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罗氏沼虾源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性分析 被引量：1
1
作者 赵梦瑶 陈静 +4 位作者 姚嘉赟 袁雪梅 黄雷 彭先启 张海琪 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第2期137-143,共7页
为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freund... 为探究患病罗氏沼虾的病原及其感染的防治措施,本研究从浙江省某养殖场采集10只患病罗氏沼虾的肝胰腺、鳃及肌肉样品分离获得一株优势菌。通过对该优势菌经革兰氏染色镜检及生化鉴定,结果表明分离菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。采用PCR分别扩增分离菌的16S r RNA和gyr B基因序列,测序后经BLAST检索与这两种基因同源性均最高的菌株;通过MEGA 7.0软件中的Clustal W方法将分离菌与从Gen Bank中获得的同源性较高的菌株序列进行多序列比对,采用MEGA 7.0软件中的邻接法构建分离菌与上述菌株16S r RNA和gyr B基因的系统发育树。BLAST检索结果显示,分离菌与弗氏柠檬酸杆菌(KC210829.1)16S r RNA基因序列的同源性高达99.93%;与弗氏柠檬酸杆菌(KF156750.1)gyr B基因序列的同源性达98.76%。16S r RNA和gyr B基因的进化树结果显示,分离菌均与弗氏柠檬酸杆菌聚为一支,且支持率高达99%。进一步表明引起罗氏沼虾发病的病原为弗氏柠檬酸杆菌。将分离菌分别以1.02×10^(9)cfu/m L~1.02×10^(4)cfu/m L 6种浓度感染健康罗氏沼虾,每日观察并记录罗氏沼虾的发病症状及死亡率,根据Probit回归法计算分离菌对罗氏沼虾的半数致死量(LD50)。结果显示,1.02×10^(6)cfu/m L以上浓度的弗氏柠檬酸杆菌均能够导致罗氏沼虾出现体型消瘦、行动迟缓无活力的症状,1.02×10^(5)cfu/m L以下浓度的弗氏柠檬酸杆菌并不致罗氏沼虾出现症状。经统计该菌株对罗氏沼虾的LD50为1.01×10^(7)cfu/m L,表明该菌株对罗氏沼虾的致病性较强。采用PCR分别检测该分离菌株的定居因子基因(cfa)、尿素酶基因簇(ure G、ure F、ure E、ure D)、Vi抗原基因(via B)、外膜蛋白基因(omp X)等7种毒力相关基因,结果显示该菌株分别扩增到375 bp(cfa)、119 bp(ure G)、300 bp(ure F)、247 bp(ure E)、243 bp(ure D)、875 bp(via B)及250 bp(oomp X)的7种毒力基因。采用K-B纸片扩散法测定分离菌对10类共35种药物的敏感性,结果显示该分离菌对β-内酰胺类的头孢他啶和头孢曲松、多肽素类的多黏菌素B、氨基糖苷类的庆大霉素以及拉氧头孢这5种药物敏感,对β-内酰胺类的青霉素、氯霉素类的氟苯尼考、多肽类的万古霉素及苯唑醂、克林霉素和新生霉素等27种药物呈不同程度的耐药性,且为多重耐药菌。综上所述,本研究从患病罗氏沼虾中分离到了一株弗氏柠檬酸杆菌,该菌携带多种毒力基因,对罗氏沼虾的致病性较强,为进一步研究弗氏柠檬酸杆菌对水产动物的致病性及对罗氏沼虾弗氏柠檬酸杆菌病的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 弗氏柠檬酸杆菌 致病性 毒力基因 药敏分析
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没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性及机理研究
2
作者 王春元 王印庚 +4 位作者 赵伟志 于永翔 张正 荣小军 刘定远 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期212-221,共10页
研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线,研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性;测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后,... 研究没食子酸对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的抑菌活性和机理。通过测定没食子酸对溶藻弧菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和生长曲线,研究没食子酸对溶藻弧菌的抑菌活性;测定不同浓度的没食子酸溶液与溶藻弧菌作用前后,菌液上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性、电导率,溶藻弧菌生物被膜、运动性和聚集能力的变化,研究没食子酸对溶藻弧菌的抗菌机理。结果显示,没食子酸对溶藻弧菌的MIC和MBC分别为4 mg/mL和8 mg/mL。没食子酸能破坏溶藻弧菌的细胞壁,增加其细胞膜通透性,抑制生物被膜的形成,清除成熟的生物被膜,抑制溶藻弧菌的运动和聚集能力。本研究为探明没食子酸抑制溶藻弧菌的作用机理奠定了良好的基础,为其防治水生动物溶藻弧菌感染性疾病提供了理论依据。 展开更多
