期刊文献+
共找到225篇文章
< 1 2 12 >
每页显示 20 50 100
弓形虫表面抗原相关序列蛋白Tgsrs51基因的生物学功能研究
1
作者 肖淑婷 江新成 +3 位作者 王萌 邬向东 李谷月 陈小庆 《江西农业大学学报》 北大核心 2026年第1期196-207,共12页
【目的】弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,可感染包括人类在内的所有温血动物。目前,弓形虫病的治疗缺乏特效药物,传统药物治疗存在毒副作用大、疗效有限等问题。因此,开发安全有效的疫苗成为防控该病的重要策略。弓形虫表面抗原相关... 【目的】弓形虫是一种专性细胞内寄生的原虫,可感染包括人类在内的所有温血动物。目前,弓形虫病的治疗缺乏特效药物,传统药物治疗存在毒副作用大、疗效有限等问题。因此,开发安全有效的疫苗成为防控该病的重要策略。弓形虫表面抗原相关序列蛋白(SRSs)在虫体的毒力、入侵与黏附、免疫调节等方面均发挥着关键作用。其中,SRS51蛋白(TGME49_308840)作为SRS家族成员之一,具体生物学功能尚不明确,具有潜在的研究价值。旨在探究弓形虫SRS51蛋白的生物学功能及作用机制,为开发安全有效的弓形虫疫苗提供参考依据。【方法】以弓形虫II型Pru株为研究对象,采用CRISPR-Cas9基因编辑和无缝克隆技术,构建Tgsrs51基因缺失株(PruΔsrs51),分别通过噬斑试验、细胞入侵与增殖试验、逸出试验、体外缓殖子转化试验以及小鼠毒力试验,系统评估弓形虫SRS51蛋白的生物学功能。【结果】Tgsrs51基因缺失后,弓形虫的噬斑面积和数量显著减少(P<0.000 1),降低了微线体蛋白MIC2的表达,入侵和胞内增殖能力明显下降(P<0.001),对小鼠的致病力也有所减弱(P<0.05),但不影响虫体的逸出能力和体外缓殖子转化(P>0.05)。【结论】SRS51蛋白缺失可显著削弱弓形虫的急性毒力及慢性包囊形成能力,可作为弓形虫弱毒疫苗候选基因。 展开更多
关键词 弓形虫 SRS51蛋白 CRISPR/Cas9 基因敲除 毒力
在线阅读 下载PDF
弓形虫抗体镧系微球免疫层析试纸条方法的建立 被引量:1
2
作者 韩阳瑞 夏炉明 +6 位作者 李瑞芳 张曼玉 杜晶莹 孙卿 李增强 赵洪进 王权 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2353-2363,共11页
近年来,人与动物感染弓形虫的风险因素增多,因此对弓形虫流行情况的调查愈加重要。鉴于镧系微球荧光寿命长、stockes位移大、光稳定性强等特点,本研究将其应用于血清中弓形虫抗体的检测。为提高检测准确性,以可溶性表达的SAG1、SAG2、G... 近年来,人与动物感染弓形虫的风险因素增多,因此对弓形虫流行情况的调查愈加重要。鉴于镧系微球荧光寿命长、stockes位移大、光稳定性强等特点,本研究将其应用于血清中弓形虫抗体的检测。为提高检测准确性,以可溶性表达的SAG1、SAG2、GRA1的三种抗原的混合液为包被原,以荧光微球标记SPA为探针,以间接免疫侧流层析法研制检测弓形虫抗体试纸条,优化了上样方式、微球血清共孵育时间、反应时间等条件,考察了试纸条的特异性、灵敏性、重复性及可靠性。结果显示,制备的镧系微球免疫层析试纸条特异性好,与其他病原感染血清无交叉反应;灵敏度高,阳性血清稀释1600倍仍可被检出;反应快速,最快10 min即可获得结果;稳定可靠,通过血清样本检测,Kappa分析揭示了镧系微球试纸条检测方法和ELISA之间有较好的一致性。本研究为弓形虫抗体检测提供了快速、灵敏、可定量的镧系微球免疫层析检测方法。 展开更多
关键词 镧系微球 免疫层析 弓形虫 即时检测 定量
在线阅读 下载PDF
弓形虫TR与ROP5双基因缺失株的构建及其生物学功能研究
3
