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产朊假丝酵母尿酸氧化酶在乳酸乳球菌中的表达及其酶学性质
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作者 时萍 刘远森 +4 位作者 彭静静 廖佳珺 吴庆龄 郭德军 王成华 《中国生物制品学杂志》 2025年第5期543-548,556,共7页
目的在乳酸菌中表达产朊假丝酵母尿酸氧化酶(urate oxidase,UOX),并进行酶学性质研究,为后续UOX的应用开发提供技术支持。方法将优化合成的UOX基因克隆至载体pTRKH2,构建重组表达质粒,电转入乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000,筛选... 目的在乳酸菌中表达产朊假丝酵母尿酸氧化酶(urate oxidase,UOX),并进行酶学性质研究,为后续UOX的应用开发提供技术支持。方法将优化合成的UOX基因克隆至载体pTRKH2,构建重组表达质粒,电转入乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000,筛选重组菌并表达带有His-tag标签的重组UOX(rUOX);以UOX酶活力为指标,优化重组菌发酵条件;采用镍离子金属螯合层析法纯化rUOX,并进行酶学性质表征。结果重组菌最佳表达条件为发酵温度37℃,发酵时间12 h,培养基初始pH 6,rUOX的最高酶活力达(44.57±0.43)U/mL。纯化的rUOX相对分子质量约为35000,与理论相对分子质量一致,比活为17.48 U/mg;rUOX的最适pH为11.5,最适温度为45℃,在最适条件下以尿酸为底物测定rUOX的米氏常数(K_(m))、最大反应速度(V_(max))及催化常数(k_(cat))值分别为5.72 mmol/L、71.25μmol/(L·min)和95.76/s;多种金属离子和化学试剂对rUOX具有抑制活性,Tween 20对rUOX具有明显的激活活性。结论UOX在乳酸菌中的重组表达是可行的,其酶活力较为稳定,为后续UOX在耐碱条件下的应用开发提供了实验依据。 展开更多
关键词 尿酸氧化酶 重组表达 乳酸菌 酶学性质 产朊假丝酵母
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甘蓝乳酸发酵过程中色香味的变化 被引量：2
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作者 王禾 张岭 +1 位作者 韩春然 王金凤 《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》 CAS 2001年第1期55-57,共3页
对甘蓝乳酸发酵过程中颜色、香气、风味物的形成做了研究。探讨了色、香、味变化的机理及对成品的影响。
关键词 甘蓝 乳酸菌 发酵 风味物质
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