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中草药及复方组合对奶牛隐性乳腺炎源大肠杆菌和阴沟肠杆菌的体外抑菌试验 被引量：3
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作者 邓凯伟 苗磊 赵云焕 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第13期123-125,共3页
为了研究金银花、白头翁、石榴皮及复方组合对引起奶牛隐性乳腺炎的大肠杆菌和阴沟肠杆菌的抑菌效果,试验用2倍稀释法测定中草药的最小抑菌浓度(MIC),采用单味中草药及两种中草药复方组合对大肠杆菌和阴沟肠杆菌进行抑菌试验测定其敏感... 为了研究金银花、白头翁、石榴皮及复方组合对引起奶牛隐性乳腺炎的大肠杆菌和阴沟肠杆菌的抑菌效果,试验用2倍稀释法测定中草药的最小抑菌浓度(MIC),采用单味中草药及两种中草药复方组合对大肠杆菌和阴沟肠杆菌进行抑菌试验测定其敏感性。结果表明:金银花、白头翁、石榴皮对大肠杆菌的MIC分别为25,20,25 mg/mL,对阴沟肠杆菌的MIC分别为50,40,50 mg/mL。三种单味中草药对大肠杆菌的抑菌效果不明显,抑菌效果依次为金银花>石榴皮>白头翁;三种单味中草药对阴沟肠杆菌的抑菌效果不明显,抑菌效果依次为白头翁>石榴皮>金银花。石榴皮和金银花的中草药组合对大肠杆菌的抑菌圈直径为8.74 mm,敏感;石榴皮和白头翁的中草药组合对阴沟肠杆菌的抑菌圈直径为7.84 mm,不敏感,但有一定程度的抑菌效果;白头翁和金银花的中草药复方组合对两种致病菌均不敏感。说明金银花、白头翁、石榴皮三种单味中草药对大肠杆菌和阴沟肠杆抑菌效果不明显,中草药复方组合的抑菌效果也不理想。 展开更多
关键词 奶牛隐性乳腺炎 中草药 大肠杆菌 阴沟肠杆菌 抑菌效果 复方组合
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鸭疫里氏杆菌rpfF基因缺失株的构建及其生物学特性的研究
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作者 马天韵 王东东 +7 位作者 王晓蓉 刘云霞 李世媛 杜陈香 赵昕昊 赵宇军 闫艺 王颖 《中国预防兽医学报》 2025年第12期1237-1245,共9页
为探究鸭疫里氏杆菌(RA)SX-1株rpfF基因的功能,本研究采用自杀质粒结合同源重组的方法构建RA SX-1株rpfF基因缺失株SX-1ΔrpfF及回补株cSX-1ΔrpfF,经PCR与测序鉴定,将二者传代并经PCR鉴定二者的遗传稳定性,结果显示rpfF基因缺失株及回... 为探究鸭疫里氏杆菌(RA)SX-1株rpfF基因的功能,本研究采用自杀质粒结合同源重组的方法构建RA SX-1株rpfF基因缺失株SX-1ΔrpfF及回补株cSX-1ΔrpfF,经PCR与测序鉴定,将二者传代并经PCR鉴定二者的遗传稳定性,结果显示rpfF基因缺失株及回补株均正确构建,且SX-1ΔrpfF和cSX-1ΔrpfF株的遗传稳定性均较强。根据RA SX-1、SX-1ΔrpfF株及其回补株c SX-1ΔrpfF不同培养时间测定的OD_(600nm)值绘制三者的生长曲线;采用纸片扩散法(K-B法)测定3株菌对5类共12种抗菌药物的敏感性;采用生化鉴定管鉴定3株菌的生化特性。经PCR扩增RA SX-1株rpfF基因,克隆至pET-28a载体构建重组质粒pET-28a-rpfF,经双酶切和测序鉴定正确后,经大肠杆菌表达重组RpfF蛋白(rRpfF),并经SDS-PAGE检测。采用明胶生化鉴定管鉴定pET-28a/BL21菌株与重组菌pET-28arpfF/BL21的明胶生化特性。结果显示,3株菌的生长速度基本一致;除缺失株SX-1ΔrpfF对喹诺酮类氧氟沙星的耐药性从中介(I)变为敏感(S)外,3株菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、大环内酯类、利福霉素类抗菌药物的敏感性均无变化。SX-1株和回补株cSX-1ΔrpfF明胶生化特性均为阳性,SX-1ΔrpfF株明胶生化特性为阴性,3株菌的其余生化特性均一致。SDS-PAGE结果显示,在35 ku处出现rRpfF的目的条带,且其主要在沉淀中表达。重组菌pET-28a-rpfF/BL21能液化明胶,而p ET-28a/BL21不能液化明胶,与SX-1ΔrpfF株的明胶生化特性一致。将rpfF基因缺失株分别以10^(9)cfu/只~10^(1)cfu/只的剂量经脚蹼注射感染雏鸭,感染后观察雏鸭的发病及死亡情况,采用改良寇氏法计算rpfF基因缺失株对雏鸭的半数致死量(LD50);将SX-1ΔrpfF株与SX-1株均以10~3cfu/只经脚蹼注射感染雏鸭,分别于感染后24 h、48 h剖杀雏鸭,观察雏鸭各脏器的剖检病变并制备病理切片,观察结果显示,缺失株SX-1ΔrpfF感染后2 d雏鸭开始发病,部分雏鸭表现为扎堆且呈神经症状。7 d内死亡70只,死亡率达77%。经计算缺失株对雏鸭的LD50为3.5×10^(3)cfu,比野生株SX-1(10 cfu)对雏鸭的LD_(50)高约350倍。剖检病变观察结果显示,SX-1株感染雏鸭的心脏和脑均无明显病变,但肝脏和脾脏出现较严重的病变。SX-1ΔrpfF株感染雏鸭的各脏器均无明显病变。组织病变观察结果显示,SX-1株感染的雏鸭心脏和脑组织均无明显病变,但肝脏和脾脏组织出现明显病变;SX-1ΔrpfF株感染及阴性对照组雏鸭的各脏器组织均无明显病变。上述结果首次证实RpfF可增强RA的致病性,这可能与其影响RA明胶酶的合成有关。本研究为进一步解析RpfF的功能及分子致病机制等奠定基础。 展开更多
关键词 鸭疫里氏杆菌 rpfF基因缺失 明胶生化特性 致病性
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