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Overexpression of cytoglobin gene inhibits hypoxic injury to SH-SY5Y neuroblastoma cells 被引量:3
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作者 Xiuling Yu Dianwen Gao 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第23期2198-2203,共6页
A plasmid for cytoglobin expression, pAcGFP1-Cl-cytoglobin, was transfected into SH-SY5Y cells. Cobalt chloride was used to establish a model of hypoxia. Western blotting indicated that cytoglobin was overexpressed an... A plasmid for cytoglobin expression, pAcGFP1-Cl-cytoglobin, was transfected into SH-SY5Y cells. Cobalt chloride was used to establish a model of hypoxia. Western blotting indicated that cytoglobin was overexpressed and there was low expression of hypoxia-inducible factor-la in SH-SY5Y cells after transfection. Following cobalt chloride-induced hypoxia, cytoglobin and hypoxia-inducible fac- tor-la expression gradually increased in SH-SY5Y cells. Flow cytometry showed that with increas- ing duration of hypoxia, the proportion of normal cells significantly diminished in the transfected and non-transfected groups. The proportion of cells in the early stages of apoptosis increased. However, the proportion of apoptotic cells was significantly lower in the transfected group compared with the non-transfected group. These results demonstrate that cytoglobin and hypoxia-inducible factor-la are strongly up-regulated by hypoxia, and that there is a strong relationship between hy- poxia-inducible factor-la and cytoglobin during hypoxic injury. 展开更多
关键词 neural regeneration cytoglobin hypoxia green fluorescent protein TRANSFECTION SH-SY5Y cells cobalt chloride recombinant plasmid NEUROPROTECTION NEUROREGENERATION
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TAT-Cytoglobin融合蛋白的原核表达、纯化及生物活性分析 被引量:1
2
作者 张如婧 李招发 +1 位作者 施伟杰 许瑞安 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1247-1255,共9页
