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食源性铁过载诱导草鱼肝细胞的损伤机制
1
作者 黄晓曼 李宁静 +4 位作者 杨琰 宋佳玲 田野 林蠡 秦真东 《水产学报》 北大核心 2026年第1期192-203,共12页
【目的】探讨食源性铁过载对草鱼肝脏的损失机制,揭示其在铁代谢紊乱、氧化应激及炎症反应中的作用。【方法】选取体重为50~80 g的健康草鱼,分别在基础饲料中添加0、400和800 mg/kg的富马酸亚铁,连续投喂60 d。其间测定鱼体生长性能、... 【目的】探讨食源性铁过载对草鱼肝脏的损失机制,揭示其在铁代谢紊乱、氧化应激及炎症反应中的作用。【方法】选取体重为50~80 g的健康草鱼,分别在基础饲料中添加0、400和800 mg/kg的富马酸亚铁,连续投喂60 d。其间测定鱼体生长性能、血清和肝脏中铁含量,以及红细胞压积、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性。采用qRT-PCR检测铁代谢及抗氧化相关基因表达变化。同时开展体外实验,以柠檬酸铁铵(III)(FAC)处理L8824细胞,检测细胞内铁和ROS水平及炎症、抗氧化等相关基因表达。【结果】富马酸亚铁过量摄入显著抑制草鱼体长增长,血清和肝脏中铁含量显著升高。ELISA结果显示,红细胞压积、ALT、AST和GPX4活性明显增加。qRT-PCR结果表明,tf、dmt1、hepcidin、fpn和ncoa4基因表达量显著上调,而tfR1和ferritin表达下调。抗氧化相关基因ho-1、gpx4和nrf2也在铁添加组中显著上调。体外实验中,FAC处理导致细胞内铁和ROS水平升高,炎症相关基因如p65、tnf-α、nf-κb、tlr4等显著上调,同时氧化应激相关基因keap1a、nrf2和ho-1的表达量也显著上升。【结论】食源性铁过载可导致草鱼肝脏铁代谢紊乱、氧化应激增强并引发炎症反应。研究结果为草鱼铁代谢相关疾病及防控策略提供了理论支持。 展开更多
关键词 草鱼 铁过载 铁代谢 氧化应激 炎症反应
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鲤浮肿病防控关键技术探析 被引量：1
2
作者 杨雪冰 张歆牧 《中国水产》 2025年第4期32-33,共2页
疾病对水产养殖品种的健康、生长速度、成活率及养殖效益有直接影响。本文通过分析我国鲤浮肿病的发病概况、病因及传播途径,从水源、苗种、疾病监测、消毒、养殖对象和密度控制、投入品管控等方面提出了全面的防治措施,以期为鲤浮肿病... 疾病对水产养殖品种的健康、生长速度、成活率及养殖效益有直接影响。本文通过分析我国鲤浮肿病的发病概况、病因及传播途径,从水源、苗种、疾病监测、消毒、养殖对象和密度控制、投入品管控等方面提出了全面的防治措施,以期为鲤浮肿病的有效防控提供参考,对于提高鲤鱼养殖效益、保障水产品质量安全具有重要借鉴意义。 展开更多
关键词 健康 传播途径 生长速度 关键技术 鲤浮肿病
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一例使用复方中草药制剂治疗鲫鱼鱼苗车轮虫病
3
作者 张慈军 俞丽 +5 位作者 高永平 韩亮 杨建新 朱振秀 金会纯 金万昆 《渔业致富指南》 2025年第8期66-68,共3页
天津市换新水产良种场(以下简称换新场)金万昆研究员经多年的探索和实践,研制出了复方中草药制剂治疗鱼类车轮虫病,收到较好的疗效,同时也减少了鱼体和养殖水体的化学残留,维护了养殖环境,现将其防治过程简述如下,以供养殖者参考。1培... 天津市换新水产良种场(以下简称换新场)金万昆研究员经多年的探索和实践,研制出了复方中草药制剂治疗鱼类车轮虫病,收到较好的疗效,同时也减少了鱼体和养殖水体的化学残留,维护了养殖环境,现将其防治过程简述如下,以供养殖者参考。1培育池基本情况1.1池塘情况培育鲫鱼水花的池塘,东西长、南北宽,面积3.73亩,池深2m,淤泥厚度10~15cm。 展开更多
关键词 车轮虫病 复方中草药制剂 鲫鱼鱼苗
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硫酸铜对河川沙塘鳢急性毒性和相关酶活性的影响
4
作者 郑友 刘国兴 +2 位作者 霍春林 毕可然 赵宁好 《水产养殖》 2025年第2期16-20,36,共6页
