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新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫感染情况调查
1
作者 王涛 阎晓菲 +4 位作者 王旖旎 赵怡阳 孙鑫 陈胜涛 王楠 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第4期1897-1909,共13页
旨在为掌握新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫种类及感染情况,对新疆岩蜥(Laudakia stoliczkana)、吐鲁番麻蜥(Eremias roborowskii)和叶城沙蜥(Phrynocephalus axillaris)共计127只蜥蜴进行胃肠道线虫检查,采用剖检法分离胃肠道线虫... 旨在为掌握新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫种类及感染情况,对新疆岩蜥(Laudakia stoliczkana)、吐鲁番麻蜥(Eremias roborowskii)和叶城沙蜥(Phrynocephalus axillaris)共计127只蜥蜴进行胃肠道线虫检查,采用剖检法分离胃肠道线虫,进行形态学鉴定。使用卡方检验和单因素方差分析对三种不同荒漠蜥蜴性别间、头体长(snout-vent length, SVL)间、体重间的感染率和感染强度进行差异性分析。结果显示:三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫总感染率为28.35%,新疆岩蜥感染率为100%,吐鲁番麻蜥感染率为27.59%,叶城沙蜥感染率为22.22%;新疆岩蜥胃肠道线虫感染率和感染强度极显著高于吐鲁番麻蜥和叶城沙蜥,其雄性感染强度显著高于雌性;较大体型的感染强度更高。基于虫种形态特征鉴定出三种优势虫种为泡翼科Abbreviata属线虫、咽齿科Spauligodon属线虫和咽齿科Parapharyngodon属线虫,均为中国新纪录属。本研究对新疆吐哈盆地三种荒漠蜥蜴胃肠道线虫进行感染情况调查及影响因素分析,不仅为新疆荒漠蜥蜴寄生虫多样性研究积累重要数据资料,还可为荒漠蜥蜴保护及开发利用提供重要理论支撑。 展开更多
关键词 吐哈盆地 荒漠蜥蜴 胃肠道线虫 新纪录属
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捻转血矛线虫的耐药性及其干预途径研究进展
2
作者 李案本 符娜娜 +2 位作者 罗晓平 李军燕 刘阳 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期523-533,共11页
捻转血矛线虫对伊维菌素、阿苯达唑等驱虫药物的耐药性愈发严重,给全球多数国家和地区的养殖业带来巨大损失。目前,对捻转血矛线虫耐药性的研究多集中于流行病学调查、耐药机制及耐药性干预,并取得一定进展。本文针对捻转血矛线虫的耐... 捻转血矛线虫对伊维菌素、阿苯达唑等驱虫药物的耐药性愈发严重,给全球多数国家和地区的养殖业带来巨大损失。目前,对捻转血矛线虫耐药性的研究多集中于流行病学调查、耐药机制及耐药性干预,并取得一定进展。本文针对捻转血矛线虫的耐药性分布及其影响因素,耐药机制以及基于细胞膜泵、自噬水平、细胞呼吸链、寄生虫替换、植物提取物与驱虫药联合驱虫、抗性宿主培育等途径逆转耐药性进行综述,以期为捻转血矛线虫的耐药性研究提供新的思路,同时为捻转血矛线虫病的科学防治、合理用药以及新药开发提供参考依据。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 耐药分布 耐药机制 耐药性逆转
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朱鹮源胃瘤线虫的鉴定 被引量：1
3
作者 许丹娜 李京宇 +5 位作者 郭如海 王俊伟 陈曦 宋军科 王兴龙 赵光辉 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期95-99,共5页
为明确朱鹮源胃线虫的种类,从陕西秦岭地区1只野外死亡的朱鹮(Nipponia nippon)的肌胃和腺胃分离了15条线虫,首先用乳酚透明液对虫体进行处理,然后利用显微镜对虫体形态特征进行观察,最后对随机选取的4条虫体样本的核糖体内转录间隔区(I... 为明确朱鹮源胃线虫的种类,从陕西秦岭地区1只野外死亡的朱鹮(Nipponia nippon)的肌胃和腺胃分离了15条线虫,首先用乳酚透明液对虫体进行处理,然后利用显微镜对虫体形态特征进行观察,最后对随机选取的4条虫体样本的核糖体内转录间隔区(ITS)基因进行了扩增、测序和遗传进化分析。结果发现,虫体形态特征与胃瘤线虫(Eustrongylides sp.)一致,获得的ITS基因序列包括350 bp的ITS 1基因序列和343 bp的ITS 2基因序列,4条ITS 1和ITS 2基因序列的相似性分别为99.5%~100%和99.2%~100%;种系发育关系分析发现朱鹮源胃线虫与普通胃瘤线虫(E.excisus)亲缘关系最近,但二者的ITS 1和ITS 2基因序列的相似性仅为96.8%~97.3%和95.6%~96.4%。结果表明,分离的朱鹮源胃线虫可能为一新种,暂时命名为朱鹮胃瘤线虫(E.nipponia nippon)。研究结果为野生朱鹮胃线虫病的防控提供了基础数据。 展开更多
关键词 朱鹮 胃瘤线虫 形态学 ITS基因
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犬弓首蛔虫感染性幼虫宿主血清反应性微RNA的鉴定与功能分析 被引量：1
