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Ghrelin对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响 被引量：1
1
作者 李阔 王子馨 +6 位作者 赵高平 鲁静 孙伟 李云霞 李喜和 曹贵方 张传强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期64-69,共6页
研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添... 研究不同浓度生长激素释放肽(growth hormone releasing peptide,GHRL)对牛卵母细胞体外成熟和发育的影响。应用免疫荧光染色法检测GHRL及生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)在牛卵和卵丘细胞中的定位,添加0、10、50、100 ng/mL的GHRL对牛卵母细胞进行体外成熟24 h后,检测卵丘细胞扩散程度;GDF 9、BMP 15 mRNA的相对表达量;统计卵母细胞成熟及胚胎发育情况。结果表明,牛卵胞质区有GHRL的表达,且GHSR主要定位于细胞膜上。与对照组相比,添加GHRL 50 ng/mL组卵丘细胞扩散程度显著增加(P<0.05),GHRL 100 ng/mL组显著减少(P<0.01);添加50 ng/mL组的极体排出率显著提高(P<0.05),且BMP 15和GDF 9 mRNA的相对表达量均显著高于对照组(P<0.01);体外成熟16 h时,添加50 ng/mL组极体排出率显著高于对照组(P<0.01),体外受精后,GHRL 50 ng/mL组卵裂率相比对照组无显著差异(P>0.05);添加GHRL 50 ng/mL体外成熟24 h和16 h受精后的卵裂率无显著差异(P>0.05),但24 h囊胚率(63.24%)显著高于16 h(P<0.05)。在试验条件下,添加50 ng/mL可促进卵母细胞的成熟,但抑制了囊胚的形成。研究结果可为牛卵母细胞体外成熟、体外受精的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 生长激素释放肽 牛卵母细胞 体外成熟 体外受精
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基于SYBR GreenⅡ的BVDV NS3基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量：2
2
作者 李阳 张世勋 +4 位作者 赫鸣睿 刘珊珊 岳山 刘宇 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第2期23-31,共9页
为了建立基于SYBR GreenⅡ的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3基因实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,设计并筛选了BVDV NS3基因的qRT-PCR引物,建立了BVDV NS3 qRT-PCR检测方法,并利用CFX96和猪警-2000 qRT-PCR仪检测了临床牛血清样本。结果显... 为了建立基于SYBR GreenⅡ的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3基因实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,设计并筛选了BVDV NS3基因的qRT-PCR引物,建立了BVDV NS3 qRT-PCR检测方法,并利用CFX96和猪警-2000 qRT-PCR仪检测了临床牛血清样本。结果显示,筛选出1对特异性好的引物,CFX96和猪警-2000 qRT-PCR的标准品最小检出值分别为1×10^(1)copies·μL^(-1)和1×10^(2) copies·μL^(-1),特异性和重复性均良好,且临床血清样本的检测结果准确、一致。研究为BVDV检测提供了技术手段。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 NS3基因 实时荧光定量PCR SYBR GreenⅡ
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我国规模化牧场奶牛胎衣不下和急性子宫炎发病规律调查 被引量：1
3
作者 童晓芳 程思颖 +3 位作者 郭志刚 徐闯 韩博 高健 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第2期33-39,共7页
为了解我国规模化牧场中分娩奶牛胎衣不下和急性子宫炎的发病规律及其影响因素,本调查收集了2022年11月—2023年10月我国10个规模化牧场102746头分娩奶牛数据,其中包括7139例胎衣不下和6146例急性子宫炎病例;分析统计各病例发病日期、... 为了解我国规模化牧场中分娩奶牛胎衣不下和急性子宫炎的发病规律及其影响因素,本调查收集了2022年11月—2023年10月我国10个规模化牧场102746头分娩奶牛数据,其中包括7139例胎衣不下和6146例急性子宫炎病例;分析统计各病例发病日期、产犊胎次、妊娠天数、难产等级、犊牛状态和产房垫料类型。