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罗非鱼源无乳链球菌缺失株ΔcrRNA与ΔcpsE的毒力与免疫效力
1
作者 聂蒙 董雨豪 +3 位作者 孙亚茹 徐婷 林世钰 刘永杰 《水产学报》 北大核心 2026年第3期197-206,共10页
【目的】比较无乳链球菌crRNA缺失株(ΔcrRNA)与荚膜形成相关基因cpsE缺失株(ΔcpsE)的毒力和免疫效力,为研发有效的罗非鱼无乳链球菌病弱毒苗提供候选菌株。【方法】基于NCBI数据库中公开的49株罗非鱼源无乳链球菌全基因组序列分析菌... 【目的】比较无乳链球菌crRNA缺失株(ΔcrRNA)与荚膜形成相关基因cpsE缺失株(ΔcpsE)的毒力和免疫效力,为研发有效的罗非鱼无乳链球菌病弱毒苗提供候选菌株。【方法】基于NCBI数据库中公开的49株罗非鱼源无乳链球菌全基因组序列分析菌株流行特征,并针对前期构建的2株弱毒株ΔcrRNA和ΔcpsE进行毒力和免疫效力比较。【结果】中国地区罗非鱼源无乳链球菌的优势流行血清型为Ia,序列型为ST7。相比野生株GD201008-001,ΔcrRNA与ΔcpsE株对罗非鱼的毒力显著下降,其半数致死量(LD_(50))均大于10^(8)CFU/尾,且高剂量感染罗非鱼未引起脑组织和脾脏组织的明显病理变化;免疫保护效力分析表明,无论是注射免疫还是浸泡免疫,缺失株ΔcrRNA均表现出比缺失株ΔcpsE更高的相对保护率,且诱导的免疫相关基因如MHCⅡβ、CD4-1、IFN-γ和IgM等表达呈现更为显著的上调。【结论】通过比较ΔcrRNA和ΔcpsE弱毒株的免疫保护效力,确定ΔcrRNA是更具潜力的弱毒活疫苗候选株,为罗非鱼链球菌病的疫苗研发提供了参考。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 无乳链球菌 弱毒活疫苗 荚膜多糖 crRNA 免疫效力
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大菱鲆杀鲑气单胞菌灭活疫苗的研制 被引量：1
2
作者 盛冬 任旭 +6 位作者 李菲 黄璐熹 刘喻晓 于庆华 周维佳 叶仕根 郭志新 《水产科学》 北大核心 2025年第3期457-464,共8页
为预防大菱鲆疖疮病,用体积分数0.05%、0.10%、0.20%、0.30%和0.40%的甲醛灭活病原菌杀鲑气单胞菌,检测其安全性,制备灭活疫苗。随后将体质量(95.5±9.7)g的健康大菱鲆分为4组,每组30尾,分别腹腔注射此灭活疫苗(疫苗组)、等体积生... 为预防大菱鲆疖疮病,用体积分数0.05%、0.10%、0.20%、0.30%和0.40%的甲醛灭活病原菌杀鲑气单胞菌,检测其安全性,制备灭活疫苗。随后将体质量(95.5±9.7)g的健康大菱鲆分为4组,每组30尾,分别腹腔注射此灭活疫苗(疫苗组)、等体积生理盐水(对照组)、壳寡糖和灭活疫苗+壳寡糖,免疫14 d后均注射109 cfu/mL的杀鲑气单胞菌进行攻毒,计算相对免疫保护率,检测大菱鲆血清中免疫球蛋白M含量,实时荧光定量PCR检测肌肉和肝脏组织中免疫相关基因(TLR2、TLR7、MyD88)的表达,测定免疫后大菱鲆血清中免疫球蛋白M含量及溶菌酶、超氧化物歧化酶活性。结果显示:14 d后疫苗组免疫球蛋白M含量显著高于对照组,免疫基因MyD88、TLR2、TLR7的表达量显著上调(P<0.05);壳寡糖组免疫球蛋白M含量和溶菌酶、超氧化物歧化酶活性随时间先增后减,14 d时达到峰值;对照组、疫苗组、壳寡糖组、疫苗+壳寡糖组相对免疫保护率分别为0%、100%、88.89%和88.89%。本试验制备的大菱鲆用杀鲑气单胞菌灭活疫苗,对大菱鲆疖疮病的预防具有重要意义。 展开更多
关键词 大菱鲆 疖疮病 杀鲑气单胞菌 灭活疫苗 疾病预防
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杀香鱼假单胞菌外膜蛋白Tol C的原核表达及其对大黄鱼的免疫保护效果
3
作者 王莹 汪浩 +6 位作者 徐伟 汪玮 施慧 王庚申 谢建军 何杰 许文军 《水产学报》 北大核心 2025年第2期193-203,共11页
【目的】评价大黄鱼杀香鱼假单胞菌外膜蛋白TolC(GenBank:EPB97112.1)的免疫保护效果。【方法】通过原核表达获得重组的Tol C功能域蛋白,命名为B6。用兔抗杀香鱼假单胞菌多抗血清对B6进行免疫原性的初步检测。将B6与明矾佐剂混合制成亚... 【目的】评价大黄鱼杀香鱼假单胞菌外膜蛋白TolC(GenBank:EPB97112.1)的免疫保护效果。【方法】通过原核表达获得重组的Tol C功能域蛋白,命名为B6。用兔抗杀香鱼假单胞菌多抗血清对B6进行免疫原性的初步检测。将B6与明矾佐剂混合制成亚单位疫苗,腹腔注射免疫大黄鱼,免疫4周后攻毒,检测相对保护率(relative percent survival,RPS)。同时,采集免疫后第2、4、6、8周的大黄鱼血清、头肾和脾脏,测定血清抗体效价和免疫相关基因的表达变化。采集健康和攻毒后大黄鱼的头肾和脾脏组织,制成石蜡切片,观察组织病理变化。【结果】B6分子质量为22 ku。Western blot结果显示,杀香鱼假单胞菌兔抗血清与B6具有强结合条带。接种B6亚单位疫苗4周后,RPS达72.22%。ELISA结果显示,免疫后第2周起,血清抗体效价显著升高,第4周时达到峰值(log_(2)8.65),随后略有下降,第8周时降至log_(2)6.98。