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利用YOLOv11识别罗非鱼等多种鱼类的链球菌病实验
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作者 袁圣 文露婷 +3 位作者 罗洪林 黄婷 潘逢文 吴文德 《海洋与渔业》 2025年第4期64-65,共2页
鱼类链球菌病是由链球菌属细菌(如宋内氏链球菌等)引发的一类急性细菌性传染病,广泛存在于我国南方及其他亚热带地区的淡水养殖系统中。近年来,随着高密度、集约化养殖模式的发展,该病呈现出传播迅猛、暴发频繁、致死率高的趋势,严重威... 鱼类链球菌病是由链球菌属细菌(如宋内氏链球菌等)引发的一类急性细菌性传染病,广泛存在于我国南方及其他亚热带地区的淡水养殖系统中。近年来,随着高密度、集约化养殖模式的发展,该病呈现出传播迅猛、暴发频繁、致死率高的趋势,严重威胁着鲈鱼、罗非鱼、草鱼、斑点叉尾鮰等主要经济鱼类的健康养殖与产业安全。其典型临床症状包括眼球肿大出血、鳍条充血甚至坏死、鱼体侧翻游动、脑膜出血等,若未能及时识别和干预,极易导致大规模死亡事件,造成数十万元甚至上百万元的直接经济损失。 展开更多
关键词 罗非鱼 YOLOv11 急性细菌性传染病 宋内氏链球菌
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基于转录组分析的蛙虹彩病毒减毒株对大口黑鲈的免疫调控机制 被引量:1
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作者 楚馨 陈静 +4 位作者 高铭悦 蔺凌云 姚嘉赟 沈锦玉 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第6期62-75,共14页
实验室通过连续传代致弱获得一株具有良好免疫保护效果的大口黑鲈蛙虹彩病毒减毒株(LMBV-ZJDSS-F110)。为评估该减毒株对鱼体的免疫作用,采集免疫后1d、4d、7d及28d的肝、脾、头肾组织样本,进行组织病理学和病毒载量分析,结果发现该减... 实验室通过连续传代致弱获得一株具有良好免疫保护效果的大口黑鲈蛙虹彩病毒减毒株(LMBV-ZJDSS-F110)。为评估该减毒株对鱼体的免疫作用,采集免疫后1d、4d、7d及28d的肝、脾、头肾组织样本,进行组织病理学和病毒载量分析,结果发现该减毒株对鱼体组织的损伤较轻,且病毒载量随时间推移在各组织中下降。此外,为进一步探究该减毒株对大口黑鲈的免疫调控机制,通过对头肾样本的转录组测序(RNAsequencing,RNA-Seq),发现免疫早期(1d和4d)的4979和6891个差异基因主要富集于先天性免疫通路,如细胞因子-细胞因子受体相互作用、胞质DNA感知及凋亡等通路;免疫中后期(7d和28d)的1693和1758个差异基因则主要富集于适应性免疫通路,如T细胞受体、B细胞受体、Fc epsilon RI信号及Th1/Th2细胞分化等通路。此外,代谢通路中半胱氨酸和蛋氨酸代谢,谷胱甘肽代谢通路主要在免疫前期富集,糖酵解/糖异生代谢通路主要在免疫中后期富集。研究筛选IRF3、MX、TRIM25、NAMPT、DHX58、SRC、RSAD2、TMEM38和C4九个基因进行RT-qPCR验证。结果显示转录组测序具有可靠性。研究为大口黑鲈的免疫应答机制提供了新见解,并为疫苗的进一步开发与应用奠定基础。 展开更多
关键词 组织病理 转录组 差异基因 免疫反应 大口黑鲈蛙虹彩病毒
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乌鳢源病原菌的分离、耐药性及基因组特性分析
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作者 谭贵良 戚少含 +4 位作者 李雪雁 林凯文 赵力超 李向丽 吴小禾 《微生物学通报》 北大核心 2025年第4期1724-1741,共18页
【背景】乌鳢(Channa argus)是一种重要的淡水经济鱼类,其养殖业快速发展,但病害侵扰尤其是易发生细菌性疾病,已成为制约其可持续发展的瓶颈。【目的】深入了解乌鳢源病原菌耐药性、致病机制,为病害的预防和控制提供科学指导。【方法】... 【背景】乌鳢(Channa argus)是一种重要的淡水经济鱼类,其养殖业快速发展,但病害侵扰尤其是易发生细菌性疾病,已成为制约其可持续发展的瓶颈。【目的】深入了解乌鳢源病原菌耐药性、致病机制,为病害的预防和控制提供科学指导。【方法】从患病乌鳢病灶部位分离获得了3株病原菌(SY1、SY3、SY7),并对其进行抗生素药物敏感性试验和全基因组测序;根据全基因组测序数据注释病原菌的毒力基因、耐药基因、前噬菌体及前噬菌体携带的毒力基因和抗性基因。【结果】经过16S rRNA基因测序及基因组平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI)分析,菌株SY1、SY3、SY7分别被鉴定为厦门希瓦氏菌(Shewanella xiamenensis)、达卡气单胞菌(Aeromonas dhakensis)和鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)。药物敏感性试验结果显示,这些病原菌对多种抗生素具有耐药性,并且对青霉素、苯唑西林、氨苄西林、红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、万古霉素、林可霉素均表现出抗药性。它们的全基因组大小分别为4895555 bp(G+C含量46.23%)、4853433 bp(G+C含量61.54%)和9294386 bp(G+C含量68.24%)。在病原菌基因组中总共检出毒力基因171个,涉及运动性、黏附、外毒素、效应传递系统、营养和代谢、抗逆性;检测到耐多药类、四环素类、大环内酯类等15种类别的抗生素抗性基因;发现病原菌均携带前噬菌体,但在前噬菌体序列中未检出毒力基因和抗生素抗性基因。【结论】本研究扩展了乌鳢源病原菌耐药性和致病机制的认识,可为乌鳢病害的预防和治疗提供科学依据。 展开更多