结果显示,奶牛胎衣不下和急性子宫炎的发病率分别为6.95%和5.98%;春季(3~5月)是奶牛胎衣不下和急性子宫炎的高发季节;胎次与胎衣不下发病率呈中等正相关(τ=0.477,P=0.042),与急性子宫炎发病率呈负相关(τ=-0.491,P=0.036);妊娠天数≤270 d奶牛的2种疾病发病率最高,分别为15.99%和11.07%;难产与胎衣不下(τ=0.333,P=0.497)和急性子宫炎(τ=0.667,P=0.174)发病率不相关;犊牛状态对胎衣不下(χ^(2)=3459.03,P<0.01)和急性子宫炎(χ^(2)=1437.63,P<0.01)发病率均存在极显著影响;使用稻草垫料奶牛的2种疾病发病率最高,分别为8.66%和7.06%,对于胎衣不下,使用混合垫料奶牛的发病率最低(4.18%),对于急性子宫炎,使用小麦秸秆垫料奶牛的发病率最低(4.34%);胎衣不下和急性子宫炎奶牛60 d内死淘率分别为11.11%和8.98%;胎衣不下对急性子宫炎有极显著影响(χ^(2)=671.92,P<0.01)。结果表明,针对高发季节、胎次、犊牛状态和产房垫料的管理优化,可能有助于降低奶牛胎衣不下和急性子宫炎的发生率,从而提高牧场经济效益和动物福利。 展开更多
关键词 奶牛 胎衣不下 急性子宫炎 发病特征
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我国华北地区3个规模化猪场母猪子宫内膜炎的调研分析
4
作者 鲜婷婷 林涛 +3 位作者 刘彦 曹忻 方富贵 冯涛 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期76-80,共5页
为了解我国华北地区3个规模化猪场母猪子宫内膜炎的发病率及子宫内膜炎对母猪繁殖性能的影响,笔者于2022年3—12月份采用发放现场调查问卷、查阅母猪生产记录、询问猪场相关负责人等方式分别对山西省临汾市、山西省忻州市和北京市密云区... 为了解我国华北地区3个规模化猪场母猪子宫内膜炎的发病率及子宫内膜炎对母猪繁殖性能的影响,笔者于2022年3—12月份采用发放现场调查问卷、查阅母猪生产记录、询问猪场相关负责人等方式分别对山西省临汾市、山西省忻州市和北京市密云区3个规模化猪场的共1428头母猪(包括山西省临汾市某猪场的201头后备母猪、山西省忻州市某猪场的152头后备母猪及北京市密云区某猪场的100头后备母猪和975头经产母猪)进行调研,调研内容包括后备母猪子宫内膜炎的发病情况与患子宫内膜炎母猪的返情情况、经产母猪不同胎次子宫内膜炎的发病情况、健康和患子宫内膜炎经产母猪的发情情况、健康和患子宫内膜炎经产发情母猪的受胎情况及患子宫内膜炎经产母猪的分娩状况,并分析子宫内膜炎对经产母猪发情率及发情母猪受胎率的影响。结果表明:3个猪场后备母猪子宫内膜炎发病率为8.00%~8.96%,患子宫内膜炎后备母猪返情率为11.11%~15.38%。经产母猪第1~9胎子宫内膜炎发病率分别为22.73%、14.07%、20.54%、13.20%、24.81%、14.94%、21.82%、16.67%和0,未随胎次的增加表现出明显变化规律。经产母猪总发情率为81.33%(793/975),其中健康发情母猪发情率为83.60%(668/799),患子宫内膜炎发情母猪发情率为71.02%(125/176),患子宫内膜炎经产母猪的发情率极显著低于健康经产母猪(χ^(2)=15.04,P<0.01)。经产发情母猪总受胎率为92.31%(732/793),其中健康发情母猪受胎率为96.26%(643/668),患子宫内膜炎发情母猪受胎率为71.20%(89/125),患子宫内膜炎发情母猪的受胎率极显著低于健康发情母猪(χ^(2)=93.11,P<0.01)。患子宫内膜炎经产母猪的正常分娩率为31.82%(56/176),异常分娩率为68.18%(120/176),其中因产程过长、助产和滞产引起的异常分娩率分别为17.04%、46.59%和4.54%,患子宫内膜炎经产母猪的异常分娩率高于正常分娩率但二者差异不显著(χ^(2)=0.74,P=0.94)。说明子宫内膜炎在后备母猪和经产母猪中均有发生,但后备母猪发病率较经产母猪低;子宫内膜炎可显著降低经产母猪发情率及发情母猪受胎率,且严重影响了母猪的分娩过程。 展开更多
关键词 规模化猪场 母猪子宫内膜炎 发病率 繁殖性能 发情率 受胎率
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大熊猫妊娠诊断技术研究进展
5
作者 王维 王倩 +3 位作者 高丹丹 贾燕妮 赵鹏鹏 林鹏飞 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期103-107,共5页
大熊猫是我国特有的一级重点保护动物,如何提升其繁殖率是目前面临的关键问题之一。准确的妊娠诊断有利于减少空怀,提高母猫的繁殖效率和减少经济损失,为维持雌性大熊猫的数量有实际指导意义。目前常用的诊断方法,如临床检查法、超声波... 大熊猫是我国特有的一级重点保护动物,如何提升其繁殖率是目前面临的关键问题之一。准确的妊娠诊断有利于减少空怀,提高母猫的繁殖效率和减少经济损失,为维持雌性大熊猫的数量有实际指导意义。目前常用的诊断方法,如临床检查法、超声波检查法、激素测定法等,虽为母猫妊娠诊断提供了技术支撑,但由于大熊猫的假孕现象等因素使其诊断不够准确。基于尿比重的标准化进行尿液内分泌代谢物浓度监测,为大熊猫妊娠诊断方法研发提供了新思路。论文概述了目前圈养雌性大熊猫妊娠诊断技术研究现状,论述了基于尿比重的标准化进行早期妊娠诊断的可行性,展望了未来妊娠诊断技术发展方向,为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 大熊猫 妊娠诊断 尿比重 生殖激素
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基于DNA甲基化组学技术分析TET 1基因对小鼠uNK细胞DNA甲基化的影响
