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指数富集的配体系统进化技术筛选大肠杆菌表达的人CD20胞外蛋白特异性适配体
1
作者 陈凡 杨凡 +5 位作者 高蕾 胡月 薛云 周菁 康建华 王伟 《生物工程学报》 北大核心 2025年第4期1467-1477,共11页
CD20是B细胞淋巴瘤表面标志蛋白,其膜外区是特异性抗体和药物的作用靶点。为了获得靶向CD20的特异性适配体,首先根据密码子简并性对CD20胞外区基因进行优化,使之易于在大肠杆菌中表达;然后将优化后的基因克隆到pGEX-4T-1载体中,转化到... CD20是B细胞淋巴瘤表面标志蛋白,其膜外区是特异性抗体和药物的作用靶点。为了获得靶向CD20的特异性适配体,首先根据密码子简并性对CD20胞外区基因进行优化,使之易于在大肠杆菌中表达;然后将优化后的基因克隆到pGEX-4T-1载体中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达;蛋白纯化后用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定;通过指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选出与融合蛋白特异性结合的ssDNA适配体,并用流式细胞术检测适配体与CD20的亲和力;再通过细胞毒性试验检测适配体抑制B淋巴瘤细胞的效果。本研究建立了CD20的原核表达方法,获得了特异性结合CD20胞外区蛋白的适配体,为靶向CD20的治疗药物的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 cd20 基因优化 原核表达 指数富集的配体系统进化技术 适配体
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中药内服、外敷治疗浆细胞性乳腺炎(肿块期)的疗效观察及其对外周血CD3、CD20、CD68和炎性因子表达的影响
2
作者 吴燕 方珍 《中国中医药科技》 2025年第2期202-206,共5页
目的:观察中药内服、外敷治疗浆细胞性乳腺炎(PCM)(肿块期)的临床疗效及其对外周血CD3、CD20、CD68和炎性因子水平的影响。方法:选择本院甲状腺乳腺外科2020年1月—2023年6月收治的女性PCM患者86例,按照随机数字表法分为观察组和对照组... 目的:观察中药内服、外敷治疗浆细胞性乳腺炎(PCM)(肿块期)的临床疗效及其对外周血CD3、CD20、CD68和炎性因子水平的影响。方法:选择本院甲状腺乳腺外科2020年1月—2023年6月收治的女性PCM患者86例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组43例;对照组予以甲泼尼龙片、奥美拉唑肠溶胶囊口服,并口服中药疏肝清热方,观察组在对照组治疗基础予以中药乳痈膏外敷,两组疗程均为4周。比较两组患者治疗前后中医症状评分、肿块大小、疼痛视觉模拟评分(VAS),并比较两组患者外周血CD3、CD20、CD68、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,比较两组治疗总有效率和12个月复发率。结果:治疗后观察组总有效率高于对照组(P<0.05);观察组治疗后各项中医症状评分、肿块最大径、疼痛VAS评分均低于对照组(P<0.01);外周血CD3、CD20、CD68、IL-6、IL-1β、TNF-α含量均低于对照组(P<0.01),随访12个月复发率低于对照组(P<0.05)。结论:疏肝清热方内服联合乳痈膏外敷治疗肿块型PCM患者效果显著,可有效减轻炎症反应,抑制机体的免疫应答,改善中医症状,缩小肿块,减轻疼痛,降低复发率。 展开更多
关键词 浆细胞性乳腺炎 肿块期 疏肝清热方 乳痈膏 CD3、cd20、CD68、IL-6 IL-1β TNF-α
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猫CD20特异性单域抗体的制备及鉴定
3
作者 李濮辰 包福祥 +5 位作者 刘艳龙 赵绮欢 高敏 李宝慧 祁娜 王宇 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第11期1494-1501,共8页
