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质粒载体介导CD基因对喉癌细胞的杀伤作用研究(英文) 被引量:2
1
作者 唐瑶云 肖健云 +2 位作者 赵素萍 冯永 胡瑾 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2005年第3期136-140,共5页
目的构建含酵母菌自杀基因CD的质粒表达载体pcDNA3.1()CMV.CD,并利用该载体进行喉癌Hep2细胞株转染研究,体外实验观察前体药物5FC对稳定表达CD基因的喉癌Hep2细胞株的杀伤作用。方法通过RTPCR从酵母菌RNA内扩增出CD基因全长CDS序列,将... 目的构建含酵母菌自杀基因CD的质粒表达载体pcDNA3.1()CMV.CD,并利用该载体进行喉癌Hep2细胞株转染研究,体外实验观察前体药物5FC对稳定表达CD基因的喉癌Hep2细胞株的杀伤作用。方法通过RTPCR从酵母菌RNA内扩增出CD基因全长CDS序列,将其定向克隆到质粒表达载体pcDNA3.1()CMV中,重组体质粒经XhoI/HindⅢ双酶切鉴定,并对重组体中的CD基因片段进行序列分析,将鉴定好的阳性重组质粒pcDNA3.1()CMV.CD运用电穿孔法转入喉癌Hep2细胞中。经300~600μg/mlG418正筛选14d和10μg/ml前体药物5FC负筛选,获得稳定表达CD基因的喉癌Hep2细胞株,提取该细胞株细胞的总RNA,经RTPCR鉴定CD基因的表达。MTT法观察不同浓度5FC对稳定表达CD基因的喉癌Hep2细胞及转染空白载体pcDNA3.1()CMV的对照组喉癌Hep2细胞的杀伤作用。结果阳性重组质粒pcDNA3.1()CMV.CD经XhoI/HindⅢ双酶切后获得5353bp的片段及496bp的插入片段,DNA自动序列分析证明重组体质粒含完整的477bp长的CD基因CDS序列。RTPCR从转染细胞总RNA中扩出453bp的预期片段。当添加不同浓度的5FC时,表达CD基因的Hep2细胞不同程度地被杀死,而对照组的细胞几乎未受到影响,两组细胞的相对生存率具有显著差异性(P<0.05)。结论成功构建了质粒表达载体pcDNA3.1()CMV.CD,建立了稳定表达酵母菌CD基因的喉癌表达CD基因的Hep2细胞株,表达CD基因的Hep2细胞可以被5FC杀死。 展开更多
关键词 自杀基因 cd载体 基因治疗 喉肿瘤/治疗
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含有CD基因的腺病毒载体的构建 被引量:2
2
作者 高军 朱伟 +3 位作者 崔龙 龙建秋 谷爱梅 李茂 《海军医学杂志》 1999年第2期132-135,共4页
目的 :构建携带CD基因和LacZ报告基因的腺病毒载体。方法 :先将真核表达载体质粒 pCI中的转录框架构建入腺病毒载体中 ,后再将CD和LacZ基因分别装配到框架的多克隆位点内。结果 :经过酶切鉴定成功地构建了分别携带CD基因和LacZ报告基因... 目的 :构建携带CD基因和LacZ报告基因的腺病毒载体。方法 :先将真核表达载体质粒 pCI中的转录框架构建入腺病毒载体中 ,后再将CD和LacZ基因分别装配到框架的多克隆位点内。结果 :经过酶切鉴定成功地构建了分别携带CD基因和LacZ报告基因的腺病毒载体 ,对肿瘤的前药转换基因治疗有重要意义。 展开更多
关键词 基因治疗 腺病毒载体 cd基因 载体构建
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CD147慢病毒表达载体的构建及稳定转染A549细胞系的建立 被引量:1
3
作者 杨绍兴 汤传昊 +2 位作者 王思涵 宋三泰 刘晓晴 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2012年第12期694-700,共7页
背景与目的 CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白,可促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟构建CD147慢病毒表达载体,建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系,观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 RT-PCR扩增C... 背景与目的 CD147是一类位于肿瘤细胞膜表面的跨膜糖蛋白,可促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟构建CD147慢病毒表达载体,建立稳定过表达CD147的人肺腺癌A549细胞系,观察过表达CD147后对MMP-9及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法 RT-PCR扩增CD147基因全长序列,将序列插入pEGFP载体,构建pEGFP-CD147慢病毒表达载体,随后转入293FT细胞中进行慢病毒包装,用获得的慢病毒毒液感染人肺腺癌细胞系A549,建立稳定过表达CD147的A549细胞系。