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细胞焦亡及其调控动物病毒感染的研究进展
1
作者 范秋雨 高鹏 +6 位作者 周琼琼 周磊 盖新娜 韩军 郭鑫 张永宁 杨汉春 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第1期85-96,共12页
细胞焦亡(Pyroptosis)是一种由消皮素(GSDMs)家族蛋白介导的程序性细胞死亡方式,其典型特征为GSDMs家族蛋白(除GSDMF外)的N端(NT)结构域在细胞膜上形成孔道,导致细胞渗透压失衡、细胞膜完整性丧失和促炎因子释放,在宿主抗病毒免疫应答... 细胞焦亡(Pyroptosis)是一种由消皮素(GSDMs)家族蛋白介导的程序性细胞死亡方式,其典型特征为GSDMs家族蛋白(除GSDMF外)的N端(NT)结构域在细胞膜上形成孔道,导致细胞渗透压失衡、细胞膜完整性丧失和促炎因子释放,在宿主抗病毒免疫应答中扮演着“双刃剑”角色。本文系统综述了细胞焦亡、细胞焦亡效应分子、细胞焦亡的生物标志和检测方法、细胞焦亡调控动物病毒感染的研究进展、开展细胞焦亡调控动物病毒感染科学研究的意义;重点阐述了动物源性病毒(如非洲猪瘟病毒、猪肠道冠状病毒、塞内卡病毒A、口蹄疫病毒和狂犬病病毒)在调控宿主细胞焦亡领域的研究进展:一方面病毒通过抑制焦亡以逃逸宿主防御,促进病毒复制;另一方面病毒通过激活焦亡诱导炎症反应,加剧组织损伤。这些研究进展不仅深化了对病毒-宿主相互作用分子机制的认识,更为抗病毒治疗领域提供了多重干预靶点。此外,本文还前瞻性地探讨了靶向调控细胞焦亡通路在抗病毒药物设计、新型疫苗佐剂开发和炎症风暴控制中的应用前景,旨在为病毒性传染病的综合防控提供新的理论支撑和策略思路。 展开更多
关键词 细胞焦亡 消皮素(GSDMs) 病毒感染 炎症 免疫逃逸 抗病毒策略
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云南地区血清7型猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及生物学特性分析
2
作者 李富祥 宋建领 李占鸿 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期499-508,共10页
【目的】研究云南地区猪源胸膜肺炎放线杆菌的生物学特性。【方法】从云南红河州某猪场患呼吸道疾病猪肺脏中分离细菌,采用生化试验、16S rDNA序列分析和PCR扩增鉴定分离菌,并分析分离菌的血清型、致病性、药物敏感性和耐药基因等生物... 【目的】研究云南地区猪源胸膜肺炎放线杆菌的生物学特性。【方法】从云南红河州某猪场患呼吸道疾病猪肺脏中分离细菌,采用生化试验、16S rDNA序列分析和PCR扩增鉴定分离菌,并分析分离菌的血清型、致病性、药物敏感性和耐药基因等生物学特性。【结果】从病猪肺脏样品中分离到1株革兰阴性小球杆菌,将其编号为YN240724。生化鉴定结果显示,分离菌分解葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖和甘露醇产酸,氧化酶、尿素酶及硝酸盐还原试验呈阳性,其生化特性与胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)参考株相同。16S rDNA基因序列分析结果显示,分离菌与胸膜肺炎放线杆菌模式菌株ATCC 27088T和其他胸膜肺炎放线杆菌参考株间的16S rDNA序列相似性分别为100%和99.6%~100%;分离菌株与全部胸膜肺炎放线杆菌参考株形成同一个进化分支;基于上述特征分离菌YN24074被鉴定为胸膜肺炎放线杆菌。血清型鉴定结果显示,该分离菌为胸膜肺炎放线杆菌血清7型。耐药基因检测结果显示,分离菌携带β-内酰胺内耐药基因blaCIT和blaTEM以及四环素类耐药基因tetM。药敏试验结果显示,分离菌对氨基糖苷类(庆大霉素和阿米卡星)、喹诺酮类(氧氟沙星)、酰胺醇类(氟苯尼考)、四环素类(四环素)、磺胺类(磺胺甲噁唑)以及头孢类(头孢噻肟和头孢呋辛)敏感,对青霉素类(青霉素、氨苄西林和哌拉西林)以及糖肽类(万古霉素)耐药。致病性试验结果显示,分离菌对小鼠的半数致死量(LD_(50))为7.5×10^(4)CFU,致病性较强。【结论】本研究从云南地区分离获得1株猪源血清7型胸膜肺炎放线杆菌,其携带耐药基因blaCIT、blaTEM及tetM,对多种抗菌药物表现耐药,致病性较强。试验结果可为云南地区猪场猪传染性胸膜肺炎的治疗和免疫防控提供重要参考。 展开更多
关键词 猪 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 血清型 致病性
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三种中草药提取物对鸡皮刺螨的杀灭效果研究 被引量：1
3
作者 冉崇儒 张思宇 +4 位作者 杨子木 秦建华 左玉柱 王传文 王路 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期155-160,共6页
为筛选出有效、低毒杀灭鸡皮刺螨的植物源药物,试验评估了荆芥、辛夷、紫苏3种中草药的乙醇和蒸馏水提取物对鸡皮刺螨的杀灭效果。试验采用浸渍触杀法,检测0.25 g/mL、0.5 g/mL、1 g/mL的3种中草药提取物在30、60、120、180 min的杀螨... 为筛选出有效、低毒杀灭鸡皮刺螨的植物源药物,试验评估了荆芥、辛夷、紫苏3种中草药的乙醇和蒸馏水提取物对鸡皮刺螨的杀灭效果。试验采用浸渍触杀法,检测0.25 g/mL、0.5 g/mL、1 g/mL的3种中草药提取物在30、60、120、180 min的杀螨率。结果显示:在乙醇提取物中,浓度为0.25 g/mL时,荆芥和辛夷180 min杀螨率分别为66.68%和53.57%,极显著高于紫苏(P<0.01);在0.5 g/mL时,荆芥180 min杀螨率极显著高于紫苏(P<0.01);在1 g/mL时,荆芥30 min杀螨率极显著高于辛夷和紫苏(P<0.01),在120 min时各处理组的杀螨率达到100%。在蒸馏水提取物中,浓度为0.25 g/mL时,各处理组30~180 min杀螨率均低于60%;在0.5 g/mL时,荆芥60 min和180 min的杀螨率均极显著高于紫苏(P<0.01);在1 g/mL时,荆芥30 min、60 min杀螨率均极显著高于辛夷和紫苏(P<0.01),并在120 min达到100%。荆芥和辛夷的蒸馏水提取物在120 min显著低于其乙醇提取物(P<0.05)。研究表明:荆芥、辛夷、紫苏均具有杀螨活性,荆芥是3种中草药中最有效的杀螨药物,其乙醇提取物在0.5 g/mL浓度下即可达到较好杀螨效果。 展开更多