本试验利用猫CD20胞外区多肽免疫成年双峰驼,扩增得到的单域抗体基因转化大肠杆菌TG1中,构建噬菌体抗体库。对该抗体库进行富集与筛选,得到与猫CD20胞外区多肽有高结合活性的重组噬菌体,将阳性克隆基因连接至原核表达载体pET-22b(+),表... 本试验利用猫CD20胞外区多肽免疫成年双峰驼,扩增得到的单域抗体基因转化大肠杆菌TG1中,构建噬菌体抗体库。对该抗体库进行富集与筛选,得到与猫CD20胞外区多肽有高结合活性的重组噬菌体,将阳性克隆基因连接至原核表达载体pET-22b(+),表达得到抗猫CD20特异性单域抗体,通过ELISA、Western-blot以及细胞免疫荧光等试验方法对制备的抗CD20特异性单域抗体的亲和活性进行了鉴定。结果表明,该抗体具有较高的亲和力,显示出良好的抗原结合活性和免疫学反应性。本研究对以CD20为靶点的猫B细胞淋巴瘤的诊断和治疗提供了新手段,具有潜在的临床应用价值和科学研究意义。 展开更多
关键词 猫cd20 单域抗体 噬菌体展示技术 原核表达 噬菌体ELISA
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抗CD20单抗在儿童难治性肾病综合征中的临床应用进展
4
作者 向金波 沈官国 +5 位作者 李政 胡小燕 曹婷婷 徐自然 丁婷 李静波 《中国药房》 北大核心 2025年第16期2078-2084,共7页
抗CD20单抗在儿童难治性肾病综合征(RNS)的治疗中具有有效性。第一代利妥昔单抗的临床应用最为广泛,其对RNS患儿的疗效确切,获得了指南推荐,尤其对微小病变性肾病的缓解率较高,可显著减少激素和免疫抑制剂的累积使用量;第二代奥法妥木... 抗CD20单抗在儿童难治性肾病综合征(RNS)的治疗中具有有效性。第一代利妥昔单抗的临床应用最为广泛,其对RNS患儿的疗效确切,获得了指南推荐,尤其对微小病变性肾病的缓解率较高,可显著减少激素和免疫抑制剂的累积使用量;第二代奥法妥木单抗在利妥昔单抗不耐受或耐药患者中有替代治疗潜力;第三代奥妥珠单抗则在利妥昔单抗耐药、移植后复发等复杂病例中显现出较好的疗效。但关于利妥昔单抗的治疗剂量优化,以及奥法妥木单抗和奥妥珠单抗相较于利妥昔单抗治疗儿童RNS是否更具优势,仍存在一定争议。抗CD20单抗最常见的不良反应是输液反应,长期不良事件主要是持续免疫抑制和感染风险增加。利妥昔单抗在儿童RNS的治疗中具有显著的经济性优势,今后需开展基于中国医疗环境的药物经济学研究以评价奥法妥木单抗和奥妥珠单抗在儿童RNS中的经济性。由于目前奥法妥木单抗与奥妥珠单抗在该领域的使用仍属于超说明书用药,临床须在严格评估患者获益和风险后使用。 展开更多
关键词 难治性肾病综合征 儿童 抗cd20单抗 利妥昔单抗 奥法妥木单抗 奥妥珠单抗
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CD20+的肿瘤期亲毛囊性蕈样肉芽肿1例
5
作者 李曼 谢建兰 +4 位作者 祝雪晴 孟凌轩 常远 梁桂熔 禚风麟 《皮肤科学通报》 2025年第5期554-558,共5页
男,67岁,躯干四肢红斑、斑块5年,头皮斑块、肿物半年伴瘙痒。皮肤科情况:躯干四肢散在对称性红色斑疹,界限清楚,前额、枕部可见红色斑块,头顶右侧1处直径2 cm大小红色肿物,质地硬,表面毛发缺失。毛发镜检查结果示:脱发区可见毛囊角栓、... 男,67岁,躯干四肢红斑、斑块5年,头皮斑块、肿物半年伴瘙痒。皮肤科情况:躯干四肢散在对称性红色斑疹,界限清楚,前额、枕部可见红色斑块,头顶右侧1处直径2 cm大小红色肿物,质地硬,表面毛发缺失。毛发镜检查结果示:脱发区可见毛囊角栓、黑点征、断发,毛囊周围可见粗大的分支状血管。皮损组织病理学检查结果示:真皮内淋巴样细胞弥漫性浸润,可见核大、胞浆淡然的异型细胞和嗜毛囊现象。免疫组织化学染色结果示:CD3、CD4阳性,CD8部分阳性,Ki-67约30%阳性,CD20阳性(细胞深染,小细胞为主,考虑为反应性B细胞),CD30部分阳性。T细胞受体基因重排结果示:TCRβ及TCRγ重排阳性。诊断:亲毛囊性蕈样肉芽肿(肿瘤期)。 展开更多
关键词 蕈样肉芽肿 毛囊 cd20 B细胞
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CD20单抗联合苯达莫司汀一线治疗滤泡性淋巴瘤疗效和安全性分析
