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中华蜜蜂囊状幼虫病的诊断和防治研究进展 被引量：1
1
作者 李爱芳 王倩芳 +3 位作者 王孜龙 李亚兰 徐朋 冯书营 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期864-873,共10页
中华蜜蜂囊状幼虫病(Chinese sacbrood disease, CSBD)是由中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus, CSBV)引起的一种病毒性疾病。该病对蜂群危害严重,传染性强,死亡率高达100%,给中国养蜂业造成了巨大的经济损失。尽管实际生... 中华蜜蜂囊状幼虫病(Chinese sacbrood disease, CSBD)是由中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus, CSBV)引起的一种病毒性疾病。该病对蜂群危害严重,传染性强,死亡率高达100%,给中国养蜂业造成了巨大的经济损失。尽管实际生产中采用了多种方法和措施对该病进行预防和治疗,但实际效果欠佳。针对CSBV的检测技术发展迅速,尤其是分子生物学检测手段的更新,使得检测结果的准确性和特异性大大提高。鉴于卵黄抗体(egg yolk antibodies, EYA)在多种病毒性疾病中的应用效果显著,对于CSBD的防治有着潜在的应用开发价值。笔者综述了CSBD诊断和防治的最新研究进展,总结了EYA抗体药物的治疗应用现状。此外,在剖析EYA药物优缺点的基础上,提出了多种EYA协同增效的策略,并从多个方面如新型抗体药物的开发、新型中药单体/配方的鉴定、核苷酸药物的开发等对抗CSBV的研究前景进行望,以期为蜂业病毒性疾病的防控提供参考。 展开更多
关键词 中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV) 诊断 防治 卵黄抗体(EYA)
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中蜂囊状幼虫病的诊断与防治
2
作者 张相君 《现代农村科技》 2025年第4期87-88,共2页
中蜂囊状幼虫病是由囊状幼虫病毒(CSBV)所引起的高致病性传染病。中蜂幼虫是易感个体,早期发病症状并不明显,且容易死亡,死亡的幼虫尸体不会腐烂,也没有明显的臭味,容易被工蜂清除掉,所以蜂农很难及时发现。为了提升中蜂养殖水平,为蜂... 中蜂囊状幼虫病是由囊状幼虫病毒(CSBV)所引起的高致病性传染病。中蜂幼虫是易感个体,早期发病症状并不明显,且容易死亡,死亡的幼虫尸体不会腐烂,也没有明显的臭味,容易被工蜂清除掉,所以蜂农很难及时发现。为了提升中蜂养殖水平,为蜂农带来更高的养殖效益,本文阐述了中蜂囊状幼虫病的发病特点,分析了中蜂囊状幼虫病的症状表现及诊断方法,并提出了有针对性的防治措施,希望能够为相关研究提供一些参考和借鉴。 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病 诊断 防治
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CSBV的分离鉴定及其感染幼虫后的应答反应 被引量：2
3
作者 费世港 刘合永 +3 位作者 王叶元 冯敏 王子龙 孙京臣 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期89-96,共8页
本研究旨在为了解江西某蜂场蜜蜂是否感染中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)并探究CSBV感染中蜂幼虫后的应答反应。采集该蜂场疑似感染CSBV的蜜蜂,采用RT-PCR的方法检测CSBV核酸,取阳性的蜜蜂样品进行病毒分离纯化、电镜观察及测序。将纯化鉴定... 本研究旨在为了解江西某蜂场蜜蜂是否感染中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)并探究CSBV感染中蜂幼虫后的应答反应。采集该蜂场疑似感染CSBV的蜜蜂,采用RT-PCR的方法检测CSBV核酸,取阳性的蜜蜂样品进行病毒分离纯化、电镜观察及测序。将纯化鉴定后的CSBV对3日龄的中蜂幼虫进行人工感染,进行转录组测序,分析中蜂幼虫感染CSBV的应答反应。通过RT-PCR验证和电镜观察成功鉴定CSBV,并命名为CSBV-JX。CSBV-JX电镜观察直径为25~30 nm。对其进行分段扩增测序,发现基因组序列为8781 bp,对其进行系统发育分析,表明东方蜜蜂的SBV(AcSBV)与西方蜜蜂的SBV(AmSBV)明显分为两个分支,具有较强的地域分化性。