开展了硫酸铜(CuSO_(4))对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)急性毒性和相关酶活性的影响试验。采取静水生物测试法,以CuSO_(4)最低致死浓度范围的最大值为起点,按倍比稀释法设定0.3、0.5、0.7、0.9 mg/L 4个浓度梯度,测定硫酸铜对... 开展了硫酸铜(CuSO_(4))对河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)急性毒性和相关酶活性的影响试验。采取静水生物测试法,以CuSO_(4)最低致死浓度范围的最大值为起点,按倍比稀释法设定0.3、0.5、0.7、0.9 mg/L 4个浓度梯度,测定硫酸铜对河川沙塘鳢24 h、48 h、72 h、96 h的半致死浓度(LC50)和安全浓度(SC),以及鳃和肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性。结果表明,24 h、48 h、72 h、96 h的LC_(50)分别为0.899、0.808、0.681、0.592 mg/L,96 h的SC为0.0592 mg/L。随着时间的增加和硫酸铜浓度的升高,鱼体内GSH-PX、CAT、SOD活性总体呈下降趋势。指出,河川沙塘鳢在不同浓度硫酸铜环境中的适应性和体内SOD、CAT、GSH-PX活性的变化,反映了河川沙塘鳢机体受到铜离子(Cu^(2+))的不同胁迫程度。 展开更多
关键词 河川沙塘鳢 急性毒性 硫酸铜 谷胱甘肽过氧化物酶 过氧化氢酶 总超氧化物歧化酶 半致死浓度 安全浓度
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鲤源豚鼠气单胞菌的分离鉴定与药敏特性研究
5
作者 张超 吕军 《河南农业科学》 北大核心 2025年第1期153-159,共7页
为明确重庆市万州区某养殖场鲤苗种死亡的病因,为该病的防治提供参考,通过细菌分离纯化、生理生化试验、16S rDNA和cpn60基因检测、系统进化分析、动物回归感染试验对病原进行鉴定,并采用纸片扩散法检测分离株的药敏特性。结果显示,从... 为明确重庆市万州区某养殖场鲤苗种死亡的病因,为该病的防治提供参考,通过细菌分离纯化、生理生化试验、16S rDNA和cpn60基因检测、系统进化分析、动物回归感染试验对病原进行鉴定,并采用纸片扩散法检测分离株的药敏特性。结果显示,从患病鲤苗种的肝脏、肾脏和脾脏中分离获得1株优势菌(WZ2302),革兰氏染色阴性,菌体两端钝圆,整体呈杆状;菌落表面光滑、颜色为浅黄色半透明;有运动性,氧化酶、精氨酸双水解酶、过氧化氢酶、吲哚试验呈阳性,能发酵葡萄糖(产酸不产气)、蔗糖、七叶苷、阿拉伯糖、甘露醇、水杨苷;16S rDNA和cpn60基因序列与豚鼠气单胞菌同源性最高,分别为99%和98%;回归试验攻毒组与临床病例表现相似。药敏试验结果显示,该菌对恩诺沙星、氟苯尼考、氧氟沙星等13种药物敏感;对环丙沙星、链霉素和麦迪霉素敏感性较差,对青霉素、头孢噻吩、氨苄西林和头孢哌酮存在耐药性。综上,引起重庆市万州区某养殖场鲤鱼苗种死亡的病原菌是豚鼠气单胞菌,可选用恩诺沙星或氟苯尼考进行防治。 展开更多
关键词 鲤 豚鼠气单胞菌 16S rDNA 分离鉴定 药敏试验
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一龄草鱼主要病害防治措施(下)
6
作者 袁圣 《农家致富》 2025年第7期36-37,共2页
3.赤皮病(1)主要症状。赤皮病是由革兰氏阴性菌感染,从鱼种到成鱼都能发生的常见病。发病初期,鱼体腹部两侧充血发红,严重时病鱼皮肤出血、发炎,体表部分鳞片松动、脱落。有时部分鱼鳍条末端腐烂,形成柱鳍症状。赤皮病通常发生在鱼体受... 3.赤皮病(1)主要症状。赤皮病是由革兰氏阴性菌感染,从鱼种到成鱼都能发生的常见病。发病初期,鱼体腹部两侧充血发红,严重时病鱼皮肤出血、发炎,体表部分鳞片松动、脱落。有时部分鱼鳍条末端腐烂,形成柱鳍症状。赤皮病通常发生在鱼体受伤且没有及时消毒处理、水质不良时。(2)防治措施。在流行期以调水、改底为主,稳定水质,减少应激反应。 展开更多
关键词 鱼种 赤皮病 充血发红 发炎 鳞片松动 皮肤出血
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一龄草鱼主要病害防治措施(上)
7
作者 袁圣 《农家致富》 2025年第6期36-37,共2页
4~6月是草鱼病害的高发期,养殖户要加强观察,及时防控,以提升养殖效益。一、气泡病及高pH值的防治,这个阶段水温较高,水中的营养物质逐渐积累后藻类生长旺盛,一龄草鱼苗可能会出现气泡病及高pH值问题。
关键词 观察 病害防治 养殖效益 高PH值 气泡病
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大蒜E素对副溶血弧菌的抑菌活性及机制 被引量：2
8
作者 蔡雪 黄雷 +6 位作者 郑阿钦 褚宽 林华利 杨艳杰 原居林 宋大伟 姚嘉赟 《水生生物学报》 北大核心 2025年第2期106-115,共10页
