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奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌噬菌体的分离鉴定、生物学特性及初步应用 被引量：2
1
作者 廖毅婷 林嘉熙 龙淼 《中国农业大学学报》 北大核心 2025年第6期70-78,共9页
为探索一种治疗牛乳房炎的新方法,本研究从牛场环境污水中分离奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌噬菌体,并分析其生物学特性,包括电镜观察形态,基因组核酸类型、噬菌谱、最佳感染复数、pH和热稳定性以及一步生长曲线。构建金黄色葡萄球菌性小鼠... 为探索一种治疗牛乳房炎的新方法,本研究从牛场环境污水中分离奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌噬菌体,并分析其生物学特性,包括电镜观察形态,基因组核酸类型、噬菌谱、最佳感染复数、pH和热稳定性以及一步生长曲线。构建金黄色葡萄球菌性小鼠乳房炎模型,通过HE染色检测小鼠乳腺损伤情况,ELISA试剂盒检测小鼠乳腺组织的炎性指标变化来确定该噬菌体治疗乳腺炎效果。结果表明:1)从污水中分离出1株金黄色葡萄球菌噬菌体,电镜观察为肌尾科噬菌体,命名为vB_SauM_Lm44;vB_SauM_Lm44的核酸类型为双链DNA。2)vB_SauM_Lm44的最适温度为42℃,pH为5~10,裂解量为41.3 PFU/cell,潜伏期为40 min,裂解期为80 min。3)vB_SauM_Lm44对小鼠乳腺组织的眼观病变与腺泡损伤有明显改善,炎细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平均极显著降低(P<0.01)。综上,噬菌体vB_SauM_Lm44对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌m44引起的小鼠乳房炎有显著的治疗效果。本研究为临床应用噬菌体治疗金黄色葡萄球菌导致的感染奠定理论基础。 展开更多
关键词 乳房炎 金黄色葡萄球菌 噬菌体 生物学特性
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江苏某猪场多血清型混合感染猪链球菌3、4、7、9型的分离鉴定及特性研究
2
作者 赖虹桥 朱恒志 +8 位作者 李娜 宋京泽 李子轩 向增豪 解建平 温立斌 何孔旺 牛家强 肖琦 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第5期11-20,共10页
为明确从猪场流行疫情多血清型猪链球菌(SS)混合感染的病死猪中分离到的猪链球菌3型(SS3)、4型(SS4)、7型(SS7)和9型(SS9)菌株的生物学特性及致病性,本研究以江苏某规模猪场某次急性流行疫情中13头病死仔猪的肺组织和血液样品为材料,通... 为明确从猪场流行疫情多血清型猪链球菌(SS)混合感染的病死猪中分离到的猪链球菌3型(SS3)、4型(SS4)、7型(SS7)和9型(SS9)菌株的生物学特性及致病性,本研究以江苏某规模猪场某次急性流行疫情中13头病死仔猪的肺组织和血液样品为材料,通过细菌分离纯化、SS-PCR和血清分型PCR鉴定、革兰氏染色、生化试验、MLST型鉴定、药敏试验、耐药及毒力基因检测及小鼠致病性试验等开展系统研究。结果显示,在13头病死猪的SS-PCR检测中,有12头肺组织为阳性,8头全血为阳性;SS血清型分型PCR共检出SS3、SS4、SS7、SS9、SS31共5种血清型及1种未知血清型;并且6头病死猪存在SS多血清型混合感染,其中2头为4种血清型混合感染(5号猪肺组织检出SS3、SS7、SS9和SS31,7号猪全血检出SS3、SS4、SS7及SS9);成功分离获得6株纯菌,选取4株有代表性的不同血清型菌株(均分离自4血清型混合感染猪)进行后续分析。4株分离菌均为革兰氏阳性链状球菌,生化特性符合SS典型特征;ST型分别属于ST117(SS3 ZJ)、ST17(SS4 ZJ)、ST373(SS7 ZJ)和ST243(SS9 ZJ)。药敏试验结果显示,4株分离菌均对β-内酰胺类(氨苄西林等)、糖肽类(万古霉素)敏感,但均呈现多重耐药,SS3 ZJ、SS7 ZJ和SS9 ZJ为四重耐药,SS4 ZJ为五重耐药,耐药谱涵盖大环内酯类、四环素类、林可酰胺类等;所有菌株均携带耐药基因erm(B),SS3 ZJ、SS7 ZJ和SS9 ZJ还携带tet(O),SS4携带tet(M)和aac(6′)-aph(2″),耐药基因与耐药表型完全匹配。