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构建重组大肠杆菌全细胞催化合成β-羟基-β-甲基丁酸 被引量:1
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作者 叶佳微 徐洪 +2 位作者 廖雅芯 饶志明 徐美娟 《生物工程学报》 北大核心 2025年第9期3487-3503,共17页
β-羟基-β-甲基丁酸(β-hydroxy-β-methylbutyric acid,HMB)在运动营养、疾病预防等领域具有广泛的应用价值。传统的化学合成法受限于有毒试剂和剧烈反应,难以满足绿色生产的需求。生物合成法主要利用酶法催化或利用代谢工程技术进行... β-羟基-β-甲基丁酸(β-hydroxy-β-methylbutyric acid,HMB)在运动营养、疾病预防等领域具有广泛的应用价值。传统的化学合成法受限于有毒试剂和剧烈反应,难以满足绿色生产的需求。生物合成法主要利用酶法催化或利用代谢工程技术进行合成,具有效率高、成本低、可持续等优点,通过生物合成法生产HMB有良好的应用前景。本研究开发了一种基于生物合成法的HMB生产策略,以L-亮氨酸为底物,通过构建双酶共表达体系实现高效催化。首先,对普通变形杆菌来源的L-氨基酸脱氨酶(L-amino acid deaminase from Proteus vulgaris,Pv L-AAD)和褐家鼠来源的4-羟基苯丙酮酸双加氧酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase from Rattus norvegicus,Rn4-HPPD)进行酶学性质表征,结果表明Rn4-HPPD的酶活较低且催化pH偏酸性。基于酶蛋白表面电荷修饰策略,本研究对Rn4-HPPD的10个位点进行定点及组合突变,获得在催化pH区间内酶活显著提高的双突变体Rn4-HPPD^(H18R/N302R),在pH 5.5和pH 6.5下的酶活分别达到野生型的2.00倍和2.39倍;优化了这2种酶在大肠杆菌中的表达,确定双酶表达的最优比例为1:3后,在OD_(600)为70、pH为6.0、温度为35℃、Fe^(2+)浓度为1.5 mmol/L的条件下于5 L发酵罐中分批投料底物,HMB的最大产量达到8.60 g/L。本研究不仅提高了Rn4-HPPD的最适pH及酶活,还为实现HMB的微生物法高效合成提供了新思路。 展开更多
关键词 β-羟基-β-甲基丁酸 全细胞催化 4-羟基苯丙酮酸双加氧酶 酶蛋白表面电荷修饰 大肠杆菌
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Controllable synthesis of hydrogen-bonded organic framework encapsulated enzyme for continuous production of chiral hydroxybutyric acid in a two-stage cascade microreactor 被引量:1
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作者 Danyang Zhao Qiangqiang Xue +1 位作者 Yujun Wang Guangsheng Luo 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 2025年第1期175-184,共10页
Constructing a framework carrier to stabilize protein conformation,induce high embedding efficiency,and acquire low mass-transfer resistance is an urgent issue in the development of immobilized enzymes.Hydrogen-bonded... Constructing a framework carrier to stabilize protein conformation,induce high embedding efficiency,and acquire low mass-transfer resistance is an urgent issue in the development of immobilized enzymes.Hydrogen-bonded