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稳定表达IRF2基因DF-1细胞株的建立及其对H9N2 AIV复制的影响
1
作者 晋晨阳 马露露 +2 位作者 郭梓轩 赵青青 代曼曼 《中国农业大学学报》 北大核心 2025年第5期169-178,共10页
为构建一种稳定表达干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2,IRF2)的DF-1细胞株,本研究首先针对IRF2成功构建重组慢病毒,再用重组慢病毒感染DF-1细胞,通过嘌呤霉素及有限稀释法筛选获得IRF2过表达多克隆细胞株。对构建的细胞... 为构建一种稳定表达干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2,IRF2)的DF-1细胞株,本研究首先针对IRF2成功构建重组慢病毒,再用重组慢病毒感染DF-1细胞,通过嘌呤霉素及有限稀释法筛选获得IRF2过表达多克隆细胞株。对构建的细胞株进行活力检测、Real-time qPCR以及Western blot等方法验证IRF2的体外表达效率,病毒增殖试验验证该细胞株对H9N2 AIV复制的影响,最后,通过双荧光素报告系统验证IRF2对干扰素刺激基因的调控作用。结果表明:1)细胞活性检测显示,稳定表达IRF2对细胞活性无显著影响(P>0.05)。2)Realtime qPCR以及Western blot证明IRF2的mRNA水平和蛋白水平在筛选的细胞株中表达相较于对照组细胞极显著增高(P<0.001)。3)Real-time qPCR(P<0.001)、Western blot(P<0.01)、TCID50(P<0.01)的体外试验证明,过表达DF-1-IRF2细胞株具有促进H9N2 AIV增殖的作用。4)双荧光素报告系统结果表明,IRF2能够极显著抑制ISRE(P<0.01)和NF-κB(P<0.01)活性,显著抑制IRF7(P<0.05)的活性。综上,本研究成功构建能够稳定表达IRF2基因的DF-1-IRF2细胞株,其能够增强H9N2 AIV的复制水平,为进一步研究IRF2在H9N2 AIV复制机制中的作用提供基础。 展开更多
关键词 H9N2 aiv 慢病毒载体 DF-1细胞 IRF2
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党参皂苷对跨H9N2 AIV感染肺微血管内皮侵袭细胞功能的影响
2
作者 乔畅 刘翔 +5 位作者 冯波 穆祥 张涛 董虹 胡格 张倩 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1800-1806,共7页
为探讨党参皂苷对H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染引起机体免疫抑制的调控作用,首先应用不同质量浓度(5、10、20 mg/L)党参皂苷孵育大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMECs),采... 为探讨党参皂苷对H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)感染引起机体免疫抑制的调控作用,首先应用不同质量浓度(5、10、20 mg/L)党参皂苷孵育大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cells,RPMECs),采用RT-PCR和流式细胞术检测PD-L1表达水平变化,并以ELISA试剂盒检测上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-10含量及空斑法检测上清液中H9N2 AIV的滴度。然后利用8μm孔径Transwell板建立RPMECs和T细胞共培养体系,以模仿循环T细胞跨过微血管迁移到病毒感染部位的过程。在Transwell上室中培养RPMECs,用H9N2 AIV接种RPMECs,1 h后加入含20 mg/L党参皂苷的培养基,36 h后加入T细胞。作用8 h后,收集下室中的T细胞,用流式细胞仪检测CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞的比例,用ELISA试剂盒检测上清液中IL-2、IFN-γ和Granzyme B的表达水平,流式细胞分选技术检测Perforin-1阳性T细胞的比例,MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测T细胞的增殖活性,Annexin V-FITC/PI对T细胞染色后用流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比。结果显示,党参皂苷可显著降低H9N2 AIV感染诱导的RPMECs中PD-L1的表达水平、IL-10及TNF-α表达量,降低T细胞凋亡率,但可显著提高跨内皮迁移T细胞中IL-2、IFN-γ、Perforin-1和Granzyme B的表达量及T细胞的增殖活性。结果表明,党参皂苷可显著抑制RPMECs中H9N2 AIV诱导的PD-L1的表达,增强跨内皮细胞层迁移T细胞的抗病毒功能,有利于增强宿主对H9N2 AIV抵抗能力。 展开更多