关键词 鸡皮刺螨 中草药 杀虫剂 杀螨活性
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动物病原微生物宏基因组高通量测序技术规范专家共识
4
作者 中国兽医协会兽医实验室检测分会 田克恭 原霖 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第1期8-12,共5页
宏基因组高通量测序(mNGS)技术作为一项新兴的、通用的微生物检测方法,可以识别所有微生物,在动物病原微生物临床检测中发挥了重要作用,被广泛应用于动物多病原检测、未知病原诊断、疫病流行病学调查、病原溯源等多种场景。但在兽医检... 宏基因组高通量测序(mNGS)技术作为一项新兴的、通用的微生物检测方法,可以识别所有微生物,在动物病原微生物临床检测中发挥了重要作用,被广泛应用于动物多病原检测、未知病原诊断、疫病流行病学调查、病原溯源等多种场景。但在兽医检测行业,mNGS技术尚未形成一致性、规范性认识。本文从实验室建设及管理、实验操作、生物信息学分析、结果判定、质量控制、报告审核等方面阐述了mNGS技术在动物病原微生物临床检测中应用的专家共识,并提出规范性要求和建议。 展开更多
关键词 宏基因组高通量测序(mNGS) 动物病原微生物 专家共识
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牛传染性鼻气管炎病毒的研究进展
5
作者 周明 孙芬 +4 位作者 张亮 陈九 杨少华 闫滨 杨宏军 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期44-50,共7页
牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)是一种包膜DNA病毒,属于疱疹病毒科γ亚群,是牛的一种重要病原体。该病毒主要引起呼吸道症状,并伴有结膜炎、乳腺炎等多系统病变,对全球养牛业造成了严重的经济损... 牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)是一种包膜DNA病毒,属于疱疹病毒科γ亚群,是牛的一种重要病原体。该病毒主要引起呼吸道症状,并伴有结膜炎、乳腺炎等多系统病变,对全球养牛业造成了严重的经济损失。目前IBRV在国内广泛流行,因尚无特效治疗药物,疫苗接种是其主要的防控措施。本文结合了近年来关于IBRV在病原学、流行病学、检测技术及防控措施方面的研究进展,旨在深入了解该病的致病机制、传播规律及防控策略,为制定更为科学合理的防控方案提供理论依据和实践参考。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎病毒 病原学 流行病学 检测技术 防控措施
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腐败梭菌α毒素单克隆抗体的制备及竞争ELISA方法的建立
6
作者 马祎芳 赵佳慧 +4 位作者 马清龙 高鹏程 曾巧英 李学瑞 储岳峰 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期31-39,共9页
为方便临床上检测腐败梭菌血清样本,以及评价腐败梭菌疫苗对动物的免疫效果,本试验利用大肠杆菌表达系统诱导α毒素重组蛋白的表达,经纯化后免疫BALB/c小鼠,制备α毒素单克隆抗体。以筛选的单抗为捕获抗体,通过棋盘滴定法优化反应条件,... 为方便临床上检测腐败梭菌血清样本,以及评价腐败梭菌疫苗对动物的免疫效果,本试验利用大肠杆菌表达系统诱导α毒素重组蛋白的表达,经纯化后免疫BALB/c小鼠,制备α毒素单克隆抗体。以筛选的单抗为捕获抗体,通过棋盘滴定法优化反应条件,建立腐败梭菌α毒素抗体的竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,利用该方法检测绵羊血清样本的阴阳性临界值,并评估其重复性、灵敏度、特异性和符合率,同时检测牛血清样本的阴阳性临界值。结果显示,成功诱导表达和纯化出约65 kDa的目的蛋白;通过杂交瘤技术筛选获得1株稳定分泌特异性抗体的单抗8H2;竞争ELISA最佳抗原包被条件为300 ng/孔、16 h,血清稀释度为1∶1,单抗稀释度为1∶2000,封闭条件为1%牛血清白蛋白(BSA)、90 min,血清和单抗竞争时间为90 min,二抗稀释度为1∶15000、孵育30 min,显色时间为15 min;该方法检测绵羊血清样本的阳性临界值为27.19%,阴性临界值为22.59%;批间和批内变异系数均低于10%,重复性良好;标准阳性血清稀释度为1∶16时仍为阳性;与产气荚膜梭菌、布鲁氏菌和鼠伤寒沙门菌均无交叉反应,特异性良好;利用该方法检测100份绵羊血清样本,与间接ELISA的检测总符合率为89.00%(89/100);检测牛血清样本的阳性临界值为20.00%,阴性临界值为16.30%。本试验成功制备了1株腐败梭菌α毒素特异性单抗,并构建了抗体竞争ELISA检测方法,为腐败梭菌病的早期诊断和疫苗免疫效果评价提供了技术支撑。 展开更多
关键词 腐败梭菌 Α毒素 单克隆抗体 竞争ELISA
