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牛结节性皮肤病病毒ORF140依赖JUP激活Wnt信号通路影响病毒复制的研究 被引量：2
1
作者 王敏 温渊 +5 位作者 曹钰莹 刘聪 李超 汤芳 戴建君 薛峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第3期103-110,共8页
旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF... 旨在探索牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)ORF140在病毒感染宿主细胞中的作用。利用前期构建的LSDV ORF140缺失株,荧光定量分析缺失ORF140基因在LSDV感染宿主细胞后细胞因子转录水平的变化,同时选取LSDV保守基因ORF077建立检测LSDV ORF077的标准曲线,检测LSDV ORF140缺失株与野毒株在不同时间点的拷贝数变化,然后通过蛋白质谱技术和免疫共沉淀技术分析140蛋白与宿主细胞内存在相互作用的蛋白,最后敲低此蛋白的基因转录水平检测宿主细胞内细胞因子转录水平的变化。结果:LSDV ORF140缺失株会引起宿主细胞β-catenin基因转录水平显著下调(P<0.000 1)且缺失株拷贝数始终比野毒株高,推测LSDV ORF140基因的存在能激活宿主细胞的Wnt/β-catenin(Wnt/β-连环蛋白信号通路)信号通路,并且该通路的激活会影响LSDV的复制,宿主细胞中的连接斑珠蛋白(JUP)与LSDV 140蛋白存在相互作用,敲低宿主细胞JUP基因转录水平,发现β-catenin基因转录水平下调(P<0.05),感染LSDV后,β-catenin基因转录水平仍处于下调状态,并且检测到此时病毒拷贝数比野毒株高(P<0.05),以此推测LSDV ORF140是通过与JUP结合激活Wnt/β-catenin信号通路,从而影响LSDV的复制。综上,本研究证实LSDV 140蛋白能够与宿主细胞中的JUP蛋白结合,激活Wnt/β-catenin信号通路,从而抑制LSDV的复制,为揭示LSDV与宿主之间的相互作用及LSDV的致病机制提供参考。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 连接斑珠蛋白 Wnt/β-catenin信号通路 病毒复制
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基于血球计数板法的球虫卵囊计数方法研究
2
作者 李建 辛凌翔 +11 位作者 王秀丽 任小侠 刘元杰 姚文生 张一帜 魏津 马欣 王甲 冯妍 赵浩然 刘燕 朱良全 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第3期74-80,共7页
本试验旨在基于血球计数板法探究影响球虫卵囊计数准确性的因素,评价相关因素对结果准确性的影响程度,从而对目前广泛应用的球虫活疫苗卵囊计数方法进行改进。试验中对比不同放大倍数视野、不同生产厂家血球计数板、不同球虫孢子化卵囊... 本试验旨在基于血球计数板法探究影响球虫卵囊计数准确性的因素,评价相关因素对结果准确性的影响程度,从而对目前广泛应用的球虫活疫苗卵囊计数方法进行改进。试验中对比不同放大倍数视野、不同生产厂家血球计数板、不同球虫孢子化卵囊浓度和助悬剂对球虫卵囊计数结果准确性的影响。结果显示,视野放大倍数、血球计数板、球虫孢子化卵囊浓度和助悬剂对球虫卵囊计数结果均有一定影响,其中,视野放大倍数有显著影响。添加助悬剂,调整样品球虫孢子化卵囊数量至181~343个/0.4μL,用改良Neubauer血球计数板在10×20倍显微镜下进行计数,结果较为准确,连续6次计数结果的变异系数基本控制在20%以内。结果表明,限定视野放大倍数、血球计数板和球虫孢子化卵囊浓度及添加助悬剂,可有效降低球虫卵囊计数结果的变异系数,提高计数结果的准确性,降低人员误差,为《中华人民共和国兽药典》改版修订提供了试验依据和理论参考。 展开更多
关键词 卵囊计数 助悬剂 孢子化卵囊 球虫 血球计数板
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火鸡疱疹病毒亚克隆对活载体疫苗性能影响的研究
3
作者 谢丽华 王志胜 +9 位作者 童玲 栗环环 郑亚婷 刘娅梅 张传健 郭容利 Armando Mario DAMIANI 呙荣兵 黄腾 王继春 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第6期92-97,共6页
旨在比较火鸡疱疹病毒(HVT)亚克隆对构建活载体疫苗的影响。本研究采用同源重组方法,在HVT Fc126的UL55与UL56基因间的非编码区插入MiniF序列,构建重组病毒;采用细菌人工染色体(BAC)技术,分别提取病毒DNA后转入DH10B感受态细胞中,构建3... 旨在比较火鸡疱疹病毒(HVT)亚克隆对构建活载体疫苗的影响。本研究采用同源重组方法,在HVT Fc126的UL55与UL56基因间的非编码区插入MiniF序列,构建重组病毒;采用细菌人工染色体(BAC)技术,分别提取病毒DNA后转入DH10B感受态细胞中,构建3个对应的BAC;将传染性法氏囊病毒(IBDV)的VP2表达盒分别与3株BAC的DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行重组病毒的拯救;将重组活载体、亲本毒株及商品化重组活载体的生长动力学进行比较;将3株重组活载体接种SPF鸡后,在免疫后第3、4、5、6周等共4个时间点采集血清进行琼脂扩散试验。