6
作者 贝丽叶 刘文宾 《浙江医学》 2025年第10期1065-1070,共6页
目的评估CD20单抗联合苯达莫司汀一线治疗初诊滤泡性淋巴瘤(FL)的疗效和安全性。方法回顾性分析2020年3月至2024年3月在浙江省中医院接受CD20单抗联合苯达莫司汀一线治疗的47例初诊FL患者临床资料,其中接受利妥昔单抗+苯达莫司汀治疗27... 目的评估CD20单抗联合苯达莫司汀一线治疗初诊滤泡性淋巴瘤(FL)的疗效和安全性。方法回顾性分析2020年3月至2024年3月在浙江省中医院接受CD20单抗联合苯达莫司汀一线治疗的47例初诊FL患者临床资料,其中接受利妥昔单抗+苯达莫司汀治疗27例(BR组),接受奥妥珠单抗+苯达莫司汀治疗20例(GB组)。比较两组患者治疗后的总体反应率(ORR)、完全缓解率、无进展生存率、总生存率和不良事件(AEs)发生率。结果47例FL患者中完成≥4个疗程诱导治疗45例(95.7%),34例(72.3%)进入维持阶段。中期评估患者ORR为100.0%,完全缓解率为40.0%,其中BR组34.6%,GB组47.4%。诱导结束时患者完全缓解率为86.4%,其中BR组87.5%,GB组83.3%。中位随访27.8个月,患者无进展生存率为88.2%,其中BR组86.3%,GB组100.0%;总生存率为94.7%,其中BR组94.1%,GB组100.0%;两组患者无进展生存率和总生存率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。BR组中,与1~2级FL患者相比,3a级FL患者总生存率较低(P=0.037)。诱导化疗期间,发生至少1次AEs患者45例(95.7%),AEs主要为1/2级。发生3/4级血液学AEs患者13例(27.7%),表现为中性粒细胞减少9例(19.1%)、血小板减少5例(10.6%)、贫血1例(2.1%)。发生非血液学AEs患者34例(72.3%),主要表现为转氨酶升高(18例,38.3%)和感染(16例,34.0%),其中转氨酶升高3/4级AEs发生率为4.3%(2例),感染3/4级AEs发生率为8.5%(4例)。维持期间,发生3/4级AEs患者中有2例感染和1例皮疹,无3/4级血液学AEs。结论CD20单抗联合苯达莫司汀一线治疗初诊FL展现出可耐受的安全性和良好的疗效。 展开更多
关键词 滤泡性淋巴瘤 苯达莫司汀 cd20单抗 一线治疗
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抗CD20单克隆抗体联合FcRn拮抗剂治疗多种神经节苷脂抗体阳性的慢性吉兰-巴雷综合征1例 被引量：2
7
作者 崔凯丽 黄培君 苏庆杰 《河北医学》 2025年第1期174-176,共3页
1病历报告患者,男性,43岁,因“四肢无力5d”于2023年12月16日入院。患者5d前无明显诱因出现双上肢无力,表现为双上肢握物和抬举困难,随后出现双下肢无力,表现为活动后步态不稳,蹲起和站立困难。病情逐渐加重,四肢肌力进一步下降,出现饮... 1病历报告患者,男性,43岁,因“四肢无力5d”于2023年12月16日入院。患者5d前无明显诱因出现双上肢无力,表现为双上肢握物和抬举困难,随后出现双下肢无力,表现为活动后步态不稳,蹲起和站立困难。病情逐渐加重,四肢肌力进一步下降,出现饮水呛咳、吞咽困难及喉咙异物感。查体:神志清醒,心肺腹无明显异常,四肢肌张力减弱,双侧肢体肌力4级,双上肢腱反射减退,双下肢腱反射消失,感觉系统及浅反射均未见异常,生理反射存在,病理反射未引出,脑膜刺激征阴性。 展开更多
关键词 慢性吉兰-巴雷综合征 神经节苷脂抗体 抗cd20单克隆抗体 FcRn拮抗剂
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B细胞膜CD20抗原的分布与单分子力谱探测 被引量：7
8
作者 王秋兰 卢育洪 +2 位作者 李盛璞 王牡 蔡继业 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期131-136,共6页
