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大口黑鲈弹状病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：3
1
作者 孔明慧 梁红茹 +5 位作者 李宁求 林强 牛银杰 罗霞 马宝福 付小哲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期379-384,共6页
为建立快速、敏感的大口黑鲈弹状病毒(MSRV)流行株Taq Man荧光定量PCR (qPCR)方法,本研究采用NCBI分析MSRV流行株N基因的保守序列,设计特异性引物和Taq Man探针,以构建的并经PCR和测序鉴定正确的重组质粒标准品p MD18-MSRV-N为模板,通... 为建立快速、敏感的大口黑鲈弹状病毒(MSRV)流行株Taq Man荧光定量PCR (qPCR)方法,本研究采用NCBI分析MSRV流行株N基因的保守序列,设计特异性引物和Taq Man探针,以构建的并经PCR和测序鉴定正确的重组质粒标准品p MD18-MSRV-N为模板,通过优化各反应条件初步建立MSRV的Taq Man q PCR检测方法。结果显示,建立的Taq Man q PCR方法标准曲线的R2为0.9906,质粒标准品在6.79×10^(8)拷贝/μL~6.79×10^(2)拷贝/μL范围内与Ct值均存在较好的线性关系。采用该方法检测MSRV及相关病毒,评估该方法的特异性,结果显示,该方法可以特异性检测MSRV,而草鱼出血病病毒、神经坏死病毒、鲤春病毒血症病毒、大口黑鲈双RNA病毒、鳜蛙虹彩病毒、传染性脾肾坏死病毒、石斑鱼虹彩病毒、大口黑鲈蛙虹彩病毒等8种常见鱼类病毒检测结果均为阴性;采用建立的方法检测不同浓度的质粒标准品(6.79×10^(8)拷贝/μL~6.79×10^(1)拷贝/μL),评估该方法的敏感性,结果显示,该方法的检测限为6.79×10^(2)拷贝/μL,比文献中的常规PCR方法敏感1 000倍;以不同批次或同一批次提取的不同浓度的质粒标准品作为模板,分别利用该方法检测,评估该方法的重复性,结果显示,该方法批内和批间重复性试验的变异系数均小于2%。采用该方法和文献中的常规PCR同时检测71份临床发病的大口黑鲈、鳜鱼、鲮鱼组织样品,结果显示阳性率为16.9%(12/71),阴性率为83.1%(59/71),且阳性样品均是从发病大口黑鲈的组织样品中检测到,而发病的鳜鱼、鲮鱼组织样品中均未检测到该病毒;常规PCR方法的阳性率为9.9%(7/71),阴性率为90.1%(64/71),二者的总符合率为93.0%。本研究建立的MSRV Taq Man q PCR方法特异性强、敏感性高、重复性和准确性均较好,可用于大口黑鲈临床样品的检测,为MSRV的快速检测提供了可行的技术手段。 展开更多
关键词 大口黑鲈弹状病毒 Taq Man荧光定量PCR N基因
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鱼类应激反应的分子机理及防治措施综述 被引量：5
2
作者 陈琼汝 高育冉 +4 位作者 赵悦 王壬 陈浩铭 石九四 刘羽鸿 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第3期27-34,共8页
生物体受到外界因素刺激时会产生应激反应,是生物适应性的一种表现形式和其赖以生存、发展的基础。鱼类是动物蛋白的重要来源,随着渔业集约化养殖的高度发展和生态环境的变化,鱼类面临的环境压力增加。适度应激会对机体的免疫功能和适... 生物体受到外界因素刺激时会产生应激反应,是生物适应性的一种表现形式和其赖以生存、发展的基础。鱼类是动物蛋白的重要来源,随着渔业集约化养殖的高度发展和生态环境的变化,鱼类面临的环境压力增加。适度应激会对机体的免疫功能和适应能力起促进作用,但长期或过强的应激会引起鱼体发生生理和行为的紊乱,导致生长缓慢、免疫力下降,引发疾病或死亡,从而严重损害经济效益。因此,了解鱼类应激反应,对鱼类压力及时评估,有助于渔业养殖持续和绿色的发展。本文根据国内外近年来有关鱼类应激和防护措施的研究成果进行归纳总结,主要阐述应激源对鱼类特异性和非特异性免疫系统、鱼类热休克蛋白、鱼类生理指标(葡萄糖、甘油三酯、胆固醇和蛋白含量)、鱼体损伤的评价因子的影响进行综述,并进一步提出在养殖过程中从改善水质、中草药及其活性成分的使用等方面缓解鱼体应激反应的防护措施。最后指出现阶段对鱼类特异性免疫系统、热休克蛋白的研究还不够深入,以期为今后鱼类集约化养殖中应激反应的研究和防护措施提供参考。 展开更多
