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禽毛滴虫感染动物模型建立和优化
1
作者 江家豪 蔡海明 +10 位作者 廖申权 戚南山 李娟 吕敏娜 林栩慧 宋勇乐 陈祥杰 朱易斌 张健騑 刘文俊 孙铭飞 《广东畜牧兽医科技》 2025年第2期14-22,共9页
该研究对比不同的禽毛滴虫感染动物的方法以及感染剂量,通过各评价指标筛选得到最优的禽毛滴虫病动物模型的造模方法。首先进行禽毛滴虫不同造模方法的比较,选取30只未感染禽毛滴虫的乳鸽,分为6组,分别为PBS对照组、0.3%Agar+TYM对照组... 该研究对比不同的禽毛滴虫感染动物的方法以及感染剂量,通过各评价指标筛选得到最优的禽毛滴虫病动物模型的造模方法。首先进行禽毛滴虫不同造模方法的比较,选取30只未感染禽毛滴虫的乳鸽,分为6组,分别为PBS对照组、0.3%Agar+TYM对照组、普通法感染组、两次法感染组、喷喉法感染组和0.3%Agar+TYM感染组,每组5只,感染组每只乳鸽灌服禽毛滴虫剂量为1×10^(7)个,连续感染5 d。结果显示,只有0.3%Agar+TYM感染组阳性率达到100%,死亡率为20%;两次法感染组、喷喉法感染组和0.3%Agar+TYM感染组的平均增重和相对增重率均低于PBS对照组,0.3%Agar+TYM感染组肝脏重量和比重显著低于PBS对照组,两次法感染组的肺脏平均重量和比重显著低于PBS对照组,0.3%Agar+TYM感染组在感染后不同天数口腔咽拭子中禽毛滴虫浓度最高,因此选用0.3%Agar+TYM作为溶剂重悬的感染方法最佳。再进一步对此方法进行优化,选取40只未感染禽毛滴虫的乳鸽分为8组,分别为PBS对照组、0.4%Agar+TYM对照组、0.2%Agar+TYM低剂量感染组、0.2%Agar+TYM高剂量感染组、0.3%Agar+TYM低剂量感染组、0.3%Agar+TYM高剂量感染组、0.4%Agar+TYM低剂量感染组和0.4%Agar+TYM高剂量感染组,每组5只。低剂量感染组每天每只乳鸽灌服禽毛滴虫剂量为1×10^(6)个,高剂量感染组则为1×10^(7)个,连续感染5 d。结果显示,感染组除0.4%Agar+TYM高剂量感染组以外,阳性率均达到100%;感染组中除了0.2%Agar+TYM高剂量组外平均增重和相对增重率均低于PBS对照组;0.3%Agar+TYM低剂量感染组,0.3%Agar+TYM高剂量感染组和0.4%Agar+TYM高剂量感染组肝脏的平均重量和比重均显著低于PBS对照组;0.3%Agar+TYM高剂量感染组和0.4%Agar+TYM高剂量感染组从第3天到第7天的口腔咽拭子中禽毛滴虫浓度逐渐升高。综上结果表明,使用0.3%Agar+TYM作为溶剂重悬,每只乳鸽感染剂量为1×10^(6)个,连续感染5 d的感染模式为最佳。该研究建立了一种禽毛滴虫感染动物模型,为抗禽毛滴虫药物筛选、禽毛滴虫入侵机制等研究提供基础。 展开更多
关键词 禽毛滴虫 动物模型 评价指标 造模方法
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伊氏锥虫感染的昆明小鼠血常规变化和病理组织学观察
2
作者 甘露 诺明达来 +3 位作者 郑会珍 金敏 李永畅 巴音查汗 《动物医学进展》 北大核心 2024年第2期79-83,共5页
为了解伊氏锥虫感染昆明小鼠的血常规和病理组织学变化,人工感染昆明小鼠、制作血液涂片、检测血常规、分子生物学(PCR)鉴定、病理组织切片,结果显示伊氏锥虫对小鼠具有较高的致病性,随着感染天数的增加,白细胞(WBC)、中性粒细胞计数(N... 为了解伊氏锥虫感染昆明小鼠的血常规和病理组织学变化,人工感染昆明小鼠、制作血液涂片、检测血常规、分子生物学(PCR)鉴定、病理组织切片,结果显示伊氏锥虫对小鼠具有较高的致病性,随着感染天数的增加,白细胞(WBC)、中性粒细胞计数(NEU)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、血小板计数(PLT)值逐渐降低,淋巴细胞百分数(LYM%)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞分布宽度的标准差(RDWR-SD)、血小板平均容积(MPV)值在死亡时明显升高,健康小鼠血常规正常。对比试验和对照小鼠各器官大小,感染小鼠脾脏、肝脏,心脏均明显变大,肺脏及肾脏变化较小。PCR鉴定在799 bp处出现目的条带,与预期片段大小相符。病理组织学观察,试验小鼠脾脏淤血,髓质间可见大量红细胞,出现较多形态改变的淋巴滤泡;肝脏中央静脉、小叶间静脉淤血,肝细胞肿胀,肝窦间隙变窄;肺脏肺泡肿胀较明显,肺泡壁增宽,支气管出现纤维化,间质可见炎症细胞;心脏中心肌纤维稍肿胀,颗粒变性,颜色加深,并伴有较多的伊氏锥虫虫体;肾小囊间隙变窄,肾小管上皮细胞肿胀,管腔变窄;对照组小鼠均未出现病理变化。研究结果可为伊氏锥虫病的诊断与预防提供理论依据。 展开更多