关键词 乌鳢 病原菌 药物敏感性 毒力基因 抗生素抗性基因 前噬菌体
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大口黑鲈蛙虹彩病毒传代致弱株免疫效果评价
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作者 高铭悦 楚馨 +4 位作者 刘思玉 姚嘉赟 蔺凌云 沈锦玉 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第6期21-31,共11页
为研究大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth Bass Ranavirus,LMBV)传代致弱毒株LMBV-ZJDSS-F110的特性,研究开展了该病毒的复制效率、毒力、体内病毒载量变化、比较基因组、免疫保护率、免疫后免疫相关基因表达和毒力返强等试验。结果显示:采... 为研究大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth Bass Ranavirus,LMBV)传代致弱毒株LMBV-ZJDSS-F110的特性,研究开展了该病毒的复制效率、毒力、体内病毒载量变化、比较基因组、免疫保护率、免疫后免疫相关基因表达和毒力返强等试验。结果显示:采用FHM培养,F110代次毒滴度可达109.1 TCID50/mL,以剂量108.0 TCID50/mL×0.1 mL注射大口黑鲈,未见死亡。不同代次毒株体内组织病毒载量测试,结果显示:传代毒F5、F45和F110在7d时脾脏和鳃的病毒载量要高于3d,而F90在两时间点的病毒载量变化不显著,表明传代毒F90相较于F45,F110相较于F90都出现了特性改变。不同代次毒株F5与F110比较基因组学分析显示:LMBV-ZJDSSF110出现了10处变异,其中有7处可能引起编码区的变化。将传代弱毒F110通过注射和浸泡免疫大口黑鲈,结果显示108.0 TCID50/mL浓度组都获得了对强毒F5株70%免疫保护率,而头肾中免疫因子(TNF-α、CD8b、IgM、IgT、IFN-γ)基因表达量在免疫后14d达到峰值,且注射组显著高于浸泡免疫组,其中IFN-γ表达量接近对照组的50倍。活体传代毒力返强测试结果显示,F110活体盲传5代未引起死亡。以上研究表明,LMBVZJDSS-F110是一株安全有效的弱毒疫苗株,为大口黑鲈蛙虹彩病毒病的免疫预防提供了路径。 展开更多
关键词 弱毒疫苗 免疫因子 传代致弱 大口黑鲈蛙虹彩病毒 免疫途径
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鳜胆囊寄生两极虫新种的鉴定与系统发育分析
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作者 尹琪 杨医静 +4 位作者 刘宇路 向建国 李德亮 刘新华 余建波 《水生生物学报》 北大核心 2025年第9期22-29,共8页
在湘江湖南株洲段开展鱼类黏孢子虫多样性调查过程中,发现一种寄生于鳜胆囊的黏孢子虫,鱼体未出现典型的致病症状。形态学特征、宿主和寄生部位及分子数据表明该黏孢子虫为两极虫新种,命名为鳜两极虫(Myxidium chuatsis n.sp.)。成熟孢... 在湘江湖南株洲段开展鱼类黏孢子虫多样性调查过程中,发现一种寄生于鳜胆囊的黏孢子虫,鱼体未出现典型的致病症状。形态学特征、宿主和寄生部位及分子数据表明该黏孢子虫为两极虫新种,命名为鳜两极虫(Myxidium chuatsis n.sp.)。成熟孢子壳面观为纺锤形,孢子两端稍突起,壳面具有6—8条壳纹;缝面观卵形,缝脊弯曲;孢子长(10.7±0.4)μm(10.0—11.4μm),宽(5.7±0.3)μm(5.4—6.1μm),厚(5.8±0.3)μm(5.4—6.1μm)。两个极囊梨形,位于孢子的两端,大小相等;极囊长(3.2±0.2)μm(2.9—3.7μm),宽(2.8±0.1)μm(2.6—3.2μm),囊间间距为(3.7±0.7)μm(2.8—5.2μm),极丝4—5圈。形态比较发现,鳜两极虫与已报道的两极虫可明显区分。基于SSU rDNA序列的BLAST比对发现,鳜两极虫与寄生于霍氏野鲮胆囊的两极虫未定种序列相似性最高(94.74%),但远低于种内序列相似性。系统发育分析表明两极虫为多系起源,寄生部位可能在两极虫属系统演化过程中发挥了重要作用,壳纹的有无与两极虫物种分化密切相关。 展开更多
关键词 鳜两极虫 胆囊 系统发育 黏孢子虫
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杀香鱼假单胞菌3株毒力相关基因缺失突变株的构建及其生物学特性
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作者 贾婷婷 池宇 +2 位作者 李珊珊 陈吉刚 毛芝娟 《微生物学报》 北大核心 2025年第8期3643-3656,共14页
杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是大黄鱼内脏白点病的致病菌,目前对该菌的致病机制已有一定了解,并筛选出部分有效疫苗,但尚无商品化疫苗问世。【目的】深入研究该菌的致病机制,开发高效的杀香鱼假单胞菌弱毒活疫苗。【... 杀香鱼假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是大黄鱼内脏白点病的致病菌,目前对该菌的致病机制已有一定了解,并筛选出部分有效疫苗,但尚无商品化疫苗问世。【目的】深入研究该菌的致病机制,开发高效的杀香鱼假单胞菌弱毒活疫苗。【方法】以亲本株杀香鱼假单胞菌NB2011为基础,采用双同源重组法,选择与群体感应系统(quorum sensing,QS)相关的luxR基因、σ因子rpoE基因进行敲除,构建缺失突变株;同时构建主要毒力因子六型分泌系统(T6SS1)与luxR基因联合缺失株ΔT6SS1ΔluxR。对缺失突变株进行生物学特征检测、毒力特性分析及对金鱼的免疫保护率评估。【结果】成功构建缺失突变菌株ΔluxR、ΔT6SS1ΔluxR及ΔrpoE。与野生株相比,3株缺失突变株的生长速度、泳动能力以及游泳能力未表现出显著差异;ΔluxR、ΔT6SS1ΔluxR两突变株的生物膜形成能力显著降低。观察不同菌株对小鼠巨噬细胞J774A.1的内化、吸附和胞内增殖现象,发现3株缺失突变株均能在巨噬细胞中存活,但增殖能力明显低于野生株。以1.0×10^(7) cells/mL的浓度腹腔注射人工感染草金鱼,与野生株相比,2株单突变株对鱼体的毒力表现了明显的降低;相同剂量的双突变株ΔT6SS1ΔluxR攻击草金鱼未表现出毒力,其对草金鱼的LD50>108 cells/mL。选择双突变株ΔT6SS1ΔluxR注射接种草金鱼,28 d后用野生株进行人工攻击,免疫保护率为78.60%,达到有效保护水平。【结论】本研究成功构建了3株毒力基因缺失突变株,突变株的毒力明显下降,其中ΔT6SS1ΔluxR株有望作为开发杀香鱼假单胞菌弱毒活疫苗的候选株。 展开更多
关键词 杀香鱼假单胞菌 双同源重组 缺失突变 生物学特性 毒力分析 免疫保护率
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大口黑鲈铜绿假单胞菌的分离鉴定与抗菌药物筛选
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作者 姚清 潘创业 +1 位作者 姚伦广 邱礽 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第1期231-237,共7页
为研究导致河南省某养殖场大口黑鲈皮肤溃烂并死亡的病因并从中分离优势感染菌株,从中获取大口黑鲈爆发该病的试验数据,达到预防与治疗的的目的。首先通过显微镜观察和分子生物学等手段排除寄生虫病和病毒感染的可能性,排除之后在患病... 为研究导致河南省某养殖场大口黑鲈皮肤溃烂并死亡的病因并从中分离优势感染菌株,从中获取大口黑鲈爆发该病的试验数据,达到预防与治疗的的目的。首先通过显微镜观察和分子生物学等手段排除寄生虫病和病毒感染的可能性,排除之后在患病大口黑鲈的肝脏和脾脏中,分离出1株优势菌株NY22101804,经过形态观察与通过生理生化试验分析和检测菌液16SrDNA基因序列并比对构建进化树分析,确认菌株类型,再通过人工回归感染试验验证致病性并通过纸片扩散法和牛津杯法测定了该菌对抗生素和中药单体的药物敏感性对药物进行筛选。结果显示,该菌为铜绿假单胞菌株,通过人工回感试验发现,NY22101804对大口黑鲈具有急性致死效应,死亡率与浓度有依赖性呈正相关变化,通过药敏试验数据发现,菌液对妥布霉素、四环素等10种抗生素敏感,对青霉素、氨卡西林等9种抗生素具有耐药性,在中药单体的测试中,黄芩素表现出最好的抑菌效果,其他如黄芩苷、柚皮素、芸香苷等也显示出不同程度的抑菌活性。 展开更多
关键词 大口黑鲈 铜绿假单胞菌 药物敏感性 16SrRNA 中药单体
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黄芪多糖对大菱鲆头肾巨噬细胞免疫激活机制的研究
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作者 董旭峰 王新月 +2 位作者 王晓雪 郭沛 秦志华 《水产科学》 北大核心 2025年第5期737-746,共10页
为探明黄芪多糖对巨噬细胞的免疫调节机制,体外分离体质量(346.00±95.72)g的6~7月龄大菱鲆头肾巨噬细胞后,经条件筛选确定以800μg/mL的黄芪多糖作用巨噬细胞24h后,通过蛋白质组学技术分析细胞中的差异蛋白及信号通路,用分子对接... 为探明黄芪多糖对巨噬细胞的免疫调节机制,体外分离体质量(346.00±95.72)g的6~7月龄大菱鲆头肾巨噬细胞后,经条件筛选确定以800μg/mL的黄芪多糖作用巨噬细胞24h后,通过蛋白质组学技术分析细胞中的差异蛋白及信号通路,用分子对接技术评估黄芪多糖与通路受体蛋白的互作,初步明确黄芪多糖对巨噬细胞的免疫调节机制。试验结果显示:用50~1000μg/mL质量浓度的黄芪多糖刺激巨噬细胞24h,黄芪多糖对巨噬细胞无细胞毒性作用,而具有一定的促细胞生长作用;黄芪多糖可刺激巨噬细胞产生一氧化氮,当质量浓度大于800μg/mL时,一氧化氮分泌量趋于稳定。800μg/mL蛋白质组学结果显示,TNF、PI3K-Akt和NF-κB信号通路相关蛋白表达量上调。分子对接结果显示,黄芪多糖与Toll样受体中的TLR2、TLR3以及TLR22相互作用,分别形成1个、2个、3个氢键。推测TLR22可能是黄芪多糖激活大菱鲆头肾巨噬细胞的核心靶点。本试验初步确定,800μg/mL质量浓度的黄芪多糖通过激活TNF、PI3K-Akt和NF-κB信号通路,调节细胞因子的表达发挥对大菱鲆头肾巨噬细胞的免疫调节作用,TLR22可能参与了黄芪多糖识别过程。 展开更多