为探究大蒜E素(ALE)对副溶血弧菌的抑菌活性及作用机制,通过测定最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和抑菌动态生长曲线,评价ALE对副溶血弧菌的抑菌作用;基于电镜观察及胞外β-D-半乳糖苷酶、蛋白质含量测定,分析ALE对副溶血弧菌细... 为探究大蒜E素(ALE)对副溶血弧菌的抑菌活性及作用机制,通过测定最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和抑菌动态生长曲线,评价ALE对副溶血弧菌的抑菌作用;基于电镜观察及胞外β-D-半乳糖苷酶、蛋白质含量测定,分析ALE对副溶血弧菌细胞结构的影响;采用结晶紫染色法检测ALE对副溶血弧菌生物被膜形成的影响;利用RNA-Seq技术分析ALE对副溶血弧菌转录水平表达的影响。结果显示,ALE对副溶血弧菌的MIC为7.8μg/mL,MBC为31.2μg/mL。与对照组相比,MIC浓度ALE组副溶血弧菌胞外β-D-半乳糖苷酶活性和蛋白质含量显著增加(P<0.05),细胞壁膜消融、内容物流失,生物被膜形成量显著减少(P<0.05)。转录组分析结果显示,与对照组相比,1/4MIC浓度的ALE组副溶血弧菌中显著下调基因145个,主要富集在MAPK信号转导、鞭毛组装、生物膜形成等通路;ALE组副溶血弧菌中显著上调基因133个,主要富集在氨基酸代谢、降解等通路;RNA-Seq结果与RT-qPCR验证试验结果一致。研究表明,ALE对副溶血弧菌抑菌作用强,可能通过破坏细菌菌体结构,抑制其生物被膜形成,以及调控鞭毛、生物膜等基因表达,从而发挥抑菌、减毒作用。研究结果为探明ALE抑制副溶血弧菌的作用及机理奠定良好基础。 展开更多
关键词 弧菌 大蒜素 抗菌药物 抑菌机制 转录组
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一例鲤疱疹病毒病诊治与预防措施 被引量：1
9
作者 张瑞雪 刘光伟 +3 位作者 刘平 李壮 杨质楠 刘洪健 《科学养鱼》 2025年第2期62-62,共1页
鲤疱疹病毒病的发生严重影响鲤鱼养殖产业发展,笔者经过几年对鲤疱疹病毒研究,获取了些许经验,现就鲤疱疹病毒病的诊治与预防措施介绍如下,供大家参考。一、鲤鱼养殖基本情况江苏连云港市赣榆区某养殖场,鱼塘面积30亩,水深1.6米,主养鲤... 鲤疱疹病毒病的发生严重影响鲤鱼养殖产业发展,笔者经过几年对鲤疱疹病毒研究,获取了些许经验,现就鲤疱疹病毒病的诊治与预防措施介绍如下,供大家参考。一、鲤鱼养殖基本情况江苏连云港市赣榆区某养殖场,鱼塘面积30亩,水深1.6米,主养鲤鱼搭配南美白对虾,亩放鲤鱼600尾、南美白对虾每亩3万尾。二、鲤鱼疾病诊断1.疾病原因发病外因:根据调查发现该池塘淤泥积累过多,清塘时,清淤不够彻底,淤泥中残留的病毒、细菌在20度水温加速繁殖,环境恶劣导致鲤鱼患病。发病内因:购入的鱼苗自身可能携带病毒,养殖期间病毒传播,导致鲤鱼患病。 展开更多
关键词 南美白对虾 池塘淤泥 养殖期间 疱疹病毒 鲤鱼养殖 疾病诊断 赣榆区 疾病原因
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大西洋鲑传染性胰腺坏死病病毒VP2蛋白和VP3蛋白重组腺病毒载体的构建及其表达 被引量：1
10
作者 李守湖 秦闯 +1 位作者 李新苍 石建高 《水产科技情报》 2025年第1期26-32,共7页
传染性胰腺坏死病(infectious pancreatic necrosis,IPN)是由传染性胰腺坏死病病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)引起的一种主要危害鲑科鱼类的传染病。为克隆传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)VP2基因和VP3基因,并构建其重组... 传染性胰腺坏死病(infectious pancreatic necrosis,IPN)是由传染性胰腺坏死病病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)引起的一种主要危害鲑科鱼类的传染病。为克隆传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)VP2基因和VP3基因,并构建其重组腺病毒载体,利用PCR方法分别扩增出IPNV VP2基因和VP3基因,通过多基因片段同源重组技术将IPNV VP2基因和VP3基因克隆到pAd-Track-CMV载体,经过线性化后与pAd-easy-1载体在BJ5183菌体内进行同源重组,构建出重组腺病毒质粒;通过PCR及NotⅠ和HindⅢ双酶切鉴定,再经PacⅠ线性化后用于转染293T细胞,获得重组腺病毒;通过绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达监控重组腺病毒的复制情况,用Western-blotting法分别检测IPNV VP2蛋白和VP3蛋白的表达,并测定重组病毒滴度。结果显示,分别克隆出IPNV VP2和VP3基因,基因总长度为2211 bp,构建出目的基因重组腺病毒载体,该病毒在293T细胞中分别表达出蛋白分子质量约为54 kD和26 kD的产物,滴度为1.0×10^(9)个/mL TCID_(50)。结果表明,已成功获得IPNV VP2基因和VP3基因重组腺病毒,该病毒在293T细胞中滴度较高,能够稳定表达。传染性胰腺坏死病病毒VP2蛋白和VP3蛋白重组腺病毒载体的成功构建可为大西洋鲑传染性胰腺坏死病活载体疫苗的研制提供参考。 展开更多