关键词 伊氏锥虫 昆明小鼠 病理切片 血常规
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氟雷拉纳在治疗犬猫体外寄生虫感染上的应用 被引量：1
3
作者 屈健 《浙江畜牧兽医》 2024年第4期14-15,共2页
氟雷拉纳属于异噁唑啉类化合物,分子式C_(22)H_(17)ClF_(6)N_(3)O_(3),分子量556.285,CAS名称为4-[5-(3,5-二氯苯基)-4,5-二氢-5-三氟甲基3-异噁唑基]-2-甲基-N-[2-氧代-2-[(2,2,2-三氟乙基)氨基]乙基]-苯甲酰胺,常温下为结晶性粉末,可... 氟雷拉纳属于异噁唑啉类化合物,分子式C_(22)H_(17)ClF_(6)N_(3)O_(3),分子量556.285,CAS名称为4-[5-(3,5-二氯苯基)-4,5-二氢-5-三氟甲基3-异噁唑基]-2-甲基-N-[2-氧代-2-[(2,2,2-三氟乙基)氨基]乙基]-苯甲酰胺,常温下为结晶性粉末,可拆分为S和R两种构型,S构型具有杀虫活性。氟雷拉纳最早由日产化学公司和杜邦公司于2004年研制,2005年获国际专利。作为γ—氨基丁酸(GABA)门控氯离子通道的阻滞剂,氟雷拉纳前期主要用于农业病虫害的防治,2014年默克公司(Merk)开发的氟雷拉纳咀嚼片(商品名Bravecto)获美国FDA批准,作为治疗犬跳蚤和蜱虫等体外寄生虫感染的药物在欧美上市,这是氟雷拉纳首次应用于宠物药领域。 展开更多
关键词 体外寄生虫感染 犬猫 病虫害的防治 国际专利 结晶性粉末 苯甲酰胺 拉纳 氯离子通道
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凉山黑绵羊秋冬季肠道寄生虫感染情况调查 被引量：1
4
作者 李英林 李呷比 +3 位作者 李维 八千张加 李德文 吉色曲伍 《四川畜牧兽医》 2024年第12期19-21,共3页
为评估凉山黑绵羊良种繁育基地示范园区秋冬季节肠道寄生虫的感染情况,于2023年9月和12月采集新鲜羊粪97份,采用饱和盐水漂浮法、沉淀法、麦氏计数法和吸虫卵计数法检测肠道寄生虫感染率和感染强度。结果表明,该园区秋冬季肠道寄生虫感... 为评估凉山黑绵羊良种繁育基地示范园区秋冬季节肠道寄生虫的感染情况,于2023年9月和12月采集新鲜羊粪97份,采用饱和盐水漂浮法、沉淀法、麦氏计数法和吸虫卵计数法检测肠道寄生虫感染率和感染强度。结果表明,该园区秋冬季肠道寄生虫感染率总体为100%,混合感染率为82.47%,以线虫和球虫为优势虫种,线虫感染率为94.85%,球虫感染率为87.63%,未检出绦虫和吸虫;捻转血矛线虫感染率为40.21%,仰口线虫感染率为24.74%,马歇尔线虫感染率为8.25%。 展开更多
关键词 凉山黑绵羊 线虫 球虫 感染率 秋冬季
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隐孢子虫与宿主的相互作用机制研究进展
5
作者 尹艳玲 谷九龙 黄石磊 《动物医学进展》 北大核心 2024年第9期109-113,共5页
隐孢子虫是一种严重威胁人和动物健康的寄生性原虫,主要寄生于胃肠道上皮细胞,感染后引起人和动物的水样腹泻甚至死亡,可严重危害公共健康并带来较大的经济损失。由于目前尚无有效治疗和预防隐孢子虫病的措施,明确宿主和隐孢子虫的互作... 隐孢子虫是一种严重威胁人和动物健康的寄生性原虫,主要寄生于胃肠道上皮细胞,感染后引起人和动物的水样腹泻甚至死亡,可严重危害公共健康并带来较大的经济损失。由于目前尚无有效治疗和预防隐孢子虫病的措施,明确宿主和隐孢子虫的互作机制显得尤为重要。论文就隐孢子虫的研究概况、宿主对抗隐孢子虫感染的机制以及隐孢子虫逃避宿主防御反应的策略进行了综述,以期为开发防治隐孢子虫病的疫苗和药物提供参考。 展开更多
关键词 隐孢子虫 宿主 互作机制
