为建立禽源鹦鹉热衣原体临床快速、准确的诊断方法,本研究针对禽源鹦鹉热衣原体外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)基因的保守区域设计特异性引物,建立了普通PCR、套式PCR和qPCR三种检测方法。通过对比三种检测方法的特异性、灵...为建立禽源鹦鹉热衣原体临床快速、准确的诊断方法,本研究针对禽源鹦鹉热衣原体外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)基因的保守区域设计特异性引物,建立了普通PCR、套式PCR和qPCR三种检测方法。通过对比三种检测方法的特异性、灵敏性、重复性以及临床样品的阳性检出率,发现三种PCR检测方法的重复性均良好,组内与组间变异系数低;与其它常见家禽病原体无交叉反应,特异性较强;建立的qPCR检测方法灵敏性较高,最低检测限度为1.20×101拷贝/μL,分别比套式PCR和普通PCR的灵敏性高10倍和100倍;对72份临床样品进行平行检测,普通PCR、套式PCR和qPCR的阳性样品检出率分别为4.16%(3/72)、48.61%(35/72)和61.11%(44/72)。因此,通过对比三种PCR检测方法,发现qPCR检测方法更适用于禽源鹦鹉热衣原体的临床快速准确诊断和流行病学调查。展开更多
文摘为建立禽源鹦鹉热衣原体临床快速、准确的诊断方法,本研究针对禽源鹦鹉热衣原体外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)基因的保守区域设计特异性引物,建立了普通PCR、套式PCR和qPCR三种检测方法。通过对比三种检测方法的特异性、灵敏性、重复性以及临床样品的阳性检出率,发现三种PCR检测方法的重复性均良好,组内与组间变异系数低;与其它常见家禽病原体无交叉反应,特异性较强;建立的qPCR检测方法灵敏性较高,最低检测限度为1.20×101拷贝/μL,分别比套式PCR和普通PCR的灵敏性高10倍和100倍;对72份临床样品进行平行检测,普通PCR、套式PCR和qPCR的阳性样品检出率分别为4.16%(3/72)、48.61%(35/72)和61.11%(44/72)。因此,通过对比三种PCR检测方法,发现qPCR检测方法更适用于禽源鹦鹉热衣原体的临床快速准确诊断和流行病学调查。