CD20抗原分子在B细胞上表达下降是慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)的标志性特征。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和量子点标记相结合的方法对正常和B-CLL外周血CD20+B淋巴细胞膜表面CD20抗原分子的表达及分布进行了荧光成像。同时,采用原... CD20抗原分子在B细胞上表达下降是慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)的标志性特征。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和量子点标记相结合的方法对正常和B-CLL外周血CD20+B淋巴细胞膜表面CD20抗原分子的表达及分布进行了荧光成像。同时,采用原子力显微镜(AFM)对CD20+B细胞的形貌及超微结构特征进行了表征,并且将AFM针尖用生物素化的单克隆抗体进行修饰,对CD20+B细胞表面的CD20抗原-抗体之间的单分子力谱进行了探测。LSCM荧光图像显示,B-CLL CD20+B淋巴细胞上CD20分子的表达量比正常CD20+B淋巴细胞显著降低。AFM结果显示,B-CLL CD20+B淋巴细胞超微结构比正常的粗糙。力谱结果显示,CD20抗原-抗体的相互作用力大约是非特异性黏附力的5倍,CD20分子在正常CD20+B淋巴细胞膜上分布比较均匀,小部分有聚集现象,反之,在B-CLL CD20+B淋巴细胞膜表面分布稀疏。利用以上两种方法能进一步观察到B-CLL外周血B淋巴细胞的异常,并在一定程度上解释临床上B-CLL病人对利妥昔的低反应现象,为针对抗原CD20的治疗用药选择提供参考。 展开更多
关键词 B-CLL 外周血cd20+B淋巴细胞 cd20分子 LSCM AFM
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体外研究抗CD20单克隆抗体对骨髓瘤细胞的细胞毒性作用 被引量：2
9
作者 周振海 李娟 +3 位作者 陈运贤 罗绍凯 李小银 洪文德 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1459-1463,共5页
目的 :体外探讨上调多发性骨髓瘤 (MM)细胞表面CD2 0抗原表达后 ,抗CD2 0单克隆抗体美罗华对骨髓瘤细胞的细胞毒性作用。方法 :将浓度为 (0 - 80 0 )× 10 3 U/L的重组人干扰素γ(hrγ -IFN) ,分别与 10例初治(初治组 )和 10例复发... 目的 :体外探讨上调多发性骨髓瘤 (MM)细胞表面CD2 0抗原表达后 ,抗CD2 0单克隆抗体美罗华对骨髓瘤细胞的细胞毒性作用。方法 :将浓度为 (0 - 80 0 )× 10 3 U/L的重组人干扰素γ(hrγ -IFN) ,分别与 10例初治(初治组 )和 10例复发难治 (难治组 )的MM患者瘤细胞共同培养 ,流式细胞仪测定培养前后瘤细胞表面CD2 0的表达 ;应用MTT比色法分析不同浓度美罗华对CD2 0抗原表达上调后瘤细胞的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用 (AD CC)和补体依赖性细胞毒作用 (CDC)。结果 :hrγ -IFN浓度分别≥ 5× 10 4U/L或≥ 1× 10 5U/L ,可明显增加初治组或难治组瘤细胞表面CD2 0的表达 ,在用 8× 10 5U/Lhrγ -IFN上调瘤细胞表面CD2 0抗原的表达后 ,12mg/L和 16mg/L的美罗华分别能显著介导初治组和难治组效应细胞对MM瘤细胞的ADCC和激活CDC。结论 :体外hrγ -IFN上调MM瘤细胞表面CD2 0的表达后、抗CD2 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 抗原 cd20 抗体 cd20 干扰素γ 重组 抗体依赖细胞介导的细胞毒性
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CD20抗原及治疗性抗CD20抗体 被引量：10
10
作者 王玉刚 沈倍奋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第1期76-79,共4页
