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menD表达强度对枯草芽孢杆菌中维生素K2产量的影响
1
作者 黄俊宝 黄茜琳 +7 位作者 陈宇 高旭丽 罗雅妮 陶伟 郭明雨 刘永圆 吴晶 刘艳 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期32-40,共9页
维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS... 维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS168)为出发菌株,构建BS168-ΔmenD、BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株,使用HPLC检测菌株中MK的含量,使用western-blot检测蛋白质的表达强度,以确定menD在枯草芽孢杆菌中对于MK合成的作用。研究发现,BS168-ΔmenD菌株生长缓慢,无法很好的产生生物膜,在培养基中需要添加甲萘醌标准品细胞才能生长;BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株的生物膜和MK的含量与原始菌株都有较为显著的差异。静态发酵时,孔板中重组菌株BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD生物膜的形成量和褶皱程度相较于原始菌株得到较大的提升,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD重组菌株的生物膜形成量分别为原始菌株的1.36倍与1.59倍,同时,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD MK产量分别为原始菌株的1.64倍和1.87倍,BS168-P_(xylA)-menD的最大产量达39.27 mg/L。结果表明,作为枯草芽孢杆菌中MK合成途径的关键酶,menD的表达量是影响枯草芽孢杆菌中生物膜与MK形成的重要因素。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 维生素K2 启动子 表达强度 菌株选育
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代谢工程改造大肠杆菌合成甲萘醌-7
2
作者 何雨锴 曾伟主 徐沙 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期1-10,共10页
甲萘醌-7(menaquinone-7,MK-7),作为维生素K2亚型之一,具有治疗骨质疏松,保护心血管健康等作用。常见MK-7生产主要由纳豆等食品发酵而来,但存在产量低,提取复杂等问题,而枯草芽孢杆菌作为MK-7常见生产菌株,也面临发酵周期长,发酵产量低... 甲萘醌-7(menaquinone-7,MK-7),作为维生素K2亚型之一,具有治疗骨质疏松,保护心血管健康等作用。常见MK-7生产主要由纳豆等食品发酵而来,但存在产量低,提取复杂等问题,而枯草芽孢杆菌作为MK-7常见生产菌株,也面临发酵周期长,发酵产量低的问题。该研究对一株引入甲羟戊酸途径的大肠杆菌进行改造,首先利用DLKcat模型比较筛选出4个关键酶,包括七聚异戊二烯焦磷酸合酶BtHepS\BtHepT、1,4-二羟基-2-萘甲酸七烯基转移酶MnMenA、甲萘醌生物合成C-甲基转移酶NtMenG,将其进行表达优化,构建了大肠杆菌内源合成MK-7途径。随后,整合表达异戊烯基焦磷酸异构酶EcIdi提升前体供应,再对得到的菌株进行补料分批发酵条件优化,包括延迟诱导时间,提升溶氧量至60,MK-7产量达到929.58 mg/L,但出现1217.58 mg/L的去甲基甲萘醌-7(DMK-7)大量堆积的现象。进一步筛选了不同来源的MenG降低DMK-7的堆积,发现Bacillus subtilis 168来源的MenG可以较好地降低DMK-7堆积。最终,在5 L发酵罐上MK-7的产量达到1090.45 mg/L,DMK-7降低至231.14 mg/L。该研究结果对应用大肠杆菌生产MK-7具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 甲萘醌-7 大肠杆菌 DLKcat 去甲基甲萘醌-7 发酵优化