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荧光定量PCR检测珍珠鸡Tva与ALV-A gp85基因方法的建立及应用
7
作者 宁宇航 李喜月 +7 位作者 王扬扬 马晨曦 李鑫鹏 荣晴 何雷 余祖华 丁轲 陈建 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期70-78,共9页
研究旨在探讨体内水平下珍珠鸡各组织器官中A亚群禽白血病病毒(ALV-A)组织载量与维生素_(B12)(V_(B12))的含量、Tva基因转录水平之间的关系。试验通过建立检测珍珠鸡ALV-A gp85和Tva基因的荧光定量PCR方法,定量感染ALV-A的珍珠鸡不同组... 研究旨在探讨体内水平下珍珠鸡各组织器官中A亚群禽白血病病毒(ALV-A)组织载量与维生素_(B12)(V_(B12))的含量、Tva基因转录水平之间的关系。试验通过建立检测珍珠鸡ALV-A gp85和Tva基因的荧光定量PCR方法,定量感染ALV-A的珍珠鸡不同组织中ALV-A gp85基因和Tva基因表达水平,并通过ELISA测定珍珠鸡组织中V_(B12)浓度,分析ALV-A gp85表达水平与V_(B12)组织含量和Tva基因表达水平之间的关系。结果显示:研究建立的珍珠鸡Tva基因荧光定量PCR方法灵敏度较常规PCR提升1个数量级(10倍),ALV-A gp85基因检测灵敏度提高2个数量级(100倍),仅靶基因出现特异性扩增且批内及批间变异系数均小于2%,血浆样本ALV-A阳性检出率明显高于PCR和ELISA方法,具有良好的灵敏度、特异性和稳定性。皮尔逊相关性分析显示,珍珠鸡组织器官中V_(B12)浓度与ALV-A gp85转录水平均呈负相关,而ALV-A gp85与Tva基因转录水平整体上符合正相关关系,推测V_(B12)可能通过占据Tva受体干扰ALV-A感染宿主细胞。研究表明,试验成功建立一种定量检测珍珠鸡ALV-A gp85基因和Tva基因的方法,并确定珍珠鸡中V_(B12)组织含量与ALV-A组织载量以及Tva基因表达水平之间的关系,为禽白血病的防控奠定基础。 展开更多
关键词 A亚群禽白血病病毒 TVA gp85 QRT-PCR 珍珠鸡 维生素B_(12)
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鸡滑液囊支原体的分离鉴定及全基因组特征分析
8
作者 李琪 方焕新 +5 位作者 胡俊 温家明 顾嘉运 王占新 覃健萍 蔺文成 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期79-88,共10页
研究旨在解析鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)全基因组特征及其功能。试验对广东地区疑似感染MS的鸡进行病原分离,对病原进行致病性试验和药物敏感性试验,并进一步解析其基因组特征。结果显示:成功分离一株MS,命名为H12株;肌肉... 研究旨在解析鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)全基因组特征及其功能。试验对广东地区疑似感染MS的鸡进行病原分离,对病原进行致病性试验和药物敏感性试验,并进一步解析其基因组特征。结果显示:成功分离一株MS,命名为H12株;肌肉攻毒10~8 CCU/mL H12株能引起30日龄SPF鸡跛行、肿腿的临床症状;H12株对截短侧耳素类药物高度敏感,但对四环素类耐药性强;H12株基因组存在多个毒力因子,有助于MS感染宿主,其携带CRISPR-Cas系统及高保守DNA修复基因(如recA),表明其对不同环境具有适应潜力;在KEGG、COG、GO数据库分别注释到381、1 410、48个基因;多位点序列分型(MLST)为ST34,与我国主要流行株遗传谱系一致。研究表明,分离株H12属于国内主要流行的ST34型,携带CRISPR-Cas系统、多个毒力因子(adh、ef-tu、pdhb等)及耐药基因(parC、gyrB),具备较强环境适应性与致病性,并对四环素类耐药。 展开更多
关键词 鸡滑液囊支原体 全基因组测序 微量稀释法 MLST分型 毒力因子
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黑龙江省猪流行性腹泻病毒流行毒株分离鉴定与遗传进化分析
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作者 张欣欣 张岳 +6 位作者 崔安 李金儒 张芸菁 何丽霞 杨桂君 任玉东 李广兴 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期378-389,共12页
【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研... 【目的】通过对黑龙江省猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)毒株进行分离鉴定,基于PEDV分离株S、ORF3基因序列进行遗传进化分析,丰富现有PEDV材料,为猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)的防治及疫苗研发提供参考依据。【方法】采集养猪场疑似猪流行性腹泻病料,利用Vero-E6细胞进行适应性培养获得病毒,并通过RT-PCR和间接免疫荧光试验(IFA)对毒株进行分离鉴定。通过PCR分别扩增PEDV分离毒株的S1、S2和ORF3基因,构建重组质粒并测序鉴定,获得PEDV分离株的S、ORF3基因序列。将分离株与26株参考毒株的S和ORF3基因序列进行核苷酸序列相似性比对和遗传进化分析,确定分离毒株的所属亚群。【结果】在Vero-E6细胞上培养分离的PEDV毒株,感染细胞出现变形圆缩、折光性降低,细胞发生融合,后期细胞脱落出现空斑等典型细胞病变;RT-PCR和IFA检测显示,扩增均出现片段大小约600 bp的特异性条带,分离株感染细胞后均可与PEDV N蛋白单克隆抗体发生特异性反应,表明分离的3株病毒株均为PEDV,分别命名为HLJ、HLJ2020和HLJ2021株。成功构建PEDV各分离株的S1、S2和ORF3基因重组质粒并测序获得相应基因序列。核苷酸序列相似性比对与遗传进化树分析结果显示,PEDV HLJ与HLJ2020株为GⅠb亚群毒株,PEDV HLJ2021株归入GⅡc亚群。【结论】本研究从黑龙江地区腹泻猪小肠组织中成功分离获得3株PEDV流行毒株,其中分离毒株PEDV HLJ与PEDV HLJ2020属于GⅠb亚群,PEDV HLJ2021株属于GⅡc亚群。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 分离鉴定 S基因 ORF3基因 遗传进化分析
