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球虫感染对家兔小肠、盲肠和圆小囊形态结构及功能的影响
1
作者 刘世洋 刘紫祎 +4 位作者 位兰 吕琼霞 梁文军 刘玉梅 张自强 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第2期78-84,94,共8页
【目的】探究球虫感染对家兔小肠、盲肠、圆小囊形态结构、功能及炎性因子含量的影响。【方法】将20只未被球虫感染的35日龄家兔随机分为对照组和感染组,感染组家兔一次性灌胃0.5×10^(4)个/mL大型艾美耳球虫卵囊的生理盐水2 mL,对... 【目的】探究球虫感染对家兔小肠、盲肠、圆小囊形态结构、功能及炎性因子含量的影响。【方法】将20只未被球虫感染的35日龄家兔随机分为对照组和感染组,感染组家兔一次性灌胃0.5×10^(4)个/mL大型艾美耳球虫卵囊的生理盐水2 mL,对照组家兔灌胃同等剂量的生理盐水。感染后第8天,每组随机抽取6只家兔处死,采集小肠(十二指肠、空肠、回肠)、盲肠以及圆小囊组织,采用HE染色观察家兔小肠、盲肠和圆小囊的组织形态学的变化,采用ELISA试剂盒检测各组织中白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等炎性因子的含量。【结果】与对照组相比,感染组家兔小肠和盲肠肠绒毛结构不完整,绒毛变短,隐窝加深等,空肠、回肠和盲肠观察到有不同发育阶段的球虫寄生;圆小囊发生炎性细胞浸润,且黏膜层有大量球虫寄生。ELISA检测结果显示,感染组家兔小肠、盲肠和圆小囊组织中的炎性因子TNF-α、IL-1β以及IL-6的含量极显著高于对照组(P<0.01)。【结论】大型艾美耳球虫感染可导致家兔的小肠、盲肠和圆小囊产生形态结构损伤与炎症反应,破坏家兔肠道的黏膜结构,促进炎性因子表达。 展开更多
关键词 家兔 大型艾美耳球虫 小肠 盲肠 圆小囊 病理变化
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甘肃和青海地区牛包虫病抗体检测
2
作者 孟春妮 张福亨 +4 位作者 李仁阁 闫鸿斌 付宝权 张念章 孙晓林 《动物医学进展》 北大核心 2026年第2期137-140,共4页
为了解西北地区牛包虫病的流行情况,此次对青海省和甘肃省部分地区开展牦牛、肉牛及奶牛包虫病流行病学调查。对甘肃省和青海省6个城市11个县区的817份牛血清,利用间接ELISA方法进行包虫病检测,并对不同地区、不同品种和养殖方式的差异... 为了解西北地区牛包虫病的流行情况,此次对青海省和甘肃省部分地区开展牦牛、肉牛及奶牛包虫病流行病学调查。对甘肃省和青海省6个城市11个县区的817份牛血清,利用间接ELISA方法进行包虫病检测,并对不同地区、不同品种和养殖方式的差异进行生物学统计。采集的青海省和甘肃省部分地区牛血清包虫病总阳性率为3.7%(30/817),其中牦牛阳性率为5.5%(25/458),奶牛阳性率为2.0%(5/249),肉牛未检测到阳性样本。青海省牛包虫病血清阳性率(4.5%)略高于甘肃省(3.4%),但差异不显著(P>0.05)。甘肃省不同县区的牛包虫病血清阳性率差异显著(P<0.05),流行率在0%~7.3%之间。对不同饲养方式的牛进行统计分析,显示圈养牛包虫病的血清阳性率为1.4%,显著低于散养牛(5.5%)。青海省和甘肃省为我国两大重要牧区,包虫病在这两省仍持续流行,应继续探索操作性强、易推广的牛包虫病综合防控措施,以降低该病在两省的流行。 展开更多
关键词 牛包虫病 抗体 检测
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弓形虫含MFS结构域蛋白TGME49_226020的基本生物学功能研究
3
作者 马志雅 李婷婷 +3 位作者 李文硕 王萌 朱兴全 张念章 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第3期285-295,共11页
为探究弓形虫含主要协同转运蛋白超家族(MFS)结构域蛋白TGME49_226020的基本生物学功能,利用CRISPR-Cas9技术结合生长素诱导的降解系统(m AID)分别构建弓形虫RH-TIR1和Pru-TIR1野生株的条件性缺失虫株RH-TIR1-TGME49_226020-m AID和Pru-... 为探究弓形虫含主要协同转运蛋白超家族(MFS)结构域蛋白TGME49_226020的基本生物学功能,利用CRISPR-Cas9技术结合生长素诱导的降解系统(m AID)分别构建弓形虫RH-TIR1和Pru-TIR1野生株的条件性缺失虫株RH-TIR1-TGME49_226020-m AID和Pru-TIR1-TGME49_226020-m AID。间接免疫荧光试验结果显示,TGME49_226020蛋白定位于细胞质,加入吲哚乙酸(IAA)后目的蛋白被成功降解。将IAA加入RH-TIR1-TGME49_226020-m AID虫株的培养基中,与RH-TIR1野生株相比,条件性缺失虫株感染宿主细胞后噬斑减小(P<0.0001)、入侵能力减弱(P<0.001)、细胞内复制能力减弱(P<0.001),但对逸出能力和弓形虫体内各细胞器的稳定性无影响。缓殖子转化试验结果显示,加入IAA降解后,RH-TIR1-TGME49_226020-m AID虫株和Pru-TIR1-TGME49_226020-m AID虫株的转化能力与相应野生株相比均显著减弱(P<0.001)。结论:TGME49_226020为含MFS结构域的转运蛋白,降解后可影响弓形虫体外细胞内的正常生命活动,具体作用机制需进一步探究。 展开更多
