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表儿茶素没食子酸酯对MAC-T和小鼠乳腺炎症与细胞焦亡及NF-κB通路和NLRP3炎性小体的抑制效应 被引量：2
1
作者 王浩磊 刘梦燕 +4 位作者 龙泉 李曼曼 吕祥 林涛 蒋曹德 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期430-441,共12页
本研究旨在探究表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate, ECG)对牛乳腺上皮细胞NF-κB(nuclear factor kappa B)炎性通路和NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体的抑制作用。利用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)... 本研究旨在探究表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate, ECG)对牛乳腺上皮细胞NF-κB(nuclear factor kappa B)炎性通路和NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体的抑制作用。利用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)处理牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)和小鼠乳腺;采用CCK-8法筛选ECG处理MAC-T细胞的最佳浓度,ELISA法检测促炎因子、氧化应激指示因子以及焦亡指示因子的表达水平;苏木精-伊红染色和Annexin V-FITC/PI法检测小鼠乳腺组织炎性变化和细胞膜破裂情况;Western blot检测NF-κB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein, ASC)、caspase-1和Gasdermin NH_(3 )端(GSDMD-N)的表达水平;免疫荧光检测p65核转移情况。结果发现:(1)ECG在10、20、40 mg·kg^(-1)浓度下均可减轻LPS诱导的乳腺炎症和炎性细胞浸润;(2)ECG在体内和体外均可显著且剂量依赖性地降低LPS诱导的促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和氧化应激指示因子(COX-2、iNOS、MPO)表达水平(P<0.05),(3)ECG剂量依赖性地降低了LPS诱导的细胞死亡率以及ROS、IL-18和LDH焦亡指示因子表达水平(P<0.05),(4)ECG极显著地抑制LPS诱导的NLRP3、ASC、GSDMD-N、caspase-1、磷酸化p65的表达与核转移(P<0.05)。综上表明,ECG抑制MAC-T细胞和小鼠乳腺炎症与细胞焦亡以及NF-κB通路和NLRP3炎性小体。本研究为利用ECG替代抗生素防治牛乳腺炎提供了新的数据。 展开更多
关键词 表儿茶素没食子酸酯 NF-ΚB 乳腺炎 NLRP3炎性小体 焦亡
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植物雌激素大豆黄酮对小鼠乳腺上皮细胞乳成分合成和细胞增殖的影响及机制 被引量：1
2
作者 黄心河 李浩楠 +3 位作者 周潇 徐佳婧 张源淑 韩正康 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期417-429,共13页
本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000μmol·L^(-1))处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细... 本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000μmol·L^(-1))处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细胞活力确定DZ作用浓度及时间;试验分为对照组(0μmol·L^(-1) DZ处理)、低浓度组(10μmol·L^(-1) DZ处理)、中浓度组(20μmol·L^(-1) DZ处理)、高浓度组(40μmol·L^(-1) DZ处理),并以生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照,37℃、5%CO_(2)培养12 h后,进行如下试验:(1)测定细胞及分泌上清中甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)含量及脂滴染色变化;(2)检测细胞增殖与凋亡相关蛋白、乳成分合成相关蛋白的表达变化;(3)检测PI3K/AKT-mTOR信号通路关键蛋白的磷酸化水平;(4)流式细胞技术分析细胞凋亡率与细胞周期分布情况。结果显示:(1)与对照组相比,2.5~80.0μmol·L^(-1 ) DZ处理后,细胞活力极显著提高(P<0.01),其中20μmol·L^(-1 )DZ处理提高效果最为显著,结合实验室前期结果,选择DZ作用的低、中和高浓度分别为10、20和40μmol·L^(-1),作用时间为12 h。