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鸡皮刺螨生殖特性研究进展
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作者 刘勃兴 郭旭东 +2 位作者 孙玮玮 张迪 潘保良 《中国家禽》 北大核心 2026年第2期112-119,共8页
鸡皮刺螨(Dermanyssus gallinae),作为全球养鸡业重要的吸血性外寄生虫,以禽类血液为食的生物学特性不仅导致鸡不安、贫血、生产性能下降,还作为传播病原生物的媒介,给养殖场造成重大经济损失。作为一种繁殖能力很强的节肢动物,鸡皮刺... 鸡皮刺螨(Dermanyssus gallinae),作为全球养鸡业重要的吸血性外寄生虫,以禽类血液为食的生物学特性不仅导致鸡不安、贫血、生产性能下降,还作为传播病原生物的媒介,给养殖场造成重大经济损失。作为一种繁殖能力很强的节肢动物,鸡皮刺螨的种群扩散与其生殖特性密切相关,如雌螨单次受精终身产卵、高效的繁殖力,但当前关于其生殖特性的了解有限。文章通过对鸡皮刺螨的繁殖方式、性别二态性、生殖系统、交配行为、生殖力和生殖相关基因等进行综述,为研发新型防控手段提供理论基础,对降低化学杀虫试剂依赖、实现生态友好型防控具有重要意义,从而促进养鸡业的健康发展。 展开更多
关键词 鸡皮刺螨 生殖特性 生殖力 防控
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重组牛冠状病毒N蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
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作者 郝良玉 郭衍冰 +8 位作者 王楠 孙兴忠 项钰 王改丽 崔鹤馨 姜乐凡 张天宇 宋建臣 曹利利 《中国草食动物科学》 北大核心 2026年第1期65-71,共7页
为更好利用昆虫杆状病毒表达系统对牛冠状病毒(BcoV)的主要结构蛋白N蛋白进行表达,本研究采用BCoV-N基因为目标设计特异性引物进行PCR扩增,通过无缝克隆技术将其插入昆虫杆状病毒系统转移载体pFastBacHT B,并构建pFastBacHT B-BCoV-N重... 为更好利用昆虫杆状病毒表达系统对牛冠状病毒(BcoV)的主要结构蛋白N蛋白进行表达,本研究采用BCoV-N基因为目标设计特异性引物进行PCR扩增,通过无缝克隆技术将其插入昆虫杆状病毒系统转移载体pFastBacHT B,并构建pFastBacHT B-BCoV-N重组质粒。随即转化至DH10Bac大肠杆菌,经过蓝白斑筛选后提取阳性重组杆粒Bacmid-BCoV-N,转染至Sf9昆虫细胞产生杆状病毒并进行传代。结果表明,经双酶切、PCR验证,重组质粒与重组杆粒均构建成功,重组杆粒Bacmid-BCoV-N转染Sf9昆虫细胞并连续盲传5代后获得重组杆状病毒Bacmid-BCoV-N,成功表达纯化出BCoV-N蛋白,经SDS-PAGE及Western blot鉴定,其分子量大小约为55 kDa,具有良好的特异性。将50μg重组蛋白与弗氏完全佐剂充分混匀乳化后免疫小鼠,间接ELISA试验结果显示免疫小鼠产生了特异性抗体。综上所述,本研究构建的昆虫杆状病毒表达系统能够高水平地表达外源基因,可以满足后续建立免疫学抗体诊断检测技术的需要。 展开更多
关键词 牛冠状病毒(BCoV) 核衣壳蛋白(N蛋白) 昆虫杆状病毒表达系统
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鼻疽菌素生产用菌株的鉴定
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作者 彭明媛 张柳青 +2 位作者 辛凌翔 任小侠 徐磊 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期115-121,共7页
马鼻疽是一种高度传染且危害较大的人兽共患病,可感染马、驴、骡等多种经济动物。作为马鼻疽诊断试剂,鼻疽菌素的效力受菌株影响很大。本研究对鼻疽伯氏菌CVCC67001、CVCC67002、CVCC67003株开展了培养特性、脂多糖(LPS)表型鉴定、测序... 马鼻疽是一种高度传染且危害较大的人兽共患病,可感染马、驴、骡等多种经济动物。作为马鼻疽诊断试剂,鼻疽菌素的效力受菌株影响很大。本研究对鼻疽伯氏菌CVCC67001、CVCC67002、CVCC67003株开展了培养特性、脂多糖(LPS)表型鉴定、测序与遗传进化分析、毒力测定和鼻疽菌素免疫原性等研究。结果:3株菌穿刺培养不具有运动性,可与类鼻疽伯氏菌相鉴别;LPS表型鉴定为光滑型革兰阴性菌;基因组大小为5.76~5.84 Mb,与类鼻疽伯氏菌基因组大小差异显著;将3株菌与NCBI数据库28株鼻疽伯氏菌进行遗传进化树分析,结果3株菌均在L3分支上;通过脾脏形态及脾重测量、病理组织学观察和脾脏分菌测定,发现CVCC67003株毒力最弱,CVCC67001和CVCC67002株毒力相对较强;将3株菌分别制备鼻疽菌素并用马进行效力和特异性测定,皮试试验结果显示,CVCC67001和CVCC67002株具有与标准品同等和高于标准品的效力,后续可选择该2株菌用于鼻疽菌素的制备研究。本研究结果为马鼻疽的检疫提供了技术支撑。 展开更多