毒力基因检测结果显示,4株分离菌均携带gapdh、ccp A、srt A、orf 2毒力基因,SS4 ZJ、SS7 ZJ额外携带sly,SS9 ZJ携带fbps。4株分离菌腹腔接种均能致BALB/c小鼠死亡,半数致死量(LD50)为1.18×10^(7) CFU/mL~2.46×10^(8) CFU/mL,且均能从感染死亡小鼠脑等组织中成功回收到攻毒菌株。病理切片显示,感染小鼠存在肝脏充血、脾脏淋巴细胞减少、肺脏出血等病变,部分菌株还引发心肌溶解或脑炎。本研究明确了多血清型混合感染场景下猪链球菌3型、4型、7型、9型的主要生物学特征和致病特性,为临床防控及合理用药提供科学依据。 展开更多
关键词 猪链球菌3型、4型、7型、9型 多血清型混合感染 分离鉴定 生物学特性 小鼠致病性
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石河子市部分流浪犬源肠球菌耐药性及耐药基因检测
3
作者 曹兴旺 冯麟博 +5 位作者 李志远 杨子为 徐道元 杨吉奥博 关团 孙志华 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期236-249,共14页
为了解新疆石河子市部分流浪犬源肠球菌的耐药性以及耐药基因携带情况,本实验采集210份来自流浪犬粪便及其周边环境的样品。通过常规细菌分离鉴定法对肠球菌进行分离、纯化与鉴定,采用纸片扩散法测定分离株对14种抗菌药物的耐药性,利用... 为了解新疆石河子市部分流浪犬源肠球菌的耐药性以及耐药基因携带情况,本实验采集210份来自流浪犬粪便及其周边环境的样品。通过常规细菌分离鉴定法对肠球菌进行分离、纯化与鉴定,采用纸片扩散法测定分离株对14种抗菌药物的耐药性,利用PCR技术检测相关耐药基因携带情况。本实验共分离到163株肠球菌,其中119株来源于粪便,44株来源于环境。这些菌株包括23株粪肠球菌,129株屎肠球菌,11株其他肠球菌。药敏试验结果显示,流浪犬源肠球菌对磺胺异噁唑、克林霉素、利福平、泰妙菌素和庆大霉素表现出较高的耐药性,耐药菌株分别占100%、78.53%、67.48%、63.19%和53.37%;相比之下,对青霉素、氨苄西林、氟苯尼考的耐药率较低(2.45%~6.75%);值得注意的是,未检测出对万古霉素、替加环素、利奈唑胺耐药的菌株。多重耐药结果显示主要分布在4~6耐,占69.32%(113/163),其中6耐占比最高(25.15%),而1耐占比最低(1.23%)。此外,环境中肠球菌的耐药情况较粪便中肠球菌稍严重,且流浪犬源屎肠球菌的耐药情况也较粪肠球菌更为严重。耐药基因检测结果显示,检出erm(B)、aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、tetM耐药基因,噁唑烷酮类药物相关耐药基因(optrA、cfr、poxtA)、万古霉素耐药基因(van)以及其他被检耐药基因均未检出。综上所述,流浪犬收容所很可能成为多重耐药菌的潜在储存库,存在相关耐药基因的流行风险。建议在治疗当地的宠物犬和流浪犬时,应根据细菌的耐药性结果来进行合理用药,并且加强对流浪犬细菌耐药性的监测,以减少耐药细菌传播的风险。 展开更多
关键词 流浪犬 肠球菌 粪肠球菌 屎肠球菌 耐药性
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四川省猪链球菌病的流行病学调查 被引量：9
4
作者 王泽洲 余勇 +5 位作者 程江 谢智明 马孟根 李金海 陈斌 李春 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期502-506,共5页
2005年7月,在四川省资阳、内江等地相继发现一种以发病急、高热、伴有头痛等全身性中毒症状,严重者出现中毒性休克、脑膜炎为主要临床表现的病例。几乎所有病例与病死猪有关。在1个月内,共报告人感染204例,其中死亡38例,分布在以资阳、... 2005年7月,在四川省资阳、内江等地相继发现一种以发病急、高热、伴有头痛等全身性中毒症状,严重者出现中毒性休克、脑膜炎为主要临床表现的病例。几乎所有病例与病死猪有关。在1个月内,共报告人感染204例,其中死亡38例,分布在以资阳、内江为主的12个市37个县。经确诊系由猪链球菌2型引起。在此期间,猪发病死亡647头,分布在8个市21个县。 展开更多
关键词 四川省 猪链球菌2型 流行病学调查
