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旋毛虫核激素受体NHR-23克隆表达和特性分析
1
作者 李嫄 冯佳俊 +5 位作者 张玉恒 徐立新 陆明敏 宋小凯 李祥瑞 严若峰 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期1034-1045,共12页
本文旨在评估旋毛虫核激素受体-23(NHR-23)的生物学特性及其疫苗开发潜力。通过克隆表达得到纯化的重组TsNHR-23蛋白(rTsNHR-23),Western blot分析其反应原性,qPCR分析TsNHR-23基因在旋毛虫不同发育阶段的转录水平。体外试验利用抗rTsNH... 本文旨在评估旋毛虫核激素受体-23(NHR-23)的生物学特性及其疫苗开发潜力。通过克隆表达得到纯化的重组TsNHR-23蛋白(rTsNHR-23),Western blot分析其反应原性,qPCR分析TsNHR-23基因在旋毛虫不同发育阶段的转录水平。体外试验利用抗rTsNHR-23多克隆抗体分析对肌肉幼虫蜕皮的抑制,并探究该蛋白对小鼠巨噬细胞炎性细胞因子分泌的影响。将PLGA纳米颗粒包被的rTsNHR-23蛋白免疫ICR小鼠,通过检测小鼠血清中IgG抗体水平的变化、细胞因子IGF-1、IL-6和TGF-β的变化并计算减虫率,评估rTsNHR-23蛋白的免疫保护效果。结果表明,TsNHR-23基因在旋毛虫的不同发育阶段均存在转录,且在肌肉幼虫阶段的转录水平最高。抗rTsNHR-23的多克隆抗体能够显著降低肌肉幼虫的蜕皮率,也可有效抑制蜕皮进程的发展。rTsNHR-23蛋白能够显著提高小鼠巨噬细胞IL-1β、IL-6、IL-10的转录水平。免疫保护试验显示rTs-NHR-23蛋白免疫小鼠后,与对照组相比,小鼠血清中IgG抗体水平极显著升高,首次免疫后IGF-1显著下降,IL-6及TGF-β升高;二次免疫后,IGF-1部分回升,TGF-β则显著下调。攻虫后,与对照组相比,小鼠体内旋毛虫成虫数量、平均每条雌虫产生的新生幼虫数量以及肌肉幼虫数量均显著下降。综上所述,旋毛虫重组NHR-23蛋白对肌肉幼虫的蜕皮具有显著抑制作用,将该蛋白免疫小鼠后,荷虫量显著下降,具有作为疫苗候选抗原的潜力。 展开更多
关键词 旋毛虫 核激素受体 巨噬细胞 免疫保护
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新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫感染情况调查
2
作者 王涛 阎晓菲 +4 位作者 王旖旎 赵怡阳 孙鑫 陈胜涛 王楠 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1897-1909,共13页
旨在为掌握新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫种类及感染情况,对新疆岩蜥(Laudakia stoliczkana)、吐鲁番麻蜥(Eremias roborowskii)和叶城沙蜥(Phrynocephalus axillaris)共计127只蜥蜴进行胃肠道线虫检查,采用剖检法分离胃肠道线虫... 旨在为掌握新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫种类及感染情况,对新疆岩蜥(Laudakia stoliczkana)、吐鲁番麻蜥(Eremias roborowskii)和叶城沙蜥(Phrynocephalus axillaris)共计127只蜥蜴进行胃肠道线虫检查,采用剖检法分离胃肠道线虫,进行形态学鉴定。使用卡方检验和单因素方差分析对三种不同荒漠蜥蜴性别间、头体长(snout-vent length, SVL)间、体重间的感染率和感染强度进行差异性分析。结果显示:三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫总感染率为28.35%,新疆岩蜥感染率为100%,吐鲁番麻蜥感染率为27.59%,叶城沙蜥感染率为22.22%;新疆岩蜥胃肠道线虫感染率和感染强度极显著高于吐鲁番麻蜥和叶城沙蜥,其雄性感染强度显著高于雌性;较大体型的感染强度更高。基于虫种形态特征鉴定出三种优势虫种为泡翼科Abbreviata属线虫、咽齿科Spauligodon属线虫和咽齿科Parapharyngodon属线虫,均为中国新纪录属。本研究对新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫进行感染情况调查及影响因素分析,不仅为新疆荒漠蜥蜴寄生虫多样性研究积累重要数据资料,还可为荒漠蜥蜴保护及开发利用提供重要理论支撑。 展开更多
关键词 吐哈盆地 荒漠蜥蜴 胃肠道线虫 新纪录属
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朱鹮源胃瘤线虫的鉴定 被引量：2
3
