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SGT1介导自噬和凋亡促进罗氏沼虾抗氧化系统抵御嗜水气单胞菌感染
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作者 吕彬彬 赵飞 +7 位作者 王玲 于凌云 陈总会 邓玉婷 谭爱萍 廖永众 罗璋 王飞飞 《水产学报》 北大核心 2026年第3期207-222,共16页
【目的】探究抑制SKP1的G2等位基因(SGT1)的分子特征及其在罗氏沼虾抗菌免疫中的作用机制,阐明其在自噬与凋亡调控中的功能。【方法】采用PCR方法克隆并鉴定罗氏沼虾SGT1基因(命名为MrSGT1),结合生物信息学进行序列特征、结构域与系统... 【目的】探究抑制SKP1的G2等位基因(SGT1)的分子特征及其在罗氏沼虾抗菌免疫中的作用机制,阐明其在自噬与凋亡调控中的功能。【方法】采用PCR方法克隆并鉴定罗氏沼虾SGT1基因(命名为MrSGT1),结合生物信息学进行序列特征、结构域与系统进化分析;通过qRT-PCR检测MrSGT1在不同组织及经嗜水气单胞菌和脂多糖刺激后的表达变化;通过RNA干扰、qRT-PCR、Western blot以及酶活性检测等方式分析MrSGT1在自噬、凋亡及抗氧化系统中的功能。【结果】MrSGT1的开放阅读框(ORF)为687 bp,预测编码228个氨基酸,含有CS和SGS两个结构域,蛋白分子质量为25.41 ku,等电点为5.54。序列相似性分析表明MrSGT1与日本沼虾SGT1相似性为95.61%,系统进化树分析显示MrSGT1与甲壳动物聚为一支,这表明MrSGT1在甲壳类动物中进化相对保守。组织分布表明MrSGT1在肝胰腺中表达量最高。使用嗜水气单胞菌和LPS刺激罗氏沼虾后,MrSGT1在肝胰腺和鳃中的表达水平显著上调,表明其参与罗氏沼虾的抗菌免疫功能。RNA干扰MrSGT1后使用嗜水气单胞菌刺激罗氏沼虾,发现自噬水平变化,凋亡水平显著升高,同时抗氧化相关酶的活性显著降低。【结论】MrSGT1可通过调控自噬与凋亡的动态平衡以提高罗氏沼虾抗氧化系统,增强宿主抵御病原感染的能力。本研究结果将为深入探究罗氏沼虾的抗菌防御机制提供重要数据基础。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 嗜水气单胞菌 抑制SKP1的G2等位基因(SGT1) 凋亡 自噬
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novel miR-56对罗氏沼虾免疫相关基因表达的调节作用
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作者 徐齐 戴习林 +1 位作者 付元帅 李云 《南方农业学报》 北大核心 2025年第6期1802-1812,共11页
【目的】揭示novel miR-56对罗氏沼虾免疫相关基因的调节机制,为进一步探究miRNA参与罗氏沼虾先天免疫调节提供理论依据。【方法】以实时荧光定量PCR检测副溶血弧菌感染后罗氏沼虾鳃组织中的novel miR-56表达变化,采用RNAhybrid预测筛选... 【目的】揭示novel miR-56对罗氏沼虾免疫相关基因的调节机制,为进一步探究miRNA参与罗氏沼虾先天免疫调节提供理论依据。【方法】以实时荧光定量PCR检测副溶血弧菌感染后罗氏沼虾鳃组织中的novel miR-56表达变化,采用RNAhybrid预测筛选出novel miR-56的潜在靶基因TLR1,通过双荧光素酶报告基因检测验证novel miR-56与靶基因TLR1的靶向关系;体外注射不同剂量(0.6、1.0和1.5μg/g)的agomiR-56和antagomiR-56干扰novel miR-56表达,筛选出agomiR-56和antagomiR-56的最佳注射剂量,并以实时荧光定量PCR检测罗氏沼虾免疫相关基因的表达变化。【结果】感染副溶血弧菌后,罗氏沼虾鳃组织中的novel miR-56相对表达量随感染时间的推移呈逐渐上升趋势,至感染后72 h,novel miR-56相对表达量约是感染前(0 h)的6.18倍。TLR1是novel miR-56的靶基因,二者的结合位点位于TLR1基因3'非编码区(3'-UTR),且novel miR-56过表达会抑制TLR1基因的表达。于罗氏沼虾围心腔注射0.6、1.0和1.5μg/g的agomiR-56均能显著抑制TLR1基因表达(P<0.05,下同),且以1.5μg/g agomiR-56的抑制效果最优;罗氏沼虾其他免疫相关基因(Spz、TLR2、TLR3、MyD88、IMD、Crustin1、Wntless、ALF1和proPO)在注射agomiR-56后的相对表达量也显著降低。antagomiR-56注射试验结果则恰好相反,注射不同剂量的antagomiR-56对罗氏沼虾TLR1基因有显著促进效果,且随着注射剂量的升高,对罗氏沼虾TLR1基因表达的促进效果呈先上升后下降的变化趋势,以1.0μg/g为antgomiR-56体外注射的最适剂量;罗氏沼虾其他免疫相关基因在注射antgomiR-56后的相对表达量均显著上升。【结论】TLR1是novel miR-56的靶基因,其结合位点位于TLR1基因3'-UTR。novel miR-56通过靶向抑制TLR1基因表达而参与Toll信号通路调控,具有抑制罗氏沼虾免疫相关基因表达的功能。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 novel miR-56 靶基因 免疫相关基因 Toll信号通路