关键词 没食子酸 溶藻弧菌 抑菌机理 细胞壁 生物膜
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凡纳对虾感染副溶血弧菌后pVA1-like质粒的组织分布及增殖特点
3
作者 苏兴琦 傅强 +7 位作者 李旭鹏 孔杰 田吉腾 曹宝祥 刘宁 栾生 罗坤 孟宪红 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期77-89,共13页
对虾急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)主要由副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)携带的pVA1-like质粒表达毒力蛋白PirABVp所致。本研究通过2次定量口饲的感染方式对凡纳对虾(Penaeus vannamei)成虾... 对虾急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)主要由副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)携带的pVA1-like质粒表达毒力蛋白PirABVp所致。本研究通过2次定量口饲的感染方式对凡纳对虾(Penaeus vannamei)成虾进行弧菌胁迫,研究相对低摄菌量实验组(L组,105 CFU/尾)与相对高摄菌量实验组(H组,107 CFU/尾)的个体5个不同时间点(感染后3、6、9、24和48 h)的9种不同组织(鳃、胃、肠道、眼柄、肌肉、肝胰腺、第5游泳足、腹部神经和第2触角鞭)中弧菌分布及变化情况。通过毒力蛋白PirA^(Vp)的基因表达量反映副溶血弧菌携带的pVA1-like质粒量,进而代表弧菌的分布及变化特点。结果显示,H组和L组的总体死亡率无差异,且均在3~6 h达到死亡高峰。2个实验组中病原质粒在各组织中的拷贝数不同,腹部神经与肠道组织平均质粒拷贝数均高于其他组织;同一组织内H组比L组的质粒拷贝数高1.9~4.9倍。质粒变化相关性分析显示,质粒拷贝数变化情况与对虾摄菌时间、死亡率无显著关系。同时2个实验组的质粒拷贝数变化特点也不同。L组中,有6个组织的质粒拷贝数随时间呈先上升后下降的趋势,而在胃、肠和肝胰腺中随时间呈波动变化;H组中,有7个组织的质粒拷贝数随时间呈现波动变化,但在胃和第5游泳足中随时间呈先上升后下降的趋势。第2触角鞭和第5游泳足在各取样时间段均可检测出PirA^(Vp),可作为保种成虾活体常态病原检测的候选组织。本研究探究了商品规格种虾感染不同浓度VpAHPND后在体内不同组织的分布及扩增动态变化的特点,可为AHPND精准抗性测试方案的制定和致病机理研究提供数据与理论依据,也为保种期成虾准确的病原监测的候选组织提供参考。 展开更多
关键词 凡纳对虾 副溶血弧菌 PirA^(Vp) 实时荧光定量PCR 组织分布
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新疆哈密市凡纳滨对虾土塘淡水健康养殖关键技术
4
作者 蔡树东 王万兴 +1 位作者 赵龙飞 韩煜茹 《现代畜牧科技》 2025年第1期87-90,共4页
凡纳滨对虾又名南美白对虾,隶属节肢动物门、甲壳纲、十足目、游泳亚目,对虾科,滨对虾属,具有生长快、适应性强、养殖周期短等优点,且肉质鲜美、营养价值高、市场前景广阔,深受广大消费者的青睐,是世界三大养殖对虾之一,也是我国重要的... 凡纳滨对虾又名南美白对虾,隶属节肢动物门、甲壳纲、十足目、游泳亚目,对虾科,滨对虾属,具有生长快、适应性强、养殖周期短等优点,且肉质鲜美、营养价值高、市场前景广阔,深受广大消费者的青睐,是世界三大养殖对虾之一,也是我国重要的养殖虾类,近年来一直是淡水、海水养殖的热门品种。由于大多养殖户缺乏养殖经验和养殖技术,盲目养殖,加之对虾苗种质量参差不齐、池塘老化、饲料选择和投喂不当、水环境控制管理不到位等多种因素,致使对虾疾病频繁爆发,导致养殖产量下降,养殖效益不高。该文对新疆哈密市南美白对虾淡水土塘露天养殖模式进行技术总结,从养殖前期池塘准备、虾苗淡化标粗、成虾养殖管理、收获等方面对凡纳滨对虾土塘淡水养殖技术进行详细阐述,为广大养殖户开展凡纳滨对虾土塘淡水健康养殖提供技术参考。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 池塘 淡水 健康养殖
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对虾肠道微生物响应部分环境胁迫的研究进展
5
作者 李海玥 张怀东 《黑龙江水产》 2025年第1期8-12,共5页
对虾在养殖过程中会遇到各种环境胁迫因素,包括重金属污染、病原体感染及其他污染等。面对这些胁迫,除了对虾自身外,其体内的肠道微生物也会做出相应响应。肠道菌群不仅具有指示宿主健康状况的作用,经过调节后还可以提升对虾免疫力、促... 对虾在养殖过程中会遇到各种环境胁迫因素,包括重金属污染、病原体感染及其他污染等。面对这些胁迫,除了对虾自身外,其体内的肠道微生物也会做出相应响应。肠道菌群不仅具有指示宿主健康状况的作用,经过调节后还可以提升对虾免疫力、促进对虾生长。对肠道菌群的研究还能加强对疾病的理解,从而制定更有效的对虾病害防治手段。 展开更多