作者 许丹娜 李京宇 +5 位作者 郭如海 王俊伟 陈曦 宋军科 王兴龙 赵光辉 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期95-99,共5页
为明确朱鹮源胃线虫的种类,从陕西秦岭地区1只野外死亡的朱鹮(Nipponia nippon)的肌胃和腺胃分离了15条线虫,首先用乳酚透明液对虫体进行处理,然后利用显微镜对虫体形态特征进行观察,最后对随机选取的4条虫体样本的核糖体内转录间隔区(I... 为明确朱鹮源胃线虫的种类,从陕西秦岭地区1只野外死亡的朱鹮(Nipponia nippon)的肌胃和腺胃分离了15条线虫,首先用乳酚透明液对虫体进行处理,然后利用显微镜对虫体形态特征进行观察,最后对随机选取的4条虫体样本的核糖体内转录间隔区(ITS)基因进行了扩增、测序和遗传进化分析。结果发现,虫体形态特征与胃瘤线虫(Eustrongylides sp.)一致,获得的ITS基因序列包括350 bp的ITS 1基因序列和343 bp的ITS 2基因序列,4条ITS 1和ITS 2基因序列的相似性分别为99.5%~100%和99.2%~100%;种系发育关系分析发现朱鹮源胃线虫与普通胃瘤线虫(E.excisus)亲缘关系最近,但二者的ITS 1和ITS 2基因序列的相似性仅为96.8%~97.3%和95.6%~96.4%。结果表明,分离的朱鹮源胃线虫可能为一新种,暂时命名为朱鹮胃瘤线虫(E.nipponia nippon)。研究结果为野生朱鹮胃线虫病的防控提供了基础数据。 展开更多
关键词 朱鹮 胃瘤线虫 形态学 ITS基因
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犬弓首蛔虫感染性幼虫宿主血清反应性微RNA的鉴定与功能分析 被引量：1
4
作者 陈宜 杨一帆 +5 位作者 陈学秋 熊志威 杨晨雨 杨怡 马光旭 杜爱芳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第3期483-491,共9页
弓首蛔虫病是一种被严重忽视的人畜共患寄生虫病,呈世界性分布,主要由弓首蛔虫的感染性幼虫在人及多种动物体内移行所致。本研究以犬弓首蛔虫组织移行的第1个环节“侵入宿主”为切入点,首先用5%健康小鼠血清体外刺激孵化的犬弓首蛔虫感... 弓首蛔虫病是一种被严重忽视的人畜共患寄生虫病,呈世界性分布,主要由弓首蛔虫的感染性幼虫在人及多种动物体内移行所致。本研究以犬弓首蛔虫组织移行的第1个环节“侵入宿主”为切入点,首先用5%健康小鼠血清体外刺激孵化的犬弓首蛔虫感染性幼虫,然后提取虫体样本的总RNA进行小RNA测序,最后开展处理组与未处理组的虫体微RNA(microRNA, miRNA)差异表达分析及靶基因预测。结果显示:在4个处理组样本和4个未处理组样本中共检测到972个miRNAs,其中血清刺激造成15个miRNAs的转录水平发生显著变化;靶基因预测发现,这些转录水平发生显著变化的miRNAs靶向宿主免疫细胞黏附与迁移、嗅觉转导等相关基因,在寄生虫与宿主互作中发挥作用。本研究鉴定到一组具有宿主血清反应性的犬弓首蛔虫感染性幼虫miRNAs,为其在感染宿主、免疫调控以及致病中的具体作用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬弓首蛔虫 血清反应性 微RNA 感染与免疫 致病
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云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况调查分析 被引量：1
5
作者 董路 段博芳 +6 位作者 杨建发 杨红梅 李坤 马洲 董星和 李永华 邹丰才 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期123-128,共6页
为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫... 为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫;PCR扩增显示:5份样品为广州管圆线虫阳性,总阳性率为0.111%(5/4502);不同地区间,昆明市阳性率最高(0.231%,4/1734),德宏州(0.221%,1/453)次之;不同淡水螺种类中,福寿螺阳性率为0.192%(4/2081),环棱螺阳性率为0.160%(1/624),其余3种螺未检出;不同采样环境下,农贸市场阳性率为0.192%(4/2083),野外环境阳性率为0.041%(1/2419)。不同螺种类和采样环境感染率有统计学意义(P<0.05)。研究结果获悉了云南省部分淡水螺广州管圆线虫的感染情况,为云南省广州管圆线虫病的防控提供了重要基础数据。 展开更多
关键词 淡水螺 广州管圆线虫 ITS基因 感染
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旋毛虫乳酸脱氢酶基因的克隆表达及组织定位
6
