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壳聚糖纳米粒载体转染Cu-SOD对缺血再灌注脑组织的作用 被引量：1
1
作者 贾栋 高国栋 李永林 《神经疾病与精神卫生》 2007年第2期134-137,共4页
目的制备适用的壳聚糖纳米粒,并连接上SOD质粒,研究壳聚糖纳米粒-SOD联合体对脑缺血再灌注脑组织氧自由基的清除能力及对脑组织内SOD含量的影响。方法以分子交联法制备壳聚糖纳米粒;通过静电吸附作用连接上Cu-SOD质粒;经琼脂糖凝胶电泳... 目的制备适用的壳聚糖纳米粒,并连接上SOD质粒,研究壳聚糖纳米粒-SOD联合体对脑缺血再灌注脑组织氧自由基的清除能力及对脑组织内SOD含量的影响。方法以分子交联法制备壳聚糖纳米粒;通过静电吸附作用连接上Cu-SOD质粒;经琼脂糖凝胶电泳分析载体与SOD-DNA的结合能力,并通过紫外分光光度计检测其包埋率。将壳聚糖纳米粒-SOD联合体输注到缺血再灌注大鼠体内,然后测定大鼠脑海马组织内丙二醛及超氧化物歧化酶含量。结果经壳聚糖纳米粒-SOD质粒联合体治疗的大鼠,其海马组织丙二醛含量明显低于生理盐水对照组及生理盐水+SOD组(P<0.05)(P<0.01)。其海马组织超氧化物歧化酶含量明显高于生理盐水对照组及生理盐水+SOD组(P<0.05)(P<0.01)。结论壳聚糖纳米粒-SOD质粒联合体在接近临床应用的实验中具有较强氧自由基清除能力,其较强的氧自由基清除能力在于壳聚糖纳米粒能助SOD质粒通过血脑屏障及细胞膜,使SOD-DNA在脑细胞内表达,增加了超氧化物歧化酶在脑细胞中的含量。 展开更多
关键词 壳聚糖 纳米粒 cu-sod质粒 脑缺血再灌注 氧自由基
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布鲁氏菌Cu/Zn SOD蛋白生物信息学分析及原核表达
2
作者 尹徽 田玮琨 +6 位作者 王潇霖 宰晓东 杨睆洲 王舒逸 张军 殷瑛 安健 《动物医学进展》 北大核心 2026年第1期1-8,共8页
对布鲁氏菌疫苗靶标抗原铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)蛋白进行生物信息学分析及重组表达。利用NCBI、Protter、Expasy、IEDB、SYFPEITHI、STRING数据库和SOPMA、Alpha-Fold软件等生物信息学工具对Cu/Zn SOD的序列保守性、理化性质、... 对布鲁氏菌疫苗靶标抗原铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)蛋白进行生物信息学分析及重组表达。利用NCBI、Protter、Expasy、IEDB、SYFPEITHI、STRING数据库和SOPMA、Alpha-Fold软件等生物信息学工具对Cu/Zn SOD的序列保守性、理化性质、结构特点、表位分布及互作蛋白进行预测分析。采用全基因合成方法构建表达质粒pET-28a(+)-sodc,转化至BL21(DE3)感受态细胞中,应用IPTG诱导蛋白表达,并用SDS-PAGE和Western blot对蛋白进行鉴定,利用亲和层析柱对蛋白进行纯化。Cu/Zn SOD蛋白由173个氨基酸组成,理论相对分子量为18130.67 u,等电点为6.24,N端第1位至第19位氨基酸为信号肽序列,在牛、羊、猪和犬种布鲁氏菌中高度保守,二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲、延展结构的占比分别为9.83%、7.51%、57.23%和25.43%,存在多个T细胞和B细胞抗原表位并可与多种蛋白相互作用。此外,鉴定并纯化获得了Cu/Zn SOD重组蛋白。布鲁氏菌Cu/Zn SOD蛋白氨基酸序列保守性高、性质稳定、亲水性良好且涵盖了丰富的B/T细胞表位,可能有较好的免疫原性,为布鲁氏菌病新型疫苗的研发提供了参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 Cu/Zn SOD蛋白 生信分析 原核表达
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枣叶绿体Cu/Zn-SOD基因克隆、生物信息学及盐胁迫表达分析
3
作者 陈蕊红 楚禄建 +2 位作者 常海飞 李云飞 王延峰 《分子植物育种》 北大核心 2025年第17期5906-5916,共11页
枣树是中国北方重要的果树,主要分布在干旱半干旱盐碱地区,长期受逆境胁迫的影响。超氧化物歧化酶(SOD)是植物重要的抗氧化的酶,能高效地清除受到逆境胁迫细胞内产生的活性氧,与植物的多种抗逆性关系密切。为了明确SOD酶基因在枣树抗盐... 枣树是中国北方重要的果树,主要分布在干旱半干旱盐碱地区,长期受逆境胁迫的影响。超氧化物歧化酶(SOD)是植物重要的抗氧化的酶,能高效地清除受到逆境胁迫细胞内产生的活性氧,与植物的多种抗逆性关系密切。为了明确SOD酶基因在枣树抗盐胁迫中的分子机理,本研究基于骏枣全基因组序列注释结构,筛选出枣Cu/Zn-SOD(ZjCSD)基因并设计引物,以骏枣cDNA为模板克隆了ZjCSD基因的全长。生物信息学分析结果表明,ZjCSD基因全长660 bp,编码219个氨基酸,其理论相对分子质量为22.3 kD,理论等电点(pI)为6.08;含有37个磷酸化位点,属于疏水性蛋白,无信号肽,不存在跨膜结构域;亚细胞定位于叶绿体;其二级结构由21.92%的α-螺旋,30.59%的延伸链,6.39%的β-转角,41.10%的无规卷曲结构区组成。进化树分析表明,ZjCSD蛋白与核桃、荔枝的亲缘关系最近。转录组以及实时荧光RT-qPCR定量分析表明,用100 mmol/L NaCl处理3、8 d时,ZjCSD基因均上调表达,而当盐浓度达到200 mmol/L时,则抑制ZjCSD基因的表达,推测ZjCSD基因参与枣非生物逆境胁迫,该研究结果为进一步分析该基因对枣树的抗盐性提供重要参考。 展开更多