CD20是人类B淋巴细胞表面特有的标识。它高表达于所有正常B细胞和多数恶性B细胞表面,不会发生明显的内化和脱落,是治疗非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma,NHL)理想的靶抗原。其胞外区由43个氨基酸残基组成,但组成的抗原表位却异常... CD20是人类B淋巴细胞表面特有的标识。它高表达于所有正常B细胞和多数恶性B细胞表面,不会发生明显的内化和脱落,是治疗非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma,NHL)理想的靶抗原。其胞外区由43个氨基酸残基组成,但组成的抗原表位却异常多样。目前,已经有多种针对CD20抗原的抗体被FDA批准上市,用于B细胞非霍奇金淋巴瘤的治疗,都显示出良好的效果。 展开更多
关键词 cd20 抗原表位 抗cd20单克隆抗体
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膜表面CD3^(-)CD20^(+)血管免疫母细胞T淋巴瘤1例
11
作者 柯娟玉 陈雷 +5 位作者 李少波 余晓红 黄婷婷 李清 陈思平 汤希 《临床检验杂志》 2025年第3期238-240,共3页
该文报道了1例特殊免疫表型的血管免疫母细胞T淋巴瘤患者的诊疗过程。患者74岁,男性,因“下肢水肿”就诊,外周血涂片可见胞浆空泡状的异常淋巴细胞,外周血流式细胞术显示,异常T淋巴细胞跨系表达B淋巴细胞标志——CD20,且丢失T淋巴细胞... 该文报道了1例特殊免疫表型的血管免疫母细胞T淋巴瘤患者的诊疗过程。患者74岁,男性,因“下肢水肿”就诊,外周血涂片可见胞浆空泡状的异常淋巴细胞,外周血流式细胞术显示,异常T淋巴细胞跨系表达B淋巴细胞标志——CD20,且丢失T淋巴细胞标志——膜表面CD3(mCD3)。后续结合病理活检、染色体分析及分子生物学分析等综合检查,确诊为血管免疫母细胞T淋巴瘤。血管免疫母细胞T淋巴瘤少见且预后差,病理活检为诊断金标准,但存在局限性。该案例证实,外周血形态学联合流式细胞学适用于早期、低创伤性筛查血管免疫母细胞T淋巴瘤,针对如跨系表达CD20这类特殊免疫表型开展靶向治疗,有望为该病的治疗提供新思路。 展开更多
关键词 血管免疫母细胞T淋巴瘤 CD3 cd20 诊疗
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抗CD20抗体治疗非霍奇金淋巴瘤 被引量：2
12
作者 张冠一 张久丁 +1 位作者 陈惠鹏 胡显文 《中国医药生物技术》 CSCD 2009年第2期140-143,共4页
非霍奇金淋巴瘤（non—hodgkin＇s lymphoma，NHL）绝大多数是B细胞来源的，是最常见的血液系统恶性肿瘤，是威胁人类生命的10大恶性肿瘤之一。NHL还是我国目前发病率增长速度最快的血液系统恶性肿瘤。但是许多化疗药物对NHL的治疗效果... 非霍奇金淋巴瘤（non—hodgkin＇s lymphoma，NHL）绝大多数是B细胞来源的，是最常见的血液系统恶性肿瘤，是威胁人类生命的10大恶性肿瘤之一。NHL还是我国目前发病率增长速度最快的血液系统恶性肿瘤。但是许多化疗药物对NHL的治疗效果并不好。1997年，疗效更好、副作用更小的抗CD20单克隆抗体——美罗华应用于NHL的治疗中，死亡率得到控制并逐渐下降。在之后的10年时间里，人们摸索出了多种基于美罗华的治疗方案，旨在提高美罗华功效、验证其他治疗性单克隆抗体和整合多种抗体的治疗方案，并取得了长足的进步， 展开更多
关键词 抗cd20抗体治疗 非霍奇金淋巴瘤 血液系统恶性肿瘤 cd20单克隆抗体 LYMPHOMA 治疗性单克隆抗体 治疗效果 治疗方案
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抗CD20单抗药物治疗原发性局灶节段硬化性肾小球肾炎的研究进展
13
作者 虞婧婷 朱斌 《浙江中西医结合杂志》 2025年第2期184-188,共5页
原发性局灶节段性肾小球硬化(primary focal segmental glomerulosclerosis,PFSGS)是临床常见的肾小球疾病,其主要病理表现为局灶性(受累肾小球<50%)、节段性(累及肾小球部分小叶)肾小球硬化,临床表现为大量蛋白尿/肾病综合征。PFSG... 原发性局灶节段性肾小球硬化(primary focal segmental glomerulosclerosis,PFSGS)是临床常见的肾小球疾病,其主要病理表现为局灶性(受累肾小球<50%)、节段性(累及肾小球部分小叶)肾小球硬化,临床表现为大量蛋白尿/肾病综合征。PFSGS的发病率在过去的几十年里显著增加,全球发病率为每年十万分之0.2~1.8。 展开更多