关键词 马鼻疽 菌种鉴定 鼻疽菌素
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新疆部分地区马红球菌的分离鉴定、生物学特征及耐药性分析
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作者 段兴勋 刘璐 +4 位作者 高仕文 马玉辉 顾伟芳 余万里 赵红琼 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期108-115,共8页
为了探究新疆地区马红球菌的生物学特征及耐药性情况,试验采集伊犁哈萨克自治州、巴音郭楞蒙古自治州和乌鲁木齐县的9个养殖场(1个驴场和8个马场)马属动物鼻/肛拭子、肺脏脓汁及环境土壤样本共725份,利用选择性培养基对样本中的疑似马... 为了探究新疆地区马红球菌的生物学特征及耐药性情况,试验采集伊犁哈萨克自治州、巴音郭楞蒙古自治州和乌鲁木齐县的9个养殖场(1个驴场和8个马场)马属动物鼻/肛拭子、肺脏脓汁及环境土壤样本共725份,利用选择性培养基对样本中的疑似马红球菌进行分离培养,并对分离菌株进行菌落形态观察、革兰氏染色、生化鉴定、特异性基因(ChoE和VapA)的PCR检测、16S rDNA基因的PCR扩增与序列分析及耐药性分析。结果表明:经分离培养,共获得20株疑似马红球菌,分别命名为R1~R20。20株分离菌株在NANAT培养基上培养48 h后形成典型灰黑色黏稠菌落,革兰氏染色、镜检可见两头钝圆的球杆状或棒状的革兰氏阳性球杆菌,与马红球菌的菌落形态特征相符;20株分离菌株均不发酵葡萄糖、麦芽糖、木糖、甘露醇,不产生靛基质,不液化明胶,可分解尿素,可产生触酶,氧化酶试验结果为阴性,均与马红球菌的生化特性相符;共有17株同时扩增出VapA基因和ChoE基因,有3株仅扩增出VapA基因,初步判定20株分离菌株均为马红球菌,其中3株为非致病性马红球菌(R12、R16、R20),其余17株为致病性马红球菌。20株分离菌株16S rDNA基因之间的核苷酸序列相似性在98.1%~100%之间,分布于系统进化树的多个分支中。20株分离菌株对氨基糖苷类药物链霉素、庆大霉素、大观霉素,β-内酰胺类药物头孢噻肟,大环内酯类药物红霉素、克拉霉素,四环素类药物四环素、多西环素,安莎霉素类药物利福平,喹诺酮类药物诺氟沙星均敏感;对β-内酰胺类药物阿莫西林、青霉素、氨苄西林,磺胺类药物复方新诺明均耐药;对氨基糖苷类药物卡那霉素与多肽类药物多黏菌素B的耐药率分别为10.0%和25.0%,敏感率均为10.0%;对酰胺醇类药物氯霉素的敏感率为95.0%。说明从新疆地区分离到了20株马红球菌,大部分菌株为致病性马红球菌,且20株分离菌株对多数抗生素敏感。 展开更多
关键词 马红球菌 细菌分离 细菌鉴定 生物学特征 遗传进化关系 耐药性
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DHAV-1、DAstV-1、DHAV-3和APMV-1四重PCR检测方法的建立及应用
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作者 李海名 吴晓燕 +3 位作者 康华裕 王旭 王一涵 张彦龙 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期94-99,共6页
为了建立一种能同时检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)和禽副黏病毒1型(APMV-1)的方法,试验根据GenBank中公布的DHAV-13A基因、DAstV-11a基因、DHAV-33a3b基因和APMV-1 F基因序列分别设计4对... 为了建立一种能同时检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)、鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)和禽副黏病毒1型(APMV-1)的方法,试验根据GenBank中公布的DHAV-13A基因、DAstV-11a基因、DHAV-33a3b基因和APMV-1 F基因序列分别设计4对特异性引物,通过优化反应条件及特异性、敏感性和重复性试验建立了四重PCR检测方法,并采用该方法对96份疑似病毒感染的鸭病料样本进行检测。结果表明:DHAV-1、DHAV-3、DAstV-1和APMV-1四重RT-PCR检测方法的最优退火温度和引物浓度分别为56℃、0.8μmol/L。该方法能同时扩增出大小为195 bp(DHAV-13A基因)、289 bp(DAstV-11a基因)、462 bp(DHAV-33a3b基因)、726 bp(APMV-1基因)的特异性片段,而与鸭瘟病毒(DPV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、鸭圆环病毒(DuCV)和鸭甲肝病毒2型(DHAV-2)无交叉反应;对DHAV-1、DAstV-1、DHAV-3和APMV-1的最低检测限分别为1.111×10~4 copies/μL、3.078×10~2 copies/μL、4.938×10~3 copies/μL、3.456×10~2 copies/μL;批间重复试验和批内重复试验的3个平行样本的结果均一致。采用该方法对96份临床样本的检测结果与参考方法的符合率为100%。说明本研究建立的针对DHAV-1、DHAV-3、DAstV-1和APMV-1四重PCR检测方法特异性强、敏感性较高、重复性好,在临床样本检测中展现出良好的应用效果。 展开更多
关键词 鸭甲肝病毒 鸭星状病毒 禽副黏病毒1型 混合感染 多重PCR检测方法 检测方法建立
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种猪场猪繁殖与呼吸综合征快速稳定和病毒清除的案例分析