旨在利用细胞穿膜肽TAT的穿膜作用和细胞珠蛋白(Cytoglobin,Cygb)的抗衰老、抗纤维化的功能,将二者通过基因工程的手段融合在一起,以期获得能够穿透细胞屏障的Cygb。通过两次重叠PCR技术获得了TAT-Cygb DNA,将其插入原核表达载体pET22b... 旨在利用细胞穿膜肽TAT的穿膜作用和细胞珠蛋白(Cytoglobin,Cygb)的抗衰老、抗纤维化的功能,将二者通过基因工程的手段融合在一起,以期获得能够穿透细胞屏障的Cygb。通过两次重叠PCR技术获得了TAT-Cygb DNA,将其插入原核表达载体pET22b质粒中,转化至大肠杆菌BL-21,筛选出可表达TAT-Cygb融合蛋白的大肠杆菌工程菌株。经乳糖诱导表达TAT-Cygb,CM阳离子交换层析(CM Sepharose Fast Flow Protocol)获得纯度高达95%的TAT-Cygb融合蛋白,分子量约23 kDa。生物活性实验显示,TAT-Cygb过氧化物酶比活力达到(422.30±0.36)U/mg。TAT-Cygb预处理的Hacat细胞可免受H2O2氧化应激的损伤(RGR=100%),同时TAT-Cygb可治疗已被H2O2氧化损伤的细胞(RGR=98%),与Cygb处理组相比具有显著差异(RGR=79%)。该研究首次成功利用大肠杆菌表达系统表达了可穿透细胞膜的、有生物活性的TAT-Cygb融合蛋白,为继续开展Cygb在抗衰老、抗纤维化和抗癌领域的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞穿膜肽 细胞珠蛋白 融合蛋白 纯化 氧化应激
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稳定表达Cytoglobin的肝细胞株LO-2的建立及生长增殖的变化 被引量:1
3
作者 王哲彦 陈柏洪 +3 位作者 续艳梅 刘诗俐 张梓荣 董文其 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期70-78,共9页
目的:建立过表达细胞珠蛋白Cytoglobin(CYGB)的人肝细胞LO-2稳定株,初步探究CYGB对LO-2细胞生长增殖的影响.方法:采用PCR法扩增CYGB编码基因,并通过GATEWAY克隆技术构建慢病毒重组表达载体Plenti-N-GFP-CYGB;酶切、测序鉴定后,与包装质... 目的:建立过表达细胞珠蛋白Cytoglobin(CYGB)的人肝细胞LO-2稳定株,初步探究CYGB对LO-2细胞生长增殖的影响.方法:采用PCR法扩增CYGB编码基因,并通过GATEWAY克隆技术构建慢病毒重组表达载体Plenti-N-GFP-CYGB;酶切、测序鉴定后,与包装质粒三质粒共转人肾上皮细胞(HEK293T),收集、浓缩含病毒上清,获得病毒颗粒;感染LO-2细胞并采用流式细胞分选技术筛选稳定细胞株,Western blot检测表达情况;使用CCK-8试剂盒检测过表达CYGB对LO-2细胞增殖的影响,通过流式细胞技术检测过表达CYGB对LO-2细胞凋亡的影响.结果:慢病毒重组表达载体Plenti-N-GFP-CYGB双酶切鉴定以及基因序列比对鉴定均正确.三质粒共转HEK293T细胞后,荧光显微镜下观察大部分细胞出现绿色荧光;收集病毒颗粒并感染LO-2细胞后,经流式细胞分选技术筛选获得稳定表达CYGB的细胞,Western blot鉴定显示,LO-2稳定株组的CYGB表达条带明显,阴性对照组未出现条带.CCK-8法绘制的细胞生长曲线显示,稳定表达细胞组的细胞生长速率低于阴性对照组,有统计学差异(P<0.01).流式细胞技术检测各组LO-2细胞凋亡情况结果显示,稳定表达细胞组的细胞凋亡百分比高于阴性对照组(P<0.05).结论:成功构建慢病毒重组表达载体Plenti-N-GFP-CYGB;建立稳定表达CYGB的人肝细胞株LO-2-GFP-CYGB以及阴性对照组细胞株LO-2-GFP;稳定表达CYGB的肝细胞生长速率较阴性对照组肝细胞降低,稳定表达CYGB的肝细胞凋亡百分比高于阴性对照组肝细胞;为CYGB与其蛋白的相互关系研究提供了细胞模型. 展开更多
关键词 CYGB LO-2 慢病毒重组表达载体 稳定表达 细胞凋亡
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氧化应激相关调控蛋白Cygb抗纤维化作用的研究进展
4
作者 杨冬梨 李静 +3 位作者 段丽芳 张文将 李娜 张红 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第5期683-689,共7页