结果:获得3个纯化的HVT-MiniF亚克隆病毒,然后获得3株对应的HVT BAC,分别命名为HVT BAC-C1、HVT BAC-C2和HVT BAC-C3。限制性片段长度多态性(RFLP)鉴定发现这3个BAC亚克隆的基因组主体序列几乎一致,略有差异;进一步获得3株相对应的VP2重组HVT活载体,分别命名为HVT-VP2-C1、HVT-VP2-C2、HVT-VP2-C3;生长动力学结果表明,3株VP2重组病毒与2株对照病毒的滴度在6、24、36和72 h存在显著性差异(P<0.05),在12和48 h无明显差异(P>0.05);琼脂扩散试验结果发现3个亚克隆的重组病毒均能产生较高抗体,但都没有达到对照商品疫苗的水平;3个亚克隆重组病毒之间产生的抗体存在明显差异,其中HVT-VP2-C2免疫鸡后产生的抗体最高。综上,HVT在传代过程中可能易出现基因变异,提示在构建重组活载体疫苗时,应充分考虑不同亚克隆活载体的免疫效力差异,做好种毒纯化。 展开更多
关键词 火鸡疱疹病毒 亚克隆 活载体疫苗 细菌人工染色体 免疫效力
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巨型艾美耳球虫与产气荚膜梭菌共感染致鸡坏死性肠炎模型的评价
4
作者 袁橙 袁月 +5 位作者 张清正 宋小凯 徐立新 严若峰 李祥瑞 陆明敏 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期4120-4128,共9页
鸡球虫感染破坏宿主肠道免疫稳态,是引起产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)介导的鸡坏死性肠炎(necrotic enteritis,NE)的主要诱因。在7种鸡球虫中,巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima,EM)最适于诱导NE。因此,本研究旨在通过对不同E... 鸡球虫感染破坏宿主肠道免疫稳态,是引起产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)介导的鸡坏死性肠炎(necrotic enteritis,NE)的主要诱因。在7种鸡球虫中,巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima,EM)最适于诱导NE。因此,本研究旨在通过对不同EM攻虫剂量的探究,建立稳定、可靠的NE实验室模型。将200只14日龄的肉鸡分为10组,分别为空白对照组、CP攻毒组、EM攻虫组(不同攻虫剂量)、EM/CP共感染组(不同攻虫剂量)。在14日龄时,使用不同剂量E.maxima孢子化卵囊攻虫。在感染后4 d使用C.perfringens攻毒,在20日龄时终止试验,剖杀鸡只,记录攻虫前、20日龄体重及存活率并进行肠道病变计分。结果显示,随着E.maxima感染剂量的增加,单一E.maxima感染组的增重逐渐减缓,但在EM/CP共感染组未见该趋势,EM/CP1组中相对增长率显著高于其余EM/CP共感染组,EM/CP2组、EM/CP3组、EM/CP4组间未见显著差异。肠道病变记分呈现与体重增长率较为相似的趋势,EM/CP1组肠道病变程度较其他EM/CP共感染组较轻,且EM/CP2组、EM/CP3组、EM/CP4组间未见显著区别。在EM/CP共感染组中,EM/CP2组的存活率为85%,而EM/CP3组和EM/CP4组存活率偏低,分别为80%和70%。综合增重情况、肠道病变、致死率三个指标进行判断,EM/CP2组的攻虫攻毒剂量(1×10^(4)卵囊·羽^(-1)+1×10^(9)CFUs·羽^(-1))最适用于E.maxima诱发NE的实验室模型的构建,该模型可为NE的致病机制研究、疫苗及药物研发等提供较好的研究工具。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 巨型艾美耳球虫 鸡坏死性肠炎 双重感染模型
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非洲猪瘟病毒调控宿主细胞凋亡的研究进展
5
作者 李强 高鹏 +6 位作者 周琼琼 周磊 盖新娜 韩军 郭鑫 张永宁 杨汉春 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第9期108-118,共11页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染引起猪的一种热性、出血性和高度接触性传染病。临床上,ASF以高热、皮肤发绀和多种脏器广泛出血等病理损伤为特征,具有极高的发病率和死亡率,严重危害全球养猪业。目前,该病尚无安全有效的疫苗... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染引起猪的一种热性、出血性和高度接触性传染病。临床上,ASF以高热、皮肤发绀和多种脏器广泛出血等病理损伤为特征,具有极高的发病率和死亡率,严重危害全球养猪业。目前,该病尚无安全有效的疫苗和治疗药物,因而被世界动物卫生组织(WOAH)列为法定报告的动物疫病。ASFV主要靶向猪的单核吞噬细胞系统,包括巨噬细胞和单核细胞,常引发淋巴细胞耗竭以及靶细胞和旁细胞死亡,其中细胞凋亡是关键的死亡形式之一。研究已证实,诱导细胞凋亡是ASFV重要的致病机制,与其引起的病理损伤密切相关。ASFV基因组庞大且可编码众多蛋白,尽管许多蛋白功能尚待探索,但已有证据显示,ASFV能够通过编码多种病毒蛋白来精细调控宿主细胞的凋亡过程。在病毒感染的早期阶段,ASFV抑制细胞凋亡以促进病毒复制;而在感染后期,ASFV诱导细胞凋亡以利于子代病毒的释放和传播,并帮助病毒逃逸宿主的免疫应答,反映了ASFV在不同复制阶段对细胞凋亡调控的复杂性。本文旨在综述ASFV的概况、细胞凋亡的特征及其发生机制,以及ASFV调控细胞凋亡的分子机制,以期为该病毒的基础研究和科学防控提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟(ASF) 非洲猪瘟病毒(ASFV) 病理损伤 细胞凋亡 致病机制 分子机制
