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人参多糖介导Wnt/β-catenin信号转导诱导人鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡 被引量：17
1
作者 范家铭 刘泽洪 +3 位作者 李静 王亚平 杨绿源 黄江菊 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期3332-3337,共6页
目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,... 目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1分别作用48 h后,流式细胞术检测其对CNE-2细胞凋亡的诱导作用;Hoechst-33258染色和电镜观察细胞的形态改变。Real-time PCR检测细胞β-catenin mRNA的表达。采用免疫荧光染色检测细胞中β-catenin,TCF4蛋白定位及表达量的变化。Western blot检测细胞中β-catenin,Bcl-2,Bax蛋白的变化。结果:CCK8法测得人参多糖能明显抑制CNE-2细胞的增殖,其抑制作用呈剂量、时间依赖性,GPS处理细胞48 h的IC50为0.39 g·L-1;质量浓度分别为0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1的GPS作用人鼻咽癌CNE-2细胞48 h后细胞凋亡率分别为(5.69±0.29)%,(10.3±0.63)%,(15.4±0.74)%,(35.7±1.86)%,与对照组(2.08±0.11)%比较均有显著性差异(P<0.05);Hoechst-33258染色结果显示细胞凋亡特征。电镜下可见0.4 g·L-1GPS诱导48 h后可使CNE-2细胞出现凋亡小体。Real-time PCR显示β-catenin mRNA表达明显降低。激光共聚焦结果显示人参多糖作用48 h后β-catenin和TCF4在胞核中表达明显减少,β-catenin表达区域由胞核向胞膜转移。Western blot结果显示经浓度梯度增加的人参多糖作用CNE-2细胞48 h后,β-catenin和抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱;而促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论:人参多糖可明显抑制CNE-2细胞增殖促进细胞凋亡。Wnt/β-catenin信号通路的受阻可能是GPS诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的一个重要机制。 展开更多
关键词 人参多糖 cne-2细胞 细胞增殖 凋亡 WNT Β-CATENIN
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甘草素通过影响鼻咽癌CNE-2细胞的自噬增强其放疗敏感性 被引量：21
2
作者 张荣芳 王春玲 +2 位作者 李申 靳海科 姬颖华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期601-606,共6页
目的:探讨甘草素(licorice)对鼻咽癌CNE-2细胞放疗增敏的影响及其作用机制。方法:体外培养构建放射抵抗性的鼻咽癌细胞株CNE-2-RR。MTT细胞实验检测不同浓度的甘草素对鼻咽癌细胞增殖活性的影响,透射电镜检测甘草素处理鼻咽癌细胞后自... 目的:探讨甘草素(licorice)对鼻咽癌CNE-2细胞放疗增敏的影响及其作用机制。方法:体外培养构建放射抵抗性的鼻咽癌细胞株CNE-2-RR。MTT细胞实验检测不同浓度的甘草素对鼻咽癌细胞增殖活性的影响,透射电镜检测甘草素处理鼻咽癌细胞后自噬体的变化情况,Western blotting检测甘草素对鼻咽癌细胞自噬蛋白水平的影响,彗星实验检测不同组鼻咽癌细胞DNA损伤修复情况,流式细胞术检测鼻咽癌细胞株凋亡率的变化。结果:成功构建放射抵抗细胞株CNE-2-RR,20 mmol/L甘草素对鼻咽癌细胞的最高抑制率为(58.86±5.02)%。甘草素处理鼻咽癌CNE-2-RR细胞后胞内自噬体数量增加,线粒体和细胞核形态异常;细胞中自噬体蛋白LC3-II水平升高、LC3-I水平降低(P<0.05);甘草素作用CNE-2-RR细胞后彗星尾距长度大于对照组,表明对DNA损伤修复能力明显降低。甘草素作用导致CNE-2-RR细胞的凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:甘草素通过影响鼻咽癌CNE-2-RR细胞的自噬行为及DNA修复能力增强其对放疗的敏感性。 展开更多
关键词 甘草素 鼻咽癌 cne-2-RR细胞 自噬体 放射敏感性
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联合基因Survivin、CDK1的shRNAs靶向干扰对鼻咽癌CNE-2细胞增值的影响 被引量：10
3
作者 陈淑萍 周红桃 +3 位作者 蔡俊宏 王福利 许茂轩 符生苗 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期239-247,共9页
为了构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,并研究其靶向干扰对鼻咽癌细胞CNE-2生物学行为的改变。本研究通过构建pU6-SurvivinshRNA、pU6-CDK1shRNA和pU6-SurvivinshRNA... 为了构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,并研究其靶向干扰对鼻咽癌细胞CNE-2生物学行为的改变。本研究通过构建pU6-SurvivinshRNA、pU6-CDK1shRNA和pU6-SurvivinshRNA-CDK1shRNA重组载体,用脂质体Lipofectamine 2000法将其转染入CNE-2细胞株中,应用RT-PCR方法初步筛选具有干扰效应的重组载体,逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平,Western blot检测Survivin和CDK1蛋白表达以及噻唑蓝溴化四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测癌细胞增殖活性的变化。结果表明:成功构建具有干扰效应的shRNAs表达载体;联合或单基因Survivin、CDK1的shRNAs表达载体干扰CNE-2细胞后,其对应的mRNA和目的蛋白表达均降低,CNE-2癌细胞增殖活性降低,联合基因shRNAs表达载体具有一定程度的干扰增强作用。 展开更多
