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大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的原核表达、多克隆抗体制备及水体氨氮胁迫对其表达的影响
1
作者 江藕 陈振威 +7 位作者 王庆超 王欢 唐伟俊 姜明旭 王怀池 简宇清 黄兴政 高坚 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期184-198,共15页
半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大... 半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大口黑鲈(Micropterus salmoides)程序性细胞死亡的作用机制,本研究针对大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的序列进行分析,筛选合适的表达区段设计引物后PCR扩增获得目的片段,随后以pET-32a为载体构建原核重组质粒,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,分别以1.0 mmol/L和0.6 mmol/L的IPTG于16℃过夜诱导表达重组蛋白;通过Ni-NTA Beads 6FF重力柱对获得的上清液蛋白进行纯化,并以SDS-PAGE分析获得Ms-CASPASE-1和Ms-CASPASE-3重组蛋白,从而确认重组蛋白表达和纯化成功。之后,将纯化的CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白分别与弗氏佐剂乳化后各免疫1只日本大耳兔和3只Balb/C小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫法和蛋白印迹法检测效价和特异性。结果表明,免疫后获得的抗血清均能特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白和内源性蛋白,有单一且与预期分子量大小一致的目的条带;同时,CASPASE-1和CASPASE-3的兔源/鼠源抗血清效价均分别为1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(6)和1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(3)。随后,使用氨氮对大口黑鲈进行胁迫,通过组织病理学检测可发现其肾脏组织出现明显病变,表现为肾小体细胞增生、肾小囊腔扩大,远曲小管和近曲小管上皮细胞肿胀和细胞死亡。以本研究制备的CASPASE-1和CASPASE-3多克隆抗体进行蛋白质印迹实验,检测到肾脏中CASPASE-1和CASPASE-3蛋白的表达水平显著增加,这2个蛋白可能介导了后续的程序性细胞死亡,这与组织病理学的结果一致。本研究成功制备了可特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的兔源和鼠源多克隆抗体,并探究了水体氨氮胁迫对其表达的影响,为深入研究氨氮胁迫下大口黑鲈的程序性细胞死亡机制提供了重要的基础。 展开更多
关键词 大口黑鲈 CASPASE-1 CASPASE-3 原核表达 多克隆抗体 氨氮胁迫
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一株产脂肪酶枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其益生特性分析 被引量：1
2
作者 褚瑞霞 梁书菲 +5 位作者 张慧 王文韬 艾庆辉 麦康森 刘明 万敏 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第S1期16-26,共11页
为筛选出有利于水产动物脂代谢的潜在益生菌,本研究从健康大菱鲆(Scophthalmus maximus)肠道中分离出一株具有高脂肪酶活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为C1。通过脂肪酶活力以及橄榄油降解率对该菌株的油脂分解能力进行检测... 为筛选出有利于水产动物脂代谢的潜在益生菌,本研究从健康大菱鲆(Scophthalmus maximus)肠道中分离出一株具有高脂肪酶活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为C1。通过脂肪酶活力以及橄榄油降解率对该菌株的油脂分解能力进行检测,同时对该菌株进行形态学观察和分子生物学分析,并对其安全性、药物敏感性、耐受性、体外抑菌能力、黏附能力等方面进行评估。