食源性蛋白淀粉样纤维化聚集具有独特的结构特性,蚕豆11S蛋白(fava bean 11S protein,FP)作为一种可持续蛋白资源,表现出巨大的潜力。该研究探究了蚕豆11S蛋白淀粉样纤维化聚集(fibrotic aggregation of 11S protein in fava bean,FPF)...食源性蛋白淀粉样纤维化聚集具有独特的结构特性,蚕豆11S蛋白(fava bean 11S protein,FP)作为一种可持续蛋白资源,表现出巨大的潜力。该研究探究了蚕豆11S蛋白淀粉样纤维化聚集(fibrotic aggregation of 11S protein in fava bean,FPF)在形成过程中的动态演变,包括其结构表征和功能特性。6 g/100 mL的FP通过酸热处理(pH 2,85℃)不同时间(0~24 h)后得到FPF。处理后的样品通过硫黄素T、荧光、二酪氨酸、透射电子显微镜、傅里叶红外光谱等进行结构表征,结果表明FP先在酸热过程中水解成多肽,再自组装成富含β-折叠结构的FPF(由0 h的34.44%增加到24 h的45.89%)。通过起泡性、乳化性和凝胶特性等对FPF功能特性进行表征,与FP相比,反应24 h后的FPF具有更好的起泡性、乳化性和凝胶特性。此外,FPF在体外细胞实验中没有表现出细胞毒性。研究结果为FPF的形成规律提供了理论支撑。展开更多
为了研究桑椹低聚半乳糖(mulberry galacto-oligosaccharide,MGO)对鼠李糖乳酪杆菌EN-08胞内蛋白质表达的影响,采用串联质量标签(tandem mass tags,TMT)定量蛋白质组学技术进行分析。将鼠李糖乳酪杆菌EN-08分别接种到含MGO、桑椹多糖(mu...为了研究桑椹低聚半乳糖(mulberry galacto-oligosaccharide,MGO)对鼠李糖乳酪杆菌EN-08胞内蛋白质表达的影响,采用串联质量标签(tandem mass tags,TMT)定量蛋白质组学技术进行分析。将鼠李糖乳酪杆菌EN-08分别接种到含MGO、桑椹多糖(mulberry polysaccharide,MPS)和低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS)的MRS培养基中发酵培养。培养18 h后提取所有样品的蛋白质进行TMT技术鉴定,采用相关性热图和主成分分析观察各组相关性,发现添加MGO和MPS后,鼠李糖乳酪杆菌EN-08全蛋白组成发生变化。在MGO组中鉴定出192个差异蛋白,其中上调蛋白有110个,下调蛋白有82个。KEGG功能注释显示,上调差异蛋白的功能主要集中在碳水化合物代谢和膜运输方面,分别有17个和16个上调蛋白参与。KEGG富集分析显示,上调差异蛋白质显著富集于果糖和甘露糖代谢以及磷酸转移酶系统通路,富集因子分别为0.2195和0.2286。分析结果表明,MGO主要从碳水化合物代谢以及环境信息处理这两方面影响菌株的生命活动。说明MGO可作为有潜力的碳源,促进菌体代谢调控,为鼠李糖乳酪杆菌EN-08的高密度工业化生产提供参考。展开更多
采用常规检测方法检测南阳市西峡县奎文村(KW)、屈原岗村(QYG)、王营村(WY)猕猴桃根际土壤样品的基本理化指标,采用Illumina Mi Seq高通量测序技术分析其微生物群落多样性,并分析两者间的相关性。结果表明,3个样品的pH、有效磷含量、速...采用常规检测方法检测南阳市西峡县奎文村(KW)、屈原岗村(QYG)、王营村(WY)猕猴桃根际土壤样品的基本理化指标,采用Illumina Mi Seq高通量测序技术分析其微生物群落多样性,并分析两者间的相关性。结果表明,3个样品的pH、有效磷含量、速效钾含量、碱解氮含量差异显著(P<0.05)。3个样品细菌群落多样性及物种丰度无显著差异(P>0.05),QYG样品真菌群落多样性最高,KW样品最低,但3个样品真菌群落的物种丰度无显著差异(P>0.05)。从3个样品中共注释到51个细菌门和16个真菌门,包括16个优势细菌门和6个优势真菌门,其中芽孢杆菌门(Bacillota)和放线菌门(Actinomycetota)作为潜在的猕猴桃溃疡病生防细菌,在3个样品中均为优势菌门。土壤理化性质对猕猴桃根际土壤微生物群落分布具有显著影响,其中,芽孢杆菌门与速效钾含量呈极显著负相关(P<0.01),放线菌门与速效钾含量呈显著正相关(P<0.05),与p H呈显著负相关(P<0.05);pH与罗兹菌门(Rozellomycota)呈高度显著正相关(P<0.001)。该研究结果为猕猴桃溃疡病生防细菌的筛选鉴定了基础。展开更多