关键词 抗cd20单抗药物 原发性局灶节段性肾小球硬化 进展
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抗CD20单克隆抗体治疗非霍奇金淋巴瘤的研究进展 被引量：1
14
作者 青晓艳 姚文秀 《肿瘤预防与治疗》 2010年第6期509-512,共4页
非霍奇金淋巴瘤（NHL）是临床常见的造血系统恶性肿瘤,是威胁人类生命的10大恶性肿瘤之一.大多数NHL起源于B淋巴细胞,95% 以上的B细胞NHL表达CD20抗原.NHL对标准的治疗,包括放疗和化疗敏感,有效率高,但复发率也高.除了传统的抑制细胞生... 非霍奇金淋巴瘤（NHL）是临床常见的造血系统恶性肿瘤,是威胁人类生命的10大恶性肿瘤之一.大多数NHL起源于B淋巴细胞,95% 以上的B细胞NHL表达CD20抗原.NHL对标准的治疗,包括放疗和化疗敏感,有效率高,但复发率也高.除了传统的抑制细胞生长的药物外，单克隆抗体的出现从本质上影响了人们对于非霍其金淋巴瘤（NHL）治疗的观念。 展开更多
关键词 单克隆抗体治疗 非霍奇金淋巴瘤 抗cd20 造血系统恶性肿瘤 非霍其金淋巴瘤 cd20抗原 B淋巴细胞 人类生命
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嵌合抗CD20 Fab′诱导Raji细胞凋亡
15
作者 范冬梅 赖增祖 +3 位作者 熊冬生 许元富 彭晖 杨纯正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第7期20-22,共3页
为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细... 为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细胞凋亡作用 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD2 0Fab′通过诱导Raji细胞凋亡的机制抑制Raji细胞生长。 展开更多
关键词 B淋巴细胞瘤 嵌合Fab' cd20 细胞凋亡 抗cd20Fab’ 临床 单克隆抗体 抗肿瘤活性
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抗CD20单克隆抗体治疗B细胞淋巴瘤的效应机制 被引量：5
16
作者 孙蕊 朱琰 +4 位作者 冯海凉 卞晓翠 顾蓓 王春景 刘玉琴 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第5期950-955,共6页
B细胞淋巴瘤是一种主要的非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL),95%以上的B细胞淋巴瘤均表达B细胞分化抗原CD20。尽管目前CD20在B细胞分化发育过程中的具体功能尚未阐明,但其特有的表达方式和在细胞膜上的分布特点决定了其成... B细胞淋巴瘤是一种主要的非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma,NHL),95%以上的B细胞淋巴瘤均表达B细胞分化抗原CD20。尽管目前CD20在B细胞分化发育过程中的具体功能尚未阐明,但其特有的表达方式和在细胞膜上的分布特点决定了其成为B细胞淋巴瘤靶向治疗的主要靶点。近十年来,随着抗CD20单克隆抗体的不断发展和进步,联合传统的CHOP化疗方案,在NHL的治疗中显示出良好的效果。虽然,近年来抗CD20单抗逐渐被用于B细胞相关的自身免疫病的治疗,但相关作用机制尚不明确。在针对NHL的临床治疗中,抗CD20单抗的疗效被认为依赖于效应器机制,主要有ADCC、CDC和细胞凋亡。虽然抗CD20在淋巴瘤的治疗中具有显著的免疫疗效,但部分瘤荷较大的病人出现了耐药和复发,循环中大量B细胞由于单抗的结合而被机体的单核巨噬细胞吞噬或NK细胞杀伤,机体出现成熟B细胞空缺期,同时单核巨噬细胞、NK细胞和补体大量消耗,造成机体免疫效应功能饱和和效应器耗竭。本文就抗CD20单克隆抗体在治疗淋巴瘤中的具体作用机制及可能造成的机体效应器耗竭问题做一简要的概述。 展开更多