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温度对罗氏沼虾感染虹彩病毒的影响及转录组学分析
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作者 赵梦瑶 陈静 +5 位作者 姚嘉赟 郑阿钦 袁雪梅 黄雷 彭先启 张海琪 《水生生物学报》 北大核心 2025年第9期10-21,共12页
为探究温度对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)感染十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)的影响及调控机制,研究设置5组不同温度(26、28、30、32、34℃)对罗氏沼虾人工感染DIV1,并统计其存活率,结果显示温度34℃能够... 为探究温度对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)感染十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)的影响及调控机制,研究设置5组不同温度(26、28、30、32、34℃)对罗氏沼虾人工感染DIV1,并统计其存活率,结果显示温度34℃能够抑制罗氏沼虾体内的病毒复制,减少死亡并延长其存活时间。对感染DIV124h和72h的罗氏沼虾肝胰腺、鳃及肌肉进行病毒载量测定,结果表明感染DIV1的罗氏沼虾在72h内病毒迅速增殖,但当水温升高至30℃及更高温度时其体内的病毒载量明显降低。此外,采集罗氏沼虾不同温度下感染DIV1的肝胰腺进行转录组学分析,结果表明共有8483个不同差异表达基因,富集分析发现基因主要富集在花生四烯酸代谢(Arachidonic acid metabolism)、糖酵解/糖异生(Glycolysis/Gluconeogenesis)、α-亚油酸代谢(alpha-Linolenic acid metabolism)等与Warburg效应相关的代谢通路中,推测这些基因和通路可能与病毒感染机制密切相关。对罗氏沼虾感染DIV1后的免疫基因CAT、Cu/ZnSOD、CTL、ACP的表达水平进行测定,结果发现当温度为32℃时免疫基因的表达量显著高于其他温度,表明高温能够促进罗氏沼虾的免疫基因表达量增加以抵御病毒入侵。研究通过分析不同温度对DIV1感染罗氏沼虾的影响,初步揭示了温度对病毒复制的影响及调控机制,为深入探究病毒感染的分子机制和开发抗病毒免疫技术奠定一定的基础。 展开更多
关键词 温度 十足目虹彩病毒1 转录组学分析 调控机制 罗氏沼虾
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水体Cu^(2+)对罗氏沼虾溞状幼体生长发育、存活及抗氧化功能的影响
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作者 章轲 戴习林 《南方农业学报》 北大核心 2025年第10期3284-3294,共11页
【目的】探究水体中Cu^(2+)对罗氏沼虾溞状幼体生长发育、存活及抗氧化功能的影响,为罗氏沼虾健康养殖过程中的水质安全管理提供理论依据。【方法】以罗氏沼虾健康Ⅰ期溞状幼体为试验对象,设对照组(Cu^(2+)≤0.001 mg/L)和6个Cu^(2+)浓... 【目的】探究水体中Cu^(2+)对罗氏沼虾溞状幼体生长发育、存活及抗氧化功能的影响,为罗氏沼虾健康养殖过程中的水质安全管理提供理论依据。【方法】以罗氏沼虾健康Ⅰ期溞状幼体为试验对象,设对照组(Cu^(2+)≤0.001 mg/L)和6个Cu^(2+)浓度梯度处理组(0.0025、0.0100、0.0500、0.1000、0.1500和0.2000 mg/L),养殖25 d。每5 d于显微镜下观察溞状幼体所处的发育阶段,测量体长并统计存活率。采用试剂盒检测铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性及丙二醛(MDA)含量。提取总RNA并检测抗氧化基因Cu/Zn-SOD、CAT和GPx的相对表达量。【结果】随着Cu^(2+)浓度升高,罗氏沼虾溞状幼体体长日增长值和出苗率呈先升高后降低的变化趋势,0.1000 mg/L组溞状幼体体长日增长值和出苗率最高,且0.1000 mg/L组溞状幼体在各取样时间的存活率高于0.1500 mg/L和0.2000 mg/L组。0.0500 mg/L和0.1000 mg/L组溞状幼体蜕壳和变态发育较快,0.1500 mg/L和0.2000 mg/L组溞状幼体发育受阻,且0.2000 mg/L组溞状幼体无法完全变态发育为仔虾。对照、0.0025 mg/L、0.0100 mg/L、0.0500 mg/L和0.1000 mg/L组MDA含量随Cu^(2+)处理时间延长整体上呈先升高后降低的变化趋势,相同Cu^(2+)处理时间下各组无显著差异(P>0.05)。相同Cu^(2+)处理时间下,Cu/Zn-SOD、CAT和GPx基因相对表达量随Cu^(2+)浓度升高整体上呈先升高后降低的变化趋势,第5 d、第10 d和第15 d,0.1000 mg/L组Cu/Zn-SOD、CAT和GPx基因相对表达量均高于其他组,第20 d和第25 d,0.1500 mg/L和0.2000 mg/L组Cu/Zn-SOD、CAT和GPx基因相对表达量显著低于其他组(P<0.05)。【结论】罗氏沼虾溞状幼体的生长发育、存活及抗氧化功能对Cu^(2+)浓度具有明显的浓度依赖性效应。Cu^(2+)≤0.1000 mg/L时,能通过诱导机体产生适度的抗氧化应激反应,促进罗氏沼虾溞状幼体生长发育并提高其存活率;Cu^(2+)≥0.1500 mg/L时,Cu^(2+)的促氧化作用占据主导,导致ROS大量积累,超出机体清除能力,引发严重的氧化损伤,最终抑制罗氏沼虾溞状幼体生长并导致其发育停滞。 展开更多