关键词 枣树(Ziziphus jujuba) Cu/Zn-SOD 盐胁迫
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稻纵卷叶螟FOXO调控Cu/Zn SOD参与抗杆状病毒CnmeGV感染的机制
4
作者 张楠 韩光杰 +6 位作者 刘琴 李传明 林曼曼 祁建杭 陆玉荣 夏杨 徐健 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第12期2334-2340,共7页
为阐明稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)对稻纵卷叶螟颗粒体病毒(C.medinalis granulovirus,CnmeGV)的抵抗机制,本研究分析了稻纵卷叶螟转录因子FOXO和铜/锌超氧化物歧化酶(Copper/zinc superoxide dismutase,Cu/Zn SOD)对CnmeGV... 为阐明稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)对稻纵卷叶螟颗粒体病毒(C.medinalis granulovirus,CnmeGV)的抵抗机制,本研究分析了稻纵卷叶螟转录因子FOXO和铜/锌超氧化物歧化酶(Copper/zinc superoxide dismutase,Cu/Zn SOD)对CnmeGV感染的响应机制。结果表明,稻纵卷叶螟幼虫脂肪体中Cu/Zn SOD表达水平高于血淋巴、中肠和马氏管等组织;CnmeGV感染后6~48 h,稻纵卷叶螟脂肪体中超氧化物歧化酶活性显著增加,FOXO和Cu/Zn SOD基因mRNA表达水平均显著上调,且抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能抑制上调水平。FOXO抑制剂AS1842856和SOD抑制剂LCS-1都能显著增强病毒DNA复制水平,提高CnmeGV感染幼虫的死亡率。上述结果说明,FOXO和Cu/Zn SOD基因的激活程度依赖于氧化应激水平,FOXO和Cu/Zn SOD基因在稻纵卷叶螟幼虫的抗病毒防御中起到关键作用。此外,FOXO抑制剂还能显著削弱病毒感染对Cu/Zn SOD转录的诱导水平,且在Cu/Zn SOD基因启动子区鉴定出多个FOXO结合位点,说明FOXO能直接调控Cu/Zn SOD的表达。本研究结果为稻纵卷叶螟防治、昆虫与病毒互作机制研究提供了新方法。 展开更多
关键词 稻纵卷叶螟 稻纵卷叶螟颗粒体病毒 氧化应激 FOXO转录因子 铜/锌超氧化物歧化酶
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布鲁氏菌Cu/Zn-SOD蛋白多克隆抗体的制备及间接ELISA方法的建立
5
作者 付双双 常晓 +13 位作者 倪荣融 王泽轩 颜可欣 孙文庆 武鑫和 吴澳迪 张雨晨 张玉婷 袁静 顾茂源 王月丽 孟闯 易继海 哈依拉提·居马诺夫 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第11期84-89,共6页
为了制备布鲁氏菌铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)蛋白多克隆抗体并建立间接ELISA方法,试验将布鲁氏菌Cu/Zn-SOD基因克隆至原核表达载体pET-22b(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导,采用His标签镍柱亲和层析法纯化重... 为了制备布鲁氏菌铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)蛋白多克隆抗体并建立间接ELISA方法,试验将布鲁氏菌Cu/Zn-SOD基因克隆至原核表达载体pET-22b(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导,采用His标签镍柱亲和层析法纯化重组蛋白Cu/Zn-SOD,将纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔4次,获得抗Cu/Zn-SOD的多克隆抗体;将重组蛋白Cu/Zn-SOD作为包被抗原,建立检测布鲁氏菌抗体的间接ELISA方法,评估其特异性、敏感性和重复性,并对采集的羊血清样品进行检测。结果表明:重组蛋白Cu/Zn-SOD主要以包涵体形式表达,纯化后在18.95 ku处出现明显单一条带,并且能与布鲁氏菌标准阳性血清发生特异性结合。制备的重组蛋白Cu/Zn-SOD兔多克隆抗体经Western-blot鉴定,能特异性识别布鲁氏菌的Cu/Zn-SOD蛋白,抗体效价大于1∶204800。