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作者 蒋大良 沙垣坤 +3 位作者 魏效祺 李润成 颜运秋 龚自冶 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第1期132-140,共9页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业健康发展的主要疾病之一。针对该病,多数猪场依赖疫苗免疫和抗生素辅助治疗,但难以阻断猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪场的循环感染,猪体内病毒清除缓慢、净化困难。2024年2月,笔者针对某... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重危害养猪业健康发展的主要疾病之一。针对该病,多数猪场依赖疫苗免疫和抗生素辅助治疗,但难以阻断猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在猪场的循环感染,猪体内病毒清除缓慢、净化困难。2024年2月,笔者针对某母猪存栏2400头、类PRRSV NADC30毒株阳性不稳定的种猪场,采用《科赛安4招8步PRRSV净化方案》,于饲料中定期添加科赛安1号(天然产物复方制剂),结合病原和抗体监测、合理淘汰、强化生物安全、调整生产管理等综合防控方法进行PRRS防控和净化。结果显示,在方案实施2个月后,猪群实现了PRRSV核酸检测阴性;7个月后,基础母猪群PRRSV N蛋白抗体平均S/P值从1.09降至0.29,抗体阳性率从96.0%降至33.3%;4个月后引入497头PRRSV核酸和N蛋白抗体双阴性后备种猪,入群9个月一直维持PRRSV核酸和N蛋白抗体双阴性。与2023年相比,2024年该猪场各项生产指标得到了明显改善,年母猪流产数减少228窝(月均19窝),年保育猪淘汰率和死亡率分别降低10.3%和4.5%,后备种猪利用率提高16.9%。该案例证明,《科赛安4招8步PRRSV净化方案》可以促进PRRSV阳性不稳定猪群更快实现病情稳定和病毒清除,促进N蛋白抗体转阴,显著改善PRRSV阳性不稳定猪场的生产成绩,为规模猪场PRRS的防控和净化提供了参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 稳定 净化 维持阴性
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牛结节性皮肤病病毒ORF140依赖JUP激活Wnt信号通路影响病毒复制的研究 被引量：2
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作者 王敏 温渊 +5 位作者 曹钰莹 刘聪 李超 汤芳 戴建君 薛峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第3期103-110,共8页
旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF... 旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF077建立检测LSDV ORF077的标准曲线,检测LSDV ORF140缺失株与野毒株在不同时间点的拷贝数变化,然后通过蛋白质谱技术和免疫共沉淀技术分析140蛋白与宿主细胞内存在相互作用的蛋白,最后敲低此蛋白的基因转录水平检测宿主细胞内细胞因子转录水平的变化。结果:LSDV ORF140缺失株会引起宿主细胞β-catenin基因转录水平显著下调(P<0.000 1)且缺失株拷贝数始终比野毒株高,推测LSDV ORF140基因的存在能激活宿主细胞的Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白信号通路)信号通路,并且该通路的激活会影响LSDV的复制,宿主细胞中的连接斑珠蛋白(JUP)与LSDV 140蛋白存在相互作用,敲低宿主细胞JUP基因转录水平,发现β-catenin基因转录水平下调(P<0.05),感染LSDV后,β-catenin基因转录水平仍处于下调状态,并且检测到此时病毒拷贝数比野毒株高(P<0.05),以此推测LSDV ORF140是通过与JUP结合激活Wnt/β-catenin信号通路,从而影响LSDV的复制。综上,本研究证实LSDV 140蛋白能够与宿主细胞中的JUP蛋白结合,激活Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制LSDV的复制,为揭示LSDV与宿主之间的相互作用及LSDV的致病机制提供参考。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 连接斑珠蛋白 Wnt/β-catenin信号通路 病毒复制
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巨型艾美耳球虫与产气荚膜梭菌共感染致鸡坏死性肠炎模型的评价 被引量：1
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作者 袁橙 袁月 +5 位作者 张清正 宋小凯 徐立新 严若峰 李祥瑞 陆明敏 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4120-4128,共9页