细胞珠蛋白(cytoglobin,Cygb)是近年来发现的一种星状细胞特异性珠蛋白,广泛存在于哺乳动物内脏器官(如肺、心脏、脾脏、肝、胰腺、胃、小肠、肾脏)及神经元和骨组织中,其在清除活性氧、一氧化氮与亚硝酸盐信号转导、减轻氧化应激、抗... 细胞珠蛋白(cytoglobin,Cygb)是近年来发现的一种星状细胞特异性珠蛋白,广泛存在于哺乳动物内脏器官(如肺、心脏、脾脏、肝、胰腺、胃、小肠、肾脏)及神经元和骨组织中,其在清除活性氧、一氧化氮与亚硝酸盐信号转导、减轻氧化应激、抗纤维化、调节细胞凋亡、防治癌症等方面发挥着重要作用。值得注意的是,近年来Cygb的抗纤维化作用引起了越来越多的关注,现有研究已经涉及肝、胰腺、肾、脾等多种纤维化疾病,特别是在肝纤维化研究方面取得了显著进展。本文系统综述了Cygb在各纤维化疾病中的作用,重点探讨了其减轻氧化应激的机制。虽然Cygb在纤维化疾病中的应用还处于起步阶段,其背后涉及的机制仍需大量研究进行探索,但无疑Cygb可作为一个有前景的治疗靶标,有望广泛应用于纤维化疾病的预防和治疗。 展开更多
关键词 细胞珠蛋白 氧化应激 纤维化
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牦牛CYGB基因CDS区克隆与生物信息学分析 被引量:27
5
作者 孙雪婧 杜晓华 +2 位作者 杨孝朴 罗玉柱 刘霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期2690-2698,共9页
【目的】丰富牦牛CYGB基因研究的基础数据,对牦牛CYGB基因的CDS区进行克隆和生物信息学分析。【方法】提取牦牛大脑海马区组织的总RNA并运用RT-PCR技术反转录为cDNA,并根据GenBank中普通牛CYGB基因cDNA序列(GenBank登录号:DV874786.1),... 【目的】丰富牦牛CYGB基因研究的基础数据,对牦牛CYGB基因的CDS区进行克隆和生物信息学分析。【方法】提取牦牛大脑海马区组织的总RNA并运用RT-PCR技术反转录为cDNA,并根据GenBank中普通牛CYGB基因cDNA序列(GenBank登录号:DV874786.1),使用Primer3.0在线软件设计特异性引物,运用PCR扩增技术、TA克隆技术和核酸测序技术获得CYGB基因的完整CDS区序列及部分5′端和3′端UTR区,并使用ProtParam、PredictProtein、SWISS-MODEL等在线分析软件与Lasergene7.1软件包分析CYGB的一级结构、二级结构、三级结构与理化性质,并进行同源性分析及构建系统进化树;利用PyMol软件修饰并输出三维结构;使用在线亚细胞定位工具PSORT II Prediction预测蛋白质的亚细胞定位;使用Protfun软件对蛋白质的功能进行预测分析。【结果】克隆获得牦牛CYGB基因650 bp,包括CDS区573 bp(GenBank登录号:KF669898),碱基组成为A 20.59%、T 16.40%、G 33.33%、C 29.67%,编码190个氨基酸残基组成的蛋白质。与普通牛比对,牦牛CYGB基因在CDS区存在4个碱基突变,同源性为99.3%,这个突变未导致氨基酸序列的改变,4个突变均属同义突变。牦牛CYGB基因编码蛋白的分子式为C964H1513N263O278S7,分子量约为21.5 kD,理论等电点(pI)为6.32,消光系数为24075,不稳定系数为48.43,疏水指数为83.63,平均亲水性为-0.301,属不稳定可溶性酸性蛋白质,在哺乳动物网织红细胞内的半衰期为30 h。二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,其中α-螺旋占64.21%,无规卷曲占35.79%,属全α类蛋白质。三级结构是一个呈"three-over-three"三明治夹心型的α-螺旋折叠结构。亚细胞定位CYGB分布在细胞质(65.2%)、细胞核(17.4%)、线粒体(13.0%)、分泌系统的囊泡(4.3%)中,主要在细胞质,推测可能在能量代谢和辅因子的生物合成过程中发挥信号转导和转录因子调控的作用。牦牛CYGB氨基酸序列与普通牛、绵羊、家犬、小鼠、褐家鼠、原鸡、猴、黑猩猩、人的CYGB氨基酸序列的同源性分别为100%、98.9%、97.8%、95.3%、93.7%、78.8%、98.4%、95.8%和96.8%,物种之间同源性较高,系统进化情况与其亲缘关系远近一致,说明CYGB基因编码区在进化过程中比较保守。【结论】通过RT-PCR与TA克隆技术及核酸测序技术获得了牦牛CYGB基因全长573 bp的CDS区,并对其核苷酸序列和编码蛋白氨基酸序列及其蛋白结构和功能进行了分析,得知牦牛的CYGB是一个由190个氨基酸残基构成的可溶酸性蛋白质,在能量代谢和辅因子生物合成过程中发挥重要作用。CYGB基因编码区在长期生物进化过程中具有较强的保守性。该基因的成功克隆及分析为揭示牦牛CYGB基因的遗传特性提供了理论依据。 展开更多
关键词 牦牛 胞红蛋白 基因克隆 生物信息学
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细胞珠蛋白对肝星状细胞氧化损伤的保护作用 被引量:5
6
