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大肠杆菌菌毛油乳剂苗的实验研究 被引量：2
1
作者 杜银中 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2001年第1期4-5,共2页
利用加热法对一株用牛心琼脂培养的当地产肠毒素性大肠杆菌 (ETEC)进行了宿主特异性菌毛的提取 ,并用该菌毛制成的油乳剂苗进行了家兔免疫试验。用甘露糖抵抗血凝反应 (MRHA)及血凝抑制试验 (HI)检测了菌毛的表达效果及抗体含量。结果显... 利用加热法对一株用牛心琼脂培养的当地产肠毒素性大肠杆菌 (ETEC)进行了宿主特异性菌毛的提取 ,并用该菌毛制成的油乳剂苗进行了家兔免疫试验。用甘露糖抵抗血凝反应 (MRHA)及血凝抑制试验 (HI)检测了菌毛的表达效果及抗体含量。结果显示 ,菌毛的血凝价为 1∶5 12 ,抗体滴度为 1∶6 4。 展开更多
关键词 大肠杆菌 宿主特异性菌毛 油乳剂苗 甘露糖抵抗血凝反应 MRHA
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布鲁菌Rev.1株eryA基因的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量：1
2
作者 程家海 宋前进 +5 位作者 郭昊 侯丽娜 杨超 王凤雪 关平原 温永俊 《畜牧与饲料科学》 2020年第6期7-12,25,共7页
通过对布鲁菌优势抗原eryA基因进行原核表达,在获得目的蛋白的基础上建立以该蛋白为包被抗原的间接ELISA方法。构建原核表达载体pET-30a-eryA,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍柱亲和纯化eryA重组蛋白,SDS-PAGE鉴定纯化蛋白... 通过对布鲁菌优势抗原eryA基因进行原核表达,在获得目的蛋白的基础上建立以该蛋白为包被抗原的间接ELISA方法。构建原核表达载体pET-30a-eryA,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,镍柱亲和纯化eryA重组蛋白,SDS-PAGE鉴定纯化蛋白,Western-Blotting检测反应原性后建立间接ELISA方法。反应条件优化后,抗原包被浓度为0.3125μg/mL,37℃包被2 h;封闭液为5%猪源明胶,37℃作用2 h;血清稀释度为1∶100,37℃作用1 h;酶标抗体稀释度为1∶8000,37℃作用45 min。血清稀释度为1∶1600时,仍然检测为阳性,证明建立的间接ELISA方法灵敏性良好;其他菌种及病毒经过特异性检测,均为阴性,证明建立的间接ELISA方法特异性良好;通过重复性检测,批间及批内变异系数均小于10%,证明建立的间接ELISA方法重复性良好。检测临床血清样品,建立的方法与试管凝集试验总符合率为95.7%,证明该方法可初步应用于临床诊断。 展开更多
关键词 布鲁菌:eryA基因 原核表达 间接ELISA
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