关键词 肠道微生物 环境污染 对虾养殖
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HIV阴性播散型马尔尼菲篮状菌骨髓炎合并肺结核患者的药学监护
6
作者 张清华 何丽庭 《中国药房》 北大核心 2025年第16期2062-2066,共5页
目的为人类免疫缺陷病毒(HIV)阴性患者播散型马尔尼菲篮状菌(TM)骨髓炎合并肺结核抗感染治疗的药学监护提供参考。方法临床药师参与1例HIV阴性播散型TM骨髓炎合并肺结核患者的治疗全过程,系统评估患者临床症状、体征及检验、影像学结果... 目的为人类免疫缺陷病毒(HIV)阴性患者播散型马尔尼菲篮状菌(TM)骨髓炎合并肺结核抗感染治疗的药学监护提供参考。方法临床药师参与1例HIV阴性播散型TM骨髓炎合并肺结核患者的治疗全过程,系统评估患者临床症状、体征及检验、影像学结果后,协助医师制定治疗方案及完善诊断,建议给予两性霉素B胆固醇硫酸酯复合物抗真菌治疗和完善结核菌素试验及痰涂片抗酸染色,实时监护患者的临床表现及检验结果;及时发现患者血钾降低,分析原因后,先后建议口服和静脉补钾,并调整治疗方案(改用伊曲康唑,联合异烟肼+利福平+吡嗪酰胺+乙胺丁醇四联抗结核),同时建议监测伊曲康唑血药浓度。此外,临床药师还对患者进行了系统的用药和健康教育。结果医师采纳临床药师的建议,患者治疗后好转出院。临床药师随访1年患者病情治愈,无不良反应发生。结论两性霉素B胆固醇硫酸酯复合物是HIV阴性患者播散型TM骨髓炎的有效治疗药物,延长疗程可防止复发;用药期间临床药师需加强药学监护,保障患者用药安全。 展开更多
关键词 马尔尼菲篮状菌 两性霉素B胆固醇硫酸酯复合物 化脓性骨髓炎 肺结核 药学监护
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对虾玻璃苗致病弧菌的毒力进化机制与生态防控策略
7
作者 崔晗 刘灵珂 刘海鹏 《渔业研究》 2025年第5期570-582,共13页
【目的】本研究揭示了对虾玻璃苗弧菌病(TPV)致病弧菌(VpTPV)的关键毒力进化途径,阐明其高致死率机制,并为开发削弱VpTPV毒力因子致病能力和特异性防控技术提供依据,以保障水产养殖业种源安全和可持续发展。【进展】TPV亦称高致死性弧菌... 【目的】本研究揭示了对虾玻璃苗弧菌病(TPV)致病弧菌(VpTPV)的关键毒力进化途径,阐明其高致死率机制,并为开发削弱VpTPV毒力因子致病能力和特异性防控技术提供依据,以保障水产养殖业种源安全和可持续发展。【进展】TPV亦称高致死性弧菌病,是一种严重危害对虾养殖业的细菌性疾病。该病主要侵袭凡纳对虾(Penaeus vannamei)仔虾阶段(PL4~PL12),发病后48 h内死亡率高达90%,给中国和越南等对虾养殖国家造成巨大经济损失。TPV的病原呈现多源性特征,主要病原以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)为主,溶藻弧菌(V.alginolyticus)和坎贝氏弧菌(V.campbellii)等亦可致病,且该病原体具有跨宿主与跨地域传播的潜在风险。质粒编码的毒素是介导VpTPV宿主侵染与病理损伤的核心效应分子,其通过质粒表达的毒素复合体或高毒力蛋白2(VHVP-2)引发肠道黏膜屏障崩解及肝胰腺组织坏死,最终导致肝胰腺玻璃样变性及肠道结构溶解。在进化层面,毒力质粒在转座子和T4SS系统作用下频繁转移和重组,推动新型杂合质粒形成并增强VpTPV的适应性与毒力。在防控层面,本文提出以生态调控为核心的综合策略:通过种源检疫和无特定病原体(SPF)亲本阻断病原输入,结合水质监测与群落调控,并辅以噬菌体、益生菌和免疫增强剂,构建“源头阻断–环境优化–精准干预–快速响应”的防御模式。【意义】本文针对近期TPV研究进展,系统概述了TPV的病原学基础、分子病理和毒力进化机制,为TPV早期监测预警和构建生态干预可持续防控策略提供理论依据与实践参考。 展开更多
关键词 凡纳对虾 对虾玻璃苗弧菌病 副溶血弧菌 致病机制 细菌性疾病
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虾十足目虹彩病毒1、肝肠胞虫及传染性早熟病毒多重Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量：3
8
作者 徐晔 周毅 +4 位作者 王娜 窦维伟 王静 王凤芝 段宏安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期825-831,共7页