两歧双歧杆菌作为重要益生菌,其工业化培养过程中存在氮源利用率低、生长密度低等问题。前期研究发现,两歧双歧杆菌可利用含脯氨酸的肽。该研究旨在根据两歧双歧杆菌的氮源利用特征靶向制备脯氨酸肽,以提升氮源利用效率和生长水平。研...两歧双歧杆菌作为重要益生菌,其工业化培养过程中存在氮源利用率低、生长密度低等问题。前期研究发现,两歧双歧杆菌可利用含脯氨酸的肽。该研究旨在根据两歧双歧杆菌的氮源利用特征靶向制备脯氨酸肽,以提升氮源利用效率和生长水平。研究优选5种富脯氨酸蛋白和5种蛋白酶制备短肽,结合菌株培养从中筛选出了2种高含脯氨酸且对生长有益的底物蛋白(酪蛋白、谷蛋白)。结合菌株氮源利用特性与肽酶特征制定多步酶解策略,利用计算机工具预测了酶解肽,并使用分子对接模拟肽段与肽转运的关键蛋白寡肽结合蛋白OppA(oligopeptide binding protein A,OppA)的结合,发现77.5%以上的肽都能与OppA有效结合。经酶解制备得到了6种脯氨酸肽,分子质量为180~2000 Da的肽占到72.49%以上(180~500 Da的短肽>50%),且脯氨酸大多以肽的形式存在(极少量游离)。将制备的脯氨酸肽与1种乳清蛋白肽都用作培养,发现乳清蛋白肽WA(whey protein peptides hydrolyzed by alkaline protease,WA)与酪蛋白肽CAF(casein peptides hydrolyzed by alkaline protease and flavourzyme,CAF)按质量比2∶1复配,添加量8 g/L时活菌数达到(2.04±0.1)×10^(9)CFU/mL,单位氮源产生(1.38±0.18)×10^(12)CFU的活菌,相较于传统MRS培养基分别提升35%和198.5%。该研究为两歧双歧杆菌的高效培养及工业化应用提供了创新策略。展开更多
文摘采用常规检测方法检测南阳市西峡县奎文村(KW)、屈原岗村(QYG)、王营村(WY)猕猴桃根际土壤样品的基本理化指标,采用Illumina Mi Seq高通量测序技术分析其微生物群落多样性,并分析两者间的相关性。结果表明,3个样品的pH、有效磷含量、速效钾含量、碱解氮含量差异显著(P<0.05)。3个样品细菌群落多样性及物种丰度无显著差异(P>0.05),QYG样品真菌群落多样性最高,KW样品最低,但3个样品真菌群落的物种丰度无显著差异(P>0.05)。从3个样品中共注释到51个细菌门和16个真菌门,包括16个优势细菌门和6个优势真菌门,其中芽孢杆菌门(Bacillota)和放线菌门(Actinomycetota)作为潜在的猕猴桃溃疡病生防细菌,在3个样品中均为优势菌门。土壤理化性质对猕猴桃根际土壤微生物群落分布具有显著影响,其中,芽孢杆菌门与速效钾含量呈极显著负相关(P<0.01),放线菌门与速效钾含量呈显著正相关(P<0.05),与p H呈显著负相关(P<0.05);pH与罗兹菌门(Rozellomycota)呈高度显著正相关(P<0.001)。该研究结果为猕猴桃溃疡病生防细菌的筛选鉴定了基础。
文摘两歧双歧杆菌作为重要益生菌,其工业化培养过程中存在氮源利用率低、生长密度低等问题。前期研究发现,两歧双歧杆菌可利用含脯氨酸的肽。该研究旨在根据两歧双歧杆菌的氮源利用特征靶向制备脯氨酸肽,以提升氮源利用效率和生长水平。研究优选5种富脯氨酸蛋白和5种蛋白酶制备短肽,结合菌株培养从中筛选出了2种高含脯氨酸且对生长有益的底物蛋白(酪蛋白、谷蛋白)。结合菌株氮源利用特性与肽酶特征制定多步酶解策略,利用计算机工具预测了酶解肽,并使用分子对接模拟肽段与肽转运的关键蛋白寡肽结合蛋白OppA(oligopeptide binding protein A,OppA)的结合,发现77.5%以上的肽都能与OppA有效结合。经酶解制备得到了6种脯氨酸肽,分子质量为180~2000 Da的肽占到72.49%以上(180~500 Da的短肽>50%),且脯氨酸大多以肽的形式存在(极少量游离)。将制备的脯氨酸肽与1种乳清蛋白肽都用作培养,发现乳清蛋白肽WA(whey protein peptides hydrolyzed by alkaline protease,WA)与酪蛋白肽CAF(casein peptides hydrolyzed by alkaline protease and flavourzyme,CAF)按质量比2∶1复配,添加量8 g/L时活菌数达到(2.04±0.1)×10^(9)CFU/mL,单位氮源产生(1.38±0.18)×10^(12)CFU的活菌,相较于传统MRS培养基分别提升35%和198.5%。该研究为两歧双歧杆菌的高效培养及工业化应用提供了创新策略。