关键词 短发夹样RNA Survivin基因 CDK1基因 鼻咽癌 cne-2
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人鼻咽癌细胞株(CNE-2)放射生物学特性的实验研究 被引量：15
4
作者 夏云飞 黄冰 +2 位作者 董秀月 钱剑扬 钟女奇 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期86-87,共2页
为了了解人鼻咽癌的放射生物学特性，我们采用集落形成法”’检测了人鼻咽癌细胞株CNE－2在不同的放射剂量照射下的存活率，通过单击多靶模型和线性二次模型拟合绘制出存活曲线，并求出D。、D。、n，和。、p、。／p比值，以及SF。等放... 为了了解人鼻咽癌的放射生物学特性，我们采用集落形成法”’检测了人鼻咽癌细胞株CNE－2在不同的放射剂量照射下的存活率，通过单击多靶模型和线性二次模型拟合绘制出存活曲线，并求出D。、D。、n，和。、p、。／p比值，以及SF。等放射生物学参数。现将本项研究介绍如下?.. 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 体外实验 放射生物学 cne-2
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PI3K/Akt/FoxO3a信号通路对人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响 被引量：10
5
作者 邱权 叶琳 +2 位作者 皮静婷 陈黎黎 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1264-1267,共4页
目的探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路。方法通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测Fo... 目的探讨FoxO3a对体外培养的人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞增殖及凋亡的影响是否是通过PI3K/Akt信号通路。方法通过使用LY294002特异性抑制PI3K的活性,免疫印迹法检测FoxO3a及p-Akt蛋白在人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的表达,免疫荧光化学检测FoxO3a在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,实时荧光定量PCR检测FoxO3a的mRNA表达水平,MTT法检测鼻咽癌细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测鼻咽癌细胞的凋亡率。结果通过使用PI3K特异性抑制剂LY294002,FoxO3a在实验组人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞中的蛋白和mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05),且在CNE-1(P=0.004)、CNE-2(P=0.001)细胞核内的表达量高于对照组,FoxO3a的上调可抑制人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞的增殖(P<0.05),促进其凋亡(P<0.01)。结论通过抑制PI3K/Akt信号通路的活性可上调人鼻咽癌CNE-1、CNE-2细胞FoxO3a基因的表达,抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与其对FoxO3a的调控有关。 展开更多
关键词 FOXO3A PI3K AKT通路 人鼻咽癌 cne-1 cne-2 细胞增殖 细胞凋亡
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鹅不食草提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长抑制作用的实验研究 被引量：10
6
作者 陈红淑 李昌煜 +2 位作者 余美荣 许亚萍 丁志山 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第7期1621-1623,共3页
目的:观察鹅不食草不同提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用系统溶剂法制备鹅不食草不同提取物,MTT法观察不同浓度的各提取物对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测鹅不食草乙酸... 目的:观察鹅不食草不同提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用系统溶剂法制备鹅不食草不同提取物,MTT法观察不同浓度的各提取物对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测鹅不食草乙酸乙酯提取物对该细胞的凋亡作用。结果:鹅不食草石油醚和乙酸乙酯提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2有一定的抑制,其中乙酸乙酯提取物抑制作用最明显,呈现较好的剂量-效应曲线,其作用机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。结论:鹅不食草乙酸乙酯提取物可能是其抗鼻咽癌作用的有效部位之一。 展开更多