荧光定量PCR(RT-PCR)结果显示,免疫后第2、4、6、8周,头肾和脾脏中免疫相关基因均有不同程度的表达上调,其中IL-1β和MHCⅠα的上调幅度最大,头肾中分别达到93.33倍和77.02倍,脾脏中分别达到241.13倍和131.95倍。除CD8外,IgM、IL-1β、CD4、MHCⅠα和MHCⅡβ在脾脏中的表达上调幅度均高于头肾。石蜡切片显示,对照组在攻毒后头肾和脾脏组织中出现严重的出血点和结节,并伴随不同程度的铁黄素沉积,B6免疫组在头肾和脾脏组织中仅有少量出血点,无结节和铁黄素沉积。【结论】通过对大黄鱼杀香鱼假单胞菌外膜蛋白Tol C进行原核表达和免疫保护效果评价,发现B6具有良好的免疫原性,免疫后4周RPS达72.22%,具有作为亚单位候选疫苗的潜力。 展开更多
关键词 大黄鱼 杀香鱼假单胞菌 Tol C 免疫保护
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小球藻表达LrrG抗原罗非鱼口服疫苗的免疫保护效果
4
作者 肖子淳 胡永华 +3 位作者 邓晓东 许殿龙 穆丹 费小雯 《广东海洋大学学报》 北大核心 2025年第6期1-12,共12页
【目的】研制针对罗非鱼(Oreochromis spp.)无乳链球菌病(Streptococcus agalactiae)防治具有高效、安全、无残留且便于推广使用的口服疫苗。【方法】将无乳链球菌外膜蛋白LrrG_epitope(706-756)表面抗原基因构建至表达载体pCAMBIA1302... 【目的】研制针对罗非鱼(Oreochromis spp.)无乳链球菌病(Streptococcus agalactiae)防治具有高效、安全、无残留且便于推广使用的口服疫苗。【方法】将无乳链球菌外膜蛋白LrrG_epitope(706-756)表面抗原基因构建至表达载体pCAMBIA1302,获得重组质粒,并转化至小球藻(Chlorella vulgaris)HOC5,使用抗生素潮霉素筛选阳性藻株,重组藻株经PCR鉴定并大规模培养后,制作成免疫口服饲料(含质量分数50%重组藻株);将驯化后的吉富罗非鱼(GIFT Oreochromis niloticus)免疫饲喂28 d,检测免疫相关基因组织分布、非特异性血清免疫指标、血清抗体效价,验证其免疫原性;测定罗非鱼生长性能;测定无乳链球菌对罗非鱼半致死剂量(LD50);对免疫饲喂28 d后的罗非鱼进行无乳链球菌攻毒试验,统计14 d的死亡率及相对保护率,观察鱼体外表征,以及鳃、中肠的显微特征。【结果】成功构建重组质粒pCAMBIA1302-LrrG_epitope(706-756),经转化获得重组微藻(口服疫苗)。经免疫饲喂,罗非鱼肝脏及中肠中IgM、TNF、IFN、MHCⅠ、MHCⅡ、CD4、CD8、IL-1β、IL-10等9种免疫相关基因的表达量较对照组均显著提高(P<0.05);免疫组血清中过氧化氢酶、碱性磷酸酶在免疫饲喂期间活性始终显著高于对照组,过氧化物酶在免疫饲喂28 d时活性较对照组有所提升(P<0.05);免疫组血清抗体效价较对照组显著升高(P<0.05),28 d时达到峰值1∶4096;免疫0 d及28 d时,免疫组罗非鱼体质量和体长无明显差异(P>0.05),免疫28 d时免疫组罗非鱼增质量率及饲料转化率无明显差异(P>0.05);攻毒14 d内,免疫组死亡率始终低于对照组,存活率明显高于对照组,其相对保护率为80.18%;免疫组体表未出现明显病变,而阳性对照组呈典型的无乳链球菌病症状;显微观察显示,免疫组鳃、中肠组织无明显病变,而阳性对照组鳃组织溃烂、中肠组织呈玻璃样变。【结论】本研究成功研制基于微藻表达系统的罗非鱼口服疫苗,疫苗具有高效免疫保护作用且不影响罗非鱼的生长性能。 展开更多
关键词 吉富罗非鱼 无乳链球菌 小球藻 外膜蛋白 疫苗 口服免疫
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香豆素联合传染性造血器官坏死病毒灭活疫苗对虹鳟的免疫效果
5
作者 邓倩 刘哲 +5 位作者 潘玉财 权金强 宋国林 卢军浩 赵桂研 王建福 《水生生物学报》 北大核心 2025年第6期32-41,共10页
为开发安全有效的疫苗以预防虹鳟传染性造血器官坏死病毒(IHNV)暴发。研究重点开发了以香豆素为佐剂的IHNV灭活疫苗,疫苗安全性实验证明IHNV病毒液已被完全灭活。实验分为对照组、疫苗组和香豆素+疫苗组。疫苗注射剂量为150μL,对照组... 为开发安全有效的疫苗以预防虹鳟传染性造血器官坏死病毒(IHNV)暴发。研究重点开发了以香豆素为佐剂的IHNV灭活疫苗,疫苗安全性实验证明IHNV病毒液已被完全灭活。实验分为对照组、疫苗组和香豆素+疫苗组。疫苗注射剂量为150μL,对照组注射同等剂量的磷酸盐缓冲溶液(PBS),在疫苗接种14d(D14)后进行IHNV攻毒实验,并在D7、D14、D15、D21、D30进行虹鳟脾脏和血清的样本采集。IHNV攻毒后显示,香豆素+疫苗的存活率为66%,而单一灭活疫苗和对照组的分别为62%和24%。组织病理学分析显示,IHNV攻毒后香豆素+疫苗组脾脏组织损伤最小,出现轻微的炎症反应,而对照组出现严重的黑色素巨噬细胞中心(MMC)和组织炎症(TI)。此外,在D7—D30,香豆素+疫苗组血清的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)活性水平显著高于疫苗组和对照组(P<0.05)。