经过条件优化,确定间接ELISA的最佳抗原包被浓度为2μg/mL,最佳封闭液为5%脱脂奶粉,最佳封闭时间为2 h,一抗最佳稀释度为1∶200,最佳孵育时间为1 h,二抗最佳稀释度为1∶8000,最佳孵育时间为1 h,显色时间为15 min。该检测方法批内、批间重复试验的变异系数均小于7%;且仅能检测布鲁氏菌标准阳性血清,无法检测巴氏杆菌、沙门菌、大肠杆菌和小肠耶尔森氏菌阳性血清;当布鲁氏菌阳性血清稀释度为1∶3200时,检测结果仍然为阳性,具有较好的重复性、特异性和敏感性;在临床应用评估中,该方法检测的阳性率为27.12%,与虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)及布鲁氏菌抗体检测试剂盒的符合率大于92%。说明成功表达了Cu/Zn-SOD蛋白,所制备的多克隆抗体能与布鲁氏菌和Cu/Zn-SOD蛋白发生特异性反应,建立的间接ELISA方法具有较高的特异性、敏感性和良好的重复性。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 铜锌超氧化物歧化酶 重组蛋白 多克隆抗体 间接ELISA
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温度胁迫对皱纹盘鲍生理和生化活动的影响 被引量：28
6
作者 姜娓娓 方建光 +5 位作者 李加琦 蒋增杰 毛玉泽 杜美荣 高振琨 陈琼琳 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期220-230,共11页
为探讨温度胁迫下皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)的响应机制,采用室内控温实验,通过设置4个温度梯度(5℃、10℃、20℃和25℃),设计温度骤变处理组(皱纹盘鲍从15℃暂养温度直接转移至各实验温度)和温度缓变处理组(0.5℃/12 h),分... 为探讨温度胁迫下皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)的响应机制,采用室内控温实验,通过设置4个温度梯度(5℃、10℃、20℃和25℃),设计温度骤变处理组(皱纹盘鲍从15℃暂养温度直接转移至各实验温度)和温度缓变处理组(0.5℃/12 h),分析温度剧烈变化和温度缓慢变化对皱纹盘鲍耗氧率和排氨率的影响及其差异性;并对高温和低温处理下皱纹盘鲍消化腺中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)和溶菌酶(LSZ)活性的变化情况以及不同组织(血细胞和肌肉组织)中Cu/Zn–SOD基因的表达状况进行了研究。结果表明,皱纹盘鲍耗氧率和排氨率随海水温度的升高而增加,20℃达到最高值;25℃骤变处理组与缓变处理组耗氧率和排氨率间存在极显著差异(P<0.01)。5℃和10℃骤变处理组皱纹盘鲍氧氮比(O/N)同缓变处理组间存在极显著差异(P<0.01)。在高温胁迫后的3 h,消化腺中SOD、CAT和LSZ活性达到最高,而ACP活性在胁迫6 h后达到最高(P<0.01);低温胁迫显著降低皱纹盘鲍LSZ的活性,于胁迫9 h后达到最低(P<0.01)。不同温度胁迫下,皱纹盘鲍血细胞和肌肉组织中Cu/Zn–SOD基因的相对表达量均表现上调,与对照组存在显著差异性(P<0.05)。本研究表明,温度胁迫能显著影响皱纹盘鲍的生理和生化活动,这将有助于探讨皱纹盘鲍夏季高死亡率的原因,为皱纹盘鲍健康养殖提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 皱纹盘鲍 温度 生理和生化活动 Cu/Zn–SOD基因
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丝瓜铜锌超氧化物歧化酶Cu/Zn-SOD基因家族的克隆与表达分析 被引量：13
7
作者 朱海生 刘建汀 +6 位作者 陈敏氡 李永平 王彬 张前荣 叶新如 林珲 温庆放 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第17期3386-3399,共14页
【目的】克隆丝瓜铜/锌超氧化物歧化酶Cu/Zn-SOD基因家族,并分析其序列特征、表达情况及其在丝瓜褐变中的作用,为进一步揭示丝瓜褐变的发生机理提供科学依据,为丝瓜品种遗传改良奠定基础。【方法】通过转录组测序和RT-PCR方法获得丝瓜Cu... 【目的】克隆丝瓜铜/锌超氧化物歧化酶Cu/Zn-SOD基因家族,并分析其序列特征、表达情况及其在丝瓜褐变中的作用,为进一步揭示丝瓜褐变的发生机理提供科学依据,为丝瓜品种遗传改良奠定基础。【方法】通过转录组测序和RT-PCR方法获得丝瓜Cu/Zn-SOD基因家族的c DNA序列,采用生物信息学方法分析氨基酸序列,利用荧光定量PCR技术研究Cu/Zn-SOD基因家族在不同组织及褐变条件下的表达情况。采用氮蓝四唑(NBT)光还原法测定总超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用福林-酚比色测定总酚含量。