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金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因突变与环丙沙星耐药性的关系 被引量：5
5
作者 闭兴明 李乾学 +4 位作者 韩春田 郭建顺 周学章 于录 曾凡勤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期621-623,共3页
采用药敏纸片法测定了临床分离的160株金黄色葡萄球菌对14种抗菌药物的耐药性,同时进行了M RSA的检测,并采用琼脂稀释法测定纸片法筛选出的45株金黄色葡萄球菌对环丙沙星的最低抑菌浓度(M IC)。根据金黄色葡萄球菌gy rA、gy rB、g rlA、... 采用药敏纸片法测定了临床分离的160株金黄色葡萄球菌对14种抗菌药物的耐药性,同时进行了M RSA的检测,并采用琼脂稀释法测定纸片法筛选出的45株金黄色葡萄球菌对环丙沙星的最低抑菌浓度(M IC)。根据金黄色葡萄球菌gy rA、gy rB、g rlA、g rlB和norA基因的核苷酸序列设计引物,以筛选出的45株金黄色葡萄球菌染色体DNA为模板,对gy rA、gy rB、g rlA、g rlB和norA基因片段进行PCR扩增,回收PCR产物,并与pM D 18-T载体连接,转化DH 5α感受态大肠杆菌,提取质粒并测序,进一步分析考查金黄色葡萄球菌gy rA、gy rB、g rlA、g rlB和norA基因及其启动子区突变与环丙沙星耐药性的关系。结果表明,g rlA中的2个突变(位于80和84密码子)及gy rA中的2个突变(位于84和88密码子)与环丙沙星耐药性明显相关。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 最低抑菌浓度(MIC) 耐药性 基因突变
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牛源金黄色葡萄球菌凝固酶基因的分型 被引量：8
6
作者 朱战波 任宪刚 +1 位作者 崔玉东 朴范泽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期728-730,共3页
为了了解我国不同地区奶牛场金黄色葡萄球菌基因型的分布情况,采用凝固酶基因(Coa)扩增的分型方法,对在奶牛乳房炎奶样中所分离到的26株金黄色葡萄球菌进行了分型。结果显示,26株金黄色葡萄球菌共分为5个基因型,黑龙江省分离株以PCR 3... 为了了解我国不同地区奶牛场金黄色葡萄球菌基因型的分布情况,采用凝固酶基因(Coa)扩增的分型方法,对在奶牛乳房炎奶样中所分离到的26株金黄色葡萄球菌进行了分型。结果显示,26株金黄色葡萄球菌共分为5个基因型,黑龙江省分离株以PCR 3型为主(10/16)。发现在同一牛群中的分离株可以存在相同的基因型,也可以存在不同的基因型;而不同牛群中的分离株也可属于同一基因型。这种结果提示,在某个或某些牛群中存在某一金黄色葡萄球菌的流行型,但也可能存在多个金黄色葡萄球菌的克隆。 展开更多
关键词 乳房炎 金黄色葡萄球菌 凝固酶基因分型
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猪链球菌广西分离株耐药性分析 被引量：12
7
作者 许力干 陈泽祥 +3 位作者 吴礼洁 潘艳 谢永平 朱贤龙 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第9期I0012-I0013,共2页
采用药敏纸片扩散法对32株猪链球菌广西分离株进行12种临床常用抗生素耐药性试验分析,结果表明:广西区内猪链菌分离株耐药性非常普遍,而且耐药谱广,所有分离株对阿莫西林均具有耐药性,耐药率为100%;对强力霉素、壮观霉素、林可霉素、罗... 采用药敏纸片扩散法对32株猪链球菌广西分离株进行12种临床常用抗生素耐药性试验分析,结果表明:广西区内猪链菌分离株耐药性非常普遍,而且耐药谱广,所有分离株对阿莫西林均具有耐药性,耐药率为100%;对强力霉素、壮观霉素、林可霉素、罗红霉素具有高度耐药性,耐药率分别为96%、89%、89%、84%,分离株对3种以上抗生素都具有耐药性,其中有3株对试验的12种抗生素都具有耐药性,表现为多重耐药性(M DR)。 展开更多
关键词 猪链球菌 抗生素 耐药性
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粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法的建立及应用 被引量：5