Real-timePCR检测MMP-9的变化情况,CCK-8及Transwell法检测人肺腺癌细胞增殖、侵袭能力的变化。结果经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了pEGFP-CD147慢病毒表达载体质粒。Real-timePCR和Westernblot检测显示,与对照组相比,转染pEGFP-CD147慢病毒表达载体组的细胞,CD147的表达在mRNA和蛋白两个水平均增高,成功建立了A549-CD147细胞系。上调CD147的表达后,MMP-9的mRNA表达水平明显升高。同时,A549-CD147细胞增殖和侵袭能力明显增加(P<0.05)。结论成功构建CD147慢病毒表达载体和A549-CD147细胞系,过表达CD147可上调MMP-9的表达,增强人肺腺癌细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 cd147 慢病毒载体 转染 增殖
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重组人血小板CD36基因真核表达载体的构建及蛋白表达 被引量:2
4
作者 付丽辉 张杰 +7 位作者 孙春昀 陈麟凤 冯倩 罗圆圆 张晓娟 王可 于洋 汪德清 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期557-560,共4页
目的制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的纯化表达蛋白胞外区30~439氨基酸残基段。方法提取人肝细胞组织总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30~Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMD18并转化大肠杆... 目的制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的纯化表达蛋白胞外区30~439氨基酸残基段。方法提取人肝细胞组织总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30~Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMD18并转化大肠杆菌DH5α,筛选获得阳性重组子pMD18-CD36,提取质粒。经序列测定后,将该基因插入到真核细胞瞬时表达载体pTE2上,构建成为pTE2-s-CD36-10 his真核瞬时表达载体。采用lipofectamine 2000(invitrogen)转染法,将重组质粒转染HEK-293细胞,表达产物经Ni2+2NTA柱层析纯化。结果 RT-PCR扩增获得了1.4 kb的片段。invitrogen测序,该序列分析结果与Genebank中的NM_001001547.2完全一致。SDS-PAGE证实转染的HEK-293细胞表达了人CD36抗原胞外区蛋白片段。结论利用构建的真核载体pTE2-s-CD36转染人胚肾细胞(HEK293)可高效表达CD36 Gly30~Asn439,得到纯化蛋白,为人血小板CD36表面抗原对血小板输注无效影响的深入研究奠定基础。 展开更多
关键词 cd36抗原 血小板 真核载体 蛋白表达
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CD14稳定沉默胃癌细胞系的建立及其侵袭能力研究 被引量:2
5
作者 李康 旦增 +3 位作者 王中华 德吉 陈晓红 刘明花 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期254-259,共6页
背景与目的:白细胞分化抗原14(cluster of differentiation antigen 14,CD14)为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的高亲和受体,能够识别革兰阴性菌、真菌以及结核杆菌并介导机体的炎性反应,为病菌引发多种细胞信号转导的第一步,在肿瘤组... 背景与目的:白细胞分化抗原14(cluster of differentiation antigen 14,CD14)为脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的高亲和受体,能够识别革兰阴性菌、真菌以及结核杆菌并介导机体的炎性反应,为病菌引发多种细胞信号转导的第一步,在肿瘤组织以及癌细胞中常呈异常表达。近来有研究指出,CD14启动子区的功能性突变能够影响CD14的表达,并增加幽门螺杆菌感染后罹患胃癌的风险,据此推测CD14与胃癌的发生、发展密切相关。本研究拟构建CD14-shRNA干扰载体,建立CD14稳定沉默的胃癌细胞系,初步探讨CD14对胃癌细胞侵袭能力的影响,以期为胃癌发病机制的研究奠定实验基础。