关键词 鹅不食草 人鼻咽癌细胞cne-2 细胞增殖 凋亡
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眼镜蛇毒神经生长因子诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡作用的研究 被引量：6
7
作者 韦世秀 刘成军 +2 位作者 李牡艳 宋慧 李佳荃 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期1909-1912,共4页
目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)... 目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)NGF处理24,48,72,96h对人鼻咽癌CNE-2生长的抑制率;Hoechst33342荧光染色观察凋亡细胞的形态;琼脂糖凝胶电泳测定DNA断裂状况;流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡率。结果:不同浓度的NGF能抑制CNE-2细胞增殖,并呈浓度-时间效应关系,作用24,48,72,96h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.213,0.095,0.048,0.033g.L-1;经NGF(0.1g.L-1)处理细胞48h后,荧光染色呈现典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳可见凋亡细胞特有的DNA片段;0.05,0.1,0.2g.L-1NGF作用48h后,CNE-2细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(28.2±2.0)%、(39.9±1.9)%、(50.3±1.3)%。结论:NGF通过诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡而产生抗鼻咽癌活性。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒 神经生长因子 鼻咽癌 cne-2细胞 细胞凋亡
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Survivin基因沉默对鼻咽癌CNE-2细胞株恶性表型的影响 被引量：5
8
作者 张帅 肖健云 +3 位作者 谢常宁 刘勇 王承龙 田勇泉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期607-610,656,共5页
目的:探讨RNA干扰技术沉默Survivin基因对鼻咽癌细胞CNE-2恶性表型的影响。方法:设计、合成针对Survivin基因的干扰序列,并将干扰序列构建至pGCsi/U6/GFP载体,稳定转染CNE-2细胞;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot鉴定干扰效果... 目的:探讨RNA干扰技术沉默Survivin基因对鼻咽癌细胞CNE-2恶性表型的影响。方法:设计、合成针对Survivin基因的干扰序列,并将干扰序列构建至pGCsi/U6/GFP载体,稳定转染CNE-2细胞;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot鉴定干扰效果;经四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、平板克隆形成实验分析沉默Survivin基因后,CNE-2细胞生长速度、细胞周期及恶性表型的改变。结果:沉默Survivin基因后,CNE-2细胞Sur-vivin mRNA、蛋白质表达水平均明显下调;细胞生长速度下降,G1期细胞增多,S期细胞减少,克隆形成能力明显减弱。结论:Survivin基因在CNE-2细胞生长、细胞周期及恶性表型等方面都起着重要的作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 SURVIVIN 鼻咽癌 cne-2
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HMME-PDT对CNE-2细胞增殖的抑制作用 被引量：9
9
作者 李燕 阴慧娟 +4 位作者 曾百乐 李晓原 胡黎平 潘实清 刘小星 《热带医学杂志》 CAS 2006年第9期F0002-F0004,共3页
目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用。方法以血卟啉单甲醚为光敏剂,532nm激光为激发光源的光动力学疗法作用于鼻咽癌CNE-2细胞。细胞用5、10、20!g/ml浓度的光敏剂孵育2h后,用0.6、1.2、2.4... 目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用。方法以血卟啉单甲醚为光敏剂,532nm激光为激发光源的光动力学疗法作用于鼻咽癌CNE-2细胞。细胞用5、10、20!g/ml浓度的光敏剂孵育2h后,用0.6、1.2、2.4、4.8、9.6J/cm2剂量的激光照射;激光功率密度为10mW/cm2。MTT法检测在HMME和激光两种变量下PDT对细胞活性的抑制作用;光镜观察PDT作用后细胞形态的变化;免疫组化法检测PCNA的表达。结果在HMME剂量为5!g/ml、10!g/ml及20!g/ml时,细胞的抑制率随着激光剂量从0.6J/cm2增加至9.6J/cm2而逐渐增加;并且和HMME及激光剂量密切相关;光镜观察结果表明PDT组与对照组相比细胞密度明显减少,细胞核浓聚、碎裂。免疫组化结果显示PDT作用后PCNA表达减少。结论HMME-PDT对CNE-2细胞的增殖有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 血卟啉单甲醚 光动力疗法 cne-2细胞
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土贝母苷甲诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡 被引量：18
10