(2)与对照组相比,中浓度及高浓度组DZ及E2处理后极显著提高了EpH4-Ev细胞及分泌上清中TG和GLU的含量,促进了脂滴的合成(P<0.01)。(3)与对照组相比,不同浓度DZ处理后葡萄糖转运载体1(GLUT1)和β-酪蛋白(β-casein)的表达均极显著升高(P<0.01),同时DZ及E2处理后均提高脂肪酸合成酶(FASN)、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达。(4)与对照组相比,不同浓度DZ及E2处理后均增加了G2/M期和S期的细胞占比,上调了增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1、D3、抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量,同时中浓度DZ组极显著增加了Bcl-2/Bax比值(P<0.01),细胞凋亡率降低。(5)三个浓度DZ及E2处理后均上调了PI3K/AKT-mTOR信号通路中p-PI3K、p-mTOR、p-AKT的磷酸化水平。结果表明:DZ处理可促进乳腺上皮细胞的增殖及乳成分的合成。其机制与上调细胞增殖蛋白的表达、降低细胞凋亡率,激活PI3K/AKT-mTOR通路有关。 展开更多
关键词 植物雌激素 大豆黄酮 小鼠乳腺上皮细胞 乳成分合成 乳腺上皮细胞的增殖
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脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞乳糖代谢的影响及其作用机制 被引量：1
3
作者 刘秀芝 龙全梅 +1 位作者 王建发 武瑞 《中国生物制品学杂志》 2025年第3期291-296,311,共7页
目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)乳糖代谢的影响及其作用机制,为选择更合理的免疫代谢调控方案以保障奶牛乳腺健康提供新思路。方法用10μg/mL LPS处理MAC-T细胞0、3、6、12、24 h,紫外分光光度计下... 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)乳糖代谢的影响及其作用机制,为选择更合理的免疫代谢调控方案以保障奶牛乳腺健康提供新思路。方法用10μg/mL LPS处理MAC-T细胞0、3、6、12、24 h,紫外分光光度计下检测细胞内糖酵解酶(己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶)活性以及乳酸、葡萄糖、乳糖含量;Western blot法检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、蛋白激酶B(又称AKT)表达及磷酸化水平;荧光定量RT-PCR法检测HIF-1α、AKT、葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)mRNA转录水平。结果与0 h相比,LPS处理3 h时己糖激酶、磷酸果糖激酶活性达到峰值(F分别为4.197、6.941,P均<0.01),之后逐渐降低,24 h时己糖激酶活性显著下降(F=4.987,P<0.01);磷酸果糖激酶活性在24 h内均维持在相对较高水平;丙酮酸激酶活性在最初6 h内显著增加,随后极显著升高,24 h时升高至0 h的27倍(F=26.95,P<0.001)。LPS处理24 h,乳糖含量均显著降低;3 h时葡萄糖含量显著增加(t=4.294,P<0.001),之后呈明显下降趋势,24 h时含量显著降低(t=5.218,P<0.001);12和24 h时乳酸含量显著增加。HIF-1αmRNA及蛋白表达水平在LPS处理6 h时均显著升高(F分别为5.355、5.466,P<0.001),之后逐渐下降;总AKT mRNA及蛋白表达水平、p-AKT(Ser473)蛋白表达水平在LPS处理24 h时均显著升高(F分别为6.207、6.368、6.253,P均<0.01);GLUT1 mRNA转录水平在LPS刺激3、6、12 h时均显著升高(F分别为6.549、5.821、5.553,P均<0.01)。结论LPS处理导致MAC-T细胞对葡萄糖的摄取增加,摄取的葡萄糖从大部分用于乳糖合成转向大部分用于糖酵解代谢和炎性应答,细胞内乳糖合成显著减少。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺上皮细胞 脂多糖 乳糖 葡萄糖 糖酵解
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奶牛乳腺健康及精准管理的研究进展 被引量：1
4
作者 季金豆 耿子健 +1 位作者 连帅 王建发 《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期21-26,43,共7页
乳腺健康是影响奶牛泌乳能力、免疫防御能力与牛奶产量与质量的直接因素。奶牛乳腺健康管理及疾病预防在乳业高效生产的环节中至关重要,而奶牛乳房炎已经成为奶牛养殖管理过程中的主要威胁。文章综述了奶牛乳腺健康整体精准管理策略,介... 乳腺健康是影响奶牛泌乳能力、免疫防御能力与牛奶产量与质量的直接因素。奶牛乳腺健康管理及疾病预防在乳业高效生产的环节中至关重要,而奶牛乳房炎已经成为奶牛养殖管理过程中的主要威胁。文章综述了奶牛乳腺健康整体精准管理策略,介绍了营养、饲养管理及奶牛乳房炎的精准防治策略,以及基于物联网、大数据、云计算、人工智能等电子信息技术的数智化畜牧理念。这些措施和技术的应用,将在很大程度上降低奶牛乳房炎发病率,提高乳房炎诊断的效率和准确性,同时通过病原菌治疗方案实现奶牛乳房炎的精准治疗。未来,数智化畜牧将进一步推动奶牛乳腺健康的精准管理,逐步走上标准化、高效化、智能化的道路,为乳业可持续发展提供有力支撑。 展开更多