4
作者 陈宜 杨一帆 +5 位作者 陈学秋 熊志威 杨晨雨 杨怡 马光旭 杜爱芳 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第3期483-491,共9页
弓首蛔虫病是一种被严重忽视的人畜共患寄生虫病,呈世界性分布,主要由弓首蛔虫的感染性幼虫在人及多种动物体内移行所致。本研究以犬弓首蛔虫组织移行的第1个环节“侵入宿主”为切入点,首先用5%健康小鼠血清体外刺激孵化的犬弓首蛔虫感... 弓首蛔虫病是一种被严重忽视的人畜共患寄生虫病,呈世界性分布,主要由弓首蛔虫的感染性幼虫在人及多种动物体内移行所致。本研究以犬弓首蛔虫组织移行的第1个环节“侵入宿主”为切入点,首先用5%健康小鼠血清体外刺激孵化的犬弓首蛔虫感染性幼虫,然后提取虫体样本的总RNA进行小RNA测序,最后开展处理组与未处理组的虫体微RNA(microRNA, miRNA)差异表达分析及靶基因预测。结果显示:在4个处理组样本和4个未处理组样本中共检测到972个miRNAs,其中血清刺激造成15个miRNAs的转录水平发生显著变化;靶基因预测发现,这些转录水平发生显著变化的miRNAs靶向宿主免疫细胞黏附与迁移、嗅觉转导等相关基因,在寄生虫与宿主互作中发挥作用。本研究鉴定到一组具有宿主血清反应性的犬弓首蛔虫感染性幼虫miRNAs,为其在感染宿主、免疫调控以及致病中的具体作用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬弓首蛔虫 血清反应性 微RNA 感染与免疫 致病
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旋毛虫TsNas36蛋白的表达和生物学特性分析
5
作者 司光泉 宋军澎 +4 位作者 吕庆博 白雪 王洋 刘晓雷 张藜潇 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第6期1225-1232,1242,共9页
旋毛虫Nas-36(TsNas36)是一种在旋毛虫排泄分泌产物(excretory secretory products,ESP)中发现的锌金属蛋白酶家族成员。本研究通过克隆表达TsNas36基因,鉴定其生物学特性和时空表达特征,为探索TsNas36基因的生物学功能提供理论和材料... 旋毛虫Nas-36(TsNas36)是一种在旋毛虫排泄分泌产物(excretory secretory products,ESP)中发现的锌金属蛋白酶家族成员。本研究通过克隆表达TsNas36基因,鉴定其生物学特性和时空表达特征,为探索TsNas36基因的生物学功能提供理论和材料基础。生物信息学分析显示,TsNas36全长470 AA,分子量约为54.69 kDa,无跨膜区,有一个信号肽(1-20 AA),一个虾红素蛋白酶(Astacin)结构域(116-320 AA)和一个CUB结构域(355-470 AA),有5个活性位点残基分别位于216(His)、217(Glu)、220(His)、226(His)和275(Tyr)位氨基酸。通过构建重组表达质粒pET-28a(+)/TsNas36,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得重组蛋白rTsNas36。使用纯化后的重组蛋白免疫家兔获得抗rTsNas36多克隆抗体血清,间接ELISA结果显示其抗体效价达到1∶10^(5)。qRT-PCR和Western-blot结果显示,TsNas36在新生幼虫(NBL)时期的转录水平显著高于成虫和肌幼虫时期。免疫荧光结果表明,TsNas36仅定位于新生幼虫虫体表皮。综上,本研究表征了TsNas36基因的生物学特征,并发现该基因的表达具有高度的时期特异性,可能参与新生幼虫的发育进程。 展开更多
关键词 旋毛虫 虾红素蛋白酶 锌金属蛋白酶 TsNas36蛋白 原核表达 免疫荧光
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云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况调查分析 被引量：1
6
作者 董路 段博芳 +6 位作者 杨建发 杨红梅 李坤 马洲 董星和 李永华 邹丰才 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期123-128,共6页
为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫... 为了查明云南省淡水螺广州管圆线虫感染情况和分布特点,从野外和农贸市场采集5种螺共4502份,取其肌肉用组织压片法镜检广州管圆线虫幼虫,再提取组织DNA,采用PCR扩增广州管圆线虫ITS基因。镜检发现,在福寿螺中发现广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫;PCR扩增显示:5份样品为广州管圆线虫阳性,总阳性率为0.111%(5/4502);不同地区间,昆明市阳性率最高(0.231%,4/1734),德宏州(0.221%,1/453)次之;不同淡水螺种类中,福寿螺阳性率为0.192%(4/2081),环棱螺阳性率为0.160%(1/624),其余3种螺未检出;不同采样环境下,农贸市场阳性率为0.192%(4/2083),野外环境阳性率为0.041%(1/2419)。不同螺种类和采样环境感染率有统计学意义(P<0.05)。研究结果获悉了云南省部分淡水螺广州管圆线虫的感染情况,为云南省广州管圆线虫病的防控提供了重要基础数据。 展开更多