方法:根据shRNA引物设计原则设计并合成4条CD14-shRNA序列,构建sh-CD14表达载体,转染MGC-803细胞,G418筛选稳转细胞系;RT-PCR检测CD14 mRNA的表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测CD14蛋白的表达;Transwell小室模型检测细胞的侵袭能力。结果:测序结果表明,CD14-shRNA表达载体构建成功并筛选得到了CD14稳定沉默的胃癌细胞系,其CD14 mRNA以及蛋白的表达分别降低了71.7%%和63.4%;与对照组相比CD14-shRNA组细胞侵袭能力显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:成功构建了CD14-shRNA干扰载体并获得了CD14稳定沉默的胃癌细胞系,初步证实CD14的沉默能够影响胃癌细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 白细胞分化抗原14 shRNA载体构建 胃癌细胞 侵袭
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放射敏感性启动子调控CD基因/5-FC自杀系统慢病毒载体的构建及^(125)I诱导表达的研究 被引量:3
6
作者 李玲 张春丽 +4 位作者 闫平 殷雷 康磊 赵倩 王荣福 《同位素》 CAS 2012年第3期165-170,共6页
合成了含8个CArG元件的放射敏感性启动子E8,将其连接于胞嘧啶脱氨酶(Cytosine Deaminase,CD)基因及GFP报告基因上游,构建了重组慢病毒载体pGC-FU-E8-codA-GFP。与慢病毒包装系统共转染293T细胞包装重组慢病毒颗粒E8-codA-GFP LV,研究重... 合成了含8个CArG元件的放射敏感性启动子E8,将其连接于胞嘧啶脱氨酶(Cytosine Deaminase,CD)基因及GFP报告基因上游,构建了重组慢病毒载体pGC-FU-E8-codA-GFP。与慢病毒包装系统共转染293T细胞包装重组慢病毒颗粒E8-codA-GFP LV,研究重组慢病毒感染EJ细胞在不同剂量125I的电离辐射下绿色荧光表达情况及其将5-FC转化为5-FU的能力。结果显示:构建的含有E8启动子及CD基因的重组慢病毒载体,包装的重组慢病毒滴度为2×108 TU/mL;经125I照射的重组慢病毒感染EJ细胞均可观察到绿色荧光,其细胞上清液均可检测到5-FC转化成的5-FU紫外峰,其中55.5kBq及74.0kBq 125I照射的细胞组绿色荧光明显,148kBq 125I照射的细胞组,其5-FU紫外峰最为明显。以上结果表明:本工作所构建的放射敏感性启动子调控CD基因/5-FC自杀系统重组慢病毒载体具有电离辐射调控作用,可在125I的电离辐射作用下诱导下游基因表达,为放射性核素125I联合CD基因/5-FC自杀系统对肿瘤细胞的治疗作用研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 125I 放射敏感性启动子 cd基因 GFP基因 慢病毒载体
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CD基因对人胰腺癌细胞株Patu 8988杀伤作用的研究 被引量:1
7
作者 潘雪 李兆申 +3 位作者 许国铭 崔龙 戴观荣 屠振兴 《实用癌症杂志》 2002年第2期119-121,共3页
目的 探讨腺病毒介导胞嘧啶脱氨酶 (CD )基因对人胰腺癌细胞株Patu 8988的杀伤作用。方法 采用细菌内同源重组方法 ,构建含胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因重组腺病毒载体 ,经 2 93细胞包装、扩增 ,氯化铯密度梯度离心制备纯化高效的重组腺病... 目的 探讨腺病毒介导胞嘧啶脱氨酶 (CD )基因对人胰腺癌细胞株Patu 8988的杀伤作用。方法 采用细菌内同源重组方法 ,构建含胞嘧啶脱氨酶 (CD)基因重组腺病毒载体 ,经 2 93细胞包装、扩增 ,氯化铯密度梯度离心制备纯化高效的重组腺病毒 ,体外转染人胰腺癌细胞株Patu 8988,并给予前药 5 Fc ,观察其体外杀伤效果。结果 含CD基因的腺病毒载体经酶切鉴定正确 ,包装纯化后 ,检测病毒滴度为 2× 10 11pfu/ml ,将重组腺病毒转染胰腺癌细胞株Patu 8988,加用前药 5 Fc后 ,转染CD基因的Patu 8988细胞及混育的胰腺癌细胞生长明显受抑制。结论 CD腺病毒不仅转染效果强 ,而且可直接或通过旁观者效应杀伤胰腺癌细胞。 展开更多
关键词 胰腺癌 腺病毒载体 胞嘧啶脱氨酶 基因治疗
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CD真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
8
作者 张巨峰 韦芳 +4 位作者 李惠明 黄陈 于慧 裘玮 黄倩 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第10期11-13,共3页