转录组测序分析发现,中蜂幼虫在感染CSBV-JX后2 h有59个基因上调表达,83个基因下调表达;感染后12 h有68个基因上调表达,86个基因下调表达。本研究成功分离鉴定一株中蜂囊状幼虫病毒并命名为CSBV-JX。同时对CSBV-JX感染中蜂幼虫的转录组学分析发现,CSBV-JX感染2 h和12 h引起宿主的响应较小,这可能是CSBV-JX感染的2 h和12 h为病毒增殖的早期阶段病毒载量低,引起的宿主免疫响应小所导致。在CSBV-JX感染中蜂幼虫的2 h和12 h期间引起的差异基因与代谢通路关联较大,研究结果为阐明解析CSBV感染中蜂的分子机制提供了基础。 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病毒 分离鉴定 系统发育分析 转录组学
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一种新的蜜蜂细菌性幼虫病病原的分离鉴定 被引量：9
4
作者 戎映君 苏松坤 +1 位作者 陈集双 陈盛禄 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期994-998,共5页
2005年早春,在浙江部分地区出现了一种严重的蜜蜂细菌性幼虫病,该病导致蜜蜂幼虫颜色发黄,失去光泽;严重时幼虫死亡腐烂。从10批发病死亡幼虫样品中,分离得到并保存了5类纯培养物。通过蜂群接种试验和实验室人工培养的幼虫接种,确定L2... 2005年早春,在浙江部分地区出现了一种严重的蜜蜂细菌性幼虫病,该病导致蜜蜂幼虫颜色发黄,失去光泽;严重时幼虫死亡腐烂。从10批发病死亡幼虫样品中,分离得到并保存了5类纯培养物。通过蜂群接种试验和实验室人工培养的幼虫接种,确定L2菌株能引起与自然发病相似的症状,且能从接种发病的幼虫上再次分离到相同菌株,证明L2菌株是该蜜蜂细菌性幼虫病的致病菌。进一步对分离到的该致病菌从发病特征、病原形态学、生理生化特性、16SrRNA序列等方面进行了分析鉴定,结果显示:该菌株属于肠球菌属的屎肠球菌(Enterococcusfaecium),不是目前报道的任何一种已知蜜蜂细菌性幼虫病的病原。 展开更多
关键词 蜜蜂细菌性幼虫病 病原 鉴定 屎肠球菌
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蜜蜂残翼病RT-PCR快速检测方法的建立 被引量：3
5
作者 薛力刚 王振国 +2 位作者 宋战昀 周亮 刘金华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期91-93,共3页
为了建立蜜蜂残翼病病毒(Deformed wing virus,DWV)RT-PCR快速检测方法,试验采用GenBank公布的蜜蜂残翼病病毒全基因序列设计1对特异性引物,对所提取的RNA进行反转录合成cDNA后,进行聚合酶链式反应,并对这种快速检测方法的特异性和敏感... 为了建立蜜蜂残翼病病毒(Deformed wing virus,DWV)RT-PCR快速检测方法,试验采用GenBank公布的蜜蜂残翼病病毒全基因序列设计1对特异性引物,对所提取的RNA进行反转录合成cDNA后,进行聚合酶链式反应,并对这种快速检测方法的特异性和敏感性进行研究。结果表明:在约702 bp处出现目的条带,其他病原无目的条带出现,灵敏性可达1×104的模板稀释度。 展开更多
关键词 蜜蜂残翼病 RT—PCR 检测
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中蜂囊状幼虫病病毒检测及地区间遗传变异 被引量：2
6
作者 宋文菲 张学文 +3 位作者 张祖芸 王艳辉 黄平 罗卫庭 《中国农学通报》 CSCD 2013年第17期42-46,共5页
为了摸清云南蒙自地区整个中蜂场春繁季节中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)的感染及其病毒株分化情况。运用RT-PCR对57群滇南中蜂进行CSBV带毒率检测和遗传变异分析。结果表明:该蜂场有26群滇南中蜂感染CSBV,感染率为45.6%,其中隐性感染为31.5... 为了摸清云南蒙自地区整个中蜂场春繁季节中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)的感染及其病毒株分化情况。运用RT-PCR对57群滇南中蜂进行CSBV带毒率检测和遗传变异分析。结果表明:该蜂场有26群滇南中蜂感染CSBV,感染率为45.6%,其中隐性感染为31.57%,显性感染为14.04%。所选用的2对引物均能较好地对滇南中蜂CSBV进行分子识别鉴定,其中第二对引物更适合;种群间RNA序列变异分析表明:云南种群与重庆种群聚为一个分支,遗传距离为0.014。说明春繁季节是云南蒙自地区滇南中蜂CSBV发生的重要时段,应提早采取预防措施;CSBV病毒株在不同地区存在分化现象,云南种群与重庆种群遗传关系较近,推测CSBV地理距离与遗传距离可能有关系。 展开更多
