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中国猪群存在Torque teno Virus(TTV)感染 被引量:9
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作者 温立斌 何孔旺 +11 位作者 杨汉春 郭容利 李成仁 钟书霖 茅爱华 倪艳秀 张雪寒 周俊明 吕立新 俞正玉 李彬 王小敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期85-90,共6页
为了探讨中国猪群TTV的感染现状以及是否存在新的基因亚型,基于TTV1和TTV2相对保守的5’非翻译区(5’UTR)设计引物,采用PCR法对2008~2009年采集于中国江苏省的138份猪血清进行了检测。结果表明,中国猪群,TTV1的感染率为15.9%,... 为了探讨中国猪群TTV的感染现状以及是否存在新的基因亚型,基于TTV1和TTV2相对保守的5’非翻译区(5’UTR)设计引物,采用PCR法对2008~2009年采集于中国江苏省的138份猪血清进行了检测。结果表明,中国猪群,TTV1的感染率为15.9%,TTV2的为34.8%,共感染率为5.8%。所扩增片断的核苷酸序列分析结果表明,中国TTV1和TTV2流行毒株之间的核苷酸同源性分别为87.3%~93.8%和74.8%~99.1%,与GenBank其他TTV1和TTV2毒株的同源性分别为69.6%~100.0%和74.8%~99.1%。系统进化分析结果表明,中国TTV1和TTV2流行毒株存在新的基因亚型。 展开更多
关键词 TTV1 TTV2 5’UTR 中国
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2006~2008年我国部分地区规模化猪场PRV血清流行病学调查 被引量:32
2
作者 程晶 陈艳红 +4 位作者 荫硕焱 盖新娜 查振林 郭鑫 杨汉春 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第1期67-72,共6页
为了监测现有的防疫控制体系下我国规模化猪场PRV野毒感染情况,本研究应用IDEXX(PRV gE-ELISA试剂盒对2006年9月~2008年9月送检的14个省(直辖市)89个规模化猪场的5312份样品血清进行PRV野毒抗体检测。结果显示,PRV野毒抗体阳性猪场有65... 为了监测现有的防疫控制体系下我国规模化猪场PRV野毒感染情况,本研究应用IDEXX(PRV gE-ELISA试剂盒对2006年9月~2008年9月送检的14个省(直辖市)89个规模化猪场的5312份样品血清进行PRV野毒抗体检测。结果显示,PRV野毒抗体阳性猪场有65个,占检测猪场总数的73.03%;各猪场血清样品中伪狂犬野毒抗体平均阳性率为23.40%。对不同生长阶段的猪群检测结果分析表明,PRV野毒抗体阳性率随猪龄的增长而升高,且不同生长阶段猪群PRV野毒抗体阳性率差异极显著,而不同季度送检的血清PRV野毒抗体阳性率没有显著差异。本次调查表明,我国免疫猪伪狂犬病毒基因缺失疫苗的规模化猪场仍存在猪伪狂犬野毒感染。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 血清学调查 ELISA
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2011~2014年上海市屠宰场上市肉猪主要病毒感染情况调查 被引量:7
3
作者 鞠厚斌 周锦萍 +7 位作者 杨德全 李凯航 葛菲菲 刘健 杨显超 吴秀娟 李鑫 刘佩红 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第3期55-60,共6页
为了解上海市屠宰场上市肉猪主要病毒的感染情况,2011~2014年在上海市5个屠宰场共采集759份血清样品,采用ELISA方法进行了口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征抗体检测;采用荧光PCR方法对720份组织样品进行了口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综... 为了解上海市屠宰场上市肉猪主要病毒的感染情况,2011~2014年在上海市5个屠宰场共采集759份血清样品,采用ELISA方法进行了口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征抗体检测;采用荧光PCR方法对720份组织样品进行了口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪流感病毒、猪细小病毒7种病毒检测。血清学检测结果显示,猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、口蹄疫抗体平均阳性率依次为96.6%、72.3%、66.4%。荧光PCR检测结果:口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病毒均为阴性,但猪圆环病毒2型、猪细小病毒阳性率较高,阳性率分别是37.9%、8.3%。由此可见,上海市屠宰场上市肉猪重大动物疫病防控已有一定效果,但猪圆环病毒2型和猪细小病毒仍具有较高阳性率,对猪群健康存在一定的危害。 展开更多
关键词 病毒 感染 屠宰场 上海
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猪传染性胃肠炎病毒SYBR Green Ⅱ荧光定量PCR检测方法的建立及在初乳检测上的应用 被引量:6