关键词 大西洋鲑 传染性胰腺坏死病 VP2基因 VP3基因 腺病毒载体
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无乳链球菌抑菌中草药的筛选及其穿透尼罗罗非鱼体血脑屏障能力的研究
11
作者 郑梦婕 李梓昕 +6 位作者 陈杨慧 蔡佳 黄瑜 汤菊芬 牟希东 杨叶欣 王蓓 《大连海洋大学学报》 北大核心 2025年第3期372-381,共10页
为研究巴西苏木素(Brazilin)穿透血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的能力,探究巴西苏木素治疗罗非鱼脑部疾病的可行性,筛选抑菌效果良好的中草药苏木,建立了测定尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)血脑屏障体外模型中巴西苏木素的UPLC... 为研究巴西苏木素(Brazilin)穿透血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的能力,探究巴西苏木素治疗罗非鱼脑部疾病的可行性,筛选抑菌效果良好的中草药苏木,建立了测定尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)血脑屏障体外模型中巴西苏木素的UPLC-MS/MS分析方法。研究表明:试验中使用的36味中草药中,苏木水提物对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的体外抑菌效果最好,选择其有效成分巴西苏木素进行后续试验;CCK8试验结果显示,在试验浓度范围内,巴西苏木素对构成血脑屏障的罗非鱼脑内皮细胞(TVEC-01)和罗非鱼星形胶质细胞(TA-02)生长无明显抑制作用;浓度为20、40、80μmol/L的巴西苏木素均能下调紧密连接蛋白JAM-B、ZO-1、Claudin-5的表达水平(P<0.05);给药30 min后即可在血脑屏障模型下池样品中检测到巴西苏木素,且穿透浓度随给药浓度的增加而增加。结果表明,巴西苏木素能透过血脑屏障发挥抑菌作用,可为筛选治疗罗非鱼脑部疾病的药物提供科学参考。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 血脑屏障 无乳链球菌 巴西苏木素 LC-MS
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大黄鱼虹彩病毒ORF 121R蛋白的表达及亚细胞定位
12
作者 吴彩霞 刘晓东 +6 位作者 池洪树 谢岸桦 陈秀霞 许斌福 郑在予 潘滢 龚晖 《福建农业学报》 北大核心 2025年第6期577-584,共8页
【目的】解析大黄鱼虹彩病毒(large yellow croaker iridovirus,LYCIV)开放阅读框(Open reading frame,ORF)121R蛋白的免疫原性与亚细胞定位,探究其在病毒致病机制中的潜在作用。【方法】以LYCIV ORF121R蛋白为研究对象,通过生物信息学... 【目的】解析大黄鱼虹彩病毒(large yellow croaker iridovirus,LYCIV)开放阅读框(Open reading frame,ORF)121R蛋白的免疫原性与亚细胞定位,探究其在病毒致病机制中的潜在作用。【方法】以LYCIV ORF121R蛋白为研究对象,通过生物信息学分析手段,进行同源蛋白之间的序列对比,并预测其亚细胞定位;将目的基因通过同源重组方法分别克隆至pET32a及pEGFP-N1载体中,构建重组质粒ORF 121R-His和ORF 121R-EGFP;诱导表达并纯化ORF121R-His重组蛋白,将其免疫小鼠制备多克隆抗体,并通过ELISA、Western-blotting和细胞间接免疫荧光等手段评估抗体效价及特异性;以ORF 121R-EGFP质粒转染EPC细胞后,利用激光共聚焦显微镜观察ORF121R-EGFP的亚细胞定位。【结果】LYCIV ORF 121R蛋白与传染性脾肾坏死病毒(Infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)中具有高免疫原性的ORF 117R蛋白氨基酸序列一致性为79.96%,且预测定位于细胞质。orf121R全长1377 bp,将其分别克隆至pET32a及pEGFP-N1载体中,成功构建重组质粒ORF 121R-His和ORF 121REGFP。经亲和纯化获得可溶性ORF 121R-His重组蛋白,其分子量为72.6 kDa,用该重组蛋白制备的多克隆抗体效价为1∶128000,可特异性识别天然病毒蛋白;ORF 121R-EGFP在鲤上皮瘤(Epithelioma papulosum cyprini,EPC)细胞中呈现胞质特异性分布,荧光信号均匀富集于核周区域。【结论】LYCIV ORF 121R主要定位于细胞质中,该蛋白良好的免疫原性与特异性,使其成为潜在的疫苗候选抗原和诊断靶标,为开发针对LYCIV的特异性防控策略提供了新的可能性。 展开更多