关键词 鱼类 应激反应 分子机理 防治措施 免疫系统
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鳜弹状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：5
3
作者 梁红茹 蔡秀珠 +7 位作者 范芷仪 林强 付小哲 刘礼辉 黄志斌 牛银杰 林蠡 李宁求 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期929-934,共6页
为建立快速、准确检测鳜弹状病毒(SCRV)的TaqMan荧光定量PCR方法,本实验根据弹状病毒N基因中的保守序列,设计合成了一对特异性引物和TaqMan探针,以构建的标准质粒为模板,经条件优化后建立了SCRV的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并对该方法... 为建立快速、准确检测鳜弹状病毒(SCRV)的TaqMan荧光定量PCR方法,本实验根据弹状病毒N基因中的保守序列,设计合成了一对特异性引物和TaqMan探针,以构建的标准质粒为模板,经条件优化后建立了SCRV的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法标准曲线的相关系数为0.999,质粒标准品在1×10~8拷贝/μL^1×10~1拷贝/μL范围内有较好的线性关系;该方法可以特异性检测SCRV,但对草鱼出血病病毒(GCRV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、罗非鱼湖病毒(TiLV)、石斑鱼虹彩病毒(SGIV)、传染性脾肾坏死病(ISKNV)、神经坏死病毒(NNV)及鲤春病毒血症病毒(SVCV)等7种常见鱼类病毒检测结果均为阴性;最低可检测到的质粒标准品浓度为102拷贝/μL,比常规PCR方法灵敏100倍;该方法组内与组间变异系数均小于2%。采用该方法对35份临床样品进行检测,结果显示阳性检出率为31%,而普通PCR阳性检出率为14%,该方法检出率比常规PCR高。本研究建立的SCRV的TaqMan荧光定量PCR检测方法为SCRV的快速检测提供了可行的技术手段。 展开更多
关键词 鳜鱼弹状病毒 N基因 TaqMan荧光定量PCR
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新开发养鱼区鱼类非寄生疾病及防治 被引量：1
4
作者 温海深 马国文 刘振琦 《水产养殖》 CAS 1995年第1期25-27,共3页
自1990年以来,西辽河流域部分地区淡水渔业发展很快,取得了一定的经济效益和社会效益,但同时也存着一些问题,如渔业起步较晚,池塘水质管理较差,放养和越冬鱼类密度不合理,饲料配方不够科学等等。
关键词 鱼病 非寄生性疾病 防治 新开发养鱼区
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特殊情况引起鱼浮头的处理方法 被引量：1
5
作者 张怀礼 《渔业致富指南》 2000年第12期25-25,共1页
在生产实践中，人们已对鱼浮头现象给予了足够的重视，但有些特殊情况引起的浮头，人们往往不能正确对待。
关键词 鱼 浮头现象 水质 酸性环境 有机悬浮物
