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SGT1介导自噬和凋亡促进罗氏沼虾抗氧化系统抵御嗜水气单胞菌感染
1
作者 吕彬彬 赵飞 +7 位作者 王玲 于凌云 陈总会 邓玉婷 谭爱萍 廖永众 罗璋 王飞飞 《水产学报》 北大核心 2026年第3期207-222,共16页
【目的】探究抑制SKP1的G2等位基因(SGT1)的分子特征及其在罗氏沼虾抗菌免疫中的作用机制,阐明其在自噬与凋亡调控中的功能。【方法】采用PCR方法克隆并鉴定罗氏沼虾SGT1基因(命名为MrSGT1),结合生物信息学进行序列特征、结构域与系统... 【目的】探究抑制SKP1的G2等位基因(SGT1)的分子特征及其在罗氏沼虾抗菌免疫中的作用机制,阐明其在自噬与凋亡调控中的功能。【方法】采用PCR方法克隆并鉴定罗氏沼虾SGT1基因(命名为MrSGT1),结合生物信息学进行序列特征、结构域与系统进化分析;通过qRT-PCR检测MrSGT1在不同组织及经嗜水气单胞菌和脂多糖刺激后的表达变化;通过RNA干扰、qRT-PCR、Western blot以及酶活性检测等方式分析MrSGT1在自噬、凋亡及抗氧化系统中的功能。【结果】MrSGT1的开放阅读框(ORF)为687 bp,预测编码228个氨基酸,含有CS和SGS两个结构域,蛋白分子质量为25.41 ku,等电点为5.54。序列相似性分析表明MrSGT1与日本沼虾SGT1相似性为95.61%,系统进化树分析显示MrSGT1与甲壳动物聚为一支,这表明MrSGT1在甲壳类动物中进化相对保守。组织分布表明MrSGT1在肝胰腺中表达量最高。使用嗜水气单胞菌和LPS刺激罗氏沼虾后,MrSGT1在肝胰腺和鳃中的表达水平显著上调,表明其参与罗氏沼虾的抗菌免疫功能。RNA干扰MrSGT1后使用嗜水气单胞菌刺激罗氏沼虾,发现自噬水平变化,凋亡水平显著升高,同时抗氧化相关酶的活性显著降低。【结论】MrSGT1可通过调控自噬与凋亡的动态平衡以提高罗氏沼虾抗氧化系统,增强宿主抵御病原感染的能力。本研究结果将为深入探究罗氏沼虾的抗菌防御机制提供重要数据基础。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 嗜水气单胞菌 抑制SKP1的G2等位基因(SGT1) 凋亡 自噬
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2024年东营市对虾养殖疫病监测结果分析及防控措施
2
作者 常雯 于贞贞 +3 位作者 杨玉艳 王晓璇 任鹏 隋凯港 《河北渔业》 2026年第1期25-28,共4页
为了解东营市对虾疫病发生现状,及时掌握对虾疫病发生规律和流行趋势,提高疫病风险防控能力,为对虾养殖疫病防控提供数据支撑和科学依据。2024年,对东营市对虾重点养殖主体开展疫病监测及分析,主要开展白斑综合征(WSD)、虾肝肠胞虫(EHP... 为了解东营市对虾疫病发生现状,及时掌握对虾疫病发生规律和流行趋势,提高疫病风险防控能力,为对虾养殖疫病防控提供数据支撑和科学依据。2024年,对东营市对虾重点养殖主体开展疫病监测及分析,主要开展白斑综合征(WSD)、虾肝肠胞虫(EHP)、传染性肌坏死病毒(IMNV)、急性肝胰腺坏死症(AHPND)、虾虹彩病毒(DIV-1)5种对虾疫病监测。监测结果显示:2024年对虾样本中,虾肝肠胞虫病阳性率为18.7%,急性肝胰腺坏死症病阳性率为9.53%,传染性肌坏死病阳性率为4.30%,白斑综合征阳性率为1.88%,虾虹彩病毒病阳性率为0.13%。采集的样品规格0.5~10 cm之间,不同规格养殖阶段都有疫病发生,建议从苗种引进、繁育、养成各个养殖环节多频次进行疫病检测,做到早检测,早预防。 展开更多
关键词 东营 对虾 疫病监测 阳性率 措施
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江苏省南通地区虾源弧菌的分子流行病学分析
3
作者 张鹏 吉星 +3 位作者 孙利厂 朱树娇 何涛 王冉 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第9期1791-1802,共12页