目的:构建含自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)的真核表达载体pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-CD,并进行哺乳动物细胞HEK293转染研究。方法:以本实验室保存的含CD基因全长的质粒为模版,用PCR方法扩增CD基因阅读框序列,并定向克隆到带有HAtag的pcD... 目的:构建含自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)的真核表达载体pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-CD,并进行哺乳动物细胞HEK293转染研究。方法:以本实验室保存的含CD基因全长的质粒为模版,用PCR方法扩增CD基因阅读框序列,并定向克隆到带有HAtag的pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z载体上,使目的基因与HAtag在同一阅读框。重组体质粒经EcoRI和BamHI双酶切鉴定,并对插入的CD基因片段进行测序,将鉴定好的阳性重组质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-CD用脂质体介导转染HEK293,提取细胞蛋白,western blot检测CD基因的表达情况。结果:阳性重组质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z CD经EcoRI和BamHI双酶切后,获得约为5.5kb片段和1.3kb插入片段,序列分析表明插入的片段与GenBank发布的序列一致,western blot检测到CD基因的表达。结论:成功构建了含自杀基因CD的真核表达质粒。 展开更多
关键词 自杀基因 cd基因 载体构建 基因表达
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真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL,pIRES2-EGFP/CD的构建和鉴定 被引量:2
9
作者 梁兵 袁芳 +3 位作者 殷建瑞 谭丽华 高庆春 高聪 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第1期21-23,共3页
目的构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础。方法将pCMV/CD质粒和pcDNA3.1(+)/TRAIL质粒行琼脂糖凝胶电泳检测,确定其完整性,并进行序列测定确定有无基因突变。pCMV... 目的构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础。方法将pCMV/CD质粒和pcDNA3.1(+)/TRAIL质粒行琼脂糖凝胶电泳检测,确定其完整性,并进行序列测定确定有无基因突变。pCMV/CD质粒用SacⅡ/XhoⅠ双酶切,pcDNA3.1(+)TRAIL质粒用BamHⅠ/XhoⅠ双酶切,将目的基因定向克隆到真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,转化E.coli DH5α感受态细胞,通过限制性内切酶双酶切、PCR及核酸序列分析等筛选、鉴定重组质粒。结果所构建的真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL经SacⅡ/XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.0、5.2 kb;pIRES2-EGFP/CD经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.3、5.2 kb。PCR及测序证实,pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD质粒基因组中分别包含TRAIL和CD基因。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用奠定了基础。 展开更多
关键词 真核表达载体 pIRES2-EGFP/TRAIL pIRES2-EGFP/cd
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β-地中海贫血CD41-42型突变基因重组载体的构建
10
作者 曾雅畅 李慕军 +3 位作者 陈萍 陈悦 陈静 庞莉莉 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第26期4369-4371,共3页