关键词 B细胞淋巴瘤 cd20 抗cd20单克隆抗体 效应机制 效应器耗竭
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抗CD20单克隆抗体质量控制中生物学活性的趋势分析 被引量：11
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作者 刘春雨 王兰 +1 位作者 郭玮 高凯 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第1期58-62,共5页
目的对抗CD20单克隆抗体质量控制中的生物学活性进行趋势分析。方法利用人淋巴瘤Raji细胞株作为靶细胞,通过补体依赖的细胞毒作用（complement dependent cytotoxicity,CDC）,使用Cyto Tox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay试剂... 目的对抗CD20单克隆抗体质量控制中的生物学活性进行趋势分析。方法利用人淋巴瘤Raji细胞株作为靶细胞,通过补体依赖的细胞毒作用（complement dependent cytotoxicity,CDC）,使用Cyto Tox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay试剂监测抗CD20单抗的生物学活性,以抗CD20单抗参比品计算供试品的相对百分效价。通过对中国食品药品检定研究院（NIFDC）和企业质控实验室99批次抗CD20单抗生物学活性的检测结果,分别建立警戒限（均值±2 SD）和行动限（均值±3 SD）,绘制趋势分析图,并对检测结果进行连续性及周期性趋势分析。结果对2009～2013年某企业抗CD20单抗的生物学活性测定结果显示,抗CD20单抗供试品和参比品在CDC活性中均存在量效关系,且符合四参数方程：y=（A-D）/[1＋（X/C）^B]＋D。NIFDC体外CDC活性的相对百分效价为（99.95±10.83）%,企业自检的相对百分效价为（100.7±19.29）%;对上述结果进行连续性趋势分析,未发现超出行动限的结果;对不同年度间数据进行方差分析显示,年度间差异无统计学意义（P〉0.05）,数据具有可比性;对年度数据进行周期性趋势分析,结果均在行动限以内,无过高或过低结果,未出现严重的漂移或连续两批结果相差4 SD以上结果,总体趋势较平稳。结论首次通过对抗CD20单克隆抗体生物学活性的趋势分析,反映了该制品的批间一致性以及生产工艺的稳定性,也为其他单抗类治疗药物质量控制中关键质量属性的趋势分析提供了参考。 展开更多
关键词 cd20 单克隆抗体 质量控制 生物学活性 趋势分析
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重组嵌合抗CD20 IgG1型单克隆抗体的结构验证 被引量：13
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作者 陶磊 饶春明 +3 位作者 高凯 史新昌 赵阳 王军志 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期752-755,共4页
本文选择一种重组嵌合抗CD20 IgG1型单抗,应用液质联用仪及N-末端测序仪对其进行结构验证。对该单抗进行还原、烷基化、酶解等处理后,对其氨基酸序列、二硫键配对方式、糖链类型及糖基化位点进行分析测定。结果显示,该单抗轻、重链氨基... 本文选择一种重组嵌合抗CD20 IgG1型单抗,应用液质联用仪及N-末端测序仪对其进行结构验证。对该单抗进行还原、烷基化、酶解等处理后,对其氨基酸序列、二硫键配对方式、糖链类型及糖基化位点进行分析测定。结果显示,该单抗轻、重链氨基酸序列与理论一致。通过液质肽图的解析,对单抗10条二硫键的配对方式进行了验证;通过比较单抗重链切糖前、后的相对分子质量,预测单抗所含糖链类型为岩藻糖化的双触角复杂型N-糖,糖基化位点位于重链的Asn301上。本方法可为该类重组单抗制品的质量控制及其参考品的结构确证提供参考。 展开更多
关键词 抗cd20IgG1单克隆抗体 结构验证 高效液相色谱-质谱联用
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基于报告基因的抗CD20单克隆抗体ADCC生物学活性测定方法的建立 被引量：10