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益生菌生物合成叶酸的研究及应用进展
3
作者 徐心怡 《中外食品工业》 2025年第2期70-74,共5页
叶酸作为一碳化合物的载体参加人体的代谢活动,对促进生长发育和维持人体健康具有重要意义。许多种属的乳酸菌也具备合成叶酸的能力。但由于叶酸不稳定,在食品加工过程中的叶酸会受到很大损失,为了满足人们每日营养需求,营养强化食品的... 叶酸作为一碳化合物的载体参加人体的代谢活动,对促进生长发育和维持人体健康具有重要意义。许多种属的乳酸菌也具备合成叶酸的能力。但由于叶酸不稳定,在食品加工过程中的叶酸会受到很大损失,为了满足人们每日营养需求,营养强化食品的研究逐渐增多。文章介绍了对叶酸的功能与应用、产叶酸的益生菌株的筛选与条件优化、叶酸的合成代谢途径与调控机制以及叶酸强化食品的研究进展,为产叶酸菌株的筛选及产业化应用提供参考依据。 展开更多
关键词 叶酸 功能 筛选 合成代谢途径 调控机制 叶酸强化食品
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应用离子束注入技术改善乳杆菌维生素K_(2)合成能力
4
作者 沐璟玮 杨旭 +3 位作者 汪洪波 王丽 孙曼曼 王鹏 《生物学杂志》 北大核心 2025年第2期46-51,共6页
维生素K_(2)(VK_(2))对维持人体骨骼、心血管健康具有重要作用,但由于乳酸菌(LAB)VK_(2)合成路径中部分基因沉默或不表达,导致目前乳制品中基本不含有VK_(2)。以发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum(LF1)为出发菌株,分析不同离子束注入... 维生素K_(2)(VK_(2))对维持人体骨骼、心血管健康具有重要作用,但由于乳酸菌(LAB)VK_(2)合成路径中部分基因沉默或不表达,导致目前乳制品中基本不含有VK_(2)。以发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum(LF1)为出发菌株,分析不同离子束注入条件下的致死率和正负突变率,确定最佳注入能量为10 keV、注入剂量为75(×2.6×1013 N+/cm 2)。通过多轮离子束注入结合适应性实验室进化(ALE),获得VK_(2)高产菌株LFX,产量为0.67 mg/g,并在连续传代实验中验证菌株良好的遗传稳定性。转录组分析发现,在LFX的VK_(2)相关合成途径中,甲萘醌主环与聚异戊二烯侧链合成相关基因的表达水平显著增加,抗氧化系统、辅因子合成及中央碳氮代谢等途径显著增强。结果表明,多轮离子束注入和ALE可以协同优化代谢通量,提高VK_(2)的生物合成和稳定性。 展开更多
关键词 离子束 诱变选育 适应性实验室进化 维生素K_(2) 发酵乳杆菌 转录组
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创建酿酒酵母细胞工厂发酵生产视黄醇
5
作者 李文豪 杨婷婷 +5 位作者 李蕊 马晓晨 贾士儒 张学礼 王冬 戴住波 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第16期4396-4406,共11页