关键词 大菱鲆 黄芪多糖 巨噬细胞 免疫调节
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枯草芽孢杆菌对南美白对虾生长、免疫及抗副溶血弧菌感染的影响
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作者 胡效东 童艳梅 +8 位作者 黄玉柳 张铭林 李强勇 杨春玲 彭敏 陈田聪 洪传远 赵永贞 胡庭俊 《水生生物学报》 北大核心 2025年第11期166-175,共10页
为综合评估饲料中添加枯草芽孢杆菌制剂(Bacillus subtilis,BS)对南美白对虾生长、免疫及抗副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)感染的作用,研究将4500尾南美白对虾[(0.95±0.25)g]随机均分为5个组,分别设置BS添加量为0(对照组)、0... 为综合评估饲料中添加枯草芽孢杆菌制剂(Bacillus subtilis,BS)对南美白对虾生长、免疫及抗副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)感染的作用,研究将4500尾南美白对虾[(0.95±0.25)g]随机均分为5个组,分别设置BS添加量为0(对照组)、0.2%、0.4%、0.8%的实验组及0.05%三黄散(SH)药物对照组,并进行42d养殖实验及48h副溶血弧菌感染实验。结果显示,饲料中添加0.2%、0.4%、0.8%BS或0.05%SH均能显著提高南美白对虾的体长、体重、增长率和增重率,并提高饵料系数。与对照组相比,0.4%BS组对虾血淋巴内天冬氨酸转移酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性显著降低,0.8%BS组对虾血淋巴及肝胰腺中超氧化物歧化酶(SOD)含量及总抗氧化能力(T-AOC)显著提高;0.05%SH组对虾血淋巴酸性磷酸酶(ACP)活性、血淋巴T-AOC及肝胰腺SOD显著提高,血淋巴ALT活性显著降低。此外,混饲喂养BS或SH能显著提高对虾感染副溶血弧菌后Hsp70、LGBP、β-GBP-HDL、Crustin、Lysozyme等肝胰腺免疫相关因子的表达量,并提高对虾感染副溶血弧菌后的存活率。其中,0.2%、0.4%、0.8%BS组和0.05%SH组将存活率从43.3%分别显著提升至66.7%、76.7%、73.3%和80.0%。在饲料中添加适量BS能够提高南美白对虾的生长性能及抗氧化能力,并促进肝胰腺中免疫相关因子的表达,增强免疫力,进而提升对虾抵抗副溶血弧菌感染的能力。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 副溶血弧菌 非特异性免疫 抗氧化 南美白对虾
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草鱼长链非编码RNA1153应对GCRV感染的调控功能
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作者 刘帅 张烨煊 +1 位作者 胡旭东 曹宏 《水生生物学报》 北大核心 2025年第6期12-20,共9页
为了解长链非编码RNA在GCRV感染草鱼过程中的分子调控机制,对GCRV攻毒的草鱼肾脏细胞(CIK)进行长链非编码RNA组学测序,在此基础上,筛选出在GCRV攻毒前后差异表达明显的lncRNA1153(PP712057)。利用qRT-PCR技术对lncRNA1153在草鱼CIK细胞... 为了解长链非编码RNA在GCRV感染草鱼过程中的分子调控机制,对GCRV攻毒的草鱼肾脏细胞(CIK)进行长链非编码RNA组学测序,在此基础上,筛选出在GCRV攻毒前后差异表达明显的lncRNA1153(PP712057)。利用qRT-PCR技术对lncRNA1153在草鱼CIK细胞中的时空表达水平进行检测,发现在GCRV感染细胞后,lncRNA1153的表达水平在稳步上升至32h达到峰值。在CIK细胞内对lncRNA进行过表达实验,发现在lncRNA1153过表达的细胞系中,在GCRV攻毒后,干扰素的mRNA表达水平上调。同时,通过在CIK细胞内进行过表达及RNA pull-down实验,将富集的蛋白质进行质谱分析,从中筛选出P62蛋白进行深入研究。qRT-PCR验证发现,在草鱼肝脏、肾脏等组织及CIK细胞中,lncRNA1153与P62的表达趋势大致相同。进一步的研究发现,GCRV感染CIK细胞后,过表达lncRNA1153与P62都对GCRV病毒蛋白的复制起到抑制作用。研究表明长链非编码RNA在草鱼拮抗GCRV感染的先天性免疫机制中发挥重要作用,为未来设计针对GCRV感染的lncRNA靶向治疗提供参考。 展开更多
关键词 长链非编码RNA1153 GCRV CIK细胞 P62 草鱼
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拉氏鱥腹水症病原的分离与鉴定
