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TRP家族蛋白的环境感知功能和炎症调控效应及其在水生动物中的研究进展
1
作者 汪蕾 李苡萱 +3 位作者 由凯文 郭钰琪 吴亚梅 谢海平 《水生生物学报》 北大核心 2026年第1期201-215,共15页
环境中的物理、化学和生物因素与动物的生命活动密切相关,感知这些因素的变化对动物避免有害刺激或转移至适宜栖息地至关重要。瞬时受体电位通道(Transient receptor potential,TRP)蛋白属于阳离子通道家族,它使膜电位去极化并调节细胞... 环境中的物理、化学和生物因素与动物的生命活动密切相关,感知这些因素的变化对动物避免有害刺激或转移至适宜栖息地至关重要。瞬时受体电位通道(Transient receptor potential,TRP)蛋白属于阳离子通道家族,它使膜电位去极化并调节细胞内阳离子(如Ca^(2+))的浓度,不仅介导动物对环境刺激的感知,还深度参与免疫炎症反应等多种生理过程,故也被称为“生物传感器”。文章首先对TRP蛋白家族的结构、分类进行综述性介绍,聚焦于其温度感知与炎症调控功能的最新进展。在此基础上,深入总结TRP家族蛋白在水生动物环境适应(温度、机械、化学感知)及生理调控(摄食行为、免疫防御、繁殖)中的关键角色,探讨TRP蛋白家族作为药物靶点和在水生动物疾病防控与育种的潜力,为提高水产养殖行业的健康发展提供有益参考。 展开更多
关键词 TRP蛋白家族 离子通道 温度感知 炎症反应 药物开发 疾病防控 水生动物
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石斑鱼肠孢虫环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用
2
作者 解恩佩 万晓媛 +6 位作者 要菲 魏京广 吴成龙 史成银 张庆利 谢国驷 黄倢 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期151-160,共10页
石斑鱼肠孢虫(Enterospora epinepheli)是当前危害石斑鱼(Epinephelus spp.)养殖产业的重要病原,但该病原自2017年报道以来,仅有2种基于核酸检测方法的报道。本研究以石斑鱼肠孢虫的核糖体小亚基r RNA(small subunit ribosomal RNA, SSU... 石斑鱼肠孢虫(Enterospora epinepheli)是当前危害石斑鱼(Epinephelus spp.)养殖产业的重要病原,但该病原自2017年报道以来,仅有2种基于核酸检测方法的报道。本研究以石斑鱼肠孢虫的核糖体小亚基r RNA(small subunit ribosomal RNA, SSU rRNA)基因为靶序列,设计3对环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)引物,建立了该病原的LAMP检测方法(LAMP for E. epinepheli, E.ep_LAMP)。添加EvaGreen^(®)核酸染料的检测体系置于定量PCR仪中,以2.68×10^(2)~2.68×10^(9)拷贝/μL的重组质粒标准品pMD18_E.ep为模板,各浓度均可在20 min内完全检测,检测灵敏度为2.68×10^(2)拷贝/反应;分析p MD18_E.ep中目的基因核酸拷贝数的对数值(x)与其对应Ct值(y)的线性关系得到检测方法的标准曲线:y=–1.719 5x+23.971(R2=0.996 2);重复性检测中,其批内和批间检测的变异系数(coefficient of variation, CV)范围分别为0.22%~3.52%和0.24%~1.70%。特异性检测中,E.ep_LAMP与虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)和肌孢虫(Ameson portunus)以及其他11种细菌和病毒均无交叉反应。E.ep_LAMP检测体系中使用核酸染料GeneFinder^(®)后,还可在简易恒温条件下进行现场检测,具有诊断试剂产品开发的前景。总体而言,本研究建立的方法快速、灵敏、特异性强,兼顾定量和可现场诊断的优点,可为当前频发的石斑鱼微孢子虫病的诊断及防控提供新的有效检测方法。 展开更多
关键词 石斑鱼肠孢虫 环介导等温扩增 检测 核糖体小亚基rRNA