关键词 淡水螺 广州管圆线虫 ITS基因 感染
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细粒棘球绦虫EgBAL蛋白的生物信息学分析及原核表达
7
作者 赵文卿 薄新文 +6 位作者 普娜 张玉霞 陈旭珂 张艳艳 孙艳 齐萌 王正荣 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期801-810,共10页
[目的]探究细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)胆盐活化脂肪酶(EgBAL)的生物信息学特征并进行原核表达,检测EgBAL重组蛋白的免疫原性,为囊性棘球蚴病疫苗抗原筛选提供理论依据。[方法]从NCBI数据库获取细粒棘球绦虫EgBAL基因序列(Ge... [目的]探究细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)胆盐活化脂肪酶(EgBAL)的生物信息学特征并进行原核表达,检测EgBAL重组蛋白的免疫原性,为囊性棘球蚴病疫苗抗原筛选提供理论依据。[方法]从NCBI数据库获取细粒棘球绦虫EgBAL基因序列(GenBank登录号:HM748917),设计特异性引物,以细粒棘球绦虫原头蚴cDNA为模板,通过PCR扩增并克隆EgBAL基因。使用Mega 7.0软件,通过邻接法(NJ)构建系统进化树,运用生物信息学软件对EgBAL蛋白理化性质和结构特征进行预测分析。构建含EgBAL基因重组pET-22b质粒,并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞诱导表达EgBAL重组蛋白,通过SDS-PAGE检测蛋白表达情况,并进行纯化。利用Western blotting分析重组蛋白的免疫原性。[结果]细粒棘球绦虫EgBAL基因片段大小为1 020 bp。系统进化树显示,EgBAL蛋白与中华树鼩EgBAL蛋白处于同一分支,进化距离较近,相似性高达99.60%。生物信息学分析显示,EgBAL基因全长1 014 bp,编码337个氨基酸,EgBAL蛋白分子质量为37 089.59 u,理论等电点为4.77,不稳定指数为44.72,为不稳定蛋白,脂肪系数为66.11,亲水性为-0.429,为亲水性蛋白,无跨膜区域及信号肽。EgBAL蛋白具有14个潜在B细胞抗原表位,二级结构包括α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占27.90%、12.76%、12.76%和56.08%。此外,EgBAL蛋白含有35个磷酸化位点,其中包括12个丝氨酸磷酸化位点、16个苏氨酸磷酸化位点和7个酪氨酸磷酸化位点。本研究成功构建重组pET-22b-EgBAL质粒,诱导表达得到EgBAL重组蛋白大小约38 ku。Western blotting结果显示,该重组蛋白可被细粒棘球绦虫感染的昆明小鼠和犬的阳性血清识别,具有良好的免疫原性。[结论]本研究成功克隆了细粒棘球绦虫EgBAL基因、表达了EgBAL重组蛋白,并初步证实重组EgBAL蛋白具有较好的免疫原性,提示其有作为囊型棘球蚴病疫苗或诊断候选抗原的潜力,为进一步研究EgBAL蛋白的功能提供了科学依据。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 EgBAL基因 生物信息学分析 原核表达
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细粒棘球绦虫MAPⅡ生物信息学分析及其在虫体不同阶段表达差异研究
8
作者 陈旭珂 普娜 +8 位作者 张玉霞 赵文卿 赵家欣 黄俊程 魏琳颖 张艳艳 孙艳 薄新文 王正荣 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3286-3296,共11页
【目的】研究甲硫氨酸氨基肽酶Ⅱ(methionine aminopeptidaseⅡ,MAPⅡ)的分子特征、反应原性及其在虫体不同发育阶段的表达情况,提供一种对终末宿主具有保护作用的疫苗候选抗原。【方法】对MAPⅡ蛋白进行生物信息学分析,包括系统进化树... 【目的】研究甲硫氨酸氨基肽酶Ⅱ(methionine aminopeptidaseⅡ,MAPⅡ)的分子特征、反应原性及其在虫体不同发育阶段的表达情况,提供一种对终末宿主具有保护作用的疫苗候选抗原。【方法】对MAPⅡ蛋白进行生物信息学分析,包括系统进化树构建、理化性质分析及信号肽、跨膜区、抗原表位、磷酸化和糖基化位点、二级结构、三级结构预测。通过原核系统表达MAPⅡ蛋白并验证重组蛋白的抗原性,同时进行虫体不同发育阶段转录水平分析。【结果】细粒棘球绦虫MAPⅡ蛋白与终末宿主犬、中间宿主绵羊中MAPⅡ蛋白亲缘关系较远。MAPⅡ蛋白由453个氨基酸组成,分子质量为51023.75 u,不稳定系数为36.6,为稳定蛋白;平均疏水性指数为-0.609,亲水性较好。不存在信号肽与跨膜区。MAPⅡ蛋白具有良好的B细胞线性表位,共有38个磷酸化位点,1个N-糖基化位点。MAPⅡ蛋白二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,占比分别为33.55%和51.88%;三级结构预测显示其为单体蛋白,GMQE值为0.85。通过原核系统表达出的MAPⅡ重组蛋白能与感染细粒棘球绦虫犬的阳性血清结合,抗原性良好。MAPⅡ蛋白在原头蚴阶段和成虫阶段均有表达,且成虫阶段表达量显著高于原头蚴阶段(P<0.05)。【结论】MAPⅡ蛋白结构稳定,具有优势抗原表位,MAPⅡ重组蛋白免疫原性良好,其在细粒棘球绦虫不同发育阶段特别是成虫阶段发挥着重要作用,可作为细粒棘球绦虫终末宿主疫苗候选抗原。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 甲硫氨酸氨基肽酶Ⅱ(MAPⅡ) 生物信息学 原核表达 转录水平