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黄牛、水牛体内人肉孢子虫18SrRNA基因研究及虫种鉴定 被引量：8
6
作者 杨照青 左仰贤 +3 位作者 陈新文 丁波 罗静 张亚平 《Zoological Research》 CAS CSCD 2000年第2期133-138,共6页
本文对自然感染的水牛源的人肉孢子虫以及黄牛源人肉孢子虫DNA的 1 8SrRNA基因的PCR扩增产物进行了测序。对所获的 86 3bp的 1 8SrRNA基因分析比较表明 ,二者有较高的同源性 ,因此认为二者可能同是一种肉孢子虫———人肉孢子虫 (Sarcoc... 本文对自然感染的水牛源的人肉孢子虫以及黄牛源人肉孢子虫DNA的 1 8SrRNA基因的PCR扩增产物进行了测序。对所获的 86 3bp的 1 8SrRNA基因分析比较表明 ,二者有较高的同源性 ,因此认为二者可能同是一种肉孢子虫———人肉孢子虫 (SarcocystishominisRaillietandLucet,1 891 )。由此推断 ,不仅黄牛可作为人肉孢子虫的中间宿主 。 展开更多
关键词 人肉孢子虫 黄牛 水牛 18S RRNA基因 虫 种鉴定
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野生动物园动物肠道寄生虫感染情况调查 被引量：22
7
作者 齐萌 董海聚 +6 位作者 胡霖 彭广能 陈治权 周治金 万建军 菅复春 张龙现 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第10期188-191,共4页
为了解四川某野生动物园动物肠道寄生虫感染情况,本试验采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法、饱和蔗糖溶液漂浮法对40种野生动物及混居水禽共计180份粪便样本进行调查。寄生虫总感染率为74.4%,共发现8种寄生虫,其中球虫、阿米巴原虫、蛔... 为了解四川某野生动物园动物肠道寄生虫感染情况,本试验采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法、饱和蔗糖溶液漂浮法对40种野生动物及混居水禽共计180份粪便样本进行调查。寄生虫总感染率为74.4%,共发现8种寄生虫,其中球虫、阿米巴原虫、蛔虫、鞭虫、毛细线虫、圆线虫、绦虫和吸虫感染率分别为31.1%、19.4%、15.6%、10.6%、17.2%、20.6%、4.4%和1.7%。结果表明,某野生动物肠寄生虫感染较为普遍,应采取有效的综合防治措施,以保证野生动物的健康。 展开更多
关键词 野生动物 肠道寄生虫 感染率 调查
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吉林省部分地区牛瑟氏泰勒虫病流行病学调查 被引量：9
8
作者 胡诗悦 张守发 +4 位作者 钱年超 贾立军 薛书江 孙柯楠 林文娟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期539-541,共3页
为了解吉林省牛瑟氏泰勒虫病的流行情况,本研究采用PCR方法和血涂片染色镜检法对采自吉林省6个地区的234份牛血液样品进行了检测,并对不同地区、不同饲养方式、不同地理条件以及不同年龄间牛瑟氏泰勒虫的感染情况进行了比较分析。结果显... 为了解吉林省牛瑟氏泰勒虫病的流行情况,本研究采用PCR方法和血涂片染色镜检法对采自吉林省6个地区的234份牛血液样品进行了检测,并对不同地区、不同饲养方式、不同地理条件以及不同年龄间牛瑟氏泰勒虫的感染情况进行了比较分析。结果显示,PCR方法检测的样本阳性率为53.4%(125/234),而血涂片染色镜检法检测的阳性率为12.4%(29/234)。经统计学分析,不同年龄间,牛瑟氏泰勒虫感染率差异显著(p<0.05);而不同地区、不同饲养方式以及不同地理条件之间牛瑟氏泰勒虫感染率差异极显著(p<0.01);调查结果表明,吉林省是牛瑟氏泰勒虫病的流行地区,尤其珲春地区牛瑟氏泰勒虫病感染严重。本次调查为吉林省牛瑟氏泰勒虫病的防控提供了依据。 展开更多
关键词 吉林省 牛瑟氏泰勒虫病 分子流行病学 PCR 调查
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桂林蛇源裂头蚴分离株的分子鉴定及种系发育关系分析 被引量：10
9