6
作者 赵静贤 杨晓伟 +3 位作者 刘言言 赵自亮 赵光伟 赵永聚 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期912-924,共13页
本研究旨在探究去甲基化酶1(ten eleven translocation,TET 1)对小鼠子宫内自然杀伤细胞(uterine natural killer,uNK)DNA甲基化的影响,深入了解其分子调控机制。无菌采集妊娠10 d小鼠子宫蜕膜,分离纯化uNK细胞进行培养,利用RNA干扰技... 本研究旨在探究去甲基化酶1(ten eleven translocation,TET 1)对小鼠子宫内自然杀伤细胞(uterine natural killer,uNK)DNA甲基化的影响,深入了解其分子调控机制。无菌采集妊娠10 d小鼠子宫蜕膜,分离纯化uNK细胞进行培养,利用RNA干扰技术敲低TET 1基因的表达,提取TET 1干扰组和正常对照组细胞的总DNA,利用简化基因组DNA甲基化测序(reduced representation bisulfite sequencing,RRBS)技术进行测序,测序结果经生物信息学软件分析进行两组样本差异甲基化区域(differentially methylated region,DMR)的统计与注释,并进一步对DMR相关基因进行GO数据库分析及注释,了解相关基因的功能,利用KEGG数据库对其调控的信号通路进行富集分析。结果显示,TET 1干扰组相较对照组共有14120个DMRs,其中高甲基化的DMR有4897个,低甲基化的DMR有9223个,分布在基因体(genebody)上的DMR最多,共9762个,占总数的69.14%。DMR广泛分布于基因组的不同元件,且有些基因不同元件同时存在高甲基化和低甲基化的DMR。GO注释结果显示,存在DMR的基因主要集中在ATP结合、核酸结合、细胞组建、细胞分化、胚胎发育、RNA聚合酶Ⅱ转录调控、细胞增殖负调控等方面。KEGG数据库分析显示,DMR主要在代谢通路呈现显著富集,其中丙酮酸代谢通路共有12个参与代谢的关键分子出现了54个DMR,是出现DMR显著富集的代谢通路,其中乙酰辅酶A合成酶(Acss)、乳酸脱氢酶B(Ldhb)和丙酮酸激酶(Pklr)的DMR呈现单一高甲基化状态。此外,PI3K/AKT信号通路和HIF-1信号通路在介导丙酮酸代谢过程中发挥重要作用,且在基因体和启动子上的DMR也出现显著富集。综上,TET 1对小鼠uNK细胞具有甲基化调控作用,丙酮酸代谢是其发挥调控作用的主要途径,Acss、Ldhb和Pklr是其潜在的调控靶分子,PI3K/AKT和HIF-1是参与调控的重要信号通路。 展开更多
关键词 TET 1基因 UNK细胞 甲基化组学 丙酮酸 小鼠
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lncRNA CUFF.253988.1在T-2毒素诱导猪卵巢颗粒细胞损伤中的作用
7
作者 范慧 吴悠 +3 位作者 肖波 杨成林 刘水平 邬静 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第6期31-37,共7页
旨在探究lncRNA CUFF.253988.1在T-2毒素诱导猪卵巢颗粒细胞损伤中的作用。本试验分离培养了猪原代卵巢颗粒细胞,通过荧光标记的卵泡刺激素受体(FSHR)抗体对细胞进行鉴定;采用实时荧光定量PCR技术,检测T-2毒素对卵巢颗粒细胞及其线粒体l... 旨在探究lncRNA CUFF.253988.1在T-2毒素诱导猪卵巢颗粒细胞损伤中的作用。本试验分离培养了猪原代卵巢颗粒细胞,通过荧光标记的卵泡刺激素受体(FSHR)抗体对细胞进行鉴定;采用实时荧光定量PCR技术,检测T-2毒素对卵巢颗粒细胞及其线粒体lncRNA CUFF.253988.1转录水平的影响;通过RNA荧光原位杂交技术检测T-2毒素对lncRNA CUFF.253988.1细胞定位的影响;利用流式细胞术检测T-2毒素对卵巢颗粒细胞活性氧(ROS)、线粒体膜电位和细胞凋亡的影响;通过透射电镜观察T-2毒素对细胞超微结构的影响;使用反义寡核苷酸(ASO)特异性敲低lncRNA CUFF.253988.1后观察相关指标的变化。结果:T-2毒素显著上调lncRNA CUFF.253988.1在细胞和线粒体中的表达水平(P<0.01),增加了lncRNA CUFF.253988.1在线粒体的聚集;敲低lncRNA CUFF.253988.1后,缓解了T-2毒素诱导的线粒体结构损伤,显著降低了细胞中ROS的产生(P<0.01),恢复线粒体膜电位(P<0.01)并抑制细胞凋亡(P<0.01)。本研究表明,lncRNA CUFF.253988.1在T-2毒素诱导的卵巢颗粒细胞损伤中具有重要调控作用。 展开更多
关键词 lncRNA CUFF.253988.1 猪卵巢颗粒细胞 线粒体损伤 氧化应激 细胞凋亡
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西门塔尔牛与荷斯坦牛产后血液离子和相关血气指标的比较分析
8
作者 魏子昂 曹杰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2025年第1期80-85,共6页
