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贝母素乙调控PI3K/Akt/mTOR通路减缓上皮-间质转化进程抑制人肺癌A549细胞侵袭及迁移的研究 被引量:21
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作者 丁志丹 方泽民 +4 位作者 王旭广 夏宗江 赵高峰 赵凯 李新强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1382-1387,共6页
目的探讨贝母素乙对人肺癌A549细胞侵袭及迁移的影响。方法采用终浓度为0、50、100、200μmol/L贝母素乙处理A549细胞,通过细胞侵袭实验、细胞划痕实验、实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法、ELISA法及Western blotting实验检测贝母素乙对A54... 目的探讨贝母素乙对人肺癌A549细胞侵袭及迁移的影响。方法采用终浓度为0、50、100、200μmol/L贝母素乙处理A549细胞,通过细胞侵袭实验、细胞划痕实验、实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法、ELISA法及Western blotting实验检测贝母素乙对A549细胞侵袭、迁移的影响及潜在机制。结果与对照组比较,贝母素乙各浓度组的A549细胞穿膜数、细胞间划痕的愈合率及MMP-9、MMP-2表达显著下降(P<0.01);与对照组比较,贝母素乙各浓度组的A549细胞E-cadherin m RNA表达明显增加(P<0.01),而N-cadherin和vimentin mRNA表达均显著降低(P<0.01);与对照组比较,除50μmol/L贝母素乙处理A549细胞24h后的FN蛋白表达无显著性变化外(P>0.05),其余贝母素乙各浓度组在各时间点上的FN蛋白表达均显著下降(P<0.05、0.01);与对照组比较,贝母素乙各浓度组的p-PI3K/PI3K、p-mTOR/mTOR值及100、200μmol/L贝母素乙组的p-Akt/Akt值显著下降(P<0.05、0.01)。结论贝母素乙具有抑制A549细胞侵袭及迁移能力的作用,该作用与贝母素乙调控PI3K/Akt/mTOR通路活性进而减缓上皮-间质转化(EMT)进程有关。 展开更多
关键词 贝母素乙 肺癌A549细胞 侵袭 迁移 上皮-间质转化进程 PI3K/Aktm/tor通路
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芝麻素改善自发性高血压大鼠肾损伤的作用及与PI3K/AKT/mTOR信号通路的关系 被引量:16
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作者 胡浩然 宣佳利 +3 位作者 杨解人 李伟 赵梦秋 韩军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期719-725,共7页
目的:观察芝麻素对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾脏损伤的作用及与PI3K/AKT/m TOR信号通路之间的关系。方法:雄性SHR随机分成模型组、芝麻素低剂量(80 mg/kg)、高剂量(160 mg/kg)组及卡托普利(30 mg/kg)组... 目的:观察芝麻素对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肾脏损伤的作用及与PI3K/AKT/m TOR信号通路之间的关系。方法:雄性SHR随机分成模型组、芝麻素低剂量(80 mg/kg)、高剂量(160 mg/kg)组及卡托普利(30 mg/kg)组。同时选取同周龄WKY大鼠作为正常对照组。每日灌胃1次,模型组、正常对照组给予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na),给药组给予CMC-Na溶解的上述剂量药物,给药前及给药后每隔2周测量1次血压。12周后,检测血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)及尿微量白蛋白(U-m Alb)含量;测定肾脏丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;HE、Masson染色观察肾组织病理学变化;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡率;Western blot法检测肾脏p-AKT、p-m TOR、4EBP1、S6K1、Bcl-2和Bax的蛋白水平。结果:芝麻素能降低SHR舒张压,明显改善肾组织的病理学变化,降低肾脏BUN、SCr、U-m Alb、MDA含量及细胞凋亡率,提高SOD活性,显著减少p-AKT、p-m TOR、4EBP1、S6K1和Bax的蛋白水平,增加Bcl-2的蛋白表达。结论:芝麻素减轻SHR大鼠肾脏损伤的作用机制可能与降低血压、对抗氧化应激、抑制细胞凋亡、阻滞过度活化的PI3K/AKT/m TOR信号通路有关。 展开更多
关键词 芝麻素 自发性高血压大鼠 PI3K/AKT/m tor信号通路 BAX BCL-2
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姜黄素下调PI3K/AKT/mTOR通路抑制人肝癌细胞系增殖 被引量:14
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作者 邓进巍 刘燕 +1 位作者 郭辛翔 黄波 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第9期1274-1279,共6页