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UV-LED对猪场水源重要病原微生物的杀灭效率及其应用研究
6
作者 纪春晓 刘剑英 +4 位作者 聂祝运 王东亮 刘德权 邹忠 唐宇龙 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第7期89-96,共8页
旨在探讨紫外发光二极管(UV-LED)对猪场水源中重要病原微生物的灭活效率,并分析经UV-LED消杀的饮水对断奶仔猪生长性能与免疫指标的影响。通过菌落计数法测定UV-LED对副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS),猪链球菌2型(Streptococcu... 旨在探讨紫外发光二极管(UV-LED)对猪场水源中重要病原微生物的灭活效率,并分析经UV-LED消杀的饮水对断奶仔猪生长性能与免疫指标的影响。通过菌落计数法测定UV-LED对副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS),猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)和肠产毒素型大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)3种致病菌菌株的杀灭效率;培养非洲绿猴肾细胞(Vero),非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145),猪肾细胞(PK-15)与猪肺泡巨噬细胞(PAM),对其分别接种伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和非洲猪瘟病毒(ASFV),观察细胞病变情况,并计算其病毒滴度,作为UV-LED灭活病毒效果的评价指标;给断奶仔猪饲喂经UV-LED消杀的饮水,测定其对生长性能及血液指标的影响。结果:UV-LED对于水源中的GPS、SS2、ETEC这3种病菌均具有很强的杀灭效果,处理17 s以上时,对以上细菌的杀灭效率可达99.90%以上;对PRV、PCV2、PRRSV、ASFV这4种病毒均具有杀灭作用,但杀灭效果存在一定区别,处理17 s以上可完全灭活PRV、PCV2与PRRSV,而完全灭活ASFV需处理58 s;断奶仔猪饲喂结果表明,给予经UV-LED消杀饮水,可显著减少断奶仔猪腹泻率(P<0.05),改善肠道功能,并且可使断奶仔猪血液中白细胞数、淋巴细胞数与单核细胞数显著下降(P<0.05)。综上,UV-LED消杀处理可以有效消杀水中常见的病原微生物,减少断奶仔猪被病原微生物感染的风险,可应用于水源消毒。 展开更多
关键词 紫外发光二极管(UV-LED) 猪场 水源 消毒 病原微生物
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5株牛源奇异变形杆菌致病性及药物敏感性分析 被引量：3
7
作者 但蕊桐 谢沐含 +3 位作者 邱羊羊 陈建宇 李能章 彭远义 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2025年第2期26-40,共15页
为探究牛源奇异变形杆菌的致病性及药物敏感性差异,对前期分离到的5株试验菌株(SPL569、SPL1502、SPL1504、SPL1511、SPL1512)进行了进一步的常规细菌学鉴定及群集运动分析、16S rDNA序列比对、动物致病性试验和毒力基因检测,通过药物... 为探究牛源奇异变形杆菌的致病性及药物敏感性差异,对前期分离到的5株试验菌株(SPL569、SPL1502、SPL1504、SPL1511、SPL1512)进行了进一步的常规细菌学鉴定及群集运动分析、16S rDNA序列比对、动物致病性试验和毒力基因检测,通过药物敏感性试验和耐药基因检测分析其耐药性。结果显示:5株试验菌株均为奇异变形杆菌,均具有在1.5%琼脂平板上发生同心圆迁移的群集运动现象,其中SPL1511和SPL1512迁移速度快于其他菌株,群集运动能力更强。致病性试验表明:只有SPL1511和SPL1512两株试验菌对小鼠致死。毒力基因检测发现:SPL1511和SPL1512具有特殊的“雾蔓”迁徙能力调节因子(rsbA),验证了该基因是拥有致病性的关键,同时也验证了群集运动能力越强、其侵袭力也越强。药物敏感性试验结果表明:5株试验菌对临床常见的大部分抗生素基本耐药,其中SPL569、SPL1502、SPL1504菌株只对头孢曲松敏感,SPL1511只对头孢他定敏感,SPL1512只对头孢哌酮敏感。耐药基因检测结果也与药物敏感性试验结果相符合。 展开更多
关键词 奇异变形杆菌 群集运动 致病性 毒力基因 耐药性 耐药基因
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牛结核病大罐奶抗体检测方法的评估 被引量：1
8