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细粒棘球绦虫EgM123表面展示型酿酒酵母菌株的构建及免疫原性初步评价
9
作者 贾新月 马静 +6 位作者 普娜 赵文卿 陈旭珂 张艳艳 孙艳 薄新文 王正荣 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期378-391,共14页
旨在构建并制备细粒棘球绦虫EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母口服活载体菌株,并初步评价其免疫效果,以期为细粒棘球绦虫终末宿主酿酒酵母活载体口服疫苗的研发提供理论基础。克隆细粒棘球绦虫EgM123基因,构建EBY100/pYD1-EgM123... 旨在构建并制备细粒棘球绦虫EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母口服活载体菌株,并初步评价其免疫效果,以期为细粒棘球绦虫终末宿主酿酒酵母活载体口服疫苗的研发提供理论基础。克隆细粒棘球绦虫EgM123基因,构建EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母菌株。诱导培养表面展示型酿酒酵母EBY100/pYD1-EgM123,并进行体外分析,通过免疫荧光分析以及BCA蛋白定量法对EgM123蛋白进行定位鉴定及定量分析。诱导表达表面展示型酿酒酵母EBY100/pYD1-EgM123菌株并免疫BALB/c小鼠。通过检测小鼠血清中抗体及细胞因子水平变化评价细粒棘球绦虫EgM123口服酵母活载体菌株的免疫效果。结果成功克隆了细粒棘球绦虫EgM123的ORF序列,长度为594 bp。PCR检测以及酶切鉴定结果表明,成功构建EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母菌株。免疫荧光结果显示,EBY100/pYD1-EgM123表面具有绿色荧光,BCA蛋白定量法测定50 OD_(600 nm)EBY100/pYD1-EgM123诱导72 h后蛋白的表达量为15.59μg,浓度为0.31μg/OD_(600 nm)。抗体水平检测结果表明,EBY100/pYD1-EgM123免疫组特异IgG、IgA、IgM抗体的分泌均高于PBS组、EBY100组及EBY100/pYD1组(P<0.05)。细胞因子检测发现,EBY100/pYD1-EgM123免疫组对小鼠细胞因子IL-17、IFN-γ的分泌量显著加强(P<0.001)。综上所述,通过对细粒棘球绦虫EBY100/pYD1-EgM123表面展示型酿酒酵母口服活载体菌株免疫效果的初步评价,发现该口服活载体菌株具有免疫原性,可以刺激小鼠产生特异性免疫应答,进一步说明其具有成为终末宿主抗囊型包虫候选疫苗的潜力。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 EgM123 表面展示型酿酒酵母 口服疫苗
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旋毛虫乳酸脱氢酶基因的克隆表达及组织定位
10
作者 牛栋玉 张念章 +5 位作者 李文卉 刘垠鞠 秦洪涛 张永芝 殷宏 付宝权 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第4期463-469,共7页
为了研究旋毛虫乳酸脱氢酶(TsLDH)的反应原性及组织分布特点,从GenBank中获取TsLDH基因序列进行生物信息学分析,设计引物对其进行RT-PCR扩增,将PCR产物连接到pET-30a质粒构建重组表达质粒pET30a-TsLDH,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达... 为了研究旋毛虫乳酸脱氢酶(TsLDH)的反应原性及组织分布特点,从GenBank中获取TsLDH基因序列进行生物信息学分析,设计引物对其进行RT-PCR扩增,将PCR产物连接到pET-30a质粒构建重组表达质粒pET30a-TsLDH,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组蛋白rTsLDH纯化后,通过Western-blot进行反应原性分析,与弗氏佐剂混合免疫家兔,采血分离血清,用间接ELISA方法检测家兔抗rTsLDH多克隆抗体效价。并利用纯化后的家兔抗rTsLDH抗体对TsLDH进行组织定位。经优化后在37℃,200 r/min,1 mmol/L IPTG诱导条件下成功表达重组蛋白rTsLDH,其分子质量约为39.4 kDa,且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析表明重组蛋白rTsLDH可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有反应原性。多克隆抗体效价为1∶5.12×10^(5)。组织定位结果显示,TsLDH存在于旋毛虫3个发育时期的体表及杆状体中,且在成虫时期可分泌到宿主肠组织周围,但不能分泌到感染的肌肉组织中。结果表明rTsLDH具有良好的反应原性,且TsLDH存在于虫体的各个时期,为旋毛虫病诊断候选抗原及药物靶标筛选提供了依据。 展开更多
关键词 旋毛虫 乳酸脱氢酶 反应原性 免疫组化定位