目的:构建β-地中海贫血CD41-42突变基因和基因调控区HS2、HS3全基因片段的真核表达重组载体,为β-地中海贫血CD41-42突变基因治疗的细胞模型奠定基础。方法:设计合成β-地中海贫血CD41-42突变纯合子患者的DNA特异性引物,扩增基因座控制... 目的:构建β-地中海贫血CD41-42突变基因和基因调控区HS2、HS3全基因片段的真核表达重组载体,为β-地中海贫血CD41-42突变基因治疗的细胞模型奠定基础。方法:设计合成β-地中海贫血CD41-42突变纯合子患者的DNA特异性引物,扩增基因座控制区(LCR)和CD41-42突变基因,插入载体pcDNA3.1-中,筛选阳性重组体,通过酶切分析及PCR进行鉴定。结果:扩增出2.1 kb CD41-42突变基因及5.5 kb LCR片段,酶切及测序结果证明重组载体构建成功,测序结果和引入方向正确。结论:成功构建了含人β-地中海贫血CD41-42基因的重组载体。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 基因座控制区 cd41-42突变基因 重组载体
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鼠抗人血小板CD36分子单克隆抗体的制备及活性分析
11
作者 陈麟凤 张杰 +5 位作者 杨嘉慧 罗圆圆 庄远 李卉 冯倩 汪德清 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期209-213,共5页
本研究旨在制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的鼠抗人单克隆抗体。提取人肝细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30-Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMD18并转化大肠杆菌DH5α,筛选获得阳性重组... 本研究旨在制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的鼠抗人单克隆抗体。提取人肝细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30-Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMD18并转化大肠杆菌DH5α,筛选获得阳性重组子pMD18-CD36,提取质粒。经序列测定后,将该基因插入到真核细胞瞬时表达载体pTE2上,构建成为pTE2-s-CD36-10 His真核瞬时表达载体。采用lipofectamine 2000转染法,将重组质粒转染至HEK293细胞,表达产物经Ni2+2NTA柱层析纯化。以制备的重组CD36蛋白免疫BALB/c小鼠后,取脾与小鼠骨髓瘤细胞融合,筛选出阳性克隆,行Western blot检测抗体结合活性。结果显示:RT-PCR扩增获得了1.4 kb的片段。经测序,该序列分析结果与GenBank中的NM_001001547.2完全一致。SDS-PAGE证实转染的HEK293细胞表达了人CD36抗原胞外区蛋白片段。鼠单克隆抗体在Western blot中可以识别重组CD36蛋白,灵敏度达到8 ng。结论:成功制备了抗人血小板CD36单克隆抗体,为临床筛选CD36阴性患者及献血员、深入研究人血小板CD36表面抗原对血小板输注无效的影响提供了实验基础。 展开更多
关键词 cd36抗原 血小板输注无效 真核载体 蛋白表达
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水稻低Cd累积相关基因RNA干扰载体及根特异性表达载体的构建 被引量:2
12
作者 陈煜娴 冯珊珊 +1 位作者 柴兴苹 柴团耀 《中国科学院大学学报(中英文)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期185-191,共7页
Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法... Cd极易被水稻等作物吸收并伴随食物链在人体内累积,严重威胁人类健康.基于水稻Cd累积机制的现有研究,克隆与水稻Cd累积相关的基因Os LCD和Os HMA3,并克隆一个维管组织特异性表达的启动子Os MTP11P,利用Gateway技术及传统酶切、连接方法,成功构建适用于水稻等单子叶植物农杆菌转化的RNA干扰载体pRI-M-LCD和根特异性表达载体p CB2022-H.期望通过这2个载体共转化水稻,使大量的Cd扣留在根细胞的液泡中,限制Cd向地上部分及籽粒中的转运,从而实现Cd在水稻籽粒中的低累积. 展开更多
关键词 水稻 RNA干扰 组织特异性表达 低镉累积 多基因转化 载体构建
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In vitro suppression of vascular smooth muscle cell proliferation using adenovirus-mediated transfer of the cd gene 被引量:1
13