关键词 弓形虫 条件性缺失 MFS结构域 生长素诱导降解系统
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GT1株弓形虫ROP16蛋白不同功能片段对三阴性乳腺癌细胞表型的影响
4
作者 周月 赵志军 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期175-183,共9页
为了探究Ⅰ型GT1株弓形虫ROP16蛋白不同功能截短体(激酶域与N端保守基序)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞周期、增殖、凋亡及迁移的影响,解析其抗肿瘤活性的分子结构关键功能域。首先基于NCBI-CDD预测ROP16功能域,构建ROP16激酶域截短体(3... 为了探究Ⅰ型GT1株弓形虫ROP16蛋白不同功能截短体(激酶域与N端保守基序)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞周期、增殖、凋亡及迁移的影响,解析其抗肿瘤活性的分子结构关键功能域。首先基于NCBI-CDD预测ROP16功能域,构建ROP16激酶域截短体(357~707aa)及N端截短体(1~356aa)慢病毒载体;建立MDA-MB-231稳转细胞系,通过CCK8、流式凋亡/周期检测、划痕/Transwell试验评估功能域对细胞表型的影响;结合RT-qPCR、Western-blot分析凋亡相关基因(BAX/BCL2/CASP3)的m RNA及蛋白表达。结果显示,ROP161~356截短体可显著抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),引起G2/M期阻滞,同时上调促凋亡因子BAX、Caspase3表达;而ROP16357~707截短体非但不具抗肿瘤活性,反而促进细胞增殖(P<0.05),加速有丝分裂进程,并显著增强细胞的转移(P<0.01)及侵袭能力(P<0.05)。本研究首次证实ROP16 N端保守基序(1~356aa)在抗肿瘤作用中起核心作用,揭示了ROP16不同功能截短体对肿瘤细胞的差异性调控,为基于ROP16蛋白开发新型抗肿瘤生物制剂提供了关键理论依据与研究方向。 展开更多
关键词 弓形虫 ROP16蛋白 截短体 MDA-MB-231细胞 表型
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表达兔球虫保护性抗原的重组枯草芽胞杆菌的构建与免疫保护效果分析
5
作者 肖洁 何维 +4 位作者 熊常明 郝哥 许力文 古小彬 杨光友 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期1017-1033,共17页
兔球虫病是一种呈世界性分布的寄生性原虫病,给养兔业造成了巨大的经济损失。传统的化学药物防控方法导致了普遍存在的耐药性及药物残留等问题;枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)作为常用的益生菌之一,被广泛用于外源蛋白的表达,这种基... 兔球虫病是一种呈世界性分布的寄生性原虫病,给养兔业造成了巨大的经济损失。传统的化学药物防控方法导致了普遍存在的耐药性及药物残留等问题;枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)作为常用的益生菌之一,被广泛用于外源蛋白的表达,这种基于益生菌的口服疫苗接种策略发生副作用的风险较小,还可以减少抗球虫药物的使用,因此具有良好的发展前景。本研究以CotB为锚定蛋白构建整合质粒,通过同源重组实现Ei AMA1、Ei IMP1、Em GAM56和Em ROP17抗原在枯草杆菌芽胞表面的展示。并使用重组芽胞Ei IMP1和重组芽胞Ei AMA1单独或混合拌料免疫家兔,对其抗肠艾美耳球虫感染的免疫保护效果进行评估;使用重组芽胞Em GAM56和重组芽胞Em ROP17单独或混合拌料免疫家兔,对其抗大型艾美耳球虫感染的免疫保护效果进行评估。结果显示:重组芽胞r Ei AMA1单独拌料免疫家兔后,卵囊排出量和病变计分都显著降低(P<0.05),卵囊减少率达到59.91%。重组芽胞Em GAM56单独拌料免疫组效果相较重组芽胞Em ROP17单独和Em GAM56+Em ROP17混合拌料免疫组更好,卵囊排量显著降低(P<0.05),卵囊减少率达到68.54%。此外,重组芽胞免疫后实验兔血清特异性IgG和肠道特异性IgA都出现显著上升(P<0.05)。综上,构建的四种重组芽胞都可以刺激机体产生特异性的全身和局部体液免疫反应,重组芽胞r Ei AMA1和重组芽胞Em GAM56分别表现出较好的抗肠艾美耳球虫和抗大型艾美耳球虫感染的免疫保护效果,因此,枯草芽胞杆菌具有作为兔球虫病疫苗活载体的潜力。 展开更多
关键词 兔 肠艾美耳球虫 大型艾美耳球虫 枯草芽胞杆菌 基因工程疫苗
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巨型住肉孢子虫 SPFH-SG基因qPCR检测方法的建立及应用
6
作者 童静 郭良婷 康明 《青海畜牧兽医杂志》 2026年第1期8-12,共5页