8
作者 周霞 王晓兰 +1 位作者 剡根强 马勋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期417-421,共5页
利用超声波裂解法制备粪肠球菌的裂解物作为抗原包被酶标反应板，通过棋盘滴定方法筛选最佳反应条件，成功地建立了检测致羔羊脑炎粪肠球菌抗体的间接ELISA。在此间接ELISA中，抗原最佳包被浓度为37．57μg／mL，被检血清的最佳稀释度为... 利用超声波裂解法制备粪肠球菌的裂解物作为抗原包被酶标反应板，通过棋盘滴定方法筛选最佳反应条件，成功地建立了检测致羔羊脑炎粪肠球菌抗体的间接ELISA。在此间接ELISA中，抗原最佳包被浓度为37．57μg／mL，被检血清的最佳稀释度为1：100。建立的间接ELISA的灵敏度是微量凝集反应的25～100倍。交叉试验、阻断试验、重复性试验表明，该方法具有重复性好、特异性强、操作简便快速等特点。确立的检测ELISA效价的回归方程lg[1／ET]=1．275＋2．730 D405nm，可用于抗体定量测定。利用此方法检测了来自未免疫绵羊场的50份成年绵羊的血清和50份羔羊的血清；结果，2份成年绵羊的血清为阳性，其他样品均为阴性。 展开更多
关键词 间接ELISA 粪肠球菌 羔羊 脑炎
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浙江省主要奶牛养殖区乳房炎致病菌金黄色葡萄球菌的耐药性 被引量：6
9
作者 燕霞 陈俭 +3 位作者 张丽佳 李禹涛 谢锋 胡松华 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第6期633-636,共4页
为了解浙江省奶牛乳房炎致病菌的耐药情况,评估其耐药表型与基因型的相关性,本研究从浙江省主要奶牛养殖区奶牛乳房炎病例分离到70株金黄色葡萄球菌,测定它们对13种常用抗菌药物的药敏性,并采用聚合酶链式反应(PCR)检测这些细菌耐青霉素... 为了解浙江省奶牛乳房炎致病菌的耐药情况,评估其耐药表型与基因型的相关性,本研究从浙江省主要奶牛养殖区奶牛乳房炎病例分离到70株金黄色葡萄球菌,测定它们对13种常用抗菌药物的药敏性,并采用聚合酶链式反应(PCR)检测这些细菌耐青霉素G、庆大霉素、红霉素和四环素的耐药基因mecA、aac(6')/aph(2″)、erm和tetM的携带情况.结果表明,奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药情况严重,耐药表型和耐药基因型的符合率较高.70株金黄色葡萄球菌主要对青霉素G、庆大霉素、红霉素和四环素耐药,表型耐药率分别为90.0%、67.1%、50.0%和60.0%,耐药基因mecA、aac(6')/aph(2″)、erm和tetM的检出率分别是92.9%、77.1%、48.6%和61.4%,耐药表型与耐药基因型的符合率分别为97.1%、70.0%、87.1%和81.4%. 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 药敏性 PCR 耐药基因
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猪链球菌检测方法的研究进展 被引量：5
10
作者 夏小静 沈志强 +2 位作者 姜世金 李书光 王金良 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期169-172,共4页
猪链球菌是一种重要的人畜共患病病原,对猪链球菌进行快速而特异性地检测,具有重要的流行病学意义和临床应用价值。文章分别对猪链球菌免疫学检测方法与分子生物学检测方法进行了阐述,并对未来的研究方向进行了展望。
关键词 猪链球菌 免疫学检测方法 分子生物学检测方法 展望
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内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病菌分离鉴定及耐药性试验 被引量：10
11
作者 赵红霞 王晓凯 +7 位作者 宋晨 郭文瑞 郝普国 郭宇 吕向聪 麻海澜 周伟光 樊宏亮 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第5期58-63,共6页
