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兔源A型多杀性巴氏杆菌感染的诊断及耐药性分析
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作者 张孟思 刘珈均 +4 位作者 李丽 罗毅 林思杨 董国兴 陈弟诗 《四川畜牧兽医》 2026年第3期48-49,共2页
多杀性巴氏杆菌是一种革兰氏阴性菌,广泛存在于多种动物体内,能够引起多种严重的疾病。该菌最早由Louis Pasteur在1881年分离并鉴定为导致禽霍乱的病原体,此后其被证实可感染兔、牛、猪等多种动物,引发兔出血性败血症、牛出血性败血症... 多杀性巴氏杆菌是一种革兰氏阴性菌,广泛存在于多种动物体内,能够引起多种严重的疾病。该菌最早由Louis Pasteur在1881年分离并鉴定为导致禽霍乱的病原体,此后其被证实可感染兔、牛、猪等多种动物,引发兔出血性败血症、牛出血性败血症等疾病。多杀性巴氏杆菌具有荚膜抗原多样性,根据荚膜抗原可分为A、B、D、E和F五个血清型。其中A型多杀性巴氏杆菌是致病性最强的血清型之一,对家兔危害极大,可引发严重的出血性败血症、呼吸道感染及繁殖障碍,其发病率和死亡率高。 展开更多
关键词 耐药性 多杀性巴氏杆菌 兔源 A型
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基于量子点技术的牛结节性皮肤病病毒P32抗体免疫层析检测试纸的制备
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作者 孙贺贺 畅文驰 +4 位作者 任可欣 张颖 史端祥 王立珍 齐雪峰 《中国牛业科学》 2026年第1期20-28,37,共10页
为了建立一种快速、高灵敏度的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)P32蛋白抗体的免疫层析检测方法,本研究基于量子点(quantum dots,QDs)荧光微球标记技术制作免疫层析试纸条,对QDs与P32蛋白的偶联条件、免疫层析试纸条... 为了建立一种快速、高灵敏度的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)P32蛋白抗体的免疫层析检测方法,本研究基于量子点(quantum dots,QDs)荧光微球标记技术制作免疫层析试纸条,对QDs与P32蛋白的偶联条件、免疫层析试纸条的最佳制备参数进行了优化,并对试纸条的特异性、灵敏性、重复性与稳定性进行了检测,最后与商品化检测试剂盒的检测结果进行了比对。结果表明,该方法与牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、禽支原体(mycoplasma gallisepticum,MG)等常见病原无交叉反应,特异性良好;最低可检测1∶160倍稀释的LSDV阳性血清;保存120 d的试纸条仍具有良好的检测效果,稳定性优。与商品化检测试剂盒检测方法对比,本方法符合率达到86.00%,且敏感性更高,适用于临床样本的早期筛查。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 量子点 免疫层析试纸条 P32蛋白 抗体检测
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鸡传染性喉气管炎的诊断与治疗
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作者 李叙涟 《国外畜牧学(猪与禽)》 2026年第1期16-19,共4页
鸡传染性喉气管炎是一种以侵害鸡呼吸道黏膜为特征的慢性接触性呼吸系统疾病,对鸡的健康和产蛋性能具有重要影响。本文以60羽病鸡为研究对象,对鸡传染性喉气管炎的病因进行简单介绍,着重探讨其临床和实验室诊断方法,归纳针对性治疗方案... 鸡传染性喉气管炎是一种以侵害鸡呼吸道黏膜为特征的慢性接触性呼吸系统疾病,对鸡的健康和产蛋性能具有重要影响。本文以60羽病鸡为研究对象,对鸡传染性喉气管炎的病因进行简单介绍,着重探讨其临床和实验室诊断方法,归纳针对性治疗方案、用药规律及治疗效果,给出适用于基层的优化治疗方案,为养殖场(户)的实际应用提供借鉴。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎 临床诊断 治疗方案 产蛋鸡 诊疗优化
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3种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA试剂盒的比较
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作者 田原 曹静 +3 位作者 柴文娴 余昊天 于重伟 夏福芳 《现代畜牧兽医》 2026年第1期25-29,共5页