作者 李雯雯 李健 +2 位作者 李树清 张鸿满 黄维义 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第10期28-32,共5页
为研究从桂林草花蛇中分离到的裂头蚴的分子分类地位,对其核糖体18SrDNA、28SrDNA、ITS全基因及线粒体cox1部分基因进行了克隆和序列分析。从GenBank获取相应基因序列,应用CLUSTAL W2软件进行多重比对分析序列差异,应用MEGA 4.0软件构... 为研究从桂林草花蛇中分离到的裂头蚴的分子分类地位,对其核糖体18SrDNA、28SrDNA、ITS全基因及线粒体cox1部分基因进行了克隆和序列分析。从GenBank获取相应基因序列,应用CLUSTAL W2软件进行多重比对分析序列差异,应用MEGA 4.0软件构建种系发育树。结果表明,在基于18S、28S基因序列构建的种系发育树中,本株裂头蚴分别与欧猥迭宫绦虫(D64072)18S构成一个单独分支,自展值为100%;与拟曼迭宫绦虫(AF004718)、欧猥迭宫绦虫(AF004717)、无头蚴绦虫(AF096223)28S同属一个分支,自展值61%。基于ITS1、ITS2和cox1部分基因序列构建的种系发育树与所有欧猥迭宫绦虫均构成同一亚群,总分支自展值分别为100%、99%、64%,三者在不同的分离株之间呈现基因多态性,从总分支自展值来看cox1比ITS更适合用于种内遗传多态性研究,ITS适合做定种的分子标记。 展开更多
关键词 裂头蚴 小亚基 大亚基 内转录间隔区 细胞色素c氧化酶第I亚基
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甘肃省景泰县羊无浆体病的诊断 被引量：12
10
作者 孙明 刘志杰 +3 位作者 马米玲 关贵全 罗建勋 殷宏 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期114-117,共4页
为建立羊无浆体病简便快捷的病原学检测方法,论文以马米玲等已建立的边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法对甘肃省景泰县多地采集的219份田间样品进行羊无浆体ELISA检测,以PCR检测方法进行病原学的检测和验证。同时为进一步验证MSP... 为建立羊无浆体病简便快捷的病原学检测方法,论文以马米玲等已建立的边缘无浆体MSP5重组抗原间接ELISA检测方法对甘肃省景泰县多地采集的219份田间样品进行羊无浆体ELISA检测,以PCR检测方法进行病原学的检测和验证。同时为进一步验证MSP5基因在边缘无浆体和羊无浆体之间的保守性,Western blot检测证实边缘无浆体重组蛋白在45ku处与羊无浆体阳性血清反应,与羊其他病原阳性血清均不反应,表明该重组蛋白适合作为羊无浆体病的诊断抗原。在被检的219份样品中,ELISA方法检测阳性率为34.7%(76/219),PCR方法阳性率为30.6%(67/219),证实该地区存在羊无浆体病,与以往调查结果相比,阳性率有所下降。利用边缘无浆体MSP5重组抗原建立的EILSA方法具有良好的特异性和敏感性,可以检测羊无浆体病,为羊无浆体病的血清学诊断及流行病学调查提供了手段。 展开更多
关键词 羊无浆体病 ELISA PCR 诊断
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牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因的克隆与序列分析 被引量：8
11
作者 金春梅 许应天 +2 位作者 张守发 鲁承 于龙政 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期112-114,119,共4页
为分析吉林省流行的牛瑟氏泰勒虫基因序列,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因序列设计合成一对引物,用PCR方法扩增出牛瑟氏泰勒虫的基因片段,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-TEasy载体上,将经EcoRⅠ酶切鉴定和PCR鉴定... 为分析吉林省流行的牛瑟氏泰勒虫基因序列,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P33表面蛋白基因序列设计合成一对引物,用PCR方法扩增出牛瑟氏泰勒虫的基因片段,并成功地将该基因纯化后克隆到pGEM-TEasy载体上,将经EcoRⅠ酶切鉴定和PCR鉴定为阳性的重组质粒进行测序。结果表明克隆的基因片段长度为868bp,编码283个氨基酸,有2个潜在的糖基化位点。核苷酸同源性分析表明,该基因片段与韩国株(AF521557)、日本株(AB016280)、俄罗斯株(AB016279)的核苷酸序列同源性分别为99.4%、88.0%、88.1%。 展开更多