为探明南通地区虾源弧菌的分子流行病学特征,本研究对在南通地区规模化虾养殖场中采集的560份病虾样本进行弧菌分离和鉴定,使用微量肉汤稀释法对分离株进行抗菌药物敏感性测试,基于全基因组测序技术分析分离株的耐药基因、毒力基因携带... 为探明南通地区虾源弧菌的分子流行病学特征,本研究对在南通地区规模化虾养殖场中采集的560份病虾样本进行弧菌分离和鉴定,使用微量肉汤稀释法对分离株进行抗菌药物敏感性测试,基于全基因组测序技术分析分离株的耐药基因、毒力基因携带情况,并通过多位点序列分型(MLST)和系统发育树分析南通地区虾源弧菌的流行病学特征。结果表明,560份病虾样本中共分离出119株弧菌,检出率为21.25%,其中,溶藻弧菌为优势亚型,占比达73.95%。弧菌分离株对氨苄西林、头孢氨苄和多西环素的耐药率较高,分别为73.11%、58.82%、45.38%。弧菌分离株中共检测到47种耐药基因,其中tet(34)、tet(35)、bla ampC检出率较高,分别为97.48%、88.24%、61.34%。分离株平均携带33个毒力基因,携带可编码细胞毒性的关键外毒素基因hlyA和rtxA的分离株分别为1株和7株。分离株ST型具有多样性,其中ST388为相对流行的ST型。溶藻弧菌分离株划分为1个进化分支,不同来源菌株之间的遗传进化关系较近;分离株85和分离株4与人类医疗临床来源的溶藻弧菌菌株有着高度同源性。本研究结果可为南通地区水产弧菌的有效防治提供科学依据。 展开更多
关键词 弧菌 虾 耐药基因 毒力基因 进化分型
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虾肝肠胞虫Septin的生物信息学分析及其在增殖中的潜在作用
4
作者 张晟 乔毅 +4 位作者 曹晓慧 张雷霆 成婕 吴海龙 沈辉 《南京师大学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期66-74,共9页
虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一,其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位,初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表... 虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是对虾养殖业的重要病原体之一,其裂殖增殖的分子机制尚不明确.本研究通过克隆和分析EHP裂殖期Septin蛋白EhpSeptin的基因序列、表达及定位,初步阐释了该基因在EHP裂殖中的潜在作用.结果表明,EhpSeptin基因序列编码265个氨基酸的蛋白质,分子量约30.4 kDa,等电点4.75.构建EhpSeptin原核表达载体,获得高纯度表达蛋白.Western blotting验证了表达蛋白与天然蛋白一致.此外,本研究建立了EhpSeptin基因显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization,CISH),分析感染对虾样本中EhpSeptin的表达模式.结果显示,EhpSeptin的表达水平随EHP感染强度增加而升高,表明其参与了EHP的裂殖过程.本研究首次报道了EHP裂殖相关蛋白EhpSeptin的克隆、表达、定位及其在EHP感染过程中的变化规律,为探究EHP裂殖分子机制和防治该病原体的感染提供了理论基础和技术手段. 展开更多
关键词 虾肝肠胞虫 SEPTIN 原核表达 显色原位杂交
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2022—2023年虾类传染性肌坏死病毒(IMNV)流行情况调查
5
作者 徐瑞东 夏继涛 +5 位作者 李萍 余星潼 姚亮 李文强 贾田畅 张庆利 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第1期183-193,共11页
2020年,由传染性肌坏死病毒(infectious myonecrosis virus,IMNV)引起的虾类传染性肌坏死(infectious myonecrosis,IMN)首次在中国暴发,使对虾养殖产业遭受了严重的经济损失。为掌握近年IMNV在我国的流行情况,2022—2023年间,本研究在... 2020年,由传染性肌坏死病毒(infectious myonecrosis virus,IMNV)引起的虾类传染性肌坏死(infectious myonecrosis,IMN)首次在中国暴发,使对虾养殖产业遭受了严重的经济损失。为掌握近年IMNV在我国的流行情况,2022—2023年间,本研究在全国主要虾类养殖地区开展了IMNV流行病学调查,并利用分子生物学、组织病理学等方法对所采集的样本进行分析。