研究旨在评价3种商品化猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体ELISA试剂盒的检测性能。选用PRRSV阴性、阳性血清各3份和临床血清样本409份,比较3种试剂盒的分析敏感性、批内重复性以及阴性、阳性符合率。结果显示,试剂盒C分析敏感性最高,... 研究旨在评价3种商品化猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体ELISA试剂盒的检测性能。选用PRRSV阴性、阳性血清各3份和临床血清样本409份,比较3种试剂盒的分析敏感性、批内重复性以及阴性、阳性符合率。结果显示,试剂盒C分析敏感性最高,试剂盒A和B基本一致;试剂盒A、B、C批内变异系数小于4%,均具有较好的重复性,其中试剂盒B的重复性最好,试剂盒C次之;试剂盒B、C的阳性符合率均为100.00%,试剂盒A的阳性符合率为98.08%,3种试剂盒的诊断敏感性为B=C>A;试剂盒A的阴性符合率为100.00%,试剂盒B、C分别为99.59%和97.22%,3种试剂盒的诊断特异性为A>B>C。研究表明,试剂盒B综合性能评价最高,重复性好,诊断敏感性和特异性高,是抗体检测的首选;若临床检测偏重敏感性,可选择分析敏感性和诊断敏感性更高的试剂盒C;若临床检测偏重特异性,可选择诊断特异性更高的试剂盒A。 展开更多
关键词 PRRSV ELISA 抗体检测 检测性能
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高通量测序技术分析奶牛呼吸道细菌群落结构及多样性
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作者 邱世华 贺卫华 +3 位作者 翟晓虎 程艳 傅宏庆 周振雷 《动物医学进展》 北大核心 2025年第12期63-68,共6页
为了评估南京地区奶牛呼吸道细菌群落结构和多样性,采集了南京周边地区奶牛场鼻咽拭子51份(后备牛14头,泌乳牛37头),提取总DNA,应用Illumina HiSeq高通量测序技术测定16S rRNA基因V3-V4可变区序列,分析细菌群落结构及多样性。细菌群落Al... 为了评估南京地区奶牛呼吸道细菌群落结构和多样性,采集了南京周边地区奶牛场鼻咽拭子51份(后备牛14头,泌乳牛37头),提取总DNA,应用Illumina HiSeq高通量测序技术测定16S rRNA基因V3-V4可变区序列,分析细菌群落结构及多样性。细菌群落Alpha多样性分析结果显示,Chao1和Ace指数相当,泌乳牛组Simpson指数显著高于后备牛组(P<0.05),Shannon指数显著低于后备牛组(P<0.05);Beta多样性分析显示,后备牛细菌群落多集中于4区,泌乳牛多集中于1区。51份样品中,细菌门水平丰度变形杆菌门为28.58%,厚壁菌门为22.66%,拟杆菌门为12.87%,且变形杆菌门在后备牛中的平均相对丰度为38.76%,泌乳牛中为24.69%,且二者存在显著差异(P<0.05);细菌属水平丰度莫拉氏菌属为6.86%,醋杆菌属为5.27%,伯杰菌属为3.66%。且莫拉氏菌属的丰度在泌乳牛和后备牛分别为8.68%和2.54%,醋杆菌属的丰度分别为6.46%和3.12%,泌乳牛均显著高于后备牛,二者存在显著差异(P<0.05)。结果表明,泌乳牛鼻腔黏液的物种多样性显著低于后备牛,且组内物种多样性差异小,相似度高,组间距离远,物种多样性差异大;变形杆菌门、厚壁菌门和拟杆菌门为门水平上的优势菌群,莫拉氏菌属、醋杆菌属为属水平上优势菌群。 展开更多
关键词 奶牛 呼吸道细菌群落 结构与多样性 16S rRNA 高通量测序
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海南省2024年春季猪、牛、羊口蹄疫免疫抗体的监测与分析 被引量:2
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作者 陈华美 罗丽华 李田美 《四川畜牧兽医》 2025年第6期20-22,共3页
为调查了解海南省2024年春季猪、牛、羊的口蹄疫免疫抗体水平,评估免疫效果,采用ELISA法对海南18个市县共计2084份猪、牛、羊血清样品进行O型和A型口蹄疫免疫抗体检测。结果得出:全省口蹄疫O型、A型免疫抗体合格率分别为94.00%、96.55%... 为调查了解海南省2024年春季猪、牛、羊的口蹄疫免疫抗体水平,评估免疫效果,采用ELISA法对海南18个市县共计2084份猪、牛、羊血清样品进行O型和A型口蹄疫免疫抗体检测。结果得出:全省口蹄疫O型、A型免疫抗体合格率分别为94.00%、96.55%,其中规模猪场、牛场、羊场的O型免疫抗体合格率分别为96.48%、95.24%、88.93%,牛、羊散养户的O型免疫抗体合格率分别为96.51%、94.78%;规模猪场、牛场、羊场的A型免疫抗体合格率分别为99.44%、98.02%%、93.32%,牛、羊散养户的A型免疫抗体合格率分别为98.54%、95.55%。综合来看,海南省2024年春季口蹄疫O型、A型的免疫效果整体较好,但个别市县的免疫抗体仅勉强合格,少数规模场、散养户的免疫抗体不合格,需要加强免疫。 展开更多