【结果】获得了3个丝瓜Cu/Zn-SOD基因家族c DNA序列,依次命名为Lc Cu/Zn-SOD1(Gen Bank登录号:KP178922)、Lc Cu/Zn-SOD2(Gen Bank登录号:KX092445)和Lc Cu/Zn-SOD3(Gen Bank登录号:KX092446)。Lc Cu/Zn-SOD1全长758 bp,包含一个456 bp的开放读码框(ORF),编码152个氨基酸;Lc Cu/Zn-SOD2全长799 bp,ORF为471 bp,编码157个氨基酸;Lc Cu/Zn-SOD3全长1 011 bp,ORF为663 bp,编码221个氨基酸;编码的蛋白与甜瓜、南瓜、黄瓜同源蛋白的相似性均在90%以上。生物信息学分析表明3个基因编码的酶蛋白均无信号肽,无跨膜结构域,为亲水性稳定蛋白,Wolf Psort预测其亚细胞定位于细胞质。Cu/Zn-SOD基因家族在根中的表达量最高,在花中表达量最低。在丝瓜采后储藏期间,Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3在丝瓜储藏初期表达量较采后当时(0 d)上调,后期表达量受到抑制;在丝瓜鲜切条件下,3个基因表达量在鲜切后较采后当时(0 h)总体呈下降趋势。相关性分析显示,在采后储藏和鲜切条件下,Lc Cu/Zn-SOD1表达量均与SOD酶活性呈极显著性正相关,Lc Cu/Zn-SOD3表达量均与SOD酶活性呈显著性正相关,SOD酶活性在鲜切条件下与总酚含量呈显著负相关,Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3在调控SOD酶活性方面起作重要作用,Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3的表达影响了SOD酶活性,并影响了丝瓜褐变进程。【结论】从丝瓜果肉中获得Cu/Zn-SOD基因家族的3个,其中Lc Cu/Zn-SOD1和Lc Cu/Zn-SOD3在普通丝瓜果肉褐变过程中可能发挥着重要作用。 展开更多
关键词 丝瓜 褐变 Cu/Zn-SOD 表达分析 SOD活性
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稀土离子与牛血Cu(Zn)-SOD的作用 被引量：10
8
作者 冯志祥 张树功 +4 位作者 刘启民 杨魁跃 倪嘉缵 苗键 油书恒 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1995年第7期993-996,共4页
采用ESR、CD谱和荧光光谱研究了pH=6.3时六次甲基四胺-HCl缓冲溶液中LaCl_3和TbCl_3与Cu(Zn)-SOD的配位作用和结构。Cu(Zn)-SOD可增强Tb^(3+)的荧光发射,Tb^(3+)与Cu(Zn)-SOD有多个配位位置,其中有2个强结合位点,La^(3+)与Tb^(3+)可竞争... 采用ESR、CD谱和荧光光谱研究了pH=6.3时六次甲基四胺-HCl缓冲溶液中LaCl_3和TbCl_3与Cu(Zn)-SOD的配位作用和结构。Cu(Zn)-SOD可增强Tb^(3+)的荧光发射,Tb^(3+)与Cu(Zn)-SOD有多个配位位置,其中有2个强结合位点,La^(3+)与Tb^(3+)可竞争Cu(Zn)…SOD上相同结合位点,77K下La^(3+)与Tb^(3+)使Cu(Zn)-SOD的Cu^(2+)活性中心的配位环境由菱形对称结构向轴对称结构转变,使Cu(Zn)-SOD的局部结构变松散,但对SOD酶活性基本无影响,表明稀土离子主要与酶蛋白分子中的酸性氨基酸羧基配位,对酶蛋白二级结构仅产生微弱扰动,对活性中心空间结构影响较小,基本不影响Cu(Zn)-SOD酶活性。 展开更多
关键词 稀土 ESR CD谱 荧光光谱 铜 锌 超氧化物歧化酶
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人铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆和在乳酸乳球菌中的表达 被引量：12
9
作者 向华 卫文仲 +1 位作者 谭华荣 郭顺星 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期6-9,共4页
采用RTPCR技术从人肝总RNA中分离扩增了045kb的人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的cDNA序列,首先克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,进行了序列测定和超高表达。将Cu/ZnSODcDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,用电穿孔法将重组质粒pMG... 采用RTPCR技术从人肝总RNA中分离扩增了045kb的人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的cDNA序列,首先克隆至大肠杆菌表达质粒pET23b,进行了序列测定和超高表达。将Cu/ZnSODcDNA亚克隆至乳酸乳球菌表达载体pMG36e,用电穿孔法将重组质粒pMG36esod转化到乳酸乳球菌中,获得Cu/ZnSOD的组成型表达,其表达量约占乳酸乳球菌可溶性蛋白的5%以上,活性染色表明该工程菌表达的Cu/ZnSOD具有较好的酶活性。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 基因克隆 基因表达 乳酸乳球菌