作者 翁昔阳 马润娣 于立坚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第8期806-811,共6页
背景和目的:土贝母犤Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franquet犦是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从中药土贝母块茎中分离得到的土贝母苷甲(下称苷甲)有强抗肿瘤效果。本研究旨在探讨苷甲对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的影响... 背景和目的:土贝母犤Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franquet犦是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从中药土贝母块茎中分离得到的土贝母苷甲(下称苷甲)有强抗肿瘤效果。本研究旨在探讨苷甲对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测苷甲对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA电泳图谱的变化,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl-2和bax表达的变化。结果:苷甲抑制CNE-2Z细胞的生长,其24、48、72h的IC50分别为32.5、20.7、16.7μmol/L。苷甲诱导CNE-2Z细胞发生程序性死亡:流式细胞分析发现Sub-G1峰,50μmol/L苷甲作用CNE-2Z细胞12h,凋亡指数为72.8%;CNE-2Z细胞经苷甲作用(10μmol/L,24、48、72h;30、40、50、60μmol/L,12h)后,其DNA电泳图中出现典型的梯形条带。苷甲诱导bcl-2表达下调且磷酸化,并伴有bax高表达。结论:苷甲诱导CNE-2Z细胞发生形态学和生化学上典型的程序性死亡,其诱导的CNE-2Z细胞凋亡与bcl-2失活和bax激活有关。 展开更多
关键词 土贝母苷甲 诱导 鼻咽癌 癌细胞 cne-2Z凋亡
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人参多糖对鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及其可能的机制 被引量：4
11
作者 范家铭 李静 +3 位作者 姜蓉 王亚平 李春莉 黄江菊 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期538-543,共6页
目的 探讨人参多糖（ginseng polysaccharide，GPS）对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞，经裸鼠背部皮下注射，1×10^7个／（0.2ml·只），待瘤体最大径为4～6mm时... 目的 探讨人参多糖（ginseng polysaccharide，GPS）对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞，经裸鼠背部皮下注射，1×10^7个／（0.2ml·只），待瘤体最大径为4～6mm时，取20只模型裸鼠，随机分为4组：对照组（经腹腔注射生理盐水）、放疗组（每次每只裸鼠经肿瘤局部给予5GyX射线照射，每3d照射1次，共3次）、GPS组（经腹腔注射GPS，30mg／kg，每次0.3ml，每72h给药1次，共5次）和GPS联合放疗组（经腹腔注射GPS，30mg／kg，每次0.3ml，每72h给药1次，共5次；末次给药48h后开始放疗，每只每次经肿瘤局部给予5Gy X射线照射，每3d照射1次，共3次）。开始给药3周后处死裸鼠，取瘤体，称重，测量肿瘤的长、短径，计算肿瘤体积及抑制率；HE染色观察移植瘤组织病理学改变；Real-time PCR检测移植瘤组织中β-eatenin基因mRNA的转录水平；免疫组织化学和Western blot法检测移植瘤组织中β-catenin蛋白的表达水平。结果与对照组相比，GPS组、放疗组和GPS联合放疗组的肿瘤体积及瘤重均明显下降（P〈0.05），抑制率分别为29.87％、52.60％和74.68％；镜下观察可见，GPS联合放疗组细胞凋亡明显，多数细胞核完全溶解，细胞结构消失，坏死的肿瘤组织呈现均质红染表现；GPS联合放疗组移植瘤中β-cateninmRNA及蛋白的表达水平均显著下降（P均〈0.05）。结论GPS可抑制CNE-2细胞在裸鼠体内的生长，且对鼻咽癌的放疗具有增敏作用，其机制可能与抑制β-catenin的表达有关。 展开更多
关键词 人参多糖 鼻咽癌 cne-2细胞 放疗 敏感性 Β-CATENIN
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脂质体介导bcl-x_L反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞株凋亡的影响 被引量：7
12
作者 何桂蓉 周克元 +3 位作者 蔡康荣 梁统 何承伟 张月飞 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期11-15,共5页