关键词 口蹄疫 免疫抗体 ELISA 猪、牛、羊 海南
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利用InlB蛋白检测小鼠血清中产单核细胞李氏杆菌抗体的间接ELISA建立
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作者 宁文晴 樊沪成 +1 位作者 张文鑫 杨晓雯 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第3期1766-1771,共6页
旨在建立一种快速有效的检测产单核细胞李氏杆菌(LM)感染样品的间接ELISA方法。本研究采用原核表达系统体外诱导表达InlB蛋白,通过优化并确定间接ELISA方法的最佳参数,建立间接ELISA方法。本研究发现,利用pColdⅡ-10×His载体能够... 旨在建立一种快速有效的检测产单核细胞李氏杆菌(LM)感染样品的间接ELISA方法。本研究采用原核表达系统体外诱导表达InlB蛋白,通过优化并确定间接ELISA方法的最佳参数,建立间接ELISA方法。本研究发现,利用pColdⅡ-10×His载体能够可溶性表达InlB蛋白;棋盘法优化后的条件为InlB蛋白包被浓度为4μg·mL^(-1),10%脱脂奶粉室温封闭2 h,血清最适稀释倍数为1∶400,37℃孵育1 h,酶标二抗最佳稀释度为1∶2 500,37℃避光显色8 min,阴阳性临界值为0.37。本研究建立的间接ELISA方法仅与产单核细胞李氏杆菌阳性血清反应,当血清稀释度为1∶800时检测仍为阳性;批内重复变异系数为2.79%~6.64%,批间重复的变异系数为2.61%~7.75%,重复性好;与商品化试剂盒相比,整体符合率为95.83%。本研究建立的LM感染样品的间接ELISA检测方法特异性强,敏感性高,可用于产单核细胞李氏杆菌感染样品的快速检测,为李斯特菌病的监测提供参考。 展开更多
关键词 产单核细胞李氏杆菌 InlB蛋白 间接酶联免疫吸附试验
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16S rRNA测序法及其在动物肠道微生物研究中的应用
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作者 张金宝 马春芳 +1 位作者 杨奇 郭许峰 《动物医学进展》 北大核心 2026年第1期109-114,共6页
动物肠道微生物的物种丰度大、群落结构和生长习性复杂,对动物机体免疫功能具有很好的调节作用,使得动物肠道微生物的研究成为难点和热点。传统的形态学和生化学鉴定方法已无法满足细菌鉴定的需求,核苷酸测序法逐步被科研学者所接受,在... 动物肠道微生物的物种丰度大、群落结构和生长习性复杂,对动物机体免疫功能具有很好的调节作用,使得动物肠道微生物的研究成为难点和热点。传统的形态学和生化学鉴定方法已无法满足细菌鉴定的需求,核苷酸测序法逐步被科研学者所接受,在初步形态鉴定的基础上,借助16S rRNA高通量测序法进一步进行细菌基因鉴定,可精准测定分析细菌种类。论文就16S rRNA高通量测序法在动物肠道微生物研究中的应用进展进行综述,旨在为动物肠道微生物相关进一步研究提供理论依据。 展开更多
关键词 16S Rrna 动物肠道 微生物
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鸭源F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定
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作者 沈莉萍 唐聪圣 +1 位作者 沈素芳 陈琦 《国外畜牧学(猪与禽)》 2025年第2期132-136,共5页
为确定上海某蛋鸭场蛋鸭发病死亡的原因,对病死鸭进行了病理剖检、病原检测和细菌分离培养,对分离株进行了药敏试验、生化鉴定、PCR种属和荚膜血清分型鉴定。结果显示,引起蛋鸭发病死亡的病原体为多杀性巴氏杆菌。该分离株对氨基糖苷类... 为确定上海某蛋鸭场蛋鸭发病死亡的原因,对病死鸭进行了病理剖检、病原检测和细菌分离培养,对分离株进行了药敏试验、生化鉴定、PCR种属和荚膜血清分型鉴定。结果显示,引起蛋鸭发病死亡的病原体为多杀性巴氏杆菌。该分离株对氨基糖苷类药物耐药,对四环素、复方新诺明、磺胺妥因、红霉素、头孢拉定、头孢曲松、恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星和阿莫西林10种抗生素均敏感。荚膜血清型PCR鉴定为F型多杀性巴氏杆菌,其基因序列与多杀性巴氏杆菌M和N的F型fcbD基因同源性为99.98%。本研究分离的鸭源F型多杀性巴氏杆菌为国内首次报道,为鸭霍乱的诊断与防治提供了一定参考依据。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 F型多杀性巴氏杆菌 蛋鸭