作者 牛栋玉 张念章 +5 位作者 李文卉 刘垠鞠 秦洪涛 张永芝 殷宏 付宝权 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第4期463-469,共7页
为了研究旋毛虫乳酸脱氢酶(TsLDH)的反应原性及组织分布特点,从GenBank中获取TsLDH基因序列进行生物信息学分析,设计引物对其进行RT-PCR扩增,将PCR产物连接到pET-30a质粒构建重组表达质粒pET30a-TsLDH,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达... 为了研究旋毛虫乳酸脱氢酶(TsLDH)的反应原性及组织分布特点,从GenBank中获取TsLDH基因序列进行生物信息学分析,设计引物对其进行RT-PCR扩增,将PCR产物连接到pET-30a质粒构建重组表达质粒pET30a-TsLDH,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组蛋白rTsLDH纯化后,通过Western-blot进行反应原性分析,与弗氏佐剂混合免疫家兔,采血分离血清,用间接ELISA方法检测家兔抗rTsLDH多克隆抗体效价。并利用纯化后的家兔抗rTsLDH抗体对TsLDH进行组织定位。经优化后在37℃,200 r/min,1 mmol/L IPTG诱导条件下成功表达重组蛋白rTsLDH,其分子质量约为39.4 kDa,且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析表明重组蛋白rTsLDH可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有反应原性。多克隆抗体效价为1∶5.12×10^(5)。组织定位结果显示,TsLDH存在于旋毛虫3个发育时期的体表及杆状体中,且在成虫时期可分泌到宿主肠组织周围,但不能分泌到感染的肌肉组织中。结果表明rTsLDH具有良好的反应原性,且TsLDH存在于虫体的各个时期,为旋毛虫病诊断候选抗原及药物靶标筛选提供了依据。 展开更多
关键词 旋毛虫 乳酸脱氢酶 反应原性 免疫组化定位
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蟾蜍棒线虫线粒体全基因组特征分析
7
作者 杨彦 胡雁鸣 +8 位作者 丁健 李犇 何雨桐 刘雪薇 王佳文 兰卓 邱鸿宇 高俊峰 王春仁 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3190-3201,共12页
【目的】获得蟾蜍棒线虫(Rhabdias bufonis)线粒体全基因组并分析其特征。【方法】通过PCR扩增蟾蜍棒线虫线粒体基因组序列,利用测序、注释、组装、拼接,获得线虫线粒体全基因组,对其进行序列分析;以湖沼驼形线虫(Camallanus lacustris... 【目的】获得蟾蜍棒线虫(Rhabdias bufonis)线粒体全基因组并分析其特征。【方法】通过PCR扩增蟾蜍棒线虫线粒体基因组序列,利用测序、注释、组装、拼接,获得线虫线粒体全基因组,对其进行序列分析;以湖沼驼形线虫(Camallanus lacustris)为外群,基于线粒体12个蛋白质编码基因(PCGs)氨基酸串联序列,采用邻接法(Neighbor-Joining,NJ)和贝叶斯法(Bayesian inference,BI)构建系统发育树进行进化分析。【结果】蟾蜍棒线虫线粒体基因组为环形结构,全长为14208 bp,由12个PCGs、22个转运RNA(tRNAs)、2个核糖体RNA(rRNAs)和2个非编码控制区组成;其线粒体基因组碱基组成中AT含量为75%、GC含量为25%,AT偏倚(AT-skew)为0.26,GC偏倚(GC-skew)为―0.36,呈现明显的AT偏向性。PCGs以ATG、GTG作为起始密码子,以TGA、TAA及不完整的TA-作为终止密码子。tRNAs二级结构分析显示,除trnS2和trnH基因缺少二氢尿嘧啶(DHU)臂外,其余均为典型的三叶草结构。系统进化树分析显示,垫刃亚目(Tylenchina)分为两个大的分支,首叶超科(Cephaloboidea)和垫刃超科(Tylenchoidea)形成分支Ⅰ,类圆超科(Strongyloidoidea)、斯氏超科(Steinernematoidea)、滑刃超科(Aphelenchoidea)及Panagrolaimoidea形成分支Ⅱ;在分支Ⅱ中,斯氏科(Steinernematidae)和棒线科(Rhabdiasidae)聚集在一起再与滑刃科(Aphelenchoidiae)和Panagrolaimidae形成的另一姐妹支形成一个大的分支,而类圆科(Strongyloididae)则独立形成另一个大的分支;林蛙源蟾蜍棒线虫与蟾蜍源蟾蜍棒线虫(OR725306)聚集在一起,两者关系较其他两株Rhabdias kafunata亲缘关系近;寄生于两栖类棒线虫与昆虫斯氏线虫聚为一支,且与寄生于植物的滑刃科线虫亲缘关系较寄生于哺乳动物的类圆线虫近。【结论】本研究成功获得林蛙源蟾蜍棒线虫线粒体全基因组序列,且斯氏科与棒线科的亲缘关系明显近于类圆科,支持斯氏超科作为独立分类阶元的有效性,斯氏科应归于斯氏超科。试验结果为棒线科线虫的分类学、群体遗传学和系统发育学的研究提供了基础资料。 展开更多