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大口黑鲈IL-1β和IL-18多克隆抗体制备及鰤诺卡氏菌感染对其表达的影响
3
作者 王欢 陈振威 +9 位作者 江藕 简宇清 唐伟俊 王怀池 翟艳花 张瑞轩 赵玉华 曹小娟 高坚 王庆超 《淡水渔业》 北大核心 2026年第1期56-65,共10页
为了探究大口黑鲈(Micropterus salmoides)IL-1β和IL-18在鰤诺卡氏菌(Nocardia seriolae)感染过程中的免疫应答反应,本研究制备了针对大口黑鲈IL-1β和IL-18的多克隆抗体,并检测感染鰤诺卡氏菌后大口黑鲈组织病变和二者的蛋白表达水平... 为了探究大口黑鲈(Micropterus salmoides)IL-1β和IL-18在鰤诺卡氏菌(Nocardia seriolae)感染过程中的免疫应答反应,本研究制备了针对大口黑鲈IL-1β和IL-18的多克隆抗体,并检测感染鰤诺卡氏菌后大口黑鲈组织病变和二者的蛋白表达水平。实验首先分析大口黑鲈IL-1β和IL-18并选择合适的表达区段,构建pET-32a-Ms IL-1β和pET-32a-Ms IL-18重组质粒并以IPTG诱导蛋白表达,经纯化后获得分子大小约49 kDa和40 kDa的Ms IL-1β和Ms IL-18重组蛋白,分别免疫日本大耳兔和Balb/C小鼠,获得抗血清后确认其效价和特异性;随后以鰤诺卡氏菌感染大口黑鲈,以本研究制备的多克隆抗体检测到肝脏中IL-1β与IL-18蛋白水平显著增加,与肝脏病理分析中大量炎性细胞浸润结果一致。综上,本研究成功制备了大口黑鲈IL-1β与IL-18多克隆抗体,并揭示了其在鰤诺卡氏菌感染大口黑鲈后蛋白表达水平显著升高。 展开更多
关键词 大口黑鲈(Micropterus salmoides) IL-1Β IL-18 多克隆抗体 鰤诺卡氏菌(Nocardia seriolae)
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大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的原核表达、多克隆抗体制备及水体氨氮胁迫对其表达的影响
4
作者 江藕 陈振威 +7 位作者 王庆超 王欢 唐伟俊 姜明旭 王怀池 简宇清 黄兴政 高坚 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期184-198,共15页
半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大... 半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大口黑鲈(Micropterus salmoides)程序性细胞死亡的作用机制,本研究针对大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的序列进行分析,筛选合适的表达区段设计引物后PCR扩增获得目的片段,随后以pET-32a为载体构建原核重组质粒,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,分别以1.0 mmol/L和0.6 mmol/L的IPTG于16℃过夜诱导表达重组蛋白;通过Ni-NTA Beads 6FF重力柱对获得的上清液蛋白进行纯化,并以SDS-PAGE分析获得Ms-CASPASE-1和Ms-CASPASE-3重组蛋白,从而确认重组蛋白表达和纯化成功。之后,将纯化的CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白分别与弗氏佐剂乳化后各免疫1只日本大耳兔和3只Balb/C小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫法和蛋白印迹法检测效价和特异性。结果表明,免疫后获得的抗血清均能特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白和内源性蛋白,有单一且与预期分子量大小一致的目的条带;同时,CASPASE-1和CASPASE-3的兔源/鼠源抗血清效价均分别为1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(6)和1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(3)。