关键词 Cu^(2+) 罗氏沼虾 溞状幼体 变态发育 存活率 抗氧化功能
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罗氏沼虾主要病害研究概况 被引量:17
5
作者 徐洋 沈锦玉 +3 位作者 姚嘉赟 潘晓艺 郝贵杰 尹文林 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期74-76,共3页
罗氏沼虾是一种重要的经济水产动物,目前在世界各地均有大规模的养殖,尤其集中于东南亚地区,随着养殖规模的扩大其病害发生也越来越多,给罗氏沼虾养殖行业带来了巨大的损失。总结了近年来国内外关于罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii... 罗氏沼虾是一种重要的经济水产动物,目前在世界各地均有大规模的养殖,尤其集中于东南亚地区,随着养殖规模的扩大其病害发生也越来越多,给罗氏沼虾养殖行业带来了巨大的损失。总结了近年来国内外关于罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)主要疾病及防治方面的研究成果,按照病原的不同分为寄生虫疾病、细菌性疾病、病毒性疾病,主要围绕上述几类疾病的研究及防治的工作展开论述,为今后罗氏沼虾的病害防治提供依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 病害 诊断 防治
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罗氏沼虾苗肌肉白浊病病原的初步研究 被引量:20
6
作者 钱冬 杨国梁 +2 位作者 刘问 王军毅 曹铮 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期472-476,共5页
收集罗氏沼虾肌肉白浊病典型病虾苗 ,进行细菌分离、除菌组织悬液制备及人工感染试验、超薄切片、病毒粗提取 ,结果表明 :从白浊病病虾的肌肉、肝胰腺中分离到的细菌以5× 1 0 8CFU/mL浓度浸泡感染正常沼虾苗不能复制疾病 ;病虾除... 收集罗氏沼虾肌肉白浊病典型病虾苗 ,进行细菌分离、除菌组织悬液制备及人工感染试验、超薄切片、病毒粗提取 ,结果表明 :从白浊病病虾的肌肉、肝胰腺中分离到的细菌以5× 1 0 8CFU/mL浓度浸泡感染正常沼虾苗不能复制疾病 ;病虾除菌组织过滤液以 1∶5 0、1∶2 5 0浓度浸泡感染正常虾苗 ,7d后可发病 ,并出现典型的肌肉白浊病症状 ,氯仿处理不能破坏病毒的感染力 ;病虾超薄切片电镜观察发现肌肉间隙组织中存在 2 1— 2 3nm大小的球状病毒 ,病虾组织浆经氯仿处理、PEG沉淀、磷钨酸负染后可见到大量 2 2— 2 4nm大小的球状病毒颗粒。上述结果表明罗氏沼虾肌肉白浊病是一种由病毒引起的疾病。 展开更多
关键词 罗氏沼虾苗 肌肉白浊病 病原
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罗氏沼虾苗种肌肉白浊病诺达病毒的分离和特性研究 被引量:18
7
作者 钱冬 石正丽 +3 位作者 曹铮 刘问 张叔勇 Bonami J R 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期457-461,共5页
本实验在以往罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)苗种肌肉白浊病病毒致病性的基础上对病毒特性进行深入研究。病虾除菌过滤液以1:50和1:250浸泡感染可复制出典型的症状,病毒对氯仿抵抗;用PEG法浓缩病毒后,35000r/min超速离心部分纯化病... 本实验在以往罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)苗种肌肉白浊病病毒致病性的基础上对病毒特性进行深入研究。病虾除菌过滤液以1:50和1:250浸泡感染可复制出典型的症状,病毒对氯仿抵抗;用PEG法浓缩病毒后,35000r/min超速离心部分纯化病毒,在电镜下可观察到大量直径24nm的球形病毒颗粒,无囊膜,此外还观察到大小为14nm的病毒粒子;采用Trizol试剂对病毒进行了核酸提取,电泳结果发现有4条核酸条带,分别为3.0kb、1.3kb、0.8kb、0.75kb,对RNA核酸酶、S1核酸酶敏感,对DNA酶抵抗,为单链RNA病毒。用罗氏沼虾诺达病毒核酸探针进行分子杂交,探针可与提纯核酸及病虾样品匀浆液反应,Southern杂交表明3.0kb、1.3kb条带分别属于诺达病毒的RNA1和RNA2。对不同的发病样品进行了核酸电泳,4个典型症状的样品均存在诺达病毒条带,2个样品还存在小病毒核酸。上述结果表明,诺达病毒是引起罗氏沼虾苗种肌肉白浊病的主要病原。14nm小病毒与罗氏沼虾肌肉白浊病中的关系有待进一步的研究。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 肌肉白浊病 诺达病毒