为建立一种快速准确的藏羊巨型住肉孢子虫(Sarcocystis gigantea)的临床检测方法,本研究基于巨型住肉孢子虫SPFH-SG基因,通过缓殖子荧光定量标准曲线的建立,敏感性、重复性、特异性试验验证,成功建立了SYBR Green Ⅰ的荧光定量PCR(qPCR... 为建立一种快速准确的藏羊巨型住肉孢子虫(Sarcocystis gigantea)的临床检测方法,本研究基于巨型住肉孢子虫SPFH-SG基因,通过缓殖子荧光定量标准曲线的建立,敏感性、重复性、特异性试验验证,成功建立了SYBR Green Ⅰ的荧光定量PCR(qPCR)检测方法并检测了423份藏羊样本。结果表明,该诊断方法特异性较强、灵敏度较高且重复性好,血液与食道肌样品的检测结果符合率达98.9%,能够准确地进行藏羊巨型住肉孢子虫的生前快速检测和诊断。 展开更多
关键词 巨型住肉孢子虫 SPFH-SG 荧光定量PCR SYBR GreenⅠ
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广东某规模化鸽场禽隐孢子虫感染特征
7
作者 何玫函 林栩慧 +9 位作者 廖申权 戚南山 吕敏娜 蔡海明 宋勇乐 陈祥杰 朱易斌 孙铭飞 白银山 李娟 《广东畜牧兽医科技》 2026年第1期23-28,共6页
为了解广东某规模化鸽场腹泻发生的诱导性因素,该研究通过形态学鉴定、分子生物学鉴定、种系发育分析及病理组织学分析对腹泻鸽群进行禽隐孢子虫感染特征分析。结果显示腹泻鸽群存在禽隐孢子虫感染,感染种类经鉴定为火鸡隐孢子虫(Crypto... 为了解广东某规模化鸽场腹泻发生的诱导性因素,该研究通过形态学鉴定、分子生物学鉴定、种系发育分析及病理组织学分析对腹泻鸽群进行禽隐孢子虫感染特征分析。结果显示腹泻鸽群存在禽隐孢子虫感染,感染种类经鉴定为火鸡隐孢子虫(Cryptosporidium melea⁃gridis,C.meleagridis),鸽群感染阳性率高达43.75%(7/16)。进一步病理组织学分析发现,感染鸽回肠上皮细胞出现坏死、固有层炎症浸润等典型病变。C.meleagridis是仅次于微小隐孢子虫(C.parvum)的第三大人兽共患隐孢子虫。该研究的发现具有重大的公共卫生意义,并为鸽群腹泻致病因素解析提供新的视角,为鸽场隐孢子虫病的科学防控提供了重要数据支撑。同时,提示该病原存在粪⁃口途径或水源性传播的潜在风险,对制定相应的防控措施保障公共卫生安全具有重要意义。 展开更多
关键词 火鸡隐孢子虫 人兽共患病 感染特征 防控措施
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表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫的构建与鉴定
8
作者 刘跃辉 孙颖颖 +3 位作者 王浩迪 索静霞 宋铭忻 刘贤勇 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第2期1008-1016,共9页
传染性法氏囊病严重制约家禽养殖业经济发展。因此,研发安全且高效的传染性法氏囊病疫苗成为当下备受瞩目的关键课题。为探索柔嫩艾美耳球虫作为活载体表达及递送传染性法氏囊病毒抗原的可行性,本研究构建表达该病毒VP2蛋白的转基因柔... 传染性法氏囊病严重制约家禽养殖业经济发展。因此,研发安全且高效的传染性法氏囊病疫苗成为当下备受瞩目的关键课题。为探索柔嫩艾美耳球虫作为活载体表达及递送传染性法氏囊病毒抗原的可行性,本研究构建表达该病毒VP2蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫株(Et-VP2)。构建表达质粒,酶切后核转染入柔嫩艾美耳球虫中,利用流式细胞分选技术筛选得到表达红色荧光报告基因(mCherry)的阳性虫株,在基因和蛋白水平上鉴定VP2基因的表达。结果显示,构建表达VP2蛋白的转基因柔嫩艾美耳球虫经雏鸡体内3次传代阳性球虫荧光率已高于95%,在球虫基因和蛋白水平上证实了外源基因的成功插入和稳定表达(后代群体荧光率均达95%),间接免疫荧光结果显示融合蛋白(Mic2-linker-VP2)定位于柔嫩艾美耳球虫子孢子顶端。本研究成功建立柔嫩艾美耳球虫稳定转染体系,为后续转基因虫株的传染性法氏囊病免疫保护研究奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 传染性法氏囊病病毒 VP2 MCHERRY 转基因
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骆驼属(Camelus)动物球虫种类与世界分布
9
作者 黄兵 董辉 +3 位作者 韩红玉 李军燕 朱顺海 赵其平 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期200-208,共9页