作者 耿小玲 李瑞芳 +7 位作者 徐卫兵 杜晶莹 张曼玉 孙卿 蒋蔚 米荣升 陈兆国 王权 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3408-3422,共15页
为了探究弓形虫TR与ROP5在抗宿主ROS损伤中是否具有协同作用,本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了TR与ROP5双基因缺失株(TR-ROP5-KO)弓形虫。通过体外增殖、入侵及小鼠体内毒力试验发现,与RH株、TR基因缺失株(TR-KO)及ROP5基因缺失株(R... 为了探究弓形虫TR与ROP5在抗宿主ROS损伤中是否具有协同作用,本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了TR与ROP5双基因缺失株(TR-ROP5-KO)弓形虫。通过体外增殖、入侵及小鼠体内毒力试验发现,与RH株、TR基因缺失株(TR-KO)及ROP5基因缺失株(ROP5-KO)相比,TR-ROP5-KO株在体外细胞中入侵、增殖能力及小鼠体内毒力作用减弱,表明弓形虫TR与ROP5基因双缺失不仅导致虫体在体外细胞中的生存活力减弱,还降低对宿主的毒力作用;通过检测TR/ROP5基因缺失株的氧化应激水平以及感染RAW264.7细胞的活性氧(ROS)水平发现,TR-ROP5-KO株引发的氧化应激水平虽然显著高于RH株(P<0.05),但与TR-KO株无显著差异(P>0.05);利用RT-qPCR检测TR/ROP5基因缺失株感染RAW264.7细胞的NF-κB、IL-12、IFN-γmRNA水平和ELISA检测小鼠血清中IL-12的水平发现,TR-ROP5-KO株感染组虽显著高于RH株感染组(P<0.05),但却未显著高于TR-KO株感染组(P>0.05),表明弓形虫的TR与ROP5在抗宿主ROS损伤中不存在协同作用。本研究构建TR与ROP5的双基因缺失株的方法探究两者在抗宿主ROS损伤中并无协同作用,为后续解析弓形虫多个基因功能的研究提供了方法依据,为弓形虫免疫逃避机制的研究提供了基础材料。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 CRISPR/Cas9 TR ROP5 ROS
在线阅读 下载PDF
北疆部分马场虻传伊氏锥虫的DNA检测及遗传进化分析
4
作者 金敏 巴依娜 +4 位作者 党文盈 高胜红 周娜 赵雪晴 巴音查汗·盖力克 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期68-73,共6页
为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的... 为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的具体种类。PCR结果显示,马虻伊氏锥虫的携带率为24.2%(157/650);阳性产物测序结果显示与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773429.1)同源性为98.63%;经COI鉴定,采集的马虻为突额瘤虻;进化树结果显示,突额瘤虻与已发表的芬兰株(MZ626174.1)同源性为98.56%。血源性伊氏锥虫的感染率分别为塔城市11.3%(6/53)、阿勒泰清河县3.6%(4/111)、伊犁44.4%(16/36)、乌市周边8%(6/76)。试验结果表明媒介虻的伊氏锥虫携带率较高,以上地区马匹存在感染锥虫的风险,应加强对该病的综合防控措施。 展开更多
关键词 突额瘤虻 COI/ISG基因 伊氏锥虫
在线阅读 下载PDF
1例人感染巴贝虫的诊断与病原体鉴定 被引量:40
5
作者 姚立农 阮卫 +5 位作者 曾长佑 李祖火 张轩 雷永良 陆巧绎 陈华良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期118-121,共4页