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高坝导致的河流气体过饱和及其对鱼类的影响 被引量：41
6
作者 谭德彩 倪朝辉 +2 位作者 郑永华 李立银 李云峰 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2006年第3期56-59,共4页
高坝泄洪是导致水中气体过饱和的主要因素,不仅能致鱼类气泡病,而且会给水生生物带来严重的危害。本文主要就气体过饱和及气泡病做了具体描述,首先叙述了气体过饱和的研究概况、导致气体过饱和的原因和水温、压强等影响气体过饱和的因素... 高坝泄洪是导致水中气体过饱和的主要因素,不仅能致鱼类气泡病,而且会给水生生物带来严重的危害。本文主要就气体过饱和及气泡病做了具体描述,首先叙述了气体过饱和的研究概况、导致气体过饱和的原因和水温、压强等影响气体过饱和的因素,具体分析了鱼类不同生活阶段、液静压、温度、间歇性的暴露、探知和躲避能力导致其对气体过饱和忍耐大小的状况,并对气泡病的内部损伤如血液中形成的气栓、外部症状如身体各个部位形成的气泡做了具体的描述。 展开更多
关键词 高坝 气体过饱和 鱼类 气泡病
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中华鳖药源性肝病模型的构建及其病理学观察 被引量：12
7
作者 陈彦伶 牟群 +4 位作者 潘连德 刘译浓 王爱卿 郑佳瑞 邱进 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期61-66,共6页
根据预试验结果,通过对人工饲养的中华鳖Trionyx sinensis投喂含2 g/kg(饲料)诺氟沙星和10 g/kg(饲料)土霉素的药饵,以及设定空白对照组(共8个试验组),构建中华鳖药源性肝病模型,运用组织与细胞病理学方法,研究患药源性肝病的中华鳖组... 根据预试验结果,通过对人工饲养的中华鳖Trionyx sinensis投喂含2 g/kg(饲料)诺氟沙星和10 g/kg(饲料)土霉素的药饵,以及设定空白对照组(共8个试验组),构建中华鳖药源性肝病模型,运用组织与细胞病理学方法,研究患药源性肝病的中华鳖组织显微与亚显微结构的病理变化。结果表明:构建的药源性肝病模型中,诺氟沙星组阳性率最高(31.3%),土霉素组阳性率略低(15.0%),与诺氟沙星组和土霉素组池水相通的对照组阳性率较低(10.0%、5.0%),而4个空白对照组均未发现阳性个体;高剂量和长时间使用两种药物均可导致中华鳖出现典型的"白底板"症状;患药源性肝病的中华鳖肝、脾、肾均有不同程度的病变,其中肝组织病变最为严重,不管是个体还是群体病例的病理过程均符合非寄生性肝病特征。药物致中华鳖肝组织损害的组织病理过程是:在药毒作用下,起初表现为肝组织脂肪变性和炎症反应,肝静脉扩张、分支血液回流受阻,窦状隙扩张,肝淤血严重,体积增大显著,后期肝细胞索先于扩张的肝血窦变性和坏死,最终肝血窦也坏死,肝组织硬变并有肝性血样腹水产生;肝细胞内脂滴越来越多,核固缩变形,线粒体和高尔基体以及内质网膨胀而破碎,细胞膜破碎,炎性细胞数量多,细胞病变与组织病理具有一致性。药源性肝病的转归表明,当致病因素(大剂量药物饵料)撤销后,中华鳖有较强的恢复性,且土霉素组较诺氟沙星组康复的快。 展开更多
关键词 中华鳖 药源性肝病 “白底板”症状 组织与细胞病理学 肝病模型
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先兆流产患者不同给药方式黄体支持的疗效分析 被引量：7
8
作者 黄坚 陈美英 +2 位作者 邓月月 王珏 石一复 《生殖医学杂志》 CAS 2009年第6期524-526,共3页