研究表明,在含有吐温80和鱼油的琼脂平板上枯草芽孢杆菌C1可产生沉淀圈和水解圈,说明该菌株具有分解油脂的能力;进一步检测发现,枯草芽孢杆菌C1的脂肪酶活力达到(20.47±2.70)U/mL,对橄榄油的降解效率为(45.15±6.34)%。该菌株对卡那霉素、链霉素、庆大霉素等12种抗生素均敏感,使用不同浓度的枯草芽孢杆菌C1水浴斑马鱼(Danio rerio)仔鱼对其存活率未产生显著影响。生理生化实验表明,枯草芽孢杆菌C1可利用大多数碳源,具有较强的自凝集能力和黏附能力。同时,枯草芽孢杆菌C1具有一定的耐酸耐碱能力,70℃下加热10 min后依旧有50%左右的存活率,但该菌株仅对2株大肠杆菌(Escherichia coli MC1061、MG1655)表现出体外抗菌活性。此外,将枯草芽孢杆菌C1培养12 h后取上清液检测其代谢物,发现该菌株产生大量乙酸。上述结果表明,本研究分离筛选到的枯草芽孢杆菌C1安全性能高、有较强的油脂分解能力,该菌株可作为调控鱼类脂质代谢的水产饲料微生态制剂的候选菌株。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 益生菌 脂代谢 脂肪酶 乙酸
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四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系 被引量：33
3
作者 曹俊明 林鼎 +4 位作者 薛华 刘永坚 关国强 田丽霞 毛永庆 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期102-111,共10页
采用11种添加不同水平的蛋氨酸（Met）、胆碱（Ch）、甜菜碱（Bet）和大豆卵磷脂（Lec）的饲料饲养初始体重约15g的草鱼，研究了它们降低草鱼肝胰脏脂质积累的相互替代关系。11种饲料中这四种物质的含量分别为（％）：（1）1．1Met0．0... 采用11种添加不同水平的蛋氨酸（Met）、胆碱（Ch）、甜菜碱（Bet）和大豆卵磷脂（Lec）的饲料饲养初始体重约15g的草鱼，研究了它们降低草鱼肝胰脏脂质积累的相互替代关系。11种饲料中这四种物质的含量分别为（％）：（1）1．1Met0．08Ch，（2）1．1Met0．33Ch，（3）1．3Met0．23Ch，（4）1．5Met0．13Ch，（5）1．3Met0．13Ch，（6）1．3Met0．13Ch0．08Bet，（7）1．3Met0．13Ch0．1Bet，（8）1．3Met0．13Ch0．12Bet，（9）1．3Met0．13Ch4．0Lec，（10）1．3Met0．13Ch6．0Lec和（11）1．3Met0．13Ch8．0Lec。52d后测定草鱼的相对生长率、饲料转化率和蛋白质效率，分析肝胰脏的脂质含量、组成和脂肪酸构成，测定血清脂蛋白和脂质含量以及全鱼和肌肉的营养成份组成。实验结果表明，（1）与摄食合1．1％蛋氨酸和0．08％胆碱饲料的第1组草鱼相比，第2组—第11组这10组草鱼的相对生长率升高17—73％，并且第10组显著高于第1组。（2）草鱼肝胰脏的脂质含量以第1组最高，增加蛋氨酸含量和添加胆碱、甜菜碱或大豆卵磷脂使肝胰脏脂质含量下降26—74％。在摄食蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和大豆卵磷脂组合不同的一些饲料组草鱼之间，肝胰脏脂质含量存在显著差异，表现出四种物质间存在相互加强和替代关系。（3）? 展开更多
关键词 蛋氨酸 胆碱 甜菜碱 大豆卵磷脂 肝脏脂质 草鱼
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大黄鱼仔、稚、幼鱼发育阶段的脂肪酸组成及其变化 被引量：28
4
作者 王丹丽 徐善良 +1 位作者 严小军 王怡 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期241-245,共5页
研究了大黄鱼早期主要发育阶段（前仔鱼期、后仔鱼期、稚鱼、幼鱼）体内脂肪酸的组成及含量的变化规律，并重点比较了发病稚鱼与正常稚鱼的脂肪酸组成。用GC／MS法共检测到24种脂肪酸，且种类随发育而递增，其中饱和脂肪酸（SFA）12种... 研究了大黄鱼早期主要发育阶段（前仔鱼期、后仔鱼期、稚鱼、幼鱼）体内脂肪酸的组成及含量的变化规律，并重点比较了发病稚鱼与正常稚鱼的脂肪酸组成。用GC／MS法共检测到24种脂肪酸，且种类随发育而递增，其中饱和脂肪酸（SFA）12种，单不饱和脂肪酸（MUFA）6种，多不饱和脂肪酸（PUFA）6种。分析结果表明：大黄鱼鱼苗内源性营养阶段以饱和脂肪酸C14：0、C16：0及单不饱和脂肪酸C16：1、C18：1作为能量代谢的主要来源；必需脂肪酸C20：4（n-6）（AA）在鱼苗开口前就已存在，而DHA和EPA摄食后才被检测到，其含量受饵料种类的影响，DHA含量变化范围为7．26％～25．36％，EPA为3．41％～8．40％。与同期正常鱼苗相比，病鱼苗的主要脂肪酸DHA、EPA含量显著降低，DHA不足前者的1／3，而AA、C18：1、C18：2、C18：3含量和EPA／DHA的比值显著增加，分别是前者的1．5—3倍。导致稚鱼阶段“胀鳔病”发生的内在原因可能是DHA和EPA的缺乏以及AA偏高。研究结果为预防“胀鳔”鱼苗的发生提供了理论依据。 展开更多