目的对首诊为疟原虫感染的巴贝虫感染者进行确诊及临床诊治情况分析。方法收集患者的临床发病资料,并对患者及其居住环境进行流行病学调查;采集骨髓样和血样,吉氏染色涂片后镜检;并以巴贝虫(Babesia)18s核糖体RNA属和种特异性引物分别... 目的对首诊为疟原虫感染的巴贝虫感染者进行确诊及临床诊治情况分析。方法收集患者的临床发病资料,并对患者及其居住环境进行流行病学调查;采集骨髓样和血样,吉氏染色涂片后镜检;并以巴贝虫(Babesia)18s核糖体RNA属和种特异性引物分别扩增患者血样基因组DNA,扩增产物测序后进行BLAST分析。结果该患者反复发热20余天,出现贫血(红细胞2.59×1012和血红蛋白5.5 g/L),CT示肝脾肿大。骨髓涂片和外周血涂片吉氏染色后镜检,发现有疑似恶性疟原虫或巴贝虫感染。经流行病学调查,该患者无外出史,但有输血史和被蜱叮咬史。患者血样经巴贝虫属和种特异性引物扩增,分别出现约400 bp和1 600 bp条带。测序的序列经BLAST分析,与田鼠巴贝虫(Babesia microti)的同源性为99%,登录号分别为JQ609305和JQ609304。结论结合患者的临床发病资料、流行病学史、病原学和分子生物学检测结果,确诊为田鼠巴贝虫感染。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 感染 诊断
在线阅读 下载PDF
牛中华泰勒虫新种(梨形虫亚目:泰勒虫科) 2.分子分类学研究 被引量:16
6
作者 白启 刘光远 +4 位作者 殷宏 赵启祖 刘德考 任家信 李新 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期185-190,共6页
分离自我国甘肃中部地区土种黄牛的一种形态特异的泰勒虫,采用传统分类学研究鉴定为新种,被定名为中华泰勒虫(Theileria sinensis sp.nov.)。又利用对泰勒虫属特异的PCR引物(92/93)对该种基因组DNA扩增,结果表明该种属泰勒虫属原... 分离自我国甘肃中部地区土种黄牛的一种形态特异的泰勒虫,采用传统分类学研究鉴定为新种,被定名为中华泰勒虫(Theileria sinensis sp.nov.)。又利用对泰勒虫属特异的PCR引物(92/93)对该种基因组DNA扩增,结果表明该种属泰勒虫属原虫确定无疑,并对代表虫种进化和分类的18SrRNA基因序列进行了测定,对已测出该基因1067bp长片断序列与基因库中9种巴贝斯虫,7种已知牛泰勒虫的相应序列进行比较、分析,建立起系统发生树。树图表明,瑟氏泰勒虫和水牛泰勒虫的亲缘关系非常近,中华泰勒虫与这两个种的亲缘关系较近,与附膜泰勒虫、小泰勒虫、环形泰勒虫、斑羚泰勒虫、突变泰勒虫差异较大。 展开更多
关键词 中华泰勒虫 新种 PCR 18SrRNA 梨形虫亚目 泰勒虫科 分子分类学
在线阅读 下载PDF
兔脑炎原虫病快速诊断的临床病理学研究 被引量:8
7
作者 潘耀谦 刘兴友 +5 位作者 王选年 银梅 唐海蓉 李瑞珍 刘志科 孙玉倩 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期203-207,共5页
为了在临床上能快速检出兔脑炎原虫,尽快诊断兔脑炎原虫病,对病兔进行了尿沉渣涂片的特殊染色、尿沉渣透射电镜的负染色、肾触片的特殊染色和肾病理组织学切片的比较观察。就尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色而言,经光学显微镜检查,可从涂... 为了在临床上能快速检出兔脑炎原虫,尽快诊断兔脑炎原虫病,对病兔进行了尿沉渣涂片的特殊染色、尿沉渣透射电镜的负染色、肾触片的特殊染色和肾病理组织学切片的比较观察。就尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色而言,经光学显微镜检查,可从涂片和触片上的肾小管上皮细胞内检出兔脑炎原虫及其假囊,据此可对兔脑炎原虫病做出快速诊断。而对尿沉渣透射电镜的负染色和肾病理组织切片的检查,可与尿沉渣涂片检查结果相互印证,使临床诊断更加准确。结果表明,尿沉渣涂片和肾触片的特殊染色是临床上用于诊断兔脑炎原虫病的一种快速、准确和简便的新方法。 展开更多