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作者 龚双燕 李小璟 +6 位作者 李幽幽 陈瑛琪 蔡瑶 李雨濛 徐逸飞 徐志文 朱玲 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期1076-1081,共6页
为了提高初乳中猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的检出率,避免初生仔猪受到带毒初乳的危害,建立了一种SYBR GreenⅡ荧光定量PCR(qPCR)检测方法。根据Gen Bank已发表的TGEV的N基因序列,选择保守区域设计... 为了提高初乳中猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)的检出率,避免初生仔猪受到带毒初乳的危害,建立了一种SYBR GreenⅡ荧光定量PCR(qPCR)检测方法。根据Gen Bank已发表的TGEV的N基因序列,选择保守区域设计、合成了1对特异性引物,扩增TGEV的N基因片段(174 bp),构建含有N基因片段的重组质粒,以重组质粒作为模板建立了特异性检测TGEV的qPCR检测方法。该方法的灵敏性比普通PCR方法高,应用建立的qPCR检测方法,对2016年10月-2017年4月采集自四川省部分地区腹泻猪场的母猪初乳130份进行检测,并与普通PCR检测方法进行比较。结果显示:用qPCR方法检测,130份样本中有13份为TGEV阳性,而普通PCR方法只检测到5份TGEV阳性样本。说明qPCR检测方法的敏感性高于普通PCR方法,更适合用于猪初乳检测。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 荧光定量PCR检测 初乳
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1株临床高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定 被引量:9
5
作者 王兴龙 柏坤桃 +3 位作者 李玉峰 唐波 蒋文明 姜平 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第8期12-16,共5页
本研究从江苏省某猪场患有明显呼吸道临床症状和高热死亡的仔猪肺脏组织中分离到一株病毒,经病毒生物学特性测定、血清学试验、病毒基因鉴定,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。人工猪体感染发病试验表明,该分离株可以引起商... 本研究从江苏省某猪场患有明显呼吸道临床症状和高热死亡的仔猪肺脏组织中分离到一株病毒,经病毒生物学特性测定、血清学试验、病毒基因鉴定,确定为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。人工猪体感染发病试验表明,该分离株可以引起商品仔猪出现明显临床症状和死亡,证实我国已经出现临床高致病性PRRSV毒株。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 分离 致病性
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猪流行性腹泻病毒HB2015分离株N基因表达及单克隆抗体的制备 被引量:5
6
作者 祁光宇 刘斌 赵兴绪 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期76-80,共5页
根据已经发表的猪流行性腹泻病毒N基因序列(GenBank:KX016034.1),设计1对特异性引物(上、下游分别插入Bam HⅠ和XhoⅠ酶切位点),通过RT-PCR技术扩增N基因,在测序鉴定正确后经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切,将其克隆至原核表达载体pET-32a上,获... 根据已经发表的猪流行性腹泻病毒N基因序列(GenBank:KX016034.1),设计1对特异性引物(上、下游分别插入Bam HⅠ和XhoⅠ酶切位点),通过RT-PCR技术扩增N基因,在测序鉴定正确后经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切,将其克隆至原核表达载体pET-32a上,获得重组表达质粒pET32a-N。表达的蛋白质经纯化后进行Western blotting鉴定分析。以表达的PEDV-N蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选及亚克隆,获2株PEDV-N特异性单克隆抗体。对获得的单抗进行Western blotting鉴定和间接免疫荧光试验(IFA)分析,结果显示2株单抗均能与PEDV-N蛋白特异性结合和识别。以上结果表明PEDV-N蛋白在大肠杆菌中成功表达,且成功制备了2株具有生物学活性的特异单抗,为建立PEDV金标试纸诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N基因 原核表达 单克隆抗体 IFA分析
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类圆环病毒因子P1感染对猪外周血单核细胞中细胞因子mRNA转录的影响 被引量:3
7
作者 温立斌 何孔旺 +9 位作者 杨汉春 郭容利 俞正玉 茅爱华 倪艳秀 张雪寒 周俊明 吕立新 李彬 王小敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期1157-1159,共3页