目的比较黄体支持的不同用药方式对先兆流产治疗的疗效。方法对93例妊娠早期先兆流产患者随机分组,肌注组38例肌注黄体酮(P)针剂,口服组55例口服P胶囊,并选择同期未使用任何药物的健康早孕妇女31例作为对照组,观察肌注组和口服组的保胎... 目的比较黄体支持的不同用药方式对先兆流产治疗的疗效。方法对93例妊娠早期先兆流产患者随机分组,肌注组38例肌注黄体酮(P)针剂,口服组55例口服P胶囊,并选择同期未使用任何药物的健康早孕妇女31例作为对照组,观察肌注组和口服组的保胎成功率;测定治疗前后血清P,雌二醇(E_2)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的变化,并与对照组进行比较。结果(1)93例患者中共78例保胎成功,肌注组保胎成功率87%,口服组82%,两组比较无显著差异(P>0.05)。(2)78例保胎成功患者初次治疗一周前后血清P、E_2、hCG的日增长率的结果,P的日增长率口服组显著高于对照组和肌注组,肌注组显著高于对照组(P<0.05);E_2和hCG的日增长率组间两两比较均无显著差异(P>0.05)。(3)治疗1周后继续用药患者平均每隔1周测定P、E_2、hCG的变化,两组患者三项指标日增长率比较均无显著差异(P均>0.05)。结论口服和肌注P对治疗先兆流产均有良好疗效。口服比肌注血清P值增长快,但相对生物利用度低,因此不能仅凭血清P浓度来判断药物治疗效果,结合E_2、hCG以及B超监测等进行综合判断,可更客观全面地评价妊娠状态和药物疗效。 展开更多
关键词 治疗效果 流产 先兆 绒毛膜促性腺激素 药物 酮类 肌肉注射 生物利用度
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分子氨对黄河鲤鱼血清抗氧化反应的影响 被引量：12
9
作者 张红梅 姜会民 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期88-93,共6页
为了探讨养殖水域中分子氨对水生生物的毒性效应,在前期毒性试验的基础上设置3个试验组(分子氨质量浓度分别为0.071,0.143,0.284mg/L)、1个对照组对黄河鲤鱼(Cyprinus carpio haematopterus Temmink etSchlegel)进行毒性试验,在试验的7,... 为了探讨养殖水域中分子氨对水生生物的毒性效应,在前期毒性试验的基础上设置3个试验组(分子氨质量浓度分别为0.071,0.143,0.284mg/L)、1个对照组对黄河鲤鱼(Cyprinus carpio haematopterus Temmink etSchlegel)进行毒性试验,在试验的7,14,28,35d取样检测,测定试验鱼血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和丙二醛(MDA)质量浓度.结果表明:随着分子氨质量浓度的增加,黄河鲤鱼血清中SOD酶活力呈先升后降的趋势,质量浓度为0.28mg/L时,SOD活力低于对照组,GSH-Px的活力和MDA质量浓度呈现上升的趋势,方差分析表明分子氨极显著地提高血清MDA质量浓度(p<0.01),二者存在剂量—效应关系;随着分子氨暴露时间的延长,SOD活力呈下降趋势,MDA质量浓度呈上升趋势,方差分析差异不显著(p>0.05).在试验质量浓度范围内分子氨可降低鲤鱼抗氧化能力,且MDA可作为一种有效的生物标志物评价分子氨的毒性. 展开更多
关键词 分子氨 黄河鲤鱼 血清 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛
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喹乙醇和分子氨对鲤幼鱼血清SOD和MDA的影响 被引量：10
10
作者 王琨 韩英 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第2期206-210,共5页
