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低氧对斑马鱼细胞存活能力的影响 被引量：7
1
作者 武晓会 刘洋 +3 位作者 狄治朝 赵文静 王丛丛 许强华 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1641-1647,共7页
【目的】明确低氧对斑马鱼细胞存活和抗氧化酶系统的影响,为揭示鱼类细胞低氧适应机理打下基础。【方法】采用不同浓度低氧处理斑马鱼胚胎上皮细胞(ZF-4细胞),检测低氧对其存活率的影响,并分析低氧应激下ZF-4细胞中超氧化物歧化酶(SOD)... 【目的】明确低氧对斑马鱼细胞存活和抗氧化酶系统的影响,为揭示鱼类细胞低氧适应机理打下基础。【方法】采用不同浓度低氧处理斑马鱼胚胎上皮细胞(ZF-4细胞),检测低氧对其存活率的影响,并分析低氧应激下ZF-4细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮合酶(NOS)活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化。【结果】1.0%O2处理可促进ZF-4细胞存活;SOD活性呈先降低后升高的变化趋势,在处理24 h时达最高值;CAT活性呈先降低后升高再降低的波动变化趋势,于处理8 h时达最低值;GSH活性在处理16 h时达最高值,随后开始下降;MDA含量与对照组无显著差异(P>0.05);NO含量和NOS活性在处理16 h时达最高值。经0.1%O2处理8 h后ZF-4细胞的存活率达最高值;SOD活性在处理24 h时显著高于对照组(P<0.05,下同);经0.1%O2处理后CAT活性极显著降低(P<0.01,下同),GSH活性则从处理8 h后极显著高于对照组;MDA含量显著或极显著降低;NO含量和NOS活性极显著降低。【结论】在极端缺氧环境下,斑马鱼细胞主要通过提高SOD和GSH等抗氧化酶活性以提高细胞的低氧适应能力,从而促进细胞存活。 展开更多
关键词 斑马鱼 ZF-4细胞 低氧 氧化应激 抗氧化酶 存活能力
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紫草素可抑制在RAW264.7巨噬细胞和斑马鱼幼虫中由脂多糖诱导的炎症反应 被引量：9
2
作者 李静 武万强 杨靖亚 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2023年第1期38-45,共8页
【目的】通过巨噬细胞和斑马鱼这2种模型来评价紫草素的抗炎作用。【方法】首先使用细胞计数试剂盒检测紫草素对细胞活性的影响,然后将巨噬细胞分为空白对照组、脂多糖组((LPS 1μg/mL)、LPS(1μg/mL)+紫草素(0.3、1.5、3μg/mL))组和... 【目的】通过巨噬细胞和斑马鱼这2种模型来评价紫草素的抗炎作用。【方法】首先使用细胞计数试剂盒检测紫草素对细胞活性的影响,然后将巨噬细胞分为空白对照组、脂多糖组((LPS 1μg/mL)、LPS(1μg/mL)+紫草素(0.3、1.5、3μg/mL))组和紫草素(3μg/mL)组。采用一氧化氮产生法和酶联免疫吸附法检测促炎因子和促炎细胞介质的含量。在斑马鱼试验中,检测紫草素对斑马鱼胚胎的毒性,并通过存活率、体型、心率和体长等结果,选择合适的紫草素浓度(0.001、0.01、0.1μg/mL)进行后续试验。在转基因斑马鱼卵黄囊中注射2 nL LPS(2 mg/mL)建立炎症模型,测定紫草素处理后卵黄囊中2种细胞(巨噬细胞和中性粒细胞)的募集情况、测定紫草素对脂多糖诱导的斑马鱼心跳的影响。【结果】在细胞研究中,与仅经LPS处理的细胞相比,紫草素的加入可以减少促炎细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的积累。同时,紫草素还能抑制一氧化氮的分泌量,抑制率可达50%。斑马鱼的研究表明,紫草素有效地减少了卵黄囊中两种细胞的大量聚集,最高抑制率为73.3%,也减轻了LPS引起的斑马鱼心率增加的症状。【结论】紫草素可通过抑制巨噬细胞和中性粒细胞的升高来减轻炎症作用,是一种潜在的天然抗炎活性物质,有望进一步发展成为巨噬细胞和中性粒细胞的阻滞剂。 展开更多