在D7—D14,香豆素+疫苗组血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)水平被显著升高;而IHNV攻毒后(D15—D30),香豆素+疫苗组GPT和GOT水平显著低于对照组(P<0.05)。在接种疫苗和攻毒后,香豆素+疫苗组中脾脏的MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ和IFN-γ基因被显著上调(P<0.05);同时,香豆素+疫苗组CD4、CD8、IgT、C3、VIG1和Mx1基因表达量显著高于疫苗组和对照组(P<0.05)。结果表明,灭活疫苗联合佐剂香豆素是预防IHNV感染的有效方法,有助于进一步控制虹鳟养殖中的IHNV暴发。 展开更多
关键词 香豆素 疫苗 虹鳟 免疫效果 IHNV
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传染性造血器官坏死病毒-杀鲑气单胞菌载体疫苗的构建及免疫保护效果分析
6
作者 高雅彤 王致鹏 +2 位作者 高晔 朱明 李杰 《渔业科学进展》 北大核心 2025年第3期194-201,共8页
传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)和杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)都是鲑鳟类养殖过程中的重要病原。为开发这2种病原的疫苗,本研究将IHNV表面抗原糖蛋白G基因片段克隆至表达载体pGEX-4T-1... 传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)和杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)都是鲑鳟类养殖过程中的重要病原。为开发这2种病原的疫苗,本研究将IHNV表面抗原糖蛋白G基因片段克隆至表达载体pGEX-4T-1,构建IHNV糖蛋白重组表达质粒pGEX-4T-1-G。以杀鲑气单胞菌SC18032201为载体,通过电击转化,构建IHNV糖蛋白表达载体SC18032201-G。利用IPTG诱导IHNV糖蛋白在SC18032201-G中进行表达,并对IPTG浓度、诱导温度和诱导时间进行了优化,Western Blotting结果显示,经IPTG诱导后G蛋白可以在SC18032201-G中表达,重组蛋白的最佳诱导条件为0.2 mmol/L IPTG、28℃诱导表达8 h。以优化后的条件对SC18032201-G进行培养、诱导、灭活和乳化,腹腔注射免疫虹鳟(Oncorhynchus mykiss)。免疫45 d后,测定虹鳟血清IHNV中和抗体水平,并进行杀鲑气单胞菌攻毒,评价疫苗载体的免疫保护效果。实验结果显示,在免疫第45天后虹鳟血清IHNV中和抗体效价为54.95±6.76,显著高于对照组;免疫45 d后虹鳟对杀鲑气单胞菌的相对免疫保护率为100%。综上所述,本研究以杀鲑气单胞菌作为载体疫苗,构建IHNV糖蛋白的二价疫苗可诱导虹鳟产生针对杀鲑气单胞菌和IHNV的特异性免疫,为虹鳟养殖过程中的病害防控提供了有效手段。 展开更多
关键词 传染性造血器官坏死病毒 杀鲑气单胞菌 疫苗 中和抗体
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乙酰化修饰对马氏珠母贝植核免疫的作用
7
作者 卢金昭 张彬 +1 位作者 梁海鹰 梁碧丹 《水产学报》 北大核心 2025年第3期212-221,共10页
【目的】马氏珠母贝植核育珠技术会导致受体贝发生免疫排斥甚至死亡,严重影响了珍珠的质量和品质。本研究通过分析提高蛋白质乙酰化修饰水平对马氏珠母贝植核免疫的影响,从而探究乙酰化修饰在其植核后的作用。【方法】通过注射赖氨酸去... 【目的】马氏珠母贝植核育珠技术会导致受体贝发生免疫排斥甚至死亡,严重影响了珍珠的质量和品质。本研究通过分析提高蛋白质乙酰化修饰水平对马氏珠母贝植核免疫的影响,从而探究乙酰化修饰在其植核后的作用。【方法】通过注射赖氨酸去乙酰化酶抑制剂(lysine deacetylase inhibitor,KDI)混合物,并采用荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白印迹(western blot,WB)、抗氧化酶活性检测以及养殖指标等多水平综合分析蛋白质乙酰化修饰水平对马氏珠母贝植核免疫的影响。【结果】注射KDI混合物后,首先检测HDAC 6/10(10006221)、Sir2家族成员(10031932和10020349)这3个去乙酰转移酶基因的表达水平,发现均在不同时间出现显著下调,鳃组织总蛋白乙酰化水平在72 h显著提高,表明注射药物后提高了乙酰化水平;其次使用qRT-PCR检测免疫相关因子的时序表达,结果显示,IRAK1、IL-17、NF-κB和CASP2基因的表达在12 h都出现显著上调,IκK在48 h显著上调,而TRAF3从48 h后则出现显著下调,表明经KDI刺激后受体贝机体细胞免疫增强;抗氧化酶GSH-Px、POD和CAT酶活性在12 h和24 h表现出显著上调的趋势,表明受体贝机体体液免疫增强;最后,结合养殖数据分析,发现60 d的存活率和留珠率显著提高。【结论】乙酰化修饰参与了马氏珠母贝的植核免疫反应,KDI可以作为免疫调节剂调节马氏珠母贝的植核免疫应答,为深入探究乙酰化修饰的生物学功能和调控机制奠定基础,为合理控制珍珠贝免疫反应提供理论支撑。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 植核 乙酰化修饰 KDI