为建立检测十足目虹彩病毒1(DIV1)、肝肠胞虫(EHP)、传染性早熟病毒(IPV)的多重Taq Man荧光定量PCR检测方法,本研究根据DIV1 MCP基因、EHP SSU基因与IPV polyprotein A基因设计特异性引物和Taq Man探针,经各反应条件的优化建立了同时检... 为建立检测十足目虹彩病毒1(DIV1)、肝肠胞虫(EHP)、传染性早熟病毒(IPV)的多重Taq Man荧光定量PCR检测方法,本研究根据DIV1 MCP基因、EHP SSU基因与IPV polyprotein A基因设计特异性引物和Taq Man探针,经各反应条件的优化建立了同时检测DIV1、EHP及IPV的多重Taq Man荧光定量PCR方法。利用该方法检测DIV1、EHP、IPV、白斑综合征病毒、致急性肝胰腺坏死弧菌、传染性皮下及造血器官坏死病毒、虾偷死病毒、传染性肌肉坏死病毒、桃拉病毒、黄头病毒1型等主要虾类病毒,结果显示,该方法仅能扩增出DIV1、EHP和IPV,与其他主要虾类病原均无交叉反应,特异性较强。对10倍倍比稀释后等浓度等体积混合的DIV1、EHP和IPV质粒标准品混合物的检测结果显示,该方法对3种病原的质粒标准品的检测限均为1.67×10^(1)拷贝/μL,各病毒单一荧光定量PCR方法的检测限均为1.67×10~0拷贝/μL,多重Taq Man荧光定量PCR方法的灵敏度虽略低于单一荧光定量PCR方法,但是可以同时检测3种病原,检测效率高。选取3个浓度的pDIV1、pEHP、pIPV(5×10^(5)拷贝/μL、5×10^(4)拷贝/μL、5×10^(3)拷贝/μL)等浓度等体积混合的质粒标准品为模板,进行组内和组间重复性试验,结果显示组内与组间重复性试验的变异系数均小于1%,该方法重复性较好。利用该方法与DIV1、EHP、IPV单一荧光定量PCR方法同时检测105份虾苗和亲虾样品,结果显示,本研究建立的多重Taq Man荧光定量PCR方法对DIV1的检出率为21.9%(23/105),对EHP的检出率为14.3%(15/105),对IPV的检出率为45.7%(48/105),3种病原混合感染率为1.9%(2/105),与DIV1、EHP、IPV各单一荧光定量PCR方法的检测结果均一致,阳性样品的符合率达100%。本研究建立的DIV1、EHP、IPV多重Taq Man荧光定量PCR方法为临床同时检测该3种病原提供了特异、敏感、高效的技术手段。 展开更多
关键词 虾十足目虹彩病毒1 虾肝肠胞虫 虾传染性早熟病毒 多重Taq Man荧光定量PCR
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苗期中国对虾幼体异养细菌区系及其变化与病害发生的关系 被引量：12
9
作者 李筠 吕艳 +4 位作者 李军 祁自忠 张晓华 王祥红 徐怀恕 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期1003-1007,共5页
研究了 2个育苗场不同发育期的中国对虾 (Penaeuschinensis)幼体的异养菌和弧菌种群变化的动态过程。以典型特征法、BIOLOGGN法和数值分类法对菌株进行鉴定。结果表明 ,对虾幼体样品中所分离的细菌 ,大多是革兰氏阴性杆菌 ,鉴定为假单... 研究了 2个育苗场不同发育期的中国对虾 (Penaeuschinensis)幼体的异养菌和弧菌种群变化的动态过程。以典型特征法、BIOLOGGN法和数值分类法对菌株进行鉴定。结果表明 ,对虾幼体样品中所分离的细菌 ,大多是革兰氏阴性杆菌 ,鉴定为假单胞菌属 (Pseudomonas)、气单胞菌属 (Aeromonas)和弧菌属 (Vibrio)。弧菌属主要为溶藻弧菌 (Vibrioal ginolyticus)和哈维氏弧菌 (Vibrioharveyi)。在对虾幼体发育早期 ,假单胞菌 (Pseudomonas)和气单胞菌 (Aeromonas)占优势 ,随着对虾幼体的发育 ,弧菌 (Vibrio)渐成为优势 ,其中溶藻弧菌 (Vibrioalginolyticus)和哈维氏弧菌 (Vibrioharveyi)优势明显。二者的消长与苗期病害的发生相关 ,溶藻弧菌总是在虾幼体健康时出现或成为优势 ,而哈维氏弧菌成为优势时 ,苗期病害容易发生。 展开更多
关键词 中国对虾 幼体 细菌区系 异养菌 弧菌
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虾肝肠胞虫极管蛋白3的鉴定
10
作者 于志君 王李宝 +6 位作者 史文军 黎慧 胡润豪 赵然 沈辉 管小平 万夕和 《水产学杂志》 CAS 2024年第1期22-29,51,共9页
为探明极管蛋白在EHP侵染宿主过程中的作用机制及虾肝肠胞虫病的预防和治疗提供新的靶标,通过克隆南美白对虾(Litopenaeus vannamei)肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)极管蛋白3基因(Polar tube protein 3,PTP3),并进行生物信... 为探明极管蛋白在EHP侵染宿主过程中的作用机制及虾肝肠胞虫病的预防和治疗提供新的靶标,通过克隆南美白对虾(Litopenaeus vannamei)肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)极管蛋白3基因(Polar tube protein 3,PTP3),并进行生物信息学分析,构建其核心区域部分序列编码的蛋白原核表达载体,诱导表达、纯化,制备多克隆抗体。结果表明,PTP3中最长的开放阅读框片段长3 390 bp,编码1 130个氨基酸,预测蛋白质分子质量为125 k D。该蛋白拥有13个N-糖基化位点和多个O-糖基化位点,未发现信号肽结构域;拥有117个磷酸化位点,其中苏氨酸磷酸化位点最多,为71个;二级结构较为简单,α螺旋占41.77%,是最大量的结构元件;延伸链占12.48%,无规卷曲占39.29%,β转角占6.46%。通过免疫印迹试验验证多抗的特异性,用免疫荧光实验观察极管蛋白在极管弹射时的状态,表明EHPPTP3分布于虾肝肠胞虫弹出的极管上,是新鉴定出的虾肝肠胞虫极管蛋白,确认了EHPPTP3的存在。通过生物信息学分析、序列特征、蛋白表达特征、多抗特异性以及定位特征证实本研究克隆的PTP3即为EHP极管蛋白3(EHPPTP3),是虾肝肠胞虫中新鉴定出的一种极管蛋白。 展开更多