视黄醇是维生素A的主要活性形式之一,对于机体的生长发育、眼部和皮肤功能维持至关重要,被广泛应用于化妆品、医药和饲料添加领域。动物体内不具备完整的维生素A合成途径,但可通过膳食直接摄入或将膳食中获得的β-胡萝卜素转化获得。为... 视黄醇是维生素A的主要活性形式之一,对于机体的生长发育、眼部和皮肤功能维持至关重要,被广泛应用于化妆品、医药和饲料添加领域。动物体内不具备完整的维生素A合成途径,但可通过膳食直接摄入或将膳食中获得的β-胡萝卜素转化获得。为了推进视黄醇的生物法合成研究,首先以β-胡萝卜素合成平台CAR*1为基础,筛选了3种不同来源的醇脱氢酶,确定了大肠杆菌来源的ybbO具有最高的催化活性,转化率可达95.6%。为了进一步提高反应速率和产量,采用蛋白质融合技术将视黄醇合成模块中2个相邻酶blh和ybbO进行融合后,在高产β-胡萝卜素工程菌株CAR*3中进行评估,获得了最优组合blh-GGGS-ybbO,其产量较融合前提高了44.9%,达到(111.1±3.5)mg·L^(-1)。进一步工作中,通过引入人源的视黄醇结合蛋白(RBP4)以及转甲状腺素蛋白(TTR),在酿酒酵母中模拟了人体肝脏细胞分泌视黄醇的过程,视黄醇产量增加至(158.0±13.1)mg·L^(-1)。最后,采用过表达INO2扩张β-胡萝卜素合成途径反应区室,提高血红蛋白VHb表达量以增强氧气的供给,强化PDR3m表达促进视黄醇的转运和开发2个阶段发酵工艺等方法,在5 L发酵罐中成功将视黄醇的产量提升至(2320.0±26.0)mg·L^(-1),为视黄醇产业化发展提供了重要基础。 展开更多
关键词 视黄醇 酿酒酵母 融合蛋白 视黄醇转运
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几种糖代谢产物对法夫酵母产虾青素影响的对比研究 被引量：10
6
作者 肖安风 倪辉 +3 位作者 李利君 杨秋明 陈小红 蔡慧农 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第19期268-272,共5页
对比研究乙醇、乙酸钠、乳酸钠、柠檬酸、甘油这5种糖代谢产物对法夫酵母产虾青素的影响。摇瓶实验结果表明:乙酸钠、乳酸钠和柠檬酸对法夫酵母产虾青素有一定的促进作用,而乙醇、甘油对其作用不明显。添加低浓度(2g/L和1g/L)的乙酸钠... 对比研究乙醇、乙酸钠、乳酸钠、柠檬酸、甘油这5种糖代谢产物对法夫酵母产虾青素的影响。摇瓶实验结果表明:乙酸钠、乳酸钠和柠檬酸对法夫酵母产虾青素有一定的促进作用,而乙醇、甘油对其作用不明显。添加低浓度(2g/L和1g/L)的乙酸钠、乳酸钠、柠檬酸对生物量和虾青素浓度都有不同程度的提高。其中,当柠檬酸添加量为2g/L时,法夫酵母的生物量达到最大,为5.48g/L(与对照相比提高了50.1%);乙酸钠添加量为1g/L时,虾青素浓度达到最大,为1.54mg/L(与对照相比提高了20.3%)。5L罐的实验结果表明:柠檬酸对法夫酵母的虾青素浓度和单产有一定的促进作用,而乙酸钠和乳酸钠没有明显的促进作用。 展开更多
关键词 法夫酵母 虾青素 糖代谢产物 发酵
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2-酮-L-古龙酸还原酶分离纯化及其理化、酶学性质的研究 被引量：24
7
作者 蒋宇扬 郭振勇 张成刚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期400-405,共6页
从发酵Ｌ山梨糖的Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａｎｓ和Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ２９８０混和菌株的无细胞抽提液中分离到了２酮Ｌ古龙酸还原酶（ＫＧＲ），测得其分子量为９０ｋＤａ。动力学性质研究表明它... 从发酵Ｌ山梨糖的Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａｎｓ和Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ２９８０混和菌株的无细胞抽提液中分离到了２酮Ｌ古龙酸还原酶（ＫＧＲ），测得其分子量为９０ｋＤａ。动力学性质研究表明它为一个典型的ＭｉｃｈａｅｌｉｓＭｅｎｔｅｎ氏酶，对２酮Ｌ古龙酸作用的Ｋｍ值为３４２×１０－３ｍｏｌ，最适作用ｐＨ为６５，最适作用温度为３０℃。２酮Ｌ古龙酸还原酶的合成不受Ｌ山梨糖和２酮Ｌ古龙酸的诱导，故推测２酮Ｌ古龙酸还原酶是Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａｎｓ的一个组成酶。 展开更多