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山莨菪碱在杀香鱼假单胞菌灭活疫苗浸泡免疫大黄鱼(Larimichthys crocea)中的应用 被引量：1
8
作者 李姣姣 汪玮 +4 位作者 杨致旭 许文军 谢建军 施慧 何杰 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第2期433-441,共9页
为探究山莨菪碱在浸泡免疫大黄鱼中的应用效果,以添加山莨菪碱佐剂的杀香鱼假单胞菌灭活疫苗浸泡免疫大黄鱼,结果显示,免疫后1~4周,无佐剂疫苗组(FKC组)和山莨菪碱疫苗组(FKCA组)血清抗体水平均显著升高,第2~3周FKCA组血清抗体显著高于... 为探究山莨菪碱在浸泡免疫大黄鱼中的应用效果,以添加山莨菪碱佐剂的杀香鱼假单胞菌灭活疫苗浸泡免疫大黄鱼,结果显示,免疫后1~4周,无佐剂疫苗组(FKC组)和山莨菪碱疫苗组(FKCA组)血清抗体水平均显著升高,第2~3周FKCA组血清抗体显著高于FKC组。rt-PCR结果显示,从免疫后第4天开始,头肾、脾脏中免疫因子IgM、IL-1β、MHC-Iα、MHC-IIβ、CD4、CD8的表达量均出现升高,FKCA组头肾中IgM、IL-1β、MHC-Iα、CD8的表达峰值显著高于FKC组。酶活结果显示,体表黏液中AKP和ACP活力在免疫后第7天达到峰值,血清中AKP和ACP活力分别在第4天和第14天达到峰值,FKCA组AKP活力显著高于FKC组。组织切片观察发现,免疫后第4天,两个免疫组的皮肤均出现表皮层增厚、黏液细胞增多,同时FKCA组初级鳃丝增宽,生理变化趋势更显著。免疫28 d后攻毒,FKCA组相对保护率为61%,显著高于FKC组(14%)。生长指标对比显示,免疫组和对照组的平均增重率、特定生长率在免疫期内无显著差异。研究表明,山莨菪碱作为浸泡疫苗佐剂可显著提高杀香鱼假单胞菌灭活疫苗对大黄鱼的相对保护率,提升血清抗体水平、头肾免疫因子表达水平,提高AKP和ACP活力,增强皮肤和鳃丝对浸泡免疫的生理扩张,同时,山莨菪碱对大黄鱼的生长性能无副作用,是一种具有应用潜力的大黄鱼浸泡疫苗佐剂。 展开更多
关键词 山莨菪碱 灭活疫苗 浸泡免疫 大黄鱼(Larimichthys crocea)
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泛素化和磷酸化修饰介导poly(I:C)调控巨噬细胞脂质代谢
9
作者 夏宁 苏建国 《水产学报》 北大核心 2025年第11期102-113,共12页
【目标】确定泛素化、磷酸化以及N/O-糖基化修饰是否参与dsRNA病毒诱导的脂质代谢过程。【方法】通过percoll密度梯度离心的方式分离出草鱼头肾原代巨噬细胞,使用poly(I:C)刺激模拟dsRNA病毒的感染;利用蛋白质谱与修饰组学技术对刺激前... 【目标】确定泛素化、磷酸化以及N/O-糖基化修饰是否参与dsRNA病毒诱导的脂质代谢过程。【方法】通过percoll密度梯度离心的方式分离出草鱼头肾原代巨噬细胞,使用poly(I:C)刺激模拟dsRNA病毒的感染;利用蛋白质谱与修饰组学技术对刺激前后差异蛋白进行鉴定、GO功能与KEGG通路富集分析。【结果】脂质代谢相关通路中,泛素化修饰差异蛋白中共计15个蛋白,富集到8个脂质代谢相关通路;磷酸化修饰差异蛋白共计1个蛋白,即cPLA2,富集到1条脂质代谢通路;N/O-糖基化修饰差异蛋白中未检测到主要的脂质代谢通路。进一步对16个差异蛋白表达水平进行分析发现,poly(I:C)刺激后,泛素化修饰水平下调最为显著的蛋白为巨噬细胞ACOX1与HADHA,上调最为显著的蛋白为DAGLα、ABCA1和PLD1,表明ACOX1、HADHA、DAGLα、ABCA1、PLD1及cPLA2可能是poly(I:C)通过蛋白修饰调控脂质代谢的关键蛋白。【结论】本研究揭示了泛素化与磷酸化修饰是病毒的dsRNA调控脂质代谢与脂滴合成的重要手段,强调了脂质代谢相关蛋白修饰在病毒dsRNA调控感染中的重要作用。 展开更多
关键词 草鱼头肾巨噬细胞 脂质代谢 脂滴 poly(I:C) 泛素化 磷酸化 糖基化
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山茱萸总苷对CT诱导的鲤抗氧化及免疫功能的影响
10
作者 朱兆曾 卢荣华 +3 位作者 陈梦迪 徐歆歆 张玉茹 曹香林 《水产学报》 北大核心 2025年第3期202-211,共10页