鸡球虫感染破坏宿主肠道免疫稳态,是引起产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)介导的鸡坏死性肠炎(necrotic enteritis,NE)的主要诱因。在7种鸡球虫中,巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima,EM)最适于诱导NE。因此,本研究旨在通过对不同E... 鸡球虫感染破坏宿主肠道免疫稳态,是引起产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)介导的鸡坏死性肠炎(necrotic enteritis,NE)的主要诱因。在7种鸡球虫中,巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima,EM)最适于诱导NE。因此,本研究旨在通过对不同EM攻虫剂量的探究,建立稳定、可靠的NE实验室模型。将200只14日龄的肉鸡分为10组,分别为空白对照组、CP攻毒组、EM攻虫组(不同攻虫剂量)、EM/CP共感染组(不同攻虫剂量)。在14日龄时,使用不同剂量E.maxima孢子化卵囊攻虫。在感染后4 d使用C.perfringens攻毒,在20日龄时终止试验,剖杀鸡只,记录攻虫前、20日龄体重及存活率并进行肠道病变计分。结果显示,随着E.maxima感染剂量的增加,单一E.maxima感染组的增重逐渐减缓,但在EM/CP共感染组未见该趋势,EM/CP1组中相对增长率显著高于其余EM/CP共感染组,EM/CP2组、EM/CP3组、EM/CP4组间未见显著差异。肠道病变记分呈现与体重增长率较为相似的趋势,EM/CP1组肠道病变程度较其他EM/CP共感染组较轻,且EM/CP2组、EM/CP3组、EM/CP4组间未见显著区别。在EM/CP共感染组中,EM/CP2组的存活率为85%,而EM/CP3组和EM/CP4组存活率偏低,分别为80%和70%。综合增重情况、肠道病变、致死率三个指标进行判断,EM/CP2组的攻虫攻毒剂量(1×10^(4)卵囊·羽^(-1)+1×10^(9)CFUs·羽^(-1))最适用于E.maxima诱发NE的实验室模型的构建,该模型可为NE的致病机制研究、疫苗及药物研发等提供较好的研究工具。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 巨型艾美耳球虫 鸡坏死性肠炎 双重感染模型
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E种牛肠道病毒VP1蛋白的截短表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
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作者 崔平 刘澜 +3 位作者 李本科 白耀国 李玉坤 管宇 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期40-48,共9页
为了开展E种牛肠道病毒(BEV-E)的流行病学调查和抗体筛查,本试验采用原核表达技术对BEV-E外衣壳蛋白VP1进行体外截短表达,采用His-Tag蛋白纯化柱对VP1重组蛋白进行纯化,采用蛋白免疫印迹(WB)方法对重组蛋白进行鉴定。以纯化的VP1重组蛋... 为了开展E种牛肠道病毒(BEV-E)的流行病学调查和抗体筛查,本试验采用原核表达技术对BEV-E外衣壳蛋白VP1进行体外截短表达,采用His-Tag蛋白纯化柱对VP1重组蛋白进行纯化,采用蛋白免疫印迹(WB)方法对重组蛋白进行鉴定。以纯化的VP1重组蛋白作为包被抗原,对反应条件进行优化和确定临界值,建立了检测BEV-E抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,并进行特异性、灵敏性、重复性、符合率试验和临床样品检测。结果显示,成功表达VP1重组蛋白;间接ELISA检测方法的最佳抗原工作浓度为15.0μg/mL,最佳一抗稀释倍数为1∶80,最佳酶标二抗稀释倍数为1∶3000,最佳封闭液为10%马血清,最佳一抗、酶标二抗、封闭液工作时间分别为30、30、60 min;临界值为0.386;与牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛冠状病毒、牛轮状病毒、O型口蹄疫病毒、A型口蹄疫病毒、产肠毒素性大肠杆菌阳性血清均无交叉反应,特异性良好;BEV-E阳性血清1∶25600稀释时仍可检测出阳性,灵敏性较高;批内和批间变异系数均小于10%,重复性良好;该方法与间接免疫荧光检测方法的符合率为92.5%;临床样品检测结果显示,BEV-E抗体平均阳性率为7.88%。结果表明,本试验建立的BEV-E VP1抗体间接ELISA检测方法为开展BEV-E临床诊断和流行病学调查提供了试验依据。 展开更多
关键词 E种牛肠道病毒(BEV-E) VP1蛋白 截短表达 抗体检测 间接ELISA
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Rv1140蛋白酶在结核分枝杆菌感染中的作用研究
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作者 郭若男 姜艳艳 +10 位作者 陈春文 段祎凡 高云洁 张镇钧 冯婷婷 王慧 李梦雨 聂蝉蝉 崔莹莹 党光辉 刘思国 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期21-29,共9页