作者 吕颖慧 王启钊 +2 位作者 李招发 刁勇 许瑞安 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1174-1182,共9页
为揭示细胞珠蛋白对肝星状细胞氧化损伤的保护作用及相关机制,通过siRNA干扰内源性细胞珠蛋白基因,利用重组细胞珠蛋白作用于完全活化的人肝星状细胞系LX-2及大鼠原代肝星状细胞,并在LX-2细胞内过表达细胞珠蛋白,考察在过氧化氢及铁过... 为揭示细胞珠蛋白对肝星状细胞氧化损伤的保护作用及相关机制,通过siRNA干扰内源性细胞珠蛋白基因,利用重组细胞珠蛋白作用于完全活化的人肝星状细胞系LX-2及大鼠原代肝星状细胞,并在LX-2细胞内过表达细胞珠蛋白,考察在过氧化氢及铁过载两种不同作用机制的氧化反应模型中细胞的增殖性及细胞内超氧化物水平。结果表明内源性细胞珠蛋白对于两种氧化反应导致的肝星状细胞损伤都具有显著性的保护作用,证明其在活化肝星状细胞内的表达上调是其应对氧化应激的保护性措施;重组细胞珠蛋白不仅能保护完全活化的LX-2细胞免受氧化应激损伤,并且能抑制未完全活化的原代肝星状细胞过度增殖以及保护其被过度损伤;重组细胞珠蛋白对细胞内的活性氧清除效果不理想,可能与其进出细胞缺乏相应的主动运输机制有关。进一步在LX-2细胞内过表达细胞珠蛋白对无论是铁过载或是过氧化氢引起的氧化反应均能发挥较好的保护性作用。本研究为加速肝纤维化药物新靶点开发提供了理论依据。 展开更多
关键词 细胞珠蛋白 肝星状细胞 过氧化氢 铁过载 肝纤维化
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珠蛋白研究进展及其在法医学中的应用 被引量:6
7
作者 秦豪杰 武娜 +1 位作者 张录顺 官鹏 《中国法医学杂志》 CSCD 2008年第4期250-252,共3页
珠蛋白是一类能够通过铁卟啉环可逆性结合氧的呼吸性蛋白质,目前在脊椎动物体内已有4种类型的珠蛋白被鉴定和正式命名:血红蛋白(haemoglobin,Hb),肌红蛋白(myoglobin,Mb),脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和细胞珠蛋白(cytoglobin,Cygb),它们... 珠蛋白是一类能够通过铁卟啉环可逆性结合氧的呼吸性蛋白质,目前在脊椎动物体内已有4种类型的珠蛋白被鉴定和正式命名:血红蛋白(haemoglobin,Hb),肌红蛋白(myoglobin,Mb),脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和细胞珠蛋白(cytoglobin,Cygb),它们共同组成珠蛋白超家族(globin superfamily)。本文就珠蛋白的组织分布、结构特征、生物学功能及其在法医学中的应用等作一综述。 展开更多
关键词 法医病理学 珠蛋白 脑红蛋白 细胞珠蛋白
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圆二色光谱法研究环境因素对细胞红蛋白二级结构的影响 被引量:4
8
作者 田素燕 李连之 +3 位作者 高磊 穆建帅 刘晓燕 谭相石 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1097-1101,共5页
采用远紫外圆二色光谱法系统地研究了细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)的浓度、环境温度、溶液的pH值和溶剂性质对细胞红蛋白二级结构的影响。结果表明:当Cygb浓度<1μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,其α-螺旋含量>60%;当Cygb浓度... 采用远紫外圆二色光谱法系统地研究了细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)的浓度、环境温度、溶液的pH值和溶剂性质对细胞红蛋白二级结构的影响。结果表明:当Cygb浓度<1μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,其α-螺旋含量>60%;当Cygb浓度从0.3μmol/L增大到2.0μmol/L时,其α-螺旋含量迅速降低;当Cygb浓度>2.0μmol/L时,其α-螺旋含量随浓度的增大变化很小(约30%)。随着温度的升高,Cygb的α-螺旋含量逐渐减小,但既使温度达到368K,它仍保持有20%的α-螺旋结构,说明该蛋白具有较高的热稳定性。在弱酸性和弱碱性溶液中,Cygb的二级结构都会有不同程度的破坏。在甲醇和乙醇中,Cygb的α-螺旋含量明显增加,这说明醇类可以诱导其α-螺旋的生成。 展开更多
关键词 细胞红蛋白 圆二色光谱 二级结构 Α-螺旋