关键词 兔脑炎原虫病 临床病理学 快速诊断 尿沉渣 假囊
原文传递
猪源结肠小袋纤毛虫培养、分子鉴定和显微观察 被引量:11
8
作者 石团员 付媛 +5 位作者 鲍国连 索勋 郝力力 王一成 李军星 周永学 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期354-359,共6页
小袋纤毛虫病是一种人畜共患寄生虫病。本研究从浙江地区病猪盲肠内分离到了一株结肠小袋纤毛虫,通过RPMI1640培养基对其进行了体外培养,结肠小袋纤毛虫在28℃和37℃均能良好生长,在培养后第5天和第4天分别达到高峰值,虫体密度分别为1.6... 小袋纤毛虫病是一种人畜共患寄生虫病。本研究从浙江地区病猪盲肠内分离到了一株结肠小袋纤毛虫,通过RPMI1640培养基对其进行了体外培养,结肠小袋纤毛虫在28℃和37℃均能良好生长,在培养后第5天和第4天分别达到高峰值,虫体密度分别为1.60×104和2.31×104个·m L-1。显微镜下滋养体胞口、胞肛和食物泡结构明显,DAPI染色后大核明显呈哑铃型,且滋养体有大小差别明显的2种类型。18S r RNA基因PCR扩增、测序和聚类分析结果显示,猪源结肠小袋纤毛虫分离株存在2条明显不同的18S r RNA基因序列,序列间趋异性为0.6%,且该分离株序列与国外分离株间存在显著差异,在进化树上形成一独立的亚枝。在高倍显微镜下,滋养体内常见有许多生物活动,种类不明,16S r RNA基因PCR扩增到3条未知细菌序列,未知细菌16S r RNA基因序列与结肠小袋纤毛虫内微生物间的确切关系有待研究。 展开更多
关键词 结肠小袋纤毛虫 体外培养 18S r RNA基因
在线阅读 下载PDF
延边地区牛瑟氏泰勒虫病的分子流行病学调查 被引量:11
9
作者 胡诗悦 钱年超 +2 位作者 王轶男 贾立军 张守发 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期647-650,共4页
为了解吉林省延边地区牛瑟氏泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片染色镜检法和PCR方法对采自延边地区的206份牛血液样本进行了牛瑟氏泰勒虫病的分子流行病学调查。结果显示,PCR检测的阳性率为62.6%,显著高于血涂片染色镜检法检测的阳性率... 为了解吉林省延边地区牛瑟氏泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片染色镜检法和PCR方法对采自延边地区的206份牛血液样本进行了牛瑟氏泰勒虫病的分子流行病学调查。结果显示,PCR检测的阳性率为62.6%,显著高于血涂片染色镜检法检测的阳性率(17.5%)。采用统计学分析方法对PCR检测的206份血液样本进行了不同地区、不同年龄、不同品种及饲养方式的比较;结果,不同地区之间和不同品种之间瑟氏泰勒虫感染率差异不显著(P>0.05);而不同年龄阶段之间和不同饲养方式之间牛瑟氏泰勒虫感染率差异显著(P<0.05)。结果表明,吉林省延边地区是牛瑟氏泰勒虫病的流行地区。 展开更多
关键词 瑟氏泰勒虫 PCR 血涂片镜检法 分子流行病学调查
原文传递
猪弓浆虫病的诊治与虫体分离 被引量:7
10
作者 何后军 邓舜洲 +2 位作者 罗军荣 邬向东 花向柏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期63-65,共3页