【目的】研究山茱萸总苷(Cornus officinalis total glycosides,COTG)对四氯化碳(CT)诱导的鲤抗氧化性能、免疫功能及血清生化指标的影响。【方法】选取初始体重(22.15±1.15)g的鲤135尾,随机分为5组,其中实验组(T1组、T2组、T3组)... 【目的】研究山茱萸总苷(Cornus officinalis total glycosides,COTG)对四氯化碳(CT)诱导的鲤抗氧化性能、免疫功能及血清生化指标的影响。【方法】选取初始体重(22.15±1.15)g的鲤135尾,随机分为5组,其中实验组(T1组、T2组、T3组)分别灌喂100、200和300 mg/kg的COTG,C组(对照)及CT组灌喂等体积生理盐水,连续灌喂7 d后CT组及实验组注射CT(5 mL/kg),24 h后取样。检测肝胰脏和肾脏组织的形态学、血清生化指标、抗氧化和免疫酶活性及相关基因表达变化。【结果】注射CT诱导了鲤肝胰脏和肾脏组织损伤,而灌喂COTG显著降低了血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性,并减轻了肝细胞的空泡化程度、细胞核损伤和肾小球肿胀。与CT组相比,T3组血清TG、TC及LDL-C含量均显著下调,改善了CT诱导的血脂紊乱。此外,T3组肝胰脏和肾脏的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、T2组肝胰脏酸性磷酸酶(ACP)及T3组肾脏碱性磷酸酶(AKP)和ACP的活性均显著上调,但T2和T3组肝胰脏及肾脏的丙二醛(MDA)含量显著降低。基因表达结果显示,COTG可提高鲤的肝胰脏和肾脏氧化酶相关基因(cat、sod、gst、gpx)表达,抑制促炎因子il-β和nf-κb p65的表达。【结论】灌喂200~300 mg/kg的COTG可通过增强抗氧化和免疫功能缓解CT诱导的鲤肝胰脏及肾脏组织损伤。 展开更多
关键词 鲤 山茱萸总苷 四氯化碳 抗氧化 免疫功能
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大黄、穿心莲、板蓝根和金银花对异育银鲫免疫机能的影响 被引量：89
11
作者 陈孝煊 吴志新 +1 位作者 殷居易 李莉 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期36-40,共5页
用分别含1%(质量分数)的大黄、穿心莲、板蓝根和金银花水提取物的饵料连续28d饲喂异育银鲫(Carassiusauratusgibelio),在不同时间取样,测定其血液白细胞的吞噬活性、血清和体表粘液的溶菌酶活性。结果表明,大黄、穿心莲、板蓝根和金银... 用分别含1%(质量分数)的大黄、穿心莲、板蓝根和金银花水提取物的饵料连续28d饲喂异育银鲫(Carassiusauratusgibelio),在不同时间取样,测定其血液白细胞的吞噬活性、血清和体表粘液的溶菌酶活性。结果表明,大黄、穿心莲、板蓝根和金银花可使异育银鲫血液白细胞的吞噬活性有明显提高。投喂药饵后4d,吞噬百分比(PP)与对照组相比均有极显著差异(P<0.01);投喂药饵后4d或7d,吞噬指数(IP)与对照组相比有显著(P<0.05)或极显著差异;在停投药饵后的10d,PP、IP与对照组相比仍有极显著差异。同时,投喂这4种中草药后,异育银鲫血清和体表粘液溶菌酶的活性也有明显提高,但体表粘液溶菌酶活性远远高于血清中溶菌酶活性。投喂药饵7d后,溶菌酶的活性与对照组之间有极显著差异;但在停止投药后10d,溶菌酶的活性与对照组之间无显著差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 免疫机能 大黄 穿心莲 板蓝根 金银花 吞噬活性 异育银鲫 非特异性免疫 溶菌酶活性
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酵母β-葡聚糖对受免异育银鲫免疫应答的增强作用 被引量：70
12
作者 陈超然 陈萱 +2 位作者 陈昌福 姚娟 梁运祥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期380-384,共5页
在饲料中添加定量的酵母 β -葡聚糖 ,投喂经注射接种福尔马林灭活的嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)菌苗的异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) 2 8d后 ,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性 ... 在饲料中添加定量的酵母 β -葡聚糖 ,投喂经注射接种福尔马林灭活的嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)菌苗的异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) 2 8d后 ,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性 (SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率 (RPS) ,探讨了酵母 β -葡聚糖对受免异育银鲫免疫应答的增强作用。结果表明 ,投喂添加 2 0 0 .0mg/ (kg·d)酵母 β -葡聚糖的饲料 ,不仅可以提高受免异育银鲫对灭活嗜水气单胞菌的免疫应答水平 ,增强抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力 ,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用。 展开更多
关键词 酵母Β-葡聚糖 异育银鲫 免疫应答 增强作用 嗜水气单胞菌 饲料添加剂 细菌性败血症