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作者 于建胜 黄俊佳 +2 位作者 罗璋 姬炳林 白晓慧 《水产养殖》 2025年第10期17-20,38,共5页
为查明天津武清区某养殖场拉氏鱥(Rhynchocypris lagowskii)发病原因,从患病拉氏鱥腹水中分离纯化菌株,通过形态学观察、16S rDNA基因序列及其系统发育分析,确定其分类地位,利用药敏纸品扩散法检测其耐药特性。结果表明,分离到1株优势菌... 为查明天津武清区某养殖场拉氏鱥(Rhynchocypris lagowskii)发病原因,从患病拉氏鱥腹水中分离纯化菌株,通过形态学观察、16S rDNA基因序列及其系统发育分析,确定其分类地位,利用药敏纸品扩散法检测其耐药特性。结果表明,分离到1株优势菌(LSH202101),在LB平板上形成淡黄色、不透明,菌落边缘整齐、中间微微隆起、表面光滑,直径约2 mm的圆形菌落;16SrDNA序列比对结果显示,该序列与温和气单胞菌(登录号:KC951914)的相似程度最高,达到99%,与温和气单胞菌聚为一支该菌株,结合生理生化试验结果,认为LSH202101为温和气单胞菌。人工回归感染试验结果显示,人工感染LSH202101菌株的拉氏鱥死亡率为93.3%,且其腹水中分离出的细菌与菌株LSH202101生理生化特性相同。因此认为温和气单胞菌为拉氏鱥腹水症的病原。该菌株对庆大霉素、硫酸新霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等4种抗菌药物敏感,对复方新诺明、卡那霉素、四环素、多西环素耐药。 展开更多
关键词 拉氏鱥 温和气单胞菌 鉴定 药物敏感性
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“鱼菜药”模式——草鱼细菌性败血病生防拮抗菌筛选研究
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作者 魏健轩 闵勇 魏志宇 《渔业致富指南》 2025年第5期68-72,共5页
“鱼菜药”生态循环综合种养模式技术研究项目于2022年落地在襄樊南漳县关庙集村,该模式是在“鱼菜共生”综合种养技术上的创新,将喜水的中草药“泽泻”加入“鱼菜共生”模式,养殖品种除了黑尾近红鲌、泥鳅之外,还试验养殖了草鱼。本研... “鱼菜药”生态循环综合种养模式技术研究项目于2022年落地在襄樊南漳县关庙集村,该模式是在“鱼菜共生”综合种养技术上的创新,将喜水的中草药“泽泻”加入“鱼菜共生”模式,养殖品种除了黑尾近红鲌、泥鳅之外,还试验养殖了草鱼。本研究为筛选气单胞菌用生防拮抗菌株,以来自于草鱼的维氏气单胞菌作为研究对象,进行了枯草类生防菌的分离和平板抑菌试验,为更好地控制细菌性败血病提供参考。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 筛选 草鱼 细菌性败血病
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陆基圆池养殖大口黑鲈结节病病原菌的分离鉴定及其毒力基因分析
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作者 高雪梅 谭红连 +5 位作者 苏三婷 童桂香 苏美珍 陈静 陈谊 韦信贤 《西南农业学报》 北大核心 2025年第8期1767-1775,共9页
【目的】明确广西陆基圆池养殖大口黑鲈(Micropterus salmoides)结节病的病原菌种类及其特性,为科学防治陆基圆池养殖大口黑鲈结节病提供科学依据。【方法】采集患结节病的大口黑鲈肝脏组织,以常规细菌分离方法分离病原菌,结合形态学观... 【目的】明确广西陆基圆池养殖大口黑鲈(Micropterus salmoides)结节病的病原菌种类及其特性,为科学防治陆基圆池养殖大口黑鲈结节病提供科学依据。【方法】采集患结节病的大口黑鲈肝脏组织,以常规细菌分离方法分离病原菌,结合形态学观察、生理生化鉴定及16S rRNA序列分析等进行鉴定;通过人工回归感染试验验证其致病性,利用PCR检测其毒力基因,并以药敏试验筛选敏感抗菌药物用于治疗。【结果】从患结节病的大口黑鲈肝脏中分离出3株优势菌株,分别命名为NN202301、HZ202306和DH202310;经形态学观察、生理生化鉴定及16S rRNA序列分析,确认3株菌株均为鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)。人工回归感染试验表明,菌株NN202301、HZ202306和DH202310的半数致死剂量(LD_(50))分别为1.12×10^(6)、8.89×10^(5)和1.26×10^(6)CFU/mL;毒力基因PCR扩增结果显示,3株菌株均携带有gapA、ibeA、mce1A和pup 4种毒力基因,即具有较高的致病性,且其毒力在一定浓度范围内呈剂量依赖性;药敏试验结果发现,3株菌株对头孢哌酮、头孢吡肟、特治星、舒普深和多西环素5种抗菌药敏感,而对链霉素和万古霉素已产生完全耐药性。【结论】陆基圆池养殖模式下大口黑鲈结节病的主要病原菌为鰤鱼诺卡氏菌,该菌具有较强的致病性,携带多种毒力基因,且存在多重耐药性,生产中可选用多西环素作为治疗大口黑鲈结节病的潜在药物。 展开更多
关键词 大口黑鲈 陆基圆池养殖模式 结节病 分离鉴定 毒力基因
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ScvL对副溶血弧菌生物膜形成的负调控作用