关键词 乳腺健康 精准管理 疾病诊断 奶牛养殖 数智化畜牧 乳房炎
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姜黄素影响铁死亡途径缓解LPS诱导牛乳腺上皮细胞炎性反应的分析
5
作者 杨文哲 王锦浩 +7 位作者 赵子琛 赵彤 潘飞龙 陈芳芳 邵雯琪 刘克祥 赵树臣 赵立佳 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4730-4740,共11页
本研究旨在从铁死亡途径探究姜黄素(curcumin,Cur)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎性反应的影响。将处于对数生长期的MAC-T细胞按照试验要求随机分组并进行相应的处理,每组3个重复。采用MTT法测定不同浓度的LPS/Cur对MAC-T... 本研究旨在从铁死亡途径探究姜黄素(curcumin,Cur)对脂多糖(LPS)诱导的牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎性反应的影响。将处于对数生长期的MAC-T细胞按照试验要求随机分组并进行相应的处理,每组3个重复。采用MTT法测定不同浓度的LPS/Cur对MAC-T细胞存活率的影响;RT-PCR法检测炎症相关基因(TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、CXCL2、CCL2)与铁死亡相关基因(PTGS2、SLC7A11、GPX4、FTH1、ACSL4)的转录水平;BODIPY 581/591 C11染色检测细胞脂质过氧化水平;试剂盒检测细胞中MDA含量、LPO浓度、GSH含量、GSH/GSSG比值;Ferro-Orange染色和Fe2+检测试剂盒测定细胞中Fe2+含量;ELISA试剂盒检测细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β浓度;Western blot检测GPX4、ACSL4、TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白的相对表达水平。结果显示,与CON组相比,10μg·mL^(-1)LPS或20μmol·L^(-1)Cur处理对MAC-T细胞存活率无显著影响。LPS处理后细胞中促炎相关基因(TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS、CXCL2、CCL2)、促铁死亡相关基因(PTGS2、ACSL4)以及相关蛋白(ACSL4)的表达水平极显著升高(P<0.01);抗铁死亡相关基因(SLC7A11、GPX4、FTH1)和蛋白(GPX4)的表达水平极显著下降(P<0.01);MDA含量和LPO浓度均极显著升高(P<0.01);GSH含量和GSH/GSSG比值均极显著下降(P<0.01);Fe2+含量极显著升高(P<0.01);TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度和蛋白的表达水平均极显著升高(P<0.01)。与LPS单独处理组相比,LPS与Cur-H共处理组促炎相关基因、促铁死亡相关基因以及相关蛋白的表达水平极显著下降(P<0.01);抗铁死亡相关基因和蛋白的表达水平极显著升高(P<0.01);脂质过氧化水平、MDA含量和LPO浓度均极显著下降(P<0.01);GSH含量和GSH/GSSG比值均极显著升高(P<0.01);Fe^(2+)含量极显著下降(P<0.01);TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度和蛋白的表达水平均极显著下降(P<0.01)。此外,铁死亡激活剂Erastin显著抑制了Cur对LPS诱导炎症的缓解作用。综上所述,Cur可通过抑制铁死亡缓解LPS诱导的MAC-T细胞炎性反应。 展开更多
关键词 铁死亡 姜黄素 脂多糖 牛乳腺上皮细胞(MAC-T)
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湖北省部分地区奶牛场凝固酶阴性葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析
6
作者 田可可 刘佳一 +6 位作者 吴香云 豆保静 孙文 李倩 李双双 余皓 王玉莲 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第9期80-88,共9页