作者 陈颖钰 张琼文 +2 位作者 王杰 陈洁 郭爱珍 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2025年第1期75-79,共5页
为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警,本试验利用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测法,对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析;并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2998... 为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警,本试验利用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测法,对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析;并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2998份个体奶样,分析大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间的相关性,建立基于大罐奶抗体检测的牛结核病的流行率预测模型;为确定不同效价阳性奶样在大罐奶中的检测能力,通过对不用阳性奶样进行稀释后混样检测,分析阳性奶样的效价和具有相近大罐奶S/P值的牛群中动物个体的抗体水平经验分布函数的差异性。结果显示,奶样和血样的牛结核病抗体检测结果之间具有高度一致性(Kappa=0.862)和相关性(Pearson相关系数r=0.976,P<0.01)。大罐奶抗体水平检测结果与牛结核病流行率之间具有中度相关性(Pearson相关系数r=0.681,P<0.01),流行率预测模型y=e4.7010+1.8784ln(x)-0.01(R2=0.8933)的预测能力为89.33%。分别稀释不同效价的阳性奶样,牛结核弱阳性奶样2倍稀释后阳性检出率为16.67%,中阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为50.00%,高阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为100%。结果表明,奶样可用于牛结核病的抗体检测,且大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间具有相关性,并可以通过模型预测牛结核病的流行率。大罐奶抗体检测可作为一项经济快捷的检测手段用于牛结核病的监测和预警,对于有着较高流行率或存在有强阳性个体的牛场,该检测方法敏感性更高,更为适用。 展开更多
关键词 牛结核病 大罐奶 效价 预测模型
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我国禽流感流行趋势和疫苗研究现状 被引量：3
9
作者 张涛 张家豪 +1 位作者 廖明 亓文宝 《中国家禽》 北大核心 2025年第5期141-151,共11页
禽流感病毒(AIV)作为一种传染性强、突变率高的人兽共患病病原体,给我国养禽业造成巨大的隐患和损失,更对人类健康造成了严重威胁。多年来,尽管我国已经实施了诸如扑杀、强制免疫、封锁疫区等一系列传统和新型的策略来防止AIV在家禽中传... 禽流感病毒(AIV)作为一种传染性强、突变率高的人兽共患病病原体,给我国养禽业造成巨大的隐患和损失,更对人类健康造成了严重威胁。多年来,尽管我国已经实施了诸如扑杀、强制免疫、封锁疫区等一系列传统和新型的策略来防止AIV在家禽中传播,但是AIV在国内仍然散发流行。目前,疫苗接种仍然是防控禽流感的最有效方法,禽流感灭活疫苗已获准在养禽业中大规模生产使用,而其他新型疫苗也正在研发中。文章阐述了禽流感灭活疫苗、弱毒疫苗、亚单位疫苗、病毒载体疫苗、核酸疫苗和通用疫苗的研发策略及研究现状,并分析了不同类型疫苗的优缺点,为禽流感疫苗的研发提供参考。 展开更多
关键词 禽流感病毒 家禽 免疫 防控 疫苗
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耐药基因blaNDM、mcr-1和cfr三重TaqMan qPCR检测方法的建立及应用 被引量：1
10
作者 杨威 于海航 +7 位作者 王芸萌 王珏 韩昱 胡晓悦 谌志伟 卢军霞 高英 张宁 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第2期243-248,273,共7页
为实现同时检测blaNDM、mcr-1和cfr 3种耐药基因的方法。通过构建质粒标准品、对引物及探针设计和优化反应体系及条件,成功建立blaNDM、mcr-1和cfr三重荧光定量PCR检测方法。该方法能特异性地检出blaNDM、mcr-1和cfr,而对其他耐药基因... 为实现同时检测blaNDM、mcr-1和cfr 3种耐药基因的方法。通过构建质粒标准品、对引物及探针设计和优化反应体系及条件,成功建立blaNDM、mcr-1和cfr三重荧光定量PCR检测方法。该方法能特异性地检出blaNDM、mcr-1和cfr,而对其他耐药基因均不能检出;3个耐药基因标准曲线的相关系数(R2)均大于0.999,变异系数(Cv)均低于1%;质粒标准品最低检出限值均为10^(2) copies/μL。使用建立的方法对800份细菌样本进行检测,结果显示,含耐药基因mcr-1样本32份、只含耐药基因blaNDM样本40份、只含耐药基因cfr样本2份;同时含有耐药基因mcr-1和blaNDM的样本8份,未检出同时携带3种耐药基因的细菌样本。以上结果证实,本研究建立的三重荧光定量PCR方法具有灵敏性高、特异性强及稳定性好的优点,适用于临床上快速检测blaNDM、mcr-1和cfr 3种耐药基因,为细菌多重耐药基因的检测和控制提供技术支持。 展开更多