为分析西门塔尔牛产后血液离子和相关血气指标的变化特点,本试验连续收集西门塔尔头胎牛40头和经产牛60头作为试验组,连续收集荷斯坦头胎牛40头和经产牛60头作为对照组,比较2个组牛血液离子和相关血气指标的差异。结果显示,西门塔尔头... 为分析西门塔尔牛产后血液离子和相关血气指标的变化特点,本试验连续收集西门塔尔头胎牛40头和经产牛60头作为试验组,连续收集荷斯坦头胎牛40头和经产牛60头作为对照组,比较2个组牛血液离子和相关血气指标的差异。结果显示,西门塔尔头胎牛和经产牛产后0 h亚临床低血钙发病率分别为7.5%和53.3%,总发病率为35.0%;西门塔尔牛产后0 h平均血液pH为7.42±0.01,平均血糖浓度为(6.91±0.16)mmol/L;西门塔尔头胎牛和经产牛初乳产量分别为(2.30±0.28)和(5.14±0.36)L,平均初乳产量为(4.01±0.28)L。荷斯坦头胎牛和经产牛产后0 h亚临床低血钙发病率分别为5.0%和61.7%,总发病率为39.0%;荷斯坦牛产后0 h平均血液pH为7.39±0.01,平均血糖浓度为(5.76±0.15)mmol/L;荷斯坦头胎牛和经产牛初乳产量分别为(3.68±0.36)和(5.96±0.33)L,平均初乳产量为(5.05±0.25)L。2个组牛产后0 h血钠、血钾、红细胞压积和血红蛋白水平组间和组内胎次间均无显著差异(P>0.05)。结果表明,西门塔尔头胎牛亚临床低血钙发病率高于荷斯坦头胎牛,可能与品种或饲料相关。而西门塔尔经产牛产后0 h血液离子钙水平高于荷斯坦经产牛,产后低血钙发病风险较低。西门塔尔牛维持产后血液pH和血液离子稳态的能力较强,较荷斯坦牛具有更好的抗分娩应激能力。本试验为制定西门塔尔牛围产期饲养管理和产后补钙策略提供了参考依据。 展开更多
关键词 西门塔尔牛 低血钙 离子钙 血气指标
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瘦素调控哺乳动物生殖的研究进展
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作者 司梦奇 郜康康 +3 位作者 赵一腾 Fouzia Kiran 周栋 靳亚平 《动物医学进展》 北大核心 2025年第9期91-96,共6页
瘦素(leptin)作为一种由肥胖基因(obese,ob)编码的蛋白质,在动物食物摄入与能量消耗过程中至关重要,同时也是生殖调控的关键信号。论文综合国内外研究进展,对瘦素在哺乳动物初情期启动、下丘脑-垂体-性腺轴以及胚胎附植等方面作用进行综... 瘦素(leptin)作为一种由肥胖基因(obese,ob)编码的蛋白质,在动物食物摄入与能量消耗过程中至关重要,同时也是生殖调控的关键信号。论文综合国内外研究进展,对瘦素在哺乳动物初情期启动、下丘脑-垂体-性腺轴以及胚胎附植等方面作用进行综述,以期加深对其生理学功能及调控哺乳动物生殖机制的认知,为繁殖障碍性疾病的预防与治疗提供新思路。 展开更多
关键词 瘦素 生殖 下丘脑-垂体-性腺轴 初情期启动 胚胎附植
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流产伊犁马驹主要致病菌的分离鉴定及其致病性研究 被引量：1
10
作者 卢冲 王语嫣 +8 位作者 付涵 李桐阳 缪荣浩 卢亚宾 李建龙 刘建华 郭庆勇 买占海 况玲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3344-3358,共15页
【目的】了解造成伊犁马流产的主要致病细菌,为其临床指导用药提供科学依据。【方法】本试验采集5匹自然流产马驹的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脐带、羊膜等35份组织样品进行增菌培养、纯化、PCR鉴定及测序,并对分离菌株进行耐药性... 【目的】了解造成伊犁马流产的主要致病细菌,为其临床指导用药提供科学依据。【方法】本试验采集5匹自然流产马驹的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脐带、羊膜等35份组织样品进行增菌培养、纯化、PCR鉴定及测序,并对分离菌株进行耐药性及致病性试验。【结果】通过细菌分离培养、形态学观察从流产马驹组织中分离出6株菌,其中1株在琼脂平板上为较大的灰白色黏液菌落,挑取易拉丝,革兰阴性菌,短粗的杆状,单独或成双排列的杆菌,疑似为克雷伯菌;1株表面具有光泽,边缘不整齐半透明或不透明,革兰阴性,两端钝圆的短杆状菌,疑似为短杆菌;1株灰色或白色边缘光滑且明亮的圆形菌落,革兰阳性菌,堆聚成葡萄串状的球菌,疑似为葡萄球菌;1株表面光滑的圆形白色或乳白色菌落,革兰阴性,两端钝圆的长杆菌,疑似为大肠杆菌;1株在绵羊血琼脂平板菌落呈灰白色圆形,凸起较小、有β溶血环的菌落,革兰阳性球菌,成双或呈长链状排列的球菌,疑似为链球菌;1株在沙门菌显色培养基呈表面光滑呈紫色,边缘整齐的圆形菌落,革兰阴性,两端钝圆的短杆菌,疑似为沙门菌。6株分离菌株16S rRNA基因PCR扩增结果显示,菌株均在1540 bp处出现单一条带;1株分离株与GenBank上公布的克雷伯菌相似性>95%,5株分离株分别与弗氏柠檬酸杆菌、缓慢葡萄球菌、大肠杆菌、马链球菌兽疫亚种和沙门菌的相似性>97%,各菌株毒力基因检测结果与预期结果一致,最终确定分离的6种致病菌分别为克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌、缓慢葡萄球菌、大肠杆菌、马链球菌兽疫亚种和沙门菌,分别命名为23-KLB-16S、23-NM-16S、23-HM-16S、23-DC-16S、23-ML-16S、23-SM-16S。相似性及遗传进化结果显示,分离株23-KLB-16S与克雷伯菌、23-NM-16S与弗氏柠檬酸杆菌、23-HM-16S与缓慢葡萄球菌、23-DC-16S与大肠杆菌、23-ML-16S与马链球菌兽疫亚种、23-SM-16S与沙门菌参考菌株相似性和亲缘关系较近。药敏试验结果显示,6株分离株均具有多重耐药,对四环素类及氟喹诺酮类药物较敏感,对林可酰胺类药物耐药。小鼠攻毒试验结果显示,上述6种致病菌对小鼠的半数致死量分别为1.54×10^(2)、2.59×10^(7)、3.62×10^(7)、7.02×10^(7)、6.08×10^(6)和8.15×10^(5)CFU/只,其中克雷伯菌、马链球菌兽疫亚种及沙门菌致病性较强。小鼠剖检结果显示,肝脏、脾脏均出现不同程度的淤血与肿大,肺脏出血。【结论】从流产马驹的组织样品中分离出克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌等6种主要致病菌株,并发现存在混合感染的情况,且6株菌均具有多重耐药,对四环素类及氟喹诺酮类药物较敏感,对林可酰胺类药物耐药,其中克雷伯菌、马链球菌兽疫亚种及沙门菌具有较强的致病性。 展开更多