目的观察姜黄素对体外培养人肝癌细胞系HL-7702增殖的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养HL-7702细胞,不同浓度的姜黄素(0、10、20、40和80μmol/L)处理48 h。PI3K/AKT抑制剂LY294002联合姜黄素处理细胞。分别用MTT法检测细胞增殖,用W... 目的观察姜黄素对体外培养人肝癌细胞系HL-7702增殖的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养HL-7702细胞,不同浓度的姜黄素(0、10、20、40和80μmol/L)处理48 h。PI3K/AKT抑制剂LY294002联合姜黄素处理细胞。分别用MTT法检测细胞增殖,用Western blot法检测细胞内PI3K、AKT、m TOR、Bax、Bcl-2及活化的caspase-3的蛋白含量。结果姜黄素可以浓度依赖性的抑制HL-7702细胞增殖,增加细胞中PI3K、AKT和m TOR的磷酸化水平(P<0.05)。姜黄素可诱导HL-7702细胞凋亡,增加Bax和活化的caspase-3的含量(P<0.05),减少Bcl-2的含量(P<0.05)。LY294002与姜黄素联用后,姜黄素对细胞增殖及凋亡无明显作用。结论姜黄素可抑制人肝癌细胞系HL-7702增殖,诱导细胞凋亡,作用机制可能与其下调PIK/AKT/m TOR信号通路的活性有关。 展开更多
关键词 姜黄素 人肝癌细胞系HL-7702 增殖 PI3K/AKT/m tor
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麦冬皂苷对非小细胞肺癌细胞株NCI-H157细胞周期及PI3K-AKT-mTOR信号通路的影响研究 被引量:15
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作者 陈美娟 赵若琳 张旭 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期40-44,共5页
目的:研究麦冬皂苷类成分鲁斯可皂苷元、麦冬皂苷D及麦冬皂苷B对人非小细胞肺癌细胞株NCI-H157体外抑制作用的作用和初步机理。方法:采用流式细胞术考察不同给药剂量,不同给药时间下麦冬皂苷类成分对NCI-H157细胞周期的影响;采用Western... 目的:研究麦冬皂苷类成分鲁斯可皂苷元、麦冬皂苷D及麦冬皂苷B对人非小细胞肺癌细胞株NCI-H157体外抑制作用的作用和初步机理。方法:采用流式细胞术考察不同给药剂量,不同给药时间下麦冬皂苷类成分对NCI-H157细胞周期的影响;采用Western blot法检测各浓度药物作用24h后对细胞中PI3K-AKT-m TOR信号通路的影响。结果:鲁斯可皂苷元(12.5、25、50μM)和麦冬皂苷B(10μM)在给药24h后导致细胞周期阻滞在G0/G1期;麦冬皂苷D(12.5、25、50μM)各给药浓度给药时间对细胞周期没有显著影响。在对信号通路的影响上,5、10、20μM的鲁斯可皂苷元对整条通路没有显著影响,相同药物浓度下,麦冬皂苷D对通路下游的e IF4B有显著激活作用,而麦冬皂苷B则主要抑制通路上游Akt和p70S6K的磷酸化激活,对下游的e IF4B及e EF2K的磷酸化没有显著影响。结论:在三种麦冬皂苷类成分中,以麦冬皂苷B对NCI-H157的细胞周期及PI3K-AKT-m TOR信号通路影响最明显,体现了构效之间的显著差异。 展开更多
关键词 麦冬皂苷 人非小细胞肺癌 细胞周期 PI3K-AKT-m tor信号通路
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芪玉三龙汤对荷瘤小鼠肿瘤组织PI3K/Akt/mTOR通路分子表达的影响 被引量:12
5
作者 张星星 李泽庚 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期5358-5361,共4页
目的:进一步研究芪玉三龙汤对荷瘤小鼠移植瘤PI3K/Akt/mTOR通路相关分子表达的影响。方法:无菌培养LLC细胞,收集细胞悬液接种C57BL/6小鼠腋部皮下构建肺癌模型,接种第11天将荷瘤小鼠随机分为6组:模型组,化疗组,芪玉三龙汤高、中、低剂量... 目的:进一步研究芪玉三龙汤对荷瘤小鼠移植瘤PI3K/Akt/mTOR通路相关分子表达的影响。方法:无菌培养LLC细胞,收集细胞悬液接种C57BL/6小鼠腋部皮下构建肺癌模型,接种第11天将荷瘤小鼠随机分为6组:模型组,化疗组,芪玉三龙汤高、中、低剂量组,联合组,每组8只。称取瘤质量,计算抑瘤率;RT-qPCR法检测肿瘤组织PIK3CA、Akt、mTOR mRNA转录水平;Western blot法检测肿瘤组织p-Akt、p-mTOR、PDK1、p-PDK1蛋白表达水平。结果:芪玉三龙汤可温和抑制肺肿瘤生长,以高剂量组抑瘤作用最优,但无明显量效关系,与化疗药联用暂无明显协同作用;芪玉三龙汤可下调PIK3CA、Akt、mTOR基因转录水平并且同时下调p-Akt、p-mTOR、PDK1、p-PDK1蛋白表达。结论:芪玉三龙汤温和的抑瘤作用与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。 展开更多
关键词 芪玉三龙汤 肺癌 PI3K/Akt/m tor
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黄芪甲苷对特发性肺纤维化自噬活性作用及PI3K/Akt/mTOR信号调控的影响 被引量:63
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作者 徐昌君 王鹏飞 +3 位作者 刘杨 黄雅薇 杨长福 赵宗江 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期75-82,共8页
