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绵羊肺炎支原体Y98和丝状支原体丝状亚种PG3抗原的分析 被引量:6
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作者 裴艳涛 孙继国 +1 位作者 蒋瑞萍 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期133-136,共4页
用SDS-PAGE和双向电泳方法,对绵羊肺炎支原体标准株Y98和丝状支原体丝状亚种标准株PG3的全菌可溶性抗原进行分析。结果表明,用SDS-PAGE分析Y98有9条蛋白带,PG3有11条蛋白带,其中有2条相同蛋白带;用双向电泳分析Y98全菌可溶性抗原多肽斑... 用SDS-PAGE和双向电泳方法,对绵羊肺炎支原体标准株Y98和丝状支原体丝状亚种标准株PG3的全菌可溶性抗原进行分析。结果表明,用SDS-PAGE分析Y98有9条蛋白带,PG3有11条蛋白带,其中有2条相同蛋白带;用双向电泳分析Y98全菌可溶性抗原多肽斑点有288±9,主多肽斑点有47个,相对分子质量范围在27 000~120000;pI范围为4.436~7.164,PG3全菌可溶性抗原多肽斑点有243±11个,主多肽斑点有36个,相对分子质量范围在27 000~120 000,而pI范围为4.213~7.987,二者有21个相同多肽点,但其多肽含量略有差异。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 丝状支原体丝状亚种 双向电泳 抗原
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牛支原体pdhc基因的克隆、表达及其亚细胞定位 被引量:5
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作者 张懿 邢小勇 +1 位作者 温峰琴 包世俊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期2377-2385,共9页
试验旨在研究牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)武威株二氢硫辛酰胺转乙酰酶(PDHc-E2)基因序列特征及其在牛支原体细胞中的位置。参照GenBank中牛支原体HB0801株pdhc基因(登录号:CP002058.1)设计引物,应用PCR扩增获得牛支原体武威株p... 试验旨在研究牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)武威株二氢硫辛酰胺转乙酰酶(PDHc-E2)基因序列特征及其在牛支原体细胞中的位置。参照GenBank中牛支原体HB0801株pdhc基因(登录号:CP002058.1)设计引物,应用PCR扩增获得牛支原体武威株pdhc基因,在测序及序列分析的基础上,应用Overlap PCR完成点突变后将其克隆至pET-28a(+)中,构建原核表达载体pET-pdhc。pET-pdhc转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞后经IPTG诱导获得融合蛋白,将纯化蛋白免疫新西兰兔制备多抗血清,应用iELISA和Western blotting对牛支原体武威株PDHc-E2在细胞内的分布进行初步研究。结果显示,牛支原体武威株pdhc基因CDS全长735bp,编码244个氨基酸,与国内牛支原体分离株HB0801、Hubei-1、CQ-W70、NM2012等基因序列完全一致,与国际标准株PG45同源性为99.2%,与无乳支原体(M.agalactiae)同源性为90.9%~91.2%,与加利福尼亚支原体(M.californicum)ST6株的同源性仅为78.4%,基因序列非常保守;通过Overlap PCR将该基因中4个编码色氨酸的TGA密码子突变为TGG,且完成点突变后的基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白大小约为29ku,主要以可溶性形式存在,iELISA结果显示,重组蛋白PDHc-E2具有较高的免疫原性,可刺激新西兰兔产生高水平的抗体,血清效价高达1∶100 000;亚细胞定位结果表明,制备的多抗血清与重组蛋白PDHc-E2、牛支原体全菌蛋白、牛支原体膜蛋白、牛支原体胞浆蛋白均能发生特异性结合,说明该蛋白在牛支原体细胞膜和细胞质中均有分布,为膜相关蛋白,但在细胞质中的分布多于细胞膜。本研究结果为进一步研究牛支原体的生物学功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 牛支原体 二氢硫辛酰胺转乙酰酶 原核表达 亚细胞定位
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鸡滑液囊支原体病的诊断及防控技术研究进展 被引量:4
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作者 刘廷江 张文婷 +4 位作者 廖卫东 郭云清 胡巧 翟新国 罗青平 《中南农业科技》 2023年第10期222-225,共4页
滑液囊支原体病是一种由滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae)引起的鸡(Gallus gallus f. domestic)的急性或慢性传染病,可导致雏鸡死亡、呼吸困难、跛行、产蛋下降等,给家禽养殖业造成较大经济损失。概述了滑液囊支原体病主要诊断技术和... 滑液囊支原体病是一种由滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae)引起的鸡(Gallus gallus f. domestic)的急性或慢性传染病,可导致雏鸡死亡、呼吸困难、跛行、产蛋下降等,给家禽养殖业造成较大经济损失。概述了滑液囊支原体病主要诊断技术和防控技术的研究进展,并针对其研究进展分析其优缺点,以期为防治滑液囊支原体病提供参考。 展开更多
关键词 鸡(Gallus gallus f.domestic) 滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae) 诊断技术 防控方法 疫苗
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