为明确引起内蒙古地区奶牛子宫内膜炎的致病菌种类及其耐药性,本试验从内蒙古呼和浩特周边奶牛场采集了260份临床型子宫内膜炎病料,继而开展病原菌的分离和鉴定,并用微量稀释法对4种主要分离菌进行药物敏感性试验。病原菌分离鉴定结果显... 为明确引起内蒙古地区奶牛子宫内膜炎的致病菌种类及其耐药性,本试验从内蒙古呼和浩特周边奶牛场采集了260份临床型子宫内膜炎病料,继而开展病原菌的分离和鉴定,并用微量稀释法对4种主要分离菌进行药物敏感性试验。病原菌分离鉴定结果显示,从260份临床型子宫内膜炎病料中共获得284株菌株,其中大肠杆菌126株(48.5%)、链球菌84株(32.3%)、金黄色葡萄球菌53株(20.4%)、沙门菌21株(8.1%)。抗菌药物敏感性试验结果显示,大肠杆菌对磺胺类、苄胺嘧啶类耐药率达98%以上,对头孢噻呋的耐药率为13.7%;链球菌对β-内酰胺类、四环素、卡那霉素的耐药率在80%以上,对万古霉素的耐药率为26.7%;金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类药物的耐药率介于60%~85%,对庆大霉素及3种组合药物的耐药率介于7.5%~13.2%,对万古霉素完全敏感;沙门菌对β-内酰胺类药物、庆大霉素、四环素类的土霉素和多西环素的耐药率介于75%~90%,对头孢噻肟较为敏感,耐药率为29%,对氨基糖苷类的妥布霉素和阿米卡星耐药率低于10%;4种分离菌对氟喹诺酮类药物敏感,耐药率均低于35%。由此可见,内蒙古呼和浩特地区奶牛子宫内膜炎的致病菌包括大肠杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌和沙门菌,氟喹诺酮类药物是治疗该地区奶牛子宫内膜炎的首选药物。 展开更多
关键词 奶牛 子宫内膜炎 致病菌 耐药性
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金黄色葡萄球菌基因分型方法研究进展 被引量：10
12
作者 倪春霞 蒲万霞 +2 位作者 胡永浩 王玲 邓海平 《中国动物检疫》 CAS 2009年第10期64-68,共5页
金黄色葡萄球菌是引起医院和社区感染的重要致病菌之一,也是引起奶牛乳房炎的重要致病菌。为有效控制其感染及流行,并为临床采取控制措施提供理论依据,需要对菌株进行分型。本文就金黄色葡萄球菌的基因分型方法研究进展作一综述。
关键词 金黄色葡萄球菌 基因分型 奶牛乳房炎
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牦牛源肠球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量：5
13
作者 徐凤 张焕容 +2 位作者 梁华 诸明欣 汤承 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1203-1210,共8页
试验结合革兰氏染色及16S rRNA分子鉴定,对分离自红原县的17份牦牛粪便样中的肠球菌进行鉴定。结果显示,通过细菌分离纯化及PCR扩增,从牦牛粪便样品中分离出8株疑似肠球菌,分离菌的扩增产物经凝胶电泳后均产生1 500bp特异性条带。16SrRN... 试验结合革兰氏染色及16S rRNA分子鉴定,对分离自红原县的17份牦牛粪便样中的肠球菌进行鉴定。结果显示,通过细菌分离纯化及PCR扩增,从牦牛粪便样品中分离出8株疑似肠球菌,分离菌的扩增产物经凝胶电泳后均产生1 500bp特异性条带。16SrRNA测序结果显示,8株疑似肠球菌中,6株为粪肠球菌,2株为屎肠球菌。同源性比对分析显示,粪肠球菌与参考序列同源性为99.7%~100.0%,屎肠球菌与参考序列同源性为98.2%~99.2%,说明牦牛源肠球菌在遗传进化过程中高度保守。运用K-B纸片法进行药敏试验,结果显示,分离株对氨基糖苷类抗生素耐受性较高,2株屎肠球菌中,11-1-2菌株表现为5重耐药,且该菌株耐万古霉素,粪肠球菌主要表现为3重耐药,药敏结果提示牦牛源肠球菌耐药较严重,应引起高度重视。 展开更多
关键词 牦牛 肠球菌 分离鉴定 药敏试验
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β-内酰胺类药物对临床分离猪链球菌2型的体外抗菌活性 被引量：3
14
作者 李乾学 郭建顺 +3 位作者 张锦霞 张作新 吴永魁 夏志平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期95-97,102,共4页