在山东、江苏、浙江、海南、天津、广西、福建、河北等地开展流行病学调查并采集样品829份,所采集的样品包括凡纳对虾(Penaeus vannamei)、日本对虾(P.japonicus)、中国对虾(P.chinensis)与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)等主要养殖虾类以及饵料、其他水产经济物种和养殖用水。采用TaqMan探针实时荧光定量PCR(TaqMan RT-qPCR)对所采集的样品进行了IMNV检测。调查中发现,患病对虾腹节或尾节骨骼肌出现IMN感染样的典型斑块状或弥散性白色坏死症状,凡纳对虾、日本对虾、中国对虾等主要养殖虾类中均可检测到IMNV阳性,阳性样品主要来自环渤海地区的山东、河北、天津等省市;除养殖虾类外,采集的虾类鲜活饵料(主要是中华卤虫Artemia sinica)和养殖场抽滤的近海海水中也可检测到IMNV阳性。2022年所采集样品中IMNV阳性检出率为6.27%(23/367),2023年所采集样品中IMNV阳性检出率为15.80%(73/462)。对TaqManRT-qPCR检测呈阳性的样品进行组织病理与原位杂交分析,病虾腹节和尾节发白肌肉组织切片中可见IMNV感染特征性凝固状坏死,且发生病理损伤的肌肉组织中有明显的IMNV探针蓝紫色杂交信号。本研究表明,2022—2023年间我国多省市的养殖对虾、生物饵料及近海海水中存在较高的IMNV阳性检出率,虾类养殖过程中需加强IMNV检测与监测预警,以降低其进一步扩散与流行危害风险。 展开更多
关键词 传染性肌坏死病毒(IMNV) 流行病学 TaqManRT-qPCR 组织病理 组织原位杂交
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共感染不同量EHP和IHHNV的凡纳滨对虾转录组分析
6
作者 袁茹青 魏舒展 +2 位作者 陈采怡 闫冬春 常林瑞 《大连海洋大学学报》 北大核心 2025年第6期973-981,共9页
为了探究共感染虾肝肠孢虫(hepatopancreatic microsporidiosis,HPM)与传染性皮下及造血组织坏死病毒(infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus, IHHNV)的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)免疫机制,采用基于Illumina... 为了探究共感染虾肝肠孢虫(hepatopancreatic microsporidiosis,HPM)与传染性皮下及造血组织坏死病毒(infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus, IHHNV)的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)免疫机制,采用基于Illumina测序平台的RNA测序技术,对两种病原不同感染程度(感染IHHNV更严重的IH组和感染EHP更严重的EH组)的对虾肝胰腺RNA进行转录组测序。结果表明:与IH组相比,EH组存在619个显著差异基因(differentially expressed genes, DEGs),其中上调基因243个,下调基因376个;1 672个单基因分别被注释到生物学过程、细胞组分和分子功能这3个GO分类之中;EH组对虾的免疫和代谢相关基因受到的影响最为显著,且大多呈现下调趋势。研究表明,相较于IHHNV,EHP对凡纳滨对虾生长造成的危害更为突出,本研究结果为水产动物共感染病原研究提供了科学依据,同时也为IHHNV和EHP防控提供了全新的思路与视角。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 共感染 EHP IHHNV RNA测序
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罗氏沼虾养殖防灾减灾防病技术措施(下)
7
作者 李风波 彭菲 +4 位作者 李波 程海华 慎佩晶 张海琪 高强 《科学养鱼》 2025年第8期1-2,共2页
6.实行分级养殖罗氏沼虾规格整齐度对产量有重要影响。为提高养殖效益,建议具备条件的养殖场采用分级养殖模式。具体操作如下:首先,将淡化仔虾放入标粗池,进行30~60天标粗。标粗期结束前对幼虾进行病原检测,观察其生长情况,淘汰质量差... 6.实行分级养殖罗氏沼虾规格整齐度对产量有重要影响。为提高养殖效益,建议具备条件的养殖场采用分级养殖模式。具体操作如下:首先,将淡化仔虾放入标粗池,进行30~60天标粗。标粗期结束前对幼虾进行病原检测,观察其生长情况,淘汰质量差的个体。然后,从标粗池中选取大小均匀、外观健康、游动活跃的SPF无特定病原体幼虾,转移至暂养池中继续培育约30天。暂养池中降低养殖密度,以促进幼虾生长。暂养期加强病原检测和健康观察,进一步筛选优质SPF幼虾作为成虾养殖苗种。 展开更多
