VI型分泌系统(type VI secretion system,T6SS)是迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的一种新型毒力因子。迟缓爱德华氏菌毒力蛋白P(E.tarda virulence protein P,EvpP)是T6SS的效应蛋白,但目前对EvpP功能机制的研究仍十分有限。【目...VI型分泌系统(type VI secretion system,T6SS)是迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的一种新型毒力因子。迟缓爱德华氏菌毒力蛋白P(E.tarda virulence protein P,EvpP)是T6SS的效应蛋白,但目前对EvpP功能机制的研究仍十分有限。【目的】解析EvpP的生物学功能,深入探究T6SS在E.tarda致病过程中的作用。【方法】构建E.tarda的evpP基因缺失株(ΔevpP)和回补株(ΔevpP-C),在此基础上开展evpP基因缺失对E.tarda生物学特性以及巨噬细胞感染影响的研究。【结果】E.tarda野生株、ΔevpP和ΔevpP-C在生长曲线和生理生化特性方面并无显著差异。相较于野生株,ΔevpP的运动性、生物被膜生成能力以及感染RAW264.7巨噬细胞的黏附率、胞内增殖率和触发细胞自噬的能力均显著下降,但能诱发巨噬细胞分泌更多的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)。ΔevpP-C的胞内增殖能力未完全恢复至野生株水平,但其他表型均得到完全恢复。【结论】EvpP不影响E.tarda的生长和生理生化特性,但能不同程度地增强该菌的运动性、生物膜形成能力以及对巨噬细胞的黏附、胞内增殖能力和自噬活性,且能抑制E.tarda感染的巨噬细胞分泌更多TNF-α。研究结果进一步证实EvpP参与E.tarda的致病过程,并在其中发挥重要作用。展开更多
文摘VI型分泌系统(type VI secretion system,T6SS)是迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的一种新型毒力因子。迟缓爱德华氏菌毒力蛋白P(E.tarda virulence protein P,EvpP)是T6SS的效应蛋白,但目前对EvpP功能机制的研究仍十分有限。【目的】解析EvpP的生物学功能,深入探究T6SS在E.tarda致病过程中的作用。【方法】构建E.tarda的evpP基因缺失株(ΔevpP)和回补株(ΔevpP-C),在此基础上开展evpP基因缺失对E.tarda生物学特性以及巨噬细胞感染影响的研究。【结果】E.tarda野生株、ΔevpP和ΔevpP-C在生长曲线和生理生化特性方面并无显著差异。相较于野生株,ΔevpP的运动性、生物被膜生成能力以及感染RAW264.7巨噬细胞的黏附率、胞内增殖率和触发细胞自噬的能力均显著下降,但能诱发巨噬细胞分泌更多的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)。ΔevpP-C的胞内增殖能力未完全恢复至野生株水平,但其他表型均得到完全恢复。【结论】EvpP不影响E.tarda的生长和生理生化特性,但能不同程度地增强该菌的运动性、生物膜形成能力以及对巨噬细胞的黏附、胞内增殖能力和自噬活性,且能抑制E.tarda感染的巨噬细胞分泌更多TNF-α。研究结果进一步证实EvpP参与E.tarda的致病过程,并在其中发挥重要作用。