关键词 流产 马驹 组织病理变化 分离鉴定 致病性
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噬菌体在奶牛乳房炎防控中的研究进展
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作者 刘馨聪 庞申雨 +2 位作者 宋军 王建发 高东阳 《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期16-20,共5页
奶牛乳房炎是全球畜牧业面临的重大公共卫生问题,其高发病率及病原菌耐药性导致年均经济损失达数百亿美元。传统抗生素疗法因耐药性加剧、药物残留等问题严重制约畜牧业可持续发展。噬菌体疗法凭借特异性高、无残留及环境友好等优势,已... 奶牛乳房炎是全球畜牧业面临的重大公共卫生问题,其高发病率及病原菌耐药性导致年均经济损失达数百亿美元。传统抗生素疗法因耐药性加剧、药物残留等问题严重制约畜牧业可持续发展。噬菌体疗法凭借特异性高、无残留及环境友好等优势,已在家禽、家畜及水产养殖中展现出良好的防控效果。本研究聚焦噬菌体对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌这两种奶牛乳房炎主要致病菌的防治潜力,旨在为噬菌体制剂在奶牛乳房炎防控领域的深入研究与应用提供有价值的参考。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 噬菌体治疗 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 防控
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表儿茶素没食子酸酯对MAC-T和小鼠乳腺炎症与细胞焦亡及NF-κB通路和NLRP3炎性小体的抑制效应 被引量：1
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作者 王浩磊 刘梦燕 +4 位作者 龙泉 李曼曼 吕祥 林涛 蒋曹德 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期430-441,共12页
本研究旨在探究表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate, ECG)对牛乳腺上皮细胞NF-κB(nuclear factor kappa B)炎性通路和NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体的抑制作用。利用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)... 本研究旨在探究表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate, ECG)对牛乳腺上皮细胞NF-κB(nuclear factor kappa B)炎性通路和NOD样受体3(NOD-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体的抑制作用。利用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)处理牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)和小鼠乳腺;采用CCK-8法筛选ECG处理MAC-T细胞的最佳浓度,ELISA法检测促炎因子、氧化应激指示因子以及焦亡指示因子的表达水平;苏木精-伊红染色和Annexin V-FITC/PI法检测小鼠乳腺组织炎性变化和细胞膜破裂情况;Western blot检测NF-κB、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein, ASC)、caspase-1和Gasdermin NH_(3 )端(GSDMD-N)的表达水平;免疫荧光检测p65核转移情况。结果发现:(1)ECG在10、20、40 mg·kg^(-1)浓度下均可减轻LPS诱导的乳腺炎症和炎性细胞浸润;(2)ECG在体内和体外均可显著且剂量依赖性地降低LPS诱导的促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和氧化应激指示因子(COX-2、iNOS、MPO)表达水平(P<0.05),(3)ECG剂量依赖性地降低了LPS诱导的细胞死亡率以及ROS、IL-18和LDH焦亡指示因子表达水平(P<0.05),(4)ECG极显著地抑制LPS诱导的NLRP3、ASC、GSDMD-N、caspase-1、磷酸化p65的表达与核转移(P<0.05)。综上表明,ECG抑制MAC-T细胞和小鼠乳腺炎症与细胞焦亡以及NF-κB通路和NLRP3炎性小体。本研究为利用ECG替代抗生素防治牛乳腺炎提供了新的数据。 展开更多