关键词 病原检测 暂养池 罗氏沼虾 分级养殖
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养殖对虾疾病防控技术研究进展
8
作者 何丽 葛辉 鄢庆枇 《渔业研究》 2025年第6期706-721,共16页
[背景]对虾养殖作为中国水产养殖业的重要组成部分,在国民经济中占据着重要地位。然而,对虾疾病问题严重制约了对虾养殖业的健康可持续发展。[进展]本文系统阐述了对虾养殖过程中常见的病毒性、细菌性、真菌性及寄生虫性疾病类型及典型... [背景]对虾养殖作为中国水产养殖业的重要组成部分,在国民经济中占据着重要地位。然而,对虾疾病问题严重制约了对虾养殖业的健康可持续发展。[进展]本文系统阐述了对虾养殖过程中常见的病毒性、细菌性、真菌性及寄生虫性疾病类型及典型症状,并对现有的病原检测技术和疾病防控技术进行了详细概括,同时指出了当前养殖对虾疾病防控所面临的问题。[意义]本文旨在为构建高效、安全、可持续的养殖对虾疾病防控体系提供系统的理论依据和技术支撑,从而推动中国对虾养殖产业向高质量方向发展。 展开更多
关键词 对虾 养殖 疾病 病原检测 疾病防控
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克氏原螯虾源弗氏柠檬酸杆菌对窄螯螯虾致病力的测定
9
作者 贾雨馨 买尔哈巴·热外都力 +6 位作者 赵琪 史海妮 田娅 庞智 海拉提江·赛依提汗 李娜 李斌 《中南农业科技》 2025年第11期60-64,共5页
弗氏柠檬酸杆菌是克氏原螯虾市售过程中常见的致病菌,鱼虾和人均可感染而发生腹泻、食物中毒和继发感染。为探究弗氏柠檬酸杆菌对窄螯螯虾(Pontastacus leptodactylus)的致病力,采集新疆维吾尔自治区某克氏原螯虾养殖基地发病螯虾样品,... 弗氏柠檬酸杆菌是克氏原螯虾市售过程中常见的致病菌,鱼虾和人均可感染而发生腹泻、食物中毒和继发感染。为探究弗氏柠檬酸杆菌对窄螯螯虾(Pontastacus leptodactylus)的致病力,采集新疆维吾尔自治区某克氏原螯虾养殖基地发病螯虾样品,分离纯化致病性弗氏柠檬酸杆菌,以PCR扩增其16S RNA基因并进行测序分析。以纸片扩散法测定该菌的药物敏感性,向窄螯螯虾体内注射弗氏柠檬酸杆菌以测定其半数致死量(LD_(50)),实验室条件下向窄螯螯虾养殖水体中加入LD_(50)浓度的弗氏柠檬酸杆菌,观察其临床症状,记录21 d内窄螯螯虾的存活率情况,评估弗氏柠檬酸杆菌对窄螯螯虾的致病力。试验成功分离纯化了1株弗氏柠檬酸杆菌,该菌与弗氏柠檬酸杆菌(Genbank登录号分别为MN208068.1、MT949653.1)同源性为99.93%;药敏试验结果表明,该菌对四环素、氧氟沙星、氯霉素、链霉素、庆大霉素和头孢他啶敏感,对氯苄西林、青霉素G、克拉霉素耐药,对红霉素完全耐药。窄螯螯虾致病力结果显示,2.0×10^(6)CFU/mL Citrobacter freundii-Xinjiang处理组的窄螯螯虾虽活力下降、食欲不振但全部存活,其LD_(50)为4.64×10^(7)CFU/mL。研究为探究窄螯螯虾抗病特性、人工健康养殖技术研发等工作奠定理论基础。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 窄螯螯虾(Pontastacus leptodactylus) 弗氏柠檬酸杆菌 致病力 细菌耐药性
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白斑综合征病毒膜囊蛋白VP28原核表达及其多克隆抗体制备
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作者 卢媛圆 刘亚 房志家 《现代农业科技》 2025年第21期154-156,161,共4页