关键词 blaNDM mcr-1 CFR 耐药基因 多重荧光定量PCR
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非洲猪瘟病毒蛋白的结构和功能研究进展 被引量：1
11
作者 罗梦 郭子强 +8 位作者 李佳乐 帅文娜 李丽薇 周艳君 姜一峰 童武 童光志 韦祖樟 高飞 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第3期125-134,共10页
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种在家猪和野猪之间传播的高度传染性和致死性的病毒性疾病,该病的病原体是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV),致死率高达100%。近年来,ASF疫情严重威胁着我国生猪产业的健康发展... 非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种在家猪和野猪之间传播的高度传染性和致死性的病毒性疾病,该病的病原体是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV),致死率高达100%。近年来,ASF疫情严重威胁着我国生猪产业的健康发展。与之前相比,我国的ASFV流行毒株逐渐由ASFVⅡ型强毒株转变为ASFVⅡ型和Ⅰ型的重组毒株。因此,迫切需要开发具有交叉保护效力的有效疫苗来预防ASFV的感染。ASFV的结构复杂,其基因组是一种大型双链DNA分子,大小在170~193 kb,包含150~167个开放阅读框,编码近200种蛋白。这些蛋白具有复杂的结构、功能以及免疫逃逸机制,使ASF疫苗研发困难重重。截止目前,尚未有针对ASF的有效疫苗或治疗药物问世,仍需要全面解析非洲猪瘟病毒蛋白的结构和功能,深入了解病毒感染机制以及病毒蛋白和宿主蛋白的相互作用。本文旨在综述当前关于ASFV相关蛋白的结构和功能的研究进展,以期为有效预防和控制ASF提供科学依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 结构蛋白 非结构蛋白 免疫逃避
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奶牛源反刍动物链球菌的分离鉴定及致病性研究 被引量：1
12
作者 李富祥 高华峰 赵文华 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期17-22,38,共7页
为了鉴定云南省某养殖场患呼吸道疾病奶牛的细菌性病原,本研究将2份奶牛鼻腔拭子样品接种含5%牛血清的营养琼脂,并观察分离菌的菌落形态和经革兰氏染色特性,结果显示分离到2株革兰氏阳性链状球菌YN240515和YN240516。采用Rapid ID32 STR... 为了鉴定云南省某养殖场患呼吸道疾病奶牛的细菌性病原,本研究将2份奶牛鼻腔拭子样品接种含5%牛血清的营养琼脂,并观察分离菌的菌落形态和经革兰氏染色特性,结果显示分离到2株革兰氏阳性链状球菌YN240515和YN240516。采用Rapid ID32 STREP kit对2株分离菌进行生化鉴定,采用PCR扩增分离菌16S rDNA基因序列并测序,采用MegAlign软件分析16S rDNA基因序列的同源性,采用MEGA软件构建16S rDNA基因序列的遗传进化树并分析2株分离菌的遗传进化特征,采用小鼠腹腔接种方法分析2株分离菌的致病性,采用纸片琼脂扩散法测定2株分离菌对8大类14种抗菌药物的敏感性。细菌的生化、16S rDNA基因序列同源性和遗传进化鉴定结果显示,2株分离菌生化特征与反刍动物链球菌(Streptococcus ruminantium)模式菌株DSM104980T以及其他链球菌参考株基本一致。分离菌YN240515和YN240516与S.ruminantium DSM104980T 16S rDNA基因序列的同源性分别为100%和99.9%,与其他S.ruminantium参考株16S rDNA基因序列的同源性为98.8%~100%。2株分离菌在16S rDNA基因序列遗传进化树中与全部S.ruminantium参考株形成同一进化分支。基于上述特征,将2株分离菌鉴定为S.ruminantium。致病性实验结果显示,2株分离菌以4.0×107 cfu经腹腔接种小鼠均能导致小鼠100%死亡率,对小鼠的致病性均较强。药敏试验结果显示,2株分离菌均对青霉素类的青霉素和阿莫西林-克拉维酸以及头孢菌素类的头孢噻吩和头孢曲松等7种抗菌药物敏感,对氨基糖苷类的链霉素和卡那霉素等5种抗菌药物耐药。本研究是国内首次从患呼吸道综合征的奶牛中分离到S.ruminantium,证实我国奶牛存在S.ruminantium的感染,为我国奶牛S.ruminantium感染的防治提供基础数据。 展开更多
关键词 反刍动物链球菌 分离 致病性 奶牛
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非洲猪瘟病毒五基因缺失株的发现与分离鉴定 被引量：1
13