关键词 大黄鱼虹彩病毒 ORF 121R蛋白 蛋白表达 亚细胞定位
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一株鲫鱼源致病性希瓦氏菌(Shewanella sp.)XWfb1生长特性、全基因组测序及比较基因组分析
13
作者 孙立 姜虎成 +2 位作者 薛晖 孙梦玲 赵彦华 《微生物学通报》 北大核心 2025年第9期4241-4259,共19页
【背景】希瓦氏菌(Shewanella sp.)是广泛分布于水产环境中的革兰氏阴性条件致病菌,可感染鲫鱼(Carassius auratus)等经济鱼类,引发体表溃烂、败血症等疾病。【目的】研究希瓦氏菌XWfb1的生长特性,解析菌株XWfb1的全基因组信息,基于基... 【背景】希瓦氏菌(Shewanella sp.)是广泛分布于水产环境中的革兰氏阴性条件致病菌,可感染鲫鱼(Carassius auratus)等经济鱼类,引发体表溃烂、败血症等疾病。【目的】研究希瓦氏菌XWfb1的生长特性,解析菌株XWfb1的全基因组信息,基于基因组数据解析其进化地位,挖掘其毒力与耐药基因分布特征,为阐明致病机制及耐药风险防控提供理论依据。【方法】观察对比希瓦氏菌XWfb1的生长曲线和环境胁迫下的生长特性。结合Illumina和PacBio平台对菌株XWfb1进行全基因组测序,利用混合组装策略完成基因组拼接,进行基因预测、功能注释并采用PCR验证关键基因表达;通过系统发育树和比较基因组学分析其进化关系。【结果】希瓦氏菌XWfb1对短期热激耐受能力良好,可以适应中高盐度环境[3%NaCl],基因组总长度为5036139 bp,G+C含量45.31%,包含4282个编码基因和138个非编码基因。功能注释显示各数据库分别注释基因4282(NR)、1476(GO)、3544(COG)、2508(KEGG)和2660个(SWISS)。系统发育分析表明,菌株XWfb1与虹鳟希瓦氏菌(Shewanella oncorhynchi)Z-P2亲缘关系最近[平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI)值97.39%,数字DNA-DNA杂交(digital DNA-DNA hybridization,dDDH)值87.50%],基因组共线性分析显示其与近缘种存在局部重排现象。PCR验证确认关键毒力基因lon、luxS、dksA、hem和fur均呈现高表达特征,并检出耐药基因mcr-4和Sul1。【结论】通过全基因组测序结果和比较基因组学分析,菌株XWfb1可能属于S.oncorhynchi,目前此菌种在GenBank仅有4株基因组数据,本研究丰富了水产微生物资源库,并揭示了其以运动性和免疫调控为主的毒力特征及多重耐药风险,为水产致病菌的分子机制研究及精准防控提供了重要遗传学基础。 展开更多
关键词 鲫鱼 全基因组测序 希瓦氏菌 基因注释 比较基因组
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SCC-3737℃驯化的稳定性及其在常见病毒培养中的应用
14
作者 巩金鹏 赵颖 +7 位作者 陈雪兰 蔺凌云 姚嘉赟 穆雪姣 周可欣 王丛旭 沈锦玉 潘晓艺 《水产学报》 北大核心 2025年第3期233-242,共10页
【目的】建立能快速增殖且对鳜源常见病毒敏感的鳜鱼细胞系。【方法】利用已建立的鳜脊髓组织细胞系SCC,采用梯度血清逐步驯化的方式,建立一个连续细胞系SCC-37,分析该连续细胞系的来源、支原体污染、生长特性和冻存后细胞活力,评估其... 【目的】建立能快速增殖且对鳜源常见病毒敏感的鳜鱼细胞系。【方法】利用已建立的鳜脊髓组织细胞系SCC,采用梯度血清逐步驯化的方式,建立一个连续细胞系SCC-37,分析该连续细胞系的来源、支原体污染、生长特性和冻存后细胞活力,评估其对传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)、鳜虹彩病毒(SCRaV)和鳜弹状病毒(SCRV)的敏感性。【结果】该细胞系SCC-37已连续培养30代,稳定的生长条件为L-15+10%NBCS、37℃培养;通过鳜28S rRNA基因分析其来源于鳜,支原体检测证实SCC-37无支原体污染;病毒敏感性结果显示,ISKNV、SCRaV和SCRV可在SCC-37中稳定增殖和传代,培养的病毒滴度为103.4~109.6TCID50/mL,电镜观察可见大量病毒颗粒。【结论】新驯化的SCC-37为分离、鉴定和增殖病毒以及疫苗制备提供了重要工具。 展开更多
关键词 鳜 鳜脊髓组织细胞系 37℃驯化 生长特性 敏感性
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鰤鱼诺卡氏菌弱毒株对大口黑鲈头肾转录组的影响
15
作者 黄梁军 黄雷 +6 位作者 杨娜 蔺凌云 姚嘉赟 陈静 沈锦玉 高迎莉 潘晓艺 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第4期43-50,共8页