关键词 牛瑟氏泰勒虫 P33表面蛋白 克隆 序列分析
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兔豆状囊尾蚴的压片技术及染色方法研究 被引量：10
12
作者 潘耀谦 刘兴友 +2 位作者 赵振升 龙塔 银梅 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期21-24,共4页
为了详细观察豆状囊尾蚴头节的形态结构,通过屠宰检验或病兔剖检采集的豆状囊尾蚴的囊泡,制作压片后用不同的染色方法进行了比较。结果表明,制作豆状囊尾蚴头节压片的关键是载玻片要洁净、干燥,从囊泡中取出的头节应完整无损,并尽量除... 为了详细观察豆状囊尾蚴头节的形态结构,通过屠宰检验或病兔剖检采集的豆状囊尾蚴的囊泡,制作压片后用不同的染色方法进行了比较。结果表明,制作豆状囊尾蚴头节压片的关键是载玻片要洁净、干燥,从囊泡中取出的头节应完整无损,并尽量除去黏附在头节上的囊液。将带有头节的结节放在载玻片的中部,再在其上放一载玻片,两手在载玻片的两端均匀用力挤压,待结节全部展开即可。为了观察头节的正面结构,在压制玻片前,应用手术刀片除去原始颈节与体节部分。通过常用的几种单染色和复染色法对压片进行染色,证明单染色更有利于详细的观察头节的结构,而且几种单染色之间有互补染色效果。 展开更多
关键词 豆状囊尾蚴 头节 压片技术 染色方法
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弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究 被引量：7
13
作者 张燕丽 曹丽艳 +5 位作者 芦赟 蔡志杰 王艳华 付宝权 李文卉 张德林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1299-1302,共4页
根据GenBank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴... 根据GenBank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。重组质粒pcDNA3-MIC3肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测血清特异抗体;经腹腔攻击感染弓形虫GJS株速殖子,观察小鼠的生存时间。结果成功构建了pcD-NA3-MIC3质粒;免疫组小鼠血清检测到特异性抗体;攻击感染后免疫组小鼠平均存活时间较对照组明显延长。表明该核酸疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 微线体蛋白3(MIC3) 核酸疫苗 免疫保护
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内蒙古乌审旗地区羊寄生虫感染流行病学调查 被引量：7
14
作者 李莹莹 乌翠兰 +9 位作者 李斌 杨晓野 王瑞 贡庆扎布 乌云其其格 陈林军 祝晓蕊 刘大程 李平安 王凤龙 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期55-57,I0003,共4页
内蒙古乌审旗地区是一个以畜牧业为主体经济的蒙古族聚居旗县。养羊业是乌审旗畜牧业的传统优势产业之一,目前乌审旗成为全国县域著名的优质羊产业基地。寄生虫病是羊养殖业中最常见的慢性消耗性疾病,羊感染寄生虫会导致生产性能上的损失,
关键词 内蒙古乌审旗 寄生虫感染 养羊业 流行病学调查 慢性消耗性疾病 优势产业 产业基地 寄生虫病
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圈养野生动物肠道寄生虫感染情况调查 被引量：9
15
作者 杨楠 齐萌 +2 位作者 菅复春 张龙现 宁长申 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第3期154-157,共4页