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阿坝州牛鼻拭子样品中细菌的分离鉴定
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作者 叶刚 文琦琦 +4 位作者 甘佳 杨浩澜 余忠华 张涛 刘昌林 《四川畜牧兽医》 2025年第5期23-25,共3页
为探究阿坝州部分牦牛场鼻腔微生物群落中的细菌多样性,通过随机采集阿坝州松潘县、马尔康市等地牦牛养殖场的牛鼻拭子样品(共42份),利用平板培养、有氧管纯化及16S rRNA基因测序技术,对分离出的细菌进行鉴定与分析。结果成功分离并鉴... 为探究阿坝州部分牦牛场鼻腔微生物群落中的细菌多样性,通过随机采集阿坝州松潘县、马尔康市等地牦牛养殖场的牛鼻拭子样品(共42份),利用平板培养、有氧管纯化及16S rRNA基因测序技术,对分离出的细菌进行鉴定与分析。结果成功分离并鉴定出多种细菌,包括Pantoea vagans、帕瓦氏窄养单胞菌、辛德勒不动杆菌、产气克雷伯菌、溶水芽孢杆菌、方蒂科拉沙雷氏菌、托约氏芽孢杆菌、热带芽孢杆菌、埃希氏菌属、院内不动杆菌、杀鲑气单胞菌、鲍曼不动杆菌、枫氏沙雷氏菌、太平洋芽孢杆菌、不动杆菌属、准霍马奇肠杆菌以及肺炎克雷伯菌。这些发现不仅丰富了我们对该地区牦牛鼻腔微生物组成的认识,也为后续研究牦牛疾病防控及养殖环境优化提供了重要的科学依据。 展开更多
关键词 牦牛 鼻拭子 细菌分离 纯化培养
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传染性喉气管炎病毒RAA检测方法的建立 被引量:2
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作者 冯婉莹 王转转 +9 位作者 刘一宁 陈光明 郭霄慧 李伟欣 李卫晴 张志强 李佩国 张召兴 吴同垒 贾青辉 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第2期212-218,共7页
为建立一种快速、高效、灵敏的传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)检测方法。提取ILTV的DNA作为模板,通过条件优化、敏感性和重复性分析,建立针对ILTV的重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法,同时使用禽... 为建立一种快速、高效、灵敏的传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)检测方法。提取ILTV的DNA作为模板,通过条件优化、敏感性和重复性分析,建立针对ILTV的重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法,同时使用禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)、传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)、新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的核酸进行检测,验证此方法的特异性;最后利用此方法对采集自河北省多家规模化养鸡场的59份临床样本进行检测,并与国家标准中的实时荧光定量(qPCR)和PCR方法进行对比分析。结果显示,本研究建立的RAA检测方法,其反应体系为缓冲液25.0μL、引物2.1μL、探针0.6μL、乙酸镁5.0μL、模板5.0μL,反应温度为39℃,扩增时间为20 min以内;该方法的灵敏度为10^(1) copies/μL,特异性检测100%;对59份临床样本检测结果显示,RAA荧光法与qPCR法均检出17份阳性,PCR法检出12份,RAA(荧光法)检出率与实时荧光定量与qPCR一致,高于PCR检测法。结果表明:RAA荧光法检测时间短,并有较好的特异性与灵敏度,可用于ILTV的快速检测。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 重组酶 RAA
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猪内源性逆转录病毒检测的三重PCR方法的建立及其在五指山猪组织样品检测中的初步应用 被引量:1
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作者 瑞雪 张云航 +7 位作者 李杨 谭晨 蔡艺菲 刘园园 曹宗喜 张艳 孙瑞萍 刘光亮 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3548-3554,共7页