关键词 党参皂苷 微血管内皮细胞 PD-L1 T细胞 H9N2 aiv
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云南野鸟源H9N2亚型AIV的遗传进化分析 被引量：1
3
作者 杨佳 杨钦鸿 +4 位作者 王位 张永仙 代红炀 尹红斌 李素华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4899-4910,共12页
【目的】分析云南纳帕海国际重要湿地H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化和分子特征,掌握H9N2亚型AIV在野禽中的流行特点,为禽流感疫情防控提供数据支持。【方法】采集2022―2023年云南省香格里拉纳帕海国际重要... 【目的】分析云南纳帕海国际重要湿地H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化和分子特征,掌握H9N2亚型AIV在野禽中的流行特点,为禽流感疫情防控提供数据支持。【方法】采集2022―2023年云南省香格里拉纳帕海国际重要湿地野禽粪样及其周边家禽喉头、泄殖腔和环境水样,经尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚分离病毒,结合HA试验和RT-PCR扩增鉴定AIV亚型。利用MBTuni-12/13引物同时扩增H9N2亚型AIV毒株的8个基因(HA、NA、M、PB2、NS、NP、PA及PB1)节段,利用二代测序获取全基因组序列,并分析遗传进化关系及关键氨基酸突变位点。【结果】分离到的4株野鸟源H9N2亚型AIV的HA、NA基因源自Y280-like亚系,M、PB 2基因为G1-like亚系,NS、NP、PA、PB 1基因为F/98-like亚系,表明4株分离株为多种亚型的重组毒株,重组模式与2013年以后在中国流行的G57基因型一致。序列相似性分析结果显示,4株H9N2亚型AIV分离株内部基因与H7N9、H5N6、H5N2等亚型AIV相似性较高,遗传多样性特征突出。HA蛋白裂解位点均符合低致病性禽流感特征,获得了多个可增加跨种感染风险及与哺乳动物致病力增强相关的氨基酸突变位点,包括A198T、Q234L、N166D(HA),I292V、A558V(PB2),I368V、L13P(PB1),N30D、T215A(M1),以及P42S(NS1)等。4株野鸟源H9N2亚型AIV毒株具有家禽源同亚型毒株特征,野禽源AIV可能源于家禽。【结论】从云南纳帕海国际重要湿地分离到的4株野鸟源H9N2亚型AIV可能是由家禽传播的多源重配病毒,属于G57基因型,且具有多个适应哺乳动物宿主相关的氨基酸突变位点。 展开更多
关键词 野鸟 H9N2亚型禽流感病毒 G57基因型
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ChIL-2对H_5亚型AIV疫苗免疫增强作用研究 被引量：7
4
作者 刘岩 由振强 +2 位作者 许健 郑江涛 于涟 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期797-801,共5页
鸡白细胞介素2真核表达质粒pCI-IL-2及原核表达重组鸡白细胞介素2(rChIL-2)分别与H5亚型禽流感油乳剂灭活苗联合使用,25日龄首免,40日龄时加强免疫.MTT法检测各组鸡外周血淋巴T细胞增殖,HI试验监测H5亚型禽流感抗体水平的消长规律,结果... 鸡白细胞介素2真核表达质粒pCI-IL-2及原核表达重组鸡白细胞介素2(rChIL-2)分别与H5亚型禽流感油乳剂灭活苗联合使用,25日龄首免,40日龄时加强免疫.MTT法检测各组鸡外周血淋巴T细胞增殖,HI试验监测H5亚型禽流感抗体水平的消长规律,结果表明:pCI-IL-2及rChIL-2均能显著增强AIV疫苗的免疫效果(P<0.05),pCI-IL-2和rChIL-2两组间差异不显著(P>0.05);证实鸡白细胞介素2对H5亚型禽流感疫苗有免疫增强作用.rChIL-2协同免疫组MTT及HI试验均在第四周达到峰值,pCI-IL-2协同免役组峰值出现时间稍晚,但随后质粒免疫组可维持在更高的水平值.提示IL-2蛋白的作用更迅速,IL-2质粒作用更持久. 展开更多
关键词 白细胞介素2 aiv MTT HI 免疫增强
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在DNA芯片平台上探测AIV不同亚型cDNA 被引量：33
5
作者 王秀荣 邓国华 +5 位作者 于康震 石锐 刘丽玲 乔传玲 陈化兰 孔宪刚 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期394-398,共5页