关键词 表儿茶素没食子酸酯 NF-ΚB 乳腺炎 NLRP3炎性小体 焦亡
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奶牛乳房炎5种致病菌多重PCR检测方法的建立与应用 被引量：4
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作者 王雪容 张宇 +3 位作者 张海森 杨王浩 靳亚平 陈华涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期48-55,共8页
为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nu... 为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nuc基因和肠炎沙门氏菌invA基因设计特异性引物,优化PCR反应体系与反应程序并进行特异性试验,同时分别构建含病原菌基因的pMD-19T重组质粒进行灵敏性试验。结果显示,多重PCR反应的最适引物工作浓度为0.8μmol/L,最适退火温度为59.6℃,最佳延伸时间为40 s,最合适的循环数为30次;优化后的多重PCR反应体系可扩增出5种目标病原菌的特异性条带;5种病原菌PCR检测灵敏度可达到5 copies/μL。进一步利用该多重PCR反应体系对采集的108份乳房炎乳样进行检测,检测结果显示,108份样本的阳性检出率为77.8%,大肠埃希氏菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和肠炎沙门氏菌的检出率分别为23.1%、8.3%、34.3%、8.3%、5.6%。结果表明,建立了一种具有良好特异性和灵敏性的多重PCR检测方法,在临床生产实践中可用于快速鉴定奶牛乳房炎的致病菌,为奶牛乳房炎的诊断、防控与流行病学调查提供了方法基础。 展开更多
关键词 奶牛 乳房炎 病原菌 多重PCR
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益归散治疗母猪子宫内膜炎效果观察 被引量：1
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作者 赵立山 汤莉 许奎 《畜牧兽医杂志》 2025年第1期49-51,共3页
母猪子宫内膜炎是规模化猪场常发的一种生殖系统疾病,可造成母猪发情紊乱、久配不孕,影响母猪生产性能,给养猪农户带来很大的经济损失。2023年3月~2023年11月,通过开展中草药益归散组方中益母草和当归不同的使用剂量和给药方式对母猪子... 母猪子宫内膜炎是规模化猪场常发的一种生殖系统疾病,可造成母猪发情紊乱、久配不孕,影响母猪生产性能,给养猪农户带来很大的经济损失。2023年3月~2023年11月,通过开展中草药益归散组方中益母草和当归不同的使用剂量和给药方式对母猪子宫内膜炎治疗效果试验。结果表明,增加益归散中益母草和当归的剂量,并采用子宫灌注给药方式治疗母猪子宫内膜炎治愈率可达87.5%。本试验克服了使用多种抗生素治疗母猪子宫内膜炎传统的治疗方法存在治疗效果较差、抗生素耐药、兽药残留、容易复发等缺点,达到环境友好、疗效确切、不易复发、对母猪和胎儿影响小,易于推广等效果,为母猪子宫内膜炎临床治疗提供依据和参考。 展开更多
关键词 母猪 子宫内膜炎 益归散
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植物雌激素大豆黄酮对小鼠乳腺上皮细胞乳成分合成和细胞增殖的影响及机制 被引量：1
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作者 黄心河 李浩楠 +3 位作者 周潇 徐佳婧 张源淑 韩正康 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期417-429,共13页
本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000μmol·L^(-1))处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细... 本试验旨在研究植物雌激素大豆黄酮(daidzein, DZ)对小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev乳糖、乳蛋白、乳脂肪合成及细胞增殖的影响,探讨相关的调节作用。首先用不同浓度DZ(0~1 000μmol·L^(-1))处理EpH4-Ev细胞6、12、24、48 h,通过检测细胞活力确定DZ作用浓度及时间;试验分为对照组(0μmol·L^(-1) DZ处理)、低浓度组(10μmol·L^(-1) DZ处理)、中浓度组(20μmol·L^(-1) DZ处理)、高浓度组(40μmol·L^(-1) DZ处理),并以生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照,37℃、5%CO_(2)培养12 h后,进行如下试验:(1)测定细胞及分泌上清中甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)含量及脂滴染色变化;(2)检测细胞增殖与凋亡相关蛋白、乳成分合成相关蛋白的表达变化;(3)检测PI3K/AKT-mTOR信号通路关键蛋白的磷酸化水平;(4)流式细胞技术分析细胞凋亡率与细胞周期分布情况。结果显示:(1)与对照组相比,2.5~80.0μmol·L^(-1 ) DZ处理后,细胞活力极显著提高(P<0.01),其中20μmol·L^(-1 )DZ处理提高效果最为显著,结合实验室前期结果,选择DZ作用的低、中和高浓度分别为10、20和40μmol·L^(-1),作用时间为12 h。