【目的】探究鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)弱毒株(LY20810 F110)免疫后大口黑鲈(Micropterus salmoides)头肾转录组的动态响应机制,为阐明该疫苗的免疫保护机制提供理论依据。【方法】将大口黑鲈分为免疫组(腹腔注射1×108 CFU... 【目的】探究鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)弱毒株(LY20810 F110)免疫后大口黑鲈(Micropterus salmoides)头肾转录组的动态响应机制,为阐明该疫苗的免疫保护机制提供理论依据。【方法】将大口黑鲈分为免疫组(腹腔注射1×108 CFU/mL鰤鱼诺卡氏菌弱毒株)和对照组(注射生理盐水)。免疫7 d和28 d采集头肾组织进行RNA-seq测序,利用DESeq2筛选差异表达基因(DEGs),并对DEGs进行KEGG通路富集分析。免疫28 d后以强毒株攻毒,评估组织病理损伤并计算相对免疫保护率(RPS)。【结果】鰤鱼诺卡氏菌弱毒株免疫组的RPS达75%,攻毒后脏器无肉芽肿病变等组织损伤。转录组分析显示,免疫7 d和28 d分别鉴定出7 606和3 225个DEGs。KEGG富集表明免疫组显著上调先天免疫(FcεRI信号、补体C3)与适应性免疫(B细胞受体信号、NF-κB)相关通路,并激活IGH、CD22、PIGR等免疫相关基因的表达;同时下调促炎通路(IL-17信号、坏死性凋亡)。【结论】鰤鱼诺卡氏菌弱毒株LY20810 F110对大口黑鲈具有显著的免疫保护效果,其机制可能是通过激活先天免疫和适应性免疫相关通路以清除病原体,同时抑制过度的炎症反应,从而发挥免疫保护作用。 展开更多
关键词 鰤鱼诺卡氏菌 减毒疫苗 大口黑鲈 免疫保护 转录组
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基于RPA-CRISPR/Cas12a的神经坏死病毒快速检测方法建立
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作者 闫光达 马红玲 +3 位作者 徐力文 邓益琴 郭志勋 冯娟 《南方水产科学》 北大核心 2025年第4期11-21,共11页
赤点石斑鱼神经坏死病毒(Red spotted grouper nervous necrosis virus,RGNNV)是危害中国海水养殖鱼类的主要病原体之一,尽早检出RGNNV是防控该病毒感染和减少养殖损失的关键措施。为建立快速检测RGNNV的方法,将重组酶聚合酶扩增(Recomb... 赤点石斑鱼神经坏死病毒(Red spotted grouper nervous necrosis virus,RGNNV)是危害中国海水养殖鱼类的主要病原体之一,尽早检出RGNNV是防控该病毒感染和减少养殖损失的关键措施。为建立快速检测RGNNV的方法,将重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification,RPA)技术与CRISPR/Cas12a(CRISPR,成簇规律间隔短回文重复序列;Cas12a,CRISPR相关蛋白)检测系统相结合,通过设计和筛选RPA引物与crRNA(CRISPR RNA),优化RPA反应条件与CRISPR/Cas12a检测体系,评估该方法的灵敏度与特异性。同时,对临床石斑鱼样本进行检测,并与行业标准《SC/T 7216—2022鱼类病毒性神经坏死病诊断方法》中规定的qPCR法进行一致性比较。结果显示,该检测方法最短可在45 min内得到结果,灵敏度为1.5×10^(1)拷贝·μL^(−1),检测特异性良好,实际样本检测与行标qPCR法对比符合率为100%。研究建立的RPA-CRISPR/Cas12a-RGNNV检测方法具有快速、便捷、高灵敏度、强特异性和可视化检测结果等特点,为RGNNV的现场快速检测提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 神经坏死病毒 CRISPR/Cas12a 重组酶聚合酶扩增 快速检测
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虾源干酪乳杆菌对罗氏沼虾生长、免疫与抗病力影响的研究
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作者 黄雷 王子位 +6 位作者 袁雪梅 郑阿钦 陈静 彭先启 钱涛 原居林 姚嘉赟 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第4期402-411,共10页