本研究旨在建立可同时检测猪基因组中的猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)并鉴别PERV-A、PERV-B、PERV-C三种亚型PERV的三重PCR检测方法。根据PERV不同亚型囊膜(env)基因设计特异性引物,经反应条件和反应体系优... 本研究旨在建立可同时检测猪基因组中的猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)并鉴别PERV-A、PERV-B、PERV-C三种亚型PERV的三重PCR检测方法。根据PERV不同亚型囊膜(env)基因设计特异性引物,经反应条件和反应体系优化后对该方法进行特异性、敏感性及重复性试验验证。结果表明:本研究建立的三重PCR检测方法特异性强,可特异性扩增三种亚型PERV目的基因,对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒扩增结果呈阴性;该方法的敏感性较好,对PERV-A、PERV-B、PERV-C质粒标准品的检测下限分别为1×10^(2)、1×10^(3)和1×10^(2)拷贝·μL^(-1);采用建立的三重PCR方法检测103份组织样品,其中PERV-A的阳性率为100%(103/103),PERV-B的阳性率为100%(103/103),PERV-C的阳性率为54%(56/103),与经典单重PCR方法进行比较,符合率分别为100%、100%、96.6%。本研究成功建立了一种特异性强、敏感性较好、快速简便的三重PCR方法,可用于PERV三种亚型同时检测的鉴别诊断,为筛选无PERV的猪源供体器官提供技术支撑。 展开更多
关键词 猪内源性逆转录病毒 囊膜基因 三重PCR检测方法 组织样品
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奶牛乳房炎5种致病菌多重PCR检测方法的建立与应用 被引量:5
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作者 王雪容 张宇 +3 位作者 张海森 杨王浩 靳亚平 陈华涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期48-55,共8页
为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nu... 为建立一种能快速检测奶牛乳房炎主要病原菌(大肠埃希氏菌、无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌)的多重PCR检测方法,根据大肠埃希氏菌phoA基因、无乳链球菌ef-tu基因、肺炎克雷伯氏菌Khe基因、金黄色葡萄球菌Nuc基因和肠炎沙门氏菌invA基因设计特异性引物,优化PCR反应体系与反应程序并进行特异性试验,同时分别构建含病原菌基因的pMD-19T重组质粒进行灵敏性试验。结果显示,多重PCR反应的最适引物工作浓度为0.8μmol/L,最适退火温度为59.6℃,最佳延伸时间为40 s,最合适的循环数为30次;优化后的多重PCR反应体系可扩增出5种目标病原菌的特异性条带;5种病原菌PCR检测灵敏度可达到5 copies/μL。进一步利用该多重PCR反应体系对采集的108份乳房炎乳样进行检测,检测结果显示,108份样本的阳性检出率为77.8%,大肠埃希氏菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和肠炎沙门氏菌的检出率分别为23.1%、8.3%、34.3%、8.3%、5.6%。结果表明,建立了一种具有良好特异性和灵敏性的多重PCR检测方法,在临床生产实践中可用于快速鉴定奶牛乳房炎的致病菌,为奶牛乳房炎的诊断、防控与流行病学调查提供了方法基础。 展开更多
关键词 奶牛 乳房炎 病原菌 多重PCR
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云南省库蠓源蓝舌病病毒16型的分离鉴定 被引量:1
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作者 付嘉佳 李富祥 +4 位作者 王金萍 何于雯 谢佳芮 高华峰 李小兵 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第4期37-43,共7页