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作者 刘春雨 王兰 +5 位作者 郭玮 于传飞 张峰 王文波 李萌 高凯 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期94-98,共5页
利用Jurkat/NFAT-luc+FcγRIIIa转基因细胞系作为效应细胞,WIL2-S细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(Bio GloTM Luciferase Assay System)进行抗CD20单抗的ADCC生物学活性检测,并对实验条件进行优化及方法学验证。结果显示抗CD20... 利用Jurkat/NFAT-luc+FcγRIIIa转基因细胞系作为效应细胞,WIL2-S细胞系作为靶细胞,通过荧光素酶检测系统(Bio GloTM Luciferase Assay System)进行抗CD20单抗的ADCC生物学活性检测,并对实验条件进行优化及方法学验证。结果显示抗CD20单抗在该方法中存在量效关系,且符合四参数方程式:y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D。方法经优化确定靶细胞为WIL2-S细胞,抗体稀释浓度为18 000 ng·m L-1,1∶5倍的稀释倍数,效靶比为6∶1,诱导时间为6 h。该方法具有良好的专属性,8次独立实验的回归分析、线性及平行性均通过统计学检验;4个不同稀释组回收率样本经3次测定,相对效价分别为(44.39±3.93)%、(72.74±2.78)%、(128.28±7.01)%和(168.19±2.70)%,变异系数均小于10%,对应回收率分别为(88.78±7.85)%、(96.99±3.70)%、(102.63±5.61)%和(112.12±1.80)%。本研究利用转基因细胞法成功建立抗CD20单抗ADCC生物学活性检测方法,该方法专属性强、重复性好,准确性高,可作为抗CD20单抗ADCC生物学活性的常规检测方法。 展开更多
关键词 抗cd20单克隆抗体 ADCC 生物学活性
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抗CD20单克隆抗体治疗难治性自身免疫性溶血性贫血 被引量：9
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作者 王莉 徐卫 +2 位作者 李建勇 谢晓艳 盛瑞兰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期425-428,共4页
本研究初步观察抗CD20单克隆抗体利妥昔(rituximab)用于治疗难治性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的疗效和安全性。对1例用糖皮质激素、脾切除治疗无效的AIHA患者,采用利妥昔单克隆抗体,375mg/m2,每周1次,共4次,观察溶血症状的改变并监测... 本研究初步观察抗CD20单克隆抗体利妥昔(rituximab)用于治疗难治性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的疗效和安全性。对1例用糖皮质激素、脾切除治疗无效的AIHA患者,采用利妥昔单克隆抗体,375mg/m2,每周1次,共4次,观察溶血症状的改变并监测血红蛋白(Hb)水平及其它检验指标,同时观察有无不良反应发生。结果表明,首次治疗后11天乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(IBIL)逐渐下降,第45天降至正常范围;首剂治疗25天后Hb水平比治疗之前升高到95-100g/L以上。治疗后已4月余,患者仍处于缓解状态。治疗过程中未发生明显不良反应。结论:抗CD20单克隆抗体利妥昔用于治疗难治性自身免疫性溶血性贫血是有效而且安全的。 展开更多
关键词 抗cd20单克隆抗体 利妥昔 溶血性贫血 难治性自身免疫性溶血性贫血
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