采用微量稀释法测定了32种药物对临床分离猪链球菌的体外最小抑菌浓度（MIC），以美国临床检验标准委员会（NCCLS）的临界浓度做为判断标准，判定了猪链球菌2型对10种β-内酰胺类药物的耐药性。结果表明，临床分离的菌株以耐药菌为主，... 采用微量稀释法测定了32种药物对临床分离猪链球菌的体外最小抑菌浓度（MIC），以美国临床检验标准委员会（NCCLS）的临界浓度做为判断标准，判定了猪链球菌2型对10种β-内酰胺类药物的耐药性。结果表明，临床分离的菌株以耐药菌为主，头孢他定（CTD）、头抱噻吩（CFT）、头抱曲松（CRX）、阿莫西林／舒巴坦钠（AMO／SUL）对猪链球菌2型的耐药率最高，达100%；其次为青霉素G（PEN）、苯唑西林（OCL）、哌拉西林钠（PPC），达90％以上，只有头孢噻肟（CTX）有微弱的抗菌活性，其耐药率也达82．6%。MIC50 0．5～32mg／L，MIC90 2～256mg／L。猪链球菌2型对辟内酰胺类药物耐药性已十分严重，应引起足够重视。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 Β-内酰胺类药物 耐药性
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金黄色葡萄球菌感染野兔的诊治 被引量：3
15
作者 何光志 田维毅 +6 位作者 王平 王文佳 韩洁 熊文康 张太华 罗成松 崔小东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第10期121-123,共3页
为了探讨野兔死亡原因,试验无菌采取病死野兔的心脏、肝脏、肺脏、脾脏及肾脏等组织病料进行细菌的分离培养、生化和PCR鉴定,并根据临床症状、剖检变化以及实验室检验进行诊断。结果表明:野兔发病为葡萄球菌感染所致。
关键词 野兔 金黄色葡萄球菌 分离 鉴定 药敏试验
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双重PCR方法检测沙门氏菌和空肠弯曲菌 被引量：2
16
作者 陈诺 唐善虎 +3 位作者 陈进会 岑璐伽 李雪 龙虎 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第22期403-406,共4页
为建立能够同时检测食品中沙门氏菌和空肠弯曲菌的双重PCR方法。采用沙门氏菌鞭毛基因fimY和空肠弯曲菌马尿酸酶基因hipO设计特异性引物,并对影响PCR扩增的主要因素——引物浓度、退火温度、Mg2+浓度因素进行优化,比较单一PCR和双重PCR... 为建立能够同时检测食品中沙门氏菌和空肠弯曲菌的双重PCR方法。采用沙门氏菌鞭毛基因fimY和空肠弯曲菌马尿酸酶基因hipO设计特异性引物,并对影响PCR扩增的主要因素——引物浓度、退火温度、Mg2+浓度因素进行优化,比较单一PCR和双重PCR的检测效果。结果表明:采用单一PCR法检测沙门氏菌和空肠弯曲菌时,灵敏度分别可达到3.98pg和4.05pg;而采用双重PCR检测时,灵敏度较单一PCR法有所下降,沙门氏菌和空肠弯曲菌检出限量分别为398pg和40.5pg。本研究建立的特异性强和灵敏度高的双重PCR检测方法,可为实现食品中沙门氏菌和空肠弯曲菌的同时检测提供新方法。 展开更多
关键词 沙门氏菌 空肠弯曲菌 双重PCR 检测
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粪肠球菌生物膜的形成及影响因素 被引量：9
17
作者 李静 马勋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期523-526,共4页
本试验研究了不同的培养时间、培养温度、生物膜引导材料和葡萄糖浓度对生物膜形成的影响,发现培养时间为36h,培养温度为37℃,生物膜引导材料为乳胶时生物膜内活菌数最多。在不影响细菌活力的条件下,糖浓度越高,生物膜内活菌数越多;刚果... 本试验研究了不同的培养时间、培养温度、生物膜引导材料和葡萄糖浓度对生物膜形成的影响,发现培养时间为36h,培养温度为37℃,生物膜引导材料为乳胶时生物膜内活菌数最多。在不影响细菌活力的条件下,糖浓度越高,生物膜内活菌数越多;刚果红-阿利新兰对不同培养时间的生物膜染色后,用高倍镜对其形成过程进行动态观察,发现8h时出现少量的细菌黏附;24h时开始形成一些微菌落;36h时开始大量黏附形成明显的微菌落;72h时膜细胞脱落,微菌落开始减少;通过光密度测定法测定生物膜形成过程中胞外多糖的含量,证实其分泌量与生物膜内细菌增长周期时间一致。研究探讨了细菌粘附和细菌生物膜的形成机理,为阻断细菌生物膜形成提供实验依据。 展开更多