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,无囊膜,基因组为单股环状DNA。PCV是迄今发现的一种最小的动物病毒,也是一种重要的病原微生物。根据致病性、抗原性及核苷酸序列的差异,PCV被划分成了无致病性的PCV1和有致病性的P... 猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科,无囊膜,基因组为单股环状DNA。PCV是迄今发现的一种最小的动物病毒,也是一种重要的病原微生物。根据致病性、抗原性及核苷酸序列的差异,PCV被划分成了无致病性的PCV1和有致病性的PCV2两个基因型[1-2]。猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)于1991年首发于加拿大,随后世界其他地方陆续报道。 展开更多
关键词 类圆环病毒因子 外周血单个核细胞 细胞因子
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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)S-1株GP5蛋白和N蛋白的原核表达 被引量:1
8
作者 张春玲 臧克伟 +5 位作者 张婉华 王英 蒋凤英 邹勇 李春华 何锡忠 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期876-878,883,共4页
将构建好的表达质粒pET-E和pET-N转化到大肠杆菌BL-21中,通过诱导剂IPTG的诱导,在原核表达系统中得到了高效表达,重组蛋白的分子量分别为39 KDa和31 KDa左右。通过Western-blot蛋白免疫印记法检测蛋白活性,发现两种原核表达重组蛋白均能... 将构建好的表达质粒pET-E和pET-N转化到大肠杆菌BL-21中,通过诱导剂IPTG的诱导,在原核表达系统中得到了高效表达,重组蛋白的分子量分别为39 KDa和31 KDa左右。通过Western-blot蛋白免疫印记法检测蛋白活性,发现两种原核表达重组蛋白均能与PRRSV阳性血清发生反应,具有生物学活性,这就为下一步目的蛋白的纯化、蛋白高级结构的研究以及以GP5和N蛋白为抗原ELISA诊断方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 PRRSV GP5蛋白 N蛋白 原核表达
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一起猪乙脑的RT-PCR诊断与防制 被引量:2
9
作者 吕晓丽 崔保安 +5 位作者 陈红英 魏战勇 赵丽 王东方 高文明 管倩 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第9期59-60,共2页
2006年9月,新郑市某猪场发生了一种以初产猪流产、死产为特征的疾病。提取流产胎儿的脑RNA,采用猪乙脑病毒E基因的一对特异引物,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,检测猪乙脑病毒为阳性,结合病史和临床症状,诊断为猪乙脑病毒病。对该... 2006年9月,新郑市某猪场发生了一种以初产猪流产、死产为特征的疾病。提取流产胎儿的脑RNA,采用猪乙脑病毒E基因的一对特异引物,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,检测猪乙脑病毒为阳性,结合病史和临床症状,诊断为猪乙脑病毒病。对该猪场采取综合防制措施,取得了较好的效果。 展开更多
关键词 猪乙脑病毒 PCR 诊断 防制
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株致弱毒株特异性抗原表位的鉴定 被引量:1
10
作者 姜一峰 周艳君 +10 位作者 田志军 安同庆 肖燕 韦天超 王瑜 彭金美 于海 李国新 闫丽萍 张善瑞 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第3期1-7,共7页
通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,HP-PRRSV)HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2(Nonstndural protein2)蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2... 通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,HP-PRRSV)HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2(Nonstndural protein2)蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2蛋白存在4处氨基酸点突变,针对每个突变点分别人工合成编码短肽的核苷酸序列,经原核表达后进行Western blot分析。结果表明表达的融合蛋白F65-11(749KGEPVSDQPAK759)能够特异性的与HuN4-F40、HuN4-F65和HuN4-F112感染猪的血清发生反应,而与HuN4F5感染猪的阳性血清和CH-1a株阳性血清不发生反应,证实第4个氨基酸点突变(S754)处存在一个免疫优势抗原表位。将该表位肽段由N端和C端逐步缩短继续鉴定,当N端缩短到第5个氨基酸(754SDQPAK759)C端缩短到第3个氨基酸(749KGEPVSDQ757)时,表达的融合蛋白不能与PRRSV阳性血清反应,最终推测该抗原表位必需氨基酸为753VSDQ756。选取GenBank中提交的部分高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的Nsp2氨基酸序列,对该表位氨基酸所在位置进行序列比较,分析结果显示位于Nsp2蛋白749→759位氨基酸序列高度保守,F65-11变异位点C754→S754为HuN4株系列传代毒株所特有。本研究结果证实抗原表位F65-11可以作为鉴别HuN4-F112弱毒疫苗所诱导产生的特异性抗体的候选抗原。 展开更多