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嗜水气单胞菌主要外膜蛋白对欧洲鳗鲡的免疫保护试验 被引量：37
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作者 董传甫 林天龙 +2 位作者 龚晖 欧阳岁东 杨苏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期285-290,共6页
制备出4株分属3个不同血清型嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白(MOMP)免疫刺激复合物(ISCOMs)亚单位疫苗,腹腔注射免疫欧洲鳗鲡,ELISA法测得免疫后第14d和第30d所采集的血清的平均抗体效价在1∶320—1∶1280之间。免疫印迹结果显示,在印迹膜... 制备出4株分属3个不同血清型嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白(MOMP)免疫刺激复合物(ISCOMs)亚单位疫苗,腹腔注射免疫欧洲鳗鲡,ELISA法测得免疫后第14d和第30d所采集的血清的平均抗体效价在1∶320—1∶1280之间。免疫印迹结果显示,在印迹膜上对应的位置均可检测到MOMP的主要蛋白条带。第40d的免疫保护试验表明,免疫欧鳗对TPS-30菌株约100倍半数致死剂量的攻击无免疫保护作用,其中的3组被测免疫欧鳗对TPS-30菌株约10倍半数致死剂量的攻击的免疫保护率皆在80%以上。上述试验结果提示,嗜水气单胞菌的主要外膜蛋白是重要的保护性抗原,在制备成ISCOMs亚单位疫苗的情况下,较小的剂量免疫一次即可显示出较高的相对免疫保护率,且没有明显的血清型特异性。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 欧洲鳗鲡 外膜蛋白 免疫刺激复合物 共同保护性抗原 人工免疫
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灭活菌苗免疫的南方鲇外周血液细胞免疫指标的变化 被引量：28
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作者 单红 张其中 +3 位作者 刘强平 赵海涛 周晓扬 冉江波 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期275-280,共6页
以嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)灭活菌苗为免疫原,以平均体重为86 20g人工饲养的健康南方(Silu rusmeridionalis)为实验对象,通过腹腔注射免疫原(浓度为1 0×108/mL)免疫,剂量为0 2mL/尾,并分别在免疫后的第1、2、4、7、14... 以嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)灭活菌苗为免疫原,以平均体重为86 20g人工饲养的健康南方(Silu rusmeridionalis)为实验对象,通过腹腔注射免疫原(浓度为1 0×108/mL)免疫,剂量为0 2mL/尾,并分别在免疫后的第1、2、4、7、14、21、28天对实验鱼尾静脉采血,进行血液生理指标和血液中吞噬细胞活性的测定。结果显示,嗜水气单胞菌灭活菌苗(FKC)可以增加南方外周血液白细胞数量并引起不同种类白细胞组成比例的变化,提高吞噬细胞的吞噬活性。在免疫后第1、2、4、7、14、21、28天,南方外周血中白细胞数量呈明显上升趋势,其中嗜中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞变化趋势更为明显;而且吞噬细胞活性大为提高,吞噬百分比较对照组平均升高了17 66%,吞噬指数比对照组平均升高了1 16,在免疫后第4天吞噬百分比和吞噬指数均达到最高值,吞噬百分比为48 40%,吞噬指数为4 82;免疫后第21天,吞噬百分比和吞噬指数开始下降,但仍高于对照组。由此表明,使用疫苗后,鱼类非特异细胞免疫在初期(尤其是在第2～7天)明显增强,这是鱼用疫苗在免疫早期保护作用的主要机制之一。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 疫苗 细胞免疫 南方鲇 血细胞
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口服免疫添加剂对养殖大黄鱼免疫机能影响的初步研究 被引量：23
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作者 鄢庆枇 苏永全 +3 位作者 王军 周化民 皮灵宝 张朝霞 《集美大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2001年第2期134-137,共4页
对福建省连江县厦宫乡新辉村的养殖大黄鱼病害进行免疫防治试验 ,通过定期口服免疫添加剂后 ,检测大黄鱼血清中溶菌酶活力、抗菌活力和酚氧化酶活力 ,测定大黄鱼体长和体重 .研究结果表明 :大黄鱼在服用免疫添加剂后血清中的溶菌酶活力... 对福建省连江县厦宫乡新辉村的养殖大黄鱼病害进行免疫防治试验 ,通过定期口服免疫添加剂后 ,检测大黄鱼血清中溶菌酶活力、抗菌活力和酚氧化酶活力 ,测定大黄鱼体长和体重 .研究结果表明 :大黄鱼在服用免疫添加剂后血清中的溶菌酶活力平均值提高了 2 6% ,抗菌活力增加了 18% ,酚氧化酶活力提高幅度高达 4 6% .与此同时 ,实验组大黄鱼的生长速度也比对照组要快 ,其中实验组平均体长比对照组高 3.8% ,平均体重增加 13.5% . 展开更多