关键词 蟾蜍棒线虫 线粒体基因组 序列分析 遗传进化分析
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青藏高原地区分离的叶氏夏柏特线虫鉴定及其遗传进化分析
8
作者 简莹娜 李秀萍 +2 位作者 马利青 王光华 张学勇 《青海畜牧兽医杂志》 2025年第2期32-38,共7页
为鉴定分离到的线虫种类及其遗传进化特征,本研究通过对该线虫进行形态学特征观察,采用线虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该线虫。形态学特征观察结果显示,线虫为幼虫,长约200~300μm,虫卵呈椭圆形,虫卵长约85~132μm,宽... 为鉴定分离到的线虫种类及其遗传进化特征,本研究通过对该线虫进行形态学特征观察,采用线虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该线虫。形态学特征观察结果显示,线虫为幼虫,长约200~300μm,虫卵呈椭圆形,虫卵长约85~132μm,宽42~56μm;PCR结果显示,在约440 bp处出现与预期目的片段大小相符的条带。测序结果显示,该基因序列与叶氏夏柏特线虫(Chabertia erschowi)cox1基因序列的同源性高达99.09%,初步表明该线虫为C.erschowi。采用C.erschowi的ITS2特异性基因引物经PCR进一步鉴定并测序。将2个基因测序结果与GenBank登录的C.erschowi的相应基因序列比对,分析它们之间的同源性,并构建这2个基因的进化树,分析它们之间的遗传进化关系。PCR结果显示,扩增到约330 bp(ITS2)的目的条带。同源性分析结果显示,ITS2基因序列与GenBank登录的C.erschowi相应基因序列的同源性最高分别达100.00%。进化树结果显示,该虫株的2个基因均与不同宿主的C.erschowi处于同一分支。本研究成功鉴定了分离的线虫为叶氏夏柏特线虫,并分析其线粒体基因同源性及遗传演化关系,为叶氏夏柏特线虫的分类、鉴定和种群遗传进化分析及分子流行病学调查等奠定了研究基础。 展开更多
关键词 叶氏夏柏特线虫 线虫 鉴定 遗传进化
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旋毛虫C型凝集素的表达及其对小鼠的免疫调节作用
9
作者 秦千策 宋军澎 +2 位作者 Mahdi Borhani 张藜潇 丁静 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第4期441-448,共8页
探讨旋毛虫C型凝集素(TsCTL)对小鼠的免疫调节作用。将TsCTL基因(GenBank登录号KRY42391.1)克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)-TsCTL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组TsCTL(rTsCTL)纯化、复性,并通过West... 探讨旋毛虫C型凝集素(TsCTL)对小鼠的免疫调节作用。将TsCTL基因(GenBank登录号KRY42391.1)克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)-TsCTL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组TsCTL(rTsCTL)纯化、复性,并通过Western-blot鉴定,同时测定内毒素水平。使用rTsCTL刺激小鼠脾细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,并采用qPCR检测脾细胞转录因子的表达水平。将10只C57BL/J小鼠随机分为对照组(n=5)和实验组(n=5)。实验组小鼠每只皮下注射50μg的rTsCTL(溶解在200μL PBS中),每周3次,持续4周。对照组则使用等量的PBS进行相同处理。收集实验组和对照组小鼠的脾细胞,并使用ELISA和qPCR检测细胞因子和转录因子的表达水平。最后,采用流式细胞术检测调节性T细胞的增殖情况。结果显示:rTsCTL对脾细胞无毒性。qPCR结果表明,rTsCTL能够提高小鼠脾细胞中Gata3和Foxp3的表达水平,同时降低T-bet的表达水平。动物实验的qPCR结果与细胞实验的结果一致。ELISA结果显示,rTsCTL促进了TGF-β和IL-4的表达,而抑制了IFN-γ的表达。流式细胞术检测结果表明,rTsCTL能够增加调节性T细胞的比例。这些结果表明,rTsCTL可以促进Th2型免疫反应,并抑制Th1型免疫反应。 展开更多
关键词 旋毛虫 C型凝集素 免疫调节