作者 戈胜强 左媛媛 +7 位作者 路皓东 初薛霏 吕艳 徐天刚 于家荣 李金明 蔡玉梅 王志亮 《中国动物检疫》 2025年第4期78-83,共6页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的高度致死性传染病,从1921年首次被发现至今,一直在全球范围内传播。研究表明,ASFV强毒株在传代细胞上连续传代会使其毒力降低,这为研发ASFV... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的高度致死性传染病,从1921年首次被发现至今,一直在全球范围内传播。研究表明,ASFV强毒株在传代细胞上连续传代会使其毒力降低,这为研发ASFV弱毒疫苗提供了重要思路。但在原代细胞上多次传代发生基因丢失的相关研究未见报道。本研究将ASFV强毒株在原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)上连续传代,发现一株ASFV多基因家族(MGFs)基因缺失毒株,并对其进行了分离纯化。全基因组测序结果显示,该分离株在MGF360和MGF505处有5个基因的缺失,且缺失区域位于ASFV MGFs基因研究的热点区域。体外验证表明,该基因缺失株与母本毒株复制能力相似,会在与母本野毒的混合增殖扩繁中稳定存在。提示ASFV在种子批毒制备过程中应保持较低的传代次数,以防基因缺失毒株出现。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因缺失 稳定增殖 病毒纯化
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牛巴氏杆菌病的防治 被引量：1
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作者 谭雄 李健 +5 位作者 李清 王凯 唐都 张能飞 蒋丽春 庞权 《四川畜牧兽医》 2025年第1期49-50,共2页
牛巴氏杆菌病又称牛出血性败血症,是由多杀性巴氏杆菌引起的急性传染病。该病主要影响牛的呼吸道,严重时可导致高热、肺炎、急性胃肠炎以及内脏器官广泛性出血。巴氏杆菌是条件性致病菌,可在健康牛上呼吸道和消化道中存在,恶劣的牛舍环... 牛巴氏杆菌病又称牛出血性败血症,是由多杀性巴氏杆菌引起的急性传染病。该病主要影响牛的呼吸道,严重时可导致高热、肺炎、急性胃肠炎以及内脏器官广泛性出血。巴氏杆菌是条件性致病菌,可在健康牛上呼吸道和消化道中存在,恶劣的牛舍环境有利于巴氏杆菌繁殖,并导致牛发病。犊牛免疫器官未发育成熟,为易感群体。 展开更多
关键词 牛巴氏杆菌病 多杀性巴氏杆菌 条件性致病菌 急性传染病 牛出血性败血症 免疫器官 急性胃肠炎 内脏器官
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某规模化猪场伪狂犬病的净化及经济效益分析 被引量：1
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作者 徐岳涛 李孝文 +5 位作者 李洋 吴伟胜 于冲 田梦婷 白娟 姜平 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第5期107-113,共7页
为了探究规模化猪场伪狂犬病净化的可行性,选择某大型父母代养猪场,通过“检测-隔离/淘汰-免疫”手段净化猪伪狂犬病。采集所有公猪、经产母猪、后备母猪,以及部分仔猪和保育猪的血清样品,根据抗体检测结果,对PRV-gE抗体阴性猪进行隔离... 为了探究规模化猪场伪狂犬病净化的可行性,选择某大型父母代养猪场,通过“检测-隔离/淘汰-免疫”手段净化猪伪狂犬病。采集所有公猪、经产母猪、后备母猪,以及部分仔猪和保育猪的血清样品,根据抗体检测结果,对PRV-gE抗体阴性猪进行隔离饲养,淘汰PRV-gE抗体阳性猪及其同栏猪只;针对不同猪群调整免疫方案,增加产前母猪、初生仔猪和保育猪的免疫次数,解决免疫空窗期问题。加强后备猪监测,严格实行“全进全出”,及时隔离病猪,加大淘汰力度,加强人员、物品和环境消毒;严格执行上述净化措施,每6个月进行PRV抗体检测。结果显示:随着净化工作的开展,gB抗体阳性率逐渐升高,gE抗体阳性率逐渐降低;持续采取净化措施2年后,经产母猪和后备母猪群体的gB抗体阳性率均达到97%以上,且各阶段猪只gE抗体均为阴性,表明该猪场已达到伪狂犬病净化标准;经统计分析,伪狂犬病净化后,该场每头母猪每年断奶仔猪数(PSY)平均增加4.96头,每头母猪每年收益平均增加1 636元。结论:通过科学的净化技术方案和严格的生物安全措施,可以实现规模化猪场的伪狂犬病净化,提高猪场经济效益。 展开更多
关键词 伪狂犬病 净化 gE抗体 gB抗体 经济效益
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水禽细小病毒LAMP及其可视化通用检测方法的建立
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作者 戴银 周慧琴 +9 位作者 谷思琴 胡晓苗 王洁茹 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 赵瑞宏 周学利 侯宏艳 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期63-68,共6页