为了解湖北省部分地区奶牛场凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative Staphylococcus,CNS)的流行情况和耐药特点,试验于2019—2020年采集武汉市江夏区(A场)、黄冈市溪水县(B场)、黄冈市(C场)、武汉市东西湖区(D场)和宜昌市(E场)的规模... 为了解湖北省部分地区奶牛场凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase negative Staphylococcus,CNS)的流行情况和耐药特点,试验于2019—2020年采集武汉市江夏区(A场)、黄冈市溪水县(B场)、黄冈市(C场)、武汉市东西湖区(D场)和宜昌市(E场)的规模化奶牛场的健康奶牛、患亚临床型乳房炎(subclinical mastitis,SCM)奶牛和患临床型乳房炎(clinical mastitis,CM)奶牛的乳头乳、乳头皮肤拭子样本及环境样本共计887份,进行葡萄球菌的分离与纯化,对分离到的葡萄球菌进行触媒试验,并选取触酶阳性的菌株进行凝固酶试验,再对筛选到的CNS进行16S rDNA基因的PCR扩增、测序及菌种鉴定,统计各类型样本中不同种类CNS的分离率、各地区奶牛养殖场CNS的分离率,最后对CNS分离株进行耐药性分析。结果表明:从887份样本中共分离到234株葡萄球菌,这些分离株均为触酶阳性菌株,其中有134株菌株为CNS。134株CNS中,共鉴定到16种葡萄球菌,包括45株鸡葡萄球菌(占比为33.6%)、13株人葡萄球菌(占比为9.7%)、11株腐生葡萄球菌(占比为8.2%)、17株产色葡萄球菌(占比为12.67%)、12株未分类葡萄球菌(占比为9.0%)、10株表皮葡萄球菌(占比为7.5%)、5株模仿葡萄球菌(占比为3.7%)、5株木糖葡萄球菌(占比为3.7%)、3株阿尔莱特葡萄球菌(占比为2.2%)、2株克氏葡萄球菌(占比为1.5%)、4株路邓葡萄球菌(占比为3.0%)、2株溶血葡萄球菌(占比为1.5%)、2株肉质葡萄球菌(占比为1.5%)、1株伪中间型葡萄球菌(占比为0.8%)、1株琥珀葡萄球菌(占比为0.8%)和1株猪葡萄球菌(占比为0.8%)。鸡葡萄球菌在健康奶牛各类型样本、患SCM奶牛的乳头乳和乳头皮肤拭子样本及环境样本中分离率均最高。患CM奶牛的乳头乳样本中人葡萄球菌、模仿葡萄球菌和阿尔莱特葡萄球菌的分离率最高(1.4%),乳头皮肤拭子样本中鸡葡萄球菌、人葡萄球菌和模仿葡萄球菌的分离率最高(2.6%),肛门拭子样本中鸡葡萄球菌、产色葡萄球菌和人葡萄球菌的分离率最高(3.8%);患SCM奶牛的肛门拭子样本中鸡葡萄球菌、产色葡萄球菌和腐生葡萄球菌的分离率最高(3.0%)。CNS在E场的分离率最高(30.7%),然后依次为A场(13.8%)、C场(12.1%)、B场(8.9%)和D场(5.6%)。CNS分离株对磺胺异口恶唑、复方新诺明、头孢噻呋、恩诺沙星、氧氟沙星、青霉素、阿莫西林/克拉维酸、头孢西丁、克林霉素的耐药率较高,分别为100%、100%、94.8%、99.3%、63.4%、70.1%、53.0%、75.4%和51.5%;对万古霉素、替米考星、庆大霉素、氟苯尼考、多西环素、利奈唑胺、苯唑西林的耐药率较低,分别为7.5%、12.7%、7.5%、15.7%、17.9%、32.8%和36.6%。134株CNS均为多重耐药菌株,包括97种耐药表型。耐药重数最低为3重,占比为4.5%(6/134);耐药重数最高为11重,占比为2.2%(3/134);5重耐药菌株占比最大,为19.4%(26/134)。青霉素-头孢西丁-头孢噻呋-泰妙菌素-磺胺异口恶唑-复方新诺明-恩诺沙星和青霉素-利奈唑胺-头孢噻呋-泰妙菌素-磺胺异口恶唑-复方新诺明-恩诺沙星-氧氟沙星为优势耐药表型。说明湖北省部分地区奶牛场CNS普遍存在,且种类较多,鸡葡萄球菌占比较高;分离到的CNS均为多重耐药菌株,对大多数抗生素耐药率较高,对万古霉素和庆大霉素的耐药率较低。 展开更多
关键词 湖北省 奶牛乳房炎 凝固酶阴性葡萄球菌 细菌分离 细菌鉴定 耐药性
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组学技术在奶牛乳腺炎发病机制和诊断上应用研究进展 被引量：1
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作者 范曼婷 黄若婷 +3 位作者 佘远航 郭建超 刘建营 郭勇庆 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1076-1088,共13页
乳腺炎是奶牛养殖中危害较大的疾病之一,严重影响奶牛健康和乳品安全,因此需要及时采取预防和控制措施。目前,奶牛乳腺炎存在诊断效率不高和发病机制解释不清晰等问题。随着高通量测序技术的快速发展,基因组学、表观基因组学、转录组学... 乳腺炎是奶牛养殖中危害较大的疾病之一,严重影响奶牛健康和乳品安全,因此需要及时采取预防和控制措施。目前,奶牛乳腺炎存在诊断效率不高和发病机制解释不清晰等问题。随着高通量测序技术的快速发展,基因组学、表观基因组学、转录组学、蛋白质组学等组学技术已被逐步应用于奶牛乳腺炎相关研究上,推动了对该疾病的深入认知。本文综述了组学技术在奶牛乳腺炎发病机制和诊断上的应用现状及研究进展,旨在为科学认识和降低乳腺炎发病率提供参考。通过解析奶牛乳腺炎的多层面机制,揭示了关键调控通路、潜在生物标志物,如CHI3L1、LBP、GSN、GCLC、C4等蛋白质及乳酸、酪氨酸等代谢物,可为乳腺炎发病机制的解析提供指导,也为干预治疗提供了新的途径。但是,在生产中应用时,组学技术仍面临着成本和技术门槛高等挑战。随着多组学技术的深入整合和成本降低,将有助于发现更精确的生物标志物,深入了解特定信号通路,为奶牛乳腺炎的预防、诊断和治疗提供更为科学的依据。 展开更多
关键词 组学技术 奶牛 乳腺炎 发病机制 诊断
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不同病变程度乳房炎山羊乳腺组织中IL-6的表达变化