关键词 滇南中蜂 中蜂囊状幼虫病病毒 春繁季节 感染率 遗传距离
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中华蜜蜂细胞吞噬与包囊作用相关基因全长转录本鉴定及分析 被引量：1
7
作者 郭思佳 张凯遥 +7 位作者 荆欣 高旭泽 冯佩林 邹培缘 张浩宇 陈大福 郭睿 付中民 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2024年第3期1-10,共10页
【目的】系统鉴定和分析中华蜜蜂(Apis cerana cerana)吞噬与包囊作用相关基因和全长转录本,为深入开展相关基因和剪接体的功能研究奠定基础。【方法】基于前期已获得的高质量中华蜜蜂纳米孔长读段测序数据,通过Blast工具将全长转录本比... 【目的】系统鉴定和分析中华蜜蜂(Apis cerana cerana)吞噬与包囊作用相关基因和全长转录本,为深入开展相关基因和剪接体的功能研究奠定基础。【方法】基于前期已获得的高质量中华蜜蜂纳米孔长读段测序数据,通过Blast工具将全长转录本比对Nr数据库筛选出吞噬与包囊作用相关基因和全长转录本。利用gffcompare软件将全长转录本与东方蜜蜂(Apis cerana)参考基因组上注释的转录本进行比较,鉴定未注释的新基因和新转录本。利用TAPIS pipeline预测和分析吞噬与包囊作用相关基因的可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)位点,并通过TBtools软件鉴定APA位点上游的基序(motif)。使用Astalavista软件鉴定可变剪接(alternative splicing, AS)事件,并通过IGV浏览器进行结构可视化。通过RT-PCR验证AS事件的真实性。【结果】共鉴定到中华蜜蜂吞噬与包囊作用相关的基因66个和全长转录本395条,发掘出东方蜜蜂参考基因组未注释的2个新基因和303条新转录本。对参考基因组已注释的34个基因进行了结构优化,分别延伸了18个基因的5′端和12个基因的3′端,同时延长了4个基因的5′端和3′端。共鉴定到含有1个及以上APA位点的吞噬与包囊作用相关基因47个,其中多于5个APA位点的基因最多,为32个。在APA位点上游鉴定到多个基序,一致性序列为:GRBGCNKSDAACAAYTRBGCBMRNGGBYAYTAYWCNVWNGG。共鉴定到吞噬与包囊作用相关基因的AS事件296次,其中包括131次可变3′端剪接(alternative 3′splice site, A3SS)、85次内含子保留(intron retention, IR)、70次可变5′端剪接(alternative 5′splice site, A5SS)和10次外显子跳跃(exon skipping, ES)。RT-PCR结果显示,扩增的目的片段大小符合预期,证实了随机选择的2次AS事件的真实性。【结论】系统鉴定了中华蜜蜂吞噬与包囊作用相关基因和全长转录本以及AS事件和APA位点,优化了东方蜜蜂参考基因组注释的吞噬与包囊作用相关基因的结构。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 吞噬作用 包囊作用 全长转录本 纳米孔测序 可变剪接 可变多聚腺苷酸化
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中华蜜蜂幼虫响应中蜂囊状幼虫病毒感染的MicroRNAs分析 被引量：1
8
作者 李一 肖宇婷 +3 位作者 马跃宇 李明 费东亮 马鸣潇 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期1366-1377,共12页
为了研究中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化,探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量测序... 为了研究中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)感染中华蜜蜂幼虫后体内MicroRNAs(miRNA)表达谱变化,探讨差异miRNAs(DEmiRNAs)在中蜂幼虫响应CSBV应答中的功能。本研究分别对感染CSBV24h和48h中蜂幼虫进行Illumina高通量测序,通过生物信息学软件分析DEmiRNAs及其靶基因,并进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。通过RT-qPCR对测序结果进行验证。