目的:研究黄芪甲苷对特发性肺纤维化自噬活性影响及其磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/mTOR信号的调控作用,探讨黄芪的抗肺纤维化机制。方法:c57bl/6小鼠分为假手术组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组、泼尼松组。博莱霉素(BL... 目的:研究黄芪甲苷对特发性肺纤维化自噬活性影响及其磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/mTOR信号的调控作用,探讨黄芪的抗肺纤维化机制。方法:c57bl/6小鼠分为假手术组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组、泼尼松组。博莱霉素(BLM)10 mg·kg-1诱导建立肺纤维化动物模型,以黄芪甲苷低、中、高剂量(25,50,100 mg·kg-1)干预,分别于3,7,14,28 d取材,进行苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态变化,马松(Masson)三色染色、羟脯氨酸测定观察胶原表达水平,免疫组化及蛋白质免疫印迹(Western bolt)分析自噬标记蛋白和PI3K/Akt/mTOR信号蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组肺组织炎症反应明显、胶原蛋白显著增加(P<0.01),PI3K/Akt/mTOR信号增强,自噬活性下降,与模型组比较,黄芪甲苷中、高剂量明显抑制肺组织炎症反应,下调转化生长因子-β1(TGF-β1)(P<0.01)和胶原蛋白(P<0.05)表达,提高LC3Ⅱ/Ⅰ和(beclin-1)表达(P<0.05),减少p62积累(P<0.05),同时抑制PI3K,Akt,mTOR磷酸化水平(P<0.05),减少ɑ-平滑肌动蛋白(ɑ-SMA)而提高E-钙黏素(E-cadherin)表达(P<0.01)。结论:黄芪甲苷通过抑制肺组织炎性反应、下调TGF-β1表达,抑制PI3K/Akt/mTOR信号增强肺组织细胞自噬活性,阻止上皮间质转分化(EMT)过程。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 黄芪甲苷 自噬 上皮间质转分化 磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/mtor信号
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顺铂通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬 被引量:14
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作者 林琼燕 生秀杰 +2 位作者 刘娟 熊汉真 王沂峰 《肿瘤预防与治疗》 2017年第5期337-342,共6页
目的:探讨顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬的影响,并初步探讨PI3K/AKT/m TOR信号通路在其中的作用。方法:透射电镜观察自噬泡形成,免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3融合蛋白II(microtubule-associated protein 1 light chain 3 fusionp... 目的:探讨顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞自噬的影响,并初步探讨PI3K/AKT/m TOR信号通路在其中的作用。方法:透射电镜观察自噬泡形成,免疫荧光检测微管相关蛋白1轻链3融合蛋白II(microtubule-associated protein 1 light chain 3 fusionprotein II,LC3II)的荧光聚集情况。采用Westerblot检测m TOR通路中的PI3K、AKT及m TOR蛋白的表达。结果:顺铂(20μg/m L)能诱导Ishikawa细胞发生自噬,其中24h组明显高于12h组(P<0.05);与对照组(20μg/m L-0h组)相比较,自噬相关蛋白-LC3Ⅱ的表达随着时间延长表达增加(P<0.05)。磷酸化AKT1、磷酸化m TOR及PI3Kp85蛋白表达水平随着时间延长表达下降。胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)与顺铂共培养组自噬小体及LC3Ⅱ蛋白表达少于顺铂组,但高于对照组。结论:顺铂可能通过抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路,从而诱导子宫内膜癌细胞发生自噬。 展开更多
关键词 顺铂 子宫内膜癌 自噬 PI3K/AKT/m tor信号通路
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PI3K/Akt/mTOR信号通路对大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控作用探讨 被引量:13
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作者 张春江 赵丹 +1 位作者 陈志刚 杨晓萍 《内科急危重症杂志》 2016年第4期308-311,共4页