关键词 大黄鱼 仔鱼 稚鱼 幼鱼 脂肪酸 胀鳔病
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脂肪肝病变大黄鱼肝脏脂肪酸组成、代谢酶活性及抗氧化能力的研究 被引量：18
5
作者 曾端 麦康森 艾庆辉 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期542-546,共5页
脂肪肝病变在人工养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)中非常普遍,本试验研究了大黄鱼脂肪肝的发生机制,为寻找解决大黄鱼脂肪肝的有效途径提供基础资料。试验鱼取自中国东海,养殖方式和饲料来源相同,根据肉眼和组织学观察分为正常肝脏、... 脂肪肝病变在人工养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)中非常普遍,本试验研究了大黄鱼脂肪肝的发生机制,为寻找解决大黄鱼脂肪肝的有效途径提供基础资料。试验鱼取自中国东海,养殖方式和饲料来源相同,根据肉眼和组织学观察分为正常肝脏、轻微脂肪肝和严重脂肪肝3类。分别测定了正常大黄鱼和具有脂肪肝症状的大黄鱼肝脏总脂脂肪酸组成的变化、相应脂肪酸合成酶、抗氧化酶以及丙二醛含量的变化。试验结果显示,随着大黄鱼脂肪肝症状严重程度增加,肝脏总脂饱和脂肪酸和n-3多不饱和脂肪酸比例显著降低(P<0.05),单不饱和脂肪酸比例显著上升(P<0.05)。其中严重脂肪肝花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)比例较正常鱼分别降低了89%,79%和78%。严重脂肪肝大黄鱼的异柠檬酸脱氢酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶活性显著高于正常鱼(P<0.05);轻微脂肪肝鱼的转氨酶活性显著低于正常鱼(P<0.05);具有脂肪肝症状的大黄鱼超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性均高于正常鱼。丙二醛含量则随大黄鱼脂肪肝病变程度加剧而显著增加(P<0.05)。通过分析认为,过量单不饱和脂肪酸沉积在肝脏中,导致脂肪酸合成代谢发生紊乱,可能是造成大黄鱼脂肪肝的主要原因;肝脏ARA含量大量减少使脂肪肝大黄鱼抗应激能力降低,而肝脏脂肪酸过氧化程度升高,进一步破坏肝脏的正常功能。 展开更多
关键词 大黄鱼 脂肪肝 脂肪酸 酶 MDA
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幼建鲤肌醇缺乏的病理组织学观察及抗氧化能力和肠道菌群变化 被引量：6
6
作者 姜维丹 刘扬 +1 位作者 冯琳 周小秋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期64-69,共6页
将300尾健康幼建鲤随机分为2组,分别饲喂肌醇含量为163.5 mg/kg(缺乏组)和535.8 mg/kg(对照组)的饲粮,研究了肌醇缺乏对幼建鲤组织器官病理学及抗氧化能力和肠道菌群的影响。结果显示,肌醇缺乏引起幼建鲤皮肤和鳍条糜烂,出现肠绒毛变短... 将300尾健康幼建鲤随机分为2组,分别饲喂肌醇含量为163.5 mg/kg(缺乏组)和535.8 mg/kg(对照组)的饲粮,研究了肌醇缺乏对幼建鲤组织器官病理学及抗氧化能力和肠道菌群的影响。结果显示,肌醇缺乏引起幼建鲤皮肤和鳍条糜烂,出现肠绒毛变短和失去正常结构、脾和头肾含铁血黄素沉积、后肾肾小管变形、胰腺酶原颗粒减少、肝细胞空泡变性等病理学改变;抗氧化酶活性和自由基清除能力降低,氧化产物增加(P<0.05);肠道嗜水气单胞菌增加,乳酸菌减少(P<0.05)。表明,肌醇缺乏会造成水生动物组织器官不同程度的病理损伤、抗氧化能力下降和肠道菌群改变。 展开更多
关键词 肌醇 建鲤 病理学 抗氧化 肠道菌群 缺乏
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鲤硒缺乏的病理学 被引量：5
7
作者 汪开毓 彭成卓 +1 位作者 金明昌 黄锦炉 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期103-111,共9页
