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驽巴贝虫病间接ELISA检测方法的建立
被引量:
9
1
作者
龚真莉
刘光远
+6 位作者
谢俊仁
柴慧萍
张丽艳
李知新
田占成
王路
刘建刚
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期200-204,共5页
目的克隆表达驽巴贝虫诊断抗原基因BC48,建立间接ELISA诊断方法。方法从感染驽巴贝虫的毛驴血液中提取虫体基因组DNA,利用PCR技术扩增BC48基因,将其克隆入表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)...
目的克隆表达驽巴贝虫诊断抗原基因BC48,建立间接ELISA诊断方法。方法从感染驽巴贝虫的毛驴血液中提取虫体基因组DNA,利用PCR技术扩增BC48基因,将其克隆入表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化蛋白。以该蛋白作为诊断抗原建立间接ELISA诊断方法 ,对反应条件进行优化,并对该方法的特异性和敏感性进行评价。结果扩增获得1272bp的BC48基因片段。重组表达质粒pET-28a-BC48诱导后获得大小约为Mr46000的可溶性融合蛋白,纯化后蛋白浓度为12.98mg/ml。间接ELISA方法条件优化的结果显示,最佳抗原包被浓度为65μg/ml,最适血清稀释度为1∶80,该融合蛋白可特异性地与驽巴贝虫感染血清结合,而不与马泰勒虫感染血清及阴性血清反应。使用该方法与镜检法检测17份散养毛驴血清样品,阳性检出率分别为3/17和2/17。结论以BC48重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可用于马属动物驽巴贝虫病的检测。
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关键词
驽巴贝虫
BC48
表达
纯化
ELISA
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职称材料
梨形虫病的分子生物学研究进展
被引量:
6
2
作者
马腾
周金林
《中国兽医寄生虫病》
2006年第2期22-27,共6页
梨形虫病是一种越来越受关注的蜱播原虫病。本文着重阐述了应用分子生物学技术在梨形虫基因组及染色体特点、致病的分子机制、抗感染免疫机制、基因工程疫苗研制方面的研究以及梨形虫病分子生物学诊断方面的应用。
关键词
梨形虫病
分子生物学技术
蜱
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职称材料
内蒙古阿拉善盟附红细胞体感染情况调查
被引量:
3
3
作者
杜跃峰
宝迪
+7 位作者
田芸
彭家中
张文彬
谢君仁
左海涛
娜仁花
张智文
彭丽琴
《中国兽医寄生虫病》
2007年第2期31-33,共3页
目的为了解内蒙古阿拉善盟人、动植物体及水、土等其它物质附红细胞体的感染情况。方法采人血静脉血和未梢血制作血片,染色后镜检。对于其他液体被检物,直接吸取一小滴镜检。对于固体被检物,需研碎后,吸取汗液进行镜检观察。结果在血片...
目的为了解内蒙古阿拉善盟人、动植物体及水、土等其它物质附红细胞体的感染情况。方法采人血静脉血和未梢血制作血片,染色后镜检。对于其他液体被检物,直接吸取一小滴镜检。对于固体被检物,需研碎后,吸取汗液进行镜检观察。结果在血片上检查到少量附红细胞体和大量附红细胞体空白痕迹,在血片染色液、水、土、草、树叶、瓜果、蔬菜、注射药物等中检查到附红细胞体。结论附红细胞体传染源多,抵抗力强,无处不在,目前没有特效消毒药和治疗药,也没有有效的防治方法。
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关键词
附红细胞体
人畜共患
感染
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职称材料
题名
驽巴贝虫病间接ELISA检测方法的建立
被引量:
9
1
作者
龚真莉
刘光远
谢俊仁
柴慧萍
张丽艳
李知新
田占成
王路
刘建刚
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期200-204,共5页
基金
国家科技基础条件平台项目(No.2005DKA21205-3)
国家高新技术研究发展计划(863计划)项目(No.2006AA10-A207)~~
文摘
目的克隆表达驽巴贝虫诊断抗原基因BC48,建立间接ELISA诊断方法。方法从感染驽巴贝虫的毛驴血液中提取虫体基因组DNA,利用PCR技术扩增BC48基因,将其克隆入表达载体pET-28a,转化大肠埃希菌感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用镍柱亲和层析法纯化蛋白。以该蛋白作为诊断抗原建立间接ELISA诊断方法 ,对反应条件进行优化,并对该方法的特异性和敏感性进行评价。结果扩增获得1272bp的BC48基因片段。重组表达质粒pET-28a-BC48诱导后获得大小约为Mr46000的可溶性融合蛋白,纯化后蛋白浓度为12.98mg/ml。间接ELISA方法条件优化的结果显示,最佳抗原包被浓度为65μg/ml,最适血清稀释度为1∶80,该融合蛋白可特异性地与驽巴贝虫感染血清结合,而不与马泰勒虫感染血清及阴性血清反应。使用该方法与镜检法检测17份散养毛驴血清样品,阳性检出率分别为3/17和2/17。结论以BC48重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可用于马属动物驽巴贝虫病的检测。
关键词
驽巴贝虫
BC48
表达
纯化
ELISA
Keywords
Babesia caballi
BC48
Expression
Purification
ELISA
分类号
S855.929 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
梨形虫病的分子生物学研究进展
被引量:
6
2
作者
马腾
周金林
机构
中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室
出处
《中国兽医寄生虫病》
2006年第2期22-27,共6页
文摘
梨形虫病是一种越来越受关注的蜱播原虫病。本文着重阐述了应用分子生物学技术在梨形虫基因组及染色体特点、致病的分子机制、抗感染免疫机制、基因工程疫苗研制方面的研究以及梨形虫病分子生物学诊断方面的应用。
关键词
梨形虫病
分子生物学技术
蜱
Keywords
Piroplasmosis
molecular biology techniques
tick-borne protozosis
分类号
S855.929 [农业科学—临床兽医学]
在线阅读
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职称材料
题名
内蒙古阿拉善盟附红细胞体感染情况调查
被引量:
3
3
作者
杜跃峰
宝迪
田芸
彭家中
张文彬
谢君仁
左海涛
娜仁花
张智文
彭丽琴
机构
内蒙古阿拉善盟畜牧研究所
出处
《中国兽医寄生虫病》
2007年第2期31-33,共3页
文摘
目的为了解内蒙古阿拉善盟人、动植物体及水、土等其它物质附红细胞体的感染情况。方法采人血静脉血和未梢血制作血片,染色后镜检。对于其他液体被检物,直接吸取一小滴镜检。对于固体被检物,需研碎后,吸取汗液进行镜检观察。结果在血片上检查到少量附红细胞体和大量附红细胞体空白痕迹,在血片染色液、水、土、草、树叶、瓜果、蔬菜、注射药物等中检查到附红细胞体。结论附红细胞体传染源多,抵抗力强,无处不在,目前没有特效消毒药和治疗药,也没有有效的防治方法。
关键词
附红细胞体
人畜共患
感染
分类号
S855.929 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
驽巴贝虫病间接ELISA检测方法的建立
龚真莉
刘光远
谢俊仁
柴慧萍
张丽艳
李知新
田占成
王路
刘建刚
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
梨形虫病的分子生物学研究进展
马腾
周金林
《中国兽医寄生虫病》
2006
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
内蒙古阿拉善盟附红细胞体感染情况调查
杜跃峰
宝迪
田芸
彭家中
张文彬
谢君仁
左海涛
娜仁花
张智文
彭丽琴
《中国兽医寄生虫病》
2007
3
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