目的:探讨磷脂酰肌醇-3(PI3K)/蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路对大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的调控作用。方法:体外培养大鼠MC,随机分为正常对照组、表皮生长因子(EGF)(10ng/m L)组、PI3K抑制剂LY294002组(2μg/m... 目的:探讨磷脂酰肌醇-3(PI3K)/蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路对大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的调控作用。方法:体外培养大鼠MC,随机分为正常对照组、表皮生长因子(EGF)(10ng/m L)组、PI3K抑制剂LY294002组(2μg/m L)、EGF联合LY294002组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测4组MC的增殖,流式细胞术检测MC周期,免疫荧光法检测系膜细胞m TOR的表达。结果:与正常对照组相比,EGF组能显著促进大鼠MC增殖,G0/G1期细胞减少,S期及G2/M期细胞增加,且m TOR表达增加;LY294002组大鼠MC增殖受抑制,G0/G1期细胞增加,S期及G2/M期细胞减少,且m TOR表达降低;与EGF组比较,EGF联合LY294002干预组MC增殖受抑制,G0/G1期细胞增多,S期及G2/M期细胞减少,且m TOR表达降低。结论:m TOR信号通路参与了大鼠肾小球MC增殖的调控,抑制该信号通路的活化可显著抑制MC的增殖和MC周期的进程。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 EGF PI3K/Akt/m tor信号通路 细胞增殖
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PI3K/Akt/mTOR信号通路对自然衰老小鼠骨骼肌自噬的影响及不同运动方式的调控 被引量:3
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作者 樊申元 靳二辉 《沈阳体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2016年第1期82-86,92,共6页
目的:探讨不同方式运动对自然衰老小鼠骨骼肌自噬的影响及其分子生物学机制。方法:36只8周龄雌性小鼠随机分为衰老对照组(C)、衰老自主运动组(V)、衰老跑台运动组(F)。C组于鼠笼中正常饲养,V组和F组分别进行8周的自主跑轮运动... 目的:探讨不同方式运动对自然衰老小鼠骨骼肌自噬的影响及其分子生物学机制。方法:36只8周龄雌性小鼠随机分为衰老对照组(C)、衰老自主运动组(V)、衰老跑台运动组(F)。C组于鼠笼中正常饲养,V组和F组分别进行8周的自主跑轮运动和跑台运动。训练结束12~24h内,取腓肠肌,利用RT-PCR法检测相关细胞因子的mRNA表达。结果:与C组相比,V组PI3K(P〈0.05)、PDK1(P〈0.05)和Atg3(P〈0.05)的mRNA表达均出现显著变化;与C组相比,F组PI3K(P〈0.01)、PDK1(P〈0.01)、Akt(P〈0.05)、m TOR(P〈0.05)、TSC2(P〈0.05)、Atg3(P〈0.01)、ULK1(P〈0.05)、Beclin1(P〈0.05)、LC3(P〈0.05)和Atg7(P〈0.05)mRNA表达均出现显著变化;与V组相比,F组PI3K(P〈0.05)、PDK1(P〈0.05)、Akt(P〈0.05)的mRNA表达均显著上调。结论:跑台运动可通过激活PI3K/Akt/m TOR信号通路抑制衰老小鼠骨骼肌的自噬水平。 展开更多
关键词 不同方式运动 衰老 骨骼肌 自噬 PI3K/Akt/m tor
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抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路对MPP+处理的SH-SY5Y细胞自噬、凋亡及PD特征蛋白表达的影响 被引量:6
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作者 王飞 张小蕾 +3 位作者 李含章 李亚楠 胡梦妮 马骏 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第5期449-454,共6页
目的探讨抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的SH-SY5Y细胞自噬、凋亡及帕金森病(PD)特征蛋白α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响。... 目的探讨抑制磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的SH-SY5Y细胞自噬、凋亡及帕金森病(PD)特征蛋白α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响。方法以MPP+、PI3K/Akt激活剂胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、PI3K/Akt抑制剂LY294002作用于人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,CCK-8检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;吖啶橙(AO)染色检测自噬空泡;Western blot检测α-syn、TH、p62、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p-mTOR、mTOR、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白水平。结果MPP+干预显著降低SH-SY5Y细胞存活率,且呈现剂量依赖性(P<0.05)。MPP+和IGF-1处理后SH-SY5Y细胞存活率降低,凋亡率增高(P<0.05);细胞中自噬空泡减少,LC3BⅡ/Ⅰ降低,p62蛋白水平增高(P<0.05);TH蛋白水平降低,α-syn蛋白水平增高(P<0.05);p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt与p-mTOR/mTOR增高(P<0.05)。LY294002对SH-SY5Y细胞的影响与MPP+和IGF-1相反,且LY294002可在一定程度上逆转MPP+对SH-SY5Y细胞的影响(P<0.05)。结论抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路可能对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞毒性具有保护作用。 展开更多