随后,使用氨氮对大口黑鲈进行胁迫,通过组织病理学检测可发现其肾脏组织出现明显病变,表现为肾小体细胞增生、肾小囊腔扩大,远曲小管和近曲小管上皮细胞肿胀和细胞死亡。以本研究制备的CASPASE-1和CASPASE-3多克隆抗体进行蛋白质印迹实验,检测到肾脏中CASPASE-1和CASPASE-3蛋白的表达水平显著增加,这2个蛋白可能介导了后续的程序性细胞死亡,这与组织病理学的结果一致。本研究成功制备了可特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的兔源和鼠源多克隆抗体,并探究了水体氨氮胁迫对其表达的影响,为深入研究氨氮胁迫下大口黑鲈的程序性细胞死亡机制提供了重要的基础。 展开更多
关键词 大口黑鲈 CASPASE-1 CASPASE-3 原核表达 多克隆抗体 氨氮胁迫
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凡纳滨对虾肝胰腺响应微囊藻毒素-LR胁迫的代谢机制
5
作者 邢瑞爱 张达娟 +3 位作者 王其鹏 张志华 宫超然 毕相东 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期77-87,共11页
【目的】高密度集约化养殖中,蓝藻水华暴发会释放出大量微囊藻毒素(MCs),研究MCs对凡纳滨对虾肝胰腺的毒性作用代谢机制,为水产养殖业健康发展提供依据。【方法】采用血窦注射法对凡纳滨对虾进行微囊藻毒素-LR(MC-LR)攻毒试验,在测定对... 【目的】高密度集约化养殖中,蓝藻水华暴发会释放出大量微囊藻毒素(MCs),研究MCs对凡纳滨对虾肝胰腺的毒性作用代谢机制,为水产养殖业健康发展提供依据。【方法】采用血窦注射法对凡纳滨对虾进行微囊藻毒素-LR(MC-LR)攻毒试验,在测定对虾肝胰腺氧化损伤及主要抗氧化酶活性的基础上对攻毒2、72 h的肝胰腺进行非靶向代谢组学分析,寻找差异代谢物及显著代谢通路,从代谢水平上揭示MC-LR对肝胰腺的影响机制。【结果】随着MC-LR胁迫时间的延长,凡纳滨对虾肝胰腺丙二醛(MDA)和脂质过氧化物(LPO)浓度逐渐升高,肝胰腺氧化损伤明显;谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性均呈先升高后降低的趋势。攻毒2、72 h,肝胰腺的差异代谢物分别为144、175个,主要为L-酪氨酸、L-天冬氨酸、L-缬氨酸和柠檬酸等,共有差异代谢物57个(包括反丁烯二酸、琥珀酸、N6,N6,N6-三甲基-L-赖氨酸等);攻毒2、72 h,KEGG显著富集通路分别有18、26条,主要有碳水化合物代谢(包括柠檬酸循环、丙酮酸代谢等)、核苷酸代谢(包括嘌呤代谢等)和氨基酸代谢(包括半胱氨酸与蛋氨酸代谢、丙酸盐代谢、苯丙氨酸代谢等)通路。【结论】MC-LR胁迫下,凡纳滨对虾肝胰腺发生氧化应激、细胞凋亡、能量代谢过程加快、细胞稳态维持和生长,以对抗MC-LR对机体产生的胁迫和损伤。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 微囊藻毒素 抗氧化酶 非靶向代谢组学 碳水化合物代谢 氨基酸代谢
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食源性铁过载诱导草鱼肝细胞的损伤机制
6
作者 黄晓曼 李宁静 +4 位作者 杨琰 宋佳玲 田野 林蠡 秦真东 《水产学报》 北大核心 2026年第1期192-203,共12页
【目的】探讨食源性铁过载对草鱼肝脏的损失机制,揭示其在铁代谢紊乱、氧化应激及炎症反应中的作用。【方法】选取体重为50~80 g的健康草鱼,分别在基础饲料中添加0、400和800 mg/kg的富马酸亚铁,连续投喂60 d。其间测定鱼体生长性能、... 【目的】探讨食源性铁过载对草鱼肝脏的损失机制,揭示其在铁代谢紊乱、氧化应激及炎症反应中的作用。【方法】选取体重为50~80 g的健康草鱼,分别在基础饲料中添加0、400和800 mg/kg的富马酸亚铁,连续投喂60 d。其间测定鱼体生长性能、血清和肝脏中铁含量,以及红细胞压积、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性。采用qRT-PCR检测铁代谢及抗氧化相关基因表达变化。同时开展体外实验,以柠檬酸铁铵(III)(FAC)处理L8824细胞,检测细胞内铁和ROS水平及炎症、抗氧化等相关基因表达。【结果】富马酸亚铁过量摄入显著抑制草鱼体长增长,血清和肝脏中铁含量显著升高。ELISA结果显示,红细胞压积、ALT、AST和GPX4活性明显增加。qRT-PCR结果表明,tf、dmt1、hepcidin、fpn和ncoa4基因表达量显著上调,而tfR1和ferritin表达下调。抗氧化相关基因ho-1、gpx4和nrf2也在铁添加组中显著上调。体外实验中,FAC处理导致细胞内铁和ROS水平升高,炎症相关基因如p65、tnf-α、nf-κb、tlr4等显著上调,同时氧化应激相关基因keap1a、nrf2和ho-1的表达量也显著上升。【结论】食源性铁过载可导致草鱼肝脏铁代谢紊乱、氧化应激增强并引发炎症反应。研究结果为草鱼铁代谢相关疾病及防控策略提供了理论支持。 展开更多
