞的增殖。 展开更多
关键词 刺槐素 雌激素 T47D细胞 雌激素Α受体 雌激素Β受体 雌激素样作用 细胞增殖
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丹参酮ⅡA抗乳腺癌T47D细胞增殖的GPER途径研究 被引量:13
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作者 赵丕文 臧金凤 +2 位作者 陶仕英 陈梦 牛建昭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1458-1462,共5页
目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPE... 目的利用经典雌激素受体(estrogenic receptor,ER)和G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER)阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA(TanshinoneIIA)对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用GPERSiRNA转染构建GPER基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮IIA对T47D细胞增殖速率的影响及GPER的介导作用.利用Westernblot方法检测丹参酮IIA对T47D细胞GPER表达情况的影响.结果1×10^-5 mol·L^-1 ~1×10^-7 mol·L^-1丹参酮IIA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强.丹参酮IIA作用于GPER基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应.West-ernblot测定结果表明,1×10^-5 mol·L^-1和1×10^-6 mol·L^-1丹参酮IIA可使T47D细胞GPER蛋白表达明显降低.结论丹参酮IIA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导;且丹参酮IIA具有对靶细胞GPER表达的调节功能. 展开更多
关键词 丹参酮IIA 乳腺癌 T47D细胞 细胞增殖 G蛋白偶联雌激素受体 雌激素受体 基因沉默
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淫羊藿苷衍生物的制备及其雌激素样作用研究 被引量:42
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作者 叶海涌 刘健 楼宜嘉 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第2期131-136,共6页
目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)及其衍生物淫羊藿素(icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(desmethyli-caritin,DICT)的雌激素样作用及其相关的构效关系。方法ICA经纤维素酶水解成ICT,进一步在BBr3和CH2Cl2的体系中反应生成DICT;用不同浓度的化... 目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)及其衍生物淫羊藿素(icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(desmethyli-caritin,DICT)的雌激素样作用及其相关的构效关系。方法ICA经纤维素酶水解成ICT,进一步在BBr3和CH2Cl2的体系中反应生成DICT;用不同浓度的化合物与雌激素敏感性人乳腺癌细胞株MCF-7和T47D分别共培养6d和9d,MTT法检测其对细胞的促增殖率,以此评价化合物雌激素样作用的强弱。结果ICT、DICT促细胞增殖作用显著,10-6mol/L浓度时促MCF-7细胞增殖作用分别是雌二醇(10-9mol/L)的90.0%和94.0%(P<0.01);促T47D细胞增殖作用分别是雌二醇的65.6%,50.0%(P<0.01)。ICA未呈现促MCF-7细胞和T47D细胞增殖作用。ICT、DICT的促细胞增殖作用被10-7mol/L雌激素受体完全拮抗剂ICI182、780完全抑制。结论ICT和DICT具有促MCF-7细胞和T47D细胞增殖的雌激素样作用,而ICA未体现该作用。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 淫羊藿素 去甲淫羊藿素 MCF-7细胞 T47D细胞 植物雌激素
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金雀异黄素的抗雌激素效应 被引量:9
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作者 余增丽 张立实 吴德生 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期125-127,共3页
应用雌激素耗尽的方法诱导乳腺癌细胞株MCF - 7和T47D发生凋亡 ,从而探讨金雀异黄素(genistein ,GS)对凋亡的影响作用。结果表明 ,同抗雌激素药物它莫西芬类似 ,3 2× 10 - 6 mol L及 96× 10 - 6 mol LGS可加剧雌激素耗尽所诱... 应用雌激素耗尽的方法诱导乳腺癌细胞株MCF - 7和T47D发生凋亡 ,从而探讨金雀异黄素(genistein ,GS)对凋亡的影响作用。结果表明 ,同抗雌激素药物它莫西芬类似 ,3 2× 10 - 6 mol L及 96× 10 - 6 mol LGS可加剧雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用 ,且这种效应存在着良好的剂量 -效应关系。 展开更多
关键词 金雀异黄素 乳腺癌细胞株MCF-7 乳腺癌细胞株T47D 细胞凋亡
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