organic frameworks(HOFs)have promising application potential for embedding enzymes.In fact,no metal involvement is required,and HOFs exhibit superior biocompatibility,and free access to substrates in mesoporous channels.Herein,a facile in situ growth approach was proposed for the self-assembly of alcohol dehydrogenase encapsulated in HOF.The micron-scale bio-catalytic composite was rapidly synthesized under mild conditions(aqueous phase and ambient temperature)with a controllable embedding rate.The high crystallinity and periodic arrangement channels of HOF were preserved at a high enzyme encapsulation efficiency of 59%.This bio-composite improved the tolerance of the enzyme to the acid-base environment and retained 81%of its initial activity after five cycles of batch hydrogenation involving NADH coenzyme.Based on this controllably synthesized bio-catalytic material and a common lipase,we further developed a two-stage cascade microchemical system and achieved the continuous production of chiral hydroxybutyric acid(R-3-HBA). 展开更多
关键词 Hydrogen-bonded organic framework Immobilized enzyme Synthesis Chiral hydroxycarboxylic acid BIOCATALYSIS Nanostructure
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活性炭固载杂多酸催化合成柠檬酸三丁酯 被引量:30
3
作者 吴茂祥 高冬寿 +4 位作者 李定 罗军华 王燕茗 马锦波 陈长章 《现代化工》 EI CAS CSCD 1999年第3期29-31,共3页
用自制的固载杂多酸催化剂催化柠檬酸与正丁醇酯化反应合成柠檬酸三丁酯。探讨了催化剂固载量、反应时间、反应温度、酸醇比等因素对反应结果的影响。实验表明,此固载型催化剂不仅反应活性高、酯化率高、反应后处理简单。
关键词 增塑剂 柠檬酸三丁酯 杂多酸 活性炭 催化
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米根霉发酵生产L(+)-乳酸研究进展 被引量:42
4
作者 白冬梅 赵学明 +1 位作者 李鑫钢 徐世民 《现代化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期9-13,共5页
米根霉是生产绿色平台生物化学品L(+) 乳酸的理想菌种 ,目前集中在发酵工艺的优化、新型生物反应器的设计以及细胞固定化等方面的研究 ,通过控制米根霉菌体形态使之自聚集成为一定大小的球体进行乳酸发酵 ,操作简便、费用低。建议今后... 米根霉是生产绿色平台生物化学品L(+) 乳酸的理想菌种 ,目前集中在发酵工艺的优化、新型生物反应器的设计以及细胞固定化等方面的研究 ,通过控制米根霉菌体形态使之自聚集成为一定大小的球体进行乳酸发酵 ,操作简便、费用低。建议今后从应用代谢工程技术定向选育米根霉L(+) 乳酸高产菌 ,改进发酵设备、改良提取工艺 ,合理控制乳酸产品的构型等几个方面着手进行进一步研究 ,从而降低乳酸生产原料的成本 ,扩大L(+) 乳酸的应用领域。 展开更多