作者 宁力 蔡振杰 +1 位作者 张伟达 许德华 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2000年第3期210-213,共4页
Objective : To develop a treatment strategy for restenosis with a replication-deficient recombinant adenovirus (AdCMVCD) containing the cd gent whose gene product phosphorylates the prodrug 5-flurocytosine to form a n... Objective : To develop a treatment strategy for restenosis with a replication-deficient recombinant adenovirus (AdCMVCD) containing the cd gent whose gene product phosphorylates the prodrug 5-flurocytosine to form a nucleoside analog that inhibits DNA synthesis. Methods: Cultured primary rabbit smooth muscle cell (SMC) infected with AdCMVCD was incubated in 5- flurocytosine-containing medium and assayed with a Coulter Counter on day 2, 6, 10, and 14 for the establish- ment of proliferation curves. In addition, to observe an inhibitory effect on neighboring SMC, only a portion of the SMC population received the cd transgene. Results : The antiproliferative effect of AdCMVCD was dependent on both concentation of virus and concentration of 5-flurocytosine . Transformed cells demonstrated a bystander effect wherein SMC expressing cd gene exerted an antiproliferative effect on neighboring cells that did not express cd gene . Conclusion:Theresult demonstrates the potential utility of adenovirus-mediated cd gene transfer for the treatment of restenosis after balloon injury. 展开更多
关键词 ADENOVIRUS vectorS cd GENE RESTENOSIS GENE therapy
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法向矢量耦合波分析法在微电子结构CD分析中的应用
14
作者 田尧 《大众科技》 2012年第6期78-81,共4页
光栅结构是微电子技术以及集成光学等方面常见的结构。其结构尺寸参数的测试技术在国际上已有很多年的发展历史,但还存在很大的研究和发展空间。当今比较有优势的方法是光栅衍射测量方法。该方法是基于精确的衍射理论,通过计算,可反演... 光栅结构是微电子技术以及集成光学等方面常见的结构。其结构尺寸参数的测试技术在国际上已有很多年的发展历史,但还存在很大的研究和发展空间。当今比较有优势的方法是光栅衍射测量方法。该方法是基于精确的衍射理论,通过计算,可反演出目标结构的某些关键尺寸。严格耦合波分析法(RCWA)是该理论的基础。RCWA在一维情况下得到完美的实现,但对二维光栅,则存在衍射展开阶次高,收敛慢的缺陷。文章进一步研究NV-RCWA,对比多种常见周期结构使用不同法向矢量场的效果。 展开更多
关键词 法向矢量耦合波分析法 微电子结构 cd分析应用
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基于相关域信息的支持向量机诱导式欺骗检测算法研究
15
作者 刘文祥 宋贻立 +2 位作者 叶小舟 肖伟 李蓬蓬 《宇航学报》 北大核心 2025年第6期1189-1202,共14页