白斑综合征病毒(WSSV)是影响我国水产养殖业的主要病毒之一,需要针对这一病毒探索快速检测技术。通过克隆对虾白斑综合征病毒膜囊蛋白VP28基因并构建原核表达载体,对大肠杆菌进行表达后,将纯化的重组VP28蛋白作为抗原来免疫兔,以制备特... 白斑综合征病毒(WSSV)是影响我国水产养殖业的主要病毒之一,需要针对这一病毒探索快速检测技术。通过克隆对虾白斑综合征病毒膜囊蛋白VP28基因并构建原核表达载体,对大肠杆菌进行表达后,将纯化的重组VP28蛋白作为抗原来免疫兔,以制备特异性VP28多克隆抗体和单克隆抗体,最终筛选出多抗SBI210026。通过ELISA检测,抗血清的效价远高于1∶64000,表明免疫反应较强,且抗体的特异性较高。 展开更多
关键词 白斑综合征病毒(WSSV) VP28 ELISA 多克隆抗体
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南美白对虾小棚养殖弧菌防控措施 被引量：2
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作者 吴龙华 顾伟 +1 位作者 丁长云 吕赞赞 《科学养鱼》 2025年第6期53-54,共2页
南美白对虾的养殖模式多种多样,在江苏沿海地区主要以小棚养殖模式为主,近年来,随着养殖密度的逐年递增,诸多病害也随之而来,其中弧菌感染是小棚养殖中较为常见的病害之一。弧菌作为广泛存在于水域环境的革兰氏阴性菌,适应性强,其致病... 南美白对虾的养殖模式多种多样,在江苏沿海地区主要以小棚养殖模式为主,近年来,随着养殖密度的逐年递增,诸多病害也随之而来,其中弧菌感染是小棚养殖中较为常见的病害之一。弧菌作为广泛存在于水域环境的革兰氏阴性菌,适应性强,其致病性种类严重威胁南美白对虾养殖,轻则掉苗,重则排塘。一、什么是弧菌弧菌是一类广泛存在于海洋、河口等水域环境中的兼性厌氧革兰氏阴性菌。 展开更多
关键词 小棚养殖 养殖密度 弧菌感染 弧菌防控 南美白对虾
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壳寡糖水溶液对虾稻田水土细菌群落的影响
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作者 羊志军 彭开松 +4 位作者 唐庆权 李言 李文慧 李璐滢 熊大华 《安徽农业大学学报》 2025年第1期56-62,共7页
【目的】旨在探究壳寡糖水溶液(商品名优力克,简称YLK)预防稻田养殖小龙虾细菌病的机理。【方法】采用细菌计数和16S rDNA V3-V4区扩增子测序分析了YLK对稻田水体和土样细菌群落结构的影响。【结果】水体和土样中的Brain Heart Infusion... 【目的】旨在探究壳寡糖水溶液(商品名优力克,简称YLK)预防稻田养殖小龙虾细菌病的机理。【方法】采用细菌计数和16S rDNA V3-V4区扩增子测序分析了YLK对稻田水体和土样细菌群落结构的影响。【结果】水体和土样中的Brain Heart Infusion(BHI)、Rimler-Shotts(RS)、Salmonella-Shigella(SS)可培养细菌载量在YLK使用后的3 h和6 h分别降至最低。优力克处理后3 h水体细菌群落的Chao1指数和Shannon指数下降;优力克处理后6 h土样细菌群落的Chao1指数和Shannon指数上升。稻田土样相对丰度最高的菌门为酸杆菌门(Acidobacteriota,29.73%),而水体相对丰度最高的菌门为变形菌门(Proteobacteria,59.36%);黄杆菌属(Flavobacterium)为稻田土样细菌群落优势菌属,慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)为水体细菌群落优势菌属。YLK泼洒后3 h,水体中变形菌门(Proteobacteri)相对丰度显著提高,而蓝细菌门(Cyanobacteria)相对丰度显著降低;YLK泼洒后6 h,土样中酸杆菌门(Acidobacteriota)和绿屈挠菌门(Chloroflexi)相对丰度均下降。【结论】壳寡糖水溶液(优力克)减少了养虾稻田水体和土样可培养细菌载量,增加了土样细菌多样性,有利于虾稻田水土细菌群落结构优化。 展开更多
关键词 壳寡糖 克氏原螯虾 16S rDNA 细菌群落 水体 土样
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罗氏沼虾育苗期优势细菌调查及耐药性分析
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作者 郭琦 吕孙建 +2 位作者 沈卫锋 朱东敏 刘莉 《浙江农业科学》 2025年第8期1840-1845,共6页