为了解云南省部分地区库蠓源蓝舌病病毒(BTV)流行情况,本试验于2023年7—10月分别从云南省昆明市宜良县和保山市龙陵县采集昆虫样品进行种属鉴定和虫媒病毒分离鉴定。基于昆虫的线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列进行BLAST序列... 为了解云南省部分地区库蠓源蓝舌病病毒(BTV)流行情况,本试验于2023年7—10月分别从云南省昆明市宜良县和保山市龙陵县采集昆虫样品进行种属鉴定和虫媒病毒分离鉴定。基于昆虫的线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列进行BLAST序列比对和种属鉴定。通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测、病毒分离培养、间接免疫荧光试验和病毒毒价测定对所获得的虫媒病毒进行分离和鉴定,以及遗传进化分析。结果显示,采集的昆虫样品分别属于尖音库蚊、隐匿库蠓、拜氏铗蠓和蠓科。其中,采自云南省保山市龙陵县的样品RT-PCR检测结果为BTV阳性,经BHK-21细胞连续传代培养,得到1株BTV分离株;间接免疫荧光试验结果显示,分离株能与BTV-16标准阳性血清发生特异性反应,初步确定该分离株为BTV-16,将其命名为YNLL-BTV16-2023,其毒价为10-5.1/0.1 mL。遗传进化分析结果显示,分离株VP2基因序列与2株日本分离株基因序列(GenBank登录号:LC586239.1和AB686220.1)核苷酸同源性最高,分别为97.20%和96.87%,VP3基因序列与中国云南省分离株VP3基因序列(GenBank登录号:MG564322.1)核苷酸同源性为99.26%,VP5基因序列与日本分离株(GenBank登录号:AB686236.1)核苷酸同源性为97.77%,VP7基因序列与2株中国分离株(GenBank登录号:AF172831.1和KT002584.1)核苷酸同源性均为98.80%。结果表明,云南省保山市龙陵县边境地区存在BTV-16毒株,该血清型病毒可通过隐匿库蠓携带。本试验为云南省边境地区BTV及其传播媒介的分布提供参考。 展开更多
关键词 隐匿库蠓 蓝舌病病毒16型(BTV-16) 分离和鉴定 遗传进化分析
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FoxO1对高NEFA诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子表达的影响 被引量:1
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作者 刘佳金 温小庆 +4 位作者 罗春海 贾红豆 王薇 李丹阳 付世新 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4708-4717,共10页
旨在探究叉头盒蛋白O1(fork head box O 1,FoxO1)对高浓度非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)状态下的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子表达变化的影响。通过实时荧光定量PCR法及Western blot法评价添加激活剂白藜芦醇(resvera... 旨在探究叉头盒蛋白O1(fork head box O 1,FoxO1)对高浓度非酯化脂肪酸(non-esterified fatty acids,NEFA)状态下的奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子表达变化的影响。通过实时荧光定量PCR法及Western blot法评价添加激活剂白藜芦醇(resveratrol)后沉默信息调节因子(silent information regulator 1,SIRT1)的表达效果,明确奶牛子宫内膜上皮细胞中FoxO1的表达情况。加入Resveratrol和高浓度的NEFA后,检测FoxO1通路关键因子及细胞凋亡相关因子蛋白的表达变化情况。与对照组相比,添加Resveratrol上调SIRT1的蛋白和mRNA表达水平(P<0.01),下调Ac-FoxO1蛋白表达水平(P<0.01);下调Caspase-3蛋白表达水平无显著影响(P>0.05),上调Bcl-2、Bcl-xl的蛋白表达水平(P<0.01),下调Bax和Bax/Bcl-2的蛋白表达水平(P<0.05)。与NEFA组相比,NEFA+Resveratrol组上调IGF-1、SIRT1和p-AKT蛋白表达水平(P<0.01),下调FoxO1、p-FoxO1、Ac-FoxO1、FoxO1/p-FoxO1、AKT和AKT/p-AKT蛋白表达水平(P<0.01),上调Bcl-xl和Bcl-2蛋白表达水平(P<0.01),下调Caspase-3、Bax和Bax/Bcl-2蛋白表达水平(P<0.01)。激光共聚焦检测结果显示,NEFA+Resveratrol组与NEFA组相比,抑制FoxO1的表达水平(P<0.01)。Resveratrol可有效激活SIRT1的表达,进而抑制FoxO1的表达,降低高浓度NEFA状态下奶牛子宫内膜上皮细胞中凋亡因子的表达水平。 展开更多
关键词 奶牛子宫内膜上皮细胞 非酯化脂肪酸 沉默信息调节因子1 叉头盒蛋白O1 凋亡因子