针对全球导航卫星系统易受欺骗攻击的问题,提出一种基于相关域信息的支持向量机检测算法。传统方法存在依赖先验信息、多径干扰易虚警及特征选择主观等局限;相关域信息的支持向量机通过分析信号跟踪过程,提取相关器的同相和正交支路输出... 针对全球导航卫星系统易受欺骗攻击的问题,提出一种基于相关域信息的支持向量机检测算法。传统方法存在依赖先验信息、多径干扰易虚警及特征选择主观等局限;相关域信息的支持向量机通过分析信号跟踪过程,提取相关器的同相和正交支路输出,早迟码和即时码组合特征,并利用特征相关性及互信息分析优化特征组合,充分挖掘相关域信息。实验表明,在特征数量为6时该算法对欺骗与多径混合场景的检测正确率达95.61%,较传统支持向量机算法提升12%,各项指标均显著优于对比算法。在泛化能力评估中,相关域信息的支持向量机对未训练数据的准确率、精确率、召回率可达90%;经德州欺骗测试集验证,在场景2训练集和场景3迁移测试集上的准确率均大于98%。该方法有效提升了GNSS欺骗检测的精度与场景适应性,为复杂电磁环境下的鲁棒检测提供了新思路。 展开更多
关键词 诱导式欺骗 多径干扰 基于相关域信息的支持向量机(cd-SVM) 泛化能力
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新型鸭呼肠孤病毒I3-σB/σC蛋白疫苗的制备与免疫研究
16
作者 刘喆 罗烈柱 +3 位作者 周新瑞 黄允真 高诗敏 孙敏华 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第11期1445-1452,共8页
新型鸭呼肠孤病毒感染(NDR)是由NDRV引起的雏鸭高发病率和高病死率的传染病,主要导致患病鸭肝脾坏死。为开发安全高效的新型疫苗预防NDRV感染,通过构建NDRV-CD株σB/σC蛋白原核表达质粒p ET28a-NDRV-I3-σB/σC,重组蛋白经纯化后,联合... 新型鸭呼肠孤病毒感染(NDR)是由NDRV引起的雏鸭高发病率和高病死率的传染病,主要导致患病鸭肝脾坏死。为开发安全高效的新型疫苗预防NDRV感染,通过构建NDRV-CD株σB/σC蛋白原核表达质粒p ET28a-NDRV-I3-σB/σC,重组蛋白经纯化后,联合赛比克ISA 201 VG双相佐剂制备基于I3-01载体的亚单位疫苗,选取1日龄雏鸭分为I3-σB免疫组、I3-σC免疫组、全病毒灭活组及对照组进行免疫保护评价。结果显示,I3-σC免疫组一免后抗体效价极显著高于对照组,间隔13 d二免后抗体效价持续升高,并显著高于I3-σB免疫组及全病毒灭活组。二免后间隔14 d攻毒,并于攻毒后7 d测定各组肝脾病毒载量及第1~7天的排毒量,I3-σC免疫组肝脾病毒载量及肛拭子排毒量均显著低于I3-σB免疫组和全病毒灭活组;I3-σC免疫组肝脾无病变,保护效果最优。结果表明,I3-σC蛋白疫苗通过诱导高效中和抗体及抑制病毒复制,优于I3-σB蛋白疫苗和灭活疫苗的免疫效力。该试验为NDRV亚单位疫苗开发提供了理论依据,未来需优化免疫程序并探索多价疫苗策略以提升应用潜力。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒cd I3-01载体 I3-σB/σC蛋白疫苗 免疫攻毒
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部件冷却对二元俯仰矢量排气系统红外特征抑制实验 被引量:9
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作者 卢浩浩 吉洪湖 +2 位作者 王丁 刘健 王浩 《航空动力学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期2070-2079,共10页
实验测试了采用中心锥气膜冷却和喷管冲击-气膜冷却的二元俯仰(2D-CD)矢量排气系统,在几何偏转0°,10°,20°三种角度下,壁面温度和红外辐射特征分布,并与未冷却状态进行了对比分析。结果表明:前密后疏的气膜孔排布形式可... 实验测试了采用中心锥气膜冷却和喷管冲击-气膜冷却的二元俯仰(2D-CD)矢量排气系统,在几何偏转0°,10°,20°三种角度下,壁面温度和红外辐射特征分布,并与未冷却状态进行了对比分析。结果表明:前密后疏的气膜孔排布形式可有效减小热侧面高温区域大小。中心锥冷却时,密流比为0.8条件下壁面冷却效率达45%~63%,排气系统尾向±10°范围内红外辐射强度下降20%;但是由于冷气流注入,导致下游壁面(隔热屏、喷管)温度升高,在30°探测方向上红外辐射强度上升15%。喷管冷却时,收敛段(密流比为0.25)冷却效率达19%~33%,扩张段(密流比为0.65)冷却效率达75.5%~83.5%,侧壁段(密流比为0.65)冷却效率达78%~90%,导致在排气系统尾向15°~75°范围内,红外辐射强度下降30%以上,最大降幅达80%(几何偏转20°,宽边探测面30°探测方向)。 展开更多
关键词 二元俯仰(2D-cd)矢量喷管 矢量偏转 气膜冷却 冲击-气膜冷却 红外抑制
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二元俯仰矢量喷管排气系统红外特征模拟实验 被引量:6
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作者 卢浩浩 吉洪湖 +3 位作者 刘健 王丁 王浩 周兵 《航空动力学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1861-1868,共8页