结果显示:对CSBV感染前后中蜂幼虫测序共筛选出140个已知miRNAs和预测到5个新miRNAs。其中,L24I组(CSBV感染24h幼虫)和L24H组(健康幼虫)对比发现18个DEmiRNAs,其中有12个表达上调,有6个表达下调;L48I组(CSBV感染48h幼虫)和L48H组(健康幼虫)筛选到47个DEmiRNAs,其中有30个表达上调,有17个表达下调。GO分析表明,部分DEmiRNAs及相关靶基因参与免疫系统过程和刺激反应等功能;KEGG通路分析显示,除涉及物质和能量代谢通路外,主要的免疫通路包括MAPK、溶酶体、Hippo、凋亡信号通路等。选取对蜜蜂调控具有重要作用和将要研究的8个miRNAs进行RT-qPCR验证结果表明,结果表明其表达水平与测序结果高度一致,表明测序准确可靠。通过本研究,不仅有助于我们深入认识CSBV感染中蜂幼虫过程中宿主miRNA变化情况,也为探究中华蜜蜂和CSBV相互作用时miRNA发挥的功能提供帮助。 展开更多
关键词 CSBV 中华蜜蜂 幼虫 MICRORNA 测序
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伊犁河谷六县养蜂情况及白垩病流行病学调查
9
作者 何晓杰 侯鑫 +5 位作者 伊恒博 艾拉提·格玛迪 张九歌 贾磊 雷程红 王振宝 《中南农业科技》 2024年第9期121-124,158,共5页
为掌握新疆伊犁河谷养蜂生产情况和白垩病流行情况,采取现场调查、线上调查、临床检查和实验室检查对尼勒克县、新源县、巩留县、特克斯县、昭苏县、霍城县6个养蜂密集地区开展了调查。结果表明,调查的45家蜂场,蜂群8470群,采用小转地... 为掌握新疆伊犁河谷养蜂生产情况和白垩病流行情况,采取现场调查、线上调查、临床检查和实验室检查对尼勒克县、新源县、巩留县、特克斯县、昭苏县、霍城县6个养蜂密集地区开展了调查。结果表明,调查的45家蜂场,蜂群8470群,采用小转地养蜂模式,饲养蜂种以新疆黑蜂为主,占66.6%,意大利蜂占22.2%,杂交蜂与卡蜂占9.0%,西域黑蜂占2.2%;养蜂者年龄以40~49岁占比最高,文化水平以初中为主,平均每年参加培训3次及以上的占48.9%;主要蜜源植物有10种,辅助蜜源30余种;45家蜂场2021年生产山花蜜5.0~20.0 kg/箱、油菜蜜15.0~50.0 kg/箱,蜂场平均年产王浆为46.0 kg、蜂胶18.0 kg、蜂蜡156.0 kg;白垩病发病率达64.4%,无有效防治方法。通过调查,初步掌握了伊犁河谷6个县养蜂生产及白垩病流行情况,为蜂产业高质量发展提供理论依据。 展开更多
关键词 养蜂情况 白垩病 流行病学 调查 新疆伊犁河谷
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浙江省淳安县中华蜜蜂囊状幼虫病毒与蜂房球菌感染情况调查 被引量：2
10
作者 王德前 黄敏婕 +3 位作者 郭海坤 方勐鸽 李君竹 董捷 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期389-394,共6页
为了解浙江省淳安县中华蜜蜂囊状幼虫病和欧洲幼虫腐臭病病原[中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)和蜂房球菌(Melissococcus pluton)]全年流行情况,于2019年1月—12月采集淳安县5个饲养点的中蜂工蜂,并采用聚合酶链式反应... 为了解浙江省淳安县中华蜜蜂囊状幼虫病和欧洲幼虫腐臭病病原[中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)和蜂房球菌(Melissococcus pluton)]全年流行情况,于2019年1月—12月采集淳安县5个饲养点的中蜂工蜂,并采用聚合酶链式反应检测方法,监测这2种病原在蜂群内的动态变化情况。结果显示:CSBV蜂群感染率在春季3月最高,为84%,到夏季7月降到最低,又从秋季开始升高,一直延续到冬季;蜂房球菌感染率从春季开始升高,到夏季开始下降,又从秋季开始升高,在10月和11月达到全年最高水平,为72%,冬季略有下降;在一年当中,蜂群内中蜂囊状幼虫病和欧洲幼虫腐臭病病原具有共同存在的现象;通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测发现,秋季蜂房球菌存在的蜂群内CSBV载量显著高于单一检出CSBV的蜂群(P<0.05)。总之,本研究明确了浙江省淳安县中蜂2种主要病原在蜂群中的全年流行动态情况,可为该地区中蜂病害的预防和控制提供理论指导。 展开更多
关键词 中华蜜蜂囊状幼虫病 欧洲幼虫腐臭病 流行病学 淳安县 病原共存
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贵州省中华蜜蜂囊状幼虫病的发病情况与流行规律调查