关键词 南美白对虾肝肠胞虫 极管蛋白3 生物信息学分析 多克隆抗体
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凡纳滨对虾致病性雷氏普罗威登斯菌的分离鉴定及中草药对其体外抑菌效果研究 被引量：5
11
作者 高晓华 何兰 邵玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期915-922,共8页
为明确引起上海青浦区某对虾养殖场凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)死亡的致病原,并了解分离菌的药敏性及对中草药的敏感性等,本研究从患病凡纳滨对虾肝胰腺组织中分离纯化到一株优势菌,命名为L20230712,采用TSA培养基培养后可见圆形... 为明确引起上海青浦区某对虾养殖场凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)死亡的致病原,并了解分离菌的药敏性及对中草药的敏感性等,本研究从患病凡纳滨对虾肝胰腺组织中分离纯化到一株优势菌,命名为L20230712,采用TSA培养基培养后可见圆形、边缘整齐、半透明的光滑菌落;经革兰氏染色后镜检可见,分离株L20230712为革兰氏阴性短杆菌;经VITEK-2全自动微生物鉴定仪鉴定,结果显示分离株L20230712与雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)符合率为99%;通过16S r RNA基因的PCR扩增并测序进一步明确该分离株为P.rettgeri。对分离菌L20230712进行动物回归实验,结果显示该分离菌对凡纳滨对虾的半数致死量(LD_(50))为5.85×10^(4)cfu/m L,且可从感染组患病对虾肝胰腺组织再次分离获得与分离株L20230712生化、分子生物学特征一致的菌株。通过Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法检测分离株L20230712对7大类20种抗菌药物的敏感性,结果显示其对氟苯尼考、诺氟沙星2种药物敏感,对恩诺沙星等4种药物中介,对新霉素等14种药物耐药;采用牛津杯打孔法测定分离株L20230712对16种中草药提取液的敏感性,结果显示,乌梅(Fructus mume)等12种中草药提取液对分离株L20230712具有显著抑菌效果,而苦参(Radix sophorae)等4种中草药提取液则对分离株L20230712无抑制作用。进一步通过微量二倍稀释法测定分离株对6种极度敏感中草药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),结果显示,乌梅提取液对分离株L20230712的体外抑杀作用最强,其MIC和MBC分别为15.63 mg/mL、31.25 mg/mL。本研究结果表明P.rettgeri分离株L20230712为引起该养殖场凡纳滨对虾疫情的致病菌,首次证实P.rettgeri对凡纳滨对虾具有强致病性,并为P.rettgeri引起的凡纳滨对虾疾病的防控提供参考依据。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 雷氏普罗威登斯菌 耐药性 中草药
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罗氏沼虾胞质锰超氧化物歧化酶的功能
12
作者 李亚男 陆霖青 +3 位作者 张鹏 张博 林蠡 秦真东 《水产学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期156-163,共8页
为了解超氧化物歧化酶(SOD)分子生物学特性和免疫功能,实验克隆了罗氏沼虾胞质锰SOD基因(MrcMnSOD),制备多克隆抗体,并分析在嗜水气单胞菌感染下该基因的表达模式。结果显示,嗜水气单胞菌感染可显著诱导MrcMnSOD在转录水平和蛋白质水平... 为了解超氧化物歧化酶(SOD)分子生物学特性和免疫功能,实验克隆了罗氏沼虾胞质锰SOD基因(MrcMnSOD),制备多克隆抗体,并分析在嗜水气单胞菌感染下该基因的表达模式。结果显示,嗜水气单胞菌感染可显著诱导MrcMnSOD在转录水平和蛋白质水平进行高表达。为探究MrcMnSOD参与免疫应答的机制,进一步的抑菌实验表明,该蛋白质可显著抑制3种革兰氏阴性细菌(大肠杆菌、副溶血性弧菌、嗜水气单胞菌)和2种革兰氏阳性细菌(无乳链球菌、金黄色葡萄球菌)的生长,且抑制作用与蛋白质浓度的关系不显著。研究表明,MrcMnSOD可能作为一种免疫相关分子参与免疫应答反应。本研究初步探讨了MrcMnSOD的免疫生物学功能,旨在为深入研究罗氏沼虾SOD的功能奠定相关基础。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 MNSOD 表达模式 抑菌