背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌CNE-2Z细胞中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展中发挥着重要的作用。本研究以脂质体(lipofectin)为载体,将人工合成的bcl-xL反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)片段导入CNE-2Z细... 背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌CNE-2Z细胞中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展中发挥着重要的作用。本研究以脂质体(lipofectin)为载体,将人工合成的bcl-xL反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)片段导入CNE-2Z细胞,拟探讨ASODN对CNE-2Z细胞的影响。方法:以bcl-xL的编码区为靶点,人工合成20个碱基全硫代修饰的反义寡核苷酸,脂质体转染反义寡核苷酸进入CNE-2Z细胞后,用MTT法检测细胞成活率;用琼脂糖凝胶电泳、荧光染色、流式细胞术等方法检测细胞凋亡。结果:MTT结果发现,ASODN在Lip介导下即可显著抑制CNE-2Z细胞株细胞增殖(P<0.01),ASODN对细胞增殖的抑制作用随其浓度增加而增强;ASODN作用细胞36h后,经Hoechst33258/PI双染在荧光显微镜下可见细胞缩小、染色质固缩、核断裂;流式细胞仪分析发现在G1峰前出现一个亚二倍体峰即凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳分析可见ASODN/Lip处理组出现明显的“梯状”外观等凋亡特征性改变。结论:ASODN脂质体转染CNE-2Z细胞后可促进CNE-2Z的细胞凋亡;在肿瘤研究中,bcl-xL可作为一个有用的靶基因,为开发鼻咽癌基因治疗药物提供实验依据。 展开更多
关键词 脂质体介导 BCL-XL 反义寡核苷酸 鼻咽癌 cne-2Z细胞株 细胞凋亡
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三氧化二砷诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及其作用机制的初步研究 被引量：15
13
作者 陈扬超 张月飞 周克元 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1061-1064,共4页
目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽癌CNE2Z细胞的生物学效应及其作用机制。方法:台盼蓝计数法计算As2O3的IC50;CNE-2Z细胞经As2O3处理后,通过流式细胞仪、荧光染色及DNA电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪测定bcl2和bax阳性细胞百分率;罗丹... 目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽癌CNE2Z细胞的生物学效应及其作用机制。方法:台盼蓝计数法计算As2O3的IC50;CNE-2Z细胞经As2O3处理后,通过流式细胞仪、荧光染色及DNA电泳检测细胞凋亡;流式细胞仪测定bcl2和bax阳性细胞百分率;罗丹明123染色后进行线粒体膜电位分析。结果:As2O3在一定浓度范围内以浓度依赖的方式抑制CNE2Z细胞生长,其IC50为(1.35±0.30)μmol/L;0.5～2.0μmol/LAs2O3处理CNE2Z细胞后,流式细胞仪检测出凋亡峰,荧光显微镜下可见明显的细胞凋亡形态特征,琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯形条带;As2O3对bcl2的表达没有影响(P>0.05),但能显著增加bax的表达(P<0.01)及降低线粒体膜电位(P<0.01)。结论:As2O3在体外可诱导鼻咽癌CNE2Z细胞凋亡,其机制可能与上调bax表达和降低线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 三氧化二砷 鼻咽肿瘤 细胞凋亡 cne-2Z细胞
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2Gy多分割不同顺序照射对鼻咽癌CNE-2细胞生物效应的研究 被引量：25
14
作者 李金高 叶建明 +1 位作者 陈文学 王小平 《实用癌症杂志》 2009年第2期125-128,共4页
目的探讨总剂量为2 Gy时部分分割和顺序照射对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应的差异。方法采用克隆形成法和四唑盐(MTT)比色法,检测2 Gy剂量照射后鼻咽癌CNE-2细胞的细胞生存率和具有代谢活性细胞比例。结果在多个等分割照射中,较小分割(≤0... 目的探讨总剂量为2 Gy时部分分割和顺序照射对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应的差异。方法采用克隆形成法和四唑盐(MTT)比色法,检测2 Gy剂量照射后鼻咽癌CNE-2细胞的细胞生存率和具有代谢活性细胞比例。结果在多个等分割照射中,较小分割(≤0.5 Gy)多次照射的细胞存活率均明显低于单次照射组(2 Gy),差异有统计学意义(P<0.05),而较大分割(1 Gy)照射与单次照射组细胞生存率差异无统计学意义;在2个部分分割和3个部分分割照射中,随着S分割剂量的增大,各S-L和S-S-L照射组细胞生存率呈逐渐下降趋势,至S分割为0.4 Gy(S-L)或者0.5Gy(S-S-L)组时细胞生存率最低;大部分S-L照射组细胞生存率明显低于L-S照射组,大部分S-S-L照射组细胞生存率和相对细胞生存率明显低于L-S-S照射组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论总剂量为2 Gy照射时,分割剂量大小和照射顺序是影响鼻咽癌CNE-2细胞放射治疗生物效应的重要因素。 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne-2细胞 低剂量照射 低剂量放射超敏感性 分割剂量排列顺序
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山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响 被引量：4
15
作者 陈育华 吴国才 +1 位作者 王珍 周碧云 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第5期616-619,共4页
目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处... 目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。 展开更多