对以基因芯片技术为基础的检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒的快速诊断技术进行了研究。试验中所使用的病毒为A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)、A/African　starling/983/79(H7N1)和　A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)。通过RT-PCR获得大约500... 对以基因芯片技术为基础的检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒的快速诊断技术进行了研究。试验中所使用的病毒为A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)、A/African　starling/983/79(H7N1)和　A/Turkey/Wisconsin/1/66(H9N2)。通过RT-PCR获得大约500　bp的禽流感病毒基因cDNAs片段,克隆,从重组质粒扩增DNA片段,并点到玻璃载体上,制成芯片。在病毒RNA反转录过程中,用Cy5标记样品　cDNAs。样品　cDNAs是一个包括禽流感病毒HA和M基因的混合物。依据M基因鉴别型,依据HA基因鉴别亚型。扫描芯片上探针结合位点,杂交信号与预期设想基本一致。结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV诊断方法。 展开更多
关键词 H9亚型禽流感病毒 鉴别 M基因 DNA芯片 快速诊断技术 基因芯片技术 HA基因 aiv 禽流感病毒 H5N1
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鸡白细胞介素2真核表达质粒的构建、表达及对AIV疫苗免疫增强作用研究 被引量：9
6
作者 由振强 于涟 +2 位作者 翁继锋 许健 徐根亮 《浙江农业学报》 CSCD 2005年第6期350-353,共4页
将鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因亚克隆入pCI载体中,pEGFP-N1载体中的EGFP基因酶切后连入质粒pCI-ChIL-2中,构建真核表达质粒pCI-ChIL-2-EGFP,该载体表达ChIL-2-EGFP融合蛋白。重组质粒在脂质体作用下转染Vero细胞、鸡胚成纤维细胞(CEF)和... 将鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因亚克隆入pCI载体中,pEGFP-N1载体中的EGFP基因酶切后连入质粒pCI-ChIL-2中,构建真核表达质粒pCI-ChIL-2-EGFP,该载体表达ChIL-2-EGFP融合蛋白。重组质粒在脂质体作用下转染Vero细胞、鸡胚成纤维细胞(CEF)和外周血淋巴细胞(PBLC),荧光显微镜观察到融合蛋白在体外能稳定表达。HI试验显示,pCI-ChIL-2-EGFP与AIV疫苗共注射可明显提高AIV疫苗的免疫原性。 展开更多
关键词 鸡白细胞介素2 EGFP 真核表达 aiv
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多重PCR同时检测鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG方法的建立和临床应用 被引量：7
7
作者 黄溢泓 陈强 +5 位作者 韦正吉 李志源 盘美妮 黄小武 李璧梅 蒋柳平 《广西农业科学》 CSCD 2009年第6期759-763,共5页
通过建立针对鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG的多重PCR鉴别诊断技术,并进行了特异性、敏感性试验和临床应用。结果表明:设计的5对引物对同一样品中的RNA(AIV、NDV、IBV)和DNA(ILTV、MG)进行多重PCR扩增,均同时得到5条片段大小与设计相符的... 通过建立针对鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG的多重PCR鉴别诊断技术,并进行了特异性、敏感性试验和临床应用。结果表明:设计的5对引物对同一样品中的RNA(AIV、NDV、IBV)和DNA(ILTV、MG)进行多重PCR扩增,均同时得到5条片段大小与设计相符的特异性片段,即268bp(AIV)、321bp(NDV)、457bp(IBV)、662bp(ILTV)和732bp(MG)。说明该多重PCR技术具有较强特异性和较高敏感性,能检测出1pg AIV、1pg NDV、10pg IBV的RNA和1pg ILTV、10pgMG的DNA。对自然感染鸡临床样品检测的结果则证明,该技术在临床诊断方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 多重PCR aiv NDV IBV ILTV MG
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AIV感染雏鸡免疫器官淋巴细胞增殖功能变化 被引量：3