将健康幼鲤360尾设置3个相同平行处理,每个处理用鱼120尾,随机分为四组,分别投以0、0.15、0.30和0.45 mg/kg硒水平的饲料,各试验组的发病率和死亡率与日粮中硒含量高低呈负相关,其发病率分别为46.7%、33.3%、13.3%和0%,死亡率分别为26.7... 将健康幼鲤360尾设置3个相同平行处理,每个处理用鱼120尾,随机分为四组,分别投以0、0.15、0.30和0.45 mg/kg硒水平的饲料,各试验组的发病率和死亡率与日粮中硒含量高低呈负相关,其发病率分别为46.7%、33.3%、13.3%和0%,死亡率分别为26.7%、16.7%、6.7%和0%。病鱼出现特征性的"瘦背症"和脊柱弯曲等症状。组织学上最突出的变化表现为营养性肌病、营养性肝病、胰腺的变性、坏死等多器官组织的退行性变化。超微结构上,骨骼肌纤维、肝细胞和肾小管上皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂,甚至发生溶解,整个线粒体呈囊泡状。硒缺乏幼鲤血液中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性升高,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化物歧化酶(SOD)活性降低,丙二醛(MDA)含量升高。 展开更多
关键词 鲤 硒缺乏 病理学
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养殖鱼类脂肪肝研究概况 被引量：22
8
作者 王兴强 段青源 +1 位作者 麦康森 张百刚 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期36-39,共4页
关键词 养殖鱼类 脂肪肝 研究概况 病变
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鱼体内锌、镉和核酸的变化及其相互关系研究 被引量：8
9
作者 甘居利 吴光权 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期98-100,共3页
关键词 草鱼 锌 镉 核酸 相关分析
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幼建鲤维生素B6缺乏的病理组织学观察及消化和免疫指标变化 被引量：2
10
作者 胡凯 何伟 +2 位作者 刘扬 冯琳 周小秋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1080-1085,共6页
选取450尾健康幼建鲤,随机分成3组,每组3个重复,分别饲喂维生素B6含量为0.20、1.71和6.32 mg/kg的饵料,研究了维生素B6缺乏对幼建鲤组织器官病理学变化及消化能力和非特异性免疫能力的影响。试验结果显示,维生素B6缺乏组的幼建鲤死亡率... 选取450尾健康幼建鲤,随机分成3组,每组3个重复,分别饲喂维生素B6含量为0.20、1.71和6.32 mg/kg的饵料,研究了维生素B6缺乏对幼建鲤组织器官病理学变化及消化能力和非特异性免疫能力的影响。试验结果显示,维生素B6缺乏组的幼建鲤死亡率增加,出现肝细胞溶解,肠绒毛失去正常结构,脾拟淋巴细胞减少,头肾含铁血黄素沉积,肾小管上皮细胞变性、坏死,心肌纤维间隙增宽等病理变化;肝、胰消化酶活力和非特异性免疫指标显著下降(P<0.01)。表明,维生素B6缺乏会造成水生动物组织器官不同程度的病理损伤,消化能力和非特异性免疫力降低,死亡率增加。 展开更多
关键词 幼建鲤 维生素B6缺乏 病理学 消化酶活力 免疫能力
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养殖鱼类脂肪肝及防治研究进展 被引量：11
11
作者 杨鸿昆 黄凯 阮栋俭 《水利渔业》 北大核心 2007年第1期4-6,共3页
脂肪肝是最常见的弥漫性肝病之一。患脂肪肝的鱼肌肉脂肪含量明显升高,品质下降。简述鱼类脂肪肝的症状及病理变化、形成机制和影响因素,综合养殖鱼类抗脂肪肝因子的研究成果,为防止养殖鱼类的脂肪肝病变、提高养殖鱼的品质和养殖效益... 脂肪肝是最常见的弥漫性肝病之一。患脂肪肝的鱼肌肉脂肪含量明显升高,品质下降。简述鱼类脂肪肝的症状及病理变化、形成机制和影响因素,综合养殖鱼类抗脂肪肝因子的研究成果,为防止养殖鱼类的脂肪肝病变、提高养殖鱼的品质和养殖效益提供参考。 展开更多
关键词 鱼类 脂肪肝 防治 研究进展
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水产动物B族维生素营养研究方法进展 被引量：7
12
作者 朱伟 麦康森 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期373-378,共6页
关键词 水产动物 营养 B族维生素 研究方法