江西某农场的猪场种猪和肥猪几乎同时暴发以高热为特征的疫病 ,病理变化主要为淋巴结出血、肿大 ,脾脏、肝脏肿大 ,肺炎 ,心脏出血。肺门淋巴结触片见多量弓浆虫滋养体 ,病猪血清的弓浆虫抗原、抗体均为阳性。接种病料的小鼠于接种后 2 ... 江西某农场的猪场种猪和肥猪几乎同时暴发以高热为特征的疫病 ,病理变化主要为淋巴结出血、肿大 ,脾脏、肝脏肿大 ,肺炎 ,心脏出血。肺门淋巴结触片见多量弓浆虫滋养体 ,病猪血清的弓浆虫抗原、抗体均为阳性。接种病料的小鼠于接种后 2 5天死亡 ,分离出一株弓浆虫。因此诊断该猪场种猪和肥猪暴发的疫病为弓浆虫病 ,并推测本次弓浆虫病的病原来自饲料中的鱼粉。 展开更多
关键词 弓浆虫病 诊断 治疗 治疗 虫体分离
在线阅读 下载PDF
我国牛羊弓形虫感染情况及影响因素研究进展 被引量:15
11
作者 朱正 孙莹莹 +2 位作者 李楷 周作勇 王芝英 《动物医学进展》 北大核心 2017年第3期107-110,共4页
弓形虫几乎可以感染所有的温血动物,是一种十分重要的人兽共患原虫病病原。牛羊弓形虫感染不仅影响其自身的发育和繁殖,对畜牧业发展造成一定的经济损失,更重要的是感染弓形虫的牛羊肉和奶可成为人类健康和生命安全的潜在威胁。牛羊弓... 弓形虫几乎可以感染所有的温血动物,是一种十分重要的人兽共患原虫病病原。牛羊弓形虫感染不仅影响其自身的发育和繁殖,对畜牧业发展造成一定的经济损失,更重要的是感染弓形虫的牛羊肉和奶可成为人类健康和生命安全的潜在威胁。牛羊弓形虫感染受多种因素(年龄、品种、养殖场管理及犬、猫和鼠的存在等)的影响,不同地区牛羊弓形虫感染的风险因素不尽相同。基于此,论文对弓形虫感染的检测方法、我国不同地区牛羊弓形虫的感染情况及影响弓形虫感染的因素进行综述,旨在为相应地区牛和羊的饲养管理及保障其奶和肉产品的安全供给提供参考。 展开更多
关键词 弓形虫 感染率 影响因素
在线阅读 下载PDF
马杜霉素抗药性诱导的实验研究 被引量:9
12
作者 安健 孔繁瑶 +1 位作者 汪明 殷佩云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期349-356,共8页
以一株对莫能菌素敏感和一株对莫能菌素抗性的柔嫩艾美耳球虫为材料,进行了马杜霉素抗药性诱导实验的研究。通过高、低两个药物浓度系列的诱导,虫株经鸡体内传代18次后,均对5ppm和7ppm马杜霉素产生了抗药性。研究表明:虫... 以一株对莫能菌素敏感和一株对莫能菌素抗性的柔嫩艾美耳球虫为材料,进行了马杜霉素抗药性诱导实验的研究。通过高、低两个药物浓度系列的诱导,虫株经鸡体内传代18次后,均对5ppm和7ppm马杜霉素产生了抗药性。研究表明:虫株对马杜霉素抗药性产生的时限和强度与药物浓度和对莫能菌素的敏感性无关,证明马杜霉素与莫能菌素之间无交叉抗药性。此外,建立了实验室条件下球虫抗药性诱导的起始浓度和梯度及方法。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 抗药性 马杜霉素 莫能菌素
在线阅读 下载PDF
我国弓形虫的感染现状 被引量:67
13
作者 张居作 陈汉忠 徐君飞 《动物医学进展》 CSCD 2008年第7期101-104,共4页
弓形虫病分布在世界各地,不受气候和地理位置的限制,感染状况各地不同。全球人群弓形虫感染率在25%~50%,有十几亿人受感染,我国人群弓形虫感染率在0.09%~34%,少数民族地区可能更高,报道的数据表明,我国人群弓形虫感染率低于世界平均水... 弓形虫病分布在世界各地,不受气候和地理位置的限制,感染状况各地不同。全球人群弓形虫感染率在25%~50%,有十几亿人受感染,我国人群弓形虫感染率在0.09%~34%,少数民族地区可能更高,报道的数据表明,我国人群弓形虫感染率低于世界平均水平,但呈现逐年上升趋势。在动物中,猪的感染率3.32%~66.39%,牛的感染率2.41%~67.46%,羊的感染率27.5%~33.33%,犬的感染率0.66%~40%,猫的感染率14.06%~78%。动物的感染情况复杂,混合其他病原感染或继发感染的情况比较多见。通过对我国弓形虫感染现状的统计分析,了解其危害,体现对其研究和预防的重要性,希望能引起人们的足够重视。 展开更多
