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芒果亚洲炭疽菌候选效应蛋白Cacfem1-Cacfem4对烟草叶片致病作用分析
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作者 陈德强 黄丽 +1 位作者 祁岑 孙碧莲 《工业微生物》 2025年第4期139-143,共5页
文章运用RT-PCR方法,从芒果亚洲炭疽菌(Colletotrichum asianum)中克隆了4个CFEM候选效应蛋白基因(编号Cacfem1-Cacfem4),并将其分别与植物表达载体pCAMBIA1300连接后转入农杆菌GV3101,再通过农杆菌介导的烟草瞬时表达方法,初步鉴定这4... 文章运用RT-PCR方法,从芒果亚洲炭疽菌(Colletotrichum asianum)中克隆了4个CFEM候选效应蛋白基因(编号Cacfem1-Cacfem4),并将其分别与植物表达载体pCAMBIA1300连接后转入农杆菌GV3101,再通过农杆菌介导的烟草瞬时表达方法,初步鉴定这4个CFEM候选效应蛋白对烟草叶片的致病作用。结果表明,4个CFEM候选效应蛋白并不能直接诱导烟草叶片细胞坏死,但Cacfem2能有效抑制由Bax免疫激发子诱导的烟草叶片细胞坏死;进一步分析发现,Cacfem2能显著(P<0.05)抑制由flg 22多肽诱导的烟草防卫基因NbGras2、NbPti5和Nbacre31的表达上调,与egfp+flg 22(对照处理)相比,3个防卫基因的表达量分别下降了91.20%、88.29%和68.34%。研究结果为深入解析亚洲炭疽菌CFEM类效应蛋白的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 亚洲炭疽菌 cfem效应蛋白 瞬时表达 致病作用
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草莓胶孢炭疽菌CFEM候选效应子的生物信息学鉴定及其侵染过程中的转录分析 被引量:11
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作者 张丽勍 段可 +2 位作者 邹小花 何成勇 高清华 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期43-51,共9页
病原真菌通常分泌效应子到寄主组织中调控寄主的生理过程,从而有利于其侵染。CFEM(common in several fungal extracellular membrane)蛋白是真菌所独有的,且与致病性密切相关。本研究利用Pfam数据库对草莓胶孢炭疽菌全基因组进行搜索,... 病原真菌通常分泌效应子到寄主组织中调控寄主的生理过程,从而有利于其侵染。CFEM(common in several fungal extracellular membrane)蛋白是真菌所独有的,且与致病性密切相关。本研究利用Pfam数据库对草莓胶孢炭疽菌全基因组进行搜索,鉴定获得22个CFEM蛋白。对CFEM蛋白的信号肽、跨膜结构域和亚细胞定位进行分析,结果表明仅有8个CFEM蛋白为分泌蛋白。对CFEM分泌蛋白在不同侵染阶段的转录情况进行转录组学及RT-PCR分析,结果显示8个CFEM蛋白在侵染后不同时期均有表达。其中,1个CFEM分泌蛋白于附着胞形成期特异表达,2个于活体寄生阶段特异表达,2个于死体寄生阶段特异表达。综合上述分析结果,预测这8个分泌蛋白可能为草莓胶孢炭疽菌的效应子。本研究为深入解析植物病原真菌CFEM效应子提供了理论依据。 展开更多
关键词 胶孢炭疽菌 效应子 cfem蛋白
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辣椒胶孢炭疽菌CFEM效应因子鉴定及转录组分析 被引量:4
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作者 刘思珍 欧阳超 +10 位作者 满益龙 盛家伟 陈岳 张鑫 郑立敏 李智强 李大伟 张德咏 刘勇 王运生 谭新球 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1074-1082,共9页
[目的]本文旨在研究辣椒胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)常见真菌细胞外膜蛋白(common in several fungal extracellular membrane proteins,CFEM)的组成和结构。[方法]以辣椒胶孢炭疽菌CSLL^(-1)1的基因组为研究对象,通过... [目的]本文旨在研究辣椒胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)常见真菌细胞外膜蛋白(common in several fungal extracellular membrane proteins,CFEM)的组成和结构。[方法]以辣椒胶孢炭疽菌CSLL^(-1)1的基因组为研究对象,通过生物信息学分析其CFEM效应因子的信号肽、跨膜结构域和亚细胞定位信号等结构特征;利用转录组学途径分析其在病菌与寄主互作过程中的表达特征,并对部分CFEM效应因子进行亚细胞定位分析。[结果]CSLL^(-1)1共编码30个CFEM效应因子,其中26个具有信号肽并可分泌至胞外;17个含有数目不等的跨膜结构域。CFEM效应因子Cghn02929、Cghn09727、Cghn12645和Cghn14146在侵染辣椒果实各阶段均具有较高表达水平,推测其可能参与病菌整个侵染过程。Cghn14146、Cghn09727和Cghn13279定位于细胞膜和细胞质,而Cghn02929、Cghn13471定位于细胞核、细胞膜和细胞质。[结论]明确了辣椒胶孢炭疽菌CFEM效应因子的组成和结构特征,探明了CFEM效应因子间的表达水平和亚细胞定位差异。 展开更多
关键词 辣椒 胶孢炭疽菌 cfem效应因子 生物信息学分析 亚细胞定位
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禾谷炭疽菌CFEM效应子的生物信息学鉴定与转录分析 被引量:12
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作者 井忠英 王国梁 刘文德 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期81-86,共6页