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氯化钠和碱度对罗氏沼虾仔虾的毒性研究 被引量:17
8
作者 王桂春 张兆琪 +2 位作者 董双林 陈兆波 张美昭 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第4期523-528,共6页
实验研究氯化钠、碱度对罗氏沼虾仔虾的急性毒性作用。用概率单位法求出了其氯化钠2 4、4 8、72、96 h的半致死浓度分别为 8.58、 5.32、 3.4 7、 2 .19g/ L;碱度的 2 4、4 8、72、96 h半致死浓度分别为 51.0 2、 37.0 7、 2 7.19、 2 1... 实验研究氯化钠、碱度对罗氏沼虾仔虾的急性毒性作用。用概率单位法求出了其氯化钠2 4、4 8、72、96 h的半致死浓度分别为 8.58、 5.32、 3.4 7、 2 .19g/ L;碱度的 2 4、4 8、72、96 h半致死浓度分别为 51.0 2、 37.0 7、 2 7.19、 2 1.54mmol/ L。对氯化钠和碱度混合作用的结果进行的方差分析表明 ,氯化钠和碱度对仔虾的死亡率影响显著 ,而两者的交互作用不显著。碱度 (AL K)与罗氏沼虾仔虾氯化钠 2 4、4 8h L C50 (S)关系式分别为 S=- 0 .12 78AL K+ 9.2 346 ,S=- 0 .0 715AL K +5.530 1。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 仔虾 氯化钠 碱度 半致死浓度 概率单位法
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不同盐度罗氏沼虾育苗水体水质及微生物群落结构研究 被引量:11
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作者 倪蒙 高强 +1 位作者 原居林 陈雪峰 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期976-985,共10页
为揭示罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)低盐育苗期养殖水体微生物多样性,探索低盐度育苗效果,采用Illumina HiSeq高通量测序方法对不同盐度罗氏沼虾育苗水体微生物的16S rRNA基因的2个高变区(V3—V4)进行测序分析,比较了低盐度(6‰... 为揭示罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)低盐育苗期养殖水体微生物多样性,探索低盐度育苗效果,采用Illumina HiSeq高通量测序方法对不同盐度罗氏沼虾育苗水体微生物的16S rRNA基因的2个高变区(V3—V4)进行测序分析,比较了低盐度(6‰、8‰和10‰)罗氏沼虾育苗水体与常规盐度(15‰)育苗水体水质及微生物群落结构差异。结果表明:不同盐度罗氏沼虾育苗水体的微生物群落结构不同,对照组(15‰)育苗水体中共检测出微生物189种,隶属于20个门;低盐度处理组(6‰、8‰和10‰)分别检测出微生物169、85和97种,分别隶属于19、9和15个门。CCA结果显示大多数核心微生物菌与总氮和总磷相关性高;盐度仅与未知菌群未分类属(S1)、气单胞菌属(S2)和红杆菌属(S9)等相关性高。主要病原微生物中,弧菌属主要与总氮含量相关,假单胞杆菌、黄杆菌属主要与总氮和总磷相关,邻单胞菌属和梭菌属主要与总磷含量相关。不同盐度主要病原菌分析结果表明,气单胞杆菌与盐度呈现显著正相关;假单胞杆菌属、黄杆菌属和弧菌属等潜在病原菌含量均随盐度的降低而显著升高,表明低盐度可增加多种潜在病原菌爆发的可能性。实验结果对罗氏沼虾育苗阶段健康管理、病害诊断及防治具有重要意义。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 育苗 水质 微生物群落结构
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罗氏沼虾肌肉白浊病病原研究 被引量:20
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作者 姜兰 邓国成 +2 位作者 石存斌 梁森汉 郑重 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期477-482,共6页