关键词 大黄鱼 免疫添加剂 溶菌酶 抗菌活力 酚氧化酶 免疫机能 酶活力
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浒苔多糖对华贵栉孔扇贝血淋巴中SOD酶和溶菌酶活性的影响 被引量：31
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作者 徐大伦 黄晓春 +2 位作者 欧昌荣 杨文鸽 王海洪 《水产科学》 CAS 北大核心 2006年第2期72-74,共3页
于华贵栉孔扇贝体内注射了0.1%,0.25%,0.5%3个不同浓度的浒苔多糖后,在24,48,72 h分别测定了华贵栉孔扇贝血淋巴中SOD酶和溶菌酶活力。结果表明:0.1%和0.25%实验组扇贝血淋巴中SOD酶活仅在注射24h后显著地高于对照组(P<0.05),而0.5%... 于华贵栉孔扇贝体内注射了0.1%,0.25%,0.5%3个不同浓度的浒苔多糖后,在24,48,72 h分别测定了华贵栉孔扇贝血淋巴中SOD酶和溶菌酶活力。结果表明:0.1%和0.25%实验组扇贝血淋巴中SOD酶活仅在注射24h后显著地高于对照组(P<0.05),而0.5%实验组在注射24 h后极显著高于对照组(P<0.01),而且在注射48h和72 h后仍显著高于对照组(P<0.05);0.1%实验组对扇贝血淋巴中溶菌酶的作用无显著影响,而0.25%和0.5%实验组对扇贝血淋巴中溶菌酶活力在不同测定时间都表现出明显的促进作用,其中0.5%实验组对血细胞中溶菌酶作用效果极显著(P<0.01);说明浒苔多糖具有增强华贵栉孔扇贝免疫活性的作用。 展开更多
关键词 浒苔多糖 华贵栉孔扇贝 SOD酶 溶菌酶
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凝结芽孢杆菌对奥尼罗非鱼消化酶活性、消化率及生长性能的影响 被引量：50
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作者 付天玺 许国焕 +2 位作者 吴月嫦 龚全 江永明 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2008年第4期30-35,共6页
在基础饲料中分别添加不同剂量的凝结芽孢杆菌(Ⅰ:1.0×1011cfu/kg饲料,Ⅱ:3.0×1011cfu/kg饲料,Ⅲ:6.0×1011cfu/kg),室外水族箱中饲养奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)(34.50±0.25 g),用基础饲料投... 在基础饲料中分别添加不同剂量的凝结芽孢杆菌(Ⅰ:1.0×1011cfu/kg饲料,Ⅱ:3.0×1011cfu/kg饲料,Ⅲ:6.0×1011cfu/kg),室外水族箱中饲养奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)(34.50±0.25 g),用基础饲料投喂作为对照,每饲料组设三个重复,每水族箱随机放养16尾鱼,投喂率为3%。采用静水饲养以避免各箱之间水的交换。56 d后测定鱼体的生长和消化酶活性。结果显示:不同添加量的凝结芽孢杆菌均能显著提高奥尼罗非鱼胃、肝胰脏和肠道蛋白酶活性(P<0.05),但酶的活性随添加量的提高呈下降趋势。凝结芽孢杆菌的添加对胃、肝胰脏和肠道淀粉酶及脂肪酶活性没有显著影响(P>0.05)。Ⅰ组和Ⅱ组的干物质表观消化率、蛋白质消化率、相对增重率、饵料系数和蛋白质效率均显著高于对照组(P<0.05),而Ⅲ组和对照组之间差异不显著(P>0.05)。结果提示,饲料中添加1.0×1011cfu/kg饲料的凝结芽孢杆菌就能显著促进奥尼罗非鱼的生长和饲料营养物质的利用,满足最佳生长。 展开更多
关键词 凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans) 奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus) 消化酶活性 消化率 生长
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灭活菌苗免疫的中华倒刺鲃外周血免疫指标的变化 被引量：16
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作者 罗芬 张其中 +3 位作者 冯汉茹 朱成科 袁娟 组超 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期626-634,共9页