关键词 山奈酚 cne-2细胞 细胞周期 CDK1 CYCLINB1 鼻咽癌
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土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究 被引量：13
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作者 翁昔阳 于立坚 马润娣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期181-181,共1页
目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、... 目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果　皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论　诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase 展开更多
关键词 土贝母皂苷 细胞凋亡 凋亡相关基因 鼻咽癌细胞株 cne-2Z
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橙皮苷提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：7
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作者 罗晓婷 熊亮 +2 位作者 李思思 董明华 李舒梅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期2202-2204,共3页
目的探讨赣南脐橙果皮提取物橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的作用及其机制。方法 MTT法检测橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;流式细胞术检测橙皮苷处理CNE-2Z细胞后细胞周期的变化。结果不同浓度橙皮苷分别处理CNE-2... 目的探讨赣南脐橙果皮提取物橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的作用及其机制。方法 MTT法检测橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;流式细胞术检测橙皮苷处理CNE-2Z细胞后细胞周期的变化。结果不同浓度橙皮苷分别处理CNE-2Z细胞24,48,72 h后,均能抑制CNE-2Z细胞体外增殖;不同时间对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F=1898.865,P<0.001),不同药物浓度对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F=5454.040,P<0.001),时间和药物浓度两个因素对CNE-2Z细胞增殖有交互作用(F=118.909,P<0.001)。在1～100μmol/L浓度范围内,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增大,且随着时间的延长,抑制率也逐渐升高。当浓度大于100μmol/L后,其抑制作用不再随药物浓度增加而进一步增强(P>0.05)。100μmol/L橙皮苷作用CNE-2Z细胞24,48,72 h,随着时间延长G0/G1期细胞比例下降(P<0.01),S期细胞比例增加(P<0.01),G2/M期细胞为0,细胞阻滞于S期。结论橙皮苷能有效动员人鼻咽癌CNE-2Z细胞从细胞周期的G0/G1期进入S期,干扰细胞从S期进入G2期,导致大量细胞堆积于S期解旋复制,阻滞了细胞周期,从而抑制细胞的分裂增殖,诱导细胞周期特异性的细胞凋亡。 展开更多
关键词 橙皮苷 人鼻咽癌cne-2Z细胞 细胞增殖 细胞周期
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miR-106b在鼻咽癌组织中表达及对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响 被引量：6
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作者 周士霞 王海莉 王豪勋 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第20期9-12,共4页
目的探讨miR-106b在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响。方法选取68例份初治鼻咽癌患者的手术切除标本和45例份鼻咽炎患者的鼻咽部活检组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-106b表达,分析miR-106b表达与鼻咽... 目的探讨miR-106b在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响。方法选取68例份初治鼻咽癌患者的手术切除标本和45例份鼻咽炎患者的鼻咽部活检组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-106b表达,分析miR-106b表达与鼻咽癌患者临床病理参数的关系。取体外培养的对数生长期人鼻咽癌细胞株CNE-2分为四组(1×106个/组)。miR-106b模拟物组、miR-106b抑制物组分别转染miR-106b模拟物及miR-106b抑制物序列,阴性对照组转染阴性对照序列,空白对照组不处理;采用实时荧光定量PCR技术检测各组miR-106b表达,MTT法检测各组细胞增殖情况(以吸光度值表示),流式细胞仪检测各组细胞周期,Transwell试验检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果鼻咽癌及鼻咽炎组织miR-106b相对表达量分别为1.57±0.15、1.14±0.12,二者比较P<0.05;miR-106b相对表达量与鼻咽癌患者淋巴结转移、侵犯颈动脉鞘和侵犯颅底有关(P均<0.05)。