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CRMP4慢病毒载体的构建及其对神经元突起生长的影响
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作者 张丹丹 谭明会 +4 位作者 叶永恒 陈克恩 李素梅 武凤鸣 郭国庆 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第3期305-310,共6页
日的探讨CRMP4对海马神经元突起生长的影响。方法利用PCR技术扩增CRMP4日的基因片段,与病毒载体连接,经过PCR、酶切和鉴定后与包装质粒共转293T细胞,制备慢病毒载体,之后感染海马神经元,观察神经元突起生长的变化,并进行定量分析。结果... 日的探讨CRMP4对海马神经元突起生长的影响。方法利用PCR技术扩增CRMP4日的基因片段,与病毒载体连接,经过PCR、酶切和鉴定后与包装质粒共转293T细胞,制备慢病毒载体,之后感染海马神经元,观察神经元突起生长的变化,并进行定量分析。结果扩增出CRMP4日的基因,成功构建CRMP4慢病毒载体,病毒滴度为1.0×107~1.0×108U/ml;对照细胞转染空质粒后见GFP表达,分布于神经元的胞体和突起,细胞随着发育不断极化,分化出树突和轴突,突起不断延长;过表达CRMP4后,可见神经元的突起延长,分支较对照组增多;定量结果显示,神经元突起总长度包括树突和轴突均较对照组增多,分支数日亦较对照组增多,差异显著(P〈0.05)。结论成功构建了携带大鼠CRMP4基因的慢病毒表达载体;过表达CRMP4基因可以促进神经元突起的生长。 展开更多
关键词 crmp4 慢病毒 海马 神经元 突起
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Combined analysis of CRMP4 methylation levels and CAPRA-S score predicts metastasis and outcomes in prostate cancer patients 被引量:2
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作者 Qun-Xiong Huang Chu-Tian Xiao +5 位作者 Zheng Chen Min-Hua Lu Jun Pang Jin-Ming Di Zi-Huan Luo Xin Gao 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2018年第1期56-61,共6页
The present study analyzed the predictive value of combined analysis of collapsin response mediator protein 4 (CRMP4) methylation levels and the Cancer of the Prostate Risk Assessment (CAPRA-S) Postsurgical score ... The present study analyzed the predictive value of combined analysis of collapsin response mediator protein 4 (CRMP4) methylation levels and the Cancer of the Prostate Risk Assessment (CAPRA-S) Postsurgical score of patients who required adjuvant hormone therapy (AHT) after radical prostatectomy (RP), We retrospectively analyzed 305 patients with prostate cancer (PCa) who received RP and subsequent androgen deprivation therapy (ADT). Two hundred and thirty patients with clinically high-risk PCa underwent immediate ADT, and 75 patients with intermediate risk PCa underwent deferred ADT. CRMP4 methylation levels in biopsies were determined, and CAPRA-S scores were calculated. In the deferred ADT group, the values of the hazard ratios for tumor progression and cancer-specific mortality (CSM) in patients with 〉15% CRMP4 methylation were 6.81 (95% CI, 2.34-19.80) and 12.83 (95% CI. 2.16-26.10), respectively. Receiver-operating characteristic curve analysis indicated that CRMP4 methylation levels 〉15% served as a significant prognostic marker of tumor progression and CSM. In the immediate ADT group, CAPRA-S scores :〉6 and CRMP4 methylation levels :〉15% were independent