关键词 维生素C 酮古龙酸还原酶 发酵 纯化
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微生物发酵法制备维生素K2研究进展 被引量：12
8
作者 罗苗苗 胡学超 +3 位作者 邱宏伟 刘维明 任路静 黄和 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期221-225,共5页
维生素K2是一类必不可少的人体内源性高活性维生素,为甲萘醌类系列化合物,纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)因能高产维生素K2而成为当前国内外研究热点。文中对纳豆芽孢杆菌及其合成维生素K2的机理进行了简要介绍,对国内外微生物... 维生素K2是一类必不可少的人体内源性高活性维生素,为甲萘醌类系列化合物,纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)因能高产维生素K2而成为当前国内外研究热点。文中对纳豆芽孢杆菌及其合成维生素K2的机理进行了简要介绍,对国内外微生物发酵产维生素K2的研究水平进行综述,并指出维生素K2是参与呼吸链的关键电子传递载体,在发酵过程中会形成水溶性复合物分泌至胞外。基于目前发酵状况,提出了维生素K2发酵过程中存在的问题,并指出今后发展方向,为实现维生素K2的高效合成和积累提供指导。 展开更多
关键词 纳豆芽孢杆菌 维生素K2 发酵 代谢途径
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产黄纤维单胞菌纤维素酶的培养条件 被引量：10
9
作者 郭爱莲 杨琳 +2 位作者 刘梅 王宏仓 郎惠云 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期575-577,580,共4页
对产黄纤维单胞菌（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｉｇｅｎａ）所产纤维素酶的条件和天然纤维素能力的利用进行了研究。认为该菌产酶最适起始ｐＨ为 ６． ０，最适产酶温度为 ２５℃，８～１６ ｈ为产酶高峰期；ＣＭＣ－Ｎａ、酪... 对产黄纤维单胞菌（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｉｇｅｎａ）所产纤维素酶的条件和天然纤维素能力的利用进行了研究。认为该菌产酶最适起始ｐＨ为 ６． ０，最适产酶温度为 ２５℃，８～１６ ｈ为产酶高峰期；ＣＭＣ－Ｎａ、酪蛋白是该菌最好的碳氮源；高浓度的葡萄糖抑制纤维素酶的形成，而纤维二糖是该菌的较好碳源和诱导剂。 展开更多
关键词 产黄纤维单胞菌 纤维素酶 天然纤维素 培养条件
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红酵母原生质体制备及其紫外诱变育种的研究 被引量：16
10
作者 顾蕾 陆玲 袁生 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期60-62,65,共4页
研 究 了 一 株 产 类 胡 萝 卜 素 红 酵 母 ns-1原 生 质 体 的 最 佳 制 备 条 件 ,并 在 此 基 础 上 进 行 诱 变 育 种 。 通 过 实 验 ,初 步 确 定 ns-1菌 株 原 生 质 体 最 佳 形 成 和 再 生 条 件 为 1.5%β- glucuro... 研 究 了 一 株 产 类 胡 萝 卜 素 红 酵 母 ns-1原 生 质 体 的 最 佳 制 备 条 件 ,并 在 此 基 础 上 进 行 诱 变 育 种 。 通 过 实 验 ,初 步 确 定 ns-1菌 株 原 生 质 体 最 佳 形 成 和 再 生 条 件 为 1.5%β- glucuronidase、1.5%lysing enzym e 和 1.5%lyticase 分 别 先 后 处 理 对 数 期 红 酵 母 细 胞 各 3h。通 过 紫 外 线 诱 变 原 生 质 体 , 获 得 类 胡 萝 卜 素 产 量 明 显 提 高 的 突 变 菌 株 U V ss,其 生 物 量 、色 素 含 量 、色 素 产 量 分 别 为 6.15g/L、1043.57μg/g 干 重 、6.41m g/L,生 物 量 、色 素 产 量 分 别 比 原 始 菌 株 提 高 了 67.6%、54.1%。 展开更多