关键词 米根霉 L(+)-乳酸 发酵 2-羧基丙酸 研究进展
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β-(3,4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯/冰片酯合成研究 被引量:14
5
作者 张群正 董岩 +2 位作者 南叶飞 蔡雪刁 郑晓晖 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1466-1469,共4页
以3,4-二羟基苯甲醛为起始原料,经苄基保护、Darzens环氧化、Lewis酸开环、NaBH4还原、催化加氢脱保护得到β-(3,4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯和β-(3,4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯,所得化合物的结构通过1HNMR、13CNMR,IR,MS证... 以3,4-二羟基苯甲醛为起始原料,经苄基保护、Darzens环氧化、Lewis酸开环、NaBH4还原、催化加氢脱保护得到β-(3,4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯和β-(3,4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯,所得化合物的结构通过1HNMR、13CNMR,IR,MS证实.该方法操作简单、毒性低、产物易于纯化. 展开更多
关键词 酯化 β-(3 4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸异丙酯 β-(3 4-二羟基苯基)-α-羟基丙酸冰片酯 超强酸催化
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乳酸酯及其衍生物的合成研究进展 被引量:27
6
作者 陈丹云 王敬平 柏艳 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期243-246,共4页
介绍了近几年来乳酸乙酯、乳酸丁酯、乳酸乙酯乙酸酯、O -酰基乳酸酯、丙酮酸乙酯、 2 -氯丙酸乙酯、O -对甲苯磺酰 - (S) -乳酸甲 (乙 )酯及L(- )对甲苯磺酰乳酸乙酯的合成研究进展 。
关键词 乳酸乙酯 乳酸丁酯 乳酸乙酯乙酸酯 O-酰基乳酸酯 丙酮酸乙酯 乳酸酯 衍生物 合成 研究进展
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SO_4^(2-)改性的锆交联黏土固体酸催化合成柠檬酸三丁酯 被引量:20
7
作者 付丽华 郭锡坤 +1 位作者 林绮纯 李俊 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第1期28-31,共4页
制备了SO4 2 -改性的锆交联黏土固体酸催化剂 (A) ,用于柠檬酸 (B)和正丁醇 (C)的酯化反应 ,与浓硫酸 ,钠基膨润土和锆交联黏土作催化剂的情况相比 ,SO4 2 -改性的锆交联黏土作催化剂时柠檬酸的转化率和产物的纯度更高。同时考察了催化... 制备了SO4 2 -改性的锆交联黏土固体酸催化剂 (A) ,用于柠檬酸 (B)和正丁醇 (C)的酯化反应 ,与浓硫酸 ,钠基膨润土和锆交联黏土作催化剂的情况相比 ,SO4 2 -改性的锆交联黏土作催化剂时柠檬酸的转化率和产物的纯度更高。同时考察了催化剂用量w(A)、酸醇量比n(B)∶n(C)、反应时间 (t)、反应温度 (θ)对其催化合成柠檬酸三丁酯 (D)的影响 ,并对合成的产物进行红外光谱分析及气相色谱分析。实验结果表明 :SO4 2 -改性的锆交联黏土固体酸催化柠檬酸与正丁醇的酯化反应的最佳反应条件为 :反应温度为 15 0℃ ,n(B)∶n(C) =1∶4,反应时间 3 .5h ,催化剂用量占反应投料总质量的百分比w(A) =1.2 % ,柠檬酸的转化率达 96 .6 0 % ,反应产物柠檬酸三丁酯的质量分数w(D) >99 0 0 % 展开更多
关键词 锆交联黏土 柠檬酸三丁酯 酯化 固体酸 催化合成
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SO_4^(2-)/ZrO_2-TiO_2催化合成乳酸乙酯的研究 被引量:19
8
作者 高静 赵学明 黄志红 《四川大学学报(工程科学版)》 EI CAS CSCD 2002年第5期36-38,共3页