为了解骆驼属(Camelus)动物球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关报道骆驼属动物球虫的相关文献,按虫种学名的字母为序,介绍了已报道的8种骆驼属动物球虫,其中艾美耳属(Eimeria)7种、囊等孢属(Cystoisospora)1种... 为了解骆驼属(Camelus)动物球虫的种类及在世界各地的分布状况,本文收集整理了世界上有关报道骆驼属动物球虫的相关文献,按虫种学名的字母为序,介绍了已报道的8种骆驼属动物球虫,其中艾美耳属(Eimeria)7种、囊等孢属(Cystoisospora)1种,每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄生部位、地理分布,地理分布按照国家和地区的英文或拼音字母为序。在收录的27个国家报道骆驼属动物球虫中,中国记录7种,印度记录6种,埃及、伊朗、伊拉克记录5种,哈萨克斯坦、沙特阿拉伯、阿联酋记录4种,尼日利亚等5个国家记录3种,阿尔及利亚等4个国家记录2种,澳大利亚等10个国家记录1种;有22个国家记录了骆驼艾美耳球虫(E.cameli),18个国家记录了单峰驼艾美耳球虫(E.dromedarii),10个国家记录了双峰驼艾美耳球虫(E.bactriani)和拉贾斯坦艾美耳球虫(E.rajasthani),7个国家记录了佩氏艾美耳球虫(E.pellerdyi),4个国家记录了奥氏囊等孢子虫(C.orlovi),吉兰泰艾美耳球虫(E.jilantaii)和乌兰艾美耳球虫(E.wulanensis)均在中国首次发现和命名,目前仅在中国有记录。另外,在韩国、约旦、坦桑尼亚、埃塞俄比亚、斯洛文尼亚、美国等6个国家的骆驼粪便中检出球虫(Eimeria/Coccidia)未定种,检出率为1.80%~58.54%。本文基本能反映出骆驼属动物球虫在世界范围的分布状况,为全面了解骆驼属动物球虫的种类与地理分布提供了一份较为完整的基础资料。 展开更多
关键词 骆驼 球虫 艾美耳球虫 囊等孢子虫 种类 分布
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世界山羊(Capra hircus)球虫种类与地理分布
10
作者 黄兵 董辉 +3 位作者 韩红玉 朱顺海 赵其平 于珏 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期207-221,共15页
为了解山羊(Capra hircus)球虫的种类及在世界各地的分布情况,本文收集整理了世界上报道山羊球虫的相关资料,按照虫种学名的字母为序,介绍了从山羊检出的19种艾美耳球虫(Eimeria),包括1种在中国发现与命名的新种(E.shunyiensis Wang,Shu... 为了解山羊(Capra hircus)球虫的种类及在世界各地的分布情况,本文收集整理了世界上报道山羊球虫的相关资料,按照虫种学名的字母为序,介绍了从山羊检出的19种艾美耳球虫(Eimeria),包括1种在中国发现与命名的新种(E.shunyiensis Wang,Shu and Ling,1990)和2种以绵羊(Ovis aries)为模式宿主的球虫。每种球虫包括中文名称与学名、宿主名称、寄生部位、地理分布,部分种类有同物异名,地理分布按照国家或地区的英文或拼音字母为序。在收录的50个国家中,记录球虫种类最多的国家为中国(13种,含新种E.shunyiensis),其次为巴西(12种,含新种E.sundarbanensis)与新西兰(12种,含新种E.capralis,E.charlestoni,E.masseyensis),记录9~11种球虫的国家占46%,5~8种球虫的国家占24%,1~4种球虫的国家占24%。在19种球虫中,分布最广的球虫为E.arloingi(46个国家),其次为E.ninakohlyakimovae(44个国家)、E.hirci(43个国家)、E.alijevi(42个国家),分布国家数在20~39的球虫种类占26.32%,2~19的球虫种类占15.79%,有7种球虫(36.84%)仅报道于一个国家。本文基本能反映出山羊球虫在世界范围的分布状况,为全面了解山羊球虫的地理分布提供了一份较为完整的基础资料。 展开更多
关键词 山羊 球虫 艾美耳球虫 种类 分布
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天冬氨酸蛋白酶在卵形巴贝斯虫侵染长角血蜱过程中的作用研究
11
作者 罗金 张高峰 +9 位作者 崔晶晶 柳志成 赵帅阳 任巧云 胡东生 曹立华 常国勤 殷宏 罗建勋 刘光远 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第2期163-170,共8页
本试验以天冬氨酸蛋白酶(AP)为目标基因,探究其表达抑制后对卵形巴贝斯虫侵染长角血蜱的能力。利用5′/3′-RACE和PCR扩增天冬氨酸蛋白酶基因的全长和CDS,然后根据获得的序列设计siRNA干扰引物。通过颈静脉接种卵形巴贝斯虫的方式构建... 本试验以天冬氨酸蛋白酶(AP)为目标基因,探究其表达抑制后对卵形巴贝斯虫侵染长角血蜱的能力。利用5′/3′-RACE和PCR扩增天冬氨酸蛋白酶基因的全长和CDS,然后根据获得的序列设计siRNA干扰引物。通过颈静脉接种卵形巴贝斯虫的方式构建动物感染模型,将通过RNA干扰(RNAi)AP基因表达后的长角血蜱置于感染卵形巴贝斯虫牛体表,使蜱叮咬后检测蜱及蜱卵中卵形巴贝斯虫的感染率。结果显示,长角血蜱AP基因全长为1497 bp,编码区序列为1176 bp。该基因的RNAi可使AP的表达丰度降低81.91%(P=0.003<0.01)具有显著性差异。感染动物过程中,相较于空白对照组和阴性对照组,qRT-PCR结果表明RNAi组的巴贝斯虫感染率下降。试验结果表明,干扰长角血蜱AP能有效抑制卵形巴贝斯虫的垂直传播,虽然该基因在蜱种间有较高保守性,但是其核酸序列仍然存在一定的差异。该基因第626~644位或第257~275位定点结合可作为潜在的阻断卵形巴贝斯虫传播的疫苗设计靶点,该位点可以发挥抑制/干扰AP表达的作用。该作用下可有效阻止卵形巴贝斯虫的垂直传播,而且可导致巴贝斯虫的感染水平的显著降低。因此,本研究不仅有助于揭示巴贝斯虫的生物学特性,也为疾病防控提供了潜在的新策略,为公共卫生提供更加有效的干预措施。 展开更多