关键词 红酵母 原生质体 制备 紫外诱变 育种 类胡萝卜素 产量
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氮源对重组枯草芽孢杆菌24/pMX45核黄素发酵的影响 被引量：7
11
作者 李建国 班睿 +1 位作者 司马迎春 赵学明 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第2期180-183,187,共5页
考察了无机氮源NH4 Cl和不同有机氮源对重组枯草芽孢杆菌 2 4 / pMX4 5核黄素发酵的影响 .实验结果表明 ,NH4 Cl作为基础氮源对菌体生长和核黄素合成均有抑制作用 .采用不同有机氮源进行核黄素发酵 ,以酵母粉为氮源时发酵单位最高 ,而... 考察了无机氮源NH4 Cl和不同有机氮源对重组枯草芽孢杆菌 2 4 / pMX4 5核黄素发酵的影响 .实验结果表明 ,NH4 Cl作为基础氮源对菌体生长和核黄素合成均有抑制作用 .采用不同有机氮源进行核黄素发酵 ,以酵母粉为氮源时发酵单位最高 ,而蛋白胨为氮源时核黄素发酵单位最低 . 展开更多
关键词 核黄素 枯草芽孢杆菌 氮源 维生素B2 发酵生产 基因工程 基因重组
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一株高产类胡萝卜素酵母Rhodotorrula.sp色素组分及摇瓶发酵研究 被引量：7
12
作者 仓一华 陆玲 +2 位作者 王伟 王刚 梁明祥 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期34-37,共4页
对一株高产类胡萝卜素的红酵母Rhodotorula.sp的色素组分、生长及色素积累的动态变化和摇瓶最佳生理条件进行了研究。结果表明该株酵母色素含量高、色素主要成分为β-胡萝卜素;色素积累起始于对数期末期和稳定期初期;在本实验条件下,红... 对一株高产类胡萝卜素的红酵母Rhodotorula.sp的色素组分、生长及色素积累的动态变化和摇瓶最佳生理条件进行了研究。结果表明该株酵母色素含量高、色素主要成分为β-胡萝卜素;色素积累起始于对数期末期和稳定期初期;在本实验条件下,红酵母Rhodotorula.sp的最佳摇瓶发酵条件为蔗糖30g/L、硫酸铵10g/L、酵母膏3g/L、Mg-Cl20.3g/L、接种量30ml/L、恒pH6.0和培养基装量100ml/500ml;经72h培养其生物量、类胡萝卜素含量和产量分别达8.72g/L、1359.7μg/g和11.86mg/L。 展开更多
关键词 高产类胡萝卜素酵母 Rhodotorrula.sp 色素组分 摇瓶发酵研究
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铁对铜绿微囊藻生长活性及产毒的影响 被引量：7
13
作者 陈莉 梁文艳 +1 位作者 王金丽 杨硕 《安全与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期21-24,共4页