(2)与对照组相比,中浓度及高浓度组DZ及E2处理后极显著提高了EpH4-Ev细胞及分泌上清中TG和GLU的含量,促进了脂滴的合成(P<0.01)。(3)与对照组相比,不同浓度DZ处理后葡萄糖转运载体1(GLUT1)和β-酪蛋白(β-casein)的表达均极显著升高(P<0.01),同时DZ及E2处理后均提高脂肪酸合成酶(FASN)、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达。(4)与对照组相比,不同浓度DZ及E2处理后均增加了G2/M期和S期的细胞占比,上调了增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1、D3、抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量,同时中浓度DZ组极显著增加了Bcl-2/Bax比值(P<0.01),细胞凋亡率降低。(5)三个浓度DZ及E2处理后均上调了PI3K/AKT-mTOR信号通路中p-PI3K、p-mTOR、p-AKT的磷酸化水平。结果表明:DZ处理可促进乳腺上皮细胞的增殖及乳成分的合成。其机制与上调细胞增殖蛋白的表达、降低细胞凋亡率,激活PI3K/AKT-mTOR通路有关。 展开更多
关键词 植物雌激素 大豆黄酮 小鼠乳腺上皮细胞 乳成分合成 乳腺上皮细胞的增殖
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枸杞多糖对己烯雌酚生殖损伤仓鼠抗氧化能力及生殖激素水平的影响 被引量：11
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作者 张彩利 刘玉姣 +3 位作者 王安忠 赵兴华 张铁 马爱团 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1364-1368,1372,共6页
为探讨枸杞多糖(LBP)对己烯雌酚(DES)致成年雄性仓鼠生殖损伤的保护作用,66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组(A)、DES组(B)、LBP组(C、D、E)及VC+VE组(F)。除对照组注射橄榄油外,其余5组皮下注射DES,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌服1... 为探讨枸杞多糖(LBP)对己烯雌酚(DES)致成年雄性仓鼠生殖损伤的保护作用,66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组(A)、DES组(B)、LBP组(C、D、E)及VC+VE组(F)。除对照组注射橄榄油外,其余5组皮下注射DES,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌服1,10,50mg/kg的LBP,F组灌服100mg/kg的VC及200IU/kg的VE,A、B组灌服等剂量的生理盐水,于末次给药24h后取材。摘取睾丸、附睾和精囊腺测质量并观察睾丸组织结构,检测血清中SOD、GSH-Px、MDA及T、LH、FSH、E2的水平。结果显示,DES能显著降低仓鼠体质量及生殖器官质量,而10,50mg/kg LBP及维生素对其有显著缓解作用(P<0.05);DES处理组仓鼠睾丸组织结构严重损伤,应用LBP后其损伤程度显著减轻,其中以10,50mg/kg LBP的作用最为明显,VC+VE的缓解作用与50mg/kg LBP组接近;随着LBP剂量的增加,血清中SOD、GSH-Px的水平增加(P<0.01),而MDA的水平下降(P<0.01),维生素组与LBP组的变化趋势一致;LBP对血清激素水平也有不同程度的提高,其中以50mg/kg作用最为显著(P<0.01)。这表明50mg/kg LBP能显著缓解DES致成年雄性仓鼠睾丸生精损伤。 展开更多
关键词 仓鼠 己烯雌酚 枸杞多糖 生殖损伤 抗氧化 激素 组织形态
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脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞乳糖代谢的影响及其作用机制 被引量：1
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作者 刘秀芝 龙全梅 +1 位作者 王建发 武瑞 《中国生物制品学杂志》 2025年第3期291-296,311,共7页
目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)乳糖代谢的影响及其作用机制,为选择更合理的免疫代谢调控方案以保障奶牛乳腺健康提供新思路。方法用10μg/mL LPS处理MAC-T细胞0、3、6、12、24 h,紫外分光光度计下... 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)乳糖代谢的影响及其作用机制,为选择更合理的免疫代谢调控方案以保障奶牛乳腺健康提供新思路。方法用10μg/mL LPS处理MAC-T细胞0、3、6、12、24 h,紫外分光光度计下检测细胞内糖酵解酶(己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶)活性以及乳酸、葡萄糖、乳糖含量;Western blot法检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、蛋白激酶B(又称AKT)表达及磷酸化水平;荧光定量RT-PCR法检测HIF-1α、AKT、葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)mRNA转录水平。