关键词 草鱼 铁过载 铁代谢 氧化应激 炎症反应
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锦鲤寄生葡萄碘泡虫的形态特征、组织病理及分子系统发育
7
作者 管西涛 张潇艺 +3 位作者 丁鹏 周凡 缪祥军 柳阳 《水产学报》 北大核心 2026年第1期204-211,共8页
【目的】鉴定从锦鲤鳃中分离的碘泡虫种类。【方法】采用形态特征、寄生特性以及分子标记综合比较的方法,对该碘泡虫进行了描述和分析,并探讨了其系统发育关系。【结果】该碘泡虫寄生于锦鲤鳃中,并在所有鳃片上形成大量白色孢囊。将该... 【目的】鉴定从锦鲤鳃中分离的碘泡虫种类。【方法】采用形态特征、寄生特性以及分子标记综合比较的方法,对该碘泡虫进行了描述和分析,并探讨了其系统发育关系。【结果】该碘泡虫寄生于锦鲤鳃中,并在所有鳃片上形成大量白色孢囊。将该碘泡虫与已知碘泡虫的形态特征比较后发现,其孢子形态特征与葡萄碘泡虫一致。组织学分析发现,该碘泡虫寄生于鳃小片中,导致宿主鳃组织上皮细胞增生和充血,其寄生特性与葡萄碘泡虫一致。分子序列分析发现,该碘泡虫的SSU rDNA序列与葡萄碘泡虫的分子序列一致。【结论】根据形态特征、寄生特征和分子标记的综合分析,本研究从锦鲤鳃中分离的碘泡虫为葡萄碘泡虫。系统发育分析发现,大部分寄生于相同宿主和相同组织的粘体动物形成了独立分系,但是寄生不同宿主、相同组织的粘体动物形成了独立的大支,说明与宿主种类相比,寄生部位对粘体动物的进化提供了更强的驱动力。 展开更多
关键词 锦鲤 粘孢子虫 物种鉴定 系统发育分析
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“水产病害防控与健康养殖技术”专刊征稿
8
《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期F0003-F0003,共1页
当前,水产养殖业呈现集约化发展趋势,养殖规模和养殖密度持续提升,对养殖环境造成的压力日益增大,在养殖生物量和养殖环境的双重胁迫下,病害发生频繁,造成的经济损失日趋严重,成为制约产业发展的瓶颈问题之一。而依赖抗生素等化学药物... 当前,水产养殖业呈现集约化发展趋势,养殖规模和养殖密度持续提升,对养殖环境造成的压力日益增大,在养殖生物量和养殖环境的双重胁迫下,病害发生频繁,造成的经济损失日趋严重,成为制约产业发展的瓶颈问题之一。而依赖抗生素等化学药物的传统防病模式,不仅面临药物残留等食品安全问题,更存在耐药性扩散等环境安全风险,与水产养殖业绿色发展的理念背道而驰。 展开更多
关键词 水产养殖 病害防控 集约化发展 健康养殖
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淡水鱼鱼体与养殖水体中地西泮的关联性分析
9
作者 杨亚琴 郝学飞 +10 位作者 韩洛利 李淑芳 曹秀 郜小龙 杨雪冰 胡永建 刘文斌 刘雨晴 石宁 冯书惠 张辉鹏 《中国渔业质量与标准》 2025年第3期41-49,共9页
本研究采用高效液相色谱-串联质谱同位素内标法建立了淡水鱼、养殖水和饵料样品中地西泮(Diazepam,DIA)的定量检测方法,分析了淡水鱼鱼体与养殖水体中DIA的关联性。结果表明,DIA在0.100~20.0 ng/mL质量浓度范围呈现良好的线性关系,相关... 本研究采用高效液相色谱-串联质谱同位素内标法建立了淡水鱼、养殖水和饵料样品中地西泮(Diazepam,DIA)的定量检测方法,分析了淡水鱼鱼体与养殖水体中DIA的关联性。结果表明,DIA在0.100~20.0 ng/mL质量浓度范围呈现良好的线性关系,相关系数R^(2)为0.9996。淡水鱼、养殖水和饵料样品的方法定量限(Limit of quantitation,LOQ)分别为0.10μg/kg、1.00 ng/L和1.00μg/kg。在1倍、5倍、20倍LOQ添加水平下,3种基质的加标回收率范围在87.7%~102.0%之间,相对标准偏差(RSD)为2.49%~6.69%。淡水鱼鱼体中DIA含量与对应养殖水体中DIA浓度的相关性分析结果表明,二者呈显著正相关(P<0.01)。建议将养殖水体中DIA浓度73.2 ng/L和100 ng/L分别作为淡水鱼产品质量安全监管的养殖水风险提示线和风险警戒线。淡水鱼养殖场可通过禁止垂钓、向养殖水域中注入清水或采用物理吸附等措施,有效降低养殖水体中DIA浓度,进而降低鱼体中DIA含量,达到保障养殖淡水鱼产品质量安全目的。 展开更多