8
作者 高雪丽 郑世民 +1 位作者 刘明 刘超男 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期566-569,共4页
应用细胞培养技术及MTT法,对感染鹅源H5N1型AIV雏鸡胸腺和脾脏T细胞,法氏囊和脾脏B细胞增殖功能进行检测,结果发现,AIV感染雏鸡免疫器官T、B细胞增殖功能在感染初期比对照雏鸡明显降低,后期有所恢复,表明感染AIV后,雏鸡全身免疫功能受... 应用细胞培养技术及MTT法,对感染鹅源H5N1型AIV雏鸡胸腺和脾脏T细胞,法氏囊和脾脏B细胞增殖功能进行检测,结果发现,AIV感染雏鸡免疫器官T、B细胞增殖功能在感染初期比对照雏鸡明显降低,后期有所恢复,表明感染AIV后,雏鸡全身免疫功能受抑制。7日龄和21日龄AIV感染雏鸡均发病,但21日龄感染雏鸡免疫器官T、B细胞增殖功能下降时间比7日龄感染雏鸡短,而且相对滞后,死亡率也较低,表明21日龄雏鸡对AIV感染具有一定的抵抗力。 展开更多
关键词 aiv 雏鸡 免疫器官 淋巴细胞
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10株不同年代H9N2 AIV NA基因的克隆及序列分析 被引量：2
9
作者 杨大光 王新卫 +1 位作者 王泽霖 周欣 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第6期58-63,共6页
利用RT-PCR技术克隆了10株涵盖不同分离年代和不同毒力的H9N2亚型AIV的NA基因,序列分析表明,10株AIV的NA基因的核苷酸和推导的氨基酸同源性高,进化稳定。系统进化树分析表明,其NA基因都属欧亚大陆禽分支,H9N2流感病毒的分布与地域有相... 利用RT-PCR技术克隆了10株涵盖不同分离年代和不同毒力的H9N2亚型AIV的NA基因,序列分析表明,10株AIV的NA基因的核苷酸和推导的氨基酸同源性高,进化稳定。系统进化树分析表明,其NA基因都属欧亚大陆禽分支,H9N2流感病毒的分布与地域有相关性。其NA蛋白氨基酸序列潜在的糖基化位点以及氨基酸红细胞吸附位点出现的变化尚不能解释这些毒株生物学特性上的差别。但这些研究结果从理论上丰富了H9N2亚型禽流感的分子流行病学,也为进一步研究该类毒株的进化提供了依据。 展开更多
关键词 H9N2 aiv NA基因 克隆 序列分析
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利用反向遗传技术研究H9N2亚型AIV传播途径的分子机制 被引量：11
10
作者 石火英 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期48-54,共7页
利用反向遗传技术,通过基因重排方法,产生两个表面基因来自A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)株和其余基因来自A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)AIV株的3株H9N2亚型重排AIV,动物传播性试验发现A/Chic... 利用反向遗传技术,通过基因重排方法,产生两个表面基因来自A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)株和其余基因来自A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)AIV株的3株H9N2亚型重排AIV,动物传播性试验发现A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株、A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)AIV株和3株H9N2亚型重排AIV都可以经直接接触途径传播;在粪便接触途径下,3株重排AIV都不经粪便接触传播;只有A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株和重排AIV RF7/SSHA能经过气溶胶途径传播。HI试验结果进一步证明了以上的结果。实验结果表明H9N2亚型AIV的NA基因与H9N2亚型AIV气溶胶传播途径有重要的关系,即1998年中国大陆H9N2亚型AIV大流行可能是因为病毒获得气溶胶传播途径的特性,推测病毒的NA基因发挥了重要作用。 展开更多
关键词 aiv H9N2亚型 传播途径 反向遗传技术 HA和NA基因
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抗H9N2 AIV HA单克隆抗体的制备及其在胶体金层析检测中的初步应用 被引量：3
11
作者 詹爱军 王新卫 +2 位作者 陈枝楠 卢体康 花群义 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第9期123-126,共4页