各组miR-106b相对表达量:miR-106b模拟物组高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,miR-106b抑制物组低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞增殖情况:miR-106b模拟物组细胞接种后24、48、72和96 h时吸光度值均高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,而miR-106b抑制物组低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞周期:miR-106b模拟物组S期细胞比例高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,而miR-106b抑制物组细胞S期比例低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞迁移和侵袭情况:miR-106b模拟物组迁移和侵袭细胞数均高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,且miR-106b抑制物组均低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05。结论 miR-106b在鼻咽癌组织中呈高表达;miR-106b过表达可促进鼻咽癌CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 鼻咽癌 微小RNA-106b cne-2细胞 细胞增殖 细胞迁移
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吗啡对顺铂诱导的鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤生长抑制作用的影响 被引量：3
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作者 操隆辉 周建华 +3 位作者 林文前 谭红鹰 曾维安 曾益新 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期371-375,共5页
【目的】以人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤为模型,探讨吗啡对顺铂抑制肿瘤生长作用的影响及其机制。【方法】建立CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型20只,随机分为4组,对照组,单纯顺铂用药组、单纯吗啡用药组和吗啡联合顺铂用药组,每组5只。吗啡5mg... 【目的】以人鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤为模型,探讨吗啡对顺铂抑制肿瘤生长作用的影响及其机制。【方法】建立CNE-2细胞裸鼠移植瘤模型20只,随机分为4组,对照组,单纯顺铂用药组、单纯吗啡用药组和吗啡联合顺铂用药组,每组5只。吗啡5mg/kg每天给药1次,顺铂3mg/kg每3d给药2次,均为腹腔注射。用药14d后处死动物,完整剥离肿瘤,记净瘤质量。TUNEL染色计算细胞凋亡数,免疫组化染色检测肿瘤组织Bax,Bcl-2,cleaved-caspase-3以及CD34的表达情况。【结果】单纯顺铂用药组的瘤质量明显小于其它3组(P<0.05),吗啡联合顺铂用药组的瘤质量明显小于对照组(P<0.05);TUNEL染色及cleaved-caspase-3染色显示单纯顺铂用药组的凋亡细胞数明显多于其他3组(P<0.05)。单纯顺铂用药组与其他3组相比Bax蛋白表达量增多,而Bcl-2表达量减少,单纯吗啡组的Bcl-2表达最强。CD34微血管染色显示单纯顺铂用药组的微血管密度显著少于其它3组(P<0.05),单纯吗啡用药组的微血管密度显著多于对照组(P<0.05)。【结论】吗啡通过拮抗顺铂诱导细胞凋亡及促进CNE-2细胞裸鼠移植瘤组织的血管生成,抵抗了顺铂抑制肿瘤生长的作用。 展开更多
关键词 吗啡 顺铂 凋亡 cne-2细胞
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鼻咽癌细胞株CNE-2连续照射期间细胞增殖状况的研究 被引量：6
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作者 朱小东 曲颂 +3 位作者 李力 唐步坚 黎丹绒 张玮 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第8期1281-1284,共4页
目的:了解鼻咽癌细胞(CNE-2)照射过程中的增殖情况,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的时机,为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法:对接受^(60)Co-γ射线2Gy/天,每天1次,连续照射5天期间的CNE-2细胞,每天分别采... 目的:了解鼻咽癌细胞(CNE-2)照射过程中的增殖情况,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的时机,为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法:对接受^(60)Co-γ射线2Gy/天,每天1次,连续照射5天期间的CNE-2细胞,每天分别采用四氮唑兰比色分析法(MTT法)检测CNE-2细胞存活率、细胞分裂指数法检测细胞分裂指数、流式细胞术检测照射后细胞周期分布情况。结果:MTT法、细胞分裂指数法和流式细胞术均检测出CNE-2细胞在连续照射的第3天增殖速度最快,增殖最旺盛;在第5天细胞增殖速度最缓慢,增殖活性最低。结论:鼻咽低分化鳞癌细胞连续分割照射中后期存在加速增殖现象。 展开更多
关键词 cne-2细胞 照射 加速增殖
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