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化学发光免疫分析法及其在动物健康养殖中的应用 被引量:1
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作者 孙保 王牟平 +1 位作者 丁向彬 鄢明华 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期126-130,共5页
化学发光免疫分析法(CLIA)作为一种分析技术,以其高灵敏度和操作简便等诸多优点,在生命科学和临床诊断等领域中有着巨大的应用潜力,并在动物疾病诊断中扮演了举足轻重的角色。论文系统性地回顾了CLIA的基本原理和技术特点,以及该技术的... 化学发光免疫分析法(CLIA)作为一种分析技术,以其高灵敏度和操作简便等诸多优点,在生命科学和临床诊断等领域中有着巨大的应用潜力,并在动物疾病诊断中扮演了举足轻重的角色。论文系统性地回顾了CLIA的基本原理和技术特点,以及该技术的技术演进过程;围绕CLIA在动物健康养殖中的实际应用情况、存在的问题以及未来的发展趋势进行了深入探讨,以期为该技术在畜禽养殖生产检测领域的研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 化学发光免疫分析法 动物健康养殖 应用
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环介导等温扩增技术在动物细小病毒检测中的应用研究进展 被引量:1
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作者 赵志刚 郭晓芹 +3 位作者 赵传芳 吕文雪 于小亚 吕爽 《特产研究》 2025年第2期194-199,共6页
细小病毒能够引起多种动物发生烈性的传染病,具有高发病率和高死亡率。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal ampli-fication,LAMP)技术是一种新兴的体外核酸扩增技术,因其成本低廉、灵敏度和特异性良好,在病毒、细菌和寄生虫的病... 细小病毒能够引起多种动物发生烈性的传染病,具有高发病率和高死亡率。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal ampli-fication,LAMP)技术是一种新兴的体外核酸扩增技术,因其成本低廉、灵敏度和特异性良好,在病毒、细菌和寄生虫的病原检测和疾病监测等方面广受青睐。本文介绍了LAMP技术及其在动物细小病毒检测中的应用和研究进展,可为该技术在细小病毒检测中的充分运用提供可靠参考。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 细小病毒 检测
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超薄切片技术的优化及其在兽医领域的应用
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作者 史永红 陈秋生 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期170-177,共8页
超薄切片技术在兽医领域是极为重要的研究手段,但其通用制备程序在面对不同样品时,常难以取得高质量结果。本研究立足传统电镜技术,先优化羊皮肤超薄切片技术,再将优化方法应用于DTMUV感染鸭脑组织及BHK-21细胞、微孢子虫感染的三疣梭... 超薄切片技术在兽医领域是极为重要的研究手段,但其通用制备程序在面对不同样品时,常难以取得高质量结果。本研究立足传统电镜技术,先优化羊皮肤超薄切片技术,再将优化方法应用于DTMUV感染鸭脑组织及BHK-21细胞、微孢子虫感染的三疣梭子蟹肌肉组织和PRV感染的Vero细胞样品中,进行应用验证。优化方案包括:在常规固定液中添入4%多聚甲醛改良固定液,全程以丙酮作脱水剂,增设30%脱水步骤,100%脱水按10、15、20、30 min时间梯度进行,浸透时长延长至常规双倍并增用一部纯包埋剂。结果显示:经优化,能稳定获取平整且厚度均一的切片;同时,采用20%乙醇配制醋酸双氧铀溶液并延长染色时间至20 min,使得切片干净平整、无污染,染色反差良好;以75目大孔径载网捞片,显著扩大切片可观察区域。这些优化手段能制作出大视野、高质量的超薄切片,并在上述样品中得到验证,表明优化后的超薄切片技术可满足兽医超微形态学研究需求。 展开更多
关键词 超薄切片 透射电镜 皮肤 鸭坦布苏病毒 微孢子虫 伪狂犬病毒
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基于免疫磁珠的智能手机辅助比色传感平台用于PDCoV/TGEV IgG抗体的快速检测