关键词 长角血蜱 卵形巴贝斯虫 天冬氨酸蛋白酶 RNA干扰 RACE
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孔氏艾美耳球虫石家庄分离株的致病性和免疫原性研究
12
作者 王鹏 施宇博 +2 位作者 方素芳 关琛 崔平 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第1期75-81,共7页
为获得孔氏艾美耳球虫的地理分布及不同地理株的致病性和免疫原性。本研究应用单卵囊分离技术,根据形态学特征获得孔氏艾美耳球虫石家庄株(E.kongi-SJZ),基于ITS-1构建系统发育树,进一步鉴定该虫株。同时,研究了孔氏艾美耳球虫石家庄株... 为获得孔氏艾美耳球虫的地理分布及不同地理株的致病性和免疫原性。本研究应用单卵囊分离技术,根据形态学特征获得孔氏艾美耳球虫石家庄株(E.kongi-SJZ),基于ITS-1构建系统发育树,进一步鉴定该虫株。同时,研究了孔氏艾美耳球虫石家庄株的致病性和免疫原性。结果显示,孔氏艾美耳球虫石家庄株(E.kongi-SJZ)与孔氏艾美耳球虫张家口株(E.kongi-ZJK)聚为一个小支,位于兔球虫的单系群内,且位于无外残体的姐妹谱系上,该株球虫属于孔氏艾美耳球虫的一个地理株,具有中等致病性及较强的免疫原性。该结果不仅丰富了兔球虫物种多样性,也为兔球虫病防控提供了依据。 展开更多
关键词 兔 孔氏艾美耳球虫 系统发育分析 致病性 免疫原性
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柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药株诱导及单核苷酸多态性杂合度分析
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作者 方素芳 顾小龙 +2 位作者 郝成宇 关琛 崔平 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期53-59,共7页
为诱导柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对莫能菌素的耐药虫株,并分析其基因组单核苷酸多态性(SNP)的杂合度(Hp),采用常规药物浓度递增方法,在实验室条件下,以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导... 为诱导柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对莫能菌素的耐药虫株,并分析其基因组单核苷酸多态性(SNP)的杂合度(Hp),采用常规药物浓度递增方法,在实验室条件下,以0.5 g/kg莫能菌素预混剂为起始浓度对柔嫩艾美耳球虫莫能菌素耐药性进行诱导,以最适抗球虫活性百分率(POAA)、相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)和抗球虫指数(ACI)指标综合判定柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素的耐药性。将诱导出的耐药株和敏感株(豪顿株)基因组重测序,并进行基因组Hp分析。经过12次传代,获得了柔嫩艾美耳球虫1倍、2倍、4倍和10倍耐药虫株,其中10倍耐药株的POAA为14.3%,ROP为68%,RLS为27%,ACI为107。与参考基因组进行比对,共检测到132691个突变,其中豪顿株共计11085个突变,耐药株共计121606个突变。从SNPindex分布图中可见,豪顿株、1倍和2倍耐药株绝大多数位点基因频率接近0,而在4倍及10倍耐药株中SNP频率显著增加,其中部分位点的基因频率达到1。耐药群体在第6、第12、第14和第15号染色体上检测到低水平Hp,推测其与柔嫩艾美耳球虫对莫能菌素耐药性的产生有关。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 莫能菌素 耐药性 单核苷酸多态性 杂合度
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温州市部分宠物犬猫隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫分子鉴定与分析
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作者 胡霖 啜力文 +5 位作者 赵辰昊 王泽坤 余复昌 陈文杰 王力 张振杰 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期83-89,共7页