关键词 紫草素 脂多糖 巨噬细胞 中性粒细胞 斑马鱼 抗炎作用
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黑玛丽养殖技术初探 被引量：1
3
作者 王东梅 侯文久 《科学养鱼》 北大核心 2014年第5期78-79,共2页
黑玛丽又名黑摩利、黑花鳉、黑姑娘，属胎鳉科、花鳉属，产地墨西哥及中美洲。其身体长纺锤形，头小，吻尖，尾柄侧扁，成年雄鱼体长5～6厘米，雌鱼体长可达7～8厘米。
关键词 养殖技术 中美洲 墨西哥 纺锤形 体长
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斑马鱼gdnfa基因表达特征及gdnfa+/-F1基因型鉴定 被引量：2
4
作者 杨倩 王顺哲 +4 位作者 刘璎慧 刘祎 汪泳昌 李胜忠 张俊杰 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2552-2561,共10页
【目的】明确gdnfa基因在斑马鱼中的表达特征及其进化保守性,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立gdnfa^(+/-)F_(1)代杂合突变体,为后续生成gdnfa^(-/-)F_(2)代纯合突变体打下基础,同时为探讨gdnfa基因在斑马鱼性腺分化和发育中的作用机制... 【目的】明确gdnfa基因在斑马鱼中的表达特征及其进化保守性,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立gdnfa^(+/-)F_(1)代杂合突变体,为后续生成gdnfa^(-/-)F_(2)代纯合突变体打下基础,同时为探讨gdnfa基因在斑马鱼性腺分化和发育中的作用机制提供理论依据。【方法】通过下载不同物种的GDNF蛋白氨基酸序列,并分析其保守结构域,探究该基因在不同物种中的进化保守性。利用实时荧光定量PCR检测gdnfa基因在6月龄斑马鱼不同组织中的表达情况,并通过CRISPR/Cas9基因编辑技术获得gdnfa F_(0)代突变个体,随后与野生型回交获取gdnfa^(+/-)F_(1)代突变个体,并分析其基因型及突变类型。最后,通过组织石蜡切片分析3月龄gdnfa^(+/-)F_(1)代个体与同期野生型性腺组织间的差异。【结果】斑马鱼GDNFA蛋白分子量为26.89 kD,由235个氨基酸残基组成,包含13个疏水氨基酸和51个酸性氨基酸,理论等电点(pI)为8.455,且该蛋白存在1个TGF-β结构域。斑马鱼GDNFA蛋白序列进化较保守,与非洲爪蟾、小鼠和人类GDNFA蛋白具有相同的TGF-β结构域,推测GDNFA蛋白序列在鱼类、人类和爬型动物类中进化保守。gdnfa基因在6月龄斑马鱼的性腺(精巢和卵巢)、肾脏、肝脏、鳃和肌肉组织中均有表达,但精巢中gdnfa基因的相对表达量显著高于其他组织(P<0.01)。繁育得到的48尾斑马鱼gdnfa^(+/-)F_(1)代杂合突变体中产生了3种突变类型,分别为在靶点附近插入2个碱基(△+2 bp)、缺失2个碱基(△-2 bp)和缺失12个碱基(△-12 bp)。48尾gdnfa^(+/-)F_(1)代个体的雄性∶雌性=14∶34,呈现出明显的雌性性别偏向。与野生型斑马鱼GDNFA蛋白相比,斑马鱼gdnfa^(+/-)F_(1)代个体的GDNFA蛋白三级结构发生了明显变化。性腺石蜡切片观察发现,部分gdnfa^(+/-)F_(1)代个体(△-2 bp)精巢中A型精原细胞团减少,B型精原细胞团排列更疏松;部分个体(△-12 bp)卵巢中更多的皮质泡卵母细胞累积。【结论】斑马鱼gdnfa基因与其他硬骨鱼类平行进化,且gdnfa基因在硬骨鱼类的进化过程中具有高度保守性;由于gdnfa基因在斑马鱼精巢发育中发挥作用,故gdnfa^(+/-)F_(1)代个体性别比例偏向于雌性,推测其参与斑马鱼性别分化。gdnfa^(+/-)F_(1)代杂合体部分功能的缺失对精原细胞的产生、皮层滤泡期卵母细胞到初级生长期卵母细胞的过渡阶段起到阻滞作用。获得的gdnfa^(+/-)F_(1)代个体可用于生成gdnfa^(-/-)F_(2)代纯合个体。 展开更多