关键词 PRRSV HuN4株 非结构蛋白Nsp2 抗原表位
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2015~2019年四川省重点原种猪场猪伪狂犬野毒感染及免疫情况调查 被引量:5
11
作者 陈弟诗 陈斌 +3 位作者 周莉媛 邓飞 邵靓 丁梦蝶 《四川畜牧兽医》 2020年第6期22-24,27,共4页
为了掌握四川省重点原种猪场猪伪狂犬野毒感染及其疫苗免疫情况,结合2015~2019年度农业农村部畜牧兽医局种畜禽场主要疫病监测工作,笔者对全省4个重点原种猪场开展了猪伪狂犬病流行病学的跟踪调查和监测分析。结果显示:所调查的4个重点... 为了掌握四川省重点原种猪场猪伪狂犬野毒感染及其疫苗免疫情况,结合2015~2019年度农业农村部畜牧兽医局种畜禽场主要疫病监测工作,笔者对全省4个重点原种猪场开展了猪伪狂犬病流行病学的跟踪调查和监测分析。结果显示:所调查的4个重点原种猪场在5年间均未发现猪伪狂犬野毒感染,且gB抗体总阳性率为97.95%,免疫水平较好。本研究结果为分级分类科学指导猪伪狂犬病的防控和净化提供了科学依据。 展开更多
关键词 原种猪场 猪伪狂犬野毒 抗体水平 免疫 监测
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四川省部分猪场公猪精液带毒情况的PCR和RT-PCR检测 被引量:1
12
作者 冯迎春 黄攀 颜其贵 《养猪》 2010年第5期71-72,共2页
近几年来,猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病仍然是危害我国养猪生产的主要病毒性传染病,特别是2010年四川部分地区发生的以高发病率和高死亡率为特点的“高热病”中,猪瘟病毒和蓝耳病病毒的检出率极高,猪乙型脑炎和细小病毒病也时有发生。而... 近几年来,猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病仍然是危害我国养猪生产的主要病毒性传染病,特别是2010年四川部分地区发生的以高发病率和高死亡率为特点的“高热病”中,猪瘟病毒和蓝耳病病毒的检出率极高,猪乙型脑炎和细小病毒病也时有发生。而这几种病的病原不仅能水平传播,还能通过母猪胎盘和公猪精液垂直传播。 展开更多
关键词 公猪精液 PCR检测 四川省 蓝耳病病毒 RT 猪场 病毒性传染病 猪瘟病毒
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猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及其抗原性分析
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作者 董林 王艳萍 +2 位作者 王金良 沈志强 谢金文 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期55-58,共4页
根据GenBank中登录的PCV-2序列,设计1对特异性引物,PCR扩增PCV-2去除核定位信号(nuclear localization signal,NLS)的Cap蛋白基因,经Bam HI和Xho I双酶切后将其插入到表达载体pEGX-4T-1多克隆位点,并转化到表达菌株Rossetta(DM3)中,采用... 根据GenBank中登录的PCV-2序列,设计1对特异性引物,PCR扩增PCV-2去除核定位信号(nuclear localization signal,NLS)的Cap蛋白基因,经Bam HI和Xho I双酶切后将其插入到表达载体pEGX-4T-1多克隆位点,并转化到表达菌株Rossetta(DM3)中,采用IPTG进行诱导表达,采用SDS-PAGE薄层灰度分析表达情况,收集菌体,使用GST-Protein Purification Kit亲和层析纯化方法对表达的GST-Cap融合蛋白蛋白进行纯化,SDS-PAGE电泳检测纯化效果,Western blot分析纯化后的重组Cap蛋白(rCap)免疫学活性。结果表明,成功克隆了大小为579 bp去除核定位信号的ORF2基因,成功诱导表达出预期大小45.3 ku相一致的rCap蛋白,表达量占总菌体的25%,纯化后的rCap蛋白SDS-PAGE电泳分析纯度达到90%以上,Western blot分析表明纯化的rCap蛋白能与PCV-2阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫学活性。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 原核表达 抗原性分析
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猪博卡病毒PCR检测方法的建立及其应用 被引量:38
14
作者 翟少伦 岳城 +7 位作者 韦祖樟 冉多良 龙进学 蔺涛 邓宇 孙利厂 黄律 袁世山 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第2期14-17,共4页