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聚乙二醇修饰重组细胞珠蛋白对小鼠急性肝损伤的保护作用 被引量:4
9
作者 李招发 邓小英 +1 位作者 许佳佳 连文昌 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1227-1235,共9页
旨在探究聚乙二醇修饰重组细胞珠蛋白(PEG modified recombinant cytoglobin,PEG-rCygb)对小鼠急性肝损伤的保护作用。采用CCl4诱导KM小鼠急性肝损伤模型,尾静脉注射PEG-rCygb,收集血清及肝脏组织检测各项生化指标及组织病理学变化。结... 旨在探究聚乙二醇修饰重组细胞珠蛋白(PEG modified recombinant cytoglobin,PEG-rCygb)对小鼠急性肝损伤的保护作用。采用CCl4诱导KM小鼠急性肝损伤模型,尾静脉注射PEG-rCygb,收集血清及肝脏组织检测各项生化指标及组织病理学变化。结果表明,PEG-rCygb治疗组小鼠肝脏系数减小,血清中AST﹑ALT水平降低,肝组织匀浆中MDA含量减少,GSH含量增加,T-SOD、CAT活性升高。肝组织切片HE染色显示PEG-rCygb可以缓解肝细胞脂肪变性,减少炎症因子,减轻肝细胞损伤。体外细胞学实验表明rCygb经PEG修饰后对H2O2造成的肝星状细胞(HSC)氧化损伤发挥的保护作用增强。研究结果显示PEG-rCygb提高了机体对自由基的清除能力,对CCl4引起的小鼠急性肝损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 聚乙二醇 重组细胞珠蛋白 氧化应激 急性肝损伤 氧自由基
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培养心肌细胞缺氧时胞红蛋白表达变化特点 被引量:3
10
作者 黄缄 高文祥 +2 位作者 廖卫公 陈建 高钰琪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1935-1938,共4页
目的探讨心肌细胞缺氧后胞红蛋白表达变化的特点与规律。方法利用酶消化法及差速贴壁法分离培养新生2—3d大鼠的心肌细胞,分为4组:对照组,缺氧4、12、24h组。对照组置常规培养箱(5%CO,、95%空气,37℃)中培养,缺氧组置缺氧培... 目的探讨心肌细胞缺氧后胞红蛋白表达变化的特点与规律。方法利用酶消化法及差速贴壁法分离培养新生2—3d大鼠的心肌细胞,分为4组:对照组,缺氧4、12、24h组。对照组置常规培养箱(5%CO,、95%空气,37℃)中培养,缺氧组置缺氧培养箱中培养(2%O2,5%CO2,93%N2,37℃),于不同时间(4、12、24h)后,取心肌细胞进行免疫组化染色和免疫印迹分析蛋白水平的分布与表达的变化,用逆转录PCR法分析胞红蛋白mRNA水平的变化。结果免疫组织化学染色显示胞红蛋白主要分布于细胞质,缺氧各组胞红蛋白染色强度均高于常氧组(对照组)。免疫印迹灰度分析结果显示,缺氧4h组胞红蛋白表达量高于常氧组,但差异无统计学意义(P〉0.05),而缺氧12、24h组胞红蛋白表达高于常氧组,差异有统计学意义(P〈0.05)。缺氧4、12、24h组胞红蛋白mRNA水平均高于常氧组(P〈0.05),缺氧12、24h组较缺氧4h组更进一步增高(P〈0.05)。结论胞红蛋白分布于心肌细胞的细胞质。培养心肌细胞缺氧4h后胞红蛋白转录增强,缺氧12h后蛋白水平增强。胞红蛋白表达增加可能是心肌细胞对缺氧的一种代偿反应。 展开更多
关键词 胞红蛋白/组红蛋白 缺氧 心肌细胞
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光谱法研究人胞红蛋白与铜(Ⅱ)离子的相互作用(英文) 被引量:2
11
作者 李景红 边琳 +2 位作者 田素燕 孔金明 李连之 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期321-326,共6页
胞红蛋白(Cygb)是近期在脊椎动物中发现的一种球蛋白家族成员,具有典型珠蛋白的"3+3"式的α-螺旋三明治折叠结构。利用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(CD)光谱法研究了Cu^(2+)离子与Cygb的相互作用。结果... 胞红蛋白(Cygb)是近期在脊椎动物中发现的一种球蛋白家族成员,具有典型珠蛋白的"3+3"式的α-螺旋三明治折叠结构。利用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(CD)光谱法研究了Cu^(2+)离子与Cygb的相互作用。结果表明,当Cu^(2+)离子加入到Cygb溶液中后,Cygb在280nm处的紫外吸收强度增大,说明Cu^(2+)与Cygb发生了相互作用;Cu^(2+)使Cygb的内源性荧光发生猝灭,其猝灭方式为静态猝灭。同步荧光光谱研究表明,Cu^(2+)可使色氨酸和酪氨酸的微环境发生较小的改变,与酪氨酸相比Cu^(2+)对Cygb的键合部位更接近于色氨酸。圆二色光谱研究表明,Cu^(2+)对Cygb的二级结构未引起明显变化。 展开更多