育苗期的条件致病菌感染是影响罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)出苗率的重要原因之一。本研究从4个育苗场中定期采集幼体、虾苗及其养殖水,采用琼脂平板分离培养后对样品的细菌数量进行调查,对分离到的优势细菌进行16S rRNA序列分... 育苗期的条件致病菌感染是影响罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)出苗率的重要原因之一。本研究从4个育苗场中定期采集幼体、虾苗及其养殖水,采用琼脂平板分离培养后对样品的细菌数量进行调查,对分离到的优势细菌进行16S rRNA序列分析,并对优势菌群进行耐药性分析。结果显示,育苗期间虾苗及幼体中的细菌数量处于较高水平,优势细菌的变化与季节存在一定联系,其中产气克雷伯氏菌、弧菌属和气单胞菌属细菌较为普遍。优势菌群的耐药性分析结果显示,不同育苗场虾苗中的优势菌对头孢氨苄和利福平表现出耐药性,对其他测试抗生素的敏感性存在差异。本研究结果为罗氏沼虾育苗期细菌感染的针对性防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 育苗期 优势菌 药敏分析 16S rRNA
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安徽蚌埠池塘螃蟹病害发生特点与防治措施 被引量：1
14
作者 刘会成 《农业工程技术》 2025年第9期127-128,共2页
五河螃蟹作为安徽省蚌埠市特产,是中国国家地理标志产品之一,在五河县地区养殖面积较大。近年来,随着社会经济不断发展,五河县的螃蟹养殖面积与产量也在不断提升。随着养殖投入品的增加,池塘中的腐殖质、饲料残饵、螃蟹粪便等有机物增多... 五河螃蟹作为安徽省蚌埠市特产,是中国国家地理标志产品之一,在五河县地区养殖面积较大。近年来,随着社会经济不断发展,五河县的螃蟹养殖面积与产量也在不断提升。随着养殖投入品的增加,池塘中的腐殖质、饲料残饵、螃蟹粪便等有机物增多,对池塘水质造成不良影响,导致五河县螃蟹发病率增加、螃蟹生产性能下降,严重影响螃蟹养殖经济效益。该文以五河县地区为例,介绍了螃蟹病害的发生特点及防治措施,旨在为相关从业人员提供参考。 展开更多
关键词 五河县 螃蟹病害 发生特点 防治措施
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凡纳滨对虾不同组织对EHP的感染差异研究
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作者 常林瑞 张兆新 +3 位作者 何传瑜 曹政 司凌郡 闫冬春 《鲁东大学学报(自然科学版)》 2025年第1期25-30,共6页
近年来,虾肝肠胞虫在我国对虾养殖区具有较高的流行风险,已成为影响对虾养殖业健康发展的主要病原。为了解EHP的早期感染机制,本研究利用常规PCR和qPCR技术,对投喂攻毒10天的凡纳滨对虾5种组织进行EHP检测。结果显示:不同组织中EHP阳性... 近年来,虾肝肠胞虫在我国对虾养殖区具有较高的流行风险,已成为影响对虾养殖业健康发展的主要病原。为了解EHP的早期感染机制,本研究利用常规PCR和qPCR技术,对投喂攻毒10天的凡纳滨对虾5种组织进行EHP检测。结果显示:不同组织中EHP阳性率由高到低为(中肠与游泳足相同)、鳃、肝胰腺、肌肉,分别为70%、70%、60%、30%、10%;不同组织中EHP载量高低顺序为中肠、游泳足、鳃、肝胰腺、肌肉。这一结果表明,凡纳滨对虾在感染EHP早期阶段,多个组织可被感染,中肠是对EHP最为敏感的组织。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 虾肝肠胞虫 不同组织 早期感染
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基于RPA分析辅助CRISPR/Cas12a系统的WSSV检测方法的建立与应用
16
作者 牟全玲 丁存宝 《生物学杂志》 北大核心 2025年第6期93-100,共8页