用基因疫苗pcDNA-H9和纯化H9N2亚型AIV免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用HI和ELISA方法筛选出5株抗H9亚型AIV HA的特异性单克隆抗体H9-01(2E6),H9-02(3B1),H9-03(3H11),H9-04(1A4),H9-05(2G9)。各株单抗亚型测定的结果为H9-01,H9-02和H9-05均... 用基因疫苗pcDNA-H9和纯化H9N2亚型AIV免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用HI和ELISA方法筛选出5株抗H9亚型AIV HA的特异性单克隆抗体H9-01(2E6),H9-02(3B1),H9-03(3H11),H9-04(1A4),H9-05(2G9)。各株单抗亚型测定的结果为H9-01,H9-02和H9-05均为IgG2b,H9-03为IgG1,H9-04为IgG2a,轻链的亚型均为kappa链。经特异性和与同型病毒的反应谱检测,它们均是HA特异性单克隆抗体。用制备的抗H9亚型AIV HA的单克隆抗体做成胶体金层析检测试纸条,可以检测到200个EID50的H9亚型AIV,为监测该亚型AIV试剂盒的进一步商品化奠定了基础。 展开更多
关键词 H9N2亚型aiv 单克隆抗体 胶体金层析检测
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3株表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒的免疫效力比较 被引量：1
12
作者 王彦红 陈素娟 +4 位作者 刘武杰 仇旭升 董丽 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期60-64,共5页
作者旨在探讨鸡痘病毒ORF073或ORF214基因缺失后,在母源抗体存在情况下对重组病毒免疫效力的影响。将构建好的在ORF073或ORF214基因插入H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A、rFPVLP-△214LRH5A)及单表达H5亚型AIV HA基因... 作者旨在探讨鸡痘病毒ORF073或ORF214基因缺失后,在母源抗体存在情况下对重组病毒免疫效力的影响。将构建好的在ORF073或ORF214基因插入H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A、rFPVLP-△214LRH5A)及单表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-12LSH5A)分别免疫SPF鸡和商品鸡,检测重组疫苗诱导的免疫效力。结果:3种重组鸡痘病毒在SPF鸡产生较高的HI抗体效价及100%的免疫保护;在HI母源抗体效价为2.45的商品鸡体内基因缺失株重组病毒比rFPVLP-12LSH5A易于清除,抗体上升缓慢而且免疫28 d后HI抗体效价较低,免疫保护率低,分别为16.7%和23.3%;在母源HI抗体效价为0的商品鸡体内基因缺失株重组病毒免疫后产生的抗体效价高,免疫28 d后分别达到3.50和3.17。结果表明在商品鸡体内母源抗体影响下,缺失ORF073或ORF214基因的重组鸡痘病毒的免疫效力降低。 展开更多
关键词 重组鸡痘病毒 H5亚型aiv 免疫效力
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MDV和AIV主要保护性抗原基因在鸡痘病毒中的联合表达 被引量：2
13
作者 陈素娟 彭大新 +1 位作者 陈平 刘秀梵 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 2002年第4期1-3,7,共4页
将强启动子Ps插入载体7S中构建成插入载体7SP,将鸡马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)基因和禽流感病毒(AIV)血凝素H9A基因共同克隆到插入载体7SP中,获得重组转移质粒7SPGA,通过酶切鉴定获得Ps-gB与P7.5-HA同向的转移质粒,再将报告基因盒PL... 将强启动子Ps插入载体7S中构建成插入载体7SP,将鸡马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)基因和禽流感病毒(AIV)血凝素H9A基因共同克隆到插入载体7SP中,获得重组转移质粒7SPGA,通过酶切鉴定获得Ps-gB与P7.5-HA同向的转移质粒,再将报告基因盒PL11-LacZ插入转移质粒7SPGA得7SPLGA,将质粒7SPLGA与禽痘病毒疫苗株共转染鸡成纤维细胞,通过蓝白斑筛选纯化得到重组病毒rFPV-Ps-gB-P7.5-HA,以间接免疫荧光法证实gB基因和HA基因同时得到表达。该研究为探索新型基因工程苗打下了良好的基础。 展开更多
关键词 MDV aiv 保护性抗原基因 鸡痘病毒 联合表达 糖蛋白B 禽流感病毒 HA基因
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H9N2亚型AIV HA蛋白第226位点氨基酸多样性分析及3株病毒受体结合能力检测 被引量：2