文章采用双因子多水平试验设计,研究喹乙醇和分子氨同时作用对鲤血清SOD和MDA的影响。喹乙醇在饲料中的添加水平为0,200,500,1500 mg.kg-1,水体中分子氨浓度为0.069,0.137,0.411 mg.L-1。结果显示,试验组鲤血清SOD活性在214.386～551.13... 文章采用双因子多水平试验设计,研究喹乙醇和分子氨同时作用对鲤血清SOD和MDA的影响。喹乙醇在饲料中的添加水平为0,200,500,1500 mg.kg-1,水体中分子氨浓度为0.069,0.137,0.411 mg.L-1。结果显示,试验组鲤血清SOD活性在214.386～551.137 U.mL-1之间,较对照组(631.374 U.mL-1)显著降低(P<0.05);MDA含量在2.427～5.572 nmol.L-1之间,较对照组(1.756 nmol.L-1)显著升高(P<0.05)。多重比较显示,喹乙醇添加量达到500 mg.kg-1、分子氨浓度达到0.137 mg.L-1时,SOD活性的下降并趋于稳定;当喹乙醇和分子氨浓度达到1 500 mg.kg-1,0.411 mg.L-1时,MDA含量显著上升(P<0.05)。喹乙醇与分子氨的交互作用显著。试验结果表明,分子氨和喹乙醇可直接影响鲤幼鱼体内的脂质过氧化水平,且这种氧化损伤的程度与二者浓度密切相关。 展开更多
关键词 喹乙醇 分子氨 鲤幼鱼 SOD MDA
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鱼类对溶解气体过饱和水体的敏感性分析 被引量：20
11
作者 董杰英 杨宇 +1 位作者 韩昌海 霍宝良 《水生态学杂志》 北大核心 2012年第3期85-89,共5页
大坝泄洪可携带大量空气进入水中,导致下游河道出现溶解气体过饱和,给水生生物特别是鱼类的生存造成威胁。通过自行设计的室内试验装置,研究了影响溶解气体过饱和度的因素及不同鱼类对气体溶解过饱和的敏感性。鱼类暴露在溶解气体过饱... 大坝泄洪可携带大量空气进入水中,导致下游河道出现溶解气体过饱和,给水生生物特别是鱼类的生存造成威胁。通过自行设计的室内试验装置,研究了影响溶解气体过饱和度的因素及不同鱼类对气体溶解过饱和的敏感性。鱼类暴露在溶解气体过饱和环境中易出现突眼、充血和气泡等气泡病症状。鲢、鳙和鳊在溶解气体含量高的水体中容易患气泡病,草鱼和鲫稍次,基本可以忽略溶解气体过饱和对黄颡鱼和鲶的影响。 展开更多
关键词 溶解气体过饱和 鱼类气泡病 模型试验
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NO_2^--N对鱼类毒性的研究概况 被引量：10
12
作者 王明学 吴卫东 《中国水产科学》 CAS CSCD 1997年第5期85-90,共6页
ＮＯ－２－Ｎ对鱼类毒性的研究概况ＡＳＵＲＶＥＹＯＦＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＴＨＥＥＦＦＥＣＴＯＦＮＩＴＲＩＴＥＴＯＸＩＣＩＴＹＯＮＦＩＳＨ王明学吴卫东（华中农业大学水产学院，武汉４３００７０）ＷａｎｇＭｉｎｇｘｕｅＷｕＷ... ＮＯ－２－Ｎ对鱼类毒性的研究概况ＡＳＵＲＶＥＹＯＦＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＴＨＥＥＦＦＥＣＴＯＦＮＩＴＲＩＴＥＴＯＸＩＣＩＴＹＯＮＦＩＳＨ王明学吴卫东（华中农业大学水产学院，武汉４３００７０）ＷａｎｇＭｉｎｇｘｕｅＷｕＷｅｉｄｏｎｇ（ＦｉｓｈｅｒｉｅｓＣ... 展开更多
关键词 NO2^--N 毒性 鱼病
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鲤鱼喹乙醇亚急性中毒的组织病理学研究 被引量：3
13
作者 彭济昌 尹海富 +1 位作者 陈伟兴 韩英 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期52-57,共6页