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骨桥蛋白和p38MAPK信号通路在多房棘球蚴原头节发育中的作用
11
作者 徐刚 毛艺 +6 位作者 胡帅 葛宇飞 徐志 张玉梦 谢士伟 张宏伟 张示杰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期9-15,共7页
为明确骨桥蛋白(OPN)和多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在Em发育过程的作用,剖检感染Em 4~6月的长爪沙鼠,提取Em原头节后,分别用不同浓度的p38MAPK抑制剂(SB202190)处理Em原头节,选... 为明确骨桥蛋白(OPN)和多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在Em发育过程的作用,剖检感染Em 4~6月的长爪沙鼠,提取Em原头节后,分别用不同浓度的p38MAPK抑制剂(SB202190)处理Em原头节,选取合适的SB202190浓度后在体外将原头节分为DMSO组、anti-p38MAPK组、PBS组、OPN组、OPN+anti-p38MAPK组,采用伊红染色、caspase-3试剂盒检测caspase-3、EDU和Hoechst染色、活性氧(ROS)检测探针检测原头节的活性、凋亡和增殖情况。结果显示,抑制Em的SB202190适宜浓度为20μmol/L,SB202190增加Em的伊红染色率、caspase-3水平,减少EDU阳性、ROS水平,OPN可减少Em伊红染色率、caspase-3水平,增加EDU阳性率、ROS水平,且SB202190可逆转OPN对Em的结果,这些结果表明SB202190可抑制Em的活性和增殖、促进凋亡并与浓度正相关,而OPN可促进Em的活性和增殖、抑制凋亡,且SB202190可逆转OPN对Em的作用。研究结果为OPN和p38MAPK信号通路可能成为治疗多房棘球蚴病的新分子靶点提供证据。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 多房棘球蚴病 骨桥蛋白 P38丝裂原活化蛋白激酶
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蟾蜍棒线虫线粒体全基因组特征分析
12
作者 杨彦 胡雁鸣 +8 位作者 丁健 李犇 何雨桐 刘雪薇 王佳文 兰卓 邱鸿宇 高俊峰 王春仁 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3190-3201,共12页
【目的】获得蟾蜍棒线虫(Rhabdias bufonis)线粒体全基因组并分析其特征。【方法】通过PCR扩增蟾蜍棒线虫线粒体基因组序列,利用测序、注释、组装、拼接,获得线虫线粒体全基因组,对其进行序列分析;以湖沼驼形线虫(Camallanus lacustris... 【目的】获得蟾蜍棒线虫(Rhabdias bufonis)线粒体全基因组并分析其特征。【方法】通过PCR扩增蟾蜍棒线虫线粒体基因组序列,利用测序、注释、组装、拼接,获得线虫线粒体全基因组,对其进行序列分析;以湖沼驼形线虫(Camallanus lacustris)为外群,基于线粒体12个蛋白质编码基因(PCGs)氨基酸串联序列,采用邻接法(Neighbor-Joining,NJ)和贝叶斯法(Bayesian inference,BI)构建系统发育树进行进化分析。【结果】蟾蜍棒线虫线粒体基因组为环形结构,全长为14208 bp,由12个PCGs、22个转运RNA(tRNAs)、2个核糖体RNA(rRNAs)和2个非编码控制区组成;其线粒体基因组碱基组成中AT含量为75%、GC含量为25%,AT偏倚(AT-skew)为0.26,GC偏倚(GC-skew)为―0.36,呈现明显的AT偏向性。PCGs以ATG、GTG作为起始密码子,以TGA、TAA及不完整的TA-作为终止密码子。tRNAs二级结构分析显示,除trnS2和trnH基因缺少二氢尿嘧啶(DHU)臂外,其余均为典型的三叶草结构。系统进化树分析显示,垫刃亚目(Tylenchina)分为两个大的分支,首叶超科(Cephaloboidea)和垫刃超科(Tylenchoidea)形成分支Ⅰ,类圆超科(Strongyloidoidea)、斯氏超科(Steinernematoidea)、滑刃超科(Aphelenchoidea)及Panagrolaimoidea形成分支Ⅱ;在分支Ⅱ中,斯氏科(Steinernematidae)和棒线科(Rhabdiasidae)聚集在一起再与滑刃科(Aphelenchoidiae)和Panagrolaimidae形成的另一姐妹支形成一个大的分支,而类圆科(Strongyloididae)则独立形成另一个大的分支;林蛙源蟾蜍棒线虫与蟾蜍源蟾蜍棒线虫(OR725306)聚集在一起,两者关系较其他两株Rhabdias kafunata亲缘关系近;寄生于两栖类棒线虫与昆虫斯氏线虫聚为一支,且与寄生于植物的滑刃科线虫亲缘关系较寄生于哺乳动物的类圆线虫近。【结论】本研究成功获得林蛙源蟾蜍棒线虫线粒体全基因组序列,且斯氏科与棒线科的亲缘关系明显近于类圆科,支持斯氏超科作为独立分类阶元的有效性,斯氏科应归于斯氏超科。试验结果为棒线科线虫的分类学、群体遗传学和系统发育学的研究提供了基础资料。 展开更多
关键词 蟾蜍棒线虫 线粒体基因组 序列分析 遗传进化分析
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青海省高原鼠兔源囊尾蚴的分子鉴定与进化分析