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作者 田曦庆 王天星 +3 位作者 高士孔 乔玉娥 陈德坤 马文涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期98-104,共7页
随着山羊养殖业不断集约化发展,乳房炎的发病率逐年升高,给山羊养殖业造成巨大的经济损失。为了确定乳房炎乳腺病理变化程度与乳腺组织白细胞介素-6(interlukin-6,IL-6)表达水平之间的联系,采用加利福尼亚乳房炎检测法(CMT)和病原菌分... 随着山羊养殖业不断集约化发展,乳房炎的发病率逐年升高,给山羊养殖业造成巨大的经济损失。为了确定乳房炎乳腺病理变化程度与乳腺组织白细胞介素-6(interlukin-6,IL-6)表达水平之间的联系,采用加利福尼亚乳房炎检测法(CMT)和病原菌分离鉴定法检测山羊乳房炎,使用real-time PCR检测健康山羊和乳房炎患病山羊乳汁体细胞趋化因子的相对表达水平,对健康和乳房炎乳腺组织进行苏木素-伊红(HE)染色,根据乳腺组织病理变化程度将其划分为轻度乳房炎乳腺、中度乳房炎乳腺、重度乳房炎乳腺,使用免疫荧光染色法确定不同病理变化程度乳房炎乳腺组织的IL-6表达水平。最后,对乳腺组织进行双重免疫荧光染色确定IL-6的来源。结果表明,乳房炎患病山羊乳汁体细胞的趋化因子表达水平显著上调;患病山羊乳腺组织腺泡排列紊乱,结构完整性被破坏,乳腺上皮细胞脱落并伴有大量的炎性细胞浸润;随着乳腺组织病理损伤程度的加重,IL-6表达水平也随之上调;IL-6可由乳腺组织的Ly6G^(+)细胞和CD68^(+)细胞分泌。研究结果提示IL-6可作为监测乳房炎的病理变化程度的生物学标志。 展开更多
关键词 山羊 乳房炎 乳腺组织 白细胞介素6 生物学标志
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奶牛乳房炎5种致病菌多重PCR检测方法的建立与应用 被引量：4
9
作者 王雪容 张宇 +3 位作者 张海森 杨王浩 靳亚平 陈华涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期48-55,共8页
为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nu... 为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nuc基因和肠炎沙门氏菌invA基因设计特异性引物,优化PCR反应体系与反应程序并进行特异性试验,同时分别构建含病原菌基因的pMD-19T重组质粒进行灵敏性试验。结果显示,多重PCR反应的最适引物工作浓度为0.8μmol/L,最适退火温度为59.6℃,最佳延伸时间为40 s,最合适的循环数为30次;优化后的多重PCR反应体系可扩增出5种目标病原菌的特异性条带;5种病原菌PCR检测灵敏度可达到5 copies/μL。进一步利用该多重PCR反应体系对采集的108份乳房炎乳样进行检测,检测结果显示,108份样本的阳性检出率为77.8%,大肠埃希氏菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和肠炎沙门氏菌的检出率分别为23.1%、8.3%、34.3%、8.3%、5.6%。结果表明,建立了一种具有良好特异性和灵敏性的多重PCR检测方法,在临床生产实践中可用于快速鉴定奶牛乳房炎的致病菌,为奶牛乳房炎的诊断、防控与流行病学调查提供了方法基础。 展开更多
关键词 奶牛 乳房炎 病原菌 多重PCR
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lncRNA PFN1-AS1在奶牛乳腺上皮细胞炎症反应中的作用
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作者 虎喜敏 罗仍卓么 +2 位作者 周冉 李宇航 王兴平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5875-5887,共13页
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达,但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达,但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)炎症反应中的作用。因该lncRNA的序列与肌动蛋白单体结合蛋白反义链(profilin1 antisense, PFN1-AS1)相同,将其命名为lncRNA PFN1-AS1。采用RT-PCR技术克隆lncRNA PFN1-AS1,预测lncRNA PFN1-AS1的功能。采用脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导bMECs建立炎症细胞模型,探究在炎症模型中干扰lncRNA PFN1-AS1对细胞炎症、增殖和凋亡的影响。结果显示:lncRNA PFN1-AS1长度为811 bp,可能参与调控细胞凋亡和炎症过程。lncRNA PFN1-AS1主要分布于细胞质中。在LPS诱导的bMECs炎症模型中,lncRNA PFN1-AS1表达水平显著下降(P<0.05);干扰lncRNA PFN1-AS1后,促炎细胞因子白介素(interleukin, IL)6、IL-8和IL-1β的转录和分泌水平均显著增加(P<0.05)。