14
作者 王爱荣 桑晓宇 +8 位作者 高晓龙 李元果 张坤 于志君 王铁成 杨松涛 夏咸柱 高玉伟 柴同杰 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第11期965-968,991,共5页
目的了解目前我国家禽业中流行的H9N2亚型AIV的HA蛋白第226位氨基酸残基的多样性,并用固相糖链ELISA方法检测实验室保存的3株H9N2亚型AIV病毒的受体结合能力。方法从NCBI数据库中下载我国分离的H9N2流感病毒的HA氨基酸序列,对其第226位... 目的了解目前我国家禽业中流行的H9N2亚型AIV的HA蛋白第226位氨基酸残基的多样性,并用固相糖链ELISA方法检测实验室保存的3株H9N2亚型AIV病毒的受体结合能力。方法从NCBI数据库中下载我国分离的H9N2流感病毒的HA氨基酸序列,对其第226位(参照H3亚型HA位点)氨基酸残基的种类进行统计分析,并利用固相糖链ELISA方法对3株H9N2亚型AIV的受体结合能力进行检测。结果与H9N2流感病毒受体结合能力相关的HA226位点已呈现出多样性,分别为HAL226、HAQ226、HAM226和HAF226,其占有比率分别为81.85%、17.57%、4.81%和0.11%;进一步统计分析表明,我国近几年分离的H9N2流感病毒以HAL226为主。受体结合能力检测显示,CK/JN/3(HAL226)只具有结合人样受体的能力,CK/JL/06(HAQ226)只具有结合禽样受体的能力,而CK/JN/2(HAF226)则具有双受体结合特性,其中与人样受体结合能力稍高。结论当前我国家禽中流行的H9N2亚型AIV中以具有HAL226位点特征的毒株占优势,而这一位点特征与病毒结合人样受体有关。因此,H9N2亚型AIV具有突破种间屏障并引发新的流感大流行的潜在威胁。 展开更多
关键词 H9N2亚型aiv HA226 多样性 受体结合能力
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中国人载脂蛋白AIV基因多态性分布及其与缺血性脑血管病的关系 被引量：3
15
作者 于丽天 李丽 +1 位作者 王兴宇 刘力生 《高血压杂志》 CSCD 2002年第2期114-116,共3页
目的　了解载脂蛋白AIV(ApoAIV)基因 347Thr/Ser和 360Gln/His多态性在中国人群中的分布 ,并探讨它们与缺血性脑血管病的关系。方法　应用病例对照研究 ,在 1 2 4 9例缺血性脑血管病和 1 2 4 9例非脑血管病人群中采用PCR和分子杂交技术... 目的　了解载脂蛋白AIV(ApoAIV)基因 347Thr/Ser和 360Gln/His多态性在中国人群中的分布 ,并探讨它们与缺血性脑血管病的关系。方法　应用病例对照研究 ,在 1 2 4 9例缺血性脑血管病和 1 2 4 9例非脑血管病人群中采用PCR和分子杂交技术检测基因型 ,将病例组和对照组各基因型和等位基因频率进行 χ2 检验。结果　中国人ApoAIV347Ser和His360等位基因频率明显低于白种人 ,347Thr/Ser和 360Gln/His多态性基因型及等位基因频率在缺血性脑血管病组和对照组中无明显区别。结论　ApoAIV基因 347Thr/Ser和 360Gln/His多态性与中国人缺血性脑血管病的关系不明显 ,可能与中国人 展开更多
关键词 载脂蛋白aiv 基因多态性 缺血性脑血管病
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AIV血凝素亚型同步检测基因芯片技术研究 被引量：1
16
作者 王秀荣 刘丽玲 +5 位作者 包红梅 乔传玲 王煜 孙凯 孔宪刚 陈化兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期260-263,271,共5页
对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究。通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒。从重组质粒扩增大约500bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片。待检病毒样品用TRIzolLS提取RNA,反转... 对流感病毒14个血凝素亚型的基因芯片检测技术进行了初步研究。通过RT-PCR克隆禽流感病毒血凝素基因片段,获得重组质粒。从重组质粒扩增大约500bp的DNA片段,浓缩后点到氨基化玻璃载体上,制成芯片。待检病毒样品用TRIzolLS提取RNA,反转录过程中用Cy5标记样品cDNAs。将标记样品与芯片杂交,扫描芯片上待检样品与芯片上捕捉探针的结合位点,杂交信号与预期设想一致。结果显示,DNA芯片技术可以提供一种有效的AIV血凝素亚型鉴别诊断方法。 展开更多
关键词 禽流感病毒 基因芯片 血凝素亚型鉴定 aiv
