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甲型H1N1流感病毒NS1蛋白核仁定位的研究
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作者 赵宗正 涂加钢 +3 位作者 张文婷 胡勇 周红波 金梅林 《中国动物传染病学报》 CAS 2012年第3期12-16,共5页
为研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的核仁定位情况,采用RT-PCR对其NS1基因进行了扩增,将其克隆至PEGX-KG载体,构建重组质粒KG-NS1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白。然后采用GST柱亲和层析方法纯化NS1重组蛋白,免疫家兔来... 为研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的核仁定位情况,采用RT-PCR对其NS1基因进行了扩增,将其克隆至PEGX-KG载体,构建重组质粒KG-NS1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白。然后采用GST柱亲和层析方法纯化NS1重组蛋白,免疫家兔来制备多抗,Western blot检测抗体。通过间接免疫荧光对表达不同长度NS1(NS1-219、NS1-230、NS1-237)的3种重组流感病毒进行了核仁定位的研究,3种重组毒的NS1蛋白存在于细胞核和细胞质,但都不能定位于核仁,说明NS1蛋白的截短与否并不影响其核仁定位,其生物学意义有待于进一步研究。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 NS1 多克隆抗体 核仁定位
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