关键词 帕金森病 磷酸肌醇3-激酶类 原癌基因蛋白质c-akt tor丝氨酸-苏氨酸激酶 自噬 细胞凋亡 1-甲基-4-苯基吡啶离子 SH-SY5Y细胞
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PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂S1联合索拉非尼对小细胞肺癌的抗肿瘤作用研究 被引量:2
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作者 王娟 马淑梅 +2 位作者 陈秀华 张三奇 梅其炳 《世界临床药物》 CAS 2015年第11期752-758,共7页
目的探讨PI3K/Akt/m TOR通路新型抑制剂S1和Ras/Raf/MAPK抑制剂索拉非尼联合用于小细胞肺癌(SCLC)的抗肿瘤作用。方法通过体外增殖抑制试验、克隆形成试验、Transwell小室细胞侵袭试验和划痕试验,评价单独用药和联合用药对NCI-H446细胞... 目的探讨PI3K/Akt/m TOR通路新型抑制剂S1和Ras/Raf/MAPK抑制剂索拉非尼联合用于小细胞肺癌(SCLC)的抗肿瘤作用。方法通过体外增殖抑制试验、克隆形成试验、Transwell小室细胞侵袭试验和划痕试验,评价单独用药和联合用药对NCI-H446细胞的抑制作用。结果 S1作用24、48和72 h对NCI-H446细胞抑制作用的IC_50分别为92.82、23.19和1.79μmol/L,联用索拉非尼的IC_50分别为5.79、1.84和0.19μmol/L。药物作用72 h,所有联合组药物联合作用指数(CI)均小于1。克隆形成试验:0.4μmol/L S1+2μmol/L索拉非尼联合用药组抑制率为54.49%,克隆数与同剂量各单独给药组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);2μmol/L S1+2μmol/L索拉非尼联合用药组抑制率为72.46%,克隆数与索拉非尼2μmol/L组,比较差异具有统计学意义(P<0.01)。侵袭抑制试验:2μmol/L S1+4μmol/L索拉非尼联合用药组对NCI-H446细胞的抑制率高达76.84%,侵袭数与同等剂量单独给药组比较差异,均具有统计学意义(P<0.01)。迁移抑制试验:作用10 h,2μmol/L S1+4μmol/L索拉非尼联合用药对细胞的抑制率为95.15%,划痕距离显著大于索拉非尼4μmol/L组(P<0.01)。作用24 h,联合用药组抑制率为89.18%,划痕距离仍显著大于索拉非尼4μmol/L组(P<0.01)。结论 S1具有抗SCLC NCI-H446的作用,且与索拉非尼联合用药具有协同作用。 展开更多
关键词 小细胞肺癌(SCLC) PI3K/Akt/m tor通路抑制剂 索拉非尼 抗肿瘤药物
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类固醇受体辅助活化因子-3通过PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子痫前期发病机制中的作用研究 被引量:1
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作者 袁雨 单楠 +3 位作者 谭彬 刘洋铭 何承晋 漆洪波 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1034-1038,共5页
目的:探讨类固醇受体辅助活化因子-3(steroid receptor coactivator-3,SRC-3)参与人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)受损的信号通路,及其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2014年10月至2015年10月在重庆医科大学附属第一医院行选择性剖... 目的:探讨类固醇受体辅助活化因子-3(steroid receptor coactivator-3,SRC-3)参与人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)受损的信号通路,及其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2014年10月至2015年10月在重庆医科大学附属第一医院行选择性剖宫产手术的正常足月妊娠组(31例)以及子痫前期组(29例)的胎盘组织。使用Western blot检测2组胎盘组织SRC-3的表达。脐静脉内皮细胞株(HUVECs)分为4个处理组:正常常氧对照(N)培养组、缺氧/复氧(H/R)培养组、SRC-3 sh RNA慢病毒敲降(sh SRC-3)培养组以及PI3K特异性抑制剂(LY294002)培养组。使用Western blot检测内皮细胞中SRC-3、p-Akt(Ser473)、Akt、p-m TOR(Ser2481)、m TOR的表达。使用细胞管腔成型实验检测内皮细胞血管形成能力。结果:SRC-3在子痫前期胎盘组织蛋白水平低于正常足月胎盘(t=3.501,P=0.013)。细胞学实验中,与N组相比,H/R组、sh SRC-3组及LY294002组HUVECs的SRC-3(t=4.236,P=0.007;t=5.469,P=0.002;t=4.165,P=0.008)、p-Akt(Ser473)/Akt(t=5.214,P=0.002;t=5.188,P=0.002;t=7.054,P=0.000)、p-m TOR(Ser2481)/m TOR(t=4.832,P=0.003;t=5.695,P=0.001;t=5.699,P=0.001)表达降低。H/R组、sh SRC-3组、LY294002组HUVECs血管形成能力低于N组(t=5.268,P=0.002;t=4.648,P=0.004;t=4.087,P=0.009)。结论:SRC-3可能通过PI3K/Akt/m TOR通路参与子痫前期的发病机制。 展开更多