predictors of these outcomes (uni- and multi-variable Cox regression analyses). The differences in the 5-year progression-free survival between each combination were statistically significant. Combining CAPRA-S score and CRMP4 methylation levels improved the area under the curve compared with the CRMP4 or CAPRA-S model. Therefore, CRMP4 methylation levels :〉15% were significantly associated with a poor prognosis and their combination with CAPRA-S score accurately predicted tumor progression and metastasis for patients requiring AHT after RP. 展开更多
关键词 adjuvant hormone therapy CAPRA-S crmp4 methylation levels prostatic neoplasms
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前列腺癌CRMP4基因启动子甲基化研究 被引量:2
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作者 刘伟鹏 庞俊 +3 位作者 李辽源 方友强 蒲小勇 高新 《中华腔镜泌尿外科杂志(电子版)》 2010年第1期49-53,共5页
目的分析前列腺癌CRMP4基因启动子区CpG岛甲基化状况及其与CRMP4表达下调的关系,设计较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针。方法去甲基化药物5-aza-dC分别以0.5μM、5μM及12.5μM三种不同浓度处理前列腺癌细胞,WesternBlot... 目的分析前列腺癌CRMP4基因启动子区CpG岛甲基化状况及其与CRMP4表达下调的关系,设计较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针。方法去甲基化药物5-aza-dC分别以0.5μM、5μM及12.5μM三种不同浓度处理前列腺癌细胞,WesternBlot检测药物处理前后CRMP4表达的变化。硫化测序PCR寻找前列腺癌CRMP4基因启动子区甲基化位点,根据测序结果设计并筛选用于诊断前列腺癌早期转移的甲基化特异性PCR引物。结果去甲基化药物处理后,CRMP4蛋白的表达可以重新上调,并且随着使用的5-aza-dC浓度增加,其表达量也逐渐增加。转移性前列腺癌CRMP4基因启动子区存在2个连续甲基化区域,共有10个CpG位点(-848,-841,-690,-680,-678,-674,-671,-665,-660,-658)其甲基化率极高,而局限性前列腺癌及非肿瘤组织这些CpG位点则未甲基化或有偶发的甲基化。筛选出较为理想的诊断前列腺癌早期转移的甲基化特异性PCR引物,多数转移性前列腺癌及局限性进展期前列腺癌均可扩增出M条带。结论转移性前列腺癌CRMP4表达下调与其基因启动子区CpG岛甲基化相关,筛选出较为理想的诊断前列腺癌早期转移的分子诊断探针,有望为临床早期诊断前列腺癌转移提供新的分子生物学诊断方法。 展开更多
关键词 前列腺癌 crmp4基因 甲基化
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年龄相关钙蛋白酶2上调C499促进前列腺间质细胞增生导致前列腺增生的发生机制 被引量:2
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作者 梁伟聪 孙卓伦 +3 位作者 毛云华 王喻 李科 高新 《中华腔镜泌尿外科杂志(电子版)》 2021年第5期367-372,共6页
目的探讨前列腺增生(BPH)的发病机制。我们前期发现塌陷反应调节蛋白4(CRMP4)受前列腺组织内钙调蛋白2切割产生两个片段,其中N端产物为C499(1-498aa),C499进入细胞核作用E2F1促进细胞增殖。我们认为C499上升促进前列腺间质细胞增生导致... 目的探讨前列腺增生(BPH)的发病机制。我们前期发现塌陷反应调节蛋白4(CRMP4)受前列腺组织内钙调蛋白2切割产生两个片段,其中N端产物为C499(1-498aa),C499进入细胞核作用E2F1促进细胞增殖。我们认为C499上升促进前列腺间质细胞增生导致BPH的发生。方法收集BPH病例按年龄建立队列。分别做CD86+M1巨噬细胞、钙蛋白酶2、C499、CRMP4的免疫组化(IHC),评估CD86+M1巨噬细胞、钙蛋白酶2与C499表达与年龄和BPH间质组织增生的联系。C499基因质粒转染RWPE-1细胞,观察细胞增殖。结果在60例BPH患者各年龄组,IHC检测显示CD86+M1巨噬细胞、钙蛋白酶2、C499在前列腺间质表达,随年龄增长而升高;而前列腺上皮细胞内CRMP4表达随年龄增加而逐渐减少。CCK-8实验显示C499促进RWPE-1生长。结论随着年龄增长,BPH患者前列腺间质细胞CD86+M1巨噬细胞增加,激活钙蛋白酶2活性;切割因上皮间质细胞转化至前列腺间质细胞的CRMP4,促使C499在前列腺间质表达升高,C499促进前列腺间质细胞增殖,导致BPH的发生。 展开更多
关键词 前列腺增生 老年医学 坍塌反应调节蛋白4 钙蛋白酶 巨噬细胞
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