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鹅坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅲ的原核表达及抗原性分析 被引量：3
1
作者 黄欣梅 赵冬敏 +3 位作者 刘宇卓 杨婧 韩凯凯 李银 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期150-154,共5页
【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入... 【目的】获得鹅坦布苏病毒(GTMUV)E蛋白结构域III的原核表达重组蛋白并明确其免疫原性,为进一步研究其生物学功能及研制亚单位疫苗奠定基础。【方法】根据Gen Bank中GTMUV JS804株E蛋白结构域III的同源基因序列设计1对引物,在其两端加入Flag标签序列和酶切位点,采用PCR扩增GTMUV的E蛋白结构域III基因(EIII),然后与p ET32a原核表达载体连接构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导融合蛋白表达,并以Western blotting鉴定其免疫原性。【结果】PCR扩增获得携带Flag标签序列的EIII基因片段约430 bp,将其插入p ET32a载体可成功构建重组质粒p ET32a-EIII。阳性重组菌经IPTG诱导表达5 h即可得到融合蛋白,分子质量约33.0 k Da,主要以包涵体形式存在。Western blotting鉴定结果显示,融合蛋白与抗Flag标签单克隆抗体、小鼠抗坦布苏病毒多克隆抗体均可发生特异性反应,检测到预期的目的条带。【结论】GTMUV E蛋白结构域Ⅲ能在大肠杆菌中成功诱导表达,且获得的融合蛋白具有良好的免疫原性,可用于研制GTMUV诊断抗原和亚单位疫苗。 展开更多
关键词 鹅坦布苏病毒 E蛋白 结构域Ⅲ 原核表达 免疫原性
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减毒沙门氏菌为载体传递DNA疫苗诱导对新城疫病毒的免疫保护 被引量：9
2
作者 方维焕 梁雪芽 李建荣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期527-530,共4页
探讨了以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体传递新城疫病毒 DNA疫苗的安全性、免疫原性和可行性。将含新城疫病毒 ( NDV) F4 8E9株融合蛋白 ( F)基因的真核表达质粒 pc DNA3- F的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ZJ111株 ( ZJ111/ pc D-NA3- F菌株 ) ,以... 探讨了以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体传递新城疫病毒 DNA疫苗的安全性、免疫原性和可行性。将含新城疫病毒 ( NDV) F4 8E9株融合蛋白 ( F)基因的真核表达质粒 pc DNA3- F的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 ZJ111株 ( ZJ111/ pc D-NA3- F菌株 ) ,以 10 8CFU进行首免 ,2周后二免 ,二免后 4周攻击强毒株 F4 8E9,观察其安全性和免疫原性 ,同时设只含空载体 pc DNA3的 ZJ111/ pc DNA3菌株对照及口服 PBS对照。结果表明 :重组 ZJ111/ pc DNA3- F菌株具有良好的安全性 ,对强毒株攻击的保护率达 6 4 .7%。重组 ZJ111/ pc DNA3- F菌株不仅能诱导雏鸡产生 NDV EL ISA抗体 ,而且诱导产生的法氏囊 B淋巴细胞和胸腺 T淋巴细胞增殖反应显著高于 ZJ111/ pc DNA3对照组。这些结果提示 ,减毒沙门氏菌为载体不仅可直接将 NDV F基因呈递给鸡体细胞进行表达 ,产生抗 NDV的体液免疫 ,而且还可诱导细胞免疫应答。 展开更多
关键词 减毒沙门氏菌 DNA疫苗 载体 新城疫病毒 免疫保护 免疫原性 安全性