为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测... 为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测方法,并对2种方法的特异性和灵敏性进行检测。采用常规PCR、LAMP和LAMP-HNB对10份水禽临床样品进行检测,以评估2种方法的实用性。结果显示,LAMP方法的最佳反应温度为65℃、反应时间为60 min。2种方法仅能扩增GPV和MDPV,而对其他5种常见水禽病毒的检测结果均为阴性,最低检出浓度均为1×10-5ng/μL。2种方法与常规PCR的检测结果一致,符合率达100%。结果表明,建立的LAMP方法和LAMP-HNB可视化方法具有灵敏性好、特异性高、仪器要求低和可视化等优点,可为水禽细小病毒的现场快速检测提供技术支撑。 展开更多
关键词 鹅细小病毒(GPV) 番鸭细小病毒(MDPV) NS基因 环介导等温扩增(LAMP) 可视化
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福建湿地野鸟源H9N2亚型禽流感病毒HA的分子特征
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作者 陈珍 朱春华 +5 位作者 陈翠腾 刘斌琼 蔡国漳 万春和 黄瑜 施少华 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期227-234,共8页
目的了解福建主要湿地野鸟源H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)HA的分子特征。方法对福建闽江口、九龙江、三都澳、兴化湾和泉州湾湿地野鸟粪便样品中分离的5株H9N2亚型AIV进行序列测定与分析。结果5株分离株之间的HA基因... 目的了解福建主要湿地野鸟源H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)HA的分子特征。方法对福建闽江口、九龙江、三都澳、兴化湾和泉州湾湿地野鸟粪便样品中分离的5株H9N2亚型AIV进行序列测定与分析。结果5株分离株之间的HA基因核苷酸同源率为89.8%~99.4%,均属于h9.4.2.5c进化分支;HA蛋白裂解位点基序均为PSRSSR↓GLF,符合低致病性AIV的分子特征;HA蛋白存在8个相同的潜在糖基化位点,其中第313位的糖基化位点位于HA蛋白裂解位点附近;位于HA受体结合位点第226位氨基酸均为亮氨酸,具有结合哺乳动物唾液酸α-2,6受体的特征。结论5株野鸟源H9N2亚型AIV均为低致病性AIV,具有感染人的特征。 展开更多
关键词 福建湿地 野鸟源 H9N2亚型 禽流感病毒 HA基因
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信阳地区散养土鸡禽白血病病毒和马立克病病毒混合感染的分子生物学诊断
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作者 李迎晓 尹磊 +4 位作者 赵瑜 董建国 何书海 曲哲会 焦凤超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期844-854,共11页
[目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增... [目的]了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus, MDV)混合感染及其遗传进化情况。[方法]对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增,并对J亚群ALV(ALV-J)gp85基因与MDV meq基因进行扩增测序,使用MegAlign软件进行核苷酸、氨基酸序列相似性比对以及氨基酸变异位点分析。利用Mega 11.0软件构建gp85、meq氨基酸序列系统进化树。[结果]送检发病鸡腺胃、脾脏肿大,肝脏出现弥漫性肿大并伴有灰白色结节。ALV-J gp85与MDV 132-bpr基因PCR扩增结果均为阳性,分别获得545、317 bp目的条带。测序比对结果显示,扩增序列分别与ALV-J分离株GX12NN04 gp85基因(登录号:KT598488)和MDV-1型分离株YLO40920 meq基因(登录号:DQ174459)高度相似,相似性分别为94.6%和99.9%,初步确定分离株为ALV-J和MDV,并分别命名为HN23XY01-ALV、HN23XY01-MDV。核苷酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85基因与13株ALV-J参考毒株核苷酸序列相似性为92.1%~94.6%;HN23XY01-MDV meq基因与14株MDV参考毒株的核苷酸序列相似性为99.3%~99.9%。氨基酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85与13株ALV-J参考毒株氨基酸序列相似性为87.4%~91.4%,HN23XY01-MDV与14株MDV参考毒株的氨基酸序列相似性为97.9%~99.7%。系统进化树结果显示,HN23XY01-ALV与ALV-J亲缘关系较近,处于同一进化分支;HN23XY01-MDV与广西分离株GXY2、YLO40920、GX20NN2和河南分离株HNSC105处于同一个分支,与疫苗株CVI988、814和CU-2亲缘关系较远。氨基酸变异位点分析结果显示,HN23XY01-ALV存在D(E)65Y、Q(K/R)75L、A(T)76S、R(T)119K、T(M/A)219K氨基酸位点突变;HN23XY01-MDV存在K77E、D80Y、T139A、P176R和P217A氨基酸位点突变,且含有疫苗株所缺失的第193位脯氨酸,与MDV-1型强毒株的特征相符合。[结论]本研究从信阳地区散养土鸡群中检测到ALV-J与MDV混合感染,结果为当地土鸡ALV-J与MDV协同致病机制研究以及混合感染的疫情防控提供重要参考。 展开更多