为了解温州市宠物犬猫隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫的感染情况,分别采集温州市宠物犬和猫粪便样本100份和64份,提取DNA后,基于隐孢子虫SSU rRNA基因和毕氏肠微孢子虫ITS基因,采用PCR法进行检测。结果发现,隐孢子虫总阳性率为4.90%(8/164),... 为了解温州市宠物犬猫隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫的感染情况,分别采集温州市宠物犬和猫粪便样本100份和64份,提取DNA后,基于隐孢子虫SSU rRNA基因和毕氏肠微孢子虫ITS基因,采用PCR法进行检测。结果发现,隐孢子虫总阳性率为4.90%(8/164),宠物犬和猫隐孢子虫的阳性率分别为4.00%(4/100)和6.25%(4/64)。毕氏肠微孢子虫总阳性率为15.85%(26/164),宠物犬和猫毕氏肠微孢子虫的阳性率分别为23.00%(23/100)和4.69%(3/64)。经序列比对分析,鉴定出2种隐孢子虫,分别为犬隐孢子虫(n=4)、猫隐孢子虫(n=4);鉴定出3种毕氏肠微孢子虫基因型,分别为PtEbⅨ(n=22)、CHG1(n=2)和BEB6(n=1)。研究结果表明,温州市宠物犬猫感染隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫较常见,应进一步加强检测和溯源工作。 展开更多
关键词 隐孢子虫 毕氏肠微孢子虫 检测 犬 猫
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陕西省榆林地区鸡异刺线虫的流行情况调查及其核糖体ITS区、线粒体cox1基因的序列分析 被引量：2
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作者 郑星星 李中波 尹会方 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期84-92,101,共10页
为了解陕西省榆林地区鸡异刺线虫的流行情况及其核糖体ITS区、线粒体cox1基因序列进化特征,试验于2022年4—10月份采集榆林市榆阳区、横山区、佳县、米脂县、靖边县、定边县和神木县7个区(县)养鸡场的新鲜鸡粪样本536份(笼养鸡和放养鸡... 为了解陕西省榆林地区鸡异刺线虫的流行情况及其核糖体ITS区、线粒体cox1基因序列进化特征,试验于2022年4—10月份采集榆林市榆阳区、横山区、佳县、米脂县、靖边县、定边县和神木县7个区(县)养鸡场的新鲜鸡粪样本536份(笼养鸡和放养鸡粪便各268份),采用饱和盐水漂浮法富集虫卵,并通过形态学检测鸡异刺线虫虫卵,统计不同区(县)笼养鸡和放养鸡粪便鸡异刺线虫阳性样本数量和阳性率;每个区(县)随机挑选出5只粪检呈鸡异刺线虫阳性的放养鸡(编号为YLHG1~YLHG35),取盲肠内容物提取基因组DNA后对鸡异刺线虫核糖体ITS区、线粒体cox1基因进行PCR扩增与测序,分析核糖体ITS区、线粒体cox1基因序列的碱基组成与遗传差异性,并分别基于鸡异刺线虫核糖体ITS区、线粒体cox1基因构建系统发育树以分析榆林地区鸡异刺线虫的系统发育关系。结果表明:检测到的鸡异刺线虫虫卵外观整体呈淡灰褐色、长椭圆形、轮廓清晰,卵壳光滑且分为明显的内外两层,内含单个尚未分裂的胚细胞;536份新鲜鸡粪样本中共有300份样本检出鸡异刺线虫虫卵,总阳性率为55.97%。其中55份来自笼养鸡,阳性率为20.52%;245份来自放养鸡,阳性率为91.42%。榆林市7个区(县)鸡异刺线虫总阳性率由高到低依次为靖边县(64.10%)、定边县(63.41%)、神木县(57.89%)、佳县(55.81%)、米脂县(51.14%)、横山区(50.0%)、榆阳区(46.77%),笼养鸡阳性率由高到低依次为定边县(31.71%)、靖边县(30.77%)、神木县(23.68%)、佳县(18.60%)、米脂县(15.91%)、榆阳区(9.68%)、横山区(9.38%),放养鸡阳性率由高到低依次为靖边县(97.44%)、定边县(95.12%)、佳县(93.02%)、神木县(92.10%)、横山区(90.62%)、米脂县(86.36%)、榆阳区(83.87%)。PCR扩增出鸡异刺线虫的核糖体ITS区、线粒体cox1基因大小分别为969 bp和1325 bp。鸡异刺线虫核糖体ITS区基因序列碱基A、T、G、C含量百分比分别为24.6%~25.3%、30.5%~31.5%、24.6%~25.8%和18.6%~19.1%,其中A+T的含量为55.1%~56.8%,G+C的含量为43.2%~44.9%,呈现明显的AT偏好性;鸡异刺线虫线粒体cox1基因序列碱基A、T、G、C含量分别为23.4%~23.5%、42.9%~43.3%、21.2%~21.4%和11.9%~12.4%,其中A+T的含量为66.3%~66.8%,G+C的含量为33.1%~33.8%,呈现明显的AT偏好性。鸡异刺线虫核糖体ITS区基因序列种内差异为0~3.8%,种间差异为20.4%~31.0%;线粒体cox1基因序列种内差异为0~0.9%,种间差异为8.6%~14.6%。基于鸡异刺线虫核糖体ITS区基因构建的系统发育树分为3个分支(分支Ⅰ~Ⅲ)。分支Ⅰ由达荷美异刺线虫(JX845277)、泡状异刺线虫(LC389877)和等矛异刺线虫(KM212953)共同聚类而成;分支Ⅱ由贝拉异刺线虫(LC592733)与印度异刺线虫(LC592806)共同聚类而成;分支Ⅲ由本研究获得的35株鸡异刺线虫(YLHG1~YLHG35)与鸡异刺线虫虫株MPM(LC777441)、HJL10F(LC592784)、HHL19F(LC592776)共同聚类而成,其中鸡异刺线虫虫株YLHG1、MPM(LC777441)、YLHG32~YLHG35聚类成第1个小分支,虫株YLHG30与YLHG31聚类成第2个小分支,其余鸡异刺线虫虫株聚类成第3个小分支。基于鸡异刺线虫线粒体cox1基因构建的系统发育树分为2个分支(分支Ⅰ、Ⅱ)。分支Ⅰ由贝拉异刺线虫(KU529972)、印度异刺线虫(LC592869)与异形异刺线虫(MK024389)共同聚类而成,分支Ⅱ由本研究获得的35株鸡异刺线虫(YLHG1~YLHG35)与鸡异刺线虫虫株YA1(KP308308)、XC1(KP308317)、MY1(KP308325)共同聚类而成。说明陕西省榆林地区鸡群感染鸡异刺线虫情况较为普遍,且7个区(县)鸡群感染的虫株之间存在一定程度的遗传差异性。 展开更多