11
作者 詹洪平 万炜 +4 位作者 贺兴江 姚丹 周文才 李应 韦小平 《贵州畜牧兽医》 2024年第5期68-72,共5页
为了解贵州中华蜜蜂囊状幼虫病的发病情况与流行规律,采用文献查阅、问卷及实地调查、定期监测方法对其发病季节、致病因素、发病率等情况进行分析研究。结果:该病自1974年传入贵州,一年四季均可发生,发病高峰期为2—6月、10月—次年1月... 为了解贵州中华蜜蜂囊状幼虫病的发病情况与流行规律,采用文献查阅、问卷及实地调查、定期监测方法对其发病季节、致病因素、发病率等情况进行分析研究。结果:该病自1974年传入贵州,一年四季均可发生,发病高峰期为2—6月、10月—次年1月,病因与气温、群势、饲养水平、蜂王质量等有关;近5年全省蜂场发病率为60.27%,大部分蜂场蜂群发病率为25%;91.78%的蜂农能通过症状判断蜂群患病,主要采取做好四季管理、及时补饲、密集群势、人工断子、换王、及时消毒等措施进行防控,辅以药物治疗,病害未对贵州蜂场造成重大损失。结论:中华蜜蜂囊状幼虫病在贵州的发病情况较平稳,应注意防范患病蜂群并发或继发其他病害。 展开更多
关键词 贵州省 中华蜜蜂 囊状幼虫病 流行病调查
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蜜蜂传染性疾病的实验室诊断技术 被引量：2
12
作者 任勤 戴荣国 +2 位作者 郭军 王瑞生 姬聪慧 《四川畜牧兽医》 2011年第8期30-32,共3页
蜜蜂传染性疾病都具有一定的潜伏期或隐性感染,只有在一定条件下才表现出症状,一旦内外环境适应病原的生存和发展,便会引起病害的流行。本文主要对蜜蜂传染性病原的体外培养镜检、免疫学及分子生物学的实验室诊断方法及最新研究进展、... 蜜蜂传染性疾病都具有一定的潜伏期或隐性感染,只有在一定条件下才表现出症状,一旦内外环境适应病原的生存和发展,便会引起病害的流行。本文主要对蜜蜂传染性病原的体外培养镜检、免疫学及分子生物学的实验室诊断方法及最新研究进展、发展趋势等进行综述。 展开更多
关键词 蜜蜂 实验室诊断 传染性疾病
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蜜蜂病毒性疾病的综合预防措施
13
作者 郝连声 邵希荣 +6 位作者 任福生 刘学才 常德生 刘金平 孙建福 付世范 张登祥 《吉林农业》 2004年第9期25-25,共1页
蜜蜂和自然界其它生物一样,都会受到病原微生物的侵袭,感染各种各样的疾病.其中包括蜜蜂病毒性疾病.侵袭蜜蜂的病毒大都属于肠道病毒属和虹彩病毒属的病毒.蜜蜂感染这些致病性病毒后,使幼虫和成蜂发病死亡.造成蜂群群势下降,生产性能低... 蜜蜂和自然界其它生物一样,都会受到病原微生物的侵袭,感染各种各样的疾病.其中包括蜜蜂病毒性疾病.侵袭蜜蜂的病毒大都属于肠道病毒属和虹彩病毒属的病毒.蜜蜂感染这些致病性病毒后,使幼虫和成蜂发病死亡.造成蜂群群势下降,生产性能低下.例如,蜜蜂囊状幼虫病、蜜蜂麻痹病. 展开更多
关键词 蜜蜂 病毒性疾病 综合预防 蜂王 饲养
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蜜蜂球囊菌基因结构优化及新基因鉴定 被引量：9
14
作者 郭睿 陈华枝 +7 位作者 童新宇 熊翠玲 郑燕珍 付中民 解彦玲 王海朋 赵红霞 陈大福 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期61-68,共8页
为补充和完善蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis基因组序列和功能注释信息,本研究利用RNA-seq技术对球囊菌菌丝和孢子进行深度测序,并基于高质量的转录组数据对已注释基因进行结构优化,对未注释基因进行预测、鉴定和分析。将测序得到的有效读... 为补充和完善蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis基因组序列和功能注释信息,本研究利用RNA-seq技术对球囊菌菌丝和孢子进行深度测序,并基于高质量的转录组数据对已注释基因进行结构优化,对未注释基因进行预测、鉴定和分析。将测序得到的有效读段进行参考基因组比对和转录本重构;利用Cuffcompare软件将重构转录本与参考基因组进行比对。结果表明:共对101个已注释基因的5′端或3′端进行了延长;共鉴定出373个新基因,随机挑选10个新基因进行RT-PCR验证,其中8个能扩增出符合预期的目的片段,表明预测出的多数新基因真实存在;共计147个球囊菌新基因可注释到Nr和eggNOG数据库中,85个新基因注释到29个GO条目,66个新基因注释到33条代谢通路。本研究结果补充了球囊菌的基因结构和功能注释信息,也为新基因的功能研究打下了初步基础。 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 转录组 已注释基因 结构优化 新基因