结果与0 h相比,LPS处理3 h时己糖激酶、磷酸果糖激酶活性达到峰值(F分别为4.197、6.941,P均<0.01),之后逐渐降低,24 h时己糖激酶活性显著下降(F=4.987,P<0.01);磷酸果糖激酶活性在24 h内均维持在相对较高水平;丙酮酸激酶活性在最初6 h内显著增加,随后极显著升高,24 h时升高至0 h的27倍(F=26.95,P<0.001)。LPS处理24 h,乳糖含量均显著降低;3 h时葡萄糖含量显著增加(t=4.294,P<0.001),之后呈明显下降趋势,24 h时含量显著降低(t=5.218,P<0.001);12和24 h时乳酸含量显著增加。HIF-1αmRNA及蛋白表达水平在LPS处理6 h时均显著升高(F分别为5.355、5.466,P<0.001),之后逐渐下降;总AKT mRNA及蛋白表达水平、p-AKT(Ser473)蛋白表达水平在LPS处理24 h时均显著升高(F分别为6.207、6.368、6.253,P均<0.01);GLUT1 mRNA转录水平在LPS刺激3、6、12 h时均显著升高(F分别为6.549、5.821、5.553,P均<0.01)。结论LPS处理导致MAC-T细胞对葡萄糖的摄取增加,摄取的葡萄糖从大部分用于乳糖合成转向大部分用于糖酵解代谢和炎性应答,细胞内乳糖合成显著减少。 展开更多
关键词 奶牛 乳腺上皮细胞 脂多糖 乳糖 葡萄糖 糖酵解
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奶牛乳腺健康及精准管理的研究进展 被引量：1
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作者 季金豆 耿子健 +1 位作者 连帅 王建发 《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期21-26,43,共7页
乳腺健康是影响奶牛泌乳能力、免疫防御能力与牛奶产量与质量的直接因素。奶牛乳腺健康管理及疾病预防在乳业高效生产的环节中至关重要,而奶牛乳房炎已经成为奶牛养殖管理过程中的主要威胁。文章综述了奶牛乳腺健康整体精准管理策略,介... 乳腺健康是影响奶牛泌乳能力、免疫防御能力与牛奶产量与质量的直接因素。奶牛乳腺健康管理及疾病预防在乳业高效生产的环节中至关重要,而奶牛乳房炎已经成为奶牛养殖管理过程中的主要威胁。文章综述了奶牛乳腺健康整体精准管理策略,介绍了营养、饲养管理及奶牛乳房炎的精准防治策略,以及基于物联网、大数据、云计算、人工智能等电子信息技术的数智化畜牧理念。这些措施和技术的应用,将在很大程度上降低奶牛乳房炎发病率,提高乳房炎诊断的效率和准确性,同时通过病原菌治疗方案实现奶牛乳房炎的精准治疗。未来,数智化畜牧将进一步推动奶牛乳腺健康的精准管理,逐步走上标准化、高效化、智能化的道路,为乳业可持续发展提供有力支撑。 展开更多
关键词 乳腺健康 精准管理 疾病诊断 奶牛养殖 数智化畜牧 乳房炎
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胎盘的有效成分及其应用 被引量：20
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作者 张淑二 陶勇 +1 位作者 张运海 章孝荣 《动物医学进展》 CSCD 2007年第9期103-107,共5页
哺乳动物胎盘中含有激素、免疫球蛋白、氨基酸、细胞因子、酶、微量元素及胶原蛋白等多种活性物质,这些活性物质在提高人体免疫力、抗氧化能力、延缓衰老、治疗部分疾病等方面具有很好的效果。文章对哺乳动物胎盘的有效成分、加工工艺... 哺乳动物胎盘中含有激素、免疫球蛋白、氨基酸、细胞因子、酶、微量元素及胶原蛋白等多种活性物质,这些活性物质在提高人体免疫力、抗氧化能力、延缓衰老、治疗部分疾病等方面具有很好的效果。文章对哺乳动物胎盘的有效成分、加工工艺和应用研究进行了综述,并对胎盘的应用前景及存在的问题进行了分析。 展开更多
关键词 胎盘 有效成分 加工工艺 药理作用 临床应用
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奶牛早期胚胎死亡的因素分析及防制措施 被引量：10
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作者 利光辉 靳亚平 +2 位作者 林炜明 陈秀荔 王赟 《西北农业学报》 CAS CSCD 2003年第3期24-28,共5页
奶牛妊娠失败主要发生在配种后的40d,染色体异常和激素失调等内源性因素和热应激、营养等环境因子,均是引起胚胎死亡的原因。激素治疗,提高P4的浓度或补充bTP—1,在一定程度上可以提高奶牛的妊娠率,改善公母畜的饲养管理条件,满足家畜... 奶牛妊娠失败主要发生在配种后的40d,染色体异常和激素失调等内源性因素和热应激、营养等环境因子,均是引起胚胎死亡的原因。激素治疗,提高P4的浓度或补充bTP—1,在一定程度上可以提高奶牛的妊娠率,改善公母畜的饲养管理条件,满足家畜对维生素及微量元素的需要,并保证优良条件,以提高配子的质量,使早期胚胎得到正常的发育。本文从早期胚胎发育、母胎识别、影响胚胎死亡率的因素及预防、治疗等方面进行综述。 展开更多
关键词 奶牛 早期胚胎 防制措施 胚胎死亡
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