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Cu，Zn─SOD酶模型化合物催化O_2~－歧化作用的研究 被引量：19
10
作者 毛宗万 杭庆伟 唐雯霞 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第3期262-266,共5页
为了解Ｃｕ，Ｚｎ—ＳＯＤ酶结构和功能关系．尤其是Ｃｕ周围四位构型对催化歧化活性的影响，本文用ＮＢＴ法测定了Ｃｕ，Ｚｎ—ＳＯＤ酶和两个Ｃｕ—ｉｍ—Ｚｎ模型配合物及相应单核Ｃｕ（Ⅱ）配合物催化歧化的活性，结果表明不同咪唑... 为了解Ｃｕ，Ｚｎ—ＳＯＤ酶结构和功能关系．尤其是Ｃｕ周围四位构型对催化歧化活性的影响，本文用ＮＢＴ法测定了Ｃｕ，Ｚｎ—ＳＯＤ酶和两个Ｃｕ—ｉｍ—Ｚｎ模型配合物及相应单核Ｃｕ（Ⅱ）配合物催化歧化的活性，结果表明不同咪唑桥联方式和不同配位构型的化合物催化歧化的活性明显不同．其中以咪唑桥在四方锥底平面位置的［（ｄｔｍａ）Ｃｕ（ｉｍ）Ｚｎ（ｄｔｍａ）ＣｌＯ４·２．５Ｈ２Ｏ及其相应单核ＣＵ（Ⅱ）化合物比对应的咪唑桥在四方锥锥顶位置的［（ｔｒｉｃｎ）Ｃｕ（ｉｍ）Ｚｎ（ｔｒｉｃｎ）］（ＣｌＯ４）３·Ｈ２Ｏ及其有关化合物有更高的催化活性． 展开更多
关键词 铜 锌 超氧化物歧化酶 超氧离子 歧化
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大鼠急性羰基镍中毒肺脏SOD活性及Cu-Zn SOD基因表达的实验观察 被引量：9
11
作者 王宁 王秋英 +4 位作者 张小培 吴喜江 闫铭峰 宣小强 程宁 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期180-183,共4页
目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒后肺组织SOD活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肺脏急性毒性作用机制。方法健康SD大鼠静态吸入染毒,染毒时间为30 min,羰基镍染毒浓度分别为20 mg/m3、135 mg/m3和250 mg/m3,氯气染毒250... 目的通过研究大鼠急性羰基镍中毒后肺组织SOD活力变化与Cu-Zn SOD基因表达,探讨急性羰基镍中毒对肺脏急性毒性作用机制。方法健康SD大鼠静态吸入染毒,染毒时间为30 min,羰基镍染毒浓度分别为20 mg/m3、135 mg/m3和250 mg/m3,氯气染毒250 mg/m3为染毒对照组,健康大鼠为正常对照组,染毒后1 d、2 d、3 d和7 d分别取材,应用黄嘌呤氧化酶测定法和反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别测定各组大鼠不同取材时间段下肺组织SOD活力并分析Cu-Zn SOD基因表达水平。结果在低、中、高剂量羰基镍染毒条件下,肺脏SOD活力均有下降,以中剂量组染毒7 d时和高剂量组染毒3 d时肺SOD降低最为显著(P<0.05);氯气染毒后也显著下降(P<0.05)。与正常对照组相比,羰基镍低、中、高剂量染毒组肺脏Cu-Zn SOD基因表达差异均无统计学意义,而氯气染毒组表达明显降低(P<0.05)。结论羰基镍可诱发肺组织氧化损伤,降低SOD活力。在不同染毒剂量下,以高剂量染毒组肺氧化损伤最为明显;在不同取材时间下,以中剂量染毒7 d时和高剂量染毒3 d时肺氧化损伤最为明显。 展开更多
关键词 羰基镍 急性中毒 SOD活力 Cu-ZnSOD基因
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Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建及其在烟草中的表达 被引量：11
12
作者 姚冉 李轶女 +2 位作者 张志芳 沈桂芳 潘沈元 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期78-82,共5页
为研究Cu/Zn-SOD基因在提高转基因植物抗逆性方面的作用,从一株地热芽孢杆菌(Geobacillus)中克隆得到Cu/Zn-SOD基因,以pZP211质粒为表达载体,构建了植物表达载体pZP211-Cu/ZnSOD,并通过农杆菌介导对烟草进行遗传转化。经PCR检测证明已... 为研究Cu/Zn-SOD基因在提高转基因植物抗逆性方面的作用,从一株地热芽孢杆菌(Geobacillus)中克隆得到Cu/Zn-SOD基因,以pZP211质粒为表达载体,构建了植物表达载体pZP211-Cu/ZnSOD,并通过农杆菌介导对烟草进行遗传转化。经PCR检测证明已获得转Cu/Zn-SOD基因的烟草。进而测定转基因烟草的SOD活力,结果表明Cu/Zn-SOD基因在烟草中高效表达。对转基因烟草进行耐盐性检测,证明Cu/Zn-SOD基因确实能够提高烟草对盐胁迫的耐受性。 展开更多
关键词 CU Zn-SOD基因 植物表达载体 转基因烟草