关键词 地西泮 淡水鱼 养殖水 分布特征
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中国南极磷虾产业发展现状及标准体系构建
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作者 郭莹莹 王新良 +8 位作者 朱建成 朱文嘉 李娜 刘小芳 于凡 江艳华 姚琳 王联珠 赵宪勇 《中国渔业质量与标准》 2025年第2期1-14,共14页
南极磷虾(Euphausia superba)产业是极地远洋渔业的重要组成部分。本研究通过产业调研、标准检索、文献梳理和对比分析等方法,概述了中国南极磷虾产业发展现状及标准化工作进展,分别在南极磷虾资源探测、生态捕捞、产品加工与流通、设... 南极磷虾(Euphausia superba)产业是极地远洋渔业的重要组成部分。本研究通过产业调研、标准检索、文献梳理和对比分析等方法,概述了中国南极磷虾产业发展现状及标准化工作进展,分别在南极磷虾资源探测、生态捕捞、产品加工与流通、设施与装备制造等方面,构建了南极磷虾全产业链标准体系框架,编制了南极磷虾产业标准体系明细表,并提出加强捕捞加工装备技术创新研究、渔场资源生态基础研究和高值化加工关键技术研究等建议,通过优先构建以加工基础通用标准、产品品质评价方法、加工操作规程和冷链贮运规范为主体的南极磷虾加工与质量安全标准体系,以促进产业链上下游标准有效衔接,为中国南极磷虾产业标准化决策提供参考。 展开更多
关键词 南极磷虾 产业现状 标准体系
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黄鳝与鸡蛋的氨基酸含量比较分析与评价
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作者 魏志宇 张瑞天 +2 位作者 李群 侯海瑛 陈鹏 《渔业致富指南》 2025年第1期70-72,共3页
经查新,迄今为止,国内外尚未发现有系统分析测定黄鳝的氨基酸含量并与土鸡蛋与洋鸡蛋比较分析的报告。本文通过将黄鳝肌肉中7种必需氨基酸和10种非必需氨基酸含量与鸡蛋对比,旨在评价黄鳝肌肉营养及功效,为黄鳝养殖推广及加工利用提供... 经查新,迄今为止,国内外尚未发现有系统分析测定黄鳝的氨基酸含量并与土鸡蛋与洋鸡蛋比较分析的报告。本文通过将黄鳝肌肉中7种必需氨基酸和10种非必需氨基酸含量与鸡蛋对比,旨在评价黄鳝肌肉营养及功效,为黄鳝养殖推广及加工利用提供理论数据。方法:委托杭州研趣信息技术有限公司进行黄鳝肌肉氨基酸分析。测定方法:液相色谱-串联质谱联用(LC-MS/MS)。 展开更多
关键词 必需氨基酸含量 黄鳝养殖 土鸡蛋 肌肉氨基酸 理论数据 肌肉营养 信息技术 洋鸡蛋
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功能花卉的利用形式及功能成分研究现状与展望 被引量：2
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作者 蔡友铭 李青竹 +4 位作者 张永春 杨柳燕 许俊旭 周琳 陈敏敏 《植物资源与环境学报》 北大核心 2025年第1期94-105,共12页