以温和气单胞菌灭活菌苗为免疫原,平均体重(100±25)g的健康中华倒刺鲃为实验对象,免疫组腹腔注射0.2mL浓度为1.0×108CFU/mL的免疫原,对照组注射等量灭菌生理盐水,分别在单次注射0、1、2、4、7、14、21、28、35d后随机从两组各... 以温和气单胞菌灭活菌苗为免疫原,平均体重(100±25)g的健康中华倒刺鲃为实验对象,免疫组腹腔注射0.2mL浓度为1.0×108CFU/mL的免疫原,对照组注射等量灭菌生理盐水,分别在单次注射0、1、2、4、7、14、21、28、35d后随机从两组各取6尾实验鱼,尾静脉采血,测定外周血的血细胞数量、白细胞分类计数、吞噬活性、抗体效价和蛋白质含量等免疫指标的变化,第35天活菌攻毒。结果表明:温和气单胞菌灭活菌苗(F-AS)可诱导中华倒刺鲃红细胞和白细胞数量增加,并引起各种白细胞分类百分比变化,提高吞噬活性和抗体效价,血清中总蛋白及球蛋白含量增加,红细胞也具有免疫功能,灭活茵苗的相对免疫保护力达65.21%。免疫早期(第1周)主要是红细胞、单核细胞和中性粒细胞数量明显增加,吞噬细胞的吞噬活性迅速提高,吞噬百分比和吞噬指数第4天达峰值;随后则是淋巴细胞大量增殖,第21天淋巴细胞、抗体效价及球蛋白达峰值。可见灭活菌苗通过促进中华倒刺鲃血细胞增殖、提高吞噬细胞的吞噬活性、产生特异性抗体等方式提高免疫保护力;免疫早期非特异性细胞免疫起重要作用,之后特异性免疫起主要作用。 展开更多
关键词 中华倒刺鲃 灭活温和气单胞菌菌苗 血细胞数量 白细胞分类计数 吞噬活性 抗体效价
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壳聚糖和益生菌对异育银鲫非特异免疫功能及血清甲状腺激素、皮质醇水平的影响 被引量：20
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作者 陈勇 华雪铭 +1 位作者 周洪琪 张冬青 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期711-718,共8页
为探讨壳聚糖和益生菌是否通过甲状腺激素、皮质醇对异育银鲫的非特异免疫功能的进行调控,试验以基础饲料为对照,在基础饲料中分别添加0.50%壳聚糖A、0.50%壳聚糖B、0.20%益生菌以及0.50%壳聚糖A与0.05%益生菌的混合物制备试验饲料,饲... 为探讨壳聚糖和益生菌是否通过甲状腺激素、皮质醇对异育银鲫的非特异免疫功能的进行调控,试验以基础饲料为对照,在基础饲料中分别添加0.50%壳聚糖A、0.50%壳聚糖B、0.20%益生菌以及0.50%壳聚糖A与0.05%益生菌的混合物制备试验饲料,饲养异育银鲫64d后,测定各组鱼外周血白细胞数量及其分类、白细胞吞噬活性、脾脏溶菌酶活性、脾脏淋巴细胞转化能力;同时采用放射免疫分析法测定异育银鲫血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)及皮质醇含量。结果表明,饲料中添加壳聚糖、益生菌或其混合物对异育银鲫白细胞总数无显著影响,但是可显著提高异育银鲫外周血淋巴细胞数量、白细胞吞噬活性和脾脏溶菌酶活性(P<0.05),显著降低外周血多形核细胞数量(P<0.05)。除了壳聚糖A能够显著提高异育银鲫脾脏B淋巴细胞转化能力之外,其余试验组的脾脏T、B淋巴细胞转化能力均与对照组无显著差异(P>0.05)。同时发现饲料中添加壳聚糖、益生菌或其混合物可以显著提高异育银鲫血清中T3的含量(P<0.05)、显著降低异育银鲫血清中皮质醇的含量(P<0.05),除了壳聚糖B对异育银鲫血清中T4的含量无显著影响(P>0.05)之外,其余均可显著降低异育银鲫血清中T4的含量(P<0.05)。因此,壳聚糖、益生菌可能通过提高血清T3水平、降低血清皮质醇水平增强异育银鲫的非特异免疫功能。 展开更多
关键词 异育银鲫 壳聚糖 益生菌 非特异免疫 免疫调节 皮质醇 甲状腺激素
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银鲫口服嗜水气单胞菌疫苗的免疫和免疫组化研究 被引量：27
20
作者 李新华 沈锦玉 +2 位作者 尹文林 潘晓艺 沈智华 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期125-130,共6页
室内恒温条件下(水温24±1℃)分别用微胶囊疫苗与全细胞疫苗口灌免疫银鲫,口灌免疫后每周取血和前、中、后肠肠黏膜,间接ELISA检测其抗体效价。结果发现:微胶囊疫苗组鱼血清抗体效价较高,峰值为1∶80,且维持时间较长;各肠段的黏膜... 室内恒温条件下(水温24±1℃)分别用微胶囊疫苗与全细胞疫苗口灌免疫银鲫,口灌免疫后每周取血和前、中、后肠肠黏膜,间接ELISA检测其抗体效价。结果发现:微胶囊疫苗组鱼血清抗体效价较高,峰值为1∶80,且维持时间较长;各肠段的黏膜抗体中,后肠黏膜抗体效价最高,微胶囊疫苗组峰值达1∶320,前肠的肠黏膜抗体效价也有一定的水平为1∶40;肠道免疫组化试验也得到相似结果:在不同时间对前、中、后肠切片进行免疫组化染色,从光镜下观察到肠黏膜外层和黏膜下层都有阳性着色,以包裹全菌苗为最多,未包裹菌苗较少。同时进行两组疫苗的池塘网箱免疫试验,结果表明:微胶囊疫苗组与全细胞疫苗组的相对百分成活率分别为61.1%和50%,微胶囊疫苗组略高于全细胞疫苗组;口服免疫后两组鱼血清中均能产生较高的抗体效价,在30d左右抗体效价最高达1∶512,能维持较长时间约8—10个月,但两者差异不显著。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 海藻酸钠 口服免疫 免疫组化
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