目的:建立一种可靠、灵敏、专属的液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)分析方法测定食蟹猴血浆中的达格列普隆含量,对建立的生物分析方法进行验证,并应用于食蟹猴体内药代动力学实验生物样本的测定。方法:50μL血浆样品经蛋白沉淀处理后上...目的:建立一种可靠、灵敏、专属的液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)分析方法测定食蟹猴血浆中的达格列普隆含量,对建立的生物分析方法进行验证,并应用于食蟹猴体内药代动力学实验生物样本的测定。方法:50μL血浆样品经蛋白沉淀处理后上样,以特非那定为内标。色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C182.1mm×50mm,3.5µm,流动相为0.1%甲酸5mmol/L乙酸铵水溶液。在电喷雾电离源正离子模式下检测,达格列普隆和特非那定离子对通道(m/z)分别为556.2→324.3,472.4→436.4。定量范围为0.1~100ng/mL。口服灌胃给予3只雄性食蟹猴10mg/kg达格列普隆后,使用已验证的LC-MS/MS分析方法检测猴血浆中达格列普隆的含量,使用代谢动力学数据分析软件WinNonlin对血浆浓度数据进行统计,利用非房室模型法(NCA)计算药代参数。结果:验证结果显示,达格列普隆在1~1000ng/mL内具有良好的线性关系(r=0.9989),低、中、高浓度的提取回收率均值在93.80%~104.90%;批内和批间准确度分别为93.10%~107.40%和94.80%~105.10%,精密度均≤15.0%。本方法无明显基质效应干扰,达格列普隆在猴血浆中短期室温稳定性和长期冻存稳定性均符合要求。结论:建立的LC-MS/MS分析方法灵敏、稳定、准确、重复性良好,适用于进行食蟹猴血浆中达格列普隆的药代动力学研究。展开更多
文摘目的:建立一种可靠、灵敏、专属的液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)分析方法测定食蟹猴血浆中的达格列普隆含量,对建立的生物分析方法进行验证,并应用于食蟹猴体内药代动力学实验生物样本的测定。方法:50μL血浆样品经蛋白沉淀处理后上样,以特非那定为内标。色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C182.1mm×50mm,3.5µm,流动相为0.1%甲酸5mmol/L乙酸铵水溶液。在电喷雾电离源正离子模式下检测,达格列普隆和特非那定离子对通道(m/z)分别为556.2→324.3,472.4→436.4。定量范围为0.1~100ng/mL。口服灌胃给予3只雄性食蟹猴10mg/kg达格列普隆后,使用已验证的LC-MS/MS分析方法检测猴血浆中达格列普隆的含量,使用代谢动力学数据分析软件WinNonlin对血浆浓度数据进行统计,利用非房室模型法(NCA)计算药代参数。结果:验证结果显示,达格列普隆在1~1000ng/mL内具有良好的线性关系(r=0.9989),低、中、高浓度的提取回收率均值在93.80%~104.90%;批内和批间准确度分别为93.10%~107.40%和94.80%~105.10%,精密度均≤15.0%。本方法无明显基质效应干扰,达格列普隆在猴血浆中短期室温稳定性和长期冻存稳定性均符合要求。结论:建立的LC-MS/MS分析方法灵敏、稳定、准确、重复性良好,适用于进行食蟹猴血浆中达格列普隆的药代动力学研究。