干酪乳杆菌是广泛应用于水产养殖中的益生菌,但其对罗氏沼虾的作用尚不明确。本实验从罗氏沼虾肠道中分离到一株乳酸菌GCGR-16株,对分离株进行形态学观察、生化特性鉴定、16S rRNA基因的PCR扩增及序列分析,以鉴定该菌株的种属。采用牛... 干酪乳杆菌是广泛应用于水产养殖中的益生菌,但其对罗氏沼虾的作用尚不明确。本实验从罗氏沼虾肠道中分离到一株乳酸菌GCGR-16株,对分离株进行形态学观察、生化特性鉴定、16S rRNA基因的PCR扩增及序列分析,以鉴定该菌株的种属。采用牛津杯法和时间-杀菌曲线试验(Time-kill assay,TKA)测定分离菌对副溶血弧菌的抑制作用。结果显示,GCGR-16株为革兰氏阳性菌,与干酪乳杆菌的生化特征一致,且与干酪乳杆菌ATCC393株16S rRNA基因序列的同源性达100%。牛津杯法结果显示,分离菌培养液过滤组(上清液)、培养液组(pH4.0)、中性菌液组(pH7.0)的抑菌圈直径分别为15 mm、13 mm和11 mm;TKA结果显示,GCGR-16株培养液滤液组中副溶血弧菌的OD600nm值始终低于PBS对照组,表明该菌滤液含副溶血弧菌的抑菌活性成分。为探究干酪乳杆菌GCGR-16株对罗氏沼虾生长、免疫反应及抗病力的影响,在罗氏沼虾日粮中分别添加2 kg/t和4 kg/t的分离菌冻干粉,于实验第84 d测定各组罗氏沼虾的生长参数,于实验前及实验后第7 d、14 d、28 d、42 d、56 d、84 d,通过体外吞噬活性试验测定各组虾不同时间点的血清对金黄色葡萄球菌的吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI),并采用试剂盒测定各组虾肝胰腺及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)、碱性磷酸酶(AKP)的含量。于分离菌饲喂实验结束后,采用1.5×10^(6)cfu/mL副溶血弧菌对各组虾攻毒。结果显示,4 kg/t和2 kg/t干酪乳杆菌添加组罗氏沼虾的体质量和亩产量均显著高于对照组(P<0.05),其中4 kg/t组罗氏沼虾的生长性能最佳,其体质量与亩产量分别较对照组提高25.4%和20.2%;4 kg/t组和2 kg/t组罗氏沼虾血清在各时间点的PP、PI,肝胰腺及血清中SOD、CAT、LZM、AKP的含量均显著高于对照组(P<0.05)。攻毒后7 d各组虾均不同程度死亡,死亡虾均出现肝胰腺发白、糜烂萎缩等剖检症状,存活虾活动能力明显减弱,未攻毒组虾均健活。4 kg/t组与2 kg/t组罗氏沼虾的存活率均显著高于对照组(P<0.05),两个剂量干酪乳杆菌对罗氏沼虾的保护率分别为33.3%与25.9%。综上所述,本研究首次证实罗氏沼虾体内分离的干酪乳杆菌GCGR-16株可有效提高罗氏沼虾的生长、免疫及抗病性能,为虾源益生菌的开发提供科学依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 干酪乳杆菌 细菌鉴定 免疫作用 抗病力
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珍珠龙胆石斑鱼源美人鱼发光杆菌的分离鉴定与致病性分析
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作者 钟小飘 陈政思 +5 位作者 李一 陈华谱 黄瑜 王蓓 简纪常 蔡佳 《广东农业科学》 2025年第4期88-97,共10页
【目的】分离鉴定1株来自患病珍珠龙胆石斑鱼的病原菌,并对该菌的类型、生理生化特性、药敏特性和致病性开展研究,为其病害防控提供理论基础。【方法】在湛江市某养殖场发现患病石斑鱼,无菌条件下从脾脏中分离得到1株优势菌(OR539201),... 【目的】分离鉴定1株来自患病珍珠龙胆石斑鱼的病原菌,并对该菌的类型、生理生化特性、药敏特性和致病性开展研究,为其病害防控提供理论基础。【方法】在湛江市某养殖场发现患病石斑鱼,无菌条件下从脾脏中分离得到1株优势菌(OR539201),对该菌株开展形态学观察、16S rRNA基因序列分析及生理生化特性鉴定,进一步开展药敏试验、回归感染试验,并检测其毒力基因。【结果】根据分离菌株的形态学观察、16S rRNA序列分析和生理生化鉴定结果,确定菌株OR539201为美人鱼发光杆菌美人鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.damselae)。该菌株在LB平板上呈圆形菌落,形态饱满,光滑均匀。系统发育树结果表明,菌株OR539201与美人鱼发光杆菌聚为一支,亲缘关系最近,同为弧菌属。生化鉴定结果显示,氧化酶活性、尿素、赖氨酸等反应呈阳性,水杨苷、甘露醇等反应呈阴性。药敏试验结果表明,该菌株对多粘菌素、丁胺卡那、头孢曲松等6种抗生素中等敏感,对氧氟沙星、环丙沙星、头孢氨苄等13种抗生素敏感。回归感染试验结果表明,该菌株对石斑鱼具有致病性,人工感染后出现体表溃疡、红色增生结节、肝脏肿大、肠道糜烂、脑部红肿等与自然感染相同的症状。载菌量测定结果显示,试验组石斑鱼脾脏及肝脏菌量明显高于对照组。毒力基因检测结果显示,该致病菌具有磷脂酶活性相关基因(plpV)。【结论】成功从患病石斑鱼中分离得到1株潜在致病菌,鉴定为美人鱼发光杆菌美人鱼亚种,该菌株具有明显致病性,可诱发明显病变、引起鱼类死亡。 展开更多
