线纹尖塘鳢(Oxyeleotris lineolata)具有典型性别生长二态性,雄鱼生长优势显著,doublesex and mab-3 related transcription factor(DMRT)家族是一个与性别决定相关的转录因子家族。基于线纹尖塘鳢性腺转录组数据,共获得2个dmrt基因的c...线纹尖塘鳢(Oxyeleotris lineolata)具有典型性别生长二态性,雄鱼生长优势显著,doublesex and mab-3 related transcription factor(DMRT)家族是一个与性别决定相关的转录因子家族。基于线纹尖塘鳢性腺转录组数据,共获得2个dmrt基因的cDNA序列,分别命名为Oxldmrt1和Oxldmrt3,并采用PCR技术扩增验证2个基因的cDNA序列。运用生物信息学方法分析2个基因序列结构特征,结果显示,Oxldmrt1和Oxldmrt3开放阅读框分别为903 bp和1363 bp,分别编码300个氨基酸和453个氨基酸;OxlDMRT1属于碱性蛋白,而OxlDMRT3属于酸性蛋白;2个基因均含有高度保守的DM结构域,OxlDMRT3还存在DMA结构域。氨基酸聚类分析显示,脊椎动物不同DMRT家族都是独立聚类,OxlDMRT1属于DMRT1家族,OxlDMRT3属于DMRT3家族,DMRT1家族最先聚类,再和DMRT3家族聚类。利用实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析2个dmrt基因在雌鱼和雄鱼8个组织的表达水平,结果显示,2个基因在精巢中的表达量均显著高于其他组织(P<0.01),Oxldmrt3在脑中也有少量表达;利用RT-qPCR分析2个dmrt基因在早期不同发育时期的表达谱,显示2个基因在受精卵中的表达量均最高,Oxldmrt1在眼囊期的表达量最低,而Oxldmrt3在出膜7 d时的表达量最低。利用荧光原位杂交(fluorescencein situhybridization,FISH)对2个基因在精巢中的表达进行定位,显示2个基因在精巢中表达部位一致,均在精原细胞中有较强的表达信号。综上所述,Oxldmrt1和Oxldmrt3均在线纹尖塘鳢性腺胚胎发育阶段和精巢发育过程中起调节作用,而Oxldmrt1还可能参与胚胎后期性别决定和性别分化调控过程,Oxldmrt3还可能参与神经系统发育。本研究为线纹尖塘鳢性别决定与性别分化相关的分子机制研究提供了参考。展开更多
【目的】研究不同孵化温度对美洲鲥胚胎发育、仔鱼孵化的影响。【方法】实验设置16、18、20、22和24℃共5个孵化温度,观察胚胎发育情况和鱼苗存活率,并分析孵化温度为18℃时美洲鲥不同胚胎发育阶段基因表达情况。【结果】16、18、20和22...【目的】研究不同孵化温度对美洲鲥胚胎发育、仔鱼孵化的影响。【方法】实验设置16、18、20、22和24℃共5个孵化温度,观察胚胎发育情况和鱼苗存活率,并分析孵化温度为18℃时美洲鲥不同胚胎发育阶段基因表达情况。【结果】16、18、20和22℃4个孵化温度下都能观察到胚胎的完整发育过程。随着孵化温度的升高,孵化总时长减少,孵化温度为16℃、18、20和22℃时,从受精卵到仔鱼出膜总用时分别为103 h 50 min、84 h 40 min、78 h 40 min和64 h 50 min。孵化水温为18和20℃时,孵化率、仔鱼存活率显著升高。孵化水温22℃时,胚胎死亡率显著高于16、18和20℃。18℃孵化温度下,美洲鲥胚胎中hif1α、hspb1、fbf1、hec、asgr1和vegfα等基因在细胞增殖期表达抑制,而细胞分化期表达显著激活。在出膜期和出膜前的器官形成期,hec的表达被显著激活。在胚胎发育早期sod和gst高表达,而hspb1和hif1α则是在器官形成后期和出膜期高表达。Rbpj在胚胎发育早期的多细胞器和囊胚期显著高表达,并随着胚胎的发育表达下调。【结论】美洲鲥孵化最适温度为18~20℃,囊胚期是美洲鲥胚胎发育的关键时期,从此时期开始,与细胞形成、细胞分裂相关的基因表达开始下调,而与器官形成、细胞分化等功能相关的基因表达明显上调。本研究为美洲鲥早期发育的调控及苗种繁殖、选育提供了参考依据。展开更多
文摘【目的】研究不同孵化温度对美洲鲥胚胎发育、仔鱼孵化的影响。【方法】实验设置16、18、20、22和24℃共5个孵化温度,观察胚胎发育情况和鱼苗存活率,并分析孵化温度为18℃时美洲鲥不同胚胎发育阶段基因表达情况。【结果】16、18、20和22℃4个孵化温度下都能观察到胚胎的完整发育过程。随着孵化温度的升高,孵化总时长减少,孵化温度为16℃、18、20和22℃时,从受精卵到仔鱼出膜总用时分别为103 h 50 min、84 h 40 min、78 h 40 min和64 h 50 min。孵化水温为18和20℃时,孵化率、仔鱼存活率显著升高。孵化水温22℃时,胚胎死亡率显著高于16、18和20℃。18℃孵化温度下,美洲鲥胚胎中hif1α、hspb1、fbf1、hec、asgr1和vegfα等基因在细胞增殖期表达抑制,而细胞分化期表达显著激活。在出膜期和出膜前的器官形成期,hec的表达被显著激活。在胚胎发育早期sod和gst高表达,而hspb1和hif1α则是在器官形成后期和出膜期高表达。Rbpj在胚胎发育早期的多细胞器和囊胚期显著高表达,并随着胚胎的发育表达下调。【结论】美洲鲥孵化最适温度为18~20℃,囊胚期是美洲鲥胚胎发育的关键时期,从此时期开始,与细胞形成、细胞分裂相关的基因表达开始下调,而与器官形成、细胞分化等功能相关的基因表达明显上调。本研究为美洲鲥早期发育的调控及苗种繁殖、选育提供了参考依据。