选用添加6种不同浓度喹乙醇(0,200,500,900,1 200,1 500 mg.kg-1)的饲料,对健康的镜鲤进行了42 d的亚急性毒性试验。观察受试鱼心脏、肝脏、脾脏、中肾、肠道等组织的病理学变化。除对照组和200mg.kg-1处理组外,其他各处理组均表现出不... 选用添加6种不同浓度喹乙醇(0,200,500,900,1 200,1 500 mg.kg-1)的饲料,对健康的镜鲤进行了42 d的亚急性毒性试验。观察受试鱼心脏、肝脏、脾脏、中肾、肠道等组织的病理学变化。除对照组和200mg.kg-1处理组外,其他各处理组均表现出不同程度的心肌出血、断裂和坏死,肝胰脏轻度充血、水肿和坏死,脾脏充血,肾小球肿大,血管内皮细胞坏死脱落,间质内充血,肠绒毛上皮下充血,固有层细胞坏死,肠绒毛融合等症状,随着试验时间的延长,症状趋向明显。 展开更多
关键词 喹乙醇 镜鲤 病理学
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药物不良反应介绍 被引量：5
14
作者 侯骏骥 张念凯 《食品与药品》 CAS 2005年第09A期71-72,共2页
关键词 药物不良反应 用药不当 治疗作用 生理机能 ADR 超剂量 WHO 疾病 药品
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鱼种昏迷急救法
15
作者 吴天靖 《中国农村小康科技》 2004年第1期25-25,共1页
关键词 鱼种 昏迷 急救 水温 呼吸频率 水波 鱼体运动 血液循环 气压
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夏秋季节防鱼浮头
16
作者 侯传宝 《内陆水产》 2001年第8期36-36,共1页
关键词 夏季 秋季 鱼类 浮头 原因分析 预测 预防 急救
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冬季鱼死亡原因及预防措施
17
作者 李凯 《渔业致富指南》 2000年第22期41-41,共1页
鱼的冬季管理，在生产中是不容忽视的一个重要环节。在越冬期间，若管理不善，常会导致鱼类因缺氧、患病、消瘦而大批死亡，造成不必要的经济损失。所以，在此阶段要根据死鱼的原因，加强冬季管理，是提高鱼产量的措施之一.
关键词 鱼 冬季管理 死亡原因 预防措施 产量
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目前果树用药存在的问题及克服方法 被引量：2
18
作者 李仁芳 王丛森 +2 位作者 张艳春 林洪荣 李丰国 《落叶果树》 2006年第2期58-59,共2页
关键词 克服方法 用药不当 果树 农药市场 危害程度 果品产量 药剂防治 果农 病虫 果园
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中草药对鱼类呼吸和浮头的影响 被引量：2
19
作者 陈光荣 金燮理 +1 位作者 肖克宇 邓时铭 《内陆水产》 2003年第11期38-39,共2页
在相同条件下,呼吸频率的高低和鱼出现浮头时间的迟早,可反映鱼对水中溶氧适应力的大小。芙蓉鲫在两次服用中草药及草鱼持续服用一段时间中草药后,其呼吸频率均比对照组鱼低(平均低8次/分)。从试验开始到鱼出现浮头的时间,试验鱼比对照... 在相同条件下,呼吸频率的高低和鱼出现浮头时间的迟早,可反映鱼对水中溶氧适应力的大小。芙蓉鲫在两次服用中草药及草鱼持续服用一段时间中草药后,其呼吸频率均比对照组鱼低(平均低8次/分)。从试验开始到鱼出现浮头的时间,试验鱼比对照组晚(6～11分钟),同时,出现浮头时水中的溶解氧试验组比对照组低。 展开更多
关键词 中草药 鱼类 呼吸频率 浮头 芙蓉鲫 草鱼 溶解氧 药饵 鱼体机能
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电力机车雾雪天气车顶高压电器闪络原因及对策 被引量：4
20
作者 郭小华 《郑州铁路职业技术学院学报》 2008年第1期5-6,共2页
关键词 电力机车 不良天气 闪络原因 高压电器 车顶 铁路运输生产 安全管理工作 闪络事故
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