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中蜂囊状幼虫病病毒结构蛋白的表达及其抗血清的制备 被引量：9
15
作者 沈克飞 张邑帆 +4 位作者 曹兰 王瑞生 杨金龙 杨柳 戴荣国 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期89-92,共4页
目的原核表达中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sarbood virus,CSBV)结构蛋白,并制备其抗血清。方法采用RT-PCR法扩增CSBV结构蛋白基因片段,克隆至pGEX-4T-1载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经Gluthathione-Sephar... 目的原核表达中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sarbood virus,CSBV)结构蛋白,并制备其抗血清。方法采用RT-PCR法扩增CSBV结构蛋白基因片段,克隆至pGEX-4T-1载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经Gluthathione-Sepharose 4B亲和层析纯化后,免疫小鼠,制备抗血清,并进行Western blot鉴定。结果重组表达质粒经菌落PCR鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约52 000,以可溶性形式表达;纯化后纯度可达95%以上;制备的抗血清可识别天然CSBV结构蛋白。结论成功在大肠杆菌中表达了CSBV结构蛋白,并制备了其抗血清,为进一步研究囊状幼虫病病毒与宿主的相互作用及开发血清学诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 囊状幼虫病病毒 病毒结构蛋白质类 基因表达 抗血清
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中蜂囊状幼虫病毒的纯化、结晶与结构研究 被引量：18
16
作者 冯建勋 张勤奋 +3 位作者 马泽微 张景强 黄文忠 张学峰 《电子显微学报》 CAS CSCD 1998年第4期387-388,共2页
中蜂囊状幼虫病毒的纯化、结晶与结构研究冯建勋卢火斤英张勤奋马泽微张景强黄文忠＊张学峰＊（中山大学昆虫研究所生物防治国家重点实验室，广州５１０２７５）（＊广东省昆虫研究所蜜蜂组，广州５１０２６０）＊国家自然科学基金重点... 中蜂囊状幼虫病毒的纯化、结晶与结构研究冯建勋卢火斤英张勤奋马泽微张景强黄文忠＊张学峰＊（中山大学昆虫研究所生物防治国家重点实验室，广州５１０２７５）（＊广东省昆虫研究所蜜蜂组，广州５１０２６０）＊国家自然科学基金重点项目资助中蜂囊状幼虫病是中峰生产中... 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病 病毒 蜜蜂 电镜
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高效液相色谱法对农产品中黄曲霉毒素的测定研究 被引量：27
17
作者 马良 李培武 张文 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期774-778,共5页
采用免疫亲和方法进行样品前处理，用甲醇一乙腈一水三元流动相体系分离黄曲霉毒素，氯化汞溶液在线衍生，荧光检测器检测，建立了新型的高效液相色谱柱后衍生测定黄曲霉毒素（B1、B2、G1、G2、M1）的方法。该方法在13min内完成测定，... 采用免疫亲和方法进行样品前处理，用甲醇一乙腈一水三元流动相体系分离黄曲霉毒素，氯化汞溶液在线衍生，荧光检测器检测，建立了新型的高效液相色谱柱后衍生测定黄曲霉毒素（B1、B2、G1、G2、M1）的方法。该方法在13min内完成测定，线性关系良好，5种黄曲霉毒素的线性相关系数r值均大于0．999。方法成功应用于花生、花生制品、大米、玉米等农产品。对样品进行不同水平的加标回收实验，回收率为83％-100％，相对标准偏差1．51％-4．98％（12=7），B，检出限（S／N=3）和定量下限（S／N=10）分别达到了0．05μg/kg和0．17μg/kg。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 高效液相色谱 柱后衍生 氯化汞