以MA培养基为基础,向无铁培养基中添加不同质量浓度的FeCl_3,对对数生长期的铜绿微囊藻进行接种培养,比较不同Fe^(3+)浓度下,铜绿微囊藻的生长、活性及产毒状况。结果表明,无Fe^(3+)时,藻的生长、细胞活性和产毒受到抑制;Fe^(3+)浓度增... 以MA培养基为基础,向无铁培养基中添加不同质量浓度的FeCl_3,对对数生长期的铜绿微囊藻进行接种培养,比较不同Fe^(3+)浓度下,铜绿微囊藻的生长、活性及产毒状况。结果表明,无Fe^(3+)时,藻的生长、细胞活性和产毒受到抑制;Fe^(3+)浓度增大时,有利于藻的生长,且当Fe^(3+)质量浓度为0.42 mg/L时,培养42 d后细胞密度达到最大(4 5×10^(10)个/L)。过高或过低浓度的Fe^(3+)均会抑制藻细胞活性和毒素的产生。Fe^(3+)质量浓度为0.04 mg/L时,脱氢酶活性较好;质量浓度为0.10 mg/L时,适宜藻毒素MCLR的生成,且单位生物量藻细胞的MCLR产量可达0.32 mg。研究表明,Fe^(3+)浓度对藻细胞完整性的影响不大,而且藻细胞的最佳生长条件并不是其最佳产毒条件。 展开更多
关键词 环境工程 铜绿微囊藻 FE^3+ 生长活性 脱氢酶活性 藻毒素
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不同培养条件对枯草芽胞杆菌BS168-ΔsinR生物膜形成及维生素K2产量的影响 被引量：6
14
作者 吴静 李伟 +10 位作者 冯静静 周梦洁 胡汶松 汪剑 SOKHNA MBACKE Gningue 吴佳雯 赵礼军 徐文瀚 薛正莲 王洲 刘艳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第14期23-30,共8页
枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)是合成维生素K2的微生物之一,维生素K2的合成量又与细菌生物膜有重要关系。其中sinR是生物膜形成环节中的关键调节基因,我们用同源重组的方法构建枯草芽胞杆菌sinR缺失突变体(ΔsinR)菌株,再以BS168-Δs... 枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)是合成维生素K2的微生物之一,维生素K2的合成量又与细菌生物膜有重要关系。其中sinR是生物膜形成环节中的关键调节基因,我们用同源重组的方法构建枯草芽胞杆菌sinR缺失突变体(ΔsinR)菌株,再以BS168-ΔsinR菌株为出发菌株,采用微孔板法-结晶紫染色测定生物膜形成量,核酸定量仪测定胞外蛋白,苯酚硫酸法测定胞外多糖,HPLC测定维生素K2的生物合成量。比较分析了不同温度、pH、以及不同浓度的金属离子(Mn^(2+)、 Fe^(2+)、Ca^(2+))对枯草芽胞杆菌BS168及BS168-ΔsinR生物膜形成能力以及维生素K2合成量的影响。结果表明,重组菌BS168-ΔsinR生物膜形成能力和维生素K2合成能力均优于原始菌BS168,且重组菌在生物膜形成、维生素K2合成过程中对温度、酸碱性的适应能力也强于原始菌。一定浓度的金属离子可以促进生物膜的形成及维生素K2的合成。2株菌生物膜形成的最佳条件为温度37~40℃、pH 8.0、Mn^(2+)浓度0.01 mmol/L、 Fe^(2+)浓度1μmol/L、Ca^(2+)浓度0.01 mmol/L,维生素K2合成的最佳条件是温度40℃、pH 7.0~8.0、Mn^(2+)浓度0.1 mmol/L、 Fe^(2+)浓度50μmol/L、Ca^(2+)浓度1 mmol/L。该研究为深入探究sinR基因参与枯草芽胞杆菌生物膜形成的机制及提高维生素K2合成产量提供实验基础和理论支撑。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 SINR 生物膜 培养条件 维生素K2产量
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新组合菌系SCB329-SCB933利用L-山梨糖发酵产生维生素C前体2-酮基-L-古龙酸的研究Ⅲ.发酵过程的特征和条件控制 被引量：8
15
作者 宋祺 何建明 +4 位作者 任双喜 叶晴 郭新友 陈策实 尹光琳 《工业微生物》 CAS CSCD 1997年第3期6-10,共5页