实验研究了二元俯仰矢量喷管排气系统在几何偏转角0°,10°,20°三种状态下的壁面温度分布与红外辐射特征,并与基准轴对称喷管排气系统进行了对比分析。结果表明:二元俯仰矢量喷管排气系统的红外辐射特征相对基准轴对称喷... 实验研究了二元俯仰矢量喷管排气系统在几何偏转角0°,10°,20°三种状态下的壁面温度分布与红外辐射特征,并与基准轴对称喷管排气系统进行了对比分析。结果表明:二元俯仰矢量喷管排气系统的红外辐射特征相对基准轴对称喷管排气系统有明显下降,正尾向降幅约10%;随着几何偏转角的增加,隔热屏与收敛段的温度逐渐上升,偏转段压力侧壁面温度略有上升,吸力侧壁面温度略有下降,最大变化幅值30K;排气系统红外辐射强度随偏转角增大而增大,尾向15°~45°和-15°^-60°范围内增幅明显,最大增幅可达70%。 展开更多
关键词 排气系统 二元俯仰喷管 矢量偏转 红外辐射 轴对称喷管排气系统
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基于核函数的IVEC-SVM说话人识别系统研究 被引量:9
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作者 栗志意 张卫强 +1 位作者 何亮 刘加 《自动化学报》 EI CSCD 北大核心 2014年第4期780-784,共5页
在说话人识别研究中,基于身份认证向量(Identity vector,IVEC)的说话人建模方法可以有效地提取说话人信息,是目前处于国际前沿的建模方法.本文对身份认证向量后接支持向量机(Identity vector followed by support vector machine,IVEC-S... 在说话人识别研究中,基于身份认证向量(Identity vector,IVEC)的说话人建模方法可以有效地提取说话人信息,是目前处于国际前沿的建模方法.本文对身份认证向量后接支持向量机(Identity vector followed by support vector machine,IVEC-SVM)的说话人识别系统进行了研究,对比了该系统在十种不同核函数下的识别性能,并与文献中身份认证向量后接余弦距离打分(Identity vector followed by cosine distance scoring,IVEC-CDS)系统进行了比较.在美国国家标准技术局(American National Institute of Standards and Technology,NIST)组织的2010年电话信道—电话信道说话人识别核心评测数据库上的实验结果显示,基于核函数的IVEC-SVM系统性能明显优于IVEC-CDS的系统性能.此外,实验结果表明基于Spline核的IVEC-SVM系统可取得最好的识别性能,与IVEC-CDS系统相比,其等错点(Equal error rate,EER)在分数归一化前后分别降低了10%和3%. 展开更多
关键词 身份认证向量后接余弦距离打分 身份认证向量后接支持向量机 Spline核 说话人识别
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略阳乌鸡METTL21C基因克隆及超表达载体构建 被引量:2
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作者 路宏朝 李蕊清 +2 位作者 孙志阳 王令 张涛 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期346-352,共7页
旨在克隆略阳乌鸡 METTL21C基因,构建其超表达载体。采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测 METTL21C基因在略阳乌鸡7种组织中的表达,通过PCR扩增技术克隆 METTL21C基因完整的CDS区序列,分析其核苷酸序列及不同物种序列进化关系,将 METTL21... 旨在克隆略阳乌鸡 METTL21C基因,构建其超表达载体。采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测 METTL21C基因在略阳乌鸡7种组织中的表达,通过PCR扩增技术克隆 METTL21C基因完整的CDS区序列,分析其核苷酸序列及不同物种序列进化关系,将 METTL21C基因片段连接至pCD513B载体,构建其超表达载体并转染至293T细胞。结果显示: METTL21C基因在略阳乌鸡心肌中表达量最高,骨骼肌次之;克隆获得略阳乌鸡 METTL21C基因完整编码区序列,共747 bp,编码249个氨基酸残基,与原鸡的相应序列具有很高的同源性;构建的 METTL21C超表达载体能转染293T细胞并成功表达,可直接用于后续 METTL21C基因功能探索的研究。 展开更多
关键词 略阳乌鸡 METTL21C基因 cdS区克隆 超表达载体
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