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蜜蜂囊状幼虫病研究进展 被引量：13
18
作者 李薇 薛菲 +4 位作者 Wubie Abebe Jenberie 黄家兴 国占宝 周婷 徐书法 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第6期117-122,共6页
蜜蜂囊状幼虫病是由蜜蜂囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)引起的一种病毒病,对蜂群危害极其严重,对我国本土蜂种的中华蜜蜂危害更甚。到目前为止,我国有20多个省发现中华蜜蜂感染此病,病害侵袭极其严重。由于该病无特效药物可以治疗,... 蜜蜂囊状幼虫病是由蜜蜂囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)引起的一种病毒病,对蜂群危害极其严重,对我国本土蜂种的中华蜜蜂危害更甚。到目前为止,我国有20多个省发现中华蜜蜂感染此病,病害侵袭极其严重。由于该病无特效药物可以治疗,我国部分省份的部分地区由于囊状幼虫病的大流行已经导致该地区中华蜜蜂饲养数量几乎为零,给当地的蜂业生产带来巨大损失。论文从蜜蜂囊状幼虫病的流行规律、病毒的生物学特性、病害诊断方法和蜜蜂抗性机理四个方面对蜜蜂囊状幼虫病研究进展进行概述,旨在为今后有效防控蜜蜂囊状幼虫病提供参考。 展开更多
关键词 蜜蜂 囊状幼虫病 诊断方法 流行
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营养生态条件对蜜蜂球囊菌生长及产孢的影响 被引量：17
19
作者 梁勤 陈大福 王建鼎 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 2001年第4期31-34,共4页
从碳源、氮源、维生素、矿质元素等方面研究了营养生态条件对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis Olive＆Spiltoir)生长及产孢的影响。结果表明,营养生态条件的变化对蜜蜂球囊菌的影响极大。A.apis菌丝体生长最好的碳源是果糖,产孢量最高的是... 从碳源、氮源、维生素、矿质元素等方面研究了营养生态条件对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis Olive＆Spiltoir)生长及产孢的影响。结果表明,营养生态条件的变化对蜜蜂球囊菌的影响极大。A.apis菌丝体生长最好的碳源是果糖,产孢量最高的是葡萄糖,不利用山梨糖和甘露糖;该菌优先利用有机氮源,不利用无机氮源中NaNO_2、H_2NCSNH_2;维生素对A.apis产孢量有极为显著的影响,复合维生素比单一维生素能更好地促进菌丝体生长,尤其对产孢更为有利;矿质元素中Mg^(2+)、P^(5+)、K^+、Zn^(2+)促进菌丝体生长和孢子的形成,Na^+对菌丝体的生长有抑制作用。 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 营养生态 菌丝体生长 产孢 蜜蜂病害 白垩病
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蜜蜂球囊菌分泌多种胞外酶侵染蜜蜂幼虫 被引量：12
20
作者 郑志阳 李江红 +1 位作者 梁勤 陈大福 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第3期280-284,共5页
对健康和患病蜜蜂幼虫血淋巴进行SDS-PAGE电泳和蛋白酶、酯酶的活性染色,以研究蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶种类及对蜜蜂侵染的作用.结果表明:健康蜜蜂幼虫血淋巴中的蛋白含量丰富,主要由4种高分子质量的蛋白组成,而患病幼虫血淋巴中的蛋白... 对健康和患病蜜蜂幼虫血淋巴进行SDS-PAGE电泳和蛋白酶、酯酶的活性染色,以研究蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶种类及对蜜蜂侵染的作用.结果表明:健康蜜蜂幼虫血淋巴中的蛋白含量丰富,主要由4种高分子质量的蛋白组成,而患病幼虫血淋巴中的蛋白含量很少,主要蛋白组分被降解;在患病幼虫血淋巴中可以检测到健康幼虫所没有的多种蛋白酶和酯酶的活性.可见,蜜蜂球囊菌在侵染蜜蜂幼虫的过程中涉及到胞外酶的作用,这些胞外酶参与降解蜜蜂的组织,为蜜蜂球囊菌的生长提供营养. 展开更多
关键词 蜜蜂球囊菌 侵染 胞外酶 血淋巴 活性染色
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