以乳酸和乙醇为原料 ,在固体超强酸SO4 2 - /ZrO2 -TiO2 的催化下合成乳酸乙酯的工艺进行了的实验研究 ,最佳制备条件为 :氧化物配比为ZrO2 ∶TiO2 =1∶1 (摩尔比 ) ,浸泡硫酸浓度为 1 .5mol·L- 1 ,浸泡时间为 2 4h ,焙烧温度为 6... 以乳酸和乙醇为原料 ,在固体超强酸SO4 2 - /ZrO2 -TiO2 的催化下合成乳酸乙酯的工艺进行了的实验研究 ,最佳制备条件为 :氧化物配比为ZrO2 ∶TiO2 =1∶1 (摩尔比 ) ,浸泡硫酸浓度为 1 .5mol·L- 1 ,浸泡时间为 2 4h ,焙烧温度为 60 0℃ ,焙烧时间为 1h ;最佳酯化反应条件为 :醇酸比为 1 .5∶1 (摩尔比 ) ,催化剂的用量为乳酸质量的 2 .0 % ,反应时间为 1 1h ,乳酸乙酯产率可达 46 .76 %。 展开更多
关键词 催化合成 乳酸 乳酸乙酯 催化剂 固体超强酸 酯化反应 工艺研究
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2,2-二羟甲基丁酸的合成 被引量:13
9
作者 史红月 张佳欣 +1 位作者 田志娟 薛传薪 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期101-104,共4页
以甲醛和丁醛为原料 ,经羟醛缩合及氧化反应合成了 2 ,2 二羟甲基丁酸 (DMBA)。缩合反应在 2 0℃、n(甲醛 ) /n(丁醛 ) =1 8、催化剂为w(Na2 CO3 ) =3%和w(NaOH) =2 %的混合溶液其用量占加入的甲醛和丁醛总用量的 1 5 %,反应 1h ,加甲... 以甲醛和丁醛为原料 ,经羟醛缩合及氧化反应合成了 2 ,2 二羟甲基丁酸 (DMBA)。缩合反应在 2 0℃、n(甲醛 ) /n(丁醛 ) =1 8、催化剂为w(Na2 CO3 ) =3%和w(NaOH) =2 %的混合溶液其用量占加入的甲醛和丁醛总用量的 1 5 %,反应 1h ,加甲酸中和碱 ,经精制使中间产物 2 ,2 二羟甲基丁醛的质量分数达到 91 0 %;氧化反应在 6 0℃、n(H2 O2 ) /n(2 ,2 二羟甲基丁醛 ) =1 2的条件下反应 6h ,产品收率 (相对于丁醛的用量 )达 81 1%,w(DMBA) =98%。 展开更多
关键词 2 2-二羟甲基丁酸 合成 2 2-二羟甲基丁醛 缩合 氧化
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乳酸的生产技术及其研究进展 被引量:25
10
作者 曾炜 陈丰秋 詹晓力 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期744-749,共6页
综述了绿色平台化合物——乳酸的生产方法及其最新技术研究进展,分析了乳酸生产技术发展的现状。认为关键问题是一方面要进一步完善现有的生产技术,另一方面应开发新的绿色合成技术,实现高效大规模生产,降低生产成本,并对绿色合成技术... 综述了绿色平台化合物——乳酸的生产方法及其最新技术研究进展,分析了乳酸生产技术发展的现状。认为关键问题是一方面要进一步完善现有的生产技术,另一方面应开发新的绿色合成技术,实现高效大规模生产,降低生产成本,并对绿色合成技术发展方向进行了分析和探讨。 展开更多
关键词 乳酸 平台化合物 发酵法 化学合成法 生物质
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乙醇酸的合成及应用 被引量:29
11
作者 陈栋梁 瞿美臻 +1 位作者 白宇新 于作龙 《合成化学》 CAS CSCD 2001年第3期194-198,共5页
综述了乙醇酸的合成方法、分离提纯以及在有机合成和生产中的应用。参考文献 2
关键词 乙醇酸 合成 分离 提纯
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用混合氯化稀土催化合成柠檬酸三丁酯 被引量:33
12
作者 刘桂华 李永绣 +1 位作者 刘辉彪 陈菁 《现代化工》 EI CAS CSCD 1999年第1期21-23,共3页
研究了氯化稀土对柠檬酸与正丁醇酯化反应的催化性能。结果表明,单一氯化稀土和混合氯化稀土均具有很好的催化活性。为此,系统地研究了混合氯化稀土催化合成柠檬酸三丁酯的工艺条件。
关键词 氯化稀土 催化剂 酯化 柠檬酸三丁酯 混合 催化
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聚乳酸的固相聚合研究 被引量:9