花卉是美丽中国建设的重要物质基础,也是健康中国和农业现代化建设的组成部分,其中,功能花卉是指主要为获得食品、饮料、药品,用于工业加工和其他用途原料而种植的花卉。多种功能花卉具有悠久的食用和药用历史,这些花卉中的有效成分不... 花卉是美丽中国建设的重要物质基础,也是健康中国和农业现代化建设的组成部分,其中,功能花卉是指主要为获得食品、饮料、药品,用于工业加工和其他用途原料而种植的花卉。多种功能花卉具有悠久的食用和药用历史,这些花卉中的有效成分不但可以提高菜肴的风味和品质,更具有许多有益的功效,如抗菌、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗抑郁、抗癌、调节免疫力等。随着“大食物观”的推进和人民对高品质生活的需求不断提高,近年来功能花卉的研究和应用备受关注。本文综述了功能花卉利用现状(包括功能花卉的主要利用形式,功能花卉中酚类、萜类、含氮化合物的功能等)、功能花卉主要功能成分合成途径基因研究进展以及主要功能花卉的产业化现状。重点阐述了菊花(Chrysanthemum×morifolium(Ramat.)Hemsl.)、百合(Lilium brownii var.viridulum Baker)、牡丹(Paeonia×suffruticosa Andrews)、玫瑰(Rosa rugosa Thunb.)、忍冬(Lonicera japonica Thunb.)等主要功能花卉的主要功能成分的种类和功能、主要食品用途和产业应用情况。并对功能花卉未来复合多样化的应用形式、全过程高效绿色生产应用前景和功能花卉的精准育种研究进行了展望。 展开更多
关键词 功能花卉 利用形式 功能成分 产业现状
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罗氏沼虾白尾病防控措施
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作者 冉光鑫 钟纯燕 +1 位作者 顾锦伟 陈洋 《水产养殖》 2025年第8期42-44,共3页
罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii),为长臂虾科、沼虾属的一种节肢动物,其体形大、食性广、病害少、易生存、生长速度快、营养丰富,具有较高的经济价值,是世界上最大的淡水虾类,有“淡水虾王”之称。20世纪90年代,规模化人工育苗技... 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii),为长臂虾科、沼虾属的一种节肢动物,其体形大、食性广、病害少、易生存、生长速度快、营养丰富,具有较高的经济价值,是世界上最大的淡水虾类,有“淡水虾王”之称。20世纪90年代,规模化人工育苗技术的突破,推动了我国罗氏沼虾养殖业的快速发展,使我国迅速跃升为全球最大的罗氏沼虾养殖国。根据《2024年中国渔业统计年鉴》,2023年我国罗氏沼虾养殖总产量达19.64万t,产业链总产值超200亿元,为渔民致富增收作出重要贡献。 展开更多
关键词 白尾病 防控措施 养殖业 罗氏沼虾
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基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌可视化检测方法的建立 被引量：1
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作者 葛辉 巫旗生 +8 位作者 宁岳 冯君雅 陈昊翔 李慧耀 叶军 吴丽云 温凭 徐春燕 任磊 《水产学报》 北大核心 2025年第11期203-215,共13页
【目的】建立基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌实时荧光检测法和试纸条检测法,满足牡蛎新发病原沙氏弧菌的快速检测需求。【方法】实验针对沙氏弧菌toxR基因设计特异性片段,优选RPA引物和crRNA序列,确保基因标志物的准确扩增与识别;当CR... 【目的】建立基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌实时荧光检测法和试纸条检测法,满足牡蛎新发病原沙氏弧菌的快速检测需求。【方法】实验针对沙氏弧菌toxR基因设计特异性片段,优选RPA引物和crRNA序列,确保基因标志物的准确扩增与识别;当CRISPR/Cas12a系统识别到RPA扩增的病原靶标基因并激活其反式切割活性后,生物素修饰的单链DNA荧光探针作为报告分子被切割,分别依据蓝光下的荧光强度和试纸条的显色情况判定检测结果;实验采用多种弧菌验证检测方法的特异性,并通过不同浓度沙氏弧菌菌液评估2种检测方法的灵敏度;最终将2种检测方法与PCR方法进行真实样本检测对比。【结果】本研究成功建立了RPA-CRISPR/Cas12a荧光检测法和试纸检测法,且均表现出优异的特异性,可准确识别沙氏弧菌,整个检测流程可在1 h内完成;2种方法的检测限均达到100 CFU/mL,检测结果与PCR高度一致(符合率100%)。【结论】本研究开发的基于RPA-CRISPR/Cas12a的荧光检测法和试纸检测法,突破了传统方法的局限,显著缩短检测时间,且无需复杂仪器,操作简便,为沙氏弧菌的现场快速检测提供了可靠的技术支持。本研究为沙氏弧菌的快速检测提供了高效、便捷的新方法,对水产养殖病害防控和食品安全保障具有重要意义。 展开更多