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作者 梁思轩 张晨 +3 位作者 李申奥 李席席 徐雪峰 赵哲 《水生生物学报》 北大核心 2025年第9期1-9,共9页
为探讨scvL在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)生物膜形成中发挥的具体作用,以导致凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamer)急性肝胰腺坏死症的副溶血弧菌菌株SHY1833为研究对象,通过基因敲除和回补技术构建了scvL的缺失突变株ΔscvL... 为探讨scvL在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)生物膜形成中发挥的具体作用,以导致凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamer)急性肝胰腺坏死症的副溶血弧菌菌株SHY1833为研究对象,通过基因敲除和回补技术构建了scvL的缺失突变株ΔscvL、回补株ΔscvL:pscvL和过表达株WT:pscvL,同时构建胞外多糖基因簇基因cpsA的缺失突变株ΔcpsA作为对照。利用结晶紫染色和SYTO-9荧光测定生物膜形成量显示,缺失scvL后明显促进了SHY1833生物膜形成,相反,过表达scvL抑制了生物膜形成;与预期结果一致cpsA缺失导致生物膜形成量下降。这说明scvL对副溶血弧菌生物膜形成发挥负调控作用。菌落形态观察表明scvL缺失还导致SHY1833菌落呈皱褶且不透明表型。利用qPCR分析显示scvL缺失造成了胞外多糖合成基因簇基因的转录上调,进一步,采用苯酚硫酸法测定胞外多糖揭示其胞外分泌的不可溶性多糖明显增多。研究结果为揭示scv基因簇在副溶血弧菌生物膜形成中的作用机制提供了基础。 展开更多
关键词 scvL 生物膜 调控 胞外多糖 副溶血弧菌
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大黄鱼虹彩病毒的流行情况初步调查及组织分布研究
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作者 王巧煌 林楠 +4 位作者 张杰 张杰鑫 陈小强 谢友佺 黄光亮 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期571-579,共9页
为初步了解近年来大黄鱼虹彩病毒(Large yellow croaker iridovirus,LYCIV)的流行现状和流行特点及其组织分布情况,于2022年3月至2023年2月,随机监测了宁德地区45家大黄鱼养殖场及重点监测了15家正发生“大黄鱼虹彩病毒病(Large yellow ... 为初步了解近年来大黄鱼虹彩病毒(Large yellow croaker iridovirus,LYCIV)的流行现状和流行特点及其组织分布情况,于2022年3月至2023年2月,随机监测了宁德地区45家大黄鱼养殖场及重点监测了15家正发生“大黄鱼虹彩病毒病(Large yellow croaker iridovirus disease,LYCIVD)”的养殖场,并对患病大黄鱼组织进行透射电镜观察;同时,采用实时荧光定量PCR(Quantitative real time PCR,qPCR)法对上述重点监测养殖场的15份经检测为肿大细胞病毒阳性的自然发病大黄鱼样品不同组织中的病毒含量进行了测定,并克隆病毒主要衣壳蛋白基因(Major capsid protein,MCP),测序后与GenBank中的虹彩病毒进行比对分析。结果显示,随机调查的45家养殖场中有10家为LYCIV阳性,阳性率为22.2%;15家重点调查的养殖场均为LYCIV阳性;感染LYCIV的大黄鱼临床症状普遍表现为肝脏出血、脾脏和肾脏肿大等病症;检出LYCIV阳性的样品,采样水温为25℃~30℃、鱼规格为10 cm~32 cm;透射电镜下可见脾脏和肾脏等组织细胞内存在病毒包涵体结构以及病毒粒子,直径约为130 nm~150 nm;MCP序列分析发现,15株大黄鱼虹彩病毒MCP序列均与肿大细胞病毒属的真鲷虹彩病毒聚类。此外,采用qPCR法测定患病大黄鱼不同组织中的LYCIV含量发现,鳃、脾脏和眼的病毒含量相对较高,肝脏中的病毒含量相对较低,故鳃、脾脏和眼可作为该病诊断、监测及研究的“优先”采样组织。 展开更多
关键词 大黄鱼 虹彩病毒 流行情况 初步调查 组织分布
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无乳链球菌母源毒株HN016和弱毒株YM001感染罗非鱼血液代谢组学变化的初步研究
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作者 苏美珍 易丹丹 +7 位作者 韦信贤 雷爱莹 杨彦豪 童桂香 覃幼洁 谭红连 何鑫 李莉萍 《基因组学与应用生物学》 北大核心 2025年第5期488-500,共13页