在分析了新组合菌系ＳＣＢ３２９－ＳＣＢ９３３发酵过程特征的基础上，对流加发酵工艺中的种子培养、ｐＨ、溶氧的控制，以及发酵液初始培养基中的Ｌ－山梨糖浓度和流加起始点进行了优化，获得了比分批发酵更为满意的结果：发酵最终总... 在分析了新组合菌系ＳＣＢ３２９－ＳＣＢ９３３发酵过程特征的基础上，对流加发酵工艺中的种子培养、ｐＨ、溶氧的控制，以及发酵液初始培养基中的Ｌ－山梨糖浓度和流加起始点进行了优化，获得了比分批发酵更为满意的结果：发酵最终总糖达１３％（ｗ／ｖ）左右，发酵周期４０～５０ｈ，产２－酮基－Ｌ－古龙酸达１１５－１３０ｍｇ／ｍｌ，克分子转化率达８８ｍｏｌ％左右。 展开更多
关键词 维生素C前体 酮基古龙酸 山梨糖 发酵 杆菌
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逆流色谱与硅胶柱色谱相结合分离纯化高良姜中高良姜素 被引量：6
16
作者 徐静 曹学丽 +4 位作者 尹鹭 成超 王尉 乐胜峰 周晓晶 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期55-58,共4页
目的:建立一种从高良姜粗提物中分离制备高纯度高良姜素的方法。方法:采用逆流色谱(CCC)直接法以及逆流色谱(CCC)与硅胶柱色谱相结合两种方法从高良姜粗提物中分离制备高良姜素。结果:先用硅胶柱色谱对粗提物进行预分离,然后采用逆流色... 目的:建立一种从高良姜粗提物中分离制备高纯度高良姜素的方法。方法:采用逆流色谱(CCC)直接法以及逆流色谱(CCC)与硅胶柱色谱相结合两种方法从高良姜粗提物中分离制备高良姜素。结果:先用硅胶柱色谱对粗提物进行预分离,然后采用逆流色谱,以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(2:0.4:0.8:0.9,V/V)为两相溶剂体系,对目标组分进行纯化,可以从高良姜粗提物中制备得到高纯度高良姜素。通过该方法可以从3.5g高良姜粗提物中分离得到纯度为99.1%的高良姜素15.6mg,纯度为95.2%的未知化合物Ⅱ5.2mg。结论:硅胶柱色谱与逆流色谱相结合为一种分离制备高纯度高良姜素有效方法。该方法可用于相关标准样品的研制及功能因子的开发。 展开更多
关键词 高良姜 高良姜素 逆流色谱 硅胶柱色谱
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疏棉状嗜热丝孢菌Thermo myces lanuginosus YNUCC4154耐碱热稳定木聚糖酶的特性及其产生菌的系统发育分析 被引量：6
17
作者 李文鹏 陈静 +2 位作者 廖昌珑 周建国 杨亚辉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第4期480-483,共4页
从云南洱源县热泉中分离到一株产木聚糖酶嗜热真菌ThermomyceslanuginosusYNUCC4 15 4 .对其 2 8SrD NA的 5′端约 90 0bp的片段进行了扩增和测序 ,并与GenBank中最相似的 12个分类单位进行了比较 .邻近接合法构建的系统发育树显示 ,T .... 从云南洱源县热泉中分离到一株产木聚糖酶嗜热真菌ThermomyceslanuginosusYNUCC4 15 4 .对其 2 8SrD NA的 5′端约 90 0bp的片段进行了扩增和测序 ,并与GenBank中最相似的 12个分类单位进行了比较 .邻近接合法构建的系统发育树显示 ,T .lanuginosusYNUCC4 15 4与几个产木聚糖酶的嗜热真菌关系较近 .在 30L全自动发酵罐中5 5℃发酵 5 0h后 ,木聚糖酶酶活达 10 32UmL-1.该木聚糖酶最适反应温度为 73℃ ,最适pH为 6 .5 ,在 10～ 6 7℃和pH 3～ 12时比较稳定 ,表明这是一种热稳定耐碱木聚糖酶 ,在造纸工业中具有良好的应用前景 .图 7表 1参 2 展开更多
关键词 热稳定耐碱木聚糖酶 THERMOMYCES LANUGINOSUS YNUCCAl54 28S rDNA
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新组合菌系SCB329-SCB933利用L-山梨糖发酵生产维生素C前体——2-酮基-L-古龙酸的研究 Ⅱ.利用L-山梨糖批加技术实现高糖发酵 被引量：7