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粪肠球菌JSHY-R5对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的拮抗作用
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作者 温梦莹 蒋葛 +4 位作者 向罗平 周子杰 成婕 范贤平 沈辉 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期992-1000,共9页
以致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌为受试菌株,从采集自江苏沿海地区的健康凡纳滨对虾体内分离筛选拮抗菌株,通过形态学、生理生化及分子生物学方法进行鉴定,测定其对受试菌株的拮抗效果,并对被动保护效果进行分析。结果显示,筛选出1株对... 以致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌为受试菌株,从采集自江苏沿海地区的健康凡纳滨对虾体内分离筛选拮抗菌株,通过形态学、生理生化及分子生物学方法进行鉴定,测定其对受试菌株的拮抗效果,并对被动保护效果进行分析。结果显示,筛选出1株对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌有良好抑制效果的菌株JSHY-R5,经形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析鉴定该菌株为粪肠球菌。当JSHY-R5与致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌以5∶1的接种比例共培养时,JSHY-R5对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌具有明显的抑制作用。此外,饲料添加JSHY-R5处理的凡纳滨对虾体内副溶血弧菌黏附因子(VpadF)mRNA的表达量显著下调,对虾免疫因子(Serpin、Hemocyanin、Peneidins)mRNA表达量显著升高,暴露在致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌下的5 d存活率相比投喂常规饲料的阳性组提高26%。本试验证实筛选的粪肠球菌JSHY-R5对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌具有较好的抑制作用,可以抑制副溶血弧菌黏附因子的mRNA表达,调节免疫因子的表达,增强宿主免疫防御能力,从而提高对虾的存活率,具有应用为饲料添加剂的潜力。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌 粪肠球菌 拮抗菌
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TaqMan实时荧光定量PCR法检测对虾肝肠胞虫(EHP)步骤优化 被引量：1
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作者 李慰欣 陈政思 黄瑜 《安徽农学通报》 2024年第21期32-36,共5页
优化虾肝肠胞虫(EHP)的TaqMan实时荧光定量PCR检测流程,目的是更准确、快速地检测出虾苗,饵料,亲虾体内携带的EHP。本研究采用酚/氯仿抽提法与水生动物病原体核酸提取试剂盒两种DNA提取方法,对等量的病原组织样本进行了对比提取。此外,... 优化虾肝肠胞虫(EHP)的TaqMan实时荧光定量PCR检测流程,目的是更准确、快速地检测出虾苗,饵料,亲虾体内携带的EHP。本研究采用酚/氯仿抽提法与水生动物病原体核酸提取试剂盒两种DNA提取方法,对等量的病原组织样本进行了对比提取。此外,还设置不同浓度的裂解液以探究其对病原组织裂解效果的影响,并设定不同裂解时间以优化裂解步骤。最后,通过调整qPCR反应的循环数,确定最佳的检测条件。结果显示,水生动物病原体试剂盒提取的DNA检出率高于酚/氯仿抽提法提取,裂解液浓度90%时检测出的EHP含量最高;裂解时间30 min时检测出的EHP含量较高;循环数在40次时足以检测出EHP。综上,优化后的检测流程为用水生动物病原体核酸提取试剂盒提取病原组织DNA,裂解液浓度90%,裂解时间30 min及qPCR检测条件的循环数控制在40次。 展开更多
关键词 虾肝肠胞虫 DNA提取 条件优化 TaqMan实时荧光定量PCR
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对虾白斑综合症病毒LAMP-TaqMan检测方法的建立及应用 被引量：2
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作者 刘昱 柳梦思 +3 位作者 董振国 焦义然 时国强 石磊 《中国动物传染病学报》 北大核心 2024年第6期63-68,共6页