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作者 陈澳 张海宁 +3 位作者 李志 孟茹 张学勇 付永 《中国农业大学学报》 北大核心 2025年第2期107-114,共8页
为鉴定青海省高原鼠兔源绦虫囊尾蚴种类,本研究对囊尾蚴样本进行体式显微镜观察,对其线粒体COI基因进行扩增并测序比对分析,同时利用Iqtree和BEAST v2.6.2等软件对测序所得的COI基因进行系统发育及分化时间分析。结果表明:1)体式显微镜... 为鉴定青海省高原鼠兔源绦虫囊尾蚴种类,本研究对囊尾蚴样本进行体式显微镜观察,对其线粒体COI基因进行扩增并测序比对分析,同时利用Iqtree和BEAST v2.6.2等软件对测序所得的COI基因进行系统发育及分化时间分析。结果表明:1)体式显微镜下该囊尾蚴的形态特征与带科囊尾蚴相似。2)测序结果发现该序列与GenBank中的才氏绦虫(Taenia caixuepengi)基因序列(MT882036)同源,序列相似性达到98.52%,表明该囊尾蚴属于Taenia caixuepengi囊尾蚴。3)系统发育树显示,才氏囊尾蚴与和豆状带绦虫(T.pisiformis)亲缘关系最近,两者形成微小分支。4)分化时间分析表明才氏囊尾蚴与豆状带绦虫在5.79 Mya(95%置信区间,3.15~6.87 Mya)左右分化形成,自展值为100%。综上,经鉴定青海省高原鼠兔源囊尾蚴为才氏囊尾蚴;利用该囊尾蚴线粒体COI基因进行的系统发育及分化时间分析表明该囊尾蚴与豆状带绦虫亲缘关系更近。本研究对青海省高原鼠兔源才氏囊尾蚴进行了鉴定与遗传进化分析,为才氏绦虫的分类、鉴定及分子流行病学调查提供理论依据。 展开更多
关键词 高原鼠兔 才氏囊尾蚴 分子鉴定 系统发育
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鄂尔多斯细毛羊前后盘吸虫病病原分子鉴定及驱虫药物筛选
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作者 乌日力格 李娜 +4 位作者 格日勒格拉巴 哈斯图雅 张靖靖 侯斌 哈斯苏荣 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1807-1814,共8页
【目的】探明鄂尔多斯细毛羊体内寄生的前后盘吸虫种类并筛选出理想的驱虫药物。【方法】在粪便虫卵检查初步诊断前后盘吸虫病的基础上,通过剖检采集鄂尔多斯细毛羊瘤胃内的前后盘吸虫虫体,并进行形态学和分子生物学鉴定。随机选取3条... 【目的】探明鄂尔多斯细毛羊体内寄生的前后盘吸虫种类并筛选出理想的驱虫药物。【方法】在粪便虫卵检查初步诊断前后盘吸虫病的基础上,通过剖检采集鄂尔多斯细毛羊瘤胃内的前后盘吸虫虫体,并进行形态学和分子生物学鉴定。随机选取3条虫体提取DNA,继而对核糖体内转录间隔区2(ITS-2)进行PCR扩增,将扩增产物测序后于NCBI数据库进行BLAST比对分析,并构建系统进化树。分别用氯硝柳胺、硝氯酚、碘醚柳胺和3%敌百虫联合硝氯酚,针对感染前后盘吸虫病的绵羊开展驱虫效果比较试验。【结果】ITS-2基因PCR扩增获得大小为441 bp的条带,与目的基因条带相符。3条虫体与源于中国的鹿前后盘吸虫ITS-2(KJ459936.1)序列相似性依次为99.3%、99.3%和99.8%。进化分析结果表明,该前后盘吸虫与来自中国(KP341671)、爱尔兰(AB973398)、阿根廷(HM209066)、德国(MZ532797)的前后盘吸虫同属一个大分支,且与鹿前后盘吸虫(Paramphistomum cervi)共处一个小分支内,鉴定为鹿前后盘吸虫。驱虫试验中氯硝柳胺、硝氯酚、碘醚柳胺、3%敌百虫配伍硝氯酚组的虫卵减少率分别为44.00%、26.73%、23.00%和90.80%。【结论】在内蒙古乌审旗地区鄂尔多斯细毛羊体内寄生的前后盘吸虫属鹿前后盘吸虫,采用3%敌百虫联合硝氯酚治疗可达到较好的驱虫效果。 展开更多
关键词 鄂尔多斯细毛羊 前后盘吸虫 分子生物学鉴定 驱虫效果
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贝氏莫尼茨绦虫和扩展莫尼茨绦虫的分子鉴定与遗传进化分析
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作者 简莹娜 马利青 +2 位作者 李秀萍 王光华 张学勇 《青海畜牧兽医杂志》 2025年第5期12-17,共6页
为了鉴定分离出的绦虫种类及其遗传进化特征,本研究对该绦虫进行了形态学特征观察,并采用PCR方法进行扩增测序,丰富了贝氏莫尼茨绦虫和扩展莫尼茨绦虫的分子生物学数据。实验分别克隆了贝氏莫尼茨绦虫和扩展莫尼茨绦虫的cox1基因和18S r... 为了鉴定分离出的绦虫种类及其遗传进化特征,本研究对该绦虫进行了形态学特征观察,并采用PCR方法进行扩增测序,丰富了贝氏莫尼茨绦虫和扩展莫尼茨绦虫的分子生物学数据。实验分别克隆了贝氏莫尼茨绦虫和扩展莫尼茨绦虫的cox1基因和18S rRNA基因,将测序结果应用Clustal Omega程序进行比对,然后用MEGA软件的Neighbor-Joining法构建cox1基因和18S rRNA基因系统发育树。结果表明,克隆的莫尼茨绦虫的cox1基因和18S rRNA基因序列长度分别为1488 bp和1120 bp,两个基因的A+T(G+C)含量相差很大;扩展莫尼茨绦虫和贝氏莫尼茨绦虫的cox1和18S rRNA基因序列的种间比对显示,两条序列种间变异明显较高,cox1基因序列的种间变异碱基为175个(12.09%),18S rRNA基因序列的种间变异碱基为71个(6.57%)。应用cox1和18S rRNA基因序列所构建的NJ系统发育分析表明,贝氏莫尼茨绦虫和扩展莫尼茨绦虫分别位于两个分支上,且与相应的莫尼茨绦虫分离株聚在一个分支上,cox1基因和18S rRNA基因序列可作为莫尼茨绦虫虫种间鉴定的遗传标记。本研究为寄生虫病的防治奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 贝氏莫尼茨绦虫 扩展莫尼茨绦虫 cox1基因 18S rRNA基因 种系发育分析