增殖基因细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin dependent kinase,CDK)2、CDK4和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达水平显著下降(P<0.05),细胞活力值和增殖率显著下降(P<0.05);凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,CASP)3、CASP8和Bcl-2相关X蛋白(bcl-2-associated X protein,BAX)的表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率极显著增加(P<0.01)。干扰lncRNA PFN1-AS1后促进了IL-6、IL-8和IL-1β的转录和蛋白分泌,促进了细胞凋亡水平,同时降低了细胞活力和增殖能力,这些结果揭示了lncRNA PFN1-AS1在bMECs炎症中的作用,为进一步探究其在奶牛乳腺炎中的作用提供了科学依据。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 lncRNA PFN1-AS1 脂多糖 炎症反应
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奶牛乳房炎的细菌感染与奶中体细胞数及乳成分的关系 被引量：34
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作者 甘宗辉 杨章平 +3 位作者 李云龙 毛永江 刘贤慧 陈飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期972-979,共8页
为探索奶牛乳房炎的发病程度、细菌感染模式、菌落总数、乳成分、体细胞数之间的关系,对187头不同乳房炎发病程度的奶牛,利用鉴别培养基和平板计数法分别进行细菌感染模式鉴定和菌落总数计数,并同步进行隐性乳房炎检测和DHI检测,利用单... 为探索奶牛乳房炎的发病程度、细菌感染模式、菌落总数、乳成分、体细胞数之间的关系,对187头不同乳房炎发病程度的奶牛,利用鉴别培养基和平板计数法分别进行细菌感染模式鉴定和菌落总数计数,并同步进行隐性乳房炎检测和DHI检测,利用单因素方差分析,对以上因素进行研究。结果表明:(1)不同的细菌感染模式对乳蛋白率、乳脂率和体细胞数的影响不显著(P>0.05),对测定日产奶量的影响显著(P<0.05);(2)菌落总数对乳蛋白率影响不显著(P>0.05),对日产奶量、乳脂率、体细胞数的影响极显著(P<0.01);(3)同种细菌感染的模式下,不同的菌落总数含量对测定日产奶量、乳脂、乳蛋白率均有显著(P<0.05)的影响,对体细胞数的影响极显著(P<0.01);(4)不同等级的乳房炎感染情况对体细胞数、日产奶量、乳脂率、乳蛋白率、菌落总数影响均显著(P<0.05);(5)体细胞数对测定日产奶量和乳脂率、乳蛋白率的影响差异极显著(P<0.01)。结果提示:菌落总数是奶牛受细菌侵染的主要指标,细菌的感染模式对乳成分及SCC没有显著影响,乳房炎的感染程度及体细胞数对乳成分有显著影响,生产上可以利用体细胞数和菌落总数监控奶牛场乳房炎风险及乳成分的变化。 展开更多
关键词 细菌感染模式 菌落总数 隐型乳房炎 体细胞数 乳成分
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奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定、血清型及耐药性研究 被引量：25
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作者 王凤 宋立 +3 位作者 汤德元 张纯萍 徐士新 魏蕊蕊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第6期62-67,共6页
为调查北京、河南、天津及广西等地区奶牛乳房炎病原菌的种类和乳房炎的流行情况,在这些地区采集了临床型乳房炎奶牛新鲜奶样82份,分离到13种110株细菌,其中大肠埃希菌23株,金黄色葡萄球菌16株,链球菌38株。血清型研究表明,大肠埃希菌以... 为调查北京、河南、天津及广西等地区奶牛乳房炎病原菌的种类和乳房炎的流行情况,在这些地区采集了临床型乳房炎奶牛新鲜奶样82份,分离到13种110株细菌,其中大肠埃希菌23株,金黄色葡萄球菌16株,链球菌38株。血清型研究表明,大肠埃希菌以O13、O17和O91为优势血清型,金黄色葡萄球菌凝固酶血清型主要集中于Ⅵ型及复合型。耐药性检测结果显示,大肠埃希菌对利福平耐药严重,对其他15种测试药耐药率低;金黄色葡萄球菌对青霉素和氨苄西林的耐药率高达81.25%以上,对其他14种测试药耐药率均低于31.30%;链球菌较上述2种细菌耐药性强,对链霉素等5种药物耐药率均高于52.60%,除万古霉素外,对其他10种药物呈不同程度耐药。3种细菌对氧氟沙星、恩诺沙星、复方新诺明和甲氧苄啶较敏感,这4种药可作为这些地区治疗奶牛乳房炎的首选药物。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 病原菌 分离鉴定 血清型 耐药性
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奶牛隐性乳房炎的调查分析 被引量：21