关键词 禽白血病病毒(ALV) 马立克病病毒(MDV) GP85基因 MEQ基因 混合感染
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GM-CSF和IL-6的免疫佐剂活性及对小鼠生长性能、血液指标的影响
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作者 成伟伟 容维中 +5 位作者 杨明 李元新 赵子惠 陈伯祥 王佳 周瑶 《饲料工业》 北大核心 2025年第1期95-102,共8页
为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响,试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因,并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a(+),且诱... 为验证粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素6(IL-6)的免疫佐剂活性以及研究其对小鼠生长性能、血液指标的影响,试验扩增了GM-CSF基因和IL-6基因,并将GMCSF基因和IL-6基因分别克隆至载体p CDNA3.1-His-C和p ET-32a(+),且诱导表达了IL-6蛋白。将构建的GM-CSF基因的重组载体、诱导表达的IL-6重组蛋白联合畜禽疫病防控技术研发课题组前期构建的TGEV DNA疫苗载体p-N-His分组免疫小鼠(设置p-N-His为对照),运用间接ELISA检测了特异性抗体水平。将构建的重组载体、诱导表达的重组蛋白和PBS分组免疫小鼠,测定了小鼠的生长性能、血清指标和免疫器官指数。结果显示,克隆的GM-CSF和IL-6基因大小分别为579 bp和576 bp,成功构建了真核表达载体p-GM-CSF和原表达载体p ET-IL-6,诱导表达的IL-6重组蛋白大小为38 ku。载体p-GM-CSF、IL-6蛋白联合p-N-His免疫小鼠后,p-N-His+p-GM-CSF、p-N-His+IL-6蛋白和p-N-His均刺激机体产生了特异性抗体,且p-N-His+IL-6蛋白抗体水平高于p-N-His+p-GM-CSF(P<0.05)。IL-6蛋白、p-GM-CSF和PBS分组免疫小鼠后,p-GM-CSF和IL-6蛋白组小鼠的生长性能指标均高于PBS组,且末重、平均日增重、料重比差异显著(P<0.05)。p-GM-CSF、IL-6蛋白、PBS组小鼠的生化指标总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮的含量差异均不显著(P>0.05),但IL-6蛋白组小鼠的葡萄糖显著升高(P<0.05),p-GM-CSF、IL-6蛋白、PBS组小鼠的免疫器官指数差异均不显著(P>0.05)。文章以p-N-His为靶载体验证出GM-CSF和IL-6具有较强免疫佐剂活性,且IL-6蛋白的效果强于GM-CSF。p-GM-CSF和IL-6蛋白能够提升小鼠的生长性能指标,对血液指标和免疫器官指数影响不大。 展开更多
关键词 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 白细胞介素6 免疫佐剂活性 生长性能 血液指标
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九三某牛场奶牛临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药物敏感性分析 被引量：1
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作者 李鹤 潘顺圆 +2 位作者 宋军 王超 韩齐 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第3期31-36,52,共7页
为了对患有乳房炎的病牛进行病原菌的分离与鉴定、分析其致病性、评估药物敏感性以及提供临床用药指导,研究从黑龙江省嫩江市九三管理局某牧场的3头乳房炎病牛的奶样中分离纯化病原菌。采用PCR法、细菌生化反应试验、细菌鉴定仪鉴定、... 为了对患有乳房炎的病牛进行病原菌的分离与鉴定、分析其致病性、评估药物敏感性以及提供临床用药指导,研究从黑龙江省嫩江市九三管理局某牧场的3头乳房炎病牛的奶样中分离纯化病原菌。采用PCR法、细菌生化反应试验、细菌鉴定仪鉴定、小鼠致病性试验、病理组织学鉴定及药敏试验等多种方法,对病原菌进行了菌株分离鉴定、致病性分析及药物敏感性研究。实验结果显示,成功分离的9株金黄色葡萄球菌经鉴定对小鼠表现出明确致病性。此外,这些病原菌对临床常用药物如阿莫西林、氨苄西林和青霉素显示出高度的敏感性。同时,苯唑西林、头孢西丁和利福平等药物也能够有效地抑制这些分离出的金黄色葡萄球菌的生长。将药敏实验的结果反馈给相关牛场后,采用阿莫西林和青霉素对患病奶牛进行治疗,观察到乳房炎症状有显著改善。这些实验结果为临床上治疗奶牛乳房炎提供了有价值的参考依据。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 分离鉴定 药敏试验
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