从患白浊病的罗氏沼虾虾苗病灶分离到 1 0多株菌株 ,其中一株经人工感染证实为病原菌 ,经ATBExpression自动细菌鉴定仪测试 ,为木糖葡萄球菌 ,其主要特性为拟球状 (直径0 .8— 1 .1 μm) ,革兰氏阳性 ,无鞭毛 ,无荚膜 ,不产生芽孢 ,发... 从患白浊病的罗氏沼虾虾苗病灶分离到 1 0多株菌株 ,其中一株经人工感染证实为病原菌 ,经ATBExpression自动细菌鉴定仪测试 ,为木糖葡萄球菌 ,其主要特性为拟球状 (直径0 .8— 1 .1 μm) ,革兰氏阳性 ,无鞭毛 ,无荚膜 ,不产生芽孢 ,发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、海藻糖、阿拉伯糖、蔗糖及甘露醇产酸 ,β 半乳糖苷酶、过氧化氢酶及脲酶阳性 ,氧化酶、血浆凝固酶、V P反应、精氨酸双水解酶、鸟氨酸脱羧酶均为阴性。最适生长温度、盐度和pH值范围分别为 2 8— 37℃、0 %— 2 %、6— 9。对红霉素、卡那霉素、头孢氨苄及庆大霉素等药物敏感。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 肌肉白浊病 病原研究 木糖葡萄球菌
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复方新诺明在罗氏沼虾中的药代动力学和组织分布 被引量:7
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作者 郑宗林 刘鸿艳 +2 位作者 黄辉 杨先乐 周兴华 《广东海洋大学学报》 CAS 2008年第4期54-59,共6页
研究了单剂量肌肉注射给药[甲氧苄氨嘧啶(SMZ)0 60 mg/kg]、口灌给药[磺胺甲基异噁唑(SMZ)100 mg/kg]和复方口灌给药(SMZ 100 mg/kg和TMP 20 mg/kg)三种给药方式下,SMZ和TMP在罗氏沼虾中的代谢动力学,分析了SMZ和TMP血淋巴、肌肉和肝胰... 研究了单剂量肌肉注射给药[甲氧苄氨嘧啶(SMZ)0 60 mg/kg]、口灌给药[磺胺甲基异噁唑(SMZ)100 mg/kg]和复方口灌给药(SMZ 100 mg/kg和TMP 20 mg/kg)三种给药方式下,SMZ和TMP在罗氏沼虾中的代谢动力学,分析了SMZ和TMP血淋巴、肌肉和肝胰腺中的分布特征。结果表明,SMZ以肌肉注射方式给药后的血淋巴中,药物经时浓度曲线符合二室开放房室模型,而SMZ&TMP口灌给药后却不能用房室模型拟合。肌注给药后,SMZ的消除半衰期(t1/2β)为24.92 h,单方和复方口灌给药后SMZ的消除半衰期(t1/2β)分别为40.70和47.197 h。复方口灌给药后TMP的消除半衰期(t1/2β)为28.77 h,TMP对SMZ的药代动力学并无显著影响。口灌给药后,SMZ和TMP在肝胰腺中的药物浓度高于同时间肌肉中的药物浓度,但肌肉和肝胰腺中的SMZ消除速度基本一致。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 药代动力学 磺胺甲基异噁唑(SMZ) 甲氧苄氨嘧啶(TMP) 组织分布
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罗氏沼虾ATG5的鉴定及其抗菌免疫功能
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作者 刘洋 赵飞 +9 位作者 文菁 王玲 廖永众 邓玉婷 谭爱萍 巩华 赖迎迢 黄志斌 邵蓬 王飞飞 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第1期1-11,共11页
【目的】研究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中自噬相关基因(ATG)的免疫功能及其在抗菌免疫中的分子调节机制。【方法】从罗氏沼虾中克隆并鉴定罗氏沼虾自噬相关基因5(MrATG5),使用生物信息学方法分析MrATG5的结构特征和理化性质... 【目的】研究罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)中自噬相关基因(ATG)的免疫功能及其在抗菌免疫中的分子调节机制。【方法】从罗氏沼虾中克隆并鉴定罗氏沼虾自噬相关基因5(MrATG5),使用生物信息学方法分析MrATG5的结构特征和理化性质,采用荧光定量PCR检测MrATG5在罗氏沼虾健康组织以及受到嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)免疫刺激后在肝胰腺和鳃组织中的表达量,利用免疫细胞化学方法检测MrATG5蛋白在HEK 293T细胞中的亚细胞定位,通过RNA干扰技术、细菌结合和抑菌活性实验分析MrATG5的免疫功能。【结果】生物信息学分析显示,MrATG5开放阅读框(ORF)为807 bp,预测编码268个氨基酸,预测蛋白分子质量为31.04 ku,等电点为5.68,含有一个典型的自噬蛋白5(Autophagy protein 5,APG5)结构域。序列同源性分析及构建的系统进化树显示,MrATG5与日本沼虾(Macrobrachium nipponense)ATG5同源性最高,相似性为97.76%,MrATG5与甲壳类动物聚为一支,说明ATG5蛋白在甲壳类动物中进化相对保守。qRT-PCR结果显示,MrATG5在罗氏沼虾各组织中广泛表达,在肝胰腺中表达量最高(P<0.05)。MrATG5主要分布在HEK 293T细胞的细胞质中。经嗜水气单胞菌和LPS免疫刺激后,MrATG5在肝胰腺和鳃组织中的表达量均显著升高(P<0.05),表明MrATG5在罗氏沼虾抗菌免疫中发挥重要作用。经RNA干扰及嗜水气单胞菌刺激后,MrATG5可通过调控自噬参与罗氏沼虾抗菌免疫。细菌结合和抑菌活性实验发现,MrATG5原核重组表达活性蛋白可与嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和海豚链球菌(Streptococcus iniae)产生结合反应,并可抑制嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌的生长。【结论】MrATG5可通过调控自噬和抑制病原菌增殖提升罗氏沼虾的抗菌免疫力。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 自噬相关基因5(ATG5) 嗜水气单胞菌 原核表达 抗菌免疫