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1例犬疑似广州管圆线虫感染的病例报告
10
作者 陈华媛 陈思远 +3 位作者 李庆 龚莫锋 余杰洲 李少川 《广东畜牧兽医科技》 2025年第6期112-115,124,共5页
犬神经性血管线虫病(CNA)是由广州管圆线虫感染引起的一种以严重的神经功能障碍为主要症状的寄生虫病。国内尚未有关于广州管圆线虫感染病例的报道。该病例是1头5岁的雄性比熊犬,疑似因误食非洲大蜗牛后出现后肢瘫痪来就诊。经临床检查... 犬神经性血管线虫病(CNA)是由广州管圆线虫感染引起的一种以严重的神经功能障碍为主要症状的寄生虫病。国内尚未有关于广州管圆线虫感染病例的报道。该病例是1头5岁的雄性比熊犬,疑似因误食非洲大蜗牛后出现后肢瘫痪来就诊。经临床检查、血液学检查、脑脊液检查、核磁共振成像(MRI)和PCR检查后,症状符合广州管圆线虫感染,但因患犬就诊三天后死亡,未进行治疗,且未进行CSFPCR检测,故高度怀疑该病例为国内首例广州管圆线虫感染。该文通过对该病例的分析讨论,从临床症状,检测方法以及防控管理进行探究,以期为相关的临床诊疗提供参考。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 犬 犬神经性血管线虫病 神经功能障碍 瘫痪
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黄鳝胃瘤线虫的分子鉴定与系统发育分析
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作者 许晓琳 仇松寅 +5 位作者 袁向芬 刘晓飞 王慧煜 孔玉方 王彩霞 吴绍强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第12期45-51,共7页
对北京市某市场购买的黄鳝腹腔内寄生的虫体进行了鉴定,并探讨其与胃瘤线虫分离株的系统进化关系。提取虫体DNA并PCR扩增18 S rRNA基因和ITS基因,PCR扩增产物纯化并连接载体后,挑取单克隆进行测序。运用MegAlign软件分析核苷酸同源性,使... 对北京市某市场购买的黄鳝腹腔内寄生的虫体进行了鉴定,并探讨其与胃瘤线虫分离株的系统进化关系。提取虫体DNA并PCR扩增18 S rRNA基因和ITS基因,PCR扩增产物纯化并连接载体后,挑取单克隆进行测序。运用MegAlign软件分析核苷酸同源性,使用MEGA X软件采用邻接法构建基于18S rRNA和ITS基因序列的系统进化树,进一步分析分离虫株的种内与种间的系统发育关系。结果表明,分离虫体的18S rRNA和ITS基因与胃瘤线虫的核苷酸序列同源性最高,均为100%。基于18S rRNA基因序列构建的系统进化树显示,分离虫株与日本、澳大利亚、土耳其胃瘤线虫分离株进化关系最近;基于ITS序列构建的系统进化树显示,分离虫株与中国胃瘤线虫分离株进化关系最近。根据序列同源性和系统发育分析结果,鉴定分离的虫株为胃瘤线虫。 展开更多
关键词 胃瘤线虫 黄鳝 18S rRNA基因 ITS基因 系统发育分析
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犬弓首蛔虫超氧化物歧化酶的免疫保护性分析
12
作者 吴天乐 游怡宁 +3 位作者 王磊 王冰楠 孙雪 周荣琼 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第1期66-73,共8页
为探究犬弓首蛔虫(Toxocara canis,T.canis)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)对小鼠的免疫保护效果,选取75只6周龄昆明系小鼠随机分为5组进行免疫保护试验,分别于试验0、14、28 d对每只小鼠皮下注射50、75和125 mg/L的Tc-SOD 0... 为探究犬弓首蛔虫(Toxocara canis,T.canis)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)对小鼠的免疫保护效果,选取75只6周龄昆明系小鼠随机分为5组进行免疫保护试验,分别于试验0、14、28 d对每只小鼠皮下注射50、75和125 mg/L的Tc-SOD 0.1 mL,空白组不做任何处理,PBS组注射等量的无菌PBS。共免疫3次,每次免疫间隔14 d;第3次免疫后14 d,经口感染3000个/只感染性虫卵。在每次免疫前、第3次免疫后14 d和攻虫后7 d对小鼠尾静脉采血并分离血清,采用间接ELISA法检测血清中特异性IgG抗体;通过CCK-8和qRT-PCR法分析小鼠脾淋巴细胞的增殖能力及Th1(IFN-γ,IL-2)和Th2(IL-4,IL-10)型细胞因子mRNA的表达水平;计算攻虫后7 d的幼虫减虫率并采用苏木精-伊红(H&E)染色观察肝脏和肺脏的病理变化。结果显示,与PBS组相比,Tc-SOD免疫组小鼠血清IgG抗体水平随着免疫次数的增加和时间延长而升高,攻虫感染后仍维持在较高水平,差异极显著(P<0.001)。