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携带AIVHA基因鸭肠炎病毒转移载体的构建 被引量：1
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作者 马波 邢明伟 +3 位作者 刘晓玫 乌伊罕 韩先杰 王君伟 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期18-21,共4页
为了获得携带禽流感病毒(AIV)HA基因鸭肠炎病毒转移载体,试验采用基因工程方法构建了带有CMV启动子、多克隆位点(MCS)及牛生长因子转录终止信号和加poly(A)信号(BGHpA)等真核表达元件的载体pET-3.1,将H5N1亚型禽流感病毒HA基因插入pET-3... 为了获得携带禽流感病毒(AIV)HA基因鸭肠炎病毒转移载体,试验采用基因工程方法构建了带有CMV启动子、多克隆位点(MCS)及牛生长因子转录终止信号和加poly(A)信号(BGHpA)等真核表达元件的载体pET-3.1,将H5N1亚型禽流感病毒HA基因插入pET-3.1,再将携带真核表达元件的HA基因插入鸭肠炎病毒通用转移载体pUC-TK-LacZ-2中TK基因的XhoⅠ位点。结果表明:获得了携带AIV HA基因的鸭肠炎病毒转移载体。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 禽流感病毒(aiv) HA基因 转移载体
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HH9N2 AIV对小鼠肠道菌群结构及黏膜屏障功能的影响研究 被引量：4
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作者 谢青梅 陆浩然 +1 位作者 张露萱 陈义虎 《中国家禽》 北大核心 2017年第20期18-22,共5页
为研究H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)继发细菌感染的作用机制,以BALB/c小鼠为模型,研究呼吸道感染H9N2 AIV后,宿主肠道菌群结构、黏膜屏障、黏膜炎症反应等情况。结果显示:H9N2 AIV经呼吸道感染BALB/c小鼠后,小鼠肠道菌群紊乱。攻毒后... 为研究H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)继发细菌感染的作用机制,以BALB/c小鼠为模型,研究呼吸道感染H9N2 AIV后,宿主肠道菌群结构、黏膜屏障、黏膜炎症反应等情况。结果显示:H9N2 AIV经呼吸道感染BALB/c小鼠后,小鼠肠道菌群紊乱。攻毒后小鼠体内的葡萄球菌属、链球菌属和棒状杆菌属极显著增加(P<0.01),而有益菌为主的乳杆菌属等极显著降低(P<0.01);H9N2 AIV感染小鼠后,肠道黏膜屏障被破坏,促炎因子IFN-γ、IFN-β等极显著高表达(P<0.01),上皮细胞中的ZO-1等紧密连接蛋白则明显下调(P<0.05),造成肠壁通透性增强。研究表明小鼠感染H9N2 AIV后,其肠道微生物菌群失衡、黏膜屏障功能被破坏、出现炎症反应等。 展开更多
关键词 H9N2aiv 小鼠 肠道菌群 黏膜屏障功能
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AIV感染7日龄雏鸡T淋巴细胞增殖功能变化 被引量：1
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作者 高雪丽 郑世民 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第8期90-90,共1页
关键词 淋巴细胞增殖 功能变化 aiv 高致病性禽流感疫情 禽流感病毒 雏鸡 日龄 感染
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黄芩苷在鸡胚上对鸡常见病毒AIV、NDV、IBV的作用效果 被引量：3
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作者 陈功义 郝振芳 王建超 《中兽医医药杂志》 2015年第2期5-7,共3页
考察黄芩苷在鸡胚上对鸡常见病毒AIV、NDV、IBV的作用效果,以确定黄芩苷抗病毒的有效浓度。试验共设计2种加药方式,第1组采用最大安全浓度的黄芩苷与鸡胚互作4 h后接种病毒,第2组采用病毒侵染鸡胚4 h后添加最大安全浓度的黄芩苷。结果表... 考察黄芩苷在鸡胚上对鸡常见病毒AIV、NDV、IBV的作用效果,以确定黄芩苷抗病毒的有效浓度。试验共设计2种加药方式,第1组采用最大安全浓度的黄芩苷与鸡胚互作4 h后接种病毒,第2组采用病毒侵染鸡胚4 h后添加最大安全浓度的黄芩苷。结果表明,第1组样品对病毒的阻断效果优于第2组。证明黄芩苷对AIV、NDV、IBV均有一定的抑制作用,在禽病的预防与治疗上具有较高价值。 展开更多
关键词 黄芩苷 鸡胚 aiv NDV IBV
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