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长三角地区罗氏沼虾成虾主要疾病的病原研究 被引量:5
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作者 徐洋 沈锦玉 +5 位作者 姚嘉赟 潘晓艺 郝贵杰 尹文林 杨国梁 王军毅 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2012年第5期27-32,共6页
2009年8月—2010年8月在长三角地区开展了罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)成虾主要疾病的流行病学调查。结果显示:所采集病样按其症状分为肌肉白浊病(以上海和浙江病样为主)、蓝体病(以江苏病样为主)、红体病(以浙江病样为主)三类... 2009年8月—2010年8月在长三角地区开展了罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)成虾主要疾病的流行病学调查。结果显示:所采集病样按其症状分为肌肉白浊病(以上海和浙江病样为主)、蓝体病(以江苏病样为主)、红体病(以浙江病样为主)三类。从采集的罗氏沼虾病样中分离到优势细菌11株,人工感染健康罗氏沼虾,筛选出3株主要致病菌,分别命名为SHB1,GYB8,HZL2。经形态学、生理生化特性及16 S rRNA鉴定,确定3株主要致病菌依次为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),费氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)。常规药物敏感性试验表明,3种主要致病菌以及其它分离株细菌对环丙沙星和恩诺沙星高度敏感。 展开更多
关键词 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 流行病学调查 病原鉴定 敏感药物 长三角
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罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的流行病学调查 被引量:10
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作者 范东东 魏永伟 +1 位作者 苗亮 陈炯 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1153-1159,共7页
传染性皮下和造血器官坏死病毒(infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)是对虾养殖的重要病原之一,可感染多种虾种。罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是中国养殖的重要沼虾品种之一。根据国际兽疫局(Office... 传染性皮下和造血器官坏死病毒(infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)是对虾养殖的重要病原之一,可感染多种虾种。罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)是中国养殖的重要沼虾品种之一。根据国际兽疫局(Office International des Epizooties,OIE)推荐的IHHNV检测方法,在中国大陆地区首次开展IHHNV在罗氏沼虾中的感染和流行情况调查。结果显示,在研究区的罗氏沼虾养殖区,IHHNV广泛流行,阳性率高达90%;但所有成年罗氏沼虾均未表现出明显的病症,仅表现为病毒的携带。通过基因序列分析显示,检测到的华南地区毒株属于Ⅰ型感染株,与菲律宾株进化关系较为接近;华东地区毒株属于Ⅱ型感染株,与东南亚株进化关系较近。本研究为IHHNV在罗氏沼虾内的感染、流行和防控提供了详细参考。 展开更多
关键词 传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV) 罗氏沼虾 感染与流行
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溶藻弧菌对罗氏沼虾成活率及5种酶活性的影响 被引量:4