关键词 鸡异刺线虫 核糖体ITS区基因 线粒体cox1基因 序列特征 基因变异 遗传多样性 系统发育关系
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巨型住肉孢子虫缓殖子感染小鼠试验研究 被引量：1
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作者 郭良婷 亓心宇 +2 位作者 祁通生 刘培琪 康明 《动物医学进展》 北大核心 2025年第5期87-91,共5页
巨型住肉孢子虫(Sarcocystis gigantea)是一种食源性寄生虫,寄生于羊食道肌、横纹肌中形成包囊,不但造成畜牧业经济损失,而且病羊肉及其制品也影响人类食品卫生安全。以4种品系小鼠(SCID、ICR、Balb/c、C57BL/6)、不同感染方式和不同感... 巨型住肉孢子虫(Sarcocystis gigantea)是一种食源性寄生虫,寄生于羊食道肌、横纹肌中形成包囊,不但造成畜牧业经济损失,而且病羊肉及其制品也影响人类食品卫生安全。以4种品系小鼠(SCID、ICR、Balb/c、C57BL/6)、不同感染方式和不同感染剂量进行巨型住肉孢子虫缓殖子感染小鼠,并对小鼠体重、生存率、细胞因子变化以及缓殖子生长发育情况进行了检测和分析。结果显示,Balb/c小鼠在攻虫后生存率下降明显,出现类似寄生虫感染症状;C57BL/6、Balb/c和ICR小鼠感染后均表现出小鼠体液免疫和细胞免疫相关因子的表达,ICR小鼠IFN-γ细胞因子和IgG、IgG1抗体水平与对照组相比差异显著(P<0.05);4种小鼠粪便、腹水和肠内容物中均未检测到住肉孢子虫。结果表明,巨型住肉孢子虫缓殖子可刺激小鼠引起免疫反应,生长发育不良,但不能建立感染。 展开更多
关键词 巨型住肉孢子虫 缓殖子 感染 小鼠
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弓形虫ME49株ROP8基因的原核表达优化及功能研究 被引量：1
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作者 余一然 姚余有 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第3期110-115,共6页
为了明确假激酶ROP8在弓形虫抵抗宿主免疫中的作用,我们成功构建弓形虫ROP8原核表达体系并研究了多克隆抗体对弓形虫增殖的影响。根据基因分析结果,在ME49虫株中获得ROP8-C的369 bp的截短片段并克隆入pET28a载体中。将此质粒转化入BL21(... 为了明确假激酶ROP8在弓形虫抵抗宿主免疫中的作用,我们成功构建弓形虫ROP8原核表达体系并研究了多克隆抗体对弓形虫增殖的影响。根据基因分析结果,在ME49虫株中获得ROP8-C的369 bp的截短片段并克隆入pET28a载体中。将此质粒转化入BL21(DE3)感受态大肠杆菌IPTG,诱导并筛选诱导条件,用纯化后的蛋白免疫新西兰兔后获得多克隆抗体。Western blot显示弓形虫裂解蛋白产生了两个条带,表明以ME49虫株为总DNA模板,成功扩增出369 bp的ROP8截短基因,构建出pET28a-ROP8质粒,经过测序和比对后与基因文库中的蛋白序列完全相同。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物显示,在20 kDa有特异性条带且在IPTG终浓度为1 mmol/L、37℃诱导表达6 h时表达量最高。弓形虫增殖实验结果显示,该多克隆抗体能够抑制弓形虫的增殖,可为研究ROP8在弓形虫增殖过程中的作用及其机制奠定基础,并为其作为疫苗候选分子提供新线索。 展开更多
关键词 弓形虫 假激酶 ROP8 多克隆抗体
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巨型艾美耳球虫卵囊壁蛋白的富集和鉴定
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作者 曹俊琴 肖琴 +7 位作者 曲自刚 李文卉 张念章 刘万荣 肖光峰 高生智 马永华 付宝权 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第12期1662-1672,共11页
采用蔗糖密度梯度离心法从破碎的巨型艾美耳球虫卵囊中分离出卵囊壁,通过LC-MS/MS技术鉴定出3398个蛋白质和8228个肽段;并且成功表达了由XP013338282.1和XP013337465.1基因编码的2种卵囊壁蛋白,用间接免疫荧光法证实前者定位于卵囊壁和... 采用蔗糖密度梯度离心法从破碎的巨型艾美耳球虫卵囊中分离出卵囊壁,通过LC-MS/MS技术鉴定出3398个蛋白质和8228个肽段;并且成功表达了由XP013338282.1和XP013337465.1基因编码的2种卵囊壁蛋白,用间接免疫荧光法证实前者定位于卵囊壁和孢子囊,后者定位于卵囊壁,这2种蛋白都可作为潜在的卵囊壁表面标志物。本研究解析了巨型艾美耳球虫卵囊壁的组成,有助于探究卵囊在生活史中的作用机制,为挖掘检测和药物靶标奠定了基础。 展开更多