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鱼类维生素C缺乏症研究进展 被引量：4
13
作者 王利 汪开毓 《动物医学进展》 CSCD 2003年第2期31-33,共3页
维生素C是动物生长、代谢及维持正常生理机能所必需的营养要素,并且在恢复组织创伤和抵御疾病侵袭等方面具有重要作用。缺乏维生素C时,鱼类生长缓慢,脊柱弯曲,皮肤及内脏出血等。本文概述了鱼类缺乏VC的原因、症状、病理变化,并提出预... 维生素C是动物生长、代谢及维持正常生理机能所必需的营养要素,并且在恢复组织创伤和抵御疾病侵袭等方面具有重要作用。缺乏维生素C时,鱼类生长缓慢,脊柱弯曲,皮肤及内脏出血等。本文概述了鱼类缺乏VC的原因、症状、病理变化,并提出预防措施。 展开更多
关键词 鱼类 症状 预防 病理变化 病因 维生素C缺乏症
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鱼类营养代谢病 被引量：3
14
作者 高红梅 王明学 张国辉 《水利渔业》 北大核心 2004年第2期67-69,共3页
营养代谢病包括新陈代谢障碍病和营养缺乏病。综述了几种常见的鱼类营养代谢病 ,如鱼类的脂肪肝病、营养性障碍综合症、胆囊结石症、鲤鱼出血病、罗非鱼越冬障碍症等的病因、发病机理、病鱼症状以及防治措施。
关键词 鱼类 营养代谢病 新陈代谢障碍病 营养缺乏病 脂肪肝病 胆囊结石症 鲤鱼 出血病
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鱼类营养性疾病的研究发展 被引量：2
15
作者 刘艳辉 祖岫杰 《饲料工业》 北大核心 1996年第10期16-18,共3页
鱼类营养性疾病的研究发展吉林省水产科学研究所刘艳辉，祖岫杰近年来，集约化高密度的水产业发展迅猛，因而需要大量的人工配合饲料。人工饲料的配制，需要营养全面，才能使鱼类健康、快速地生长。最适合的鱼类配合饲料应含有蛋白质、... 鱼类营养性疾病的研究发展吉林省水产科学研究所刘艳辉，祖岫杰近年来，集约化高密度的水产业发展迅猛，因而需要大量的人工配合饲料。人工饲料的配制，需要营养全面，才能使鱼类健康、快速地生长。最适合的鱼类配合饲料应含有蛋白质、糖、脂肪、矿物质和维生素等营养成分... 展开更多
关键词 鱼类 营养性疾病 研究进展
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浅谈鱼类的营养性疾病 被引量：1
16
作者 梁萌青 钱伟靖 《饲料工业》 北大核心 1998年第8期33-36,共4页
关键词 鱼类 营养性疾病 症状 营养缺乏 营养过剩
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浅谈鱼虾营养性疾病 被引量：1
17
作者 姜金忠 《科学养鱼》 北大核心 2006年第3期77-77,共1页
关键词 营养性疾病 鱼虾 人工配合饲料 天然饲料 营养成分 碳水化合物 饲料配制 合理搭配 生长 蛋白质
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鱼虾营养缺乏症的诊断及防治措施 被引量：1
18
作者 蔡春芳 凌去非 《水利渔业》 1999年第4期40-41,47,共3页
水产动物某种营养素摄入不足，会导致生长速度下降，饲料转化率降低，抗逆性差，骨骼畸形，死亡率增高等症状。不同营养素缺乏表现出的症状有所不同。集约化养殖条件下，为了防治营养缺乏症，适当补充天然饵料是行之有效的方法。
关键词 营养缺乏症 鱼 虾 诊断 防治
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鱼类应激性出血病病因及防治研究 被引量：2
19
作者 袁万安 《内陆水产》 1998年第7期4-5,共2页
通过调查对比，查证有关资料，从流行方式、病血病状、内脏解剖及药物试验，饲料配方的调整等方面对鱼类应激性出血病病因及防治进行了研究。鱼类应激性出血病，是属于营养性疾病，而非传染性疾病；通过调整饲料配方和抗应激药物的治疗... 通过调查对比，查证有关资料，从流行方式、病血病状、内脏解剖及药物试验，饲料配方的调整等方面对鱼类应激性出血病病因及防治进行了研究。鱼类应激性出血病，是属于营养性疾病，而非传染性疾病；通过调整饲料配方和抗应激药物的治疗，可收到良好效果。 展开更多
关键词 鱼类 应激性出血病 病因 防治
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鳗鱼营养性疾病
20
作者 林建斌 朱庆国 《中国饲料》 北大核心 2000年第8期23-24,共2页
关键词 鳗鱼营养性疾病 蛋白质 营养平衡 脂类 维生素
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