为提高环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法的特异性,本研究建立一种LAMP-TaqMan检测方法,进行对虾白斑综合症病毒(WSSV)核酸检测。本研究以WSSV基因组中保守序列构建测试质粒并设计筛选LAMP引物组,以荧光淬灭集团修饰的环引物作为TaqMan... 为提高环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法的特异性,本研究建立一种LAMP-TaqMan检测方法,进行对虾白斑综合症病毒(WSSV)核酸检测。本研究以WSSV基因组中保守序列构建测试质粒并设计筛选LAMP引物组,以荧光淬灭集团修饰的环引物作为TaqMan探针,建立LAMP-TaqMan检测方法。结果显示:LAMP-TaqMan法在WSSV检测中,具备良好的特异性,最适检测温度为63℃,测试质粒线性相关性系数R^(2)为0.990,最低检出限为0.76×10^(1)copies/μL,重复性检测结果的变异系数CV值均小于3%,稳定性良好;以市售检测试剂盒为对照,对60份对虾样品进行平行测试,LAMP-TaqMan检测准确率为96.67%,敏感性为100.00%。建立的LAMP-TaqMan恒温核酸检测方法具备精准快速,检出限低,有效避免LAMP非特异性扩增造成的“假阳性”等优势,在水产疫病精准快速检测中具有广泛的市场应用前景。 展开更多
关键词 LAMP TAQMAN探针 对虾白斑综合症病毒 核酸检测
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凡纳对虾不同品系生长和急性肝胰腺坏死病抗性遗传参数估计 被引量：1
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作者 黄桂仙 李旭鹏 +16 位作者 田吉腾 栾生 孔杰 曹宝祥 刘宁 罗坤 谭建 曹家旺 代平 陈宝龙 强光峰 刘绵宇 刘杨 王宏杰 刘学会 隋娟 孟宪红 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第6期133-143,共11页
为开展凡纳对虾(Penaeus vannamei)生长和急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)抗性复合选育,本研究以自主选育的凡纳对虾高抗和快大品系为研究对象进行生长和AHPND抗性测试。实验家系共计70个(高抗家系40... 为开展凡纳对虾(Penaeus vannamei)生长和急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)抗性复合选育,本研究以自主选育的凡纳对虾高抗和快大品系为研究对象进行生长和AHPND抗性测试。实验家系共计70个(高抗家系40个,快大家系30个),实验个体共计1 760尾(高抗个体800尾,快大个体960尾)。2个品系分2批次进行VpAHPND定量口饲感染。批次内实验个体达半数死亡后停止投喂毒饵。利用个体动物模型和父母本阈值模型评估2个品系3个性状(体重、感染VpAHPND后个体存活时间、家系半致死存活率)的遗传力;利用两性状动物模型评估3个性状两两之间的遗传相关。结果显示,高抗系体重遗传力估计值为0.599±0.120,为高遗传力水平;个体存活时间遗传力估计值为0.240±0.072,为中等遗传力水平;家系半致死存活率遗传力估计值为0.173±0.051,为低等遗传力水平。快大系体重、个体存活时间和家系半致死存活率的遗传力估计值分别为0.266±0.082、0.374±0.096、0.257±0.048,均为中等遗传力水平。经Z-score检验,2个品系各性状遗传力估计值与0差异均达到极显著水平(P<0.01)。2个品系内的体重与AHPND抗性性状(个体存活时间、家系半致死存活率)遗传相关均表现为低度正相关(0.061~0.235),且与0差异不显著(P>0.05);2个品系内的个体存活时间与家系半致死存活率遗传相关分别为0.997±0.129、0.967±0.044,为高度正相关。结果表明,在实际选育过程中,可将生长和AHPND抗性作为选育指标纳入综合选择指数进行选种制种;为简化抗性测试过程,可将家系半致死存活率作为选育群体的AHPND抗性指标。本研究为开展凡纳对虾生长和AHPND抗性优良品种的选育提供了参考。 展开更多
关键词 凡纳对虾 生长 AHPND抗性 遗传力 遗传相关
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实体器官移植受者侵袭性真菌病的临床治疗管理 被引量：3
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作者 Arnoux Robenson Jean 周佩军 《器官移植》 CSCD 北大核心 2024年第1期151-159,共9页
随着实体器官移植(SOT)的广泛开展,SOT受者术后侵袭性真菌病(IFD)的发生率呈逐年上升趋势。近年来,对于SOT受者预防性抗真菌治疗意识不断增强,随之也出现了真菌耐药问题,导致原有标准化抗真菌治疗的效果不理想。而药物相互作用、药物的... 随着实体器官移植(SOT)的广泛开展,SOT受者术后侵袭性真菌病(IFD)的发生率呈逐年上升趋势。近年来,对于SOT受者预防性抗真菌治疗意识不断增强,随之也出现了真菌耐药问题,导致原有标准化抗真菌治疗的效果不理想。而药物相互作用、药物的肝肾毒性等问题,也是临床医师需面对的挑战。本文综述了目前三唑类、棘白菌素类以及多烯类抗真菌药物与免疫抑制药之间的药物相互作用和肝肾毒性等特征,并总结了目前不同种类SOT受者术后IFD的预防策略以及感染不同病原体导致IFD的治疗策略,旨在为器官移植及相关学科的医师提供参考。 展开更多