关键词 胞红蛋白 铜(Ⅱ)离子 荧光光谱 荧光猝灭
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重组人细胞红蛋白的表达纯化及谱学表征 被引量:2
12
作者 田素燕 李连之 +2 位作者 李海丽 薛泽春 杜为红 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期483-488,共6页
以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白,并比较了其谱学特征和热稳定性.可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀,再依次经Hiprep 16/10 Q FF阴离子交换柱、Hiload16/60 Superdex75凝胶过滤柱和CM Sepharose FF阳离子交换柱纯化,... 以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白,并比较了其谱学特征和热稳定性.可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀,再依次经Hiprep 16/10 Q FF阴离子交换柱、Hiload16/60 Superdex75凝胶过滤柱和CM Sepharose FF阳离子交换柱纯化,得到电泳纯的包涵体蛋白;包涵体蛋白经盐酸胍变性溶解、外加血红素重组和柱层析得到了电泳纯的可溶性蛋白.电喷雾质谱表明,以这两种形式得到的蛋白分子量相差153.0,紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱均表明,这两种形式的蛋白在血红素构象上存在差异,其热稳定性也不相同. 展开更多
关键词 细胞红蛋白 分离纯化 谱学表征 稳定性
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大鼠皮肤切创愈合过程中Cygb及HIF-1α mRNA的表达 被引量:2
13
作者 秦豪杰 陈宝生 +2 位作者 徐国辉 潘新民 莫耀南 《中国法医学杂志》 CSCD 2013年第1期8-10,共3页
目的探讨皮肤切创愈合过程中Cygb及HIF-1αmRNA表达的相关性及时间变化规律。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为9个实验组和1个正常对照组,建立大鼠皮肤全层切创模型,实验组分别于术后0、1、3、6、12、24、48、72、96h脱颈处死大鼠,提取... 目的探讨皮肤切创愈合过程中Cygb及HIF-1αmRNA表达的相关性及时间变化规律。方法 60只健康雄性SD大鼠随机分为9个实验组和1个正常对照组,建立大鼠皮肤全层切创模型,实验组分别于术后0、1、3、6、12、24、48、72、96h脱颈处死大鼠,提取创周皮肤总RNA,采用实时荧光定量PCR技术检测Cygb及HIF-1αmRNA的表达,实验组与对照组及各组间进行比较分析。结果 Cygb与HIF-1αmRNA创伤后表达的总体变化趋势基本一致,均于伤后12h首次达峰,分别为对照组的1.6倍和5.4倍(P<0.05);随后下降,并分别于伤后48h、72h再次升高,至96h达对照组的2.8倍和5.6倍(P<0.05)。结论大鼠皮肤切创愈合过程中Cygb与HIF-1 mRNA的表达呈现时序性变化且有一定的相关性,可作为皮肤损伤时间推断的指标。 展开更多
关键词 法医病理学 细胞珠蛋白 HIF-1Α 切创 损伤时间推断
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胞红蛋白的结构功能与药理学活性研究进展 被引量:3
14
作者 贾晓健 张玉彬 吴梧桐 《药物生物技术》 CAS CSCD 2010年第3期268-272,共5页
胞红蛋白是珠蛋白家族的新成员,能够调节O2及NO的代谢、清除胞内活性氧自由基,在组织缺氧或氧化应激发生时能够维持细胞氧化还原平衡,起到良好的细胞保护作用,其在抗纤维化、抗肿瘤及其他疾病治疗方面已经显示出一定成药性。该文综合近... 胞红蛋白是珠蛋白家族的新成员,能够调节O2及NO的代谢、清除胞内活性氧自由基,在组织缺氧或氧化应激发生时能够维持细胞氧化还原平衡,起到良好的细胞保护作用,其在抗纤维化、抗肿瘤及其他疾病治疗方面已经显示出一定成药性。该文综合近年研究成果,总结了胞红蛋白结构、组织分布、表达调节、生理功能及其药理学活性等方面的研究进展。 展开更多