关键词 子痫前期 类固醇受体辅助活化因子-3 血管内皮 PI3K/Akt/m tor
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基于3D-DOCTOR的成人脑干MRI的三维测量准确性研究
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作者 王娟 李敏达 汤乐民 《泰州职业技术学院学报》 2015年第5期51-52,63,共3页
目的利用3D-DOCTOR软件对脑干磁共振成像(MRI)图像进行三维重建及体积测量,分析测量值的准确性。方法选择十例脑干标本,根据阿基米德原理分别测量标本体积,再用3.0T MRI对十例标本分别扫描,用3D-DOCTOR软件对MRI图像进行三维重建,并利... 目的利用3D-DOCTOR软件对脑干磁共振成像(MRI)图像进行三维重建及体积测量,分析测量值的准确性。方法选择十例脑干标本,根据阿基米德原理分别测量标本体积,再用3.0T MRI对十例标本分别扫描,用3D-DOCTOR软件对MRI图像进行三维重建,并利用该软件计算脑干体积,将获得的数据与实际测量数据进行比较分析。结果三维重建后脑干结构具有较好的立体感,可在计算机上进行自由观察和测量;计算机算出的脑干体积和实际测量值比较接近,两者之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论借助3D-DOCTOR软件重建的脑干能较准确的模拟真实脑干,对该区病变的诊断和临床手术治疗有一定的指导意义。 展开更多
关键词 脑干 三维重建 三维测量 磁共振成像 3D-DOCtor
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PI3K-Akt-mTOR信号通路介导的细胞自噬在荭草苷抗大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用研究 被引量:17
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作者 吴宥熹 徐俊 +2 位作者 刘立亚 孙秀玉 黄秀兰 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期20-24,共5页
目的探讨PI3K-Akt-m TOR信号通路介导的细胞自噬在荭草苷抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用。方法采用结扎SD雄性大鼠左冠状动脉前降支,心肌缺血30 min,再灌注120 min制作心肌缺血再灌注模型。90只大鼠随机分为六组:假手术组、模... 目的探讨PI3K-Akt-m TOR信号通路介导的细胞自噬在荭草苷抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用。方法采用结扎SD雄性大鼠左冠状动脉前降支,心肌缺血30 min,再灌注120 min制作心肌缺血再灌注模型。90只大鼠随机分为六组:假手术组、模型组、不同剂量荭草苷预处理组(1.0,2.0,4.0 mg·kg-1)。生化分析仪检测心肌酶活性,TTC染色检测心肌梗死面积,光镜观察心肌组织病理学变化,电镜观察心肌细胞超微结构并统计自噬体数量,Western Blot检测LC3、Akt、m TOR和p70S6K等蛋白的表达水平及或磷酸化水平。结果荭草苷(2.0,4.0 mg·kg-1)可显著降低心肌缺血再灌注诱导的心肌酶漏出率(P<0.01或P<0.05),减小大鼠心肌梗死面积(P<0.01)以及改善心肌病理损伤;同时能减少细胞内自噬体数量以及自噬相关蛋白LC3-II的表达水平。此外,荭草苷还可增加Akt、m TOR和p70S6K的磷酸化水平。结论荭草苷对大鼠心脏缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能与其通过PI3K-Akt-m TOR信号通路抑制细胞过度自噬有关。 展开更多
关键词 荭草苷 心肌缺血再灌注损伤 自噬 PI3K-Akt-m tor信号通路
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二十碳五烯酸激活PI3K/mTOR/p70S6K通路改善快速老化小鼠肌肉功能 被引量:2
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作者 斯日古楞 李天柱 +6 位作者 乌英嘎 郝丹丹 其木格 田慧敏 白春英 张凤宁 瑞云 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期713-718,共6页
目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)通路介导二十碳五烯酸(EPA)对快速老化小鼠肌肉功能的作用。方法将40只SAMP8小鼠随机分为模型组、抑制剂组、EPA组、抑制剂+EPA组,各10只,另取... 目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)通路介导二十碳五烯酸(EPA)对快速老化小鼠肌肉功能的作用。方法将40只SAMP8小鼠随机分为模型组、抑制剂组、EPA组、抑制剂+EPA组,各10只,另取8只正常老化SAMR1小鼠作为对照组。抑制剂组给予PI3K抑制剂LY2940027.5 mg·kg^(-1)灌胃,EPA组给予EPA 70 mg·kg^(-1)灌胃,抑制剂+EPA组给予LY294002+EPA灌胃,模型组和对照组灌胃等体积生理盐水,干预8周。检测小鼠肌肉力量强度,计算小鼠肌肉湿重与睾丸周围脂肪湿重变化。HE染色观察小鼠骨骼肌组织病理变化,评估肌纤维横截面积。