关键词 实体器官移植 侵袭性真菌病 药物相互作用 抗真菌治疗 药物浓度监测 侵袭性假丝酵母病 侵袭性曲霉病 耶氏肺孢子菌肺炎
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南美白对虾传染性肌肉坏死病及防控技术 被引量：1
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作者 冯晓 崔玮琪 +2 位作者 苏兆军 杨双 杨勋 《江西水产科技》 2024年第1期27-28,共2页
总结了南美白对虾传染性肌肉坏死病的病原体、症状、传染源和传播途径,简介了检测方法,归纳了综合防控措施。
关键词 南美白对虾 传染性肌肉坏死病 病原体
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IHHNV对凡纳滨对虾成虾不同器官感染的研究
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作者 杨宁 王静静 +4 位作者 徐家惠 于吉悦 李婷 闫冬春 常林瑞 《海洋湖沼通报(中英文)》 CSCD 北大核心 2024年第6期55-60,共6页
传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是影响对虾养殖的主要病毒之一。普遍认为IHHNV主要感染起源于外胚层和中胚层的器官,一般不感染内胚层器官,如肝胰腺。本研究通过室内投喂攻毒的方式对凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)进行人工感染,利... 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是影响对虾养殖的主要病毒之一。普遍认为IHHNV主要感染起源于外胚层和中胚层的器官,一般不感染内胚层器官,如肝胰腺。本研究通过室内投喂攻毒的方式对凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)进行人工感染,利用PCR方法分析IHHNV对凡纳滨对虾鳃、肝胰腺、游泳足和肌肉不同器官的感染情况。攻毒10 d后结果显示,凡纳滨对虾的肝胰腺在投喂攻毒实验中更易感染IHHNV,其阳性感染率为86.7%,IHHNV病毒载量为9.8 copies/μL DNA。鳃的感染率为46.7%,IHHNV病毒载量为3.0 copies/μL DNA。肌肉和游泳足具有相似的感染性,其感染率都为13.3%,IHHNV病毒载量分别为0.8 copies/μL DNA和0.3 copies/μL DNA。该研究表明来源于内胚层器官肝胰腺也可以感染IHHNV,且与其他器官相比IHHNV感染程度较高,此结果为IHHNV感染机制的研究提供了新视点。 展开更多
关键词 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) 凡纳滨对虾 游泳足 肌肉 鳃 肝胰腺
原文传递
中国典型草原优势植物功能群氮磷化学计量学特征研究 被引量：89
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作者 张文彦 樊江文 +3 位作者 钟华平 胡中民 宋璐璐 王宁 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期503-509,共7页
氮(N)和磷(P)影响陆地生态系统的植物生长、发育和系统的结构和功能等,而植物氮磷(NP)生态化学计量特征为研究植物的养分利用状况提供了重要的手段,不同功能群植物叶片N、P元素的系统研究将为草地生态系统植被的限制元素及其对环境的适... 氮(N)和磷(P)影响陆地生态系统的植物生长、发育和系统的结构和功能等,而植物氮磷(NP)生态化学计量特征为研究植物的养分利用状况提供了重要的手段,不同功能群植物叶片N、P元素的系统研究将为草地生态系统植被的限制元素及其对环境的适应策略提供参考依据。因此,以涵盖中国北方温带草原区和青藏高原区主要草地类型的草地样带为平台,通过系统采集该样带上132个采样点的33个主要优势植物叶片,分析了中国典型草地植物叶片N和P的生态化学计量学特征。结果表明:样带上主要物种的N含量、P含量、N/P的均值分别为18.18±6.16 mg.g-1、1.25±0.64 mg.g-1和16.75±6.67。其中,N和P存在显著的正相关关系(P<0.05);C3植物和C4植物的N、P含量无明显差异;双子叶植物、非禾本科植物、豆科植物、中生型植物的N、P含量分别高于相应的单子叶植物、禾本科植物、非豆科植物、旱生型植物;C3植物、双子叶植物、禾本科植物、豆科植物、旱生植物的N/P分别高于相应的C4植物、单子叶植物、非禾本科植物、非豆科植物、中生植物。总之,高寒草地植物的N、P含量高于温性草地植物,但其N/P却低于温性草地。 展开更多
关键词 氮 磷 化学计量学 功能群 温性草原 高寒草原
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