13
作者 宇恒星 王朝生 +3 位作者 黄南薰 唐志廉 潘容 顾家耀 《东华大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期105-107,122,共4页
对聚乳酸的新聚合方法———固相聚合进行了研究 ,探讨了聚合温度、聚合时间、氮气流量、催化剂等对聚乳酸粘均相对分子质量的影响 ;验证了固相聚合方法的有效性。
关键词 聚乳酸 固相聚合 聚合条件
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乳酸精制新工艺——刮膜蒸发和短程蒸馏联用法 被引量:8
14
作者 吕九琢 徐亚贤 +1 位作者 袁光 韩锡广 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期44-46,共3页
2 0 %~ 30 %粗乳酸经刮膜蒸发器 ,在 1 0 0 0~ 70 0 0Pa,60~ 1 0 0℃条件下蒸发 5~ 2 5min ,得到 80 %~ 90 %亚纯乳酸。亚纯乳酸再经短程蒸馏器 ,在 1 0~ 1 0 0Pa ,60~ 90℃条件下蒸馏 0 .5~ 5min得到纯乳酸。这种方法不用活性... 2 0 %~ 30 %粗乳酸经刮膜蒸发器 ,在 1 0 0 0~ 70 0 0Pa,60~ 1 0 0℃条件下蒸发 5~ 2 5min ,得到 80 %~ 90 %亚纯乳酸。亚纯乳酸再经短程蒸馏器 ,在 1 0~ 1 0 0Pa ,60~ 90℃条件下蒸馏 0 .5~ 5min得到纯乳酸。这种方法不用活性炭脱色和离子交换 ,仅经过两次减压蒸馏就能得到达到国家标准的纯乳酸。 展开更多
关键词 乳酸 精制 刮膜蒸发 短程蒸馏 联用法
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乳酸、羟基乙酸共聚物的制备 被引量:4
15
作者 张灿 吉民 +1 位作者 黄文龙 郭岩 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期17-18,共2页
乳酸、羟基乙酸共聚物(PGLA)为新型的生物降解型材料。本文以价廉无毒的催化剂氧化锌取代了辛酸亚锡,且去除了原来的封管反应,制备了不同规格的PGLA,并测定了它们的一些理化性质。
关键词 生物降解型材料 乳酸 羟基乙酸 共聚物 制备
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草酸电还原制备乙醇酸 被引量:6
16
作者 李宇展 邱丽 顾登平 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第4期242-243,246,共3页
用循环伏安法确定了草酸可以还原为乙醇酸,证明了从草酸研制乙醇酸的可行性。工艺采用以铅电极作阴极材料的阳离子交换膜电解槽,电解草酸制备乙醇酸,并以电流密度、电量、温度和电解液的流速作了四因素四水平的正交实验,得出最佳工艺条... 用循环伏安法确定了草酸可以还原为乙醇酸,证明了从草酸研制乙醇酸的可行性。工艺采用以铅电极作阴极材料的阳离子交换膜电解槽,电解草酸制备乙醇酸,并以电流密度、电量、温度和电解液的流速作了四因素四水平的正交实验,得出最佳工艺条件为电流密度1400A/m2,电量1 7F/mol,温度40℃,电解液流速0 15m/s,产率达88%以上。 展开更多
关键词 循环伏安法 草酸 乙醇酸 电化学还原 制备
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活性炭固载三氯化铁催化合成乙酸仲丁酯 被引量:8
17
作者 刘春生 周海霞 +1 位作者 何淼 罗根祥 《辽宁石油化工大学学报》 CAS 2005年第3期17-19,共3页
以活性炭固载三氯化铁为非均相催化剂,对仲丁醇与乙酸酐之间的酰化反应进行了研究,考察了催化剂质量、醇酐摩尔比、反应时间对乙酸仲丁酯收率的影响。结果表明,活性炭固载三氯化铁有着较好的催化活性,当乙酸酐的物质的量为0.1 mol,醇酐... 以活性炭固载三氯化铁为非均相催化剂,对仲丁醇与乙酸酐之间的酰化反应进行了研究,考察了催化剂质量、醇酐摩尔比、反应时间对乙酸仲丁酯收率的影响。结果表明,活性炭固载三氯化铁有着较好的催化活性,当乙酸酐的物质的量为0.1 mol,醇酐摩尔比为1.1,催化剂质量为0.30 g,反应30 min后,乙酸仲丁酯收率可达到97.5%,且催化剂重复使用5次仍保持较高活性,所得产品无色透明,具有很高的纯度。并对产品进行了折光率和红外光谱表征。 展开更多