本研究旨在探讨无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)母源毒株HN016与弱毒株YM001对罗非鱼血液代谢组的影响,以期为无乳链球菌感染机制及弱毒株YM001疫苗免疫机制的研究提供理论基础。运用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography... 本研究旨在探讨无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)母源毒株HN016与弱毒株YM001对罗非鱼血液代谢组的影响,以期为无乳链球菌感染机制及弱毒株YM001疫苗免疫机制的研究提供理论基础。运用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)测定罗非鱼(Oreochromis niloticus)血液中的代谢物,并通过主成分分析(principal component analysis, PCA)和偏最小乘判别分析(partial least squares discriminant analysis, PLS-DA)、 KEGG通路、人类代谢数据库(human metabolome database, HMDB)分类及代谢物差异分析对母源毒株HN016组与弱毒株YM001组代谢物进行研究。研究结果表明母源毒株HN016组与弱毒株YM001组代谢物差异较大。其中PCA与PLS-DA结果显示母源毒株HN016与弱毒株YM001组、对照组相比,样本间的聚集程度较小,弱毒株YM001组与对照组样本间聚集程度相似;KEGG通路结果显示ABC转运器、精氨酸和脯氨酸代谢通路被极显著富集,且含代谢产物数量最多;HMDB化合物分类上超类、层及子类层级分为10、 34、 55个类别,有机酸及其衍生物类别包含63种代谢物,数量最多;代谢物差异分析结果表明母源毒株HN016组相较于弱毒株YM001组共有133种代谢物上调, 88种代谢物下调,母源毒株HN016组中的亚精胺、核黄素、辛二酰甘氨酸等代谢物极显著低于弱毒株YM001组,环状RGD肽、 2-羟基喹啉、除莠霉素A等代谢物极显著高于弱毒株YM001组;母源毒株HN016组中的DL-二氢鞘氨醇、 4-三甲基氨基丁酸、 L-4-羟基谷氨酸半醛、(S)-3,4-二羟基丁酸及β-亮氨酸等代谢物丰度低于对照组与弱毒株YM001组,(1R,2R,4S)-对薄荷烷-1,2,8-三醇、棕榈酰肉碱、溶血磷脂酸、 O-己二酰肉碱、溶血磷脂酰乙醇胺等代谢物丰度高于对照组与弱毒株YM001组。这些代谢物的变化不仅揭示了两种菌株感染后罗非鱼血液代谢组的差异,还为进一步理解无乳链球菌感染机制及弱毒株YM001的潜在免疫保护作用提供了重要线索。对于开发针对无乳链球菌感染的新型疫苗和治疗策略具有重要意义。 展开更多
关键词 无乳链球菌 罗非鱼 代谢组学 疫苗
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广西罗非鱼源无乳链球菌分离鉴定及耐药性分析 被引量:1
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作者 全琛宇 周英宁 +11 位作者 蒲婵娟 陈婷婷 许心婷 卢冰霞 许艺兰 赵硕 杨讯业 段群棚 秦毅斌 李斌 陈忠伟 何颖 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2893-2903,共11页
【目的】掌握广西地区无乳链球菌流行规律和耐药特征,为罗非鱼健康养殖提供科学依据。【方法】采集广西贵港市、北海市、玉林市罗非鱼养殖场病鱼肝脏、脾脏、脑等组织作为样本进行细菌分离培养,通过对分离菌株形态观察及16S rRNA测序分... 【目的】掌握广西地区无乳链球菌流行规律和耐药特征,为罗非鱼健康养殖提供科学依据。【方法】采集广西贵港市、北海市、玉林市罗非鱼养殖场病鱼肝脏、脾脏、脑等组织作为样本进行细菌分离培养,通过对分离菌株形态观察及16S rRNA测序分析进行病原鉴定;利用PCR方法检测各分离菌株血清型、主要毒力基因,并采用K-B法检测其耐药性。【结果】共分离38株链球菌,分离菌株在血平板上形成乳白色圆形、具备溶血环的小菌落;革兰染色为阳性,呈典型短链状,经鉴定均为Ⅰa型无乳链球菌;分离菌株均能扩增出毒力基因sodA、cylE、gapC、bac和bca,但未能扩增出毒力基因scpB;38株分离株对氨基糖苷类药物敏感性较低,对阿米卡星耐药率达到85%以上;分离菌株对β-内酰胺类药物敏感性较高,对青霉素G、头孢哌酮敏感性达100%。38株分离菌中有23株分离菌株呈多重耐药性,耐药数量为3~10重,其中4重及以上为13株,占总分离菌株的34.21%。【结论】广西地区罗非鱼源无乳链球菌临床菌株主要血清型为Ⅰa型,其主要毒力基因为sodA、cylE、gapC、bac和bca;分离菌株对氨基糖苷类药物耐药,提示避免使用该类药物进行防治。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 血清型 毒力基因 耐药性
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CKD患者肠道菌群及其代谢产物短链脂肪酸的研究进展 被引量:1
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作者 张维进 马亚琪 +2 位作者 李璐 张红霞 田娜 《宁夏医学杂志》 2025年第1期84-87,共4页
健康人胃肠道内存在多种微生物,以拟杆菌门和厚壁菌门为主,微生物细胞达1014个、菌群种类达1000多种,统称为肠道菌群[1]。其与宿主相互制约、依赖,参与对抗病原微生物、免疫调节、内分泌代谢等多种过程[2]。慢性肾脏病(CKD)患者有肠道... 健康人胃肠道内存在多种微生物,以拟杆菌门和厚壁菌门为主,微生物细胞达1014个、菌群种类达1000多种,统称为肠道菌群[1]。其与宿主相互制约、依赖,参与对抗病原微生物、免疫调节、内分泌代谢等多种过程[2]。慢性肾脏病(CKD)患者有肠道菌群失衡、菌群丰富度降低、菌群代谢功能改变,与菌群及其代谢物失调有密切关系[3-4]。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 肠道菌群 短链脂肪酸 治疗