猪博卡病毒是最新发现的一种DNA病毒,于2009年首次在瑞典患仔猪断奶后多系统衰竭综合征的猪体内被鉴定。为了及时地评估其在我国的流行情况,本研究根据GenBank上递交的唯一一条猪博卡病毒核苷酸序列设计了一对特异性引物,并首次建立了... 猪博卡病毒是最新发现的一种DNA病毒,于2009年首次在瑞典患仔猪断奶后多系统衰竭综合征的猪体内被鉴定。为了及时地评估其在我国的流行情况,本研究根据GenBank上递交的唯一一条猪博卡病毒核苷酸序列设计了一对特异性引物,并首次建立了猪博卡病毒的PCR检测方法。该方法特异性强,敏感度高,重复性好,对2009年我国部分省市猪场的191份临床样品进行检测,结果75份为猪博卡病毒阳性,这表明我国猪群中猪博卡病毒相当流行。本研究建立的PCR方法可以作为猪博卡病毒在临床上的一种诊断技术。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 聚合酶链式反应 检测
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2008~2010年华东部分地区猪圆环病毒2型感染血清学调查 被引量:22
15
作者 赵津 张小敏 +4 位作者 周斌 曹瑞兵 庞然 何丹妮 陈溥言 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第6期49-52,共4页
为了解华东地区近三年来猪圆环病毒病(porcine circovirus disease,PCVD)的流行状况,以便更好地控制该病的发生,2008年1月~2010年9月在华东地区5个省、直辖市及河南省的68个规模化猪场(均未免疫商品化猪圆环病毒疫苗)共收集1017份猪血... 为了解华东地区近三年来猪圆环病毒病(porcine circovirus disease,PCVD)的流行状况,以便更好地控制该病的发生,2008年1月~2010年9月在华东地区5个省、直辖市及河南省的68个规模化猪场(均未免疫商品化猪圆环病毒疫苗)共收集1017份猪血清样品,应用商品化猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)抗体诊断试剂盒(PCV2-ELISA),对送检血清样品进行PCV2抗体水平检测。结果显示:送检猪血清中抗体阳性总数为609份,总阳性率为59.88%;2008、2009和2010年送检样品的阳性率分别为53.4%、35.33%和80.63%,PCV血清抗体阳性率呈先下降后上升的趋势;成年猪血清阳性率最高为81.40%,保育猪血清阳性率最低为41.48%,仔猪和育肥猪血清阳性率相近,分别为57.95%和52.20%,说明仔猪断奶后随母源抗体下降其抗体阳性率亦下降,但随猪龄的增长而感染逐渐加重后其抗体阳性率又升高,且不同生长阶段PCV毒抗体阳性率有明显差异。 展开更多
关键词 猪圆环病毒病 血清学调查 抗体水平 ELISA
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TaqMan荧光定量PCR检测猪流行性腹泻病毒方法的建立与初步应用 被引量:22
16
作者 刘邓 袁秀芳 +4 位作者 冉多良 徐丽华 牛登元 王朝文 王一成 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第1期28-34,共7页
根据GenBank中公布的猪流行性腹泻病毒Ⅳ基因序列,设计了一对特异性引物和探针,扩增长度为186bp的片段。以克隆Ⅳ基因的质粒作为阳性标准品,建立了一种快速检测猪流行腹泻病毒含量的TaqMan荧光定量PCR方法。该方法在10^9-10^1copies... 根据GenBank中公布的猪流行性腹泻病毒Ⅳ基因序列,设计了一对特异性引物和探针,扩增长度为186bp的片段。以克隆Ⅳ基因的质粒作为阳性标准品,建立了一种快速检测猪流行腹泻病毒含量的TaqMan荧光定量PCR方法。该方法在10^9-10^1copies/μL范围内具有良好的线性关系,可检测到初始模板中10copies/μL的质粒DNA,以猪圆环病毒、猪乙脑病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒为模板时,均检测不到荧光信号,而重复性实验中其变异系数均小于2%,表明此方法具有很好的特异性和重复性。应用此方法对采集的60份,陆床样品进行检测,其阳性检出率为92%,而用常规RT-PCR方法进行检测,阳性检出率仅为80%。表明荧光定量RT-PCR方法的敏感性明显高于常规PcR检测方法。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 荧光定量RT-PCR TaqMan荧光探针
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猪圆环病毒2型陕西杨凌株的分离鉴定及全基因组分析 被引量:7
17
作者 汤智慧 郭抗抗 +3 位作者 张彦明 王津津 李宇立 向华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2011年第4期7-13,18,共8页
【目的】分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、... 【目的】分离得到猪圆环病毒2型(PCV-2)陕西杨凌株,测定病毒滴度(TCID50),并进行全基因组序列比对,为研制针对性更强的PCV-2疫苗提供理论依据。【方法】从经PCR检测为猪圆环病毒2型阳性的病料中,分离病毒并接种PK-15细胞,通过PCR检测、间接免疫荧光试验及电镜观察,对分离病毒进行鉴定;用免疫过氧化物酶细胞单层试验(IPMA),测定分离毒株的TCID50,并对其全基因组序列进行测定与分析。【结果】分离得到1株猪圆环病毒2型毒株,分离株在PK-15细胞上的TCID50为10-4.75。全基因组序列同源性比对发现,分离株与一加拿大分离株(DQ200735)同源性最高(99.4%)。【结论】从陕西杨凌分离得到了1个猪圆环病毒2型分离株。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 分离鉴定 TCID50 陕西杨凌株