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作者 任双喜 何建明 +4 位作者 宋祺 叶晴 郭新友 陈策实 尹光琳 《工业微生物》 CAS CSCD 1997年第2期5-9,共5页
新组合菌系氧化葡萄糖酸杆菌SCB329-苏芸金芽孢杆菌SCB933能在较长时间内保持高的转化活力且具有极强的抗杂菌污染的特性。在一次投糖分批发酵的基础上,探索在控制溶氧、pH、温度等条件下,分批加入L-山梨糖发酵生产2-酮基-L-古龙酸新工... 新组合菌系氧化葡萄糖酸杆菌SCB329-苏芸金芽孢杆菌SCB933能在较长时间内保持高的转化活力且具有极强的抗杂菌污染的特性。在一次投糖分批发酵的基础上,探索在控制溶氧、pH、温度等条件下,分批加入L-山梨糖发酵生产2-酮基-L-古龙酸新工艺。采用新工艺,既充分利用了菌系的优良特性,又避免了高糖浓度可能对菌系造成的不良影响。L-山梨糖最终浓度达到14%（w/v）,产酸120—135g/l,转化率90％左右,发酵周期40—65h。 展开更多
关键词 维生素C L-山梨糖 L-古龙酸 发酵 细菌
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氧化葡萄糖酸杆菌DSM 2003膜结合乙醇脱氢酶的纯化鉴定和性质研究 被引量：5
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作者 韦柳静 林金萍 +1 位作者 杨雪鹏 魏东芝 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第13期164-168,共5页
通过超速离心收集膜组分、表面活性剂溶解膜蛋白、CM-纤维素柱层析纯化等步骤,从氧化葡萄糖酸杆菌DSM2003中获得电泳纯的具有1,2-丙二醇脱氢酶活性的脱氢酶,此酶由两个亚基组成,其表观相对分子质量分别为80000和50000。经MALDI-TOFMS-M... 通过超速离心收集膜组分、表面活性剂溶解膜蛋白、CM-纤维素柱层析纯化等步骤,从氧化葡萄糖酸杆菌DSM2003中获得电泳纯的具有1,2-丙二醇脱氢酶活性的脱氢酶,此酶由两个亚基组成,其表观相对分子质量分别为80000和50000。经MALDI-TOFMS-MS质谱分析与肽质量指纹图谱检索鉴定,证明纯化得到的酶是乙醇脱氢酶。酶学性质分析表明,该酶的最适反应温度为30℃,最适pH值为5.5～6.0;该酶能催化多种一元醇、二元醇,但对包含3个以上羟基的多元醇基本无氧化活性;其催化活性随着底物碳链长度的增加而减小;大多数金属离子及抑制剂(Cu2+、Fe3+、Ca2+、EDTA等)对此酶活性均有抑制作用。 展开更多
关键词 氧化葡萄糖酸杆菌 膜结合乙醇脱氢酶 纯化 鉴定 酶学特性
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β—胡萝卜素的生物合成与发酵促进剂 被引量：20
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作者 王岁楼 张平之 《生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期4-5,共2页
本文论述了 β—胡萝卜素的生物合成途径及某些发酵助剂对微生物产β—胡萝卜素的影响。据对某些植物和真菌产生 β—胡萝卜素的研究 ,认为 β—胡萝卜素及相关类胡萝卜素是一类自乙酰COA开始的次生代谢产物。通过大量的研究实例表明 ,... 本文论述了 β—胡萝卜素的生物合成途径及某些发酵助剂对微生物产β—胡萝卜素的影响。据对某些植物和真菌产生 β—胡萝卜素的研究 ,认为 β—胡萝卜素及相关类胡萝卜素是一类自乙酰COA开始的次生代谢产物。通过大量的研究实例表明 ,添加合适的发酵促进剂是提高 β—胡萝卜素产量和降低生产成本非常有效的工艺学途径。 展开更多
关键词 Β-胡萝卜素 生物合成 发酵促进剂 菌种
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