三免后14 d,IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的mRNA表达水平均极显著增高(P<0.01),其中IL-4和IL-10显著高于IFN-γ和IL-2(P<0.05),表现为Th2型为主的免疫反应。小鼠脾淋巴细胞的增殖能力显著增强(P<0.01)。50、75和125 mg/L的Tc-SOD免疫组的幼虫减虫率分别为18.7%、24.9%、37.6%,其中125 mg/L Tc-SOD组差异显著(P<0.05),具有较好的免疫保护效果。H&E染色结果显示,3个Tc-SOD免疫组均缓解了小鼠肝脏和肺脏的炎性细胞浸润(中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨噬细胞)和出血性病变。上述研究结果表明,Tc-SOD可诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,以Th2型免疫反应为主,并对T.canis的感染具有一定程度的免疫保护作用。 展开更多
关键词 小鼠 犬弓首蛔虫 超氧化物歧化酶 免疫应答
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宁夏羊胃肠道线虫对现行驱虫药的抗药性调查 被引量：14
13
作者 蔡葵蒸 杨晓野 +12 位作者 王晓亮 郝成 马桂花 杨风宝 房彦宾 宗旭斌 任德新 刘珍莲 张玉玲 李昕 周进勤 杨安 赵亚峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期491-495,共5页
采用粪便虫卵减少试验对宁夏地区所属灵武、贺兰、盐池、吴忠、中宁、中卫、永宁和银川市郊8个县(市)的12个绵羊场、6个山羊场进行了丙硫苯咪唑和阿维菌素抗药性的随机调查。结果表明:在用丙硫苯咪唑调查的10个绵羊场和6个山羊场中,虫... 采用粪便虫卵减少试验对宁夏地区所属灵武、贺兰、盐池、吴忠、中宁、中卫、永宁和银川市郊8个县(市)的12个绵羊场、6个山羊场进行了丙硫苯咪唑和阿维菌素抗药性的随机调查。结果表明:在用丙硫苯咪唑调查的10个绵羊场和6个山羊场中,虫卵减少率在95%以下和95%的置信域下限在90%以下的有山羊场2个、绵羊场2个,证明对丙硫苯咪唑有抗药性;1个绵羊场和1个山羊场的虫卵减少率是96.3%、95.9%,但95%置信域的下限在90%以下,具有抗药性可疑;山羊群中丙硫苯咪唑的抗药性为33.3%,绵羊群为20.0%。用同样的方法调查了1个山羊场和5个绵羊场(其中有4个羊场曾执行了丙硫苯咪唑的试验),查出1个山羊场和1个绵羊场对阿维菌素具有抗药性可疑,其虫卵减少率分别为97.3%和95.5%,置信域下限在90%以下。揭示了宁夏地区羊消化道线虫对现行驱虫药的抗药状态,为今后防治提供了依据。 展开更多
关键词 驱虫药 抗药性 绵羊 山羊 胃肠道线虫 丙硫苯咪唑 阿维菌素
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猪食道口线虫ITS-1和ITS-2rDNA的PCR-SSCP分析 被引量：13
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作者 林瑞庆 张新高 +4 位作者 胡友兰 李国清 翁亚彪 宋慧群 朱兴全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期323-326,331,共5页
以采自我国不同地区猪体的食道口线虫虫株为研究对象,PCR扩增出ITS-1和ITS-2序列片段,然后采用单链构象多态性(SSCP)方法分析PCR产物,对不同地区食道口线虫进行分子鉴定。所有样品经SSCP分析显示两种带型,第一种为有齿食道口线虫带型,... 以采自我国不同地区猪体的食道口线虫虫株为研究对象,PCR扩增出ITS-1和ITS-2序列片段,然后采用单链构象多态性(SSCP)方法分析PCR产物,对不同地区食道口线虫进行分子鉴定。所有样品经SSCP分析显示两种带型,第一种为有齿食道口线虫带型,另一种为未定种食道口线虫带型。代表性样品的测序结果表明,未定种食道口线虫带型的样品为四棘食道口线虫。本研究在国际上首次报道了中国猪四棘食道口线虫的ITS序列,并建立了区分有齿食道口线虫和四棘食道口线虫的PCR-SSCP方法,从而为食道口线虫的分子生物学的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 食道口线虫 ITS-1 ITS-2 单链构象多态性(SSCP) 猪
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大熊猫等八种野生珍稀动物蛔虫ITS-2基因的序列分析 被引量：9
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作者 何光志 牛李丽 +6 位作者 杨光友 邓家波 王帅 余星明 汪涛 古小彬 陈维刚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期933-938,共6页