研究建立一种针对白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的基于重组酶聚合酶等温扩增(recombinant polymerase amplification,RPA)结合CRISPR/Cas12a系统及侧流层析试纸条(lateral flow strip,LFS)的检测方法,即RPA-CRISPR/Ca... 研究建立一种针对白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的基于重组酶聚合酶等温扩增(recombinant polymerase amplification,RPA)结合CRISPR/Cas12a系统及侧流层析试纸条(lateral flow strip,LFS)的检测方法,即RPA-CRISPR/Cas12a-LFS,该方法具有快速、灵敏、操作简单等特点。RPA-CRISPR/Cas12a-LFS的检测方法下限是每个反应1.12×10^(1) copies的白斑综合征病毒DNA,并且整个过程可以在1 h内完成。此外,这种检测组分与其他常见对虾病毒和健康对虾基因组均没有交叉反应。从对虾养殖场采集的110个临床对虾样本,检测结果与实时聚合酶链式反应测试结果完全一致。研究构建的检测方法(RPA-CRISPR/Cas12a-LFS)作为对虾中WSSV早期诊断的新型检测方案具有巨大潜力。 展开更多
关键词 白斑综合征病毒 重组酶聚合酶等温扩增 CRISPR-Cas12a系统 侧流层析试纸条 病毒检测
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十足目虹彩病毒1和虾肝肠胞虫双重荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 谈荣想 斯广杰 +1 位作者 孙海涛 许婷 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第12期2468-2478,共11页
为建立一种可同时检测十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)与虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)的方法,本研究在已有DIV1实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法的基础上,开发了一种基于SY... 为建立一种可同时检测十足目虹彩病毒1(Decapod iridescent virus 1,DIV1)与虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)的方法,本研究在已有DIV1实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法的基础上,开发了一种基于SYBR Green I的双重qPCR方法,分别靶向DIV1的主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因和EHP的孢壁蛋白(spore wall protein,SWP)基因。结果显示,该方法中DIV1与EHP的熔解温度(Tm)分别为(82.0±0.5)℃和(77.0±0.5)℃,能够特异性检出DIV1和EHP,而对其他常见虾病原和健康虾样本的检测结果均为阴性;在35个循环内,DIV1与EHP的最低检测限分别为75 copies·μL^(-1)和15 copies·μL^(-1);重复性试验显示,组内和组间变异系数均低于2%。综上,本研究建立的双重qPCR检测方法具有高度的特异性、灵敏度与重复性,适用于虾中DIV1和EHP感染的快速监测。 展开更多
关键词 双重SYBR Green I实时荧光定量PCR 十足目虹彩病毒1 虾肝肠胞虫 虾
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芽孢杆菌对凡纳对虾生长和消化酶活性的影响 被引量：136
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作者 丁贤 李卓佳 +3 位作者 陈永青 林黑着 杨莺莺 杨铿 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期580-584,共5页