关键词 斑马鱼 gdnfa基因 精巢 表达特征 CRISPR/Cas9
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斑马鱼E3泛素连接酶基因的生物信息学分析和mRNA表达 被引量：1
5
作者 李宝钧 王伟伟 安丽霞 《畜牧与饲料科学》 2019年第8期12-16,共5页
[目的]对斑马鱼E3泛素连接酶基因进行生物信息学分析,并研究其mRNA表达情况。[方法]利用生物信息学方法分析斑马鱼E3泛素连接酶基因的cDNA序列、蛋白质二级结构、结构域、氨基酸序列同源性,并构建进化树;利用整胚原位杂交技术研究目的... [目的]对斑马鱼E3泛素连接酶基因进行生物信息学分析,并研究其mRNA表达情况。[方法]利用生物信息学方法分析斑马鱼E3泛素连接酶基因的cDNA序列、蛋白质二级结构、结构域、氨基酸序列同源性,并构建进化树;利用整胚原位杂交技术研究目的基因在斑马鱼体内的mRNA表达模式。[结果]在NCBI基因库中找出TRIM54、TRIM55a、TRIM55b、TRIM63a、TRIM63b和TRIM101 6个斑马鱼E3泛素连接酶基因。这些基因之间有较高的同源性,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,编码的蛋白质均含有3个保守结构域:环锌指、B-box锌指和卷曲螺旋。进化树分析显示,所有基因聚为4组:各物种TRIM54基因聚为一组;各物种TRIM55基因聚为一组,但靠近于斑马鱼TRIM101基因分支;TRIM63基因分为一组。整胚原位杂交结果显示,这些TRIM基因的mRNA均在受精后24 h的斑马鱼的肌节中表达,且TRIM55a、TRIM63a和TRIM101基因表达量较高。这些TRIM基因在肌肉发育和肌肉功能中可能发挥作用。[结论]斑马鱼的6个E3泛素连接酶基因有较高的保守性,其mRNA特异性表达于肌节部位。结果对深入研究这些基因在鱼类肌肉中的作用和指导鱼类生产具有一定的意义。 展开更多
关键词 斑马鱼 E3泛素连接酶 生物信息学 MRNA表达
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双须骨舌鱼(Osteoglossum bicirrhosum)寄生单殖吸虫中国一新纪录属
6
作者 谢志胜 马江霞 +4 位作者 郝翠兰 段成任 杨昆明 郭爱民 岳城 《经济动物学报》 CAS 2018年第3期168-171,176,共5页
为研究新疆观赏鱼市场双须骨舌鱼感染单殖吸虫的种类情况,采用形态学比较具有鉴定依据的背腹中央大钩、联接片、交接器等结构,初步鉴定为寄生在双须骨舌鱼鳃部的单殖吸虫有两种,分别为角棒虫属(Gonocleithrum)的银龙角棒虫(Gonocleithru... 为研究新疆观赏鱼市场双须骨舌鱼感染单殖吸虫的种类情况,采用形态学比较具有鉴定依据的背腹中央大钩、联接片、交接器等结构,初步鉴定为寄生在双须骨舌鱼鳃部的单殖吸虫有两种,分别为角棒虫属(Gonocleithrum)的银龙角棒虫(Gonocleithrum aruanae)、相似角棒虫(Gonocleithrum coenoideum)。经资料检索,该属种在我国均未报到,故为属种新纪录,该新纪录属区别于其他属的主要特征是在身体中部有一"Y"形的性腺片和呈螺旋形卷曲的支持器。所有标本均保存于新疆农业大学鱼类寄生虫学实验室。 展开更多
关键词 双须骨舌鱼 单殖吸虫 新纪录
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