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作者 刘君君 郭东辉 +6 位作者 刘缓缓 宋润泽 赵赛娅 杨钧尧 魏战勇 项玉强 陈丽颖 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4559-4571,共13页
本研究旨在建立灵敏、经济、便携和快速现场可视化检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)IgG抗体的方法。本研究分别将PDCoV和TGEV的N蛋白偶联到羧基磁珠表面形成“PDCoV-N/TGEV-N蛋白特异性IgG-酶标记抗体”三聚体复合... 本研究旨在建立灵敏、经济、便携和快速现场可视化检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)IgG抗体的方法。本研究分别将PDCoV和TGEV的N蛋白偶联到羧基磁珠表面形成“PDCoV-N/TGEV-N蛋白特异性IgG-酶标记抗体”三聚体复合物检测体系,建立基于免疫磁珠的间接ELISA方法,结合智能手机辅助比色传感平台,用于猪血清中PDCoV和TGEV IgG抗体的快速可视化检测。结果显示:以检测PDCoV IgG抗体为例,优化了免疫磁珠间接ELISA的反应条件,其最佳反应条件:磁珠用量25μg、抗原包被浓度5μg·mL^(-1)(30 min)、封闭液为2.5%BSA+脱脂奶粉混合液(37℃封闭2 h)、血清孵育60 min、酶标二抗1∶8000稀释(孵育30 min)、TMB显色10 min。在该最佳反应条件下,该方法对PDCoV和TGEV抗体检测效价分别达1∶32768和1∶8192,批内/批间变异系数均<8%,且与7种常见猪源病原体阳性血清无交叉反应。临床验证显示,与中和试验相比,80份样本的检测总符合率达95%(PDCoV)和96.25%(TGEV)。本研究建立的基于免疫磁珠的智能手机辅助比色传感平台的检测方法具有较高的特异性和敏感性,且重复性好,可用于PDCoV和TGEV临床血清样本的现场快速可视化检测,将为PDCoV/TGEV的流行病学调查和疫苗免疫效果评价提供可靠工具。 展开更多
关键词 免疫磁珠 猪丁型冠状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 N蛋白 智能手机 比色检测
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致牛流产病原体三重荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 王凯茸 马勇杰 +5 位作者 刘建行 王涛 张涛平 许伟督 张琪 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2025年第12期11-16,共6页
旨在建立能够同时检测牛家畜衣原体(Chlamydia pecorum)、布鲁氏菌(Brucella)及贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)3种常见致牛流产病原体的多重荧光定量PCR技术。分别基于C.pecorum、Brucella和C.burneti的特异性基因ompA、IS711和com1,... 旨在建立能够同时检测牛家畜衣原体(Chlamydia pecorum)、布鲁氏菌(Brucella)及贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii)3种常见致牛流产病原体的多重荧光定量PCR技术。分别基于C.pecorum、Brucella和C.burneti的特异性基因ompA、IS711和com1,运用Oligo7和Primer5软件进行引物与探针设计,建立一种能够同时检测3种病原的Taq Man多重荧光定量PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏性与重复性进行评价。结果显示,该方法所建立的标准曲线线性关系良好;使用优化后的条件可以特异性扩增C.pecorum、Brucella和C.burneti,且与其他病原无交叉反应;各目的基因的最低检出限分别为4.54×10^(1)copies/μL(C.pecorum)、4.67×10^(1)copies/μL(Brucella)和1.04×10^(1)copies/μL(C.burnetii),与普通PCR相比,灵敏度高出100倍;批次内和批次间试验均变异系数小于4%。用建立的方法对103份临床样品分别进行荧光定量检测并与常规单一PCR检测相比较,结果显示,两种检测方法的符合率为100%(C.pecorum)、92.9%(Brucella)、100%(C.burnetii)。该方法为家畜衣原体、布鲁氏菌和贝氏柯克斯体等病原体在临床上和实验室的鉴别提供了检测技术。 展开更多
关键词 家畜衣原体 布鲁氏菌 贝氏柯克斯体 Taq Man多重荧光定量PCR
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