关键词 弓形虫 感染现状 危害
在线阅读 下载PDF
10株火鸡组织滴虫18S rRNA基因的克隆及进化分析 被引量:6
14
作者 刘进辉 彭俊宇 +1 位作者 宋海燕 刘毅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期448-452,共5页
应用聚合酶链反应(PCR)鉴定湖南娄底(简称HMLD1-3)、湘潭(HMXT1-2)、永州(HMYZ1-3)和宁乡(HMNX1-2)共10株火鸡组织滴虫,并用18SrRNA部分序列重构火鸡组织滴虫与其它相近原虫的种群遗传关系。作者通过PCR扩增火鸡组织滴虫虫株的18S rRNA... 应用聚合酶链反应(PCR)鉴定湖南娄底(简称HMLD1-3)、湘潭(HMXT1-2)、永州(HMYZ1-3)和宁乡(HMNX1-2)共10株火鸡组织滴虫,并用18SrRNA部分序列重构火鸡组织滴虫与其它相近原虫的种群遗传关系。作者通过PCR扩增火鸡组织滴虫虫株的18S rRNA部分序列,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果表明,来自湖南省的10株火鸡组织滴虫18SrRNA序列长度一致,均为532bp,与GenBankTM公布的火鸡组织滴虫序列相似性在97.5%以上,与其它原虫差异均大于20%。种系发育树分析表明,10个分离株与已知火鸡组织滴虫位于同一分枝。本研究证实该病原为火鸡组织滴虫,从分子生物学水平证明了湖南省存在火鸡组织滴虫。本研究为火鸡组织滴虫病诊断及火鸡组织滴虫种群体遗传学研究奠定了良好基础。 展开更多
关键词 火鸡组织滴虫 核糖体18S RRNA 序列分析 种系发育关系
在线阅读 下载PDF
巨型艾美球虫配子体gam82基因的克隆表达与免疫原性分析 被引量:5
15
作者 彭昊 陶建平 +3 位作者 许金俊 刘丹丹 李建梅 任春芝 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1203-1207,1212,共6页
提取巨型艾美球虫(Eimeria maxima)南通株(NT株)配子体总RNA,应用RT-PCR技术对gam82基因进行克隆,并对其核苷酸及氨基酸进行序列分析。结果表明,克隆的基因全长为1791个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码596个氨基酸,与GenBank中发... 提取巨型艾美球虫(Eimeria maxima)南通株(NT株)配子体总RNA,应用RT-PCR技术对gam82基因进行克隆,并对其核苷酸及氨基酸进行序列分析。结果表明,克隆的基因全长为1791个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码596个氨基酸,与GenBank中发表的Houghton株gam82基因同源性为100%。根据对推导的氨基酸序列的二级结构和抗原表位分析的结果,筛选免疫原性良好的区域,命名为gam82-Y,进行原核表达。重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳和Western-blot检测,gam82-Y基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,相对分子质量约为53000。可溶性分析表明,融合蛋白主要以包涵体形式存在。以E.maxima高免血清为一抗进行Western-blot检测,显示重组抗原gam82-Y具有免疫原性。 展开更多