Western blot法和qRT-PCR法检测小鼠骨骼肌中PI3K、mTOR、p70S6K蛋白及mRNA表达水平。结果与对照组相比,模型组小鼠抓力小,疲劳耐受时间短,肌肉和睾丸周围脂肪湿重轻,骨骼肌中磷酸化PI3K(p-PI3K)、p-mTOR、p-p70S6K蛋白相对表达量低(P<0.05)。与模型组比较,抑制剂组小鼠抓力更小,疲劳耐受时间更短,肌肉湿重、睾丸周围脂肪湿重更轻,骨骼肌中p-PI3K、p-mTOR、p-p70S6K蛋白相对表达量更低(P<0.05);EPA组和抑制剂+EPA组小鼠抓力增大,疲劳耐受时间较长,肌肉湿重、睾丸周围脂肪湿重较重,骨骼肌中p-PI3K、p-mTOR、p-p70S6K蛋白相对表达量上调(P<0.05)。与对照组比较,模型组、抑制剂组肌纤维横截面积明显缩小,细胞核内移明显,抑制剂+EPA组肌纤维横截面积与细胞核内移有所改善,EPA组改善更明显。结论EPA可能是通过激活PI3K/mTOR/p70S6K信号通路改善快速老化小鼠的肌肉功能。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 衰老 肌减少症 Ⅰ类磷脂酰肌醇3-激酶类 tor丝氨酸-苏氨酸激酶 核糖体蛋白质S6激酶类 70-kDa
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食管鳞癌Eca109细胞中PI3K/AKT/mTOR信号通路对LSD1的调控作用 被引量:5
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作者 凡丞 鲁照明 +6 位作者 张幸丽 田菲 白一汝 赵琦 彭柯峥 刘宏民 侯桂琴 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第5期531-535,共5页
目的:探讨食管鳞癌Eca109细胞中PI3K/AKT/m TOR信号通路对LSD1的调控作用。方法:用不同浓度的PI3K/Akt/m TOR信号通路抑制剂LY294002(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0和50.0μmol/L)、RAD001(0.05、0.50、5.00、10.00、20.00和50.00μmol/L)... 目的:探讨食管鳞癌Eca109细胞中PI3K/AKT/m TOR信号通路对LSD1的调控作用。方法:用不同浓度的PI3K/Akt/m TOR信号通路抑制剂LY294002(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0和50.0μmol/L)、RAD001(0.05、0.50、5.00、10.00、20.00和50.00μmol/L)分别处理Eca109细胞24、48 h,采用CCK-8实验检测细胞增殖;然后分别用0、10、20μmol/L LY294002或RAD001处理Eca109细胞24 h或20μmol/L LY294002或RAD001处理不同时间(0~72 h),采用Western blot检测PI3K/Akt/m TOR信号通路因子、LSD1及组蛋白H3K4me2表达的变化。结果:LY294002、RAD001处理后,食管鳞癌细胞增殖受抑,且随浓度的增加,抑制作用有增强的趋势(P<0.05);LY294002抑制Eca109细胞中p-p70S6K的表达,上调Raptor、Rictor、p-Akt(Ser473)以及组蛋白H3K4me2的表达;而RAD001抑制了Raptor、Rictor、p-p70S6K表达,增加p-Akt(Ser473)的表达,并且下调LSD1表达,上调组蛋白H3K4me2的表达(P<0.05)。结论:PI3K/AKT/m TOR信号通路对LSD1存在调控作用。 展开更多
关键词 食管鳞癌 PI3K/AKT/m tor通路 LSD1 H3K4me2
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老鼠簕生物碱A对肝纤维化大鼠PI3K/Akt/m TOR/p70S6K信号通路的影响 被引量:20
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作者 黄秀昆 孙雪梅 +5 位作者 韦秀桂 王红园 朱勋帅 刘林 林兴 林军 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期457-461,共5页
目的观察老鼠簕生物碱A(HBOA)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响,探讨HBOA抗肝纤维化的作用机制。方法大鼠随机分成对照... 目的观察老鼠簕生物碱A(HBOA)对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响,探讨HBOA抗肝纤维化的作用机制。方法大鼠随机分成对照组、模型组及HBOA高、中、低剂量(100、50、25 mg/kg)组和秋水仙碱(0.4 mg/kg)组。除对照组外,其余各组ig给予50%CCl4橄榄油溶液,每周2次,连续12周,诱导肝纤维化大鼠模型。于造模第9周起,给药组分别ig相应的受试药物,每天1次,给药4周。实验结束后,计算各组大鼠体质量变化、肝脏指数;检测各组大鼠肝匀浆中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性;蛋白免疫印迹法(Western blotting)法检测肝组织P-PI3K、p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K蛋白的表达。结果与模型组比较,各给药组大鼠体质量增加量显著升高,均能降低肝脏指数及肝组织中ALT、AST活性;此外,HBOA高、中剂量组均能显著抑制p-PI3K、p-Akt、p-m TOR、p-p70S6K蛋白的表达。结论 HBOA对肝纤维化大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt/m TOR/p70S6K信号通路有关。 展开更多