关键词 粪肠球菌 生物膜 影响因素
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不同途径免疫小鼠重组乳酸乳球菌诱导的黏膜及系统免疫应答分析 被引量：3
18
作者 王振华 王迪 +2 位作者 刘平 宋禾 曾宪垠 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期38-41,共4页
重组乳酸乳球菌分别经鼻腔和口腔免疫小鼠后,免疫后的测定时间内鼻腔免疫方法刺激呼吸道和肠道产生s-Ig A水平高于口服免疫方法,且肺泡冲洗液中s-Ig A水平差异极显著(P>0.01),肠道黏膜s-Ig A水平无显著差异(P>0.05);血清中Ig G抗... 重组乳酸乳球菌分别经鼻腔和口腔免疫小鼠后,免疫后的测定时间内鼻腔免疫方法刺激呼吸道和肠道产生s-Ig A水平高于口服免疫方法,且肺泡冲洗液中s-Ig A水平差异极显著(P>0.01),肠道黏膜s-Ig A水平无显著差异(P>0.05);血清中Ig G抗体水平两种免疫方法均无显著差异(P>0.05),但鼻腔免疫组抗体水平在最后一次免疫后7 d达到最高,在整个测定时间内维持在高水平,口服免疫组抗体水平在最后一次免疫后21 d达到最高水平,然后迅速下降;h1型细胞因子IL-2和IFN-γ水平滴鼻免疫组高于口服免疫试验组,差异不显著(P>0.05),Th2型细胞因子IL-4水平在各组之间差异不显著(P>0.05)。结果表明,重组乳酸乳球菌分别经鼻腔及口腔免疫小鼠后,能诱导机体产生黏膜免疫系统的体液免疫及Th1型细胞免疫反应,且滴鼻免疫方法优于口服免疫方法,为传染病的预防控制提供了新的免疫策略。 展开更多
关键词 重组乳酸乳球菌 鼻腔免疫 口服免疫
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生猪猪衣原体感染的PCR诊断 被引量：3
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作者 李润成 马攀 李淼 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期47-48,共2页
衣原体是介于细菌和病毒之间的一种微生物,猪衣原体可引起生猪结膜炎、肠炎和肺炎。2015年4月湖南省益阳某规模猪场,约40%的120-160日龄育肥猪出现眼结膜发红、流泪等症状,笔者采用PCR方法检测了6份鼻拭子和2份眼睛分泌物拭子,并进行了... 衣原体是介于细菌和病毒之间的一种微生物,猪衣原体可引起生猪结膜炎、肠炎和肺炎。2015年4月湖南省益阳某规模猪场,约40%的120-160日龄育肥猪出现眼结膜发红、流泪等症状,笔者采用PCR方法检测了6份鼻拭子和2份眼睛分泌物拭子,并进行了药物防治,报告如下。 展开更多
关键词 衣原体感染 PCR诊断 生猪 PCR方法 猪衣原体 规模猪场 药物防治 微生物
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猪肺炎双球菌荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：2
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作者 林甦 朱春华 +2 位作者 林秋敏 陈螺眉 唐锦辉 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第7期295-299,共5页
猪肺炎双球菌能导致仔猪发生败血症和肺炎等,是一种重要的人兽共患病原菌。该研究运用实时荧光定量PCR新技术,针对肺炎双球菌(S.pn)的16S rRNA基因设计特异性引物,建立了一种快速准确诊断S.pn的荧光定量PCR方法。通过重复性、特异性和... 猪肺炎双球菌能导致仔猪发生败血症和肺炎等,是一种重要的人兽共患病原菌。该研究运用实时荧光定量PCR新技术,针对肺炎双球菌(S.pn)的16S rRNA基因设计特异性引物,建立了一种快速准确诊断S.pn的荧光定量PCR方法。通过重复性、特异性和灵敏度等验证表明,该方法适用于S.pn的临床检测,为由S.pn引起的猪肺炎等疾病的快速诊断及采取相应的治疗措施提供了重要的技术支撑。 展开更多
关键词 猪肺炎双球菌 荧光定量PCR 16S RRNA基因
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