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青藏高原地区分离的叶氏夏柏特线虫鉴定及其遗传进化分析
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作者 简莹娜 李秀萍 +2 位作者 马利青 王光华 张学勇 《青海畜牧兽医杂志》 2025年第2期32-38,共7页
为鉴定分离到的线虫种类及其遗传进化特征,本研究通过对该线虫进行形态学特征观察,采用线虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该线虫。形态学特征观察结果显示,线虫为幼虫,长约200~300μm,虫卵呈椭圆形,虫卵长约85~132μm,宽... 为鉴定分离到的线虫种类及其遗传进化特征,本研究通过对该线虫进行形态学特征观察,采用线虫cox1基因通用引物,利用PCR扩增并测序,初步鉴定该线虫。形态学特征观察结果显示,线虫为幼虫,长约200~300μm,虫卵呈椭圆形,虫卵长约85~132μm,宽42~56μm;PCR结果显示,在约440 bp处出现与预期目的片段大小相符的条带。测序结果显示,该基因序列与叶氏夏柏特线虫(Chabertia erschowi)cox1基因序列的同源性高达99.09%,初步表明该线虫为C.erschowi。采用C.erschowi的ITS2特异性基因引物经PCR进一步鉴定并测序。将2个基因测序结果与GenBank登录的C.erschowi的相应基因序列比对,分析它们之间的同源性,并构建这2个基因的进化树,分析它们之间的遗传进化关系。PCR结果显示,扩增到约330 bp(ITS2)的目的条带。同源性分析结果显示,ITS2基因序列与GenBank登录的C.erschowi相应基因序列的同源性最高分别达100.00%。进化树结果显示,该虫株的2个基因均与不同宿主的C.erschowi处于同一分支。本研究成功鉴定了分离的线虫为叶氏夏柏特线虫,并分析其线粒体基因同源性及遗传演化关系,为叶氏夏柏特线虫的分类、鉴定和种群遗传进化分析及分子流行病学调查等奠定了研究基础。 展开更多
关键词 叶氏夏柏特线虫 线虫 鉴定 遗传进化
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空间转录组学研究揭示了多房棘球蚴感染小鼠免疫应答的时空变化规律 被引量：1
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作者 《中国兽医科学》编辑部 闫鸿斌(审核) 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第9期1274-1275,共2页
多房棘球蚴病是由多房棘球蚴感染引起的危害严重的人兽共患病,其肿瘤样生长可导致患者高死亡率。目前,该病的早期诊断和治疗仍然面临挑战。2025年2月22日,中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院畜禽重要人兽共... 多房棘球蚴病是由多房棘球蚴感染引起的危害严重的人兽共患病,其肿瘤样生长可导致患者高死亡率。目前,该病的早期诊断和治疗仍然面临挑战。2025年2月22日,中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院畜禽重要人兽共患病团队联合北京华大生命科学研究院,在Advanced Science期刊上发表题了为“Spatiotemporal transcriptomic profiling reveals the dynamic immunological landscape of alveolar echinococcosis”的研究论文。该研究基于多房棘球蚴病小鼠感染模型,采集了感染后第0~15个月的多个时间点的小鼠肝脏样本,整合RNA-seq、scRNA-seq和空间转录组学技术,从空间和时间上揭示了宿主对多房棘球蚴的免疫反应机制,首次绘制了多房棘球蚴感染灶微环境的高分辨率时空图谱,揭示了中性粒细胞、巨噬细胞和成纤维细胞在疾病进展中的功能和作用及其相互作用。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 中性粒细胞 巨噬细胞 空间转录组 单细胞转录组
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旋毛虫C型凝集素的表达及其对小鼠的免疫调节作用
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作者 秦千策 宋军澎 +2 位作者 Mahdi Borhani 张藜潇 丁静 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第4期441-448,共8页