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郑州市县级兽医实验室抗体和病原检测能力比对分析 被引量：1
3
作者 张军 《现代牧业》 2024年第1期17-18,共2页
对郑州市5个县级兽医实验室抗体和核酸检测能力进行比对。检测项目4个即禽流感病毒H5亚型(Re-13株)抗体、A型口蹄疫病毒抗体、羊布鲁氏菌抗体、非洲猪瘟核酸。检测结果总体准确率为91.6%。血凝抑制、试管凝集、酶联免疫吸附、荧光聚合... 对郑州市5个县级兽医实验室抗体和核酸检测能力进行比对。检测项目4个即禽流感病毒H5亚型(Re-13株)抗体、A型口蹄疫病毒抗体、羊布鲁氏菌抗体、非洲猪瘟核酸。检测结果总体准确率为91.6%。血凝抑制、试管凝集、酶联免疫吸附、荧光聚合酶链式反应4种检测方法准确率分别为96%、92%、100%、80%。检测结果全部正确的是A市和B市兽医实验室,C市、D市和E县兽医实验室检测结果准确率分别为89.5%、84.2%和84.2%。全市县级兽医实验室的抗体和病原检测能力总体处于较高的水平,但个别实验室还需提高荧光PCR检测能力。 展开更多
关键词 郑州市 县级兽医实验室 抗体和病原检测
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种鸡群禽白血病和鸡白痢净化挑战与未来发展趋势 被引量：4
4
作者 王永强 徐志超 +4 位作者 孙晓霞 苏晓娜 杨金易 郑世军 赖金玉(整理) 《养禽与禽病防治》 2023年第4期29-35,共7页
1鸡白痢净化面临的问题和挑战1.1鸡白痢简介鸡白痢是由鸡白痢沙门菌(Salmonella pullorum)引起的鸡的传染性疾病,主要危害2~3周龄的幼鸡,感染鸡群主要排白色稀粥样粪便,成年鸡感染后不表现典型临床症状,但会造成生殖系统损伤,对种鸡危... 1鸡白痢净化面临的问题和挑战1.1鸡白痢简介鸡白痢是由鸡白痢沙门菌(Salmonella pullorum)引起的鸡的传染性疾病,主要危害2~3周龄的幼鸡,感染鸡群主要排白色稀粥样粪便,成年鸡感染后不表现典型临床症状,但会造成生殖系统损伤,对种鸡危害较大。 展开更多
关键词 鸡白痢 禽白血病 种鸡群 成年鸡 感染鸡 典型临床症状 幼鸡 传染性疾病
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粤北地区鸡传染性病毒性腺胃炎流行病学调查 被引量：1
5
作者 肖文婉 李秀 +10 位作者 戚南山 廖申权 李娟 吕敏娜 林栩慧 刘佐正 蔡海明 胡俊菁 张健 孙铭飞 李国清 《养禽与禽病防治》 2023年第2期11-17,共7页
为了解粤北地区鸡传染性病毒性腺胃炎(Transmissible viral proventriculitis,TVP)的病原学特征,于粤北地区8个有生长停滞、羽毛生长不良和消瘦等症状,疑似传染性病毒性腺胃炎的肉鸡场共采集样品420份,根据发病鸡场每10份样品混为1个样... 为了解粤北地区鸡传染性病毒性腺胃炎(Transmissible viral proventriculitis,TVP)的病原学特征,于粤北地区8个有生长停滞、羽毛生长不良和消瘦等症状,疑似传染性病毒性腺胃炎的肉鸡场共采集样品420份,根据发病鸡场每10份样品混为1个样本,利用实时荧光定量PCR方法进行检测,8种TVP相关病毒的总检出率为80.95%(34/42),除呼肠孤病毒和传染性支气管炎病毒未检测到阳性外,鸡传染性贫血病毒和马立克氏病病毒感染率分别为57.14%、4.76%,传染性法氏囊病病毒、网状内皮增生症病毒、鸡腺胃坏死病毒和圆圈病毒3型均为2.38%,其中鸡传染性贫血病毒和马立克氏病病毒、马立克氏病病毒和传染性法氏囊病病毒等混合感染的检出率均为4.76%,马立克氏病病毒和鸡腺胃坏死病毒、马立克氏病病毒和圆圈病毒3型等混合感染的检出率为2.38%;发病鸡主要集中于25~80日龄,不同日龄的TVP相关病原学检出率无显著性差异。结果表明粤北地区肉鸡TVP发病率较高,需进一步完善相关疾病免疫策略,研究结果为进一步了解TVP发病规律和有效防控提供科学参考依据。 展开更多
关键词 粤北地区 鸡传染性病毒性腺胃炎 流行病学调查
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