关键词 沙氏弧菌 重组酶聚合酶扩增(RPA) CRISPR/Cas12a 荧光检测 试纸检测
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绿色养殖尾水处理技术与模式 被引量：2
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作者 宣雄智 叶琦 宋方舟 《农业与技术》 2025年第5期110-113,共4页
未经科学处理的水产养殖尾水若大量排放到养殖池塘周边水域,会造成水域生态环境恶化,以养殖尾水为核心的农业面源污染最终也会对水产养殖业的健康发展产生负面影响。本文介绍了常见养殖尾水处理技术与模式,并叙述了养殖尾水处理典型案例... 未经科学处理的水产养殖尾水若大量排放到养殖池塘周边水域,会造成水域生态环境恶化,以养殖尾水为核心的农业面源污染最终也会对水产养殖业的健康发展产生负面影响。本文介绍了常见养殖尾水处理技术与模式,并叙述了养殖尾水处理典型案例,以期为水产养殖尾水科学处理提供参考。 展开更多
关键词 养殖尾水 处理技术 处理模式
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中草药防治鱼病研究进展 被引量：37
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作者 曹红峰 黄文芳 宋靖芳 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期83-87,共5页
关键词 中草药防治 水产养殖动物 鱼病 抗菌作用 养殖方式 毒副作用 药物成分 免疫作用 免疫状态 抗菌药物
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蛙源米尔伊丽莎白菌的生物膜形成能力及β内酰胺类和喹诺酮类耐药性分析
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作者 蔺凌云 赵颖 +7 位作者 姚嘉赟 沈锦玉 袁雪梅 黄雷 陈静 彭先启 刘忆瀚 潘晓艺 《水生生物学报》 北大核心 2025年第2期95-105,共11页
研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和... 研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和卡尔加里生物膜装置分别测定其最小抑菌浓度(MIC)、生物膜形成能力及最低生物膜清除浓度(MBEC)。利用PCR方法分析β-内酰胺耐药基因及喹诺酮类耐药决定区(QRDR)突变,并通过双纸片法检测其超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和金属β-内酰胺酶(MBL)的产生。结果显示,从患病蛙类样本中分离到的9株优势菌株均为E.miricola;各菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类及喹诺酮类药物耐药,但对多西环素和氟苯尼考敏感;所有菌株均可形成生物膜,生物膜形成菌的MBEC比对应浮游菌的MIC提高8—>256倍;所有菌株均携带β-内酰胺类耐药相关基因(blaCME、blaGOB和blaB),并产生ESBL及MBL;gyrA基因的QRDR区均检测到了可介导喹诺酮类耐药的非同义突变S83R,gyrB、parC和parE未发现突变。结果表明,蛙源E.miricola呈现多重耐药性,普遍具有生物膜形成能力,β-内酰胺酶的产生及喹酮类药物作用靶点突变与其β-内酰胺及喹诺酮类耐药表型相符。多西环素和氟苯尼考的体外敏感性较高,具有治疗该菌感染的潜力。研究可为E.miricola感染的治疗及耐药机制的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 多重耐药性 Β-内酰胺酶 喹诺酮类耐药决定区 生物膜 米尔伊丽莎白菌
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水产甲壳类抗病免疫增强剂快速筛选与评估技术的研究