为了进一步了解Rv1140蛋白酶在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染中的功能,试验采用同源重组方法构建MTB H37Ra rv1140基因缺失菌株(ΔRv1140菌株)及MTB H37Ra rv1140基因回补菌株(ΔRv1140+Rv1140菌株),并采用PCR和Sou... 为了进一步了解Rv1140蛋白酶在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染中的功能,试验采用同源重组方法构建MTB H37Ra rv1140基因缺失菌株(ΔRv1140菌株)及MTB H37Ra rv1140基因回补菌株(ΔRv1140+Rv1140菌株),并采用PCR和Southern-blot方法进行鉴定;绘制MTB H37Ra菌株、ΔRv1140菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株的生长曲线;利用H37Ra菌株感染巨噬细胞后采用实时荧光定量PCR(q PCR)方法检测感染后rv1140转录水平;利用MTB H37Ra菌株、ΔRv1140菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株感染小鼠腹腔巨噬细胞,采用q PCR方法检测炎性细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因的转录水平及胞内定殖情况。结果表明:成功构建出ΔRv1140菌株及ΔRv1140+Rv1140菌株;Rv1140蛋白酶的缺失并不影响H37Ra的生长;与感染前相比,H37Ra菌株感染巨噬细胞第48,72小时,rv1140基因的mRNA相对表达量极显著升高(P<0.001);感染U937细胞第24,48,72小时,rv1140基因的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01、P<0.001)。与ΔRv1140菌株感染小鼠腹腔巨噬细胞相比,感染H37Ra菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株第12小时,IL-1βmRNA相对表达量极显著升高(P<0.001),第6,12小时后,H37Ra菌株和ΔRv1140+Rv1140菌株感染的IL-6和TNF-αmRNA相对表达量极显著升高(P<0.01或P<0.001)。说明Rv1140蛋白酶不仅参与调节宿主免疫反应,还与MTB在巨噬细胞内的定殖能力呈现负相关的关系。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 蛋白酶 Rv1140 免疫反应 候选抗原
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番茄红素对金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎的多维度抑制效应分析
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作者 董俊丽 郭鑫 +4 位作者 倪洋 李婧娴 岳宇坤 刘焕奇 陈永平 《中国兽医杂志》 北大核心 2026年第2期49-58,共10页
为了探究番茄红素(LYC)对金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导小鼠乳腺炎的保护作用及其机制,本试验选取6~8周龄昆明妊娠母鼠36只,随机均分为6个组:对照组、LYC组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。从母鼠配种中期(即母鼠见栓后第7天)... 为了探究番茄红素(LYC)对金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导小鼠乳腺炎的保护作用及其机制,本试验选取6~8周龄昆明妊娠母鼠36只,随机均分为6个组:对照组、LYC组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。从母鼠配种中期(即母鼠见栓后第7天)开始,LYC组、低剂量组、中剂量组和高剂量组每天分别灌胃给予50、12.5、25和50 mg(/kg·bw)LYC,对照组和模型组灌胃同体积的玉米油,连续灌胃28 d后,于乳腺导管注射S.aureus悬液(2×10^(8)CFU/mL)建立小鼠乳腺炎模型(对照组和LYC组不做处理)。24 h后处死小鼠,观察小鼠乳腺组织解剖学变化;摘取第4对乳腺组织,苏木精-伊红(H.E.)染色观察乳腺组织病理学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠乳腺组织炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)]浓度;蛋白免疫印迹(WB)检测紧密连接蛋白[闭合小环蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-3(Claudin-3)]表达。进一步通过微量肉汤法检测LYC对S.aureus的最小抑菌浓度(MIC),绘制S.aureus生长曲线;溶血法检测S.aureus溶血活性;WB检测S.aureus的α-溶血素(Hla)表达。结果显示,与对照组相比,模型组小鼠乳腺组织出血,乳腺腺泡壁固有结构受到破坏、乳腺腺泡壁增厚、炎性细胞浸润,乳腺组织损伤评分极显著升高(P<0.01),炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)浓度极显著升高(P<0.01),紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-3)表达量极显著降低(P<0.01)。低、中、高剂量组均显著地逆转了S.aureus诱导的上述指标的变化(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,LYC组所有指标均无显著差异(P>0.05)。LYC对S.aureus的MIC为128μg/mL;亚抑菌浓度(16、32、64μg/mL)LYC极显著抑制S.aureus溶血活性(P<0.01),并呈剂量依赖性地降低Hla蛋白表达(P<0.01);而8μg/mL LYC对S.aureus溶血活性和Hla蛋白表达均无显著影响(P>0.05)。结果表明,LYC通过调控宿主炎症反应和细菌毒力以缓解S.aureus诱导的乳腺炎,为天然产物靶向“宿主-病原体”互作而防控乳腺炎提供了新策略。 展开更多
关键词 番茄红素 金黄色葡萄球菌(S.aureus) 乳腺炎 α-溶血素 细菌毒力
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