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作者 邹卫丽 戴习林 +4 位作者 朱其建 邓平平 张立田 郭印 丁福江 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期129-134,141,共7页
用溶藻弧菌对体重为23.86(±3.95)g的健康罗氏沼虾分别进行浸浴、投喂和注射感染试验,并在注射感染96 h内和20 d后测定虾组织中过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸... 用溶藻弧菌对体重为23.86(±3.95)g的健康罗氏沼虾分别进行浸浴、投喂和注射感染试验,并在注射感染96 h内和20 d后测定虾组织中过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(AKP)的活性。结果显示:注射感染对罗氏沼虾的致死作用最明显,其中培养物离心液组罗氏沼虾的成活率最低。感染96h内CAT、T-SOD、GSH-Px和AKP的活性变化较为显著;感染20 d后仅肌肉组织T-SOD和ACP活性各组间存在显著差异。结果表明,培养物离心液的毒性很强;注射感染较适合短时间内取样感染;酶活测定感染浓度应选择106cell/mL;溶藻弧菌对罗氏沼虾免疫相关酶活指标的影响较大,其中CAT、T-SOD、GSH-Px和AKP对病原反应较为敏感。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 溶藻弧菌 成活率 酶活
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罗氏沼虾仔虾病原菌的分离鉴定及耐药性试验 被引量:7
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作者 樊星 赵笑笑 +3 位作者 李阳阳 徐梦 梁利国 张晓君 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第5期1008-1011,共4页
从病(死)罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)仔虾的匀浆液中分离到了一株大量生长的优势菌,感染试验表明分离菌对罗氏沼虾仔虾有较强的致病作用。对分离菌进行了形态、培养、生化和理化等表观生物学特性检验,同时对该菌进行了分子生... 从病(死)罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)仔虾的匀浆液中分离到了一株大量生长的优势菌,感染试验表明分离菌对罗氏沼虾仔虾有较强的致病作用。对分离菌进行了形态、培养、生化和理化等表观生物学特性检验,同时对该菌进行了分子生物学鉴定,扩增了该菌的gyrB基因和16S rRNA基因并进行测序和序列同源性分析。综合分离菌的表型特征、理化特性及分子生物学鉴定结果,判定病原菌为气单胞菌属(Aeromonas)的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。采用纸片扩散法(K-B法)测试了分离株对44种抗菌类药物的敏感性,结果表明,供试菌均对所测定的44种抗菌类药物中的氨曲南等24种药物敏感,对青霉素G等8种药物耐药。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 嗜水气单胞菌 药敏试验 gyrB基因 16S RRNA
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Cu^(2+)胁迫对罗氏沼虾血清中抗氧化和免疫指标的影响 被引量:5
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作者 郭慧 卢芷程 +3 位作者 谭翠婷 陈劲鑫 李可旭 申玉春 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1323-1328,共6页
【目的】研究Cu^(2+)胁迫对罗氏沼虾血清中抗氧化和免疫指标的影响,为其养殖环境的调控提供科学依据。【方法】设置0(对照组)和100μg/L(胁迫组)两个Cu^(2+)浓度,分别在罗氏沼虾受Cu^(2+)胁迫后的0、3、6、12、24和48 h取样,分离血清,... 【目的】研究Cu^(2+)胁迫对罗氏沼虾血清中抗氧化和免疫指标的影响,为其养殖环境的调控提供科学依据。【方法】设置0(对照组)和100μg/L(胁迫组)两个Cu^(2+)浓度,分别在罗氏沼虾受Cu^(2+)胁迫后的0、3、6、12、24和48 h取样,分离血清,测定血清中总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活力、丙二醛(MDA)含量,以及酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活力。【结果】在Cu^(2+)胁迫的3~12 h,罗氏沼虾血清中T-AOC显著升高(P<0.05,下同),并在12 h达峰值,胁迫后24和48 h显著下降;与对照组相比,CAT活力在胁迫3 h时显著升高,6 h时显著下降,12 h时又显著上升并达峰值,之后又逐渐降低,并在48 h时显著低于对照组;胁迫组罗氏沼虾血清中MDA含量在整个胁迫过程中呈先升高后略有降低的变化趋势,且在各时间点均显著高于对照组;ACP活力在胁迫后6和12 h显著升高,24和48 h时降至初始水平;AKP活力在胁迫3~12 h内无显著变化(P>0.05),胁迫后24和48 h显著降低。【结论】Cu^(2+)胁迫导致罗氏沼虾脂质过氧化发生,机体通过调节抗氧化系统抵御Cu^(2+)胁迫,抗氧化和免疫指标的变化具有一定时间效应,其中T-AOC、CAT活力和MDA含量对Cu^(2+)胁迫较敏感,在胁迫短时间内即被显著诱导,可作为Cu^(2+)污染的潜在生物指示物。 展开更多