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作者 林锋 黄爱霞 +5 位作者 王雨辰 孙伟杰 陆静 周阳 陈克平 郝贵杰 《海洋与湖沼》 北大核心 2025年第3期680-687,共8页
甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)为研究对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾... 甲壳类水产品是水产养殖中的重要组成部分,通过拌喂中草药免疫增强剂的方式提高虾蟹自身的抗病免疫力,已成为甲壳类病害防治的首选方式。以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)为研究对象,将20种类免疫增强剂分别以3个梯度浓度加入虾血淋巴细胞培养液中,分析非特异性免疫指标表达差异,结合口服免疫增强剂试验比较评估,构建一种甲壳类免疫增强剂体外筛选和评估方法。结果表明,综合LZM、ACP、AKP、SOD、POD和PO等6项免疫指标的测定值,预筛选出5种具有潜在提高罗氏沼虾非特异性免疫力的黄芩苷、茶树菇多糖、左旋咪唑等成分;在罗氏沼虾中的LZM、ACP、SOD、PO免疫效果与预期吻合,明显高于对照组,且存活率高于对照组19%,平均增重为对照组的1.3倍;完成了罗氏沼虾与免疫相关的microRNA的筛选,建立对免疫增强剂免疫效果进行反向评估验证,成功获得3个可用于免疫效果评估的microRNA分子。利用免疫增强剂待选品在甲壳类血淋巴细胞中的短期原代培养,能够实现在体外高通量快速筛选免疫增强剂,该方法的构建可以为甲壳类抗病免疫增强剂的深入研究提供有效支撑。 展开更多
关键词 甲壳类 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 原代培养 免疫增强剂 筛选
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鳗弧菌感染早期牙鲆鳃黏膜淋巴组织的免疫应答特征
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作者 绳秀珍 毛美霖 +4 位作者 刘英钦 唐小千 邢婧 迟恒 战文斌 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第8期29-46,共18页
为了解鱼类鳃黏膜相关淋巴组织对病原菌感染的抵抗及其免疫应答机制,本文对健康和感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的牙鲆(Paralichthys olivaceus)鳃组织进行转录组测序,对差异表达基因进行了GO、KEGG、GSEA等生物信息学分析。研究共获... 为了解鱼类鳃黏膜相关淋巴组织对病原菌感染的抵抗及其免疫应答机制,本文对健康和感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的牙鲆(Paralichthys olivaceus)鳃组织进行转录组测序,对差异表达基因进行了GO、KEGG、GSEA等生物信息学分析。研究共获得620个差异表达基因,其中包括334个上调表达基因和286个下调表达基因。随机选取其中8个基因进行荧光定量PCR分析,结果显示其表达变化趋势与转录组测序结果一致,表明测序结果具有准确性和可靠性。富集分析表明,差异基因富集在自噬和免疫反应激活及调节相关的条目中,补体和凝血级联通路、白细胞跨内皮迁移、NOD样受体、JAK-STAT等免疫相关通路被激活,与疾病、细胞黏附相关的通路也显著富集。发现与补体激活和抗菌免疫相关的凝集素基因上调表达,以CD209和MBL为代表的C型凝集素表达发生显著变化,且是互作网络的核心基因。同样作为互作的核心基因,模式识别受体tlr13和nlrc3也显著上调表达。另外,凋亡基因boka、bcl2l15,吞噬相关基因lyg、pla2g4c,黏蛋白基因muc5ac、muc5b、muc19,黏膜防御屏障相关基因cldn3d和esama,以及T、B淋巴细胞相关基因表达也发生了显著变化,表明其参与机体抗菌免疫应答。这些结果为深入理解鱼类黏膜免疫系统抗病原菌入侵的应答机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 鳗弧菌 抗感染应答 鳃相关淋巴组织 转录组 牙鲆 黏膜防御
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