探讨旋毛虫C型凝集素(TsCTL)对小鼠的免疫调节作用。将TsCTL基因(GenBank登录号KRY42391.1)克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)-TsCTL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组TsCTL(rTsCTL)纯化、复性,并通过West... 探讨旋毛虫C型凝集素(TsCTL)对小鼠的免疫调节作用。将TsCTL基因(GenBank登录号KRY42391.1)克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)-TsCTL,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将重组TsCTL(rTsCTL)纯化、复性,并通过Western-blot鉴定,同时测定内毒素水平。使用rTsCTL刺激小鼠脾细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,并采用qPCR检测脾细胞转录因子的表达水平。将10只C57BL/J小鼠随机分为对照组(n=5)和实验组(n=5)。实验组小鼠每只皮下注射50μg的rTsCTL(溶解在200μL PBS中),每周3次,持续4周。对照组则使用等量的PBS进行相同处理。收集实验组和对照组小鼠的脾细胞,并使用ELISA和qPCR检测细胞因子和转录因子的表达水平。最后,采用流式细胞术检测调节性T细胞的增殖情况。结果显示:rTsCTL对脾细胞无毒性。qPCR结果表明,rTsCTL能够提高小鼠脾细胞中Gata3和Foxp3的表达水平,同时降低T-bet的表达水平。动物实验的qPCR结果与细胞实验的结果一致。ELISA结果显示,rTsCTL促进了TGF-β和IL-4的表达,而抑制了IFN-γ的表达。流式细胞术检测结果表明,rTsCTL能够增加调节性T细胞的比例。这些结果表明,rTsCTL可以促进Th2型免疫反应,并抑制Th1型免疫反应。 展开更多
关键词 旋毛虫 C型凝集素 免疫调节
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拉萨某地犬细粒棘球绦虫的分离鉴定及驱虫效果评价
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作者 冯青 郝力力 +3 位作者 索朗晋美 郝世钊 袁东波 杨涛 《四川畜牧兽医》 2025年第3期25-27,30,共4页
为鉴定拉萨某地犬细粒棘球绦虫的虫种或基因型,了解新型研制的犬细粒棘球绦虫驱虫药物——吡喹酮饼干和牛肉味吡喹酮咀嚼片的驱虫效果,选取拉萨市墨竹工卡县271只家犬,采用PCR方法检测驱虫前后犬只的粪便样本,对所得PCR阳性产物进行测序... 为鉴定拉萨某地犬细粒棘球绦虫的虫种或基因型,了解新型研制的犬细粒棘球绦虫驱虫药物——吡喹酮饼干和牛肉味吡喹酮咀嚼片的驱虫效果,选取拉萨市墨竹工卡县271只家犬,采用PCR方法检测驱虫前后犬只的粪便样本,对所得PCR阳性产物进行测序、BLAST比对及进化树构建,从而确定细粒棘球绦虫的虫种或基因型,并评价吡喹酮咀嚼片和吡喹酮饼干的驱虫效果。结果表明,从试验犬中检出的细粒棘球绦虫基因型均为G5型(奥氏棘球绦虫);吡喹酮饼干和吡喹酮咀嚼片两种驱虫药对犬细粒棘球绦虫的驱虫效果良好,投药后阳性率显著低于投药前;第二次投喂后,吡喹酮饼干组的驱虫效果不稳定,阳性率不降反升,吡喹酮咀嚼片组的驱虫效果较好,阳性率持续降低。 展开更多
关键词 家犬 细粒棘球绦虫 吡喹酮 驱虫 PCR检测
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犬细粒棘球绦虫粪抗原诊断标志物筛选
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作者 班万里 刘帅 +8 位作者 王冰洁 吾力江·卡马力 潘星羽 王延 古丽扎提·塔力甫汗 徐晶 穆尼拉·特列吾汗 张壮志 赵莉 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第4期717-723,共7页
旨在筛选特异性强、敏感性高的犬细粒棘球绦虫(Eg)粪抗原诊断标志物。采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴人工感染犬,制备犬Eg阴性粪样和阳性粪样。盐析结合亲和层析纯化获得多克隆抗体、阴性粪抗原-多克隆抗体结合物和阳性粪抗原-多克隆抗体... 旨在筛选特异性强、敏感性高的犬细粒棘球绦虫(Eg)粪抗原诊断标志物。采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴人工感染犬,制备犬Eg阴性粪样和阳性粪样。盐析结合亲和层析纯化获得多克隆抗体、阴性粪抗原-多克隆抗体结合物和阳性粪抗原-多克隆抗体结合物,ELISA和Western blot检测3组样品,对3组样品进行LC-MS/MS检测和生物信息学分析,以阳性粪抗原-多克隆抗体结合物为处理组,多克隆抗体和阴性粪抗原-多克隆抗体结合物为对照组筛选处理组独有的唯一肽段。ELISA和Western blot检测显示仅阳性粪抗原-多克隆抗体结合物为阳性。根据LCMS/MS检测和生物信息学分析,共鉴定到171个蛋白,486条肽段;蛋白质定量分析筛选出86个差异蛋白;根据唯一多肽筛选出仅处理组存在唯一肽段蛋白的蛋白质11个,其中3个蛋白质与细粒棘球绦虫相关,分别为Dysferlin、Integrator complex 9和Diagnostic antigen gp50,此3个蛋白质分别为膜相关蛋白、INT复合体组成部分和诊断抗原。本研究初步筛选出3个候选犬Eg粪抗原诊断标志物,对进一步挖掘Eg诊断标准物质、筛选包虫病靶标基因和疫苗研制提供参考。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 多克隆抗体 抗原 特异性肽段 诊断标志物
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