关键词 乙酸仲丁酯 非均相 活性炭固载三氯化铁 催化合成 酰化反应
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碳酸钾催化苯酚在超临界CO_2中合成水杨酸的实验研究 被引量:4
18
作者 徐明仙 胡斯翰 +1 位作者 丁春晓 林春绵 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第3期529-532,共4页
在超临界CO2中以K2CO3为催化剂,由苯酚一步直接合成了水杨酸。改进了传统的有机酚酸(Kolbe-Schmitt反应)的两步法合成工艺。在CO2压力4~14 MPa、温度160~220℃,考察温度、压力、反应时间、催化剂用量等条件对水杨酸收率的影响。水杨... 在超临界CO2中以K2CO3为催化剂,由苯酚一步直接合成了水杨酸。改进了传统的有机酚酸(Kolbe-Schmitt反应)的两步法合成工艺。在CO2压力4~14 MPa、温度160~220℃,考察温度、压力、反应时间、催化剂用量等条件对水杨酸收率的影响。水杨酸最高得率接近54%,产物的选择性在99%以上,副产物有极少量对羟基苯甲酸。较为理想的反应条件为:反应温度190℃,反应压力8 MPa,反应时间3~5 h,催化剂用量10 mmol(nK2CO3/n phenol=1)。 展开更多
关键词 超临界CO2 碳酸钾 苯酚 水杨酸
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含离子液体介质中脂肪酶高效催化对羟基苯甘氨酸甲酯不对称氨解 被引量:6
19
作者 吴虹 娄文勇 宗敏华 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期481-487,共7页
利用离子液体C_6MIm·BF_4(20%,v/v)/叔丁醇混合介质中脂肪酶Novozym 435催化对羟基苯甘氨酸甲酯不对称氨解反应,高效地制备了对映体纯D-对羟基苯甘氨酸酰胺。该反应的最适氨源为氨基甲酸铵,其较佳浓度为120~160mmol·L^(-1);... 利用离子液体C_6MIm·BF_4(20%,v/v)/叔丁醇混合介质中脂肪酶Novozym 435催化对羟基苯甘氨酸甲酯不对称氨解反应,高效地制备了对映体纯D-对羟基苯甘氨酸酰胺。该反应的最适氨源为氨基甲酸铵,其较佳浓度为120~160mmol·L^(-1);最适水活度、反应温度、pH值、对羟基苯甘氨酸甲酯浓度分别为0.55~0.75、35~40℃、7.5~8.0和40mmol·L^(-1)。在上述条件下,反应初速度和对映体选择比分别为5.88mmol·L^(-1)·h^(-1)和83(E值),反应6h,产率为47.6%,产物e.e.值为92.9%。与有机溶剂叔丁醇相比,脂肪酶Novozym 435在C_6MIm·BF_4(20%,v/v)/叔丁醇混合溶剂中的操作稳定性显著提高,反应7批次后,仍能维持90%以上的催化活性,而在叔丁醇反应介质中,仅能维持41%的催化活性。 展开更多
关键词 脂肪酶 不对称氨解 对羟基苯甘氨酸甲酯 离子液体
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二苯胺甲烷磺酸盐催化合成乙酸仲丁酯 被引量:10
20
作者 刘春生 郭春燕 +1 位作者 黄占凯 罗根祥 《辽宁石油化工大学学报》 CAS 2004年第4期25-27,共3页
 以二苯胺甲烷磺酸盐为催化剂,对乙酸与仲丁醇之间的酯化反应进行了研究,考察了反应时间、催化剂用量、醇酸摩尔比等因素对乙酸仲丁酯酯化率的影响。实验结果表明,在最佳反应条件为:当乙酸的物质的量为0.1mol,醇酸摩尔比为1.4,二苯胺...  以二苯胺甲烷磺酸盐为催化剂,对乙酸与仲丁醇之间的酯化反应进行了研究,考察了反应时间、催化剂用量、醇酸摩尔比等因素对乙酸仲丁酯酯化率的影响。实验结果表明,在最佳反应条件为:当乙酸的物质的量为0.1mol,醇酸摩尔比为1.4,二苯胺甲烷磺酸盐质量为0.8g(约3.2mmol),带水剂环己烷的体积为8mL,反应时间为45min,酯化率达95.7%,且所得产品无色透明,具有很高的纯度。催化剂重复使用5次仍保持较高活性。合成反应条件温和,反应时间较短,操作简便,后处理过程简单,无三废产生。同时,对产品的红外光谱进行了表征。 展开更多
关键词 乙酸仲丁酯 二苯胺甲烷磺酸盐 酯化
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