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陆地棉叶绿体铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达(英文) 被引量：13
13
作者 胡根海 喻树迅 +1 位作者 范术丽 宋美珍 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期197-204,共8页
以陆地棉‘CRI36’的叶片为材料,使用RACE技术克隆到了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因。基因序列全长共1043bp,含有完整的开放阅读框。推导的氨基酸序列分析显示含有叶绿体信号肽,和已知植物的叶绿体Cu/Zn-SOD酶蛋白的氨基酸残基的同源性在... 以陆地棉‘CRI36’的叶片为材料,使用RACE技术克隆到了棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因。基因序列全长共1043bp,含有完整的开放阅读框。推导的氨基酸序列分析显示含有叶绿体信号肽,和已知植物的叶绿体Cu/Zn-SOD酶蛋白的氨基酸残基的同源性在66%～74%之间。基因的表达谱分析显示:棉花叶绿体Cu/Zn-SOD酶基因主要在叶片、茎中表达,根、花和下胚轴中没有检测到信号,即基因的表达主要在棉花的绿色组织。不同生育期的表达谱结果证实:该基因主要在苗期表达,以后表达逐渐减少。用pET-2la(+)构建了原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)的表达结果显示:表达后得到一个29.0kD的新蛋白,其分子量与预期目标一致。对SOD酶活性的分析证实,重组菌的酶活性显著增加,证明克隆的基因具有活性。 展开更多
关键词 棉花 铜锌超氧化物歧化酶 CDNA末端快速扩增 基因表达
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乌骨鸡红细胞超氧化物歧化酶的分离纯化及部分性质的研究 被引量：12
14
作者 张兰杰 辛广 +1 位作者 张维华 袁勤生 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期51-54,共4页
经氯仿-乙醇分级分离,丙酮沉淀及DE-32纤维素柱层析的方法,从乌骨鸡红细胞中得到纯化的Cu,Zn-SOD。结果表明此酶的比活力为11,954U/mg,提纯倍数为334.71,聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白带与活性带相对应。相对分子量约为32,000,相对亚基分子量... 经氯仿-乙醇分级分离,丙酮沉淀及DE-32纤维素柱层析的方法,从乌骨鸡红细胞中得到纯化的Cu,Zn-SOD。结果表明此酶的比活力为11,954U/mg,提纯倍数为334.71,聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白带与活性带相对应。相对分子量约为32,000,相对亚基分子量约为16,000。最大紫外吸收波长为260nm,对KCN和H2O2敏感,最适pH为6～9,热稳定性在60℃以下。 展开更多
关键词 乌骨鸡 红细胞 超氧化物歧化酶 分离 纯化 营养价值 药用价值
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人Cu,Zn-SOD在重组毕赤酵母中表达的发酵工艺研究 被引量：7
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作者 郑屹峰 孙金钰 +4 位作者 巫启明 郭建辉 林春通 刘树滔 饶平凡 《福州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期801-806,共6页
以表达人Cu,Zn-SOD的重组毕赤酵母为出发菌株,通过摇瓶实验研究发酵初始pH值、诱导剂浓度、诱导温度和培养基组成等因素对目的蛋白表达水平的影响.实验结果表明,培养基组分对目的蛋白表达水平的影响最大.与YPG培养基相比,菌株在FM22培养... 以表达人Cu,Zn-SOD的重组毕赤酵母为出发菌株,通过摇瓶实验研究发酵初始pH值、诱导剂浓度、诱导温度和培养基组成等因素对目的蛋白表达水平的影响.实验结果表明,培养基组分对目的蛋白表达水平的影响最大.与YPG培养基相比,菌株在FM22培养基(含0.15%组氨酸及PTM4)中目的蛋白表达量提高5.5倍.在优化摇瓶发酵条件下(诱导剂浓度1%,诱导温度27℃,FM22培养基(含0.15%组氨酸及PTM4),初始pH值为6.0),发酵液上清酶活水平为895 U/mL,较初始提高8.5倍;以摇瓶实验结果指导5 L罐发酵,得到13 539 U/mL酶活,为摇瓶试验的15倍. 展开更多
关键词 人Cu Zn-SOD 毕赤酵母 表达 发酵 培养基
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白菜型冬油菜铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的克隆及其在低温条件下的表达 被引量：29