关键词 巨型艾美耳球虫 卵囊壁 蛋白质组学 Β-微管蛋白 SAG2蛋白
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田鼠巴贝斯虫对鼠、兔和羊的感染性分析
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作者 李志康 周珂珂 +5 位作者 陈兆国 米荣升 黄燕 朱琪 龚海燕 刘伟 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5635-5648,共14页
巴贝斯虫是一类由蜱传播的寄生于人或其他动物红细胞内的人兽共患病病原。感染后可引起宿主发热、贫血及血红蛋白尿等临床症状,甚至可导致死亡,严重威胁着人类尤其是无脾、恶性肿瘤、免疫抑制患者的健康。前期的流行病调查发现巴贝斯虫... 巴贝斯虫是一类由蜱传播的寄生于人或其他动物红细胞内的人兽共患病病原。感染后可引起宿主发热、贫血及血红蛋白尿等临床症状,甚至可导致死亡,严重威胁着人类尤其是无脾、恶性肿瘤、免疫抑制患者的健康。前期的流行病调查发现巴贝斯虫在不同家养动物中的感染率存在明显差异,但是其具体致病机制尚不十分明确。本研究以田鼠巴贝斯虫为研究对象,比较其在常见不同实验动物中的感染能力、血液指数变化和免疫反应,为进一步揭示其致病机制提供依据。以鼠、兔和羊等动物为感染模型,经人工接种田鼠巴贝斯虫后,对0~36 d感染期的染虫率、血液指标及血清中特异性抗体水平进行动态监测。结果表明,小鼠感染后第4天时染虫率达到峰值(62.9%),拷贝数达6.05×10^(7)copies·μL^(-1),而新西兰兔和羊红细胞染虫率接近于0。血液学监测显示,感染早中期(0~20 d),小鼠血液中红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)等显著降低。感染早期(0~8 d),血小板数目(PLT)和血小板压积(PCT)较对照组明显降低,此后逐渐恢复正常值。ELISA检测显示,小鼠感染后抗田鼠巴贝斯虫分泌抗原1(BmSA1)抗体持续上升,到第16天达平台期并在后期维持较高水平,而新西兰兔在接种后抗体水平迅速上升,第8天达到平台期并维持较高水平,但绵羊的抗体水平较低。上述结果表明,鼠易感田鼠巴贝斯虫,且血液参数明显异常,而兔和羊不易感,这种特异性可能与寄生虫对宿主细胞识别位点的遗传多样性有关。兔和羊两种非易感动物的抗体水平的差异可能暗示两个物种在抗巴贝斯虫的机制上有本质的区别。本研究为进一步研究巴贝斯虫与宿主的互作机制及致病机理、疫苗与药物筛选奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 田鼠巴贝斯虫 易感性 感染率 抗体 血小板
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细粒棘球绦虫 LAP 基因的原核表达及对犬PBMCs的影响
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作者 赵家欣 徐春生 +7 位作者 陈旭珂 黄俊程 魏琳颖 张玉霞 张艳艳 孙艳 薄新文 王正荣 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第12期2699-2707,共9页
通过生物信息学分析、原核表达和rEgLAP对犬外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的影响,探究细粒棘绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)的生物学功能,为之后研究抗Eg... 通过生物信息学分析、原核表达和rEgLAP对犬外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)的影响,探究细粒棘绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)的生物学功能,为之后研究抗Eg疫苗提供基础数据。从NCBI GenBank数据库中获取细粒棘球绦虫亮氨酸氨基肽酶(EgLAP)的基因序列,采用生物信息学软件分析该基因的B细胞抗原表位等。先通过原核表达成功制备重组蛋白,随后采用Western blot技术对其抗原性进行分析;同时利用实时荧光定量PCR检测EgLAP基因在原头蚴与成虫中的相对转录水平,并从NCBI数据库下载EgLAP基因序列构建进化树;最后,结合细胞增殖试验与qPCR检测,评价LAP对犬PBMCs功能的影响。结果显示,成功克隆了EgLAP基因的ORF编码序列大小为1608 bp。经SDS-PAGE验证,rEgLAP蛋白相对分子质量为66 kDa;Western blot分析显示重组蛋白成功被犬的阳性血清识别;实时荧光定量PCR检测该基因在成虫阶段表达量高于原头蚴阶段(P<0.0001)。重组蛋白对犬PBMCs的增殖没有显著性影响(P>0.0500),qPCR结果显示,重组蛋白对犬PBMCs细胞因子IL-17A和IFN-γ的分泌表达具有调控作用(P<0.0001)。初步证实rEgLAP拥有良好的免疫原性,具有成为Eg终末宿主疫苗的潜力。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 亮氨酸氨基肽酶 原核表达 外周血单个核细胞
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