关键词 胞红蛋白 肝星状细胞激活相关蛋白 抗氧化 抗纤维化 抗肿瘤
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胞红蛋白对巨噬细胞氧化损伤的保护作用 被引量:2
15
作者 屈顺林 朱宇凝 +5 位作者 潘文军 李维 王宇菲 谢黎明 姜志胜 范文静 《中南医学科学杂志》 CAS 2016年第5期486-489,共4页
目的探讨CYGB在巨噬细胞氧化损伤过程中的表达及作用。方法构建CYGB高表达/低表达巨噬细胞模型,Western blot检测不同浓度H_2O_2刺激RAW264.7 12 h后CYGB的蛋白表达水平;用分光光度计观察RAW264.7在氧化损伤过程中乳酸脱氢酶(LDH)活性... 目的探讨CYGB在巨噬细胞氧化损伤过程中的表达及作用。方法构建CYGB高表达/低表达巨噬细胞模型,Western blot检测不同浓度H_2O_2刺激RAW264.7 12 h后CYGB的蛋白表达水平;用分光光度计观察RAW264.7在氧化损伤过程中乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量的变化情况。结果 0.5 mmol/L H_2O_2处理巨噬细胞12 h后CYGB表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);与0.5 mmol/L H_2O_2处理组相比,0.5 mmol/L H_2O_2对CYGB高表达组的CYGB表达升高(P<0.05),而0.5 mmol/L H_2O_2对CYGB低表达组的CYGB表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);0.5 mmol/L H_2O_2+CYGB高表达组中LDH活性和MDA含量下降;0.5 mmol/L H_2O_2+CYGB低表达组中LDH活性和MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论巨噬细胞氧化损伤时CYGB表达水平增加;CYGB在巨噬细胞氧化损伤过程中具有拮抗作用。 展开更多
关键词 巨噬细胞 氧化应激 胞红蛋白 过氧化氢
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新型缺氧保护因子胞红蛋白的研究进展 被引量:2
16
作者 李维 范文静 屈顺林 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第9期978-983,共6页
作为珠蛋白家族的第四名成员,胞红蛋白在缺氧条件下的表达明显增强。其在生物体内分布广泛,具有多种重要的生物学功能,如抗氧化应激、抗纤维化、神经保护作用以及在心血管疾病、癌症等和缺氧有关的疾病中起到一定的保护作用。文中综合... 作为珠蛋白家族的第四名成员,胞红蛋白在缺氧条件下的表达明显增强。其在生物体内分布广泛,具有多种重要的生物学功能,如抗氧化应激、抗纤维化、神经保护作用以及在心血管疾病、癌症等和缺氧有关的疾病中起到一定的保护作用。文中综合了近年来的研究成果,就胞红蛋白的结构与分布,抗纤维化、抗癌、促进肌肉再生等相关生理功能以及在缺氧下的表达调节和表达机制作一综述。 展开更多
关键词 胞红蛋白 生理功能 缺氧 表达机制
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藏羚羊脑组织胞红蛋白基因的表达 被引量:3
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作者 尹宏 白振忠 +2 位作者 靳国恩 杨应忠 格日力 《青海医学院学报》 CAS 2012年第1期47-50,共4页
目的检测藏羚羊不同脑区脑组织胞红蛋白(CGB)基因的表达状况。方法选取藏羚羊海马、丘脑、小脑、额叶、顶叶、枕叶、颞叶、中脑组织,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测CGB基因的表达、实时定量PCR相对定量比较CT法(2-△△CT法)分析结果。... 目的检测藏羚羊不同脑区脑组织胞红蛋白(CGB)基因的表达状况。方法选取藏羚羊海马、丘脑、小脑、额叶、顶叶、枕叶、颞叶、中脑组织,应用实时荧光定量RT-PCR技术检测CGB基因的表达、实时定量PCR相对定量比较CT法(2-△△CT法)分析结果。结果藏羚羊脑海马、丘脑、小脑、额叶、顶叶、枕叶、颞叶、中脑组织CGB基因的2-△△CT值分别为0.00、1.78、1.00、1.30、1.19、1.21、4.08、7.41。结论藏羚羊不同脑区脑组织CGB基因均有表达。藏羚羊脑组织CGB基因相对表达量由高到低依次为中脑、颞叶、丘脑、额叶、枕叶、顶叶、小脑和海马。 展开更多