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作者 曾秀存 刘自刚 +7 位作者 史鹏辉 许耀照 孙佳 方彦 杨刚 武军艳 孔德晶 孙万仓 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期636-643,共8页
超氧化物歧化酶(SOD)是一种逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)是该酶系中最主要的活性氧清除剂,与植物的抗逆性关系密切。本研究根据已发表的十字花科植物Cu/Zn-SOD基因的编码区设计引物,采用RT-PCR... 超氧化物歧化酶(SOD)是一种逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)是该酶系中最主要的活性氧清除剂,与植物的抗逆性关系密切。本研究根据已发表的十字花科植物Cu/Zn-SOD基因的编码区设计引物,采用RT-PCR克隆超强抗寒冬油菜陇油7号Cu/Zn-SOD的cDNA序列,该基因全长459 bp。生物信息学分析表明,该基因与甘蓝型油菜(Brassica napus)Cu/Zn-SOD基因同源性高达99%,编码1个亲水性稳定蛋白,无跨膜结构域和信号肽,具有胞质Cu/Zn-SOD超基因家族特有的序列特征和保守结构区域。半定量RT-PCR以及SOD酶活性分析表明,低温诱导条件下Cu/Zn-SOD基因差异表达,在白菜型冬油菜适应低温胁迫过程中发挥重要作用。超强抗寒冬油菜陇油6号品种低温诱导蛋白的SDS-PAGE分析以及蛋白串联质谱技术鉴定表明,Cu/Zn-SOD是受低温诱导表达的抗逆基因。 展开更多
关键词 白菜型冬油菜 CU Zn—SOD基因克隆 低温 表达分析 SOD活性 低温诱导蛋白
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HgCl_2对斑马鱼SOD,AChE酶活性和基因相对转录量的影响 被引量：6
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作者 何桢 牟文 +8 位作者 周巧巧 杨雪 张灿 胡芹芹 胡晓静 郭佳 钟秋 熊丽 刘德立 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2011年第6期649-654,共6页
以HgCl2为实验毒物,研究其对斑马鱼的毒性效应,经染毒后,分别在第1天和第7天取斑马鱼的肌肉测定超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,半定量RT-PCR检测肌肉中乙酰胆碱酯酶、细胞色素P450(CYP1A)和超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基... 以HgCl2为实验毒物,研究其对斑马鱼的毒性效应,经染毒后,分别在第1天和第7天取斑马鱼的肌肉测定超氧化物歧化酶(SOD)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,半定量RT-PCR检测肌肉中乙酰胆碱酯酶、细胞色素P450(CYP1A)和超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的相对转录量。结果显示HgCl2对斑马鱼的毒性很强,低浓度染毒1d后,基因转录量显著变化,而酶活性7d后才有显著变化。HgCl2对斑马鱼96h-LC50为244.06μg·L-1;AChE活性和基因相对转录量在第1天呈下降趋势;第7天,酶活性依然下降,但基因相对转录量在低、中浓度组呈上升趋势;高浓度组呈下降趋势,和对照组相比差异显著。SOD活性第7天表现促进作用,与染毒浓度成正相关,并有显著性差异;Cu/Zn-SOD基因转录量第1天总体呈下降趋势,第7天低浓度HgCl2对Cu/Zn-SOD基因转录量有诱导作用,高浓度有抑制作用。CYP1A基因相对转录量第1天整体呈下降趋势;第7天呈现出低浓度升高,中、高浓度降低的变化规律。以上结果说明基因转录水平的变化比其蛋白翻译水平的变化出现更早,更灵敏,因此可作为环境污染物的早期预警;同时说明污染物对生物大分子的影响比较复杂,受多种因素调控。 展开更多
关键词 Hgck 斑马鱼 ACHE CYP IA Cu/Zn—SOD
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哈密瓜铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的克隆及生物信息学分析 被引量：5
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作者 马伟荣 单春会 +1 位作者 童军茂 柳涛 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期181-185,190,共6页