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作者 郭抗抗 张为民 +4 位作者 张彦明 王森 周鹏 宁蓬勃 王晶钰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第11期26-29,共4页
采用体细胞计数(SCC)法对杨凌某奶牛场中60头不同胎次和泌乳时间奶牛隐性乳房炎进行检测,对引起乳房炎的可能诱因进行调查分析,研究该场奶牛隐性乳房炎的发病规律,为本病的防控提供参考。结果表明,受检奶牛隐性乳房炎的检出率为43.3%。... 采用体细胞计数(SCC)法对杨凌某奶牛场中60头不同胎次和泌乳时间奶牛隐性乳房炎进行检测,对引起乳房炎的可能诱因进行调查分析,研究该场奶牛隐性乳房炎的发病规律,为本病的防控提供参考。结果表明,受检奶牛隐性乳房炎的检出率为43.3%。1胎～2胎奶牛隐性乳房炎检出率为40.0%,3胎～4胎为46.7%,隐性乳房炎的检出率有随胎次增加而升高的趋势;泌乳时间少于200 d的泌乳牛隐性乳房炎检出率为27.6%,200 d～300 d的为36.4%,300 d～400 d的为41.7%,超过400 d的为50.0%,提示奶牛隐性乳房炎有随泌乳期升高的趋势。本调查显示,奶牛隐性乳房炎的发生与胎次和泌乳时间有显著的相关性,饲养管理和卫生条件是乳房炎发生的重要诱因。 展开更多
关键词 奶牛 隐性乳房炎 体细胞计数 胎次 泌乳时间
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奶牛乳房炎研究进展 被引量：61
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作者 蒋春茂 周新民 +1 位作者 周广生 王子轼 《中国畜牧兽医》 CAS 2004年第5期36-38,共3页
奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业常见的疾病之一。对奶牛乳房炎的现状、病因、诊断、治疗和防治研究方向进行了简要综述 ,为深入研究奶牛乳房炎的防治提供了资料。
关键词 奶牛 乳房炎 病因 诊断 治疗
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奶牛乳房炎致病菌的分离鉴定及耐药性研究 被引量：30
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作者 李新圃 李宏胜 +2 位作者 罗金印 杨峰 王旭荣 《动物医学进展》 北大核心 2015年第11期36-39,共4页
为进一步了解奶牛乳房炎致病菌的菌群分布,以及条件致病菌的致病性和耐药性。采集了302份临床型乳房炎乳样,从中分离出257株细菌,使用16SDNA PCR试剂盒鉴定分析,对其中检出率较高的条件致病菌进行小鼠致病性和耐药性研究。结果显示,检... 为进一步了解奶牛乳房炎致病菌的菌群分布,以及条件致病菌的致病性和耐药性。采集了302份临床型乳房炎乳样,从中分离出257株细菌,使用16SDNA PCR试剂盒鉴定分析,对其中检出率较高的条件致病菌进行小鼠致病性和耐药性研究。结果显示,检出菌可分为主要致病菌、条件致病菌、乳酸菌及其他菌。条件致病菌化脓隐秘杆菌对小鼠具有明显的致病性,粪肠球菌和屎肠球菌对小鼠没有明显的致病性,但它们对抗生素均有一定的耐药性。粪肠球菌和屎肠球菌具有条件致病性,但它们属于乳酸菌,而乳酸菌一般作为益生菌使用。说明奶牛乳房炎致病菌具有多样性和复杂性,除了常见的主要致病菌和条件致病菌外,有些益生菌进入乳腺组织也能成为条件致病菌引发乳房炎。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 致病菌 致病性 耐药性
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兰州地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：29
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作者 魏小娟 蒲万霞 +4 位作者 周绪正 张继瑜 李金善 李剑勇 牛建荣 《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期113-114,共2页
采集临床型乳房炎患牛的乳样进行细菌分离鉴定,并选择主要病原菌做药敏试验,对兰州地区部分奶牛场乳房炎发生情况进行调查。结果表明,主要致病菌为葡萄球菌、链球菌和大肠埃希菌,这些细菌对环丙沙星、氟哌酸和氟嗪酸等药物均高度敏感。
关键词 奶牛乳房炎 病原菌 分离鉴定 药敏试验
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乳酶LDH作为奶牛隐性乳房炎早期诊断指标的研究 被引量：11
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作者 杨德英 曹随忠 +3 位作者 余树民 姚学萍 刘长松 杜立新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期761-764,共4页