为了探讨寄生在大熊猫、小熊猫、黑猩猩、白眉长臂猿和4种熊科动物(北极熊、棕熊西藏亚种、狗熊四川亚种和棕熊东北亚种)体内蛔虫的分类地位,测定了核糖体第二内转录间隔区(ITS-2)基因序列,并对这些序列进行同源性分析和采用UPGMA法构... 为了探讨寄生在大熊猫、小熊猫、黑猩猩、白眉长臂猿和4种熊科动物(北极熊、棕熊西藏亚种、狗熊四川亚种和棕熊东北亚种)体内蛔虫的分类地位,测定了核糖体第二内转录间隔区(ITS-2)基因序列,并对这些序列进行同源性分析和采用UPGMA法构建分子系统树。结果表明:寄生在大熊猫、小熊猫和4种熊科动物体内的蛔虫均为贝蛔属蛔虫;寄生在黑猩猩和白眉长臂猿体内的蛔虫为蛔属蛔虫。分析结果提示蛔虫与宿主之间存在协同进化关系。 展开更多
关键词 大熊猫 野生珍稀动物 蛔虫 核糖体ITS-2基因 序列分析 协同进化
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弓首蛔虫线粒体cox1基因的多态性研究 被引量：14
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作者 李明伟 林瑞庆 +4 位作者 邹丰才 宋慧群 曹湛 何芳 朱兴全 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期386-390,共5页
应用PCR SSCP技术和DNA 序列分析对犬弓首蛔虫(Toxocara canis)线粒体DNA(mtDNA)中的细胞色素c氧化酶第I亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)进行了分析研究,并与弓首属的猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫及弓蛔属的狮弓蛔虫进行了... 应用PCR SSCP技术和DNA 序列分析对犬弓首蛔虫(Toxocara canis)线粒体DNA(mtDNA)中的细胞色素c氧化酶第I亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)进行了分析研究,并与弓首属的猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫及弓蛔属的狮弓蛔虫进行了种间比较。结果显示,犬弓首蛔虫种群内的pcox1 序列差异为2.72%,与马来西亚弓首蛔虫种群间的序列差异为11.38%,与猫弓首蛔虫种群间的序列差异为11. 20%,与牛弓首蛔虫种群间的序列差异为10.40%,与狮弓蛔虫种群间的序列差异为11.48%;马来西亚弓首蛔虫种群内的pcox1 序列差异为0.57%,与猫弓首蛔虫的序列差异为8.23%,与牛弓首蛔虫的序列差异为8.70%,与狮弓蛔虫的序列差异为10.60%。研究证实,犬弓首蛔虫不同地方虫株的pcox1 有一定差异,与同属其他种类及狮弓蛔虫的差异较大;马来西亚弓首蛔虫确为一独立种。 展开更多
关键词 弓首蛔虫 线粒体DNA cox1基因 PCR—SSCP
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秀丽隐杆线虫的培养与保存研究 被引量：16
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作者 李有全 关贵全 +3 位作者 彭欲率 何海宁 罗建勋 殷宏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1001-1004,共4页
比较了在OP50-NGM、JM109-NGM、OP50-LB、JM109-LB四种不同培养基上秀丽隐杆线虫的生长效果;测定了在三种温度和含不同甘油浓度冻存液中的虫体保存效果。结果显示,秀丽隐杆线虫在OP50-NGM培养基中生长良好,在JM109-LB培养基中生长较差。... 比较了在OP50-NGM、JM109-NGM、OP50-LB、JM109-LB四种不同培养基上秀丽隐杆线虫的生长效果;测定了在三种温度和含不同甘油浓度冻存液中的虫体保存效果。结果显示,秀丽隐杆线虫在OP50-NGM培养基中生长良好,在JM109-LB培养基中生长较差。在-80℃最佳温度条件下,秀丽隐杆线虫在含50mL/L甘油的LB培养基中的存活率达78%;在含50mL/L甘油的PBS中的存活率达52%;而在含100mL/L甘油的水溶液中的存活率仅为8%。用液氮保存,成虫和幼虫均可存活;而在-80℃和-20℃条件下,仅有幼虫存活。结果表明,秀丽隐杆线虫在OP50-NGM培养基中培养发育生长较好;在-80℃条件下,含50mL/L甘油的LB培养基适于保存秀丽隐杆线虫。 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 培养 保存
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用丙硫苯咪唑检测羊线虫抗药性的体外虫卵孵化试验 被引量：7