依据NCBI中已克隆的葫芦科植物黄瓜和西瓜铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因序列设计引物,以哈密瓜果肉总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,最终获得一段403bp的哈密瓜Cu/Zn-SOD(HmCu/Zn-SOD)基因片段,运用Blast比对,系统进化树分析最终确定... 依据NCBI中已克隆的葫芦科植物黄瓜和西瓜铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因序列设计引物,以哈密瓜果肉总RNA为模板,通过RT-PCR扩增,最终获得一段403bp的哈密瓜Cu/Zn-SOD(HmCu/Zn-SOD)基因片段,运用Blast比对,系统进化树分析最终确定所克隆的基因片段为哈密瓜的Cu/Zn-SOD基因序列。运用蛋白质分析软件分析结果表明,克隆得到的哈密瓜Cu/Zn-SOD位于细胞质中,是非跨膜的非分泌性亲水蛋白,主要由无规则卷曲和β-折叠等蛋白质二级结构元件构成,同时与其他植物的胞质Cu/Zn-SOD的组成成分和理化性质具有高度的相似性。 展开更多
关键词 哈密瓜 CU Zn-SOD 基因克隆
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甘蔗Cu/Zn-SOD的克隆和表达分析 被引量：15
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作者 王盛 张保青 +3 位作者 黄杏 樊艳姣 杨丽涛 李杨瑞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期3277-3284,共8页
【目的】克隆甘蔗铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因,并分析其序列特征、组织特异性表达及在不同逆境胁迫下的表达模式。【方法】以甘蔗桂糖28号为材料,利用RT-PCR技术克隆获得Cu/Zn-SOD,采用生物信息学方法分析所推测的氨基酸序列,... 【目的】克隆甘蔗铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因,并分析其序列特征、组织特异性表达及在不同逆境胁迫下的表达模式。【方法】以甘蔗桂糖28号为材料,利用RT-PCR技术克隆获得Cu/Zn-SOD,采用生物信息学方法分析所推测的氨基酸序列,通过实时荧光定量PCR研究Cu/Zn-SOD在不同组织及逆境条件下的表达情况。【结果】克隆获得甘蔗Cu/Zn-SOD,NCBI登录号为JQ958328,其开放阅读框为456 bp,编码151个氨基酸,与禾本科植物聚于同一进化分支。实时荧光定量PCR分析表明Cu/Zn-SOD在根、茎、叶中均有表达,为组成型表达,在叶中表达量最高;Cu/Zn-SOD在聚乙二醇(PEG)、NaCl、低温(4℃)和H2O2四种非生物胁迫下均诱导表达,表达模式因调控机制的不同而异。【结论】克隆获得Cu/Zn-SOD,其主要在甘蔗绿色组织中表达,其在铜/锌SOD超氧化物歧化酶的功能区域保守型很高,可能与甘蔗抵御渗透胁迫相关。 展开更多
关键词 甘蔗 铜 锌超氧化物歧化酶 逆境 表达分析 实时荧光定量PCR
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盐酸阿霉素对大鼠心肌损伤的分子机制研究 被引量：10
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作者 李咏梅 宋伯根 +1 位作者 赵桂芬 沈丽贤 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2002年第3期209-212,共4页
目的 :初步研究盐酸阿霉素(adriamycin,ADR)对大鼠心肌损伤的分子机制及机体急性修复的机理。方法 :将雄性SD大鼠 40只随机分成 4组 (每组 1 0只) :正常对照组 ,ADR低剂量组 (1 0mg·kg-1) ,ADR中剂量组 (2 0mg·kg-1) ,ADR高... 目的 :初步研究盐酸阿霉素(adriamycin,ADR)对大鼠心肌损伤的分子机制及机体急性修复的机理。方法 :将雄性SD大鼠 40只随机分成 4组 (每组 1 0只) :正常对照组 ,ADR低剂量组 (1 0mg·kg-1) ,ADR中剂量组 (2 0mg·kg-1) ,ADR高剂量组 (4 0mg·kg-1) ,对后 3组分别一次性腹腔注射不同剂量的ADR ,制备大鼠心肌损伤模型。采用硫代巴比妥酸 (TBA)荧光分光光度法测大鼠血清丙二醛 (malondialdehyde,MDA)含量 ;采用黄嘌呤氧化酶法测定铜锌超氧化物歧化酶 (Cu Zn SOD)活性 ;采用二硫代二硝基苯甲酸直接显色法测定谷胱苷肽过氧化物酶GSH Px活性 ;运用RT PCR方法分析相关基因的表达。结果 :ADR中、高剂量组大鼠血清中MDA含量高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ;实验组Cu Zn SOD和GSH Px的酶活性均较对照组降低 ,并与其基因表达的减弱呈密切的相关性 ;FN、P1 0 5mRNA在不同剂量模型组呈不同程度的高表达。结论 :抗氧化酶基因表达的改变可能是ADR导致心肌损伤的分子机制之一 ,而纤连蛋白和核转录因子可能通过一系列的信号转导参与了机体损伤后急性期的修复。 展开更多
关键词 心肌损伤 盐酸阿霉素 Cu-Zn-SOD GSH-PX 纤连蛋白 P105 基因表达 ADR
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