为了筛选敏感的奶牛隐性乳房炎早期诊断指标,选择220头荷斯坦泌乳奶牛,分别采集乳汁进行体细胞计数和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定。结果显示,隐性乳房炎奶牛乳汁中LDH活性显著高于健康奶牛(P<0.05),乳汁体细胞数(SCC)与LDH活性呈正相关(... 为了筛选敏感的奶牛隐性乳房炎早期诊断指标,选择220头荷斯坦泌乳奶牛,分别采集乳汁进行体细胞计数和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定。结果显示,隐性乳房炎奶牛乳汁中LDH活性显著高于健康奶牛(P<0.05),乳汁体细胞数(SCC)与LDH活性呈正相关(r2=0.93)。选择LDH活性>100 IU/L作为隐性乳房炎的判定阈值,诊断的敏感性为70%,特异性为82.3%,Jouden指数为0.52。结果提示,LDH可作为奶牛隐性乳房炎早期诊断指标。 展开更多
关键词 隐性乳房炎 诊断 乳酸脱氢酶(LDH) 乳汁体细胞计数(SCC) 奶牛
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奶牛酒精阳性乳与自由基代谢及乳腺损伤关系的研究 被引量：15
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作者 王林 王振勇 +4 位作者 李龙 曹爱智 王彦明 王鹏 王永 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期384-388,共5页
对酒精阳性乳患牛血清与乳清中的抗氧化指标进行了检测,从自由基代谢与损伤的角度探讨了酒精阳性乳的发病机理;同时检测了阳性牛血清与全乳中微量元素Zn、Cu、Mn、Fe的含量,分析了微量元素含量变化与自由基代谢的关系。试验结果显示阳... 对酒精阳性乳患牛血清与乳清中的抗氧化指标进行了检测,从自由基代谢与损伤的角度探讨了酒精阳性乳的发病机理;同时检测了阳性牛血清与全乳中微量元素Zn、Cu、Mn、Fe的含量,分析了微量元素含量变化与自由基代谢的关系。试验结果显示阳性牛体内发生了过度的过氧化反应,机体总抗氧化能力下降,机体的抗氧化系统已不能有效地清除活性氧及代谢产物,过多的氧自由基可能对乳腺上皮分泌细胞细胞膜造成微损伤,从而引起乳腺细胞分泌异常乳。 展开更多
关键词 酒精阳性乳 自由基代谢 抗氧化
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髓过氧化物酶检测奶牛隐性乳房炎研究进展 被引量：25
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作者 郭昌明 张乃生 +3 位作者 周昌芳 杨正涛 魏东 张志刚 《动物医学进展》 CSCD 2006年第6期54-57,共4页
奶牛隐性乳房炎的检测方法有多种,相比之下,近年来,国外报道的用检测奶样中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)来诊断奶牛隐性乳房炎的方法更符合快速、简便、高灵敏度、高特异性的现代诊断方法要求。根据乳房炎过程中的生理生化指标的... 奶牛隐性乳房炎的检测方法有多种,相比之下,近年来,国外报道的用检测奶样中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)来诊断奶牛隐性乳房炎的方法更符合快速、简便、高灵敏度、高特异性的现代诊断方法要求。根据乳房炎过程中的生理生化指标的变化特点,可得出奶液中MPO是乳房炎指示物。奶样中的体细胞数(SCC)和MPO浓度的相关系数值为0.91,奶样中随着SCC的增高,MPO的水平也增高达到2 000 ng/mL,同时也可分离到大量细菌。免疫学分析MPO单克隆抗体与奶液中成分乳铁蛋白、乳过氧化物酶、牛血清白蛋白、MPO、淋巴细胞、少量体细胞的乳样之间ELISA反应没有交叉性,表明MPO分子在乳房炎中具有很高的特异性。通过对牛奶中MPO的检测来判断乳房内中性粒细胞(PMN)的活性状态,可对奶牛隐性乳房炎做出早期诊断。 展开更多
关键词 奶牛 隐性乳房炎 髓过氧化物酶 检测
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小反刍动物乳房炎 被引量：8
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作者 柳旭伟 葛文霞 +5 位作者 剡根强 刘晓娜 杨力伟 阮东 朱玲 张锐 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1825-1830,共6页
对近几年有关小反刍动物乳房炎的最新研究和相关知识进行了回顾,并阐述了乳房炎的危害、病因、诊断、治疗和预防等方面的研究情况。小反刍动物乳房炎的患病率平均为5%-30%,但临床型乳房炎的发病率一般低于50%,亚临床型乳房炎的发病率较... 对近几年有关小反刍动物乳房炎的最新研究和相关知识进行了回顾,并阐述了乳房炎的危害、病因、诊断、治疗和预防等方面的研究情况。小反刍动物乳房炎的患病率平均为5%-30%,但临床型乳房炎的发病率一般低于50%,亚临床型乳房炎的发病率较高,能引起死亡和淘汰。葡萄球菌是羊乳房内感染的主要病原菌,金黄色葡萄球菌感染能引起严重的临床症状,并能导致乳制品被耐热毒素污染,从而引发公共卫生问题。还对目前羊乳房炎的诊断方法进行了讨论,也对目前常用的乳房炎的治疗方法和预防措施进行了介绍。 展开更多
关键词 羊 乳房炎 分类 危害 发病率 病原 诊断 预防
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