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大口黑鲈蛙虹彩病毒的分离鉴定与病理学研究
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作者 李佳宇 绳秀珍 +3 位作者 唐小千 邢婧 迟恒 战文斌 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期184-192,共9页
为了丰富大口黑鲈病毒(Largemouth bass virus,LMBV)的流行病学资料,深入理解病毒的特性及致病机理,本文从山东省烟台市某养殖场采集了患病的大口黑鲈(Micropterus salmoides),采用细胞培养、PCR扩增及系统进化分析等方法进行病原的分... 为了丰富大口黑鲈病毒(Largemouth bass virus,LMBV)的流行病学资料,深入理解病毒的特性及致病机理,本文从山东省烟台市某养殖场采集了患病的大口黑鲈(Micropterus salmoides),采用细胞培养、PCR扩增及系统进化分析等方法进行病原的分离鉴定。肉眼可见患病大口黑鲈多处出现红肿出血的症状,显微镜检查未发现寄生虫和细菌感染。将病鱼组织匀浆液接种鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprini,EPC),出现明显的细胞病变;对EPC细胞进行透射电镜观察,在细胞质内发现直径约为150 nm的成熟病毒粒子,病毒粒子呈现虹彩病毒典型的正六边形结构。根据NCBI公布的蛙病毒的主要衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)基因序列设计引物,经PCR扩增和测序后得到一段长度为1392 bp的基因序列。对获得的MCP序列进行系统进化分析,发现该病毒株与蛙病毒属的其他13种病毒聚成一支,与Santee-Cooper蛙病毒(SCRV)、鳜鱼虹彩病毒(MRV)、大口黑鲈溃疡综合征病毒(LBUSV)等7株病毒的MCP序列同源性高达100%。向健康大口黑鲈腹腔注射200μL的105 TCID 50/mL的病毒液,7 d的累计死亡率可达100%。研究结果表明,我们分离到的病毒为虹彩病毒科蛙病毒属成员,将该病毒株命名为大口黑鲈蛙虹彩病毒LMBV-CN2022株。对病鱼组织进行病理学观察,石蜡切片苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,H&E)染色结果显示肝、脾、肾组织中出现大量铁血黄素沉积,透射电镜结果显示脾和体肾中存在病毒粒子。 展开更多
关键词 大口黑鲈 蛙病毒 分离鉴定 组织病理
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大口黑鲈双RNA病毒VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备
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作者 张秋爽 马宝福 +6 位作者 郑果 林强 梁红茹 牛银杰 罗霞 李宁求 付小哲 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第7期18-25,共8页
【目的】研究大口黑鲈双RNA病毒(largemouth bass birnavirus,LBBV)VP2蛋白的抗原性,为后续LBBV疫苗研究提供基础材料。【方法】PCR扩增LBBV VP2基因,构建重组质粒pET-VP2,PCR和测序鉴定后转入大肠杆菌中进行诱导表达和纯化。以纯化的重... 【目的】研究大口黑鲈双RNA病毒(largemouth bass birnavirus,LBBV)VP2蛋白的抗原性,为后续LBBV疫苗研究提供基础材料。【方法】PCR扩增LBBV VP2基因,构建重组质粒pET-VP2,PCR和测序鉴定后转入大肠杆菌中进行诱导表达和纯化。以纯化的重组VP2蛋白为抗原,皮下多点注射免疫新西兰大白兔,耳中央动脉采血并分离血清,通过间接ELISA方法测定多克隆抗体效价;利用Ni-NTA镍离子亲和层析纯化抗体,用BCA法测定纯化后抗体的浓度。通过Western blot和间接免疫荧光鉴定VP2多克隆抗体特异性;采用固定病毒-稀释血清法测定血清的中和效价。【结果】PCR扩增获得了1266 bp的VP2基因片段。PCR和测序鉴定结果表明,重组质粒pET-VP2构建成功。VP2重组蛋白的诱导表达和纯化试验结果获得了64 ku的重组蛋白,符合预期大小。成功制备了VP2蛋白的多克隆抗体,其质量浓度为10 mg/mL,效价为1∶1024000,可特异性识别LBBV VP2蛋白;血清中和试验结果显示,VP2多抗中和抗体效价为1∶64。【结论】成功获得了大肠杆菌表达的LBBV重组VP2蛋白,制备了抗VP2蛋白的多克隆抗体,该多抗对LBBV具有中和作用。 展开更多
关键词 大口黑鲈 大口黑鲈双RNA病毒 VP2蛋白 多克隆抗体
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