关键词 Cu2+胁迫 罗氏沼虾 抗氧化能力 免疫 生物指示物
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罗氏沼虾TLRs基因表达差异分析 被引量:5
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作者 刘伟利 刘红 +1 位作者 丁福江 戴习林 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期721-727,共7页
【目的】探究罗氏沼虾Toll样受体(TLRs)基因(MrToll1、MrToll2和MrToll3)在不同组织中及感染溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)后不同时间鳃组织的表达量差异变化,为揭示罗氏沼虾TLRs在应对病害等免疫方面的表现和作用机理提供参考依据。... 【目的】探究罗氏沼虾Toll样受体(TLRs)基因(MrToll1、MrToll2和MrToll3)在不同组织中及感染溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)后不同时间鳃组织的表达量差异变化,为揭示罗氏沼虾TLRs在应对病害等免疫方面的表现和作用机理提供参考依据。【方法】利用实时荧光定量RT-PCR分别检测MrToll1、MrToll2和MrToll3基因在罗氏沼虾肌肉、鳃、肝胰腺、心脏、胃、肠、血淋巴、神经节、眼柄等不同组织中的相对表达量,并以同样方法检测罗氏沼虾感染溶藻弧菌后TLRs基因的相对表达量变化情况。【结果】罗氏沼虾MrToll1、MrToll2和MrToll3基因在各组织中广泛表达,但存在组织表达差异性。MrToll1和MrToll2基因在鳃组织中的相对表达量最高,分别是在肝胰腺中相对表达量的19.26和20.03倍;MrToll3基因在神经节中的相对表达量最高,是在肝胰腺中的10.13倍。感染溶藻弧菌悬液后,罗氏沼虾死亡率随时间的推移不断升高,至注射感染72 h时死亡率达峰值(64%),随后不再出现死亡。感染溶藻弧菌后罗氏沼虾MrToll1基因表达量呈先升高后下降的变化趋势,注射感染后24 h的表达量达峰值;Mrtoll2基因表达量呈下降—升高—下降—升高的波动变化趋势,注射感染后24 h的表达量达峰值;MrToll3基因表达量急剧下降,且维持在较低水平。【结论】罗氏沼虾MrToll1基因是鳃组织抵御细菌感染的主要应答基因,MrToll2基因可能参与鳃组织的其他免疫活动,MrToll3基因的调控机制尚未清晰。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 Toll样受体(TLRs) 表达差异 溶藻弧菌 实时荧光定量PCR
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虫草菌粉对罗氏沼虾免疫功能的影响 被引量:11
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作者 李义 潘新法 +3 位作者 宋学宏 蔡春芳 张雷明 王尧茂 《水利渔业》 北大核心 2002年第4期47-48,共2页
罗氏沼虾饵料中添加 0 5 %虫草菌丝 ,罗氏沼虾血细胞吞噬百分比和吞噬指数、血清溶菌酶活力及酚氧化酶活力均显著提高。经嗜水气单胞菌攻毒后 ,试验组的免疫保护率也明显提高。试验证明 ,口服虫草菌粉可显著地提高罗氏沼虾的免疫功能 。
关键词 虫草菌粉 罗氏沼虾 口服 免疫功能 病害防治
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蛹虫草菌丝对罗氏沼虾免疫功能的影响 被引量:6
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作者 陈俐彤 黄文芳 《华南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2009年第4期106-110,共5页
在罗氏沼虾饵料中添加w=1%、2%、3%蛹虫草菌丝能提高罗氏沼虾血清PO活力、肌肉SOD活力、GSH-Px活力,并降低MDA含量.经嗜水气单胞菌攻毒后,实验组的免疫保护率明显提高.结果证明,蛹虫草菌丝可提高罗氏沼虾的免疫能力,增强抗嗜水气单胞菌... 在罗氏沼虾饵料中添加w=1%、2%、3%蛹虫草菌丝能提高罗氏沼虾血清PO活力、肌肉SOD活力、GSH-Px活力,并降低MDA含量.经嗜水气单胞菌攻毒后,实验组的免疫保护率明显提高.结果证明,蛹虫草菌丝可提高罗氏沼虾的免疫能力,增强抗嗜水气单胞菌的能力. 展开更多
关键词 蛹虫草菌丝 罗氏沼虾 免疫功能
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