关键词 石斑鱼 美人鱼发光杆菌 生化特性 药敏试验 回归感染 致病性 载菌量 毒力基因
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低盐度下金钱鱼对嗜水气单胞菌感染的生理生化及免疫响应
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作者 冷卓颖 蔡博生 +4 位作者 吴天利 黄洋 庞欢瑛 李广丽 邓思平 《海南热带海洋学院学报》 2025年第2期20-31,共12页
为研究金钱鱼(Scatophagus argus)在低盐度养殖条件下对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染的响应情况,本研究随机选择体质量为(200±50)g、体长为(13.5±0.5)cm的金钱鱼,在盐度为5‰的养殖条件下进行嗜水气单胞菌腹腔注... 为研究金钱鱼(Scatophagus argus)在低盐度养殖条件下对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染的响应情况,本研究随机选择体质量为(200±50)g、体长为(13.5±0.5)cm的金钱鱼,在盐度为5‰的养殖条件下进行嗜水气单胞菌腹腔注射感染,并在感染后0、3、6 h检测血清生理生化和免疫指标;同时使用实时荧光定量PCR检测头肾和脾脏中与免疫相关基因的表达情况。结果显示:在注射嗜水气单胞菌3、6 h后,处理组金钱鱼血清中的补体C3、补体C4、免疫球蛋白IgM含量和溶菌酶LZM活性相比对照组显著增加(P<0.05),血糖GLU含量显著降低(P<0.05)。但处理组超氧化物歧化酶SOD活性仅在6 h显著增加(P<0.05),谷草转氨酶AST活性仅在3 h显著降低(P<0.05),碱性磷酸酶AKP活性仅在6 h显著降低(P<0.05)。此外,处理组血清中的谷丙转氨酶ALT、酸性磷酸酶ACP、过氧化物酶POD活性和甘油三酯TG、总胆固醇TC、总蛋白TP含量相比对照组无显著差异。注射嗜水气单胞菌3、6 h后,处理组金钱鱼头肾和脾脏组织中的il-1β、il-10、tnf-α、socs1基因的相对表达量比对照组显著增加(P<0.05)。 展开更多
关键词 金钱鱼 嗜水气单胞菌 血清指标 免疫响应
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裂殖壶藻粉营养强化对雄性斑马鱼生殖能力的影响 被引量：1
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作者 王琛鑫 吴艺文 +8 位作者 侯江霞 姜金辉 汪兰 石柳 郭晓嘉 熊光权 钱凯 陈胜 周志 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第4期33-42,共10页
【目的】研究裂殖壶藻(Schizochytrium)粉营养强化对雄性斑马鱼(Danio rerio)生殖性能的影响,为调控性成熟鱼类生殖能力提供有效方案。【方法】选取裂殖壶藻粉作为水产营养强化剂,制备裂殖壶藻粉添加质量分数为0、40、80、120 g/kg的水... 【目的】研究裂殖壶藻(Schizochytrium)粉营养强化对雄性斑马鱼(Danio rerio)生殖性能的影响,为调控性成熟鱼类生殖能力提供有效方案。【方法】选取裂殖壶藻粉作为水产营养强化剂,制备裂殖壶藻粉添加质量分数为0、40、80、120 g/kg的水产饲料,强化饲喂性成熟雄性斑马鱼30 d,通过测定鱼类体质量、体长、器官指数、性激素等指标,并分析生殖基因调控轴的基因相对表达水平,探究裂殖壶藻粉营养强化对雄鱼生殖能力的影响。【结果】斑马鱼表型研究发现,裂殖壶藻粉强化各组雄鱼体长较对照组均显著增加(P<0.05),其中80 g/kg组雄鱼体长增幅最大(6.48%);与对照组比,80、120 g/kg组雄鱼肝脏体质指数有显著提升,其中80 g/kg组增幅为13.94%(P<0.05);80 g/kg组性腺体质指数较其他各组显著提升(P<0.05),性腺发育能力得到提升。性腺组织切片统计分析发现,80 g/kg组雄鱼精子细胞占比(67.37±3.11)%显著高于对照组(59.59±4.42)%(P<0.05),性腺成熟程度增高。性激素水平研究发现,裂殖壶藻粉强化各组雄鱼血清中睾酮水平均显著提升(P<0.05),40、80 g/kg组性腺中雌二醇水平显著升高(P<0.05),性激素水平得到优化。基因研究表明,裂殖壶藻粉营养强化能够上调雄鱼脑部gnrh3、lhβ相对表达量,驱动其促性腺激素分泌,提高其性腺雄激素受体(ar)及类固醇合成酶(17β-hsd)相对表达水平,增强其肝脏vtg1、vtg2相对表达量,最终提升雄鱼生殖能力。【结论】裂殖壶藻粉营养强化后对雄性斑马鱼繁殖能力具有提升作用,添加质量分数为80 g/kg时最佳。 展开更多
关键词 斑马鱼 裂殖壶藻 生殖 基因 下丘脑-垂体-性腺-肝脏轴 营养强化 水产养殖
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