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中国流行的2009甲型H1N1猪源流感病毒HA和NA基因的分子和遗传特征 被引量:8
18
作者 闫丽萍 周艳君 +2 位作者 李国新 于海 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期13-19,共7页
目前流行的甲型H1N1流感病毒是一个复杂的基因重配病毒。对病毒的分子生物学研究,尤其是病毒囊膜蛋白血凝素(haemagglutini,HA)基因和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的研究,为控制和预防H1N1流感病毒具有重要的意义。本研究对中... 目前流行的甲型H1N1流感病毒是一个复杂的基因重配病毒。对病毒的分子生物学研究,尤其是病毒囊膜蛋白血凝素(haemagglutini,HA)基因和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因的研究,为控制和预防H1N1流感病毒具有重要的意义。本研究对中国流行的2009甲型H1N1猪源流感病毒的HA和NA基因与疫苗株A/California/07/2009(H1N1),以及不同国家和地区的病毒株进行核苷酸和氨基酸序列分析。从NCBI的GenBank数据库下载所需要毒株的序列,采用Lasergene 6.0软件包中的EditSeq和MegAlign进行序列分析,进化树分析采用MEGA4.1软件。进化分析表明,中国流行的2009 H1N1流感病毒与疫苗株的核苷酸同源率分别在98.8%~99.7%和98.6%~99.6%之间;裂解位点处为I/VPSIQSR↓G,不具备高致病性流感病毒的特征;有1株NA抗性病毒。尽管与疫苗株相比,中国流行株2009甲型H1N1猪源流感病毒的HA和NA基因有部分突变,但这些突变并不是重要的。本研究首次详细分析了中国流行的2009甲型H1N1猪源流感病毒株与疫苗株的HA和NA基因的分子特征,对实时监测流感病毒HA和NA基因的变化具有重要意义。 展开更多
关键词 2009H1N1流感病毒 疫苗株 血凝素 神经氨酸酶 分子和遗传特征
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猪戊型肝炎病毒分子生物学与流行病学研究进展 被引量:7
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作者 郝宝成 兰喜 +4 位作者 刑小勇 项海涛 胡永浩 柳纪省 梁剑平 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第5期67-73,共7页
戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis ... 戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是20世纪80年代发现的又一新型肝炎病毒,近年来对戊型肝炎病毒病原学、流行病学、实验室诊断、基因结构等方面研究取得了重大进展,本文就HEV的形态、基因分型、分子生物学特性、戊型肝炎(Hepatitis E,HE)的流行病学特点作一简要概述。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 形态 基因分型 分子生物学特性 流行病学
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上海市猪博卡病毒感染情况调查 被引量:10
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作者 邓波 刘佩红 +6 位作者 周锦萍 王建 刘健 鞠厚斌 葛菲菲 崔立 华修国 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期62-66,共5页
根据GenBank公布的猪博卡病毒(Porcine Bocavirus,PBoV)序列,在VP1/2基因区域设计引物和TaqMan探针建立实时荧光定量PCR检测方法,对上海市10个区(县)规模场2006~2011年间采集的1800份猪血清、2010年种猪场不同月份采集的45份猪粪便、2... 根据GenBank公布的猪博卡病毒(Porcine Bocavirus,PBoV)序列,在VP1/2基因区域设计引物和TaqMan探针建立实时荧光定量PCR检测方法,对上海市10个区(县)规模场2006~2011年间采集的1800份猪血清、2010年种猪场不同月份采集的45份猪粪便、2010年9个规模场采集的27份猪鼻棉拭以及门诊采集的9份高热病死猪内脏进行检测,阳性率依次为24%、30%、0%、67%。6份PBoV阳性病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcineparvovirus,PPV)检测,阳性率依次为83%、100%、0%、0%。检测结果表明,PBoV感染在上海市普遍存在,猪内脏中检出率较高,且春秋两季高发,仔猪比较易感,并与PRRSV、PCV2存在混合感染。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 实时荧光PCR 混合感染
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