关键词 老鼠簕生物碱A 肝纤维化 PI3K/Akt/m tor/p70S6K信号通路 丙氨酸转氨酶 天冬氨酸转氨酶
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西黄丸及其主要成分抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路促进PC-3荷瘤小鼠前列腺癌细胞的凋亡 被引量:19
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作者 龙衍 吴泳蓉 +8 位作者 郭垠梅 罗新筠 李仙福 黄甜甜 黄振 柳卓 陈铮甲 周青 田雪飞 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期340-346,共7页
目的:评估西黄丸及其主要成分对裸鼠去势抵抗性人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的PI3K/AKT/mTOR信号通路及细胞凋亡的影响。方法:通过西黄丸、麝香、牛黄、多西他赛、麝香+牛黄干预动物模型,计算各组抑瘤率及HE染色观察肿瘤细胞形态,采用q... 目的:评估西黄丸及其主要成分对裸鼠去势抵抗性人前列腺癌PC-3细胞皮下移植瘤的PI3K/AKT/mTOR信号通路及细胞凋亡的影响。方法:通过西黄丸、麝香、牛黄、多西他赛、麝香+牛黄干预动物模型,计算各组抑瘤率及HE染色观察肿瘤细胞形态,采用qPCR方法检测各组PI3K/Akt/mTOR mRNA水平,Western印迹检测各组PI3K/Akt/mTOR通路和Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达情况。结果:西黄丸、麝香、牛黄、麝香-牛黄、多西他赛组连续干预14 d后,各组抑瘤率分别为29.67%、5.52%、7.26%、12.88%、6.26%。肿瘤组织HE染色结果显示药物干预后可见凋亡小体形成,以西黄丸组、麝香+牛黄组明显;西黄丸、麝香+牛黄组PI3K/Akt/mTOR mRNA以及磷酸化蛋白的表达水平均明显下调(P<0.01),并促进Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达(P<0.01)。结论:西黄丸及麝香、牛黄具有抑制PC-3细胞皮下移植瘤生长的作用,其机制与抑制异常激活的PI3K/Akt/mTOR信号通路,并促进PC3细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 西黄丸 前列腺癌 凋亡 PI3K/AKT/Mtor PC-3细胞系 小鼠
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PI3K/AKt/mTOR信号通路与肿瘤关系的研究进展 被引量:18
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作者 柳望舒 俞松 《实用医院临床杂志》 2016年第4期20-23,共4页
近年来,随着人们对肿瘤信号通路的不断研究,其中尤以PI3K/AKt/m TOR信号通路已逐渐成为研究热点,胞內磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)作为该信号转导通路中重要的介导分子,发挥着不可或缺的作用。因此,本文就PI3K/AKt/m TOR信号通路的激活及其... 近年来,随着人们对肿瘤信号通路的不断研究,其中尤以PI3K/AKt/m TOR信号通路已逐渐成为研究热点,胞內磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)作为该信号转导通路中重要的介导分子,发挥着不可或缺的作用。因此,本文就PI3K/AKt/m TOR信号通路的激活及其主要效应分子的作用机制,与肿瘤及血管瘤之关系的研究进展作一介绍。 展开更多
关键词 PI3K/AKt/m tor信号通路 胞內磷脂酰肌醇-3-激酶 肿瘤 血管瘤
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姜黄素对海人酸致痫大鼠PI3K/AKt/mTOR通路调节作用的实验研究 被引量:7
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作者 王娜 佟凤芝 曾常茜 《中国中医药科技》 CAS 2015年第5期534-536,549,共4页
目的:通过检测海人酸致痫大鼠海马神经元PI3K、AKt和m TOR的表达,探讨姜黄素对癫痫大鼠神经元保护的分子机制。方法:采用海人酸注射诱导大鼠癫痫造模,造模前用姜黄素干预7天。免疫组化方法检测大鼠海马神经元PI3K、AKt、m TOR蛋白表达,... 目的:通过检测海人酸致痫大鼠海马神经元PI3K、AKt和m TOR的表达,探讨姜黄素对癫痫大鼠神经元保护的分子机制。方法:采用海人酸注射诱导大鼠癫痫造模,造模前用姜黄素干预7天。免疫组化方法检测大鼠海马神经元PI3K、AKt、m TOR蛋白表达,采用RT-PCR技术检测大鼠海马神经元PI3K、AKt、m TOR mRNA表达。结果:免疫组化结果显示,海人酸组神经元PI3K、AKt、m TOR蛋白表达较正常组降低(P<0.05),姜黄素组神经元的PI3K、AKt、m TOR蛋白表达较海人酸组增加(P<0.05)。RT-PCR结果显示,海人酸组海马神经元PI3K、AKt、m TOR mRNA表达水平与正常组比较显著降低(P<0.05),姜黄素组海马神经元PI3K、AKt、m TOR mRNA表达水平与海人酸组比较显著增高(P<0.05)。结论:姜黄素能够保护海人酸致痫大鼠的神经元损伤,其分子机制可能与上调PI3K/AKt/m TOR表达有关。 展开更多
关键词 癫痫 姜黄素 海马 神经元 PI3K/AKt/m tor 基因表达 大鼠
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