为了解圈养野生动物肠道寄生虫感染情况,采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法,对河南省野生动物保护中心14种和濮阳市动物园34种圈养野生动物共85份粪便样品进行调查。结果发现7种肠道寄生虫,总感染率为56.5%,其中球... 为了解圈养野生动物肠道寄生虫感染情况,采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法,对河南省野生动物保护中心14种和濮阳市动物园34种圈养野生动物共85份粪便样品进行调查。结果发现7种肠道寄生虫,总感染率为56.5%,其中球虫、阿米巴原虫、隐孢子虫、圆线虫、蛔虫、鞭虫和毛细线虫感染率分别为21.2%、18.8%、2.4%、12.9%、18.8%、23.5%和4.7%。数据分析显示,河南省野生动物保护中心和濮阳市动物园圈养野生动物肠道寄生虫感染较为普遍,尤其是肉杂食动物肠道寄生虫感染率均较高(为72.7%、71.4%)。应加强圈养野生动物的寄生虫病防治工作。 展开更多
关键词 圈养野生动物 寄生虫 感染率
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刚地弓形虫GRA3基因的克隆与表达 被引量：5
16
作者 陈媛媛 张守发 +2 位作者 于龙政 常巧呈 薛书江 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期21-25,共5页
采用PCR方法扩增弓形虫GRA3基因,将扩增产物与pMD18-TSimple载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建pGEX-4T-1/GRA3表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,克隆的GRA3基因片段长687bp,含有1个66... 采用PCR方法扩增弓形虫GRA3基因,将扩增产物与pMD18-TSimple载体连接,重组质粒经PCR、双酶切鉴定后测序;构建pGEX-4T-1/GRA3表达载体,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,克隆的GRA3基因片段长687bp,含有1个669bp的开放阅读框,编码222个氨基酸,与GenBank中UK株(AF414079)的同源性为99.8%;表达的融合蛋白为50Ku,能被弓形虫阳性血清识别;表明该融合蛋白具有较好的免疫反应活性。 展开更多
关键词 弓形虫 GRA3基因 克隆 表达
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规模化猪场肠道寄生虫感染情况调查 被引量：8
17
作者 焦凤超 李迎晓 魏爱枝 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第8期48-49,共2页
关键词 感染情况调查 肠道寄生虫 规模化猪场 猪寄生虫病 中小规模猪场 流行情况 综合防治 信阳市
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牛泰勒虫的分离鉴定及进化分析 被引量：5
18
作者 刘娟 刘军龙 +7 位作者 刘爱红 赵洪喜 杨聪山 赵帅阳 刘光远 殷宏 关贵全 罗建勋 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第4期1050-1057,共8页
牛泰勒虫病是严重危害养牛业可持续发展的血液原虫病,本试验采用血涂片镜检和特异性PCR检测技术,对中国某种牛场的18份血样进行了泰勒虫检测,然后分别用ITS基因通用引物和4种MPSP等位基因特异性引物自阳性样品中扩增出对应的基因,克隆... 牛泰勒虫病是严重危害养牛业可持续发展的血液原虫病,本试验采用血涂片镜检和特异性PCR检测技术,对中国某种牛场的18份血样进行了泰勒虫检测,然后分别用ITS基因通用引物和4种MPSP等位基因特异性引物自阳性样品中扩增出对应的基因,克隆测序后,进行序列比对和进化分析,确定泰勒虫基因型。结果显示,自18份牛血样中检出3份阳性样品,且全为瑟氏泰勒虫感染;3个阳性样品的瑟氏泰勒虫MPSP等位基因扩增结果显示,1个阳性样品为I(Ikeda)和C(Chitose)型的混合感染,另2个样品为I型单一感染,而均无B(Buffeli)和Thai型;用扩增的MPSP基因测序,构建进化树,确认其感染的瑟氏泰勒虫存在MPSP 1型和2型。这些结果表明,该种牛场存在瑟氏泰勒虫感染,且同时存在2种MPSP等位基因型;MPSP等位基因的复杂性可能使该病的免疫防控更加困难。本试验结果为深入研究瑟氏泰勒虫感染情况及免疫防控提供了数据支持,并为养防一体做好监控。 展开更多