植物病原真菌效应子是指可以改变寄主植物细胞结构或者细胞功能的分泌蛋白或其他小分子物质。效应子对病原真菌的侵入、扩展以及致病发挥着至关重要的作用,是植物病原真菌与寄主的互作不断演化的必然结果。真菌特有的CFEM(common in sev... 植物病原真菌效应子是指可以改变寄主植物细胞结构或者细胞功能的分泌蛋白或其他小分子物质。效应子对病原真菌的侵入、扩展以及致病发挥着至关重要的作用,是植物病原真菌与寄主的互作不断演化的必然结果。真菌特有的CFEM(common in several fungal extracellular membrane protein)蛋白对于病原真菌的致病性起重要作用,一些能够被分泌到胞外的CFEM蛋白被证明是病原真菌效应子。由禾谷炭疽菌(Colletotrichum graminicola)引起的玉米炭疽病是玉米上的重要病害,常年造成严重损失。本研究运用生物信息学工具对禾谷炭疽菌中的CFEM蛋白进行信号肽分析和亚细胞定位分析,进而通过转录分析明确禾谷炭疽菌CFEM蛋白的表达时期。分析结果表明,该病原真菌编码32个CFEM蛋白,其中22个具有信号肽并可分泌至胞外,为分泌蛋白。转录分析表明,10个CFEM分泌蛋白于病菌侵染时附着胞形成期表达,2个CFEM分泌蛋白于侵染后的活体寄生阶段表达,1个于死体寄生阶段表达,其余9个CFEM分泌蛋白在病菌侵染时期的3个阶段均稳定表达。结合生物信息学和转录分析结果,我们预测这22个CFEM分泌蛋白为禾谷炭疽菌致病相关的效应子(简称CFEM效应子)。明确禾谷炭疽菌中CFEM蛋白数量,预测病菌致病相关的CFEM效应子组成,可为开展病原真菌CFEM蛋白介导的病菌—寄主互作研究奠定基础,并为玉米炭疽病的防治和抗性育种研究提供参考。 展开更多
关键词 禾谷炭疽菌 cfem效应子 生物信息学分析
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Bioinformatic analysis and functional characterization of the cfem proteins in maize anthracnose fungus Colletotrichum graminicola 被引量:9
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作者 GONG An-dong JING Zhong-ying +3 位作者 ZHANG Kai TAN Qing-qun WANG Guo-liang LIU Wen-de 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第2期541-550,共10页
Fungal secreted proteins that contain the Common in Fungal Extracellular Membrane(CFEM)domain are important for pathogenicity.The hemibiotrophic fungus Colletotrichum graminicola causes the serious anthracnose disease... Fungal secreted proteins that contain the Common in Fungal Extracellular Membrane(CFEM)domain are important for pathogenicity.The hemibiotrophic fungus Colletotrichum graminicola causes the serious anthracnose disease of maize.In this study,we identified 24 CgCFEM proteins in the genome of C.graminicola.Phylogenic analysis revealed that these 24 proteins(CgCFEM1–24)can be divided into 2 clades based on the presence of the trans-membrane domain.Sequence alignment analysis indicated that the amino acids of the CFEM domain are highly conserved and contain 8 spaced cysteines,with the exception that CgCFEM1 and CgCFEM24 lack 1 and 2 cysteines,respectively.Ten CgCFEM proteins with a signal peptide and without the trans-membrane domain were considered as candidate effectors and,thus were selected for structural prediction and functional analyses.The CFEM domain in the candidate effectors can form a helical-basket structure homologous to the Csa2 protein in Candida albicans,which is responsible for haem acquisition and pathogenicity.Subcellular localization analysis revealed that these effectors accumulate in the cell membrane,nucleus,and cytosolic bodies.Additionally,5 effectors,CgCFEM6,7,8,9 and 15,can suppress the BAX-induced programmed cell death in Nicotiana benthamiana with or without the signal peptide.These results demonstrate that these 10 CgCFEM candidate effectors with different structures and subcellular localizations in host cells may play important roles during the pathogenic processes on maize plants. 展开更多
关键词 cfem domain candidate effector anthracnose disease MAIZE Colletotrichum graminicola
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