关键词 巨型艾美球虫 gam82基因 克隆 序列分析 表达
原文传递
应用PCR扩增检测伊氏锥虫的研究 被引量:5
16
作者 王云飞 周勇志 +2 位作者 钟淑梅 宋斌 沈杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期168-173,共6页
本文建立了伊氏锥虫DNA的PCR扩增技术,并用于伊氏锥虫的检测。经PCR扩增后的DNA片断分子量约为237bp,可以检测到0.1pg总DNA或1条虫体,可以诊断小鼠的早期感染(第一天)和重复感染,还可以用来考核抗锥虫... 本文建立了伊氏锥虫DNA的PCR扩增技术,并用于伊氏锥虫的检测。经PCR扩增后的DNA片断分子量约为237bp,可以检测到0.1pg总DNA或1条虫体,可以诊断小鼠的早期感染(第一天)和重复感染,还可以用来考核抗锥虫药物疗效;该项技术对锥虫具有特异性,且灵敏性和准确性都很高。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 PCR 检测 聚合酶链反应
在线阅读 下载PDF
γ-干扰素对弓形虫MIC3的基因免疫效果研究 被引量:5
17
作者 江涛 周艳琴 +4 位作者 聂浩 陈声国 方瑞 姚宝安 赵俊龙 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期519-523,共5页
将编码弓形虫微线蛋白3(MIC3)的真核表达质粒pcMIC3和编码γ-干扰素(IFN-γ)的真核表达质粒pcIFN-γ各100μg混合肌肉注射,间隔2周、3次免疫Balb/c小鼠,同时设相同剂量的pcMIC3、pcDNA和PBS免疫对照组。分别以酶联免疫吸附试验(ELISA)... 将编码弓形虫微线蛋白3(MIC3)的真核表达质粒pcMIC3和编码γ-干扰素(IFN-γ)的真核表达质粒pcIFN-γ各100μg混合肌肉注射,间隔2周、3次免疫Balb/c小鼠,同时设相同剂量的pcMIC3、pcDNA和PBS免疫对照组。分别以酶联免疫吸附试验(ELISA)、四氮甲唑蓝(MTT)比色法和乳酸脱氢酶释放法(LDH)检测试验小鼠血清的特异性抗体、脾淋巴细胞的增殖应答和细胞毒性T细胞(CTL)活性,并观察腹腔接种弓形虫RH株速殖子后质粒的免疫保护效果。结果表明:与其它试验组相比,pcMIC3+pcIFN-γ组试验小鼠在免疫8周后的ELISA抗体水平、脾淋巴细胞的增殖应答和CTL活性显著或极显著提高,免疫小鼠45 d时的生存率为100%,能有效抵抗小剂量弓形虫强毒株的攻击。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 弓形虫微线蛋白3(MIC3) Γ-干扰素 基因免疫
在线阅读 下载PDF
利什曼原虫实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:10
18
作者 张瑞岩 商立民 +2 位作者 张宁 刘全 吴永魁 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第6期164-167,共4页
以利什曼原虫的小环状动基体DNA(Leishmaniak DNA)为靶基因,建立实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法。根据GenBank报道的利什曼原虫小环状动基体DNA保守序列设计合成特异性引物,经PCR扩增后与pMD18-T载体连接,转化入大肠杆菌DH5α感... 以利什曼原虫的小环状动基体DNA(Leishmaniak DNA)为靶基因,建立实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法。根据GenBank报道的利什曼原虫小环状动基体DNA保守序列设计合成特异性引物,经PCR扩增后与pMD18-T载体连接,转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞。挑选阳性克隆重组质粒经鉴定正确后,作为模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线。结果构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.996,而且特异性强,重复性好。本研究成功建立了实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法,该方法可用于利氏曼原虫病的诊断、流行病学监测和科学研究。 展开更多
关键词 利氏曼原虫 实时荧光定量PCR 小环状动基体DNA
在线阅读 下载PDF
旋毛虫新生幼虫期特异性T_(314)全长cDNA的克隆及表达 被引量:4
19
作者 吴秀萍 刘明远 +4 位作者 陈启军 卢强 付宝权 姚春雨 P.Boireau 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期169-171,共3页
利用 PCR将旋毛虫新生幼虫期特异性全长 T31 4c DNA的信号肽祛除后重组到原核表达载体 p ET- 2 8a。将重组质粒 p ET2 8- T31 4转入克隆菌 DH5α和表达菌 DE3,分别提取质粒进行酶切、测序鉴定。用 IPTG诱导培养重组表达菌DE3,做菌体裂... 利用 PCR将旋毛虫新生幼虫期特异性全长 T31 4c DNA的信号肽祛除后重组到原核表达载体 p ET- 2 8a。将重组质粒 p ET2 8- T31 4转入克隆菌 DH5α和表达菌 DE3,分别提取质粒进行酶切、测序鉴定。用 IPTG诱导培养重组表达菌DE3,做菌体裂解物外源基因表达产物的 SDS- PAGE分析。将重组质粒表达的融合蛋白免疫家兔制备抗血清 ,采用Western blot检测 T31 4c DNA在旋毛虫不同发育时期的表达情况及其天然表达产物的相对分子质量。测序结果显示 :外源 T31 4c DNA的 PCR产物在重组质粒 p ET2 8- T31 4中阅读框架正确 ;SDS- PAGE分析结果显示 :经 IPTG诱导后转化菌 DE3的裂解产物与对照菌相比出现了 1条相对分子质量约为 390 0 0的新条带 ,大小与外源 c DNA融合蛋白的理论推导值 3880 0相符 ;Western blot检测结果显示 :T31 4c DNA的天然表达产物仅存在旋毛虫新生幼虫 ,不存在于成虫与肌幼虫 ,且相对分子质量大小与其在原核重组质粒中表达产物相同。 展开更多
关键词 新生幼虫 旋毛虫 T314cDNA 基因克隆 基因表达 特异性基因
在线阅读 下载PDF
斯氏艾美耳球虫子孢子的超微结构 被引量:5
20
作者 索勋 孔繁瑶 +1 位作者 李安兴 殷佩云 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期474-478,共5页
斯氏艾美耳球虫子孢子呈香蕉形,外被三层膜组成的表膜,有前后极环;顶复合器具典型结构,棒状体为8根;核一个,位于虫体前半部,含一个偏心核仁;相当于核中部水平位置的表膜上,见有一微孔;折光体在核后,呈球形,约占子孢子纵长... 斯氏艾美耳球虫子孢子呈香蕉形,外被三层膜组成的表膜,有前后极环;顶复合器具典型结构,棒状体为8根;核一个,位于虫体前半部,含一个偏心核仁;相当于核中部水平位置的表膜上,见有一微孔;折光体在核后,呈球形,约占子孢子纵长的2/5;尾部常见一兔尾巴式的结构,构成方式类似阿米巴的伪足,是由被表膜的胞质向外突出形成的;胞质中见有许多管泡状线粒体和一些电子致密体。 展开更多
关键词 艾美耳球虫 斯氏艾美耳球虫 子孢子 超微结构
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 12 下一页 到第
使用帮助 返回顶部