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题名青鱼鳍条组织细胞系的建立及其生物学特性
被引量:10
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作者
张雪萍
曾令兵
陈倩
周勇
张琳琳
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机构
华中农业大学水产学院
中国水产科学研究院长江水产研究所
湖州师范学院浙江省水生生物资源养护与开发技术研究重点实验室
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出处
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
2016年第2期3-9,共7页
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基金
国家"现代农业产业技术体系建设专项资金"(nycytx-46-11)
浙江省水生生物资源养护与开发技术研究重点实验室开放基金资助课题(SS201403)
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文摘
采用组织块移植培养技术,对来源于青鱼(Mylopharyngodon piceus)的鳍条组织细胞进行原代培养,建立了青鱼鳍条组织细胞系,定名为BC-Fin。青鱼鳍条组织细胞为成纤维样细胞,已稳定传代培养50多代,其最适培养温度为25℃,最佳培养基为L-15,最适血清浓度为15%,在最适培养条件下,青鱼鳍条组织细胞的群体倍增时间为60.6 h。青鱼鳍条组织细胞液氮冷冻保藏6个月后,经台盼蓝染色,约(90.09±4.65)%的细胞具有细胞活性,复苏后的细胞生长旺盛。细胞染色体分析显示,第16代青鱼鳍条组织细胞的染色体数目为正常二倍体(2n=48),第41代细胞染色体众数为46。通过对离体培养细胞的线粒体中的16S rRNA基因进行特异性扩增,获得长度为320 bp的核酸片段,核酸序列比对分析结果表明,其与青鱼16S rRNA基因序列的一致性达98%,表明该细胞来源于青鱼。病毒敏感性试验结果显示,在感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)后BC-Fin细胞系可产生典型细胞病变效应,病毒滴度为105.33±0.21TCID50/m L,且PCR检测可检测出细胞培养的草鱼呼肠孤病毒,表明BCFin细胞系对草鱼呼肠孤病毒较敏感。
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关键词
青鱼(Mylopharyngodon
piceus)
鳍条组织
细胞系
生物学特性
病毒敏感性
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Keywords
Mylopharyngodon piceus
fin
cell line
biological characterization
viral susceptibility
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分类号
S917.42
[农业科学—水产科学]
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