关键词 藏羚羊 胞红蛋白基因 实时荧光定量 聚合酶链式反应
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胞红蛋白酵母双杂交载体的构建与表达 被引量:1
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作者 李谋 刘小林 张成岗 《生物技术通讯》 CAS 2005年第6期615-617,共3页
胞红蛋白(CGB)是一种新发现的分布于胞浆与胞核的携氧珠蛋白。为探讨CGB在体内的相互作用蛋白,从而促进对其分子调控网络的认识,根据CGB基因的开放阅读框架设计并合成PCR引物,从人胎肝cDNA文库中扩增得到该基因编码区。测序分析正确后... 胞红蛋白(CGB)是一种新发现的分布于胞浆与胞核的携氧珠蛋白。为探讨CGB在体内的相互作用蛋白,从而促进对其分子调控网络的认识,根据CGB基因的开放阅读框架设计并合成PCR引物,从人胎肝cDNA文库中扩增得到该基因编码区。测序分析正确后将其定向克隆到酵母表达载体pGBKT7中,构建获得CGB的酵母表达载体pGBKT7-CGB,并在酵母菌AH109中表达。提取酵母总蛋白并利用标签蛋白(myc)的抗体进行免疫印迹检测。结果表明所构建的CGB酵母表达载体能够在酵母中高效表达,可用于后续的酵母双杂交文库的筛选工作。 展开更多
关键词 胞红蛋白 酵母 载体构建
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体外培养神经元缺氧时细胞红蛋白基因表达的变化 被引量:1
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作者 杨汉华 马海然 肖丹萍 《中国临床新医学》 2016年第1期10-13,共4页
目的探讨体外培养神经元在缺氧时细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)基因表达的变化规律。方法运用无血清培养技术进行胎鼠皮质神经元培养6 d,用免疫组织化学方法进行纯度鉴定,随机分为4组,其中3个实验组分别置于0.5%~0.9% O2中8、16、24 h... 目的探讨体外培养神经元在缺氧时细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)基因表达的变化规律。方法运用无血清培养技术进行胎鼠皮质神经元培养6 d,用免疫组织化学方法进行纯度鉴定,随机分为4组,其中3个实验组分别置于0.5%~0.9% O2中8、16、24 h,对照组置于正常环境。用CCK8试剂盒测试细胞生存率,用Real-time PCR方法检测不同时点Cygb基因表达的情况。结果神经元纯度鉴定纯度〉99%;缺氧后神经元Cygb基因的表达随时间增长而递增。结论体外培养神经元缺氧时Cygb基因表达增强,提示Cygb可能在神经细胞缺氧时发挥重要作用。 展开更多
关键词 细胞红蛋白 神经元 基因表达 缺氧缺血性脑损伤
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胞红蛋白研究进展
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作者 徐中菊 张悦 +2 位作者 舒适 李志杰 张瑞义 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第10期1987-1990,共4页
胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)是珠蛋白家族中的一员,在脊椎动物的器官,组织和细胞中有广泛表达。它具有一个紧密的双螺旋结构,不仅具有储存和运输氧气的功能,还参与胶原合成、酶促反应、清除细胞内活性氧、基因调控等过程。此外,胞红蛋白... 胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)是珠蛋白家族中的一员,在脊椎动物的器官,组织和细胞中有广泛表达。它具有一个紧密的双螺旋结构,不仅具有储存和运输氧气的功能,还参与胶原合成、酶促反应、清除细胞内活性氧、基因调控等过程。此外,胞红蛋白在体外能抑制癌细胞的生长,从而引起研究人员的高度关注。本文重点对CYGB的结构、分布、基因调控和功能、参与病理状态以及潜在的临床应用价值等方面展开综述。 展开更多
关键词 胞红蛋白 结构 分布 基因调控 功能
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