选用豆粕、鱼粉、植物油、淀粉等原料配制基础料为对照组,在基础饲料中分别添加0.5％、1.0％、3.0％、5.0％芽孢杆菌(Bacillus subtilis)制剂为实验组。实验结果显示,凡纳对虾(Pennaus-vannamei)生长的2个阶段,实验组γSGR均大于对照组... 选用豆粕、鱼粉、植物油、淀粉等原料配制基础料为对照组,在基础饲料中分别添加0.5％、1.0％、3.0％、5.0％芽孢杆菌(Bacillus subtilis)制剂为实验组。实验结果显示,凡纳对虾(Pennaus-vannamei)生长的2个阶段,实验组γSGR均大于对照组;生长第1阶段,组1与组2差异显著(P<0.05),与其余3组差异不显著(P>0.05),但各实验组之间差异均不明显(P>0.05);生长第2阶段,组1与组2之间γSGR差异极显著(P<0.01),与其余3组差异不明显(P>0.05),但各实验组间:组2与组4γSGR差异显著(P<0.05),而与组5γSGR差异极显著(P<0.01);对虾生长2个阶段的成活率实验组均略高于对照组,第1阶段的成活率明显高于第2阶段;芽孢杆菌对凡纳对虾2个生长阶段消化酶活性的影响表现出一定的相似性:实验组蛋白酶活性较淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶高,且明显高于对照组,但各实验组间变化不明显。表明芽孢杆菌可以提高凡纳对虾消化酶活性和成活率,利于养分的消化吸收,促进生长。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 凡纳对虾 生长 消化酶
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白斑综合症病毒(WSSV)的宿主调查 被引量：53
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作者 雷质文 黄倢 +2 位作者 史成银 张立敬 俞开康 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期250-258,共9页
用地高辛 (DIG)标记的WSSVDNA探针斑点杂交与原位杂交技术 ,在中国对虾、斑节对虾、南美白对虾、刀额新对虾、脊尾白虾、天津厚蟹、日本大眼蟹体内检测到了WSSV ,它们是WSSV的天然宿主 ;在经人工感染的哈氏美人虾、短脊鼓虾、克氏原螯... 用地高辛 (DIG)标记的WSSVDNA探针斑点杂交与原位杂交技术 ,在中国对虾、斑节对虾、南美白对虾、刀额新对虾、脊尾白虾、天津厚蟹、日本大眼蟹体内检测到了WSSV ,它们是WSSV的天然宿主 ;在经人工感染的哈氏美人虾、短脊鼓虾、克氏原螯虾、肉球近方蟹、滕壶体内检测到了WSSV ;在球形侧腕水母、病虾池的桡足类等浮游生物、卤虫无节幼体以及人工浸泡感染卤虫成体体内没有检测到WSSV。经原位杂交检测 ,虾类的甲壳下上皮、胃上皮、附肢、造血组织、鳃等组织器官均可被WSSV侵染 ,其中甲壳下上皮和鳃对WSSV敏感 ;蟹类的甲壳下上皮和鳃对WSSV敏感 ;在中国对虾、南美白对虾、脊尾白虾、注射感染的克氏原螯虾的精巢中 ,精荚的结缔组织细胞和血细胞呈阳性 ,在中国对虾、脊尾白虾以及注射感染的短脊鼓虾的卵巢中 ,结缔组织细胞和滤泡细胞被WSSV感染。 展开更多
关键词 白斑综合症病毒 核酸探针 宿主 南美白对虾 中国对虾 斑节对虾
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非生物环境因子对用暴发性流行病病原实验感染的中国对虾发病的影响 被引量：20
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作者 刘昌彬 王金星 +3 位作者 刘存仁 吴中华 陈忠科 张红卫 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期58-63,共6页
在保证有充足氧气的前提下 ,按正交设计 ,研究水质氨态氮浓度、pH值、盐度和温度四种环境因子 ,对实验感染暴发性流行病病原的中国对虾发病的影响。在感染的不同时期 ,这四种环境因子对带毒对虾死亡率的影响程度不同。感染后 3～ 4天 ,... 在保证有充足氧气的前提下 ,按正交设计 ,研究水质氨态氮浓度、pH值、盐度和温度四种环境因子 ,对实验感染暴发性流行病病原的中国对虾发病的影响。在感染的不同时期 ,这四种环境因子对带毒对虾死亡率的影响程度不同。感染后 3～ 4天 ,影响程度从大到小的次序为盐度、pH值、温度、氨态氮浓度 ,感染后 5天 ,影响程度从大到小的次序变为氨态氮浓度、pH值、温度、盐度。我们还进行了混合水平的正交实验 ,即在盐度水平不变 ,氨态氮浓度降到适宜的水平 ,再研究温度、pH值、氨态氮三种因子对带毒对虾的影响 ,结果表明 :三种环境因子的影响程度由大到小的次序为温度、氨态氮浓度和pH值 ,这与我国养殖对虾发病时间从南到北推移的现象相符合。 展开更多
关键词 中国对虾 暴发性流行病 正交设计 非生物性环境因子 温度 盐度 pH值 人工感染试验
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