关键词 牛泰勒虫病 血涂片调查 PCR ITS基因 MPSP等位基因
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黑龙江省不同地区东方次睾吸虫线粒体cox1和nad1基因序列分析及种系发育研究 被引量：6
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作者 高俊峰 张莹 +1 位作者 侯美如 崔宇超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期943-945,共3页
为了阐明黑龙江省不同地区的东方次睾吸虫线粒体细胞色素C氧化酶第I亚基(cox1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位I(nad1)的遗传变异及种系发育情况,本研究利用PCR方法扩增黑龙江省3个地区的东方次睾吸虫线粒体cox1和nad1部分基因,对... 为了阐明黑龙江省不同地区的东方次睾吸虫线粒体细胞色素C氧化酶第I亚基(cox1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位I(nad1)的遗传变异及种系发育情况,本研究利用PCR方法扩增黑龙江省3个地区的东方次睾吸虫线粒体cox1和nad1部分基因,对其序列分析并构建种系发生树,探讨其遗传进化关系。结果显示pcox1和pnad1基因片段长度分别为699 bp和492 bp,且基因长度均一致。pcox1基因种内变异率在0~0.7%,种间变异率在12.2%~15.8%;pnad1基因种内变异率在0~0.2%,种间变异率在12.7%~23.3%,种间变异要大于种内变异。分子进化树结果显示,3个地区的东方次睾吸虫聚集在一起,次睾属的另两个成员聚集在同一分支,且系统发生树中的Bootstrap值均较高。本研究表明线粒体cox1基因和nad1基因可以用于东方次睾吸虫的种系发育分析,本研究为东方次睾吸虫进一步的分子流行病学和数量遗传学研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 东方次睾吸虫 线粒体DNA cox1基因 nad1基因 序列分析
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猫锡兰钩虫rDNA ITS1的扩增及分子鉴定 被引量：3
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作者 刘远佳 郑国超 +5 位作者 刘田 任邵娜 李雅文 孟祥龙 Loutou H M 李国清 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期821-824,共4页
为了对从猫粪便样品中分离的钩虫虫卵进行种类鉴定,本研究提取该虫卵基因组DNA,根据核糖体内转录间区1(ITS1)的保守序列设计钩虫属引物,通过PCR扩增、克隆、测序、相关软件分析,建立系统进化树,从分子水平对其进行种类鉴定。结果表明扩... 为了对从猫粪便样品中分离的钩虫虫卵进行种类鉴定,本研究提取该虫卵基因组DNA,根据核糖体内转录间区1(ITS1)的保守序列设计钩虫属引物,通过PCR扩增、克隆、测序、相关软件分析,建立系统进化树,从分子水平对其进行种类鉴定。结果表明扩增出404 bp DNA片段,测序结果显示该片段包括309 bp ITS1和95 bp的5.8S rDNA,与NCBI中登录的序列进行比对以及采用Clustal X和MEGA5.1软件分析确定该钩虫为锡兰钩虫。这是我国首次建立钩虫的分子鉴定方法,也是40年来再次发现猫源锡兰钩虫,为锡兰钩虫分子生物学和分子流行病学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 锡兰钩虫 猫 ITSl 5 8S RDNA
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