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作者 蔡葵蒸 杨晓野 +8 位作者 杨春生 郝成 王晓亮 梁小军 王瑞 张晓东 张玉玲 李昕 韩海宾 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期721-725,共5页
为探讨用丙硫苯咪唑进行体外虫卵孵化试验检测羊线虫对苯并咪唑类药物的抗药性,对23个羊场的25份田间样品用丙硫苯咪唑和噻苯咪唑进行了虫卵孵化试验并与先前减卵试验（faecal egg count re-duction test,FECRT）的结果比较。结果表明,2... 为探讨用丙硫苯咪唑进行体外虫卵孵化试验检测羊线虫对苯并咪唑类药物的抗药性,对23个羊场的25份田间样品用丙硫苯咪唑和噻苯咪唑进行了虫卵孵化试验并与先前减卵试验（faecal egg count re-duction test,FECRT）的结果比较。结果表明,25份样品中,丙硫苯咪唑和噻苯咪唑对受检虫卵的半数致死量（LD50）均值分别为0.050 1和0.054 0μg/mL,差异不显著。FECRT检测有抗药性的4个羊场,75%的样品对丙硫苯咪唑和噻苯咪唑的LD50均值均在0.1μg/mL以上,只有1个羊场的的LD50值分别为0.068 9μg/mL（丙硫苯咪唑）和0.071 2μg/mL（噻苯咪唑）。检测为可疑的2个羊场,其样品的LD50值为0.04～0.07μg/mL;FECRT检测敏感的蠕虫群体的LD50均在0.04μg/mL以下。此外,丙硫苯咪唑用纯的二甲基亚砜溶解和稀释后于4℃保存7 d,LD50值变化不大,提示药效无明显下降,而保存14 d后药效有下降趋势。 展开更多
关键词 驱虫药抗性 丙硫苯咪唑 虫卵孵化试验 粪便虫减少试验 绵羊 山羊 线虫
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野生动物捻转血矛线虫的分子鉴定及PCR检测方法的建立 被引量：8
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作者 罗琴 谭立娉 +5 位作者 胡伟 李保宏 郑国超 林丽琴 路鹏云 李国清 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期80-84,共5页
为了对野生动物捻转血矛线虫进行分子鉴定并建立特异性PCR检测方法,基于ITS序列,对草食类野生动物粪便中毛圆线虫虫卵及幼虫DNA进行分子鉴定,并比较粪便和虫体样品的PCR扩增效果;基于ITS1序列建立了特异性PCR检测方法,并对20份临床粪样... 为了对野生动物捻转血矛线虫进行分子鉴定并建立特异性PCR检测方法,基于ITS序列,对草食类野生动物粪便中毛圆线虫虫卵及幼虫DNA进行分子鉴定,并比较粪便和虫体样品的PCR扩增效果;基于ITS1序列建立了特异性PCR检测方法,并对20份临床粪样进行了检测。结果显示,2种草食动物(长颈鹿、弯角剑羚)粪便和虫体样品均扩增出ITS1和ITS2片段,且虫体DNA比虫卵DNA的扩增效果更好;经系统发育分析和BLAST比对,该毛圆线虫分离株属于毛圆科血矛属,与基因库中多株捻转血矛线虫ITS1和ITS2序列的相似性为98%~99%。结果表明,基于ITS1序列建立的PCR检测方法具有良好的特异性和敏感性,与幼虫鉴定法的符合率为95%,高于粪便虫卵检查法(70%),具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 内转录间隔区 分子鉴定 PCR检测 野生动物
原文传递
几种拟地新线虫种间及种内线粒体lsrRNA及cox1基因的多态性 被引量：9
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作者 曹湛 翁亚彪 +4 位作者 林瑞庆 李明伟 邹丰才 何芳 朱兴全 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期600-603,共4页
对来自世界各地的拟地新线虫共6个种的线粒体基因lsrRNA及cox1序列进行了PCR-SSCP和序列分析.结果显示,lsrRNA基因序列在拟地新线虫种内、种间的变异都比较小,不能提供准确的遗传标记.但cox1基因序列种间变异为0.5%～12.2%,比种内变异(1... 对来自世界各地的拟地新线虫共6个种的线粒体基因lsrRNA及cox1序列进行了PCR-SSCP和序列分析.结果显示,lsrRNA基因序列在拟地新线虫种内、种间的变异都比较小,不能提供准确的遗传标记.但cox1基因序列种间变异为0.5%～12.2%,比种内变异(1%～1.7%)大,能提供准确的遗传标记,可用于拟地新线虫姊妹种的鉴定.这些发现有助于拟地新线虫的生活史、传播途径、流行病学、种群遗传学的研究